KR100221123B1 - 안정화된 고나도트로핀을 함유하는 제제 - Google Patents

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레오 조안스 드메르 안드레아
아리에드 루이터 마리누스
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에프.쥐.엠.헤르만스
악조 엔.브이.
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Abstract

본 발명은 디카르복실산염 안정제를 포함하는 동결건조된 고나도트로핀 함유 제제에 관한 것이다. 특정 프로테인들(예 LH, TSH, FSH 또는 HCG)은 그와 혼합되어, 적어도 부분적으로는 동결건조된 형태로 특정 안정제들에 의해 안정화될 수 있다. 이같은 제제는 적정온도에서 적절한 시간동안 동결건조형태의 상기 프로테인을 안정화시키기 위해 디카르복실산염의 충분한 양을 포함한다. 밝혀진 전형적인 디카르복실산염으로는 시트르산, 타르타르산 및 아스파르트산의 염들이 있다. 그 제제들은 바람직하게는 동결건조된 상기 용액의 와해 온도를 높이기 위해서 비환원성 이당류를 포함한다. 본 발명은 또한 동결건조 형태로 상기 제제를 만드는 방법 및 상기물의 최종 주사식 제제에 관한 것이다.

Description

안정화된 고나도트로핀을 함유하는 제제
제1도는 다양한 안정제를 60℃에서 1달간 사용한 후의 재조합 FSH 활성도의 회수량에 대한 이온세기(X1000)의 상관 관계를 보여주는 그래프이다.
제2도는 HCG 활성도의 회수율에 대한 시트레이트/단백질 비(중량/중량)의 효과를 보여주는 그래프이다.
본 발명은 일반적으로 약학 조성물에 관한 것이며 특히, 안정화된 고나도트로핀을 함유하는 제제에 관한 것이다.
비교적 순수한 고나도트로핀의 제제들은 시판되고 있다. 예를 들면 천연적으로 유래된 사람 폐경기 고나도트로핀("HMG")을 함유하는 조성물과, 천연적으로 유래된 사람 융모막의 고나도트로핀("HCG")을 함유하는 조성물은 각각, "Humegon" 및 "Pregnyl"와 같은 상표로 오르가논 인터내쇼날(bv of Oss, NL.)사로부터 동결 건조된 제제로 시판되고 있다. 임신한 암말의 고나도트로핀 또한 같은 회사에서 동결 건조된 형태로 시판된다.
만니톨과 같은 부피 증가제를 동결 건조하기 전에 상기 제제들에 첨가한다. 상기 제제들은 충분한 저장 수명을 확보하기 위한 안정제의 첨가를 필요로 하지 않는다. 확실히, 정제과정 후에 잔존하는 모든 천연 불순물들은 동결 건조 형태의 제제를 안정화하는 작용을 한다.
그러나 최근, 더 효과적인 제조 및 정제 기법의 발전으로 인한, 일부 매우 순수한 고나도트로핀의 제제는 안정성이 불충분하다. 이 제제는 비교적 단기간내에 분해되어, 활성을 상실한다. 이분해를 방지하거나 늦추기 위해서, 상기 제제를 동결건조(lyophilize)하려는 시도가 행해졌으나, 동결 건조는 오직 부분적으로만 성공적이었다. 따라서 제품이 제조되고, 운반되고, 사용전 저장되는 충분히 긴 기간 동안 안정한 고나도트로핀을 함유하는 약학적 제제에 관한 필요성이 대두하게 되었다. 그런 필요성은 한 개 이상의 고나도트로핀을 함유하는 안정한 제제에 특히 요구되었다.
일반적으로, 본 발명은 디카르복실산염 안정제를 포함하는 고나도트로핀 함유 동결 건조 단백질 제제를 포함한다. 본 명세서에서 사용되는 "디카르복실산"이란 두 개 또는 그 이상의 카르복실산 잔기를 가지는 유기산을 의미한다(예, HOOC-R-COOH).
상기 고나도트로핀은 동결 건조 시스템 내의 특정한 안정제와 혼합되며, 적어도 부분적으로는 동결 건조 시스템 내의 특정한 안정제에 의해 안정화될 수 있다. 상기 제제는 소정의 온도에서 소정의 시간 동안 동결 건조 형태로 상기 고나도트로핀을 안정화시키는 디카르복실산염의 충분한 양을 포함할 것이다.
