KR100217011B1 - 동물의 성장 촉진방법, 그 성장 촉진제, 클로스트리듐속에 속하는 균의 사균체 분말제제 및 그 제법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 클로스트리듐속(屬)에 속하는 세균의 죽은 미생물 세포를 동물에게 경구 투여하는 동물의 생장 촉진 방법을 제공하며, 또한 필수 성분으로서 클로스트리듐속에 속하는 세균의 죽은 미생물 영양 세포를 함유하고 기타 성분으로서 당류 및/또는 전분류를 함유하는 분말 조성물을 제공한다.

Description

[발명의 명칭]

동물의 성장 촉진 방법, 그 성장 촉진제, 클로스트리듐속에 속하는 균의 사균체 분말제제 및 그 제법

[발명의 상세한 설명]

본 발명은 동물의 성장 촉진 방법, 그 성장 촉진제, 클로스트리듐속(Colostridium 屬)에 속하는 균의 사균체(死菌體) 분말제제 및 그 제법에 관한 것이다.

항생물질등의 항균성 물질은 가축, 가금(家禽) 및 양식된 수생(水生)동물 등의 성장촉진을 목적으로 하는 사료의 첨가제로 널리 사용되고 있다.

그러나 가축, 가금 및 양식된 수생 동물의 살코기에 있어서, 항균성 물질이 잔류물로서 존재할 가능성이 있다는데 대하여 심각한 문제가 있다는 것을 소비자들이나 매스컴에서 흔히 지적하고 있다.

따라서 극히 안전한 식품을 소비자들에게 공급한다는 관점에서 항균성 물질의 사용에 대하여 철저한 연구가 진행되고 있다.

한편, 옛날부터 인간과 가축을 비롯한 포유동물을 건강하게 유지하기 위하여 친세균성 물질을 함유하는 미생물 조성물을 이용하고 있다. 일반적으로 고려할 수 있는 것은 이러한 조성물들은 병원(病原)세균에 대한 길항작용을 가지고 있다는 점과, 따라서 이들 조성물에 있어서는 유용한 생균이 필수적으로 존재하고 있는 것으로 믿고 있다는 점이다.

친세균성 물질을 함유하는 미생물 조성물의 경우에 있어서 단백질 변성을 고려하여 친세균성 물질을 가열해서는 안되기 때문에 이들 조성물을 고강도의 분쇄 고형사료(crumble) 및 펠릿제 사료 형태로 제제화 할 수 없다.

결합제로서 α-전분을 함유하는 호상(糊狀)사료(예컨대, 뱀장어 양식용 사료)에 아밀라아제 분비 친세균성 물질(예 : 클로스트리듐속에 속하는 세균)을 첨가할 경우에 있어서 이러한 사료는 아밀라아제의 작용에 의하여 열화(劣化)할 수도 있다.

더욱이 친세균성 물질이 홀씨 형성 세균인 경우에는 이들을 홀씨 형성처리를 하여 세균이 사멸되는 일이 없도록 해야 하기 때문에 이러한 미생물 조성물의 생산수율을 저하하게 된다.

따라서 본 발명의 목적은 공지의 항균성 물질과 친세균성 물질을 함유한 미생물 조성물 대신에 안전하게 사용할 수 있는 성장 촉진 물질을 제공함에 있다.

본 발명에 의하면 클로스트리듐속에 속하는 세균의 사균체를 동물에게 투여하여서 되는 동물 성장 촉진 방법을 제공한다.

또한 본 발명은 당류 및/또는 전분류와 더불어 클로스트리듐속에 속하는 세균의 사균체를 필수 성분으로 함유하는 분말 조성물에 관한 것이다.

클로스트리듐속에 속하는 미생물로서는 예컨대 클로스트리듐 부티리쿰(Clostridium butyricum)을 들 수 있다. 특히 바람직한 것은 클로스트리듐 부티리쿰 미야이리(MIYAIRI)인데, 이것은 일본국의 미야리산사(Miyarisan Co. Ltd)에서 친세균성제로서 시판하고 있다. 이 미생물제의 경우에 있어서, 관찰된 바로서는 이 미생물제를 인간과 가축에게 장기간 불필요한 부작용이 없이 투여할 수 있다는 것이다.

미야이리종(種)의 예로서는 클로스트리듐 부티리쿰 균주 MIYAIRI 588을 들수 있는데, 이것은 부다페스트 조약에 의거한 국제기탁기관인 일본국의 공업 기술원 산하의 발효연구소(Fermentatien Research Institute)에 기탁번호 제 FERM BP-2789호로 기탁되어 있다.

