KR100303872B1 - 응고인자ⅷ제형을포함하는조성물,이것의제조방법및안정화제로서의계면활성제의사용방법 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 응고인자 Ⅷ 및 안정화제로서 블록공중합체, 예컨대 폴리옥사머 또는 폴리옥시에틸렌(20) 소르비탄 지방산 에스테르, 예를들면 폴리소르베이트 20 또는 폴리소르베이트 80을 포함하는 신규 조성물에 관한 것이다. 조성물은 또한 염화나트륨, 염화칼슘, L-히스티딘 및/또는 당 또는 당 알코올을 포함할 수 있다. 본 발명은 또한 응고 인자 Ⅷ을 포함하는 조성물에 대한 안정화제로서 비-이온성 계면활성제를 사용하는 것에 관한 것이다.

Description

[발명의 명칭]
응고 인자 Ⅷ 제형을 포함하는 조성물, 이것의 제조방법 및 안정화제로서의 계면활성제의 사용 방법.
[발명의 상세한 설명]
본 발명은 응고인자 Ⅷ 및 블록 공중합체와 같은 비이온성 계면활성제, 예를 들어 폴리옥사며 또는 폴리옥시에틸렌(20) 소르비탄 지방산 에스테르, 예를 들어 폴리소르베이트 20 또는 폴리소르베이트 80를 포함하는 신규한 제형에 관한 것이다. 조성물은 또한 염화나트륨, 염화칼슘, L-히스티딘 및/또는 당 및/또는 당 알코올을 포함할 수 있다.
혈우병은 수세기 동안 알려져 있는 유전적 질병이지만, 다양한 형태, 즉 혈우병 A, 혈우병 B 및 혈우병 C를 식별할 수 있게 된 것은 지난 30년에 불과하다. 혈우병 A가 가장 흔한 형태이다. 이 질명은 남자에게만 영향을 미치며, 신생 남자 아기 10,000당 1명 또는 2명에게서 발병한다. 이 질병은 혈장에 정상적으로 존재하는 단백질인 생물학적 활성 응고 인자 Ⅷ(항 혈우성 인자)의 매우 심하게 감소된 수준 또는 부재가 원인이다. 혈우병 A의 임상적 징후는 강한 출혈 경향이며, 인자 Ⅷ 농축물로 처리하기 전에, 이 질환에 걸린 환자들의 평균 연령은 20세 미만이다. 혈장으로부터 얻어진 인자 Ⅷ의 농축물은 약 30년 동안 이용되어 왔다. 이것은 혈우병 환자들의 치료 상태를 현저히 개선시켰으며, 환자들에게 정상적인 삶을 영위할 가능성을 제공하였다.
치료 인자 Ⅷ 농축물은 지금까지는 혈장의 분별에 의해 제조되어 왔다. 그러나, 현재는 예를 들어, 문헌[J. Gitschier et al., Nature 312, 330-37, 1984 및 EP 160 457]에 보고된 바와 같이, 재조합 DNA 기술을 사용하여 세포 배양물에서 인자 Ⅷ을 제조하는 방법이 이용될 수 있게 되었다.
사람 혈장으로부터 유도되는 인자 Ⅷ 농축물은 수개의 단편화된 안전활성 인자 Ⅷ 형태를 함유한다[참고문헌:Andersson et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, Vol 83, 2979-83, May 1986]. 가장 작은 활성 형태는 분자 질량이 170 kDa이고, 금속 이온 가교에 의해 90 kDa와 80 kDa이 함께 보유된 2개의 사슬로 구성된다.[참조: EP 197 901]. 카비 파마시아(Kabi Pharmacia)는 치료 인자 Ⅷ 농축물 중의 170 kDa 혈장 인자 Ⅷ 형태에 상응하는 재조합 인자 Ⅷ 생성물을 개발하였다. 절단된 재조합 인자 Ⅷ 분자는 r-Ⅷ SQ로 명명되고, 유한 계대접종시에 혈청 비함유 배지에서 세포 배양 방법으로 차이니스 햄스터 난소(CHO) 세포에 의해 생성된다.
r-Ⅷ SQ의 비활성(specific activity)은 단백질 1㎎당 12000 IU(IU/㎎)보다 클 수 있고, 14000 IU/㎎보다 큰 것이 바람직하다. 약 15000 IU/㎎의 활성이 측정되었다. 단백질 1㎎당 약 10,000 IU Ⅷ:C가 초기에 본 출원인의 r-Ⅷ SQ에 대해 공지되었다.
재조합 인자 Ⅷ SQ는 고전적 혈우병의 치료에 대해 요구된다. 용량은 혈장 인자 Ⅷ 농축물의 용량과 유사하다. 현재 고농도로 입수할 수 있기 때문에, 주사용으로는 적은 양만이 요구된다.
재조합 인자 Ⅷ-생성물의 구조 및 생화학은 일반적으로 문헌[Kaufman Tibtech, Vol 9, 1991 and Hematology, 63, 155-65, 1991]에 기술되어 있다. r-Ⅷ SQ 구조 및 생화학은 WO 91/09122호에 기술되어 있다.
단백질의 안정성이 일반적으로 제약 산업에서 문제점이다. 이러한 문제점은 종종 단백질을 동결 건조와 같은 상이한 건조 방법으로 건조시킴으로써 해결되어 왔다. 다음, 단백질은 건조 형태로 분배되고 저장되었다. 건조 또는 동결 건조되기 전의 용액, 건조된 물질 및 재구성된 생성물은 모두 안정하여서, 건조 과정, 저장 또는 취급 도중에 너무 많은 활성이 손실되지 않아야 한다.
혈장으로부터 분별된 인자 Ⅷ은 정상적으로는 물로 재구성되어야 하는 동결 건조된 분말로서 시판된다.
소량의 단백질을 포함하는 제형은 정제, 멸균 제조, 포장 및 투여되는 동안 활성을 잃는 것이 일반적일 것이다. 이러한 문제점은 활성 단백질의 활성 손실을 상당히 감소시키는 사람 알부민을 첨가함으로써 해결하는 것이 일반적이다. 사람 알부민은 정제, 멸균 제조 및 동결 건조 동안 일반적인 안정화제로서 작용한다[참조 : Wang et al., J. of Parenteral Sci. and Tech. Vol 42, Number 2S, Supplement. 1988]. 사람 알부민은 또한 동결 건조용 제형 중의 양호한 케이크-형성제이다. 인자 Ⅷ의 안정화를 위한 알부민의 사용은 공지되어 있고, 현재 시판되고 있는 모든 고도로 정제된 인자 Ⅷ 제품에 사용되고 있다. 그러나, 사람 알부민을 재조힙 DNA 기술에 의해 제조되는 치료적 단백질에 첨가하는 것은 발맘직하지 않다. 또한, 사람 알부민을 제형 부형제로서 사용하면, 종종 단백질 특징화를 위한 많은 가장 강력하고 민감한 분석 방법의 사요이 제한된다.
