JP2799273B2 - 動物の成長促進方法及びクロストリジウム属菌死菌体粉末製剤 - Google Patents
動物の成長促進方法及びクロストリジウム属菌死菌体粉末製剤Info
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Description
びクロストリジウム属菌死菌体粉末製剤に関する。
家禽、養殖水産動物では成長促進を目的に抗生物質など
の抗菌性物質等を飼料に添加して広く利用されている。
しかしながら昨今、抗菌性物質等の畜肉、養殖魚への残
留が度々消費者やマスメディア等から指摘され、国民へ
の安全性の高い食糧供給の観点から抗菌性物質等の使用
の見直しがされつつある。一方、人や家畜等の哺乳動物
の健康維持を目的として、生菌剤が古くから使用されて
きた。この生菌剤の作用は有害菌に対する拮抗作用等に
よるとされ、従って生菌剤は生きた菌が必須と考えられ
ている。
度が上げられず、強度の強いクランプルやペレットが製
造できない。養鰻飼料のような練餌では、生菌の生産す
る酵素により飼料の劣化が生じる。さらに生菌が芽胞形
成菌の場合、死菌の発生を極力防ぐため芽胞を形成させ
るための処理を必要とするので、収率が悪い。そこで本
発明は、抗菌性物質や生菌剤に代わる安全な成長促進物
質を提供することを目的とする。
ウム属に属する微生物の死菌体を動物に経口投与するこ
とを特徴とする動物の成長促進方法、及びクロストリジ
ウム属に属する微生物の栄養体死菌体と糖類及び/又は
澱粉を必須成分とするクロストリジウム属死菌体粉末製
剤に関する。
は、例えばクロストリジウム・ブチリカム(Clost
ridium butyricum)が挙げられる。特
に好ましいものとしては、例えばミヤイリ菌が挙げられ
る。ミヤイリ菌は学名クロストリジウム・ブチリカム・
ミヤイリ(Clostridium butyricu
m MIYAIRI)と呼ばれているもので、現在、生
菌剤としてミヤリサン株式会社から市販されており、人
や家畜に長年に亘って投与しても全く副作用の認められ
ないものである。このミヤイリ菌の一種としてクロスト
リジウム・ブチリカム・ミヤイリ 588株(微工研条
寄第2789号:FERM BP−2789)があげら
れる。死菌体を製造するための生菌としては芽胞形成期
のものでも栄養体期のものでも制限はないが、栄養体期
のものが好ましい。生菌の製法はUSP 489273
1に開示されている。
方法により、例えば熱処理やホルマリン処理その他の殺
菌剤等を用いた処理方法によって得られる。又、実質的
に死菌体と言えるものであればよく、製剤化の際実質的
に死菌体となるのであれば生菌体を用いてもよい。この
クロストリジウム属に属する微生物の栄養体を製造する
には、菌体の培養法、分離法に特に制限なく例えばクロ
ストリジウム属に属する微生物をブドウ糖加普通ブイヨ
ンなどの適当な培地に接種し、30℃〜40℃で14時
間〜24時間前培養する。この培養が終了した液をスケ
ールアップした前培養と同様な培地に接種し、同様な温
度、時間で、本培養する。本培養終了後、遠心分離機な
ど適当な機器を用いて菌体を集めればよい。培地は、該
菌用であれば特に制限はなく、例えばクロストリジウム
ブチリカム菌用の普通ブイヨン(肉エキス0.8%、
ペプトン1%、塩化ナトリウム0.5%)などのいかな
る培地でも使用できるが、ブドウ糖、酵母エキス、ペプ
トンを含む液体培地が好適である。又、特公昭37−8
300号に開示の方法において、培養時間を短くし(例
えば14〜24時間程度)、芽胞形成前の栄養体の状態
で培養を中断し、菌体を集めてもよい。
る微生物の栄養体死菌末を得るには、培養した栄養体期
の菌体を空気中で濾過することにより、又、それだけで
は不十分な場合にはさらに、酸素の存在する水中にその
濾過物を懸濁すればよい(クロストリジウム属菌は、偏
性嫌気性菌なので、その栄養体は空気に触れるだけで死
滅して栄養体死菌体となる)。なお、栄養体死菌体は栄
養体の生菌を通常の方法により、例えば熱処理やホルマ
リン処理その他の殺菌剤等を用いた処理方法によっても
得られる。実質的に死菌体と言えるものであればよく、