이러한 미생물의 사균체를 제조하기 위한 생균으로 사용할 수 있는 것은 홀씨 형성 단계의 생균과 영양단계의 생균이다.

이러한 생균의 배양 방법에 대해서는 미합중국 특허 제 4,892,731호에 기재되어 있다.

본 발명에 따라 사용되는 사균체는 종래의 방법, 예를 들자면 상응한 생균체를 열처리하거나 포르말린 또는 기타 살균제와 함께 처리하여 얻을 수 있다. 사균체는 실질적으로 죽어 있는 것이어도 좋다. 또한 이들을 제제화할 경우에 있어서 실제로 사균체로 될 때에는 생균체를 사용할 수도 있다.

클로스트리듐속에 속하는 세균의 미생물 영양 세포는 예컨대 적당한 한가지 방법으로 얻을 수도 있다. 균체의 배양과 분리 방법에 대해서는 아무런 제한이 없다.

예를 들자면 종래의 글루코오스 함유 배양육즙 등의 적당한 배지에 클로스트리듐 세균을 접종하여 30∼40℃엥서 14∼24시간 동안 배양하는 방법이 있다. 위에 나온 예비 배양이 끝나면 본배양(本培養)을 실시하는데, 즉 예비 배양에서 얻은 액상의 배양물을 크기가 훨씬 큰 유사한 배지에 접종하여 예비 배양시에 사용한 것과 유사한 온도 조건과 시간 조건하에서 배양하는 것이다.

본 배양이 끝나면 수득한 균체를 원심 분리기 등의 적당한 수단을 사용하여 수집한다.

이러한 세균에 사용되는 배지는 특별한 제한없이 사용할 수 있다. 예를 들자면 육엑스 0.8%, 펩톤 1% 및 염화 나트륨 0.5%을 함유한 종래의 클로스트리듐 부티리쿰 배양육즙을 사용하여도 좋다.

일반적으로 바람직한 것은 글루코오스, 효모 추출물 및 펩톤을 함유한 액상의 배지이다.

일본국 특허 공고 제 8300/1962호 공보에 개시되어 있는 방법, 즉 약 14∼24시간 동안의 비교적 짧은 시간 동안 배양한 다음 배양 조작을 중단하여 홀씨 형성 단계전의 영양단계의 균체를 얻어 이것을 수집하는 방법을 실시할 수도 있다.

본 발명에 따라 사용되는 클로스트리듐 세균의 사균체의 영양세포는 배양된 영양단계의 균체를 공기중에서 여과하여 얻는다. 공기중에서의 여과가 불충분하면 공기가 존재하는 물속에서 여과물을 현탁시킬 수 있다.

클로스트리듐속에 속하는 세균은 절대 무산소성 세균이어서 영양단계의 균체가 공기중에 노출되면 사멸하여 버리므로 영양단계의 사균체를 얻게 된다.

상응한 영양단계의 생균을 열처리하거나 포르말린 또는 기타 살균제와 더불어 처리함으로써 영양단계의 사균체를 얻을 수도 있다. 사균체는 실질적으로 사멸해 있는 균체이어도 좋다. 더욱이 제제화할 경우에 있어서 실질적으로 사멸한다면 생균체를 사용하여도 좋다.

본 발명에 따라 사용되는 사균체는 사균체 1g 당의 균체의 수로서 최소한 10⁹개, 바람직하게는 10⁹∼10¹¹개 함유하는 것을 사용한다. 위에 나온 균체의 수란 것은 유화(乳化)시킨 균체를 생리 식염 용액중에서 현탁시킨 현탁액에 대하여 현미경하에서 혈구 계수기(hemacytometer)를 사용하여 계수(計數)하는 방법으로 계수한 균체의 수이다.

본 발명에 의한 미생물 조성물에는 조성물 1g 당 사균체를 최소한 10⁶개, 바람직하게는 10⁶∼10¹¹개, 보다 바람직하게는 10⁶∼10¹⁰개 함유한다.

본 발명에 의한 조성물을 투여하게 되는 동물은 인간이외에, 예컨대 가축, 가금, 양식된 수생 동물등을 포함한다.

본 발명에 의한 미생물 조성물의 제조방법은 그 한가지 예를 들자면 균체를 배양한 후 균체를 살균처리하고, 수득한 사균체를 분리하여 농축하는 방법이 있다.

이와 같이 하여 얻은 사균체의 건조 분말을 그대로 제제화하여도 좋다.