그러므로, 건조 또는 동결 건조되는 동안 용액 중에서 그리고 재구성 후의 용액으로서 안정한 인자 Ⅷ 및 특히 재조합 인자 Ⅷ을 함유하는 알부민 비함유 제형이 요구되고 있다.
다양한 단백질의 안정화를 위해 수자기 행결방안이 제안되었다:
커터(Cutter)의 EP 35 204호에는 폴리올의 존재하에 단백질 조성물에 열안정성을 부여하는 방법이 기술되어 있다.
코린트(Corint)의 EP 381 345호에는 카르복시메틸셀룰로오스의 존재하에 펩티드의 수성 액체, 데스모프레신(desmopressin)이 기술되어 있다.
진테크(Genentech)의 WO 89/09614호에는, 글리신, 만니톨 및 완충제를 포함하는 사람 성장 호르몬의 안정화된 제형이 기술되어 있으며, 바람직한 양태에서는 폴리소르베이트 80과 같은 비이온성 계면활성제가 첨가된다. 비이온성 계면활성제는 환원된 응집 및 변성을 위해 첨가된다. 제형은 동결 건조 중에 그리고 재구성시에 증가된 안정성을 갖는다.
세터스(Cetus)의 EP 268 110호에는 용해제/안정화제로서 비이온성 중합체 청정제를 포함하는 불활성 담체 배지 중에 용해된 특정 단백질, 예를 들어 인터로이킨-2를 포함하는 용액이 기술되어 잇다. 바람직한 청정제로는 옥틸페녹시 폴리에톡시 에탄올 화합물, 폴리에틸렌 글리콜 모노스테아레이트 화합물 및 폴리에틸렌 소르비탄 지방산 에스테르가 있다.
훽스트(Hoechst)의 US 4,783,441호에는 단백질 예를 들어, 인슐린 및 표면 활성 물질을 포함하는 수용액이 기술되어 있다.
코발(Coval)의 US 4,165,370호에는 감마 글로불린 용액 및 이것의 제조 방법이 기술되어 있다. 용액은 폴리에틸렌 글리콜(PEG)을 함유한다. 비이온성 계면활성제가 또한 용액에 첨가될 수 있다.
그린 크로스(Green Cross)의 EP 77 870호에는 인자 Ⅷ을 함유하는 용액의 안정성을 개선시키기 위해 아미노산, 단당류, 올리고당류 또는 당 알코올 또는 탄화수소 카르복실산을 첨가하는 것이 개시되어 있으며, 그린 크로스의 EP 117 064호에는 열처리되는 동안 안정성을 증가시키기 위해 인자 Ⅷ의 수용액에 당 알코올 또는 이당류를 첨가하는 것이 기술되어 있다.
옥토파르마(Octopharma)의 WO 91/10439호에는 이당류, 바람직하게는 사카로오스 및 1종 이상의 아미노산을 포함하는 인자 Ⅷ 또는 인자 Ⅸ의 안정한 주사 용액이 청구되어 있다.
로레어(Rorer)의 EP 315 968 및 EP 314 095호에는 다양한 이온 강도를 갖는 인자 Ⅷ의 안정한 제형이 청구되어 있다.
각종 단백질들은 물리화학적 성질이 상이하다. 물리화학적으로 허용될 수 있고 장기간 동안 안정해야 하는 약제 제조물을 제조하는 경우에는, 단백질의 생리학적 특성을 고려해야 할 뿐만 아니라 산업용 제조, 한자를 위한 용이한 취급 및 환자에 대한 안정성과 같은 다른 측면들을 고려해야 한다. 이런 측면의 결과는 상이한 제형들을 시험할 때에 예측할 수 있는 것은 아니며, 종종 각각의 단백질에 대해 독특한 해결책이기도 하다.
혈장에서, 순환하는 인자 Ⅷ은 이것의 담체 단백질인 폰빌레브란트 인자(von Willebrand factor : vWF)와의 결합에 의해 안정해진다. 혈장에서 그리고 또한 통상적인 중간 순도의 인자 Ⅷ 농축물에서, vWF 대 인자 Ⅷ의 비율은 중량비를 기준으로 하여 50:1 이상이다. 단백질 ㎎당 2000 IU를 초과하는 비활성을 가지고 있는 매우 순도가 높은 인자 Ⅷ 농축물에서, vWF 대 인자 Ⅷ의 비율은 약 1:1(w/w)이며, 본질적으로 모든 인자 Ⅷ은 vWF에 결합된다. 이러한 안정화에도 불구하고, 동결 건조 및 저장 동안 허용가능한 안정도를 달성하기 위해 알부민의 첨가에 의한 추가의 보호가 필요하다.
시판되고 있는 모든 초순도 제조물은 알부민(사람 혈청 알부민)에 의해 안정화된다. 현재, 알부민을 함유하지 않고, 최소량의 첨가제를 함유하는 주사용 인자Ⅷ이 요구되고 있다.
본 발명자들은 현재 인자 Ⅷ에 대해 상기 언급된 문제점들을 해결하는 신규한 제형을 개발하였다.
놀랍게도, 본 발명자들은 매우 민감한 단백질인 인자 Ⅷ이 비이온성 계면활성제가 첨가되는 경우에 알부민 없이 안정화제로서의 비이온성 계면활성제를 포함하는 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 인자 Ⅷ은 고도로 정제되며, 즉 단백질 ㎎당 5000 IU 이상의 비활성을 가지며, 본 발명의 조성물은 알부민의 첨가없이 안정화된다.
인자 Ⅷ이 재조합체인 경우에, 이것은 전장(full-length) 형태로 존재하나, SQ 유도체와 같은 결실 유도체로서 존재할 수 있다. 인자 Ⅷ의 양은 10 내지 100,000 IU/㎖, 바람직하게는 50 내지 10,000 U/㎖ 이다.
비이온성 계면활성제는 폴리옥사머 또는 폴리소르베이트 20 또는 폴리소르베이트 80과 같은 폴리옥시에틸렌(20) 지방산 에스테르아 같은 블록 공중합체로부터 선택되는 것이 바람직하다. 트윈(Tween) 80 이 폴리소르베이트 80으로서 사용되어 왔다.
비이온성 계면활성제는 임계 미셀 농도(CMC) 보다 많은 양으로 존재 하여야 한다[참조 : Wan and Lee, Jourmal of Pharm Sci, 63, 136, 1974].