전형적인 디카르복실산염들은 시트르산, 타르타르산, 아스파라긴산 또는 이산들의 혼합물의 염이다. 상기 고나도트로핀 또는 고나도트로핀 유도체들(이하 "고나도트로핀"으로 언급함)은, 전형적으로 난포 자극 호르몬(FSH), 갑상선 자극 호르몬(TSH), 사람 융모막 고나도트로핀(HCG) 또는 황체형성 호르몬(LH)와 같은 단백질이다. 상기 제제는 수크로즈 또는 트레할로즈와 같은 비(非)환원성 이당류를 추가로 포함할 수 있다.
또한 본 발명은 본질적으로 순수한 고나도트로핀을 동결 건조 형태로 안정화 시키는 방법에 관한 것으로서, 동결건조된 형태의 단백질을 안정화시키기 위해 디카르복실산염의 충분한 양과 용액중 고나도트로핀을 혼합시킨 후 생성된 용액을 동결 건조시켜서 상기 고나도트로핀의 안정화된 동결 건조물을 생성하는 방법에 관한 것이다.
나아가, 본 발명은 상기 동결 건조물로부터 제조되는 재구성된 주사 가능한 제제에 관한 것이다. 상기 주사 가능한 제제는 주사용 수용액, 고나도트로핀, 비환원성 당, 흡착방지제 및 디카르복실산염들로 주로 이루어진다.
A. 고나도트로핀
바람직한 고나도트로핀으로는 다른 단백질 성분을 함유하건 그렇지 않건 간에 FSH, TSH, HCG, LH, 그 유도체들 및 그 혼합물들이 있다. 난포 자극 호르몬, 갑상선 자극 호르몬, 사람 융모막 고나도트로핀, 및 황체 형성 호르몬은 모두 α 및 β서브 유니트들로 구성된 화학적으로 관련된 단백질들이다. 이들 단백질의 α서브 유니트들은 동일하거나 거의 동일하다.
난포 자극 호르몬은 정상적인 생식 기능을 위해 요구되는 뇌하수체 전엽의 호르몬성 글리코프로테인이다. 난포 자극 호르몬은 체외 수정시 난소의 난포 발달을 촉진시키는 데 사용되고, 또한, 임상적으로는 만성적인 무배란 증후군 또는 황체상 부전증을 가진 무배란성 여성에게 있어, 난포의 성숙을 자극시키는데 이용된다. 난포 자극 호르몬은 적어도 부분적으로, 사람의 뇨와 같은 천연 소오스들로부터 분리될 수 있다. 재조합 난포 자극 호르몬 및/또는 LH는 Keene 등의 문헌["Expression of Biologically Active Human Follitropin in Chinese Hamster Ovary Cells", The Journal of Biological Chemistry, Vol. 264, pp 4769-4775(1989년 3월 25일)]에 기재된 바와 같이 제조될 수 있으며, 이 문헌은 본원에 참고로 포함된다. 여기서 이용되는 난포 자극 호르몬(FSH)과 같은 고나도트로핀은, 상기 화합물의 유사체, 및 재조합형, 천연형, 탈글리코실화된 형, 비글리코실화형, 변형된 글리코실화형 및 기타 형태의 고나도트로핀을 포함한다.
가장 바람직한 고나도트로핀은 재조합 DNA 기법에 의해 제조된 FSH(rFSH) 단독이거나, 또는 LH나 HCG와의 동결 건조물의 형태이다. 천연 소스로부터 정제된 FSH는 일반적으로는 부분적으로만 정제되어진다. 불순물들은 FSH를 어느 정도 안정화시키는 작용을 하는 것으로 보인다. 그러나, rFSH를 사용하면 불순물이 존재하지 않는다. 따라서 FSH는 급속한 분해 및 동결 건조시의 손실이 커지는 경향이 있다. FSH의 용량은 앰플 동결 건조물당 60 내지 1500 IU, 특히 75 내지 225 IU 범위이다.
사용되는 고나도트로핀은 특정한 양의 수용액(예, 주사용 증류수 또는 멸균통상 생리식염수)로 일반적으로 비경구(예, 피하 또는 정맥내) 투여를 위해 용도에 적합한 용량의 제제를 만들기 위해 희석한 후, 치료학적으로 유용한 농도의 단백질을 형성하기에 충분한 양으로 동결 건조물 제제 내에 존재하는 것이 바람직하다. 본원에서 사용된 수용액은 물을 주된 용매로서 함유하는 용액이지만, 물만을 함유할 필요는 없다. 예를 들면, FSH를 함유하는 용기는 1 내지 1000 ㎍의 FSH를 함유할 수 있다(예, 75 국제 단위(IU)가 치료 유효량으로 여겨진다). 존재하는 단백질 양이 클수록 제제가 더 안정하게 되는 것이 일반적이므로, 가능한 최대의 합리적인 양의 단백질이 용기내에 있는 것이 바람직하다. 고나도트로핀의 유효한 투여량은 의료 종사자에게 공지되어 있으며, 투여량 내에 함유된 양은 일반적으로 질병 상태 및 각각의 치료받는 환자에 따라 좌우된다.