또한 일본국의 사료의 안전성 보증 및 품질 개선에 관한 법률에 의거하여 허용된 부형제, 예컨대 탈지된 쌀겨, 밀가루, 글루코오스, 실리카, 밀기울등과 사균체의 건조분말을 혼합하여 제제화 할 수도 있다. 더욱이 액상의 배양 생성물을 그 잔류물과 함께 농축, 건조하여 사균체를 함유하는 멸균 혼합물을 제조하여 이것을 본 발명에 의한 조성물 중에서 유효 성분으로 사용하여도 좋다.

본 발명에 의한 조성물의 형태는 분말, 정제(錠劑), 펠릿, 미세 과립, 캡슐 등이어도 좋다.

정제를 제조하자면 종래의 방법에 따라 임의로 부형제, 붕해제, 결합제, 윤활제등을 사용하여 제조한다.

부형제로서는 예컨대 당류(예 : 락토오스, D-만니톨, D-소르비톨, 수크로오스), 전분류(예 : 옥수수 전분, 감자 전분)무기 염류(예 : 인산 칼슘, 황산 칼슘, 침강 탄산 칼슘)등이 있다.

붕해제의 예로서는 전분류(예 : 히드록시프로필 전분, 소디움 카르복시메틸 전분, 부분적으로 α형으로 전환된 전분)셀룰로오스 유도체(예 : 저치환도의 히드록시프로필 셀룰로오스, 칼슘 카르복시메틸 셀룰로오스, 카르복시메틸 셀룰로오스) 및 합성 고분자류(예 : 가교된 폴리비닐피롤리돈)등을 들 수 있다.

결합제로 사용할 수 있는 것의 예로서는 폴리비닐피롤리돈, 히드록시프로필 셀룰로오스, 히드록시프로필메틸 셀룰로오스, 젤라틴, 아라비아 고무 등을 비롯한 고분자량의 물질이 있다.

윤활제의 예로서는 천연산 물질 및 그 유도체(예 : 탈크, 왁스, 콜로이드 실리카)와 지방산 및 이들의 금속염(예 : 스테아르산, 스테아르산 마그네슘, 스테아르산 칼슘, 스테아르산 알루미늄 및 수크로오스 지방산 에스테르) 등이 있다.

정제에는 마크로골(Macrogol)등과 같은 중합체를 적절히 사용한다.

본 발명에 의한 조성물을 동물의 성장촉진에 사용할 때에는 이들을 사료나 음료수의 첨가제로 하여 사용하는 것이 일반적이다. 따라서 이 경우에 있어서 분말형태의 조성물을 사용하는 것이 바람직하다. 이러한 분말 조성물에는 클로스트리듐속에 속하는 세균의 사균체를 함유하는 분말 0.00005∼80%, 바람직하게는 0.0005∼70%, 보다 바람직하게는 0.01∼50%을 함유하고 나머지는 담체를 함유한다.

본 발명에 의한 조성물에 있어서 이 조성물은 그 바람직한 조성물의 성장 촉진 활성이 상당히 높기 때문에 영양단계의 사균체뿐만 아니라 당류 및/또는 전분류를 함유하는 것이 바람직한 것이다. 즉, 바람직한 것은 당류 및/또는 전분류와 더불어 클로스트리듐속에 속하는 세균의 영양단계의 사균체를 함유하는 분말 조성물이다. 사균체를 함유하는 분말 조성물에 사용된 당류로서는 예컨대 글루코오스, 프룩토오스, 수크로오스, 올리고당, 락토오스 등을 비롯한 여러가지 당중에서 어떠한 것을 사용하여도 좋는데, 그 에서도 락토오스가 바람직하다.

전분으로서는 밀 전분, 감자 전분 및 옥수수 전분 등의 여러가지 전분 중에서 어떠한 것을 사용하여도 좋은데, 그 중에서 옥수수 전분이 바람직하다.

영양단계의 사균체 분말중의 균체의 함유량은 분말 1g 당 최소한 10⁹개, 바람직하게는 10⁹∼10¹¹개이어야 한다.

본 발명에 의한 클로스트리듐속에 속하는 세균의 영양단계의 사균체를 함유한 분말 조성물은, 예컨대 사균체 분말을 당 분말 또는 전분 분말과 혼합하여 균질 혼합물로 하는 제조 방법에 따라 제조할 수도 있다.