따라서, 폴리옥시에틸렌(20) 지방산 에스테르의 양은 0.01㎎/㎖일 수 있다. 조성물은 또한 염화나트륨 또는 염화칼륨을 바람직하게는 0.1M보다 많은 양으로 포함할 수 있다.
조성물은 염화칼슘 또는 글루콘산칼슘과 같은 칼슘염을 바람직하게는 0.5mM 보다 많은 양으로 포함하고, L-히스티딘 같은 아미노산을 1mM보다 많은 양으로 포함하는 것이 바람직하다. 그 양은 예를 들어, 0.5mM과 500mM 상이에서 선택될 수 있다. 수크로오스 또는 당 알코올과 같은 단당류 또는 다당류가 예를 들어, 1 내지 300㎎/㎖의 양으로 첨가될 수 있다.
조성물은 L-히스티딘 및 수크로오스를 포함하는 것이 바람직하다. 조성물 중의 염화 나트륨 대 L-히스티딘의 비는 1:1을 넘는 것이 바람직하다.
조성물은 하기 성분들을 포함할 수 있다.
ⅰ) 10-100,000 IU/㎖의 재조합 인자 Ⅷ
ⅱ) 0.01㎎/㎖ 이상ㅇ의 폴리옥시에틸렌(20) 지방산 에스테르
ⅲ) 바람직하게는 0.1M보다 많은 양의 염화나트륨
ⅳ) 바람직하게는 0.5mM보다 많은 양의 염화칼슘 또는 글루콘산 칼슘과 같은 칼슘염
ⅴ) 1mM보다 많은 양의 L-히스티틴과 같은 아미노산.
상기 조성물에는 단당류, 이당류 또는 당 알코올, 바람직하게는 슈크로오스가 첨가될 수 있다. 조성물은 건조 형태, 바람직하게는 동결건조된 형태로 존재하거나, 건조전 또는 후에 수성용액으로 존재할 수 있다. 건조된 생성물은 주사용 멸균수로 또는 완충용액으로 재구성된다.
본원에서 권리 대상으로 청구되는 조성물은 또한 사용을 위해 준비가 되어 있는 안정한 수용액일 수 있다.
본 발명은 또한 r-Ⅷ SQ의 비활성이 12000 IU/㎎ 단백질보다 크고, 바람직하게는 14000 IU/㎎보다 큰 조성물에 관한 것이다.
본 발명에서 청구되는 조성물은 인자 Ⅷ 바람직하게는, L-히스티딘 같은 아미노산, 나트륨염, 수크로오스 및 칼슘염과 함께 수용액 중의 비이온성 계면활성제와 혼합시킴으로써, 또는 최종 정체 단계로부터 인자 Ⅷ을 바람직하게는 L-히스티딘과 같은 아미노산, 나트륨염, 수크로오스 및 칼슘염과 함께 수용액 중의 비이온성 계면활성제를 함유하고 있는 완충액을 이용하여 용출시킴으로써 제조될 수 있다.
본 발명은 또한 응고 인자 Ⅷ을 포함하는 조성물에 대한 안정화제로서, 블록 공중합체, 바람직하게는 폴리옥사머 또는 폴리옥시에틸렌(20) 지방산 에스테르, 바람직하게는 폴리소르베이트 20 또는 폴리소르베이트 80으로부터 선택되는 것이 바람직한 비이온성 계면활성제의 사용에 관한 것이다.
아미노산은 시스템을 완충시키기 위해 사용되고, 또한 비정질상의 단백질을 보호한다. 적합한 완충제는 L-히스티딘, 리신 및/또는 아르기닌일 수 있다. pH 근처에서의 L-히스티딘의 완충 능력이 양호하기 때문에, L-히스티딘이 주로 선택되어 왔다.
스크로오스 또는 당 알코올이 또한 단백질의 보호를 위해 첨가될 수 있다.
본원에서 염화칼슘(CaCl2), 및 글루콘산 칼슘, 글루비온산 칼슘 또는 글루셉트산 칼슘과 같은 다른 염으로서 첨가되는 칼슘(또는 2가 금속 이온)이 또한 사용될 수 있으며, 인자 Ⅷ 중쇄 및 경쇄의 결합의 유지를 위해 필요하다.
하기 실시예에 제공된 데이타는 r-Ⅷ SQ 가 5±3℃에서 보관될 때에 12개월 이상 동안 안정함을 나타낸다.
하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것이며, 모두 보호 범위 내에 있는 상이한 제형에 대한 안정성 데이터를 보이며, 이러한 보호는 이들 실시예로 제한되지 않는다.
하기의 도면은 본 발명을 예시하는 것이다.
도 1은 25℃에서 5개월 동안 저장된 실시예 10A의 HPLC 겔여과를 도시한 것이다.
도 2는 30℃에서 5개월 동안 저장된 실시예 10B의 HPLC 겔여과를 도시한 것이다.
[실험]
[재료 및 방법]
재조합 인자 Ⅷ SQ(r-Ⅷ SQ)의 제조를 국제특허공개 WO 91/09122호의 실시예 1-3에 기재된 바와 같이 수행하였다. DHFR 결핍 CHO 세포주(DG44N.Y.)를 r-Ⅷ SQ 유전자를 함유하는 발현 인자 및 디하이드로폴레이트-환원효소 유전자를 함유하는 발현 인자를 사용하여 전기영동시켰다. 선택성 배지상에서의 선택 후에, 생존한 콜로니를 단계적으로 증가하는 양의 메토트렉세이트 중에서의 성장을 증폭시켰다. 생성된 콜로니로부터의 상등액을 Ⅷ:C 활성에 대해 개별적으로 스크리닝시켰다. 생성 클론을 선택하고, 후속하여 이것을 규정된 배지 중에서의 혈청 유리 현탁 성장에 대해 적용시켜, 최종적으로 대규모의 발효 공정을 전개시켰다. 특정 시간후에 상등액을 수집하고, 하기와 같이 추가로 정제하였다.
정제시킨 조절된 배지를 pH 조절하고, S-세파로오스 FF 칼럼에 적용시켰다. 세척 후, 인자 Ⅷ을 5mM CaCl2를 함유하는 염 완충액으로 용출시켰다.
면역 흡착을 리간드가 인자 Ⅷ의 중쇄 쪽으로 이동하는 단클론성 항체(8A4)인 면역 친화성 수지 상에서 수행시켰다. 칼럼에 충전시키기 전에, S-용출물을 0.3% TNBP 및 1% 옥토크시놀(Octoxynol) 9로 처리하였다. 칼럼을 평형화시키고, 세척한 후, 인자 Ⅷ을 0.05M CaCl2및 50% 에틸렌글리콜 함유 완충액으로 용출시켰다.
mAb-용출물을 면역친화성 단계에서 용출 완충액으로 평형화시킨 Q-세파로오스 FF 카럼 상에 로딩시켰다. 세척 후에, 인자 Ⅷ을 pH 6.8에서 0.05M L-히스티딘, 4mM CaCl2, 0.6M NaCl로 용출시켰다.