예를 들면, 10,000 국제 단위의 다량의 HCG와 15 국제 단위의 소량의 HCG를 투여하였다. 20 내지 225 국제 단위의 LH를 주사하였다.
바람직한 한 실시 태양에서, FSH와 LH의 배합물, 또는 FSH와 HCG의 배합물을 함께 동결 건조시킴으로써, 선택된 고나도트로핀 각각의 치료 유효량을 가지는 제제를 생성한다.
B. 안정제
본 명세서에서 "안정화시킨다"라는 것은 상대적 용어이다. 안정제 또는 안정화 화합물로 안정화시킨다는 것은, 안정제를 통해 상기 단백질 활성의 감소를 막거나 지연시킬 수 있는 능력을 의미한다. 예를 들면, 안정화 화합물("안정제")의 첨가에 의해, 안정제 없는 제제와 비교해 볼 때 규정 온도에서 분해되어 생체내 또는 시험관내 활성을 어느 정도 상실하는데 더 오랜 시간(예, 1주 대신에 2주)이 걸리는 경우, 제제는 "안정화"된 것이다.
단백질 활성은 각각의 단백질에 대해 공지된 방법으로 측정할 수 있다. 활성의 한가지 측정법은, 시간 경과에 따라 형성되는 (불활성) 올리고머의 양을 특정함으로써 수행될 수 있다. 샘플 중의 올리고머 형성은 HPSEC에 의해 측정될 수 있다. 예를 들면 rFSH의 잔류 활성을 측정하는 다른 방법으로는 미국 재발행 특허 제32,696호(Schuurs 등)에 기재된 효소 면역 활성 분석법("EIA"); 프랑스, bioM
Figure kpo00002
rieux 사(프랑스, Charbonni
Figure kpo00003
res-les-Bains, Marcy L`Etoile 69260 소재)에서 상표명 "FSHEIA"로 시판하는 FSH용 킷트; 및 만내르츠(Mannaerts)등의 문헌["Applications of in vitro Bioassays for Gonadotropins", Neuroendocrinology of Reproduction, pp. 49-58(Elsevier Science Publishers bv, Amsterdam, NL 1987)]에 기재된 FSH와 LH의 시험관내 바이오분석법이 있다.
상기 제제에 사용되는 바람직한 안정제로는 시트르산, 타르타르산, 아스파라긴산 및 그 혼합물과 같은 디카르복실산의 염들이 있다. 바람직한 염들로는 이러한 디카르복실산들의 나트륨염, 칼륨염, 리튬염 및 암모늄염들이 있고, 특히 나트륨염과 칼륨염이 바람직하다. 또 다른 디카르복실산의 염으로는 나트륨 글루타메이트가 있다. 상기 디카르복실산염 안정제의 존재는 상기 효소 혼합물을 안정화시키는 역할을 하며, 특히 장기간동안 비교적 고온일 때 안정화시킨다. 안정제로 사용될 때, 아스파르테이트 및 글루타이메이트염들은 시트레이트, 이소시트레이트 또는 타르트레이트염들보다 더 우수한 활성의 회수율을 갖는다.
시트레이트염이 안정제로 선택되는 경우, 시트레이트 대 고나도트로핀의 비율은 200 내지 400(㎎/㎎)의 범위가 바람직하며, 일정량의 당이 존재할 때 최상의 안정화도와 회수율을 얻는다. 나트륨 시트레이트와 함게 사용되는 특히 바람직한 단백질은 rFSH인데, 이것은 상기 안정제를 사용하여 안정화되는 이 화합물의 능력 때문이다.