또 다른 방법은 습한 사균체에 당 또는 전분을 혼합하여 혼합물을 만든 다음 건조시켜 분말화 하는 것이다. 조작의 간편성을 고려하면 사균체와 당 및/또는 전분을 혼합하여 혼합물을 만든 다음, 이 혼합물을 물속에 현탁시킨 후, 수득한 현탁액을 분무 건조 처리하는데, 즉 열풍의 유입구 온도를 120∼200℃, 바람직하게는 130∼170℃로 하고 출구 온도를 30∼150℃, 바람직하게는 50∼100℃로 하여 분무 건조하는 것이 바람직하다. 당과 전분의 첨가량에 있어서는 클로스트리듐속에 속하는 영양단계의 사균체 1 중량부에 대하여 당의 첨가량을 0.04∼700 중량부, 바람직하게는 0.1∼70 중량부로 하는 한편, 전분의 첨가량을 0.2∼700 중량부, 바람직하게는 0.4∼70 중량부로 한다.

분무 건조 조작에 있어서 물에 난용성인 탄산 칼슘 등의 생리학적으로 허용되는 무기 물질을 첨가제로 사용하면 조작이 용이해짐을 확인하였다. 이러한 무기 물질의 첨가량은 위에 나온 필수 성분의 전체량에 대하여 0.005∼0.5부, 바람직하게는 0.01∼0.2부, 보다 바람직하게는 0.01∼0.1부이다.

위에 나온 방법으로 얻은 클로스트리듐 세균의 영양단계의 사균체를 함유한 분말 조성물은 일반적으로 클로스트리듐 세균의 영양단계의 사균체 분말 0.05∼80%, 바람직하게는 0.5∼70%, 보다 바람직하게는 5∼50%와, 당 1∼50%, 바람직하게는 3∼40%, 보다 바람직하게는 5∼30% 및 전분 15∼90%, 바람직하게는 25∼80%, 보다 바람직하게는 35∼75%을 함유한다.

분말 조성물 중에는 사균체를 최소한 10⁹개, 바람직하게는 10⁹∼10¹¹개, 보다 바람직하게는 10⁹∼10¹⁰개 함유하는 것이 좋다. 조성물중에 무기 물질을 추가로 함유할 경우에는 무기 물질의 양은 0.5∼50%, 바람직하게는 1∼20% 보다 바람직하게는 1∼10%이다.

이 분말 조성물에다 부형제를 첨가할 수도 있다. 사용되는 부형제의 예로서는 탈지 쌀겨, 콩가루, 등겨 칩, 왕겨 분말, 탄산 칼슘, 당류, 전분류, 맥주 효모 및 밀가루를 비롯하여 일본국의 안전성 보증 및 품질 개선에 관한 법률에 따라 허용되는 부형를 들 수 있다.

부형제 한가지만 사용하거나 최소한 두가지를 사용할 수 있다. 부형제의 첨가량은 일반적으로 위에 나온 분말 조성물 1 중량부 당 0.01∼1000 중량부, 바람직하게는 0.1∼800 중량부, 보다 바람직하게는 1∼500 중량부이다.

부형제 함유 분말 조성물의 경우에 있어서 함유된 사균체의 수는 일반적으로 조성물 1g 당 최소한 약 106개, 바람직하게는 10⁶∼10¹¹개, 보다 바람직하게는 10⁶∼10¹⁰개이다.

부형제 함유 분말 조성물에는 필수적으로 클로스트리듐 세균의 영양단계의 사균체 분말 0.00005∼80%, 바람직하게는 0.0005∼70% 보다 바람직하게는 0.01∼25%와, 당 0.01∼50%, 바람직하게는 0.003∼40%, 보다 바람직하게는 0.01∼15%와, 전분 0.015∼90%, 바람직하게는 0.03∼80%, 보다 바람직하게는 0.05∼40% 및 부형제 1∼99.9%, 바람직하게는 10∼99.8%, 보다 바람직하게는 50∼99.7%를 함유한다.

위에 나온 분말 조성물이 분무 건조법으로 제조된 것으로서 무기 물질을 함유한 것일 때에는 무기 물질의 양을 0.0005∼33%, 바람직하게는 0.001∼15%, 보다 바람직하게는 0.002∼5%로 하는 것이 적당하다.

당류, 전분류 또는 무기 물질을 부형제로 사용할 경우에는 조성물 중의 부형제의 양을 다음과 같이 한다.

당류 : 0.001∼99.9%, 바람직하게는 0.003∼99.8%, 보다 바람직하게는 0.01∼99.7% ; 전분류 : 0.015∼99.9%, 바람직하게는 0.03∼99.8%, 보다 바람직하게는 0.05∼99.7% ; 무기물질 : 0.0005∼99.9%, 바람직하게는 0.001∼99.8%, 보다 바람직하게는 0.02∼99.7%

본 발명에 의한 조성물에 유동성 개선제, 응고 방지제, 비산 방지제 등의 첨가제를 첨가하여도 좋다.