製剤化の際実質的に死菌体となるのであれば生菌体を用
いてもよい。
g当り菌体数109 個以上、好ましくは109 〜1011
個含まれていればよい。なお、菌体数は、生理食塩水に
菌体を乳化した菌体浮遊液を、血球計算盤にとり顕微鏡
にて計数して求めた値である。本発明における製剤中に
は106 個/g以上、好ましくは106 〜1011個/
g、更に好ましくは106 〜1010個/g程度の生菌を
滅菌した死菌体が含まれていればよい。
例えば家畜、家禽、養殖水産動物などがあげられる。製
剤としては菌体を培養後殺菌処理し、死菌体のみを分離
濃縮後、乾燥した死菌体原末をそのまま製剤とすること
もでき、又米糠油かす、小麦粉、ブドウ糖、無水ケイ
酸、フスマ等、飼料安全法で許可されている任意の賦形
剤と混合した製剤とすることができる。さらに有効成分
として培養した培養液を、残渣も含めて濃縮乾燥し、殺
菌した死菌体含有物を用いることもできる。製剤の形態
としては例えば散剤、錠剤、ペレット、細粒剤、カプセ
ル剤などがあげられる。錠剤を製造する場合、必要に応
じ賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤等を用いて常法によ
りおこなえばよい。
ニトール、D−ソルビトール、白糖等の糖類、トウモロ
コシデンプン、バレイショデンプン等のデンプン類、リ
ン酸カルシウム、硫酸カルシウム、沈降炭酸カルシウム
等の無機塩類等があげられる。
ピルスターチ、カルボキシメチルスターチナトリウム、
部分アルファー化デンプン等のデンプン類、カルボキシ
メチルセルロースカルシウム、カルボキシメチルセルロ
ース、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース等のセル
ロース誘導体、ポリビニルピロリドンを架橋構造にし
た、その他合成高分子類等があげられる。
リドン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプ
ロピルメチルセルロース、ゼラチン、アラビアゴム等の
高分子類等があげられる。滑沢剤としては、例えば、タ
ルク、ロウ類、軽質無水ケイ酸等の天然物由来およびそ
の誘導体等、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウ
ム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸アルミニウ
ム、ショ糖脂肪酸エステル糖の脂肪酸およびその金属塩
類等があげられる。なお、錠剤には他にマクロゴール等
の高分子化合物が適宜使用される。本発明の製剤を動物
の成長促進のために使用する場合は、通常飼料や飲水に
添加して使用されるので、粉末製剤とする方が好まし
い。この場合製剤中のクロストリジウム属に属する微生
物の死菌体粉末0.00005〜80%、好ましくは
0.0005〜70%、更に好ましくは0.01〜50
%であり、残部は担体である。
もに糖及び/又は澱粉を併用したものは、成長促進作用
がより高く発現されるので好ましい。即ち、この製剤
は、クロストリジウム属に属する微生物の栄養体死菌体
と糖類及び/又は澱粉を必須成分とするクロストリジウ
ム属死菌体粉末製剤である。この死菌体粉末製剤に用い
る糖は、葡萄糖、果糖、蔗糖、オリゴ糖、乳糖、マンニ
トール、ソルビトール、キシリトール等その他糖なら何
でも良いが、乳糖が好ましい。又、澱粉は、小麦澱粉、
馬鈴薯澱粉、とうもろこし澱粉その他澱粉なら何でも良
いが、とうもろこし澱粉が好ましい。クロストリジウム
属に属する微生物の栄養体死菌末には菌体数が109 個
以上/g、好ましくは109 〜1011個/g程度含まれ
ていれば良い。
製剤を製造するには、例えば死菌体粉末に糖や澱粉粉末
を加え、単に均一に混合しても、又、湿死菌体に糖や澱
粉を加え乾燥粉砕してもよいが、操作の簡便さからする
と、死菌体に糖および/又は澱粉を加え、水中に懸濁さ
せた後、熱風の入り口温度120〜200℃、好ましく
は130〜170℃、出口温度30〜150℃、好まし
くは50〜100℃で、噴霧乾燥した方がよい。糖や澱