0.050 이상의 이온 세기를 가지는 용액을 형성하기에 충분한 농도의 디카르복실산염 안정제가, 0.1 내지 1000 ㎍의 FSH를 함유하는 FSH조성물 내에서 바람직하다. 0.250 내지 0.350 사이의 이온 세기를 가지는 상기 용액들이 특히 바람직하고, 이들은 일반적으로 rFSH를 안정화시키는데, 예를 들어 60℃에서 1달간 저장했던 rFSH를 안정화시켜서 rFSH의 회수율을 75%에 이르게 할 것이다. 이온세기의 계산은 당업자에게 널리 공지되었다. 체이스(Chase) 등의 문헌[Remington`s Pharmaceutical Sciences, pp. 223-224, 228 및 233(16판. 1980, Mack Publ. Co. of Easton, PA, U.S.A)]을 참조하시오.
용액중 나트륨 시트레이트 2.5 내지 17.5 ㎎/m1의 농도는 일반적으로 전술한 양의 동결 건조된 rFSH를 안정화시키는 데 충분하다.
또한, 제2도에 도시한 바대로 더 큰 안정성을 얻기 위해 시트레이트는 HCG의 중량의 10,000배 이하의 양으로 HCG 조성물 중에 존재해야 한다.
C. 비(非)환원성 당(non-reducing sugars)
동결 건조되는 상기 조성물들은 바람직하게는 수크로즈 또는 트레할로즈와 같은 비환원성 당을 포함한다. 이러한 당(예, 수크로즈)의 혼입은, 상기 용액의 동결건조가 일어나는 "와해(또는 수축) 온도"를 높이는 작용을 한다. 이같은 온도의 증가는 전체 동결 건조 과정을 단순화한다. 이런 용도에 특히 바람직한 비환원성당은 무정형 수크로즈이다.
동결 건조되는 상기 용액 중에 존재하는 비환원성 당의 양은 존재하고 있는 디카르복실산염 안정제의 양에 좌우되는 것이 일반적이다. 예를 들면, 비환원성 당대 디카르복실산염의 중량비는 일반적으로 50:1 내지 10:3 사이이며, 바람직한 농도로는 수크로즈 대 나트륨 시트레이트의 경우, 약 3.3:1 이다. 물리적 특성면에 서 최적의 동결 건조물을 생성하는 50 ㎎/m1 수크로즈 및 14.7 ㎎/m1 나트륨 시트레이트를 함유하는 용액이 특히 바람직하다.
현재 가장 바람직한 실시 태양에 있어서, 수크로즈의 양은 시차 주사 열량계에 의해 측정되는 온도로 와해(collapse) 온도를 -38℃로부터 약 -25℃로 올리기에 충분하다. 생성되는 동결 건조물 "케렉"은 무정형이 되며 비교적 오랜 기간 동안 안정하다.
D. 흡착 방지제
흡찹 방지제들은 바람직하게는 동결 건조된 조성물에 첨가되어 상기 조성물을 함유하고 있는 용기 벽에 단백질이 흡착되는 것을 방지하게 되며, 발생할 수 있는 농도 감소를 방지한다. 또한 특정의 흡착 방지제들(예, 폴리소르베이트)은 동결 건조 과정 동안 단백질을 보호하는 저온보호제(cryprotectant)로도 작용한다.
바람직한 흡착 방지제는 폴리소르베이트 20, NF(아틀라스 케미칼 사 제품 Tween 20), 폴리소르베이트 80, NF(아틀라스 케미칼 사 제품 Tween 80), Brij35(영국의 ICI Pharmaceuticals 회사 제품) 및 Pluronic F123 (서독, Ludwigshafen의 BASF사 제품)과 같은 비이온성 계면 활성제이다. 폴리소르베이트 20, NF는 특히 바람직하다.
바람직하게는, 폴리소르베이트는 1990. 1. 1 공인된 "The National Formulary"(22판. U.S. Pharmacopeial Convention, Inc. 1989)의 1763면 및 1967면에 발표된 USP/NF XXII의 시방서를 충족시키는 폴리소르베이트를 의미하는 것으로 이해된다.
하나의 흡착 방지제 또는 여럿의 흡착 방지제들은 용기 벽, 또는 공정중의 용기 벽들에 대한 단백질의 흡착을 감소시키기 위한 양으로 존재할 것이다. 예를 들면, 최종 용액내에 0.1 내지 0.2 ㎎/m1의 농도를 만들기에 충분한 양의 폴리소르베이트 20이 바람직하다. 이것보다 더 높은 농도는 올리고머를 생성시키기 쉽고 따라서 활성을 감소시키게 된다.