본 발명에 의한 조성물을 가축, 가금 또는 양식된 수생 동물의 사료 또는 음료수에 첨가하는 것이 보통이겠으나 동물에 그대로 투여하여도 된다. 필요에 따라서는 통상적으로 1개월 내지 수년 동안 계속해서 투여할 수도 있다.

투여 대상이 되는 동물의 예로서는 가축(예 : 소, 돼지, 말, 양), 가금(예 : 육계, 암닭, 메추리, 오리, 꿩, 칠면조) 및 양식된 수생 동물[예 : 방어, 도미, 복어, 다랑어, 가자미, 전갱이, 연어, 잉어, 뱀장어, 무지개 송어, 담수 송어, 새우류(예 : 보리 새우, 가재, 바다 가재, 파눌리러스(Panulirus), 블랙타이거(black tiger) 및 게류(예 : 파랄리토데스(Paralithodes), 치오노에세테스(Chionoecetes), 에리마크러스(Erimascrus)]등이 있다.

본 발명에 의한 조성물을 사료에 첨가할 경우에 있어서 사료 1g 당의 첨가량은 균체의 수가 최소한 약 10⁴, 바람직하게는 약 10⁴∼10⁷개, 보다 바람직하게는 약 10⁴∼10⁶개 되도록 한다.

예를 들자면 부형제를 함유하지 않은 조성물을 사용할 경우에 있어서 조성물의 첨가량은 최소한 0.1ppm, 바람직하게는 0.1∼1000ppm, 보다 바람직하게는 0.1∼100ppm 이어도 좋다. 부형제를 함유한 조성물을 사용할 경우에 있어서 조성물의 첨가량은 최소한 0.001wt.%, 바람직하게는 0.01∼10wt.%, 보다 바람직하게는 0.1∼0.5wt.% 이어도 좋다.

본 발명의 조성물을 음료수에 가할 때는 조성물의 첨가량은 음료수 1ml 당 균체의 수가 최소한 약 10⁴개, 바람직하게는 약 10⁴∼10⁷개, 보다 바람직하게는 약 10⁴∼10⁶개가 되는 양으로 한다. 예를 들자면 부형제를 함유하지 않은 조성물을 사용할 경우에서의 조성물의 첨가량은 일반적으로 최소한 0.05ppm, 바람직하게는 0.05∼500ppm, 보다 바람직하게는 0.05∼50ppm 이다. 부형제를 함유한 조성물을 사용할 경우에 있어서의 조성물의 첨가량은 일반적으로 최소한 0.0005%, 바람직하게는 0.005∼5%, 보다 바람직하게는 0.005∼0.5% 이다.

본 발명과 그 효과를 다음에 나오는 시험결과로 구체적으로 설명한다.

[시험 1-1]

(무지개 송어의 발육시험)

목적 : 발육 촉진 효과를 관찰하기 위하여 여러가지 시험을 하였다. 즉 클로스트리듐 부티리쿰 미야이리의 사균체를 무지개 송어의 사료에 첨가하여 시험을 하였다.

(시험 방법)

시료 : 사료 1g 당 C. 부티리쿰 미랴이리의 사균체 10⁵개를 첨가한 사료를 사용하였다.

방법 : 1마리당 평균 체중이 20g 인 무지개 송어를 40일 동안 사육하였다.

단, 이 경우에 있어서 무지개 송어의 각 시험군당 수를 525 마리로 하였다. 그 시험 결과는 표 1에 나와 있다.

비고 : 괄호속의 숫자는 대조군에서 얻은 값에 상응한 100을 기준으로 했을 때의 지수이다.

위의 표 1로 부터 C. 부티리쿰 미야이리의 사균체는 무지개 송어에 대하여 발육촉진 효과를 나타내었음을 알 수 있다.

[시험 1-2]

(마우스 발육 시험)

목적 : C. 부티리쿰 미야이리이 사균체의 발육 촉진 효과를 파악하기 위하여 사균체를 마우스(mouse)의 사료에 첨가하여 시험을 하였다.

시료 : 사료 1g 당 C. 부티리쿰 미야이리의 사균체 10 개 또는 10 개를 첨가한 사료를 사용하였다.

시험 방법 : 1 마리당 평균 체중이 25g 인 SPF 마우스를 28일간 사육하였다.

단 이 경우에 있어서 각 시험군당 마우스의 수를 10마리로 하였다.

그 시험 결과는 표 2에 나와 있다.