粉の添加量はクロストリジウム属に属する微生物の栄養
死菌体1重量部に対し、糖が0.04〜700重量部、
好ましくは0.1〜70重量部、澱粉が0.2〜700
重量部、好ましくは0.4〜70重量部程度である。な
お、噴霧乾燥する場合、炭酸カルシウムなどの水難溶性
の生理的に許容される無機物を添加すると操作が容易と
なる。この場合無機物の添加量は上記の必須成分の総量
に対し0.005〜0.5部、好ましくは0.01〜
0.2部、さらに好ましくは0.01〜0.1部であ
る。
属菌死菌体粉末製剤の各成分の割合は、クロストリジウ
ム属に属する微生物の栄養体死菌体0.05〜80%、
好ましくは0.5〜70%、さらに好ましくは5〜50
%、糖1〜50%、好ましくは3〜40%、さらに好ま
しくは5〜30%、澱粉15〜90%、好ましくは25
〜80%、さらに好ましくは35〜75%程度であり、
製剤1g当り、栄養体の死菌体が109 個以上、好まし
くは109 〜1011個、さらに好ましくは10 9 〜10
10個含まれていればよい。又無機物を使用している場
合、製剤中のその割合は0.5〜50%、好ましくは1
〜20%、さらに好ましくは1〜10%程度である。
加してもよい。賦形剤としては、脱脂米糠、大豆粉、フ
スマ、もみがら粉、炭酸カルシウム、糖、澱粉、ビール
酵母、小麦粉等、飼料安全法で認可されている任意の賦
形剤があげられる。これらの賦形剤は1種のみならず2
種以上併用してもよい。その添加割合は上記の粉末製剤
1重量部当り0.01〜1000重量部、好ましくは
0.1〜800重量部さらに好ましくは1〜500重量
部程度である。この賦形剤入粉末製剤中の死菌体量は、
製剤1g当り菌体数106 個以上、好ましくは106 〜
1011個、さらに好ましくは106 〜1010個程度であ
る。
ると、クロストリジウム属に属する微生物の栄養体死菌
体0.00005〜80%、好ましくは0.0005〜
70%、さらに好ましくは0.01〜25%、糖0.0
01〜50%、好ましくは0.003〜40%、さらに
好ましくは0.01〜15%、澱粉0.015〜90
%、好ましくは0.03〜80%、さらに好ましくは
0.05〜40%、賦形剤1〜99.9%、好ましくは
10〜99.8%、さらに好ましくは50〜99.7
%、程度である。又、上記粉末製剤として無機物を添加
した噴霧乾燥製剤を使用した場合、その無機物の割合は
0.0005〜33%、好ましくは0.001〜15
%、さらに好ましくは0.002〜5%程度がよい。
を使用した場合、製剤中の各成分の割合は、賦形剤と乾
燥粉末中の成分の総量として糖0.001〜99.9
%、好ましくは0.003〜99.8%、さらに好まし
くは0.01〜99.7%、澱粉0.015〜99.9
%、好ましくは0.03〜99.8%、さらに好ましく
は0.05〜99.7%、無機物0.0005〜99.
9%、好ましくは0.001〜99.8%、さらに好ま
しくは0.002〜99.7%程度である。
結防止剤、飛散防止剤等の助剤を添加してもよい。本発
明の製剤は、そのまま人、家畜等の動物に投与してもよ
いが、通常、家畜、家禽又は養殖水産動物等の動物飼料
に添加して、又は飲水に懸濁して投与される。投与は必
要のある限りおこなわれ、通常、1ヵ月−数年間にわた
る。投与する動物としては、例えば、牛、豚、馬、羊等
の家畜、ブロイラー、採卵鶏、うずら、カモ、アヒル、
キジ、七面鳥等の家禽、ハマチ、マダイ、フグ、マグ
ロ、ヒラメ、シマアジ、マアジ、サケ、コイ、ウナギ、
ニジマス、アユ、エビ類(クルマエビ、ボタンエビ、イ
セエビ、ロブスター、ブラックタイガー等)、カニ類
(タラバガニ、ズワイガニ、ワタリガニ、ケガニ等)等
の養殖水産動物があげられる。
数が飼料1g当り約104 個以上、好ましくは約104
〜107 個、更に好ましくは約104 〜106 個となる
ように添加する。例えば賦形剤の入っていない製剤を使
用する場合、その添加量は0.1ppm以上、好ましく
は0.1〜1000ppm、更に好ましくは0.1〜1
00ppmで良い。又、賦形剤の入っている製剤を使用
する場合、0.001重量%以上添加でよく、好ましく
は0.01重量%〜10重量%、さらに好ましくは0.