Q-용출물을 겔여과 칼럼(Superdex 200 p.g.)에 적용시켰다. 평형화 및 용출을 염화나트륨, L-히스티딘, 염화칼슘 및 폴리소르베이트 80을 함유하는 제형을 사용하여 수행하였다.
단백질 피크를 수집하고, 용액을 냉동건조 전에 제형화시켰다.
Ⅷ:C 활성 및 비활성 성분의 농도를 적절한 완충액으로 희석시킴으로써 조절하였다. 다음, 용액을 멸균 여과(0.22㎛)시키고, 분배한 후, 냉동건조시켰다. 각각의 조성물로부터의 샘플을 냉동시키고, -70℃에서 저장하였다. 이들 샘플을 해동시키고, Ⅷ:C를 검정하는 동안 기준물질로서 사용하였다.
응고제 활성 Ⅷ:C를 발색성 기질 검정(Coatest Factor Ⅷ:Chromogenix AB, Moelndal, Sweden)에 의해 평가하였다. 활성화된 인자 X(Xa)를 인자 Ⅷ:C가 조인자로서 작용하는 고유 경로를 통해 생성시켰다. 다음, 인자 Xa를 트롬빈에 의한 기질의 가수분해를 방지하기 위해, 트롬빈 억제제 I-2581의 존재하에 합성 발색성 기질인 S-2222를 사용함으로써 측정하였다. 반응을 산을 가하여 중단시키고, pNA(파라니트로아닐린)의 방출에 비례하는 Ⅷ:C를 시약 블랭크에 대해 450 ㎚에서 광도계로 측정하였다. 인자 Ⅷ:C의 단위는 세계보건기구(WHO)에 의해 수립된 현행 국제 농축물 표준(International Concentrate Standard)(IS)에 의해 규정된 바와 같은 국제 단위(IU)로 표시하였다.
Ⅷ:C의 회수율은 희석을 위해 적절하게 조정하면서 냉동건조를 위한 냉동 및 해동 용액 중에서 Ⅷ:C에 의해 분할된 재구성된 용액 중에서의 Ⅷ:C의 백분율로서 계산하였다.
가용성 응집체를 겔여과에 의해 측정하였다. 사전충전된 슈퍼덱스 200 HR 10/30 칼럼(Pharmacia)을 형광검출기(여기 파장 280 ㎚, 방출 파장 340 ㎚)와 함께 사용하였다. 재구성된 제제를 분석하였다. 겔화로부터의 결과의 평가를 크로마토그램의 육안 조사에 의해 수행하거나, 응집체가 발견되는 경우에는 피크 영역의 통합에 의해 수행하였다.
냉동건조 후의 회수율은 냉동 기준 물질의 수율(%)로서 표시하였다.
[실시예 1. 알부민과 비이온성 계면활성제 사이의 비교]
재조합 인자 Ⅷ을 상기 실험에서 기술된 방법에 따라 제조하였다.
2㎖의 용액을 동결건조시킨 후, 5㎖의 주사용 멸균수 중에 재구성시켰다.
조성은 다음과 같다 :
본 실시예는 비이온성 계면활성제 또는 알부민을 사용하였을 경우의 인자 Ⅷ:C의 회수율에 차이가 없음을 보여준다.
[실시예 2. 비이온성 계면활성제의 상이한 강도의 비교]
재조합 인자 Ⅷ을 상기 실험에서 기술된 방법에 따라 제조하였다.
2㎖의 용액을 동결건조시킨 후, 2㎖의 주사용 멸균수 중에서 재구성시켰다.
조성은 다음과 같다 :
* 주변온도에서 재구성된 용애긍로서 저장함
본 실시예서는 비이온성 계면활성제가 사용되었을 경우의 인자 Ⅷ에 대한 놀라울 정도로 양호한 안정화 효과를 명백히 보여준다.
[실시예 3. 비이온성 계면활성제 농도의 변동]
조합 인자 Ⅷ을 상기 실험에서 기술된 방법에 따라 제조하였다.
2㎖의 용액을 동결건조시킨 후, 5㎖의 주사용 멸균수 중에서 재구성시켰다.
조성은 다음과 같다 :
본 실시예로부터의 결과는 인자 Ⅷ(Ⅷ:C)의 회수율이 재구성후에 매우 높았으며, 사용한 폴리소르베이트 80의 모든 농도에 대해 양호하였음을 나타낸다.
[실시예 4. 염화 나트륨 농도의 변동]
재조합 인자 Ⅷ을 상기 실험에서 기술된 방법에 따라 제조하였다.
2㎖의 용액을 동결건조시키고, 상이한 온도에서 6개월 이하 동안 저장한 후, 5㎖의 주사용 멸균수 중에서 재구성시켰다.
0.3 또는 0.6M 염화나트륨이 매우 양호한 안정성을 나타내었다. 2가지 제형 모두 37℃본에서 6개월 동안 안정하였다.
[실시예 5. L-히스티딘 농도의 변동]
재조합 인자 Ⅷ을 상기 실험에서 기술된 방법에 따라 제조하였다.
2.2㎖의 용액을 동결건조시키고, 상이한 온도에서 3개월 이하 동안 저장한 후, 5㎖의 주사용 멸균수 중에서 재구성시켰다.
본 실시예는 L-히스티딘의 상이한 양이 안정성에 영향을 미치지 못함을 나타낸다.
[실시예 6]
재조합 인자 Ⅷ을 상기 실험에서 기술된 방법에 따라 제조하였다.
이들 용액을 1, 5 및 10회에 걸쳐 냉동 및 해동시켰다. 회수율은 다음과 같았다 :
이들 연구는 Ⅷ:C가 반복된 냉동-해동 후에 안정하고, 저온 보호제로서 작용하는 것으로 여겨지는 PEG-4000이 이 제형에는 필요하지 않음을 보여주었다.
[실시예 7. pH의 변동]
재조합 인자 Ⅷ을 상기 실험에서 기술된 방법에 따라 제조하였다.
2.2㎖의 용액을 동결건조 시킨 후, 5㎖의 주사용 멸균수 중에서 재구성시켰다.
* 주변 온도에서 재구성된 용액으로서 저장함.
본 실시예는 pH가 6.0 내지 약 7.5에서 유의할만한 중요성이 없음을 보여준다.