비고 : 괄호속의 숫자는 대조군에서 얻은 값에 상응한 100을 기준으로 했을 때의 지수이다.

위의 표 2로 부터 C.부티리쿰 미야이리의 사균체는 마우스에 대하여 발육 촉진 효과를 나타내었음을 알 수 있다.

[시험 1-3]

(육계의 발육 시험)

목적 : C.부티리쿰 미야이리의 사균체의 발육 촉진 효과를 파악하기 위하여 사균체를 육계(broiler)의 사료에 첨가하여 시험을 하였다.

시료 : 사료 1g 당 C. 부티리쿰 미야이리의 사균체 10 개를 첨가한 사료를 사용하였다.

시험 방법 : 1 마리당 평균 체중이 40g인 육계를 28일 동안 사육하였다.

단 이 경우에 있어서 각 시험군당 육계의 수를 20마리로 하였다.

그 시험 결과는 표 3에 나와 있다.

비고 : 괄호속의 숫자는 대조군에서 얻은 값에 상응한 100을 기준으로 했을 때의 지수이다.

위의 표 3으로 부터 C.부티리쿰 미야이리의 사균체는 육계에 대하여 발육 촉진 효과가 있음을 알 수 있다.

[시험 1-4]

(양식 뱀장어 사료의 열화(劣化) 시험(물속에서의 사료의 불필요한 산란에 대한 시험)

목적 : C. 부티리쿰 미야이리의 사균체 분말 또는 생균체 분말을 첨가한 양식 뱀장어 사료에서 열화 현상이 나타나는지의 여부를 파악하기 위하여 다음의 시험을 하였다.

시험 방법 : 표 4에 나와 있는 사료 100g을 비이커에 넣고 물 120g을 가하여 혼합, 반죽하여 쌀로 만든 떡 같은 혼합물을 제조한 다음, 30℃에서 10분간 방치한 후 시료 하나당 중량이 10g 되는 경단(dumpling)같은 시료를 만들었다. 이 시료 하나마다 C. 부티리쿰 미야이리의 균체를 약 10 개 함유하였다.

각 시료를 300ml 용량의 원추형 플라스크에 넣고 여기에 물 100ml을 가한 다음, 가열 장치가 구성된 바이브레이터로 30분간 진탕한 후 시료를 5분간 방치하고 나서 상청액을 분리하였다.

분광 광도계(spectrophotometer)로 파장 660mμ에서 상청액의 투광율을 측정하였다. 각 시료에 대하여 측정을 5회 실시하여 그 평균값을 기록하였다.

그 시험 결과는 표 5에 나와 있다.

비고 : 괄호속의 숫자는 대조군에서 얻은 값에 상응한 100을 기준으로 했을 때의 지수이다.

위의 표 5로 부터 알 수 있는 바와 같이 생균체 대신 사균체를 사용했을 경우 생균체가 첨가된 사료가 물속에서 불필요하게 산란되는 것이 억제되었다.

[시험 2-1]

육계 발육 시험

(1) 시료 : 본 발명의 시료 : 실시예 2-3에 나온 사균체 조성물(균체의 수 : 8.7 × 10 개/g) 참고 시료 : 참고 실시예에 나온 영양단계의 사균체만으로 된 분말(균체의 수 : 5 × 10 개/g)

(2) 시험 방법 : 각 시험군당 체중이 약 44g 되는 육계(Arbor Acres strain) 20마리(수컷 10마리, 암컷 10마리)를 사육하여 1회 시험을 3회 반복 실시하였다.

항생물질과 항세균성 물질이 전혀 함유되지 아니하고 1g 당 균체(4.4∼4.5)× 10 개에 상응한 양으로 하여 위에 나온 시료에 첨가된 육계 사료를 사용하여 육계를 사육하였다. 발육 시험을 4주 동안 실시하였다.

더욱이 위에 나온 시료가 전혀 함유되지 아니한 사료를 사용하여 육계를 사육한 것을 대조군으로 하였다.

(3) 그 시험 결과는 아래표에 나와 있다.

시험 1-1∼1-4에 나온 바와 같이 C. 부티리쿰 미야이리의 사균체는 가축, 가금(家禽) 및 양식 수생 동물에 대해서 발육 촉진 효과를 나타내므로 극히 안전한 육류 제조와 양식 수생 동물에 유용하다. 생균체와는 달리 사료 제조에 대해서는 아무런 제약이 없다. 특히 주목해야 할 것은 양식 수생 동물의 사료에 사균체를 첨가하여도 사료의 열화를 촉진하지 않는다는 점에서 본 발명의 효과는 생균체 사용에 비하여 현저하다는 점이다.