1重量%〜0.5重量%でよい。
数が飲水1ml当り約104 個以上、好ましくは約10
4 〜107 個、更に好ましくは約104 〜106 個程度
となるように添加する。例えば賦形剤の入っていない製
剤を使用する場合、その添加量は0.05ppm以上、
好ましくは0.05〜500ppm、更に好ましくは
0.05〜50ppm程度である。又、賦形剤の入って
いる製剤を使用する場合、その添加量は0.0005%
以上、好ましくは0.005%〜5%、さらに好ましく
は0.05%〜0.5%程度である。
示す。 実験例1−1 ニジマスの発育試験 目的:ニジマスの育成用飼料にC.butyricum
MIYAIRIの死菌体を飼料に添加し、発育促進効
果をみるために以下の実験をおこなった。 実験方法 供試品:C.butyricum MIYAIRIの死
菌体を105個/g添加した飼料を作製した。 実験手順:一匹当たり平均体重20gのニジマスを1区
525匹当て40日間飼育した。 試験結果を表1に示す。
IRIの死菌体はニジマスに対する発育促進効果がある
ことが分かった。
AIRIの死菌体を飼料に添加し、発育促進効果をみる
ために以下の実験をおこなった。 供試品:C.butyricum MIYAIRIの死
菌体を105個/g、及び107個/g、添加した飼料
を作製した。 実験手順:一匹当たり平均体重25gのSPFマウスを
1区10匹当て28日間飼育した。 試験結果を表2に示す。
IRIの死菌体はマウスに対する発育促進効果があるこ
とが分かった。
cum MIYAIRIの死菌体を飼料に添加し、発育
促進効果をみるために以下の実験をおこなった。 実験方法 供試品:C.butyricum MIYAIRIの死
菌体を106 個/g添加した飼料を作製した。 実験手順:平均体重40gのブロイラーを1区20羽当
て28日間飼育した。試験結果を表3に示す。
IRIの死菌体はブロイラーに対する発育促進効果があ
ることが分かった。
RIの生菌、死菌体をそれぞれ添加し、劣化の有無をみ
るために以下の試験をおこなった。 試験方法 表4に示す飼料100gをビーカーにとり1.2倍量の
水を加え、もち状に練り上げた。次いで30℃10分間
放置後10gの団子状のかたまりを作り試料とした。な
おC.butyricum MIYAIRIは試料1g
中105個含有している。
mlを加え、加温式振とう器で30分間振とうした。振
とう後5分間静置し、上澄液を採取して分光光度計(波
長660mμ)にて透過率を測定した。各試料5回測定
し、平均値を求めた。
水中での飼料の散逸が防止されることが分かった。
個/g) 対照品 :参考例の栄養体死菌末(菌数:5×1011
個/g) 実験手順:アーバーエーカー系のブロイラー雛(体
重44g)を1区当り20羽(雄10+雌10)×3反
復で60羽を用い、上記試料を菌体濃度(4.4〜4.