E. 약학 조성물
본 발명의 안정한 동결 건조 제제는, 수용액중 선택된 단백질을 충분한 양의 디카르복실산염 안정제와 혼합하여 상기 단백질을 안정화시키고, 충분한 양의 비환원성 당과 혼합하여 상기 와해 온도를 -38℃에서 -25℃ 이상으로 상승시킴으로써 제조할 수 있다. -35℃ 이상의 온도가 바람직하다. 임의로, 상기 선택한 흡착 방지제를 또한 첨가할 수 있다. 상기 용액은 여과한 후 용기(예, 1 m1 유리 앰플)안에 넣고 동결 건조하여 안정화된 동결 건조물을 생성한다. 동결 건조 기술은 당업자에게 잘 알려져 있다. 참고 자료로 골드블리쓰 등의 문헌 [Freeze Drying and Advanced Food Technology(Academic Press, Inc., 영국, GB 1975)]를 포함한 몇 개의 책들을 참고할 수 있다. 상기 동결 건조물 케렉내에 잔존하는 바람직한 물의 함량은 1 내지 5% 사이이다. 무균 기법이 그 전과정 내내 사용되어야 한다. 동결 건조기는 레이볼드 또는 에드워즈와 같은 제조 회사에서 시판된다. 이같은 방법 또는 그것의 변형된 방법을 사용하여, 몇몇 다른 조성물들을 제조할 수 있다.
특히 바람직한 조성물은 디카르복실산염 안정제와 혼합된 rFSH를 포함하며, 상기 디카르복실산은 시트르산, 타르타르산, 아스파라긴산 및 그 산들의 혼합물로 이루어지는 군으로부터 선택된다.
또다른 바람직한 동결 건조된 제제는 혼합물 중에 디카르복실산염 안정제, 제제 내에 존재하는 안정제의 양에 의해 안정화될 수 있는 고나도트로핀 및 트레할로즈를 함유하고 있다. 상기 제제는 상기 안정제, 단백질 및 비환원성 당과 혼합하여 나트륨 바이포스페이트를 추가로 포함하고 있다. 그같은 제제들을 위한 특히 바람직한 염은 나트륨 아스파르테이트, 나트륨 시트레이트 및 나트륨 타르트레이트이다.
또다른 바람직한 안정한 동결 건조 제제는 타르타르산염 또는 아스파라긴산염과 같은 안정제, 상기 제제 내에 존재하는 안정제의 양에 의해 안정화될 수 있는 고나도트로핀 및 비환원성 당을 함유하고 있다. 상기 제제는 상기 안정제, 단백질 및 비환원성 당과 혼합하여 디나트륨 바이포스페이트를 추가로 포함할 수 있다. 특히 바람직한 비환원성 당은 트레할로즈와 수크로즈이다. 상기 제제에서의 특히 바람직한 안정제는 나트륨 아스파르테이트이다.
다른 매우 바람직한 안정화된 동결 건조물은 단백질 ; 단백질을 동결 건조형으로 안정화하기 위한 충분한 양의 디카르복실산염 안정제 ; 비환원성 이당류 ; 상기 단백질이 그 동결 건조물을 함유하고 있는 용기에 흡착되는 것을 방지하기 위한 흡착 방지제 ; 및 5% 이하의 잔류수(水)로 주로 이루어진다. 이러한 동결 건조물에서 상기 단백질은 FSH가 될 것이다. 상기 디카르복실산염 안정제는 시트르산염, 타르타르산염 및 아스파라긴산염으로 이루어진 군 중에서 선택된 것이다. 상기 비환원성 이당류는 수크로즈 도는 트레할로즈일 것이고, 흡착 방지제는 Tween 20, Tween 80, Brij 또는 플루로닉 산으로부터 선택될 것이다. 이러한 동결 건조물은 다른 것들 중에서도 특히 바람직한데, 그것은 만니톨, 말토오스, 또는 이들 각각과 같은 또다른 "안정제들"의 첨가가 활성면에서 실제로 상기 동결 건조물을 불안정하게 한다는 것이 밝혀졌기 때문이다.
비경구 제제 및 정맥내 혼합물을 제조하는 방법은 문헌[Remington`s Pharmaceutical Scinces, pp. 1463-1497]에서 개시하고 있다. 그러나 상기 안정화된 조성물이 주입 액체들과 상용성이긴 하지만, 사용되는 주입액체는 바람직하게는 환원성 당을 함유하지 않아야 하므로 주의를 요한다. 사용가능한 최종 용액의 바람직한 pH는 6 내지 8 사이, 특히 7이어야 한다.
본 발명을 다음 실시예들을 참고로 더 설명한다.