[실시예 8. 수크로오스의 첨가]
재조합 인자 Ⅷ을 상기 실험에서 기술된 방법에 따라 제조하였다.
2.2㎖의 용액을 동결건조시킨 후, 5㎖의 주사용 멸균수 중에서 재구성시켰다.
최종 정제단계 후 및 동결건조 전에 용액 B에 수크로오스를 첨가하였다.
냉동건조후 회수율은 A에 대해서는 76%이고, B에 대해서는 87%이었다. 재구성한 후 실온에서 저장한 지 4시간 후에도 동일한 활성이 관찰되었다.
본 연구는 수크로오스의 첨가가 냉동건조 후의 Ⅷ:C의 회수를 위해 바람직함을 나타낸다.
[실시예 9. 칼슘염의 변동]
재조합 인자 Ⅷ을 상기 실험에서 기술된 방법에 따라 제조하였다.
2㎖의 용액을 동결건조시킨 후, 5㎖의 주사용 멸균수 중에서 재구성시켰다.
* 주변 온도에서 재구성된 용액으로서 저장함.
본 실시예는 CaCl2가 글루콘산 칼슘으로 대체될 수 있음을 보여준다.
[실시예 10]
재조합 인자 Ⅷ을 상기 실험에서 기술된 방법에 따라 제조하였다.
2.2㎖의 용액을 동결건조시킨 후, 5㎖의 주사용 멸균수에서 재구성시켰다. 재구성된 제조물 중의 바이알당 Ⅷ:C는 약 1000 IU이었다.
회수율은 L-히스티딘의 일부가 수크로오스로 대체되었을 때 양호하였다.
이들 제형을 각각 25℃ 및 30℃에서 5개월 저장한 후에 겔여과에 의해 연구하였으며, 그 결과를 도 1 및 도 2에 나타내었다. 관찰되는 유일한 피크는 인자 Ⅷ:C를 나타내는 42에서의 피크 및 히스티딘을 나타내는 70에서의 피크이다. 응집물은 40보다 앞에서 관찰되었다. 도 1로부터, 10A에대해 25℃에서 5개월 후에 검출될 만한 양의 응집물은 발견되지 않았음을 알 수 있다. 도 2는 10B에 대해 30℃에서 5개월 후에 2% 미만의 소량의 응집물의 검출됨을 보여준다.
[실시예 11]
재조합 인자 Ⅷ을 상기 실험에서 기술된 방법에 따라 제조하였다.
2.2㎖의 용액을 동결건조시킨 후, 5㎖의 주사용 멸균수 중에서 재구성시켰다. 재구성된 제조물 중의 바이알당 Ⅷ:C는 약 500 IU이었다.
2가지 제형은 모두 양호한 안정성을 보여주었다, 이들 제형을 겔여과에 의해 연구하였고, 그 결과는 제 1도 및 2도에 도시된 것과 유사하였다. 제형들을 각각 25℃ 및 30℃에서 5개월 동안 저장하였을 때에 응집물은 형성되지 않았다.
[실시예 12]
재조합 인자 Ⅷ을 상기 실험에서 기술된 방법에 따라 제조하였다.
2㎖의 용액을 동결건조시키고, 상이한 온도에서 3개월 이하 동안 저장한 후, 4㎖ 주사용 멸균수 중에서 재구성시켰다. 재구성된 제조물 중의 바이알당 Ⅷ:C는 약 500 IU이었다.
7℃에서 5개월 동안 저장한 후에도 허용가능한 안정성이 달성되었다.

Claims (26)

  1. 재조합 응고 인자 Ⅷ, 0.01㎎/㎖ 이상의 비이온성 계면활성제, 0.1M 초과의 염화나트륨 또는 염화 칼륨, 및 시스템을 완충시키고 비정질상의 단백질을 보호하기 위한 L-히스티딘을 포함하여, 인자 Ⅷ의 활성을 장기간의 저장중에 안정화시키는 조성물로서, (a) 초기에 및 최종적으로 사용을 위해 준비된 수용액이거나, (b) 초기에는 수용액이며, 후속하여 건조되고 최종적으로 사용전에 수용애그로서 재구성되는 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 인자 Ⅷ이 단백질 ㎎당 2,000 IU를 초과하는 비활성(specific activity)을 가짐을 특징으로 하는 조성물.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 인자 Ⅷ의 비활성이 단백질 ㎎당 5,000 IU 초과이며, 알부민의 첨가 없이 안정화됨을 특징으로 하는 조성물.
  4. 제1항 또는 제2항에 있어서, 인자 Ⅷ이 전장(full-length)이거나, 재조합 인자 Ⅷ의 결실 유도체임을 특징으로 하는 조성물.
  5. 제1항 또는 제2항에 있어서, 인자 Ⅷ의 양이 10 내지 100,000 IU/㎖임을 특징으로 하는 조성물.
  6. 제5항에 있어서, 인자 Ⅷ의 양이 50 내지 10,000 IU/㎖임을 특징으로 하는 조성물.
  7. 제1항 또는 2항에 있어서, 비이온성 계면활성제가 임계 미셀(micelle) 농도보다 많은 양으로 존재함을 특징으로 하는 조성물.
  8. 제1항 또는 2항에 있어서, 비이온성 계면활성제가 블록 공중합체 및 폴리옥시에티렌 (20) 지방산 에스테르로 구성된 군으로부터 선택됨을 특징으로 하는 조성물.
  9. 제8항에 있어서, 블록 공중합체가 폴록사머임을 특징으로 하는 조성물.
  10. 제8항에 있어서, 폴리옥시에틸렌 (20) 지방산 에스테르가 폴리소르베이트 20 및 폴리소르베이트 80으로 구성된 군으로부터 선택됨을 특징으로 하는 조성물.
  11. 제1항 또는 제2항에 있어서, 단당류, 이당류 또는 당 알코올을 포함함을 특징으로 하는 조성물.
  12. 제11항에 있어서, 이당류가 수크로오스임을 특징으로 하는 조성물.
  13. 제1항 또는 제2항에 있어서, 염화나트륨 대 L-히스티딘의 비가 1:1 초과임을 특징으로 하는 조성물.
  14. 제1항 또는 제2항에 있어서, 칼슘염을 추가로 포함함을 특징으로 하는 조성물.
  15. 제14항에 있어서, 칼슘염의 양이 0.5mM 초과임을 특징으로 하는 조성물.
  16. 제14항에 있어서, 칼슘염이 염화칼슘 및 글루콘산 칼슘으로 구성된 군으로부터 선택됨을 특징으로 하는 조성물.