더욱이 시험 2-1의 결과로 부터 장담할 수 있는 것은 당류 및/또는 전분류와 더불어 C. 부티리쿰 미야이리의 영양단계의 사균체를 함유하는 본 발명의 분말 조성물은 상기 사균체만을 함유하는 관련된 분말 조성물보다 발육 촉진 효과가 극히 크다는 점이다. 따라서 본 발명의 조성물은 가축, 가금 및 수생 동물의 생산성 향상에 효과적이다.

본 발명을 실시예에 따라 구체적으로 설명한다.

[실시예 1-1]

(분말 조성물 제조)

C. 부티리쿰 미야이리의 사균체

위에 나온 각 성분을 서로 혼합하여 분말 조성물을 제조하였다.

[실시예 1-2]

(펠릿 제조)

C. 부티리쿰 미랴이리의 사균체

이들 성분을 서로 혼합하여 펠릿(pellet)성형기로 펠릿화하였다.

[실시예 1-3]

(정제 제조)

C. 부티리쿰 미랴이리의 사균체를 함유하는 분말(1g당 사균체 10¹⁰개) 1부에 락토오스 80부, 옥수수 전분 20부, 히드록시프로필 셀룰로오스(저치환도) 20부, 폴리비닐피롤리돈 2부를 철저히 혼합하여 과립으로 성형한 다음 마그네슘 스테아레이트 0.5부와 혼합한 후 정제를 제조하였다.

[실시예 1-4]

(미세과립 제조)

C. 부티리쿰 미랴이리의 죽은 사균체를 함유하는 분말(1g당 사균체 10¹⁰개) 1부에 만니톨 85부, 카르복시메틸 셀룰로오스 15부, 히드록시프로필 셀룰로오스 2.5부를 철저히 혼합한 다음 성형하여 미세 과립을 얻었다.

[실시예 2-1]

보존균인 클로스트리듐 부티리쿰 미야이리 균주 588(FERM BP-2789)을 아래에 나온 배지에서 37℃에서 배양하였다.

16시간 후 액상 배양물을 원심분리하여 영양단계의 균체를 얻었다.

이와 같이 하여 얻은 균체 100g, 옥수수 전분 110g, 락토오스 50g 및 탄산 칼슘 8g을 물 1ℓ에 현탁시키고, 이 현탁액을 분무 건조기에서 열풍의 유입구 온도를 140∼160℃로 하고 유출구 온도를 70∼95℃로 하여 순간 분무 건조처리함으로써 영양단계의 사균체를 함유한 본 발명의 분말 조성물을 제조하였다.

[실시예 2-2]

C. 부티리쿰 미랴이리의 영양단계의 사균체 분말 300g을 락토오스 100g 및 옥수수 전분 600g과 V형 믹서에서 혼합하여 본 발명의 분말 조성물을 제조하였다.

[실시예 2-3]

아래에 나온 참고 실시예와 마찬가지 방법으로 제조한 C. 부티리쿰 미랴이리의 영양단계의 사균체 분말 5.15kg을 락토오스 2kg, 옥수수 전분 13kg 및 탄산 칼슘 1kg과 함께 물속에서 유화시켰다. 이 유화액을 다시 물과 혼합하여 유화액의 체적이 100ℓ되게 하였다.

이어서 분무 건조기에서 분무 건조시켜 본 발명의 분말 조성물을 제조하였다.

[실시예 2-4]

C. 부티리쿰 미랴이리의 영양단계의 사균체 분말 2.5kg을 락토오스 0.5kg, 옥수수 전분 7kg 및 맥주 효모 90kg과 드럼형 믹서에서 혼합하여 본 발명의 분말 조성물을 제조하였다.

[실시예 2-5]

실시예 2-1에 나온 분무 건조제품 5g과 맥주 효모 85g 및 탈지된 쌀겨 10g을 철저히 혼합하여 본 발명의 조성물을 제조하였다.

[참고 실시예]

보존균인 클로스트리듐 부티리쿰 미야이리 균주 588(RERM BP-2789)을 아래에 나온 배지에서 37℃에서 배양하였다. 16시간 후 액상 배양물을 원심 분리하여 영양단계의 균체를 얻었다.

이와 같이 하여 얻는 균체 100g을 물 350ml에 현탁시키고, 이 현탁액을 -30℃에서 예비 동결 처리한 다음, 종래의 동결 건조 처리를 하여 영양단계의 사균체를 함유한 건조 분말을 제조하였다.