[실시예 1]
A. 다양한 이당류를 사용한 rFSH의 안정화
rFSH 150 unit를 함유하는 수용액을 제조한다. 그 용액을 세 개로 나누고 각각을 (1) 50 ㎎/m1 말토오스/14.7 ㎎/m1 나트륨 시트레이트; (2) 50 ㎎/m1 트레할로즈/14.7 ㎎/m1 나트륨 시트레이트 및 (3) 50 ㎎/m1 수크로즈/14.7 ㎎/m1 나트륨 시트레이트와 혼합한다. 또한 세 개의 용액에 0.2 ㎎/m1 폴리소르베이트 20, NF를 첨가한다. 세 개의 용액을 동결건조하고, 생성된 동결 건조물을 60℃에서 4주간 방치한다. 그 후 동결 건조물의 활성을 시험하여 (EIA에 의해 측정) 다음 결과를 얻는다.
Figure kpo00004
본 실시예는 환원성 이당류보다 비환원성 이당류가 더 안정화시킨다는 것을 보여준다.
B. 나트륨 시트레이트를 사용한 rFSH의 안정화
두 개의 동결 건조된 샘플을 제조한다. 첫 번째 샘플은 75 unit의 rFSH, 25 ㎎의 무정형 수크로즈, 7.35 ㎎의 나트륨 시트레이트 및 0.1 ㎎의 폴리소르베이트(Tween) 20을 함유한다. 두 번째 샘플은 75 unit의 rFSH, 25 ㎎의 무정형 수크로즈 및 0.2 ㎎ Tween 20을 함유한다. 2개 샘플의 pH를 모두 7로 조정한다. 첫 번째 샘플을 50℃에서 3개월간 저장한 후, 정제수로 재구성하고 HPSEC에 의해 분석한다. 생성된 프로파일은 소량의 올리고머 형성을 나타낸다. 나트륨 시트레이트를 함유하지 않은 두 번째 샘플은 50℃에서 6개월간 저장한 후 정제수로 재구성하고 HPSEC로 분석한다. 생성된 프로파일은 훨씬 더 많은 올리고머가 형성됐음을 나타낸다.
첫 번째 샘플의 프로파일이 분해 생성물을 나타내지 않는 반면, 두 번째 샘플의 프로파일은 거의 전적으로 올리고머 생성물을 나타낸다.
[실시예 2-5]
다른 디카르복실산염 안정제들
제1도에서 나타낸 것처럼, rFSH 및 다양한 안정제들을 함유하는 샘플들을 제조하고 동결 건조시킨 후, 60℃에서 1달간 저장한 후의 활성을 테스트한다. 제1도는 회수율 퍼센트(EIA로 측정)에 대한 구체적인 안정제의 이온세기(X1000) 간의 상관 관계를 나타낸다.
시험된 상기 안정제들은 단독 나트륨 시트레이트(Ⅱ)와, 앰풀당 3.0 내지 9.1 ㎎의 NaHPO를 함유한 나트륨 시트레이트(Ⅲ); 나트륨 타르트레이트(Ⅳ); 및 나트륨 아스파르테이트(Ⅴ)이다. 그것의 농도들은 제1도에 나타낸 바와 같이 이온 세기 면에서 결정된다.
[실시예 6]
고나도트로핀(HCG) 활성에 대한 시트레이트 중량비의 효과가 테스트되었다. 그 결과는 제2도에 제시했다.
[실시예 7]
재조합 사람 FSH에 관한 동결 건조 조성물을 75 IU rFSH, 14.7 ㎎ 나트륨 시트레이트, 50 ㎎ 수크로즈 및 0.2 ㎎ 폴리소르베이트 20을 함유하도록 제조한다. 그 제제를 주사용수 1 m1와 혼합하여 재구성한다.
[실시예 8]
재조합 사람 FSH에 관한 동결 건조 조성물을 75 IU rFSH, 75 IU LH, 15 ㎎ 나트륨 시트레이트, 50 ㎎ 수크로즈 및 0.2 ㎎ 폴리소르베이트 20을 함유하도록 제조한다. 이 조성물은 안정하다. 상기 제제를 주사용수 1 m1와 혼합하여 재구성한다.

Claims (9)

  1. 고나도트로핀 1 중량부; 및 시트르산(citric acid)염, 타르타르산염, 아스파라긴산염, 이소시트르산염, 글루타민산염 또는 이들의 혼합물로 구성되는 군으로부터 선택되는 디카르복실산의 염 하나이상 1 ~ 10,000 중량부를 포함하는, 안정화된 도나도트로핀 함유 동결건조물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 디카르복실산염 안정제 중량의 3 내지 50 배 양의 비(非)환원성 당을 추가로 포함하는 안정화된 고나도트로핀 함유 동결건조물.