  17. 제1항에 있어서,
    ⅰ) 10-100,000 IU/㎖의 재조합 인자 Ⅷ
    ⅱ) 0.01㎎/㎖ 이상의 폴리옥시에틸렌(20) 지방산 에스테르,
    ⅲ) 0.1M 초과의 염화나트륨
    ⅳ) 칼슘염, 및
    ⅴ) 1 mM 초과의 L-히스티틴을 포함함을 특징으로 하는 조성물.
  18. 제1항에 있어서, 동결건조됨을 특징으로 하는 조성물.
  19. 제1항에 있어서, 인자 Ⅷ의 활성이 6개월 이상 동안의 저장중에 안정화됨을 특징으로 하는 조성물.
  20. 제19항에 있어서, 저장이 5±3℃에서 수행됨을 특징으로 하는 조성물.
  21. 제1항에 따르는 조성물을 제조하는 방법으로서, 인자 Ⅷ을 L-히스티딘 및 염화나트륨 또는 염화칼륨과 함께 수용액 중에서 비이온성 계면활성제와 혼합시킴을 특징으로 하는 방법.
  22. 제1항에 따르는 조성물을 제조하는 방법으로서, 인자 Ⅷ을 L-히스티딘 및 염화나트륨 또는 염화칼륨과 함께 수용액 중에서 비이온성 계면활성제를 함유하는 완충액으로 최종 정제 단계로부터 용출시킴을 특징으로 하는 방법.
  23. 제21항에 있어서, 인자 Ⅷ을 수크로오스 및 칼슘염과 추가로 혼합시킴을 특징으로 하는 방법.
  24. 재조합 응고 인자Ⅷ을 포함하고, 0.1M 초과의 염화나트륨 또는 염화 칼륨, 및 시스템을 완충시키고 비정질상의 단백질을 보호하기 위한 L-히스티딘을 포함하여, 인자 Ⅷ의 활성을 저장중에 안정화시키며, (a) 초기에 및 최종적으로 사용을 위해 준비된 수용액이거나, (b) 초기에는 수용액이나, 후속하여 건조되고 최종적으로 사용전에 수용액으로서 재구성되는 조성물을 안정화시키기 위해 0.01㎎/㎖ 이상의 비이온성 계면활성제를 사용하는 방법.
  25. 제15항에 있어서, 칼슘염이 염화칼슘 및 글루콘산 칼슘으로 구성된 군으로부터 선택됨을 특징으로 하는 조성물.
  26. 제22항에 있어서, 인자 Ⅷ을 수크로오스 및 칼슘염과 추가로 혼합시킴을 특징으로 하는 방법.
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Families Citing this family (96)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ATE198277T1 (de) * 1992-10-02 2001-01-15 Genetics Inst Zusammensetzung, welche den koagulationsfaktor viii beinhaltet; verfahren zu deren herstellung und die benutzung eines oberflächenaktiven stoffes als stabilisator
SE504074C2 (sv) † 1993-07-05 1996-11-04 Pharmacia Ab Proteinberedning för subkutan, intramuskulär eller intradermal administrering
US6288030B1 (en) * 1993-12-22 2001-09-11 Amgen Inc. Stem cell factor formulations and methods
US6242417B1 (en) * 1994-03-08 2001-06-05 Somatogen, Inc. Stabilized compositions containing hemoglobin
IL113010A0 (en) * 1994-03-31 1995-10-31 Pharmacia Ab Pharmaceutical formulation comprising factor VIII or factor ix with an activity of at least 200 IU/ml and an enhancer for improved subcutaneous intramuscular or intradermal administration
US5514781A (en) * 1994-04-11 1996-05-07 Bayer Corporation Use of azoles as virucidal agents in solutions of biologically active proteins
US6372716B1 (en) * 1994-04-26 2002-04-16 Genetics Institute, Inc. Formulations for factor IX
SE503424C2 (sv) * 1994-11-14 1996-06-10 Pharmacia Ab Process för rening av rekombinant koagulationsfaktor VIII
SE9403915D0 (sv) * 1994-11-14 1994-11-14 Annelie Almstedt Process A
US7244824B2 (en) 1995-01-19 2007-07-17 Quadrant Drug Delivery Limited Dried blood factor composition comprising trehalose
US7253262B2 (en) 1995-01-19 2007-08-07 Quandrant Drug Delivery Limited Dried blood factor composition comprising trehalose
GB9501040D0 (en) 1995-01-19 1995-03-08 Quadrant Holdings Cambridge Dried composition
SE9501189D0 (sv) * 1995-03-31 1995-03-31 Pharmacia Ab Protein formulation
US6267958B1 (en) 1995-07-27 2001-07-31 Genentech, Inc. Protein formulation
AUPN801296A0 (en) * 1996-02-12 1996-03-07 Csl Limited Stabilised growth hormone formulation and method of preparation thereof
US7560107B2 (en) 1996-06-26 2009-07-14 Emory University Modified factor VIII
US5763401A (en) * 1996-07-12 1998-06-09 Bayer Corporation Stabilized albumin-free recombinant factor VIII preparation having a low sugar content
EP0852951A1 (de) * 1996-11-19 1998-07-15 Roche Diagnostics GmbH Stabile lyophilisierte pharmazeutische Zubereitungen von mono- oder polyklonalen Antikörpern
US6475725B1 (en) 1997-06-20 2002-11-05 Baxter Aktiengesellschaft Recombinant cell clones having increased stability and methods of making and using the same
PT2130554E (pt) * 1999-02-22 2012-11-19 Univ Connecticut Formulações de factor viii isentas de albumina
US20060099685A1 (en) * 1999-04-15 2006-05-11 Yallop Christopher A Recombinant expression of factor VIII in human cells
ES2252028T3 (es) 1999-07-13 2006-05-16 Biovitrum Ab Composiciones estables del factor viii.