5)×105 個/gとなるように添加したブロイラー肥
育前期用飼料(抗生物質、抗菌剤無添加)を投与し、4
週間の発育試験を行なった。なお、上記試料を添加しな
い飼料を投与した区をブランクとした。 結果を下表に示す。
tyricum MIYAIRIの死菌体は家畜、家
禽、養殖水産動物の発育促進効果を有し、安全性の高い
畜肉及び養殖魚の生産に有効である。また、飼料製造に
当たり、生菌剤のような制限はなく、特に養魚飼料に添
加してもその劣化を促進することはないという生菌剤に
はないすぐれた効果を発揮する。又、上記実験例2−1
から明らかなように、C.butyricum MIY
AIRIの栄養体死菌末と糖及び/又は澱粉からなる本
発明の粉末製剤は、C.butyricum MIYA
IRIの栄養体死菌末のみよりも成長促進効果が優れ、
畜産物、水産物の生産性向上に有効である。
する。 実施例1−1 散剤の製造 米糠油かす 96 g 大豆油 3 g ミヤイリ菌体末(死菌体1010/g) 1 g 上記の成分を混合し、散剤とする。
る。
部、コーンスターチ20部、低置換度ヒドロキシプロピ
ルセルロース20部及びポリビニルピロリドン2部を加
え十分混合後、造粒し、ステアリン酸マグネシウム0.
5部を加え混合後、錠剤する。
トール85部にカルボキシメチルセルロース15部及び
ヒドロキシプロピルセルロース2.5部を加え、十分混
合し、造粒して細粒剤を得る。 実施例2−1Clostridium butyricum MIY
AIRI 588の保存株(FERM BP−278
9)を次の培地を用い、37°Cで培養し、16時間
後、培養液を遠心分離して栄養体期の菌体を得る。 ペプトン 1% 酵母エキス 1% ブドウ糖 1% 得られた菌体100g、コーンスターチ110g、乳糖
50g、炭酸カルシウム8gを水1Lに懸濁し、懸濁液
を噴霧乾燥機で熱風の入口温度140〜160℃、出口
温度70°〜95°Cで、瞬間的に乾燥粉末とし、本発
明の製剤を得る。
うもろこし澱粉600gをv型混合機で混合して粉末状
の本発明の製剤を得る。 実施例2−3 ミヤイリ菌の栄養体死菌末5.15kg、乳糖2kg、
とうもろこし澱粉13kg、炭酸カルシウム1kgに水
を加えて乳化し、更に水を加えて100Lとし、スプレ
ードライヤーにて噴霧乾燥し粉末状の本発明の製剤を得
た。 実施例2−4 ミヤイリ菌の栄養体死菌末2.5kg、乳糖0.5gk
g、とうもろこし澱粉7kg、ビール酵母90kgをド
ラム型混合機で混合して粉末状の本発明の製剤を得る。
ぬか10gを均一に混合して、本発明の製剤を得る。 参考例Clostridium butyricum MIY
AIRI 588の保存株(FERM BP−278
9)を次の培地を用い、37°Cで培養し、16時間
後、培養液を大気中で遠心分離して栄養体期の菌体を得
た。 ペプトン 1% 酵母エキス 1% ブドウ糖 1% 得られた菌体100gを水350mlに懸濁し、この懸
濁液を、予め−30℃で予備凍結を行った後、常法によ
り凍結乾燥を行って、乾燥粉末とし、栄養体死菌体末を
得た。
Claims (9)
- 【請求項1】 クロストリジウム・ブチリカム種に属す
る微生物の死菌体を動物に経口投与することを特徴とす
る動物の成長促進方法。 - 【請求項2】 クロストリジウム・ブチリカム種に属す
る微生物がクロストリジウム・ブチリカム・ミヤイリで
ある請求項1の方法。 - 【請求項3】 死菌体が栄養体死菌体である請求項1の
方法。 - 【請求項4】 死菌体を飼料に添加して動物に投与する
請求項1の方法。 - 【請求項5】 飼料中の死菌体量が菌体数として104
個/g以上である請求項4の方法。 - 【請求項6】 動物が家畜、家禽又は水産動物である請
求項1の方法。 - 【請求項7】 クロストリジウム・ブチリカム種に属す
る微生物の死菌体を有効成分とする動物の成長促進剤。 - 【請求項8】 死菌体が栄養体の死菌体である請求項7
の成長促進剤。 - 【請求項9】 クロストリジウム・ブチリカム種に属す
る微生物がクロストリジウム ブチリカム・ミヤイリで
ある請求項7の成長促進剤。
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---|---|---|---|---|
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-
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- 1992-12-10 JP JP4330508A patent/JP2799273B2/ja not_active Expired - Lifetime
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