  3. 제1항에 있어서, 비이온성 계면 활성제를 추가로 포함하는 안정화된 고나도트로핀 함유 동결건조물
  4. 제3항에 있어서, 상기 고나도트로핀이 황체 형성 호르몬, 사람 융모막 고나도트로핀, 난포 자극 호르몬 또는 이들의 혼합물로 구성되는 군으로부터 선택되는 안정화된 고나도트로핀 함유 동결건조물.
  5. 제4항에 있어서, 상기 디카르복실산염 안정제가 시트르산염, 타르타르산염 또는 아스파라긴산염인 안정화된 고나도트로핀 함유 동결건조물.
  6. 제2항에 있어서, 상기 비환원성 당은 상기 디카르복실산염 안정제 중량의 3배 양으로 존재하는 안정화된 고나도트로핀 함유 동결건조물.
  7. 제6항에 있어서, 상기 디카르복실산염 안정제에 의해 안정화될 수 있는 제2의 고나도트로핀을 추가로 포함하는 안정화된 고나도트로핀 함유 동결건조물.
  8. 고나도트로핀 1 중량부 및 상기 고나도트로핀과 관련하여 시트르산염, 타르타르산염, 아스파라긴산염, 이소시트르산염, 글루타민산염 또는 이들의 혼합물로 구성되는 군으로부터 선택되는 디카르복실산의 염 하나이상 200 ~ 10,000 중량부를 포함하는, 안정화된 고나도트로핀 함유 동결건조물.
  9. 수용액 중에, 한 종류 이상의 고나도트로핀과, 상기 용액의 이온 세기를 0.050 내지 0.350 으로 조정하는 양의, 시트르산염, 타르타르산염, 아스파라긴산염, 이소트로산염, 글루타민산염 또는 이들의 혼합물로 구성되는 군으로부터 선택되는 디카르복실산의 염 하나 이상을 혼합하는 단계; 상기 혼합물에 상기 디카르복실산염 중량의 약 3배 내지 50배 양의 비환원성 당을 용해시키는 단계; 및 상기 혼합물을 -35℃를 초과하는 온도에서 동결건조시켜서 안정화된 고나도트로핀 동결건조물을 형성시키는 단계를 포함하는, 안정화된 고나도트로핀 동결건주물의 제조 방법.
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Families Citing this family (33)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IT1250075B (it) * 1991-12-18 1995-03-30 Serono Cesare Ist Ricerca Composizioni farmaceutiche contenenti gonadotropine.
WO1994025005A1 (en) * 1993-04-28 1994-11-10 Akzo Nobel N.V. Lyospheres comprising gonadotropin
JP4165878B2 (ja) * 1993-06-03 2008-10-15 株式会社林原生物化学研究所 トレハロース遊離酵素とその製造方法並びに用途
US5556771A (en) * 1995-02-10 1996-09-17 Gen-Probe Incorporated Stabilized compositions of reverse transcriptase and RNA polymerase for nucleic acid amplification
KR100377967B1 (ko) 1995-03-21 2003-06-12 어플라이드 리서치 시스템스 에이알에스 홀딩 엔.브이. Hcg액상조성물
IL120202A (en) 1996-03-07 2001-03-19 Akzo Nobel Nv Container with freeze-dried vaccine components
IL122732A0 (en) * 1997-01-15 1998-08-16 Akzo Nobel Nv Liquid gonadotropin-containing formulation its preparation and a device containing same
US20030166525A1 (en) 1998-07-23 2003-09-04 Hoffmann James Arthur FSH Formulation
JP4719357B2 (ja) * 1998-07-23 2011-07-06 アレス トレイディング ソシエテ アノニム Ｆｓｈ及びｆｓｈ変異体の製剤、製品及び方法
EP1169053A1 (en) 1999-04-13 2002-01-09 Inhale Therapeutic Systems, Inc. Pulmonary administration of dry powder formulations for treating infertility
CN1568192A (zh) * 2000-10-31 2005-01-19 法马马有限公司 KahalalideF制剂
EP1356809A4 (en) * 2000-12-28 2008-05-14 Takeda Pharmaceutical SUSTAINED RELEASE PREPARATIONS
GB0207092D0 (en) * 2002-03-26 2002-05-08 Sod Conseils Rech Applic Stable pharmaceutical composition containing factor VIII
WO2004087213A1 (en) 2003-04-02 2004-10-14 Ares Trading S.A. Liquid pharmaceutical formulations of fsh and lh together with a non-ionic surfactant
US20040248784A1 (en) 2003-06-03 2004-12-09 Marco Filicori Unitary combinations of FSH and hCG
PT1638595E (pt) * 2003-06-20 2013-04-26 Ares Trading Sa Fsh liofilizada / formulações de hl
DE10333317A1 (de) * 2003-07-22 2005-02-17 Biotecon Therapeutics Gmbh Formulierung für Proteinarzneimittel ohne Zusatz von humanem Serumalbumin (HSA)
EP1737573A2 (en) 2004-04-08 2007-01-03 Biomatrica, Inc. Integration of sample storage and sample management for life science