US6413537B1 (en) * 2000-03-10 2002-07-02 Wisconsin Alumni Research Foundation Nystatin formulation having reduced toxicity
GB0207092D0 (en) 2002-03-26 2002-05-08 Sod Conseils Rech Applic Stable pharmaceutical composition containing factor VIII
WO2004055164A2 (en) * 2002-12-13 2004-07-01 Abgenix, Inc. System and method for stabilizing antibodies with histidine
WO2005028496A2 (en) 2003-09-12 2005-03-31 Antigenics, Inc. Vaccine for treatment and prevention of herpes simplex virus infection
PL1750733T3 (pl) 2004-05-03 2014-05-30 Univ Emory Sposób podawania świńskiego czynnika krzepnięcia VIII pozbawionego domeny B
KR100624013B1 (ko) * 2004-06-25 2006-09-19 주식회사 녹십자홀딩스 동결건조된 알부민 비함유 재조합 사람 혈액응고 제 8인자 제제
GB2416122A (en) * 2004-07-12 2006-01-18 Ipsen Ltd Botulinum neurotoxin composition
RU2423380C2 (ru) 2004-11-12 2011-07-10 БАЙЕР ХЕЛСКЕА ЛЛСи Сайт-направленная модификация fviii
DK1835938T3 (da) 2004-12-27 2013-11-04 Baxter Int Polymer-von Willebrand-faktor-konjugater
US8703706B2 (en) 2005-04-28 2014-04-22 Novo Nordisk Healthcare Ag Closed container comprising an activated factor VII polypeptide, processes for the preparation of the same, and a kit and a method for use of the kit
RU2424805C2 (ru) 2005-09-12 2011-07-27 Актелион Фармасьютиклз Лтд Стабильные фармацевтические композиции, включающие пиримидинсульфамид
US7855279B2 (en) 2005-09-27 2010-12-21 Amunix Operating, Inc. Unstructured recombinant polymers and uses thereof
US7985839B2 (en) * 2006-03-31 2011-07-26 Baxter International Inc. Factor VIII polymer conjugates
US7645860B2 (en) 2006-03-31 2010-01-12 Baxter Healthcare S.A. Factor VIII polymer conjugates
AU2007245190B2 (en) 2006-03-31 2011-07-21 Takeda Pharmaceutical Company Limited Pegylated factor VIII
US7982010B2 (en) * 2006-03-31 2011-07-19 Baxter International Inc. Factor VIII polymer conjugates
JP5876208B2 (ja) 2006-12-15 2016-03-02 バクスター・インターナショナル・インコーポレイテッドＢａｘｔｅｒ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｃｏｒｐ０Ｒａｔｅｄ 延長されたｉｎｖｉｖｏ半減期を有する第ＶＩＩａ因子−（ポリ）シアル酸結合体
CA2683317C (en) 2007-04-26 2014-12-16 Bayer Healthcare Llc Stabilization of liquid solutions of recombinant protein for frozen storage
SG10201503304RA (en) 2007-12-27 2015-06-29 Baxter Int Cell culture processes
EP2113564A1 (en) * 2008-05-01 2009-11-04 Arecor Limited Protein formulation
BRPI0917656A2 (pt) 2008-08-21 2017-07-11 Octapharma Ag Fatores viii e ix humanos produzidos de forma recombinante
BRPI0918589B1 (pt) * 2008-09-03 2021-07-13 Octapharma Ag Composições de proteção para fator viii recombinantemente produzido
AU2009303368B2 (en) * 2008-10-15 2012-04-05 Takeda Pharmaceutical Company Limited Pegylation of recombinant blood coagulation factors in the presence of bound antibodies
NZ593190A (en) 2008-11-07 2013-01-25 Baxter Int Factor viii formulations
US20100168023A1 (en) 2008-12-31 2010-07-01 Revance Therapeutics, Inc. Injectable Botulinum Toxin Formulations
CN116925238A (zh) 2009-02-03 2023-10-24 阿穆尼克斯制药公司 延伸重组多肽和包含该延伸重组多肽的组合物
US10172949B2 (en) 2009-06-09 2019-01-08 Prolong Pharmaceuticals, LLC Hemoglobin compositions
PL2440239T3 (pl) 2009-06-09 2018-01-31 Prolong Pharmaceuticals Llc Kompozycje hemoglobiny
US10172950B2 (en) 2009-06-09 2019-01-08 Prolong Pharmaceuticals, LLC Hemoglobin compositions
MX344583B (es) 2009-06-25 2016-12-20 Revance Therapeutics Inc Formulaciones de toxina botulinica libres de albumina.
HUE028056T2 (en) 2009-07-27 2016-11-28 Baxalta GmbH Blood coagulation protein conjugates
US8642737B2 (en) 2010-07-26 2014-02-04 Baxter International Inc. Nucleophilic catalysts for oxime linkage
JP5908401B2 (ja) 2009-07-27 2016-04-26 バクスター・インターナショナル・インコーポレイテッドＢａｘｔｅｒ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｃｏｒｐ０Ｒａｔｅｄ 血液凝固タンパク質複合体
JP5909755B2 (ja) 2009-07-27 2016-04-27 リポクセン テクノロジーズ リミテッド 非血液凝固タンパク質の糖ポリシアル酸化
US8809501B2 (en) 2009-07-27 2014-08-19 Baxter International Inc. Nucleophilic catalysts for oxime linkage
CA2772051C (en) 2009-08-24 2020-08-18 Amunix Operating Inc. Coagulation factor ix compositions and methods of making and using same
GB0915480D0 (en) * 2009-09-04 2009-10-07 Arecor Ltd Stable formulation of factor viii
WO2011075185A1 (en) 2009-12-18 2011-06-23 Oligasis Targeted drug phosphorylcholine polymer conjugates
EA201691292A1 (ru) 2010-07-30 2017-08-31 Баксалта Инкорпорейтид Нуклеофильные катализаторы для оксимного связывания
AU2011323236B2 (en) 2010-11-05 2017-03-30 Takeda Pharmaceutical Company Limited A new variant of antihemophilic factor VIII having increased specific activity
CA2821711C (en) 2010-12-15 2017-10-10 Baxter International Inc. Eluate collection using conductivity gradient
US20130345403A1 (en) * 2010-12-16 2013-12-26 Novo Nordisk A/S Aqueous factor viii solution
EP2654794B8 (en) 2010-12-22 2020-04-22 Baxalta GmbH Materials and methods for conjugating a water soluble fatty acid derivative to a protein
LT2822577T (lt) 2012-02-15 2019-03-25 Bioverativ Therapeutics Inc. Rekombinantiniai faktoriaus viii baltymai
ES2935489T3 (es) 2012-02-15 2023-03-07 Bioverativ Therapeutics Inc Composiciones de factor VIII y métodos de preparación y uso de las mismas
AU2013204754C1 (en) 2012-05-16 2018-10-11 Takeda Pharmaceutical Company Limited Nucleophilic Catalysts for Oxime Linkage
US9212357B2 (en) 2012-12-03 2015-12-15 Omrix Biopharmaceuticals Ltd. Thrombin solution and methods of use thereof
TWI690325B (zh) 2013-03-15 2020-04-11 美商百歐維拉提夫治療公司 因子viii多肽調配物
SG11201505926VA (en) 2013-03-15 2015-09-29 Biogen Ma Inc Factor ix polypeptide formulations
US9700486B2 (en) 2013-04-24 2017-07-11 Corning Incorporated Delamination resistant pharmaceutical glass containers containing active pharmaceutical ingredients
US10548953B2 (en) 2013-08-14 2020-02-04 Bioverativ Therapeutics Inc. Factor VIII-XTEN fusions and uses thereof
DK3041513T3 (da) 2013-09-08 2020-10-26 Kodiak Sciences Inc Zwitterioniske faktor viii-polymerkonjugater
KR102382402B1 (ko) 2014-02-04 2022-04-01 바이오젠 엠에이 인코포레이티드 번역 후 변형을 강화시키기 위한 통류 방식 양이온 교환 크로마토그래피의 용도
US10772942B2 (en) * 2014-03-24 2020-09-15 Bioverativ Therapeutics Inc. Lyophilized factor IX formulations
MX2016012869A (es) 2014-04-01 2017-05-12 Advantech Bioscience Farmacêutica Ltda Estabilizacion del factor viii sin calcio como un excipiente.