Claims (25)

1. 클로스트리듐속(屬)에 속하는 세균의 사균체를 동물에게 경구 투여하는 동물의 성장 촉진 방법.
2. 제1항에 있어서, 클로스트리듐속에 속하는 세균이 클로스트리듐 부티리쿰종에 속하는 세균인 동물의 성장 촉진 방법.
3. 제2항에 있어서, 클로스트리듐 부티리쿰종에 속하는 세균이 클로스트리듐 부티리쿰 미야이리인 동물의 성장 촉진 방법.
4. 제1항에 있어서, 사균체가 영양단계의 사균체인 동물의 성장 촉진 방법.
5. 제1항에 있어서, 사균체를 사료에 첨가함으로써 사균체를 동물에게 투여하는 동물의 성장 촉진 방법.
6. 제5항에 있어서, 사료중의 사균체의 수가 사료 1g당 10⁴∼10⁷개인 동물의 성장 촉진 방법.
7. 제1항에 있어서, 동물의 가축, 가금 또는 수생 동물인 동물의 성장 촉진 방법.
8. 필수 성분으로서 클로스트리듐속에 속하는 세균의 영양단계의 사균체를 함유하고 기타 성분으로서 당류 및 전분류를 함유하는 분말 조성물.
9. 제8항에 있어서, 클로스트리듐속에 속하는 세균이 클로스트리듐 부티리쿰종에 속하는 세균인 분말 조성물.
10. 제9항에 있어서, 클로스트리듐 부티리쿰종에 속하는 세균이 클로스트리듐 부티리쿰 미야이리인 분말 조성물.
11. 제8항에 있어서, 영양단계의 사균체의 수가 조성물 1g당 10⁶∼10¹¹개인 분말 조성물.
12. 제8항에 있어서, 당류는 글루코오스, 프룩토오스, 수크로오스, 올리고당 또는 락토오스이고, 전분은 밀 전분, 감자 전분 또는 옥수수 전분인 분말 조성물.
13. 제8항에 있어서, 조성물은 클로스트리듐속에 속하는 영양단계의 사균체 1 중량부당 당류 0.04∼700 중량부 및 전분류 0.2∼700 중량부를 함유하는 분말 조성물.
14. 제8항에 있어서, 조성물은 클로스트리듐 부티리쿰 미야이리의 영양단계의 사균체 0.00005∼80w/w%, 당류 0.001∼50w/w%, 전분류 0.015∼90w/w%, 물에 난용성인 무기 물질 0.0005∼33w/w% 및 부형제 1∼99.9w/w%을 함유하고, 영양단계의 사균체의 수가 조성물 1g 당 10⁶∼10¹¹개인 분말 조성물.
15. 제14항에 있어서, 당은 락토오스이고 물에 난용성인 무기 물질은 탄산 칼슘인 분말 조성물.
16. 클로스트리듐속에 속하는 세균의 영양단계의 사균체 분말을 당류 및 전분류와 함께 물속에 현탁시키고, 수득한 현탁액을 분무 건조 처리하는 단계를 포함하는 클로스트리듐속에 속하는 세균의 사균체 함유 분말 조성물의 제조 방법.
17. 클로스트리듐속에 속하는 세균의 사균체를 유효 성분으로 함유하는 동물의 성장 촉진 조성물.
18. 제17항에 있어서, 사균체가 영양단계의 사균체인 동물의 성장 촉진 조성물.
19. 제17항에 있어서, 클로스트리듐속에 속하는 세균이 클로스트리듐 부티리쿰종에 속하는 세균인 동물의 성장 촉진 조성물.
20. 제19항에 있어서, 클로스트리듐 부티리쿰종에 속하는 세균이 클로스트리듐 부티리쿰 미야이리인 동물의 성장 촉진 조성물.
21. 제17항에 있어서, 클로스트리듐속에 속하는 세균의 사균체 분말 0.00005∼80%를 함유하고 나머지를 담체로서 함유하는 동물의 성장 촉진 조성물.
22. 제21항에 있어서, 사균체가 영양단계의 사균체인 동물의 성장 촉진 조성물.
23. 제20항에 있어서, 조성물은 클로스트리듐속에 속하는 세균의 사균체 분말을 0.01∼50% 함유하는 동물의 성장 촉진 조성물.
24. 제21항에 있어서, 클로스트리듐속에 속하는 세균이 클로스트리듐 부티리쿰종에 속하는 세균인 동물의 성장 촉진 조성물.
25. 제24항에 있어서, 클로스트리듐 부티리쿰종에 속하는 세균이 클로스트리듐 부티리쿰 미야이리인 동물의 성장 촉진 조성물.