EP1987067A4 (en) * 2006-02-15 2012-01-25 Imclone Llc ANTIBODY FORMULATION
MY153976A (en) * 2007-11-01 2015-04-30 Merck Serono Sa Lh liquid formulations
CN101269215B (zh) * 2008-05-15 2011-03-23 上海天伟生物制药有限公司 一种糖蛋白激素组合物
CA2761675A1 (en) 2009-05-11 2010-11-18 Biomatrica, Inc. Compositions and methods for biological sample storage
EP2598661B1 (en) 2010-07-26 2017-09-27 Biomatrica, INC. Compositions for stabilizing dna, rna and proteins in saliva and other biological samples during shipping and storage at ambient temperatures
US9376709B2 (en) 2010-07-26 2016-06-28 Biomatrica, Inc. Compositions for stabilizing DNA and RNA in blood and other biological samples during shipping and storage at ambient temperatures
SG190136A1 (en) 2010-11-05 2013-07-31 Baxter Int A new variant of antihemophilic factor viii having increased specific activity
CN102293756A (zh) * 2011-08-24 2011-12-28 蚌埠丰原涂山制药有限公司 一种尿促性素冻干粉针剂及其制备方法
JP5775974B2 (ja) 2011-10-28 2015-09-09 プロセナ バイオサイエンシーズ リミテッド アルファシヌクレインを認識するヒト化抗体
WO2013112945A1 (en) 2012-01-27 2013-08-01 Neotope Biosciences Limited Humanized antibodies that recognize alpha-synuclein
UA118441C2 (uk) 2012-10-08 2019-01-25 Протена Біосаєнсиз Лімітед Антитіло, що розпізнає альфа-синуклеїн
US9725703B2 (en) 2012-12-20 2017-08-08 Biomatrica, Inc. Formulations and methods for stabilizing PCR reagents
US10513555B2 (en) 2013-07-04 2019-12-24 Prothena Biosciences Limited Antibody formulations and methods
JP6661554B2 (ja) 2014-06-10 2020-03-11 バイオマトリカ，インク． 周囲温度における血小板の安定化
SG11201804776SA (en) 2015-12-08 2018-07-30 Biomatrica Inc Reduction of erythrocyte sedimentation rate

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3932943A (en) * 1970-08-14 1976-01-20 E. I. Du Pont De Nemours And Company Method of preparation of lyophilized biological products
IT1057895B (it) * 1975-02-17 1982-03-30 Serono Lab Gonadotropina corionica umana parzialmente desalinizzata per indurre l'ouvulazione
ATE31023T1 (de) * 1983-04-28 1987-12-15 Armour Pharma Pharmazeutische zubereitung mit gehalt an gereinigtem fibrinonectin.
GB8604983D0 (en) * 1986-02-28 1986-04-09 Biocompatibles Ltd Protein preservation
US5059587A (en) * 1987-08-03 1991-10-22 Toyo Jozo Company, Ltd. Physiologically active peptide composition for nasal administration

Also Published As

Publication number Publication date
CA2037884C (en) 2003-10-21
CA2037884A1 (en) 1991-09-21
AU7362391A (en) 1991-09-26
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ZA911659B (en) 1991-12-24
PT97074B (pt) 1998-10-30
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PT97074A (pt) 1991-10-31
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JP3031570B2 (ja) 2000-04-10
ATE107172T1 (de) 1994-07-15
AU631730B2 (en) 1992-12-03
ID905B (id) 1996-09-10
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KR910016340A (ko) 1991-11-05
ES2057731T3 (es) 1994-10-16
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DE69102465T2 (de) 1995-03-02
EP0448146B1 (en) 1994-06-15
IE910732A1 (en) 1991-09-25
JPH04217630A (ja) 1992-08-07

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