EP3126003A4 (en) * 2014-04-01 2017-11-29 Advantech Bioscience Farmacêutica Ltda. Stable factor viii formulations with low sugar-glycine
WO2016012595A1 (en) * 2014-07-25 2016-01-28 Csl Behring Gmbh Improved factor viii preparations suitable for therapeutic use and processes to obtain these
KR102192494B1 (ko) 2014-08-04 2020-12-18 시에스엘 리미티드 인자 viii 제형
MA40864A (fr) 2014-10-31 2017-09-05 Biogen Ma Inc Hypotaurine, gaba, bêta-alanine et choline pour la régulation de l'accumulation de sous-produits résiduaires dans des procédés de culture de cellules mammifères
JP6925980B2 (ja) 2015-05-13 2021-08-25 アジェナス インコーポレイテッド がんの処置および予防のためのワクチン
AR104847A1 (es) 2015-06-17 2017-08-16 Lilly Co Eli Formulación de anticuerpo anti-cgrp
TWI741992B (zh) 2015-08-03 2021-10-11 美商百歐維拉提夫治療公司 因子ｉｘ融合蛋白以及其製備及使用方法
BR112018008319A2 (pt) * 2015-11-05 2018-10-30 Novo Nordisk A/S formulação de fviii
EP3167877A1 (en) 2015-11-12 2017-05-17 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Method for the production of freeze-dried pellets comprising factor viii
CA3007364A1 (en) 2015-12-03 2017-06-08 Baxalta Incorporated Factor viii with extended half-life and reduced ligand-binding properties
EP3694322A1 (en) 2017-10-09 2020-08-19 Terumo BCT Biotechnologies, LLC Lyophilization container and method of using same
CA3096909A1 (en) 2018-04-26 2019-10-31 Agenus Inc. Heat shock protein-binding peptide compositions and methods of use thereof
CA3130668A1 (en) 2019-03-14 2020-12-03 Terumo Bct Biotechnologies, Llc Multi-part lyophilization container and method of use
AU2020300820A1 (en) 2019-07-04 2022-03-03 CSL Behring Lengnau AG A truncated von willebrand factor (vWF) for increasing the in vitro stability of coagulation factor VIII
AU2020364071A1 (en) 2019-10-10 2022-05-26 Kodiak Sciences Inc. Methods of treating an eye disorder
EP4153613A4 (en) * 2020-05-22 2024-01-24 R Pharm Overseas Inc IL-1-R1 DERIVED INHIBITOR OF IL-1B AND ITS USE
US20220380439A1 (en) 2020-11-09 2022-12-01 Takeda Pharmaceutical Company Limited Purification of fviii from plasma using silicon oxide adsorption
TW202317178A (zh) * 2021-06-23 2023-05-01 美商百歐維拉提夫治療公司 因子ⅷ嵌合蛋白的配製品及其用途
CA3229979A1 (en) * 2021-10-15 2023-04-20 Tyler CARLAGE Formulations of factor viii chimeric proteins and uses thereof

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4165370A (en) * 1976-05-21 1979-08-21 Coval M L Injectable gamma globulin
US4783441A (en) * 1979-04-30 1988-11-08 Hoechst Aktiengesellschaft Aqueous protein solutions stable to denaturation
DE3176491D1 (en) * 1980-03-05 1987-11-26 Miles Lab Pasteurized therapeutically active protein compositions
US4481189A (en) * 1982-04-14 1984-11-06 New York Blood Center Inc. Process for preparing sterilized plasma and plasma derivatives
US4597966A (en) * 1985-01-09 1986-07-01 Ortho Diagnostic Systems, Inc. Histidine stabilized immunoglobulin and method of preparation
SE8501050D0 (sv) * 1985-03-05 1985-03-05 Kabivitrum Ab Biologically active fragments of human antihemophilic factor and method for preparation thereof
US4758657A (en) * 1985-07-11 1988-07-19 Armour Pharmaceutical Company Method of purifying Factor VIII:C
CA1292686C (en) * 1986-10-27 1991-12-03 Ze'ev Shaked Pharmaceutical compositions of recombinant interleukin-2 and formulation process
US4877608A (en) * 1987-11-09 1989-10-31 Rorer Pharmaceutical Corporation Pharmaceutical plasma protein formulations in low ionic strength media
FR2630115B1 (fr) * 1988-04-14 1994-10-28 Merieux Inst Procede de stabilisation des solutions d'albumine humaine et solution obtenue
US5096885A (en) * 1988-04-15 1992-03-17 Genentech, Inc. Human growth hormone formulation
US4996047A (en) * 1988-11-02 1991-02-26 Richardson-Vicks, Inc. Sustained release drug-resin complexes
ATE108326T1 (de) * 1989-01-30 1994-07-15 Corint Ltd Wässerige desmopressin-cmc enthaltende arzneizubereitung.
SE465222C5 (sv) * 1989-12-15 1998-02-10 Pharmacia & Upjohn Ab Ett rekombinant, humant faktor VIII-derivat och förfarande för dess framställning
DE4001451A1 (de) * 1990-01-19 1991-08-01 Octapharma Ag Stabile injizierbare loesungen von faktor viii und faktor ix
DE4111393A1 (de) * 1991-04-09 1992-10-15 Behringwerke Ag Stabilisierte faktor viii-praeparationen
ATE198277T1 (de) * 1992-10-02 2001-01-15 Genetics Inst Zusammensetzung, welche den koagulationsfaktor viii beinhaltet; verfahren zu deren herstellung und die benutzung eines oberflächenaktiven stoffes als stabilisator

Also Published As

Publication number Publication date
DE69329795T2 (de) 2001-07-05
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DK0627924T3 (da) 2001-04-30
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FI942573A0 (fi) 1994-06-01
AU5288393A (en) 1994-04-26
HU211670A9 (en) 1995-12-28

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