KR0173503B1

KR0173503B1 - 항생제와 조단백질이 포함된 사료용 항생제 조성물 및 그의 제조방법

Info

Publication number: KR0173503B1
Application number: KR1019950043469A
Authority: KR
Inventors: 황교열; 강성우
Original assignee: 오세열; 제일바이오텍
Priority date: 1995-11-24
Filing date: 1995-11-24
Publication date: 1999-02-18
Also published as: KR970025416A

Abstract

본 발명은 미생물 발효로 얻어진 발효액을 염화시키거나 안정제를 사용하여 제조한 미생물 균체등 조단백질과 항생제를 포함하는 사료용 항생제 조성물과 그의 제조방법에 관한 것이다.

본 발명에 따르면 미생물 발효로 얻어진 발효액에 포함된 단백질 등을 제거하지 않고 사료용 항생제 조성물로 사용함으로써 공정의 단축은 물론 폐기물의 발생을 막아 환경에 폐혜를 주지 않을 뿐아니라 영양학적으로 유용한 사료용 항생제 조성물 및 그의 제조방법이 제공된다.

Description

항생제와 조단백질이 포함된 사료용 항생제 조성물 및 그의 제조방법

본 발명은 항생제와 조단백질이 포함된 사료용 항생제 조성물 및 그의 제조방법에 관한 것으로, 상세히는 미생물 발효로 얻어진 배양액을 염화(salting)시키거나 안정화시켜 제조된 미생물균체 등 조단백질이 포함된 사료용 항생제 조성물 및 그의 제조방법에 관한 것이다. 더욱 상세하게는 본 발명은 스트렙토마이세스 속의 균주를 포함한 방선균을 이용하여 항생제를 발효생산하고 발효가 종료된 후 미생물 균체가 포함된 발효물은 정제과정을 거치지 아니하고 직접 염화 또는 안정화시켜 건조함으로서 여러단계의 항생제 정제과정이 생략되고 미생물 균체 등 조단백질이 포함된 개량된 항생제 조성물 및 그의 제조방법에 관한 것이다.

세계 2차대전 당시 페니실린의 발견 이후 여러 항생제는 인류 건강 증진에 크게 공헌한 바는 물론 가축의 대량생산에 따른 질병의 예방 및 치료를 목적으로 사료에 적량을 사용함으로서 축산발전에도 크게 기여한 점은 주지의 사실이다. 항생제의 종류는 천연항생제(Natural antibiotics) 뿐만 아니라 유도체 항생제의 개발로 인하여 매우 다양하며 혜아릴수 없이 많다.

특히 예를 들자면 테트라사이클린(tetracyclin)은 천연테트라사이클린과 테트라사이클린 유도체로 구분할 수 있는데 테트라사이클린, 클로로테트라사이클린(chlorotetracycline), 옥시테트라사이클린(oxytetracycline), 데모클로사이클린(democlocycline)등이 천연 테트라사이클린으로 구분된다. 이 가운데 클로로테트라사이클린 및 테트라사이클린은 스트렙토마이세스 아우레오파시엔스(Streptomyces aureofaciens) 등에 의해서, 옥시테트라사이클린은 스트렙토마이세스 리모수스(Streptomyces rimosus) 등에 의해 발효로서 얻어지며 그 밖의 테트라사이클린 유도체는 이들 천연테트라사이클린을 기초로 유도되어 얻어진다.

클로로테트라사이클린 및 옥시테트라사이클린을 포함한 몇몇 항생제는 사료에 첨가되어 가축의 질병 예방, 치료, 사료효율 증가, 증체효과 등의 목적으로 이용되는 경제성이 있는 항생제로 발효로 대량생산되고 있다.

이미 발명되어 공개된 항생제의 제조방법은 항생제발효, 균체제거 및 여과, 불순물의 제거, 부분정제, 완전정제의 방식에 따라 제조되고 있으며, 특히 동물용 항생제도 이와같이 여러단계의 정제과정에 따라 제조되어 동물용 주사제, 경구제, 사료첨가제등으로 이용되고 있다. 발효액으로부터 항생제를 분리 정제하여 회수하는 공개된 선 기술들은 상당히 많이 발표되었으며 특히 클로로테트라사이클린의 분리·정제방법은 이미 선 발명되어 특허가 종료된 것이 대부분이다(In Biochemical Reference Series, Vol II. Quadrangle Press, New York.). 균체를 제거한 후 더 나아가 정제 순도를 증진하기 위하여 포화 염화 나트륨을 이용한 방법(미국특허 2 763 681), 4급 암모니움 형태로 직접 정제하는 방법(미국특허 2 875 247)과 7 이상의 높은 pH에서 Ca²⁺과 Mg²⁺을 결합시키는 방법(Biotechnology, a comprehensive treatise in 8 volumes edited by H.-J. Rehm and G. Reed. Vol. 4 393-429)등이 알려져 있다. 또한 옥시테트라사이클린의 분리·정제방법으로는 균체를 제거한 후 산성화된 배지에서 침전법으로 회수하는 방법(미국특허 2 873 276), 4급 암모니움염, Ca²⁺, Mg²⁺를 이용하여 수용액으로부터 침전시켜 얻는 방법과 아릴 아조 설포닉 염료(Aryl azo sulfonic dyes)를 이용한 침전 회수 방법(미국특허 2 649 480)등이 선 발명되어 있다.

그러나 상기와 같은 항생제 제법에 있어서는 생산 미생물 균체의 제거, 불순물의 제거 및 정제과정에서 환경에 폐해를 줄수 있는 폐기물, 유기용매 또는 폐수가 다량 배출되는 문제점이 포함되어 있다. 정제된 동물주사용 항생제는 순도가 높아야하고 불순불이 최소화 되어야 하므로 상기와 같은 여러단계의 정제과정을 통하여 만들어진 항생제를 사용하여야 하지만 동물의 구강을 통하여 장내로 섭취되는 경구제 또는 사료첨가용 항생제 제품의 제조에 있어서는 상기와 같은 제조방법이 필수적인 방법은 아니다. 또한 항생제 생산미생물은 성장과정에서 여러가지 유용한 성분을 세포내외로 축적 또는 분비하기 때문에 사료적인 가치가 매우 높다.

따라서 본 발명가들은 상기와 같은 동물용 경구제 및 사료첨가용 항생제제의 비효율적인 제조방법과 문제점을 해결하고자 많은 연구를 진행한 결과 환경에 폐해를 주는 계기물의 발생을 방지했을 뿐 아니라 항생제 생산과정에서 미생물에 의해서 만들어진 미지성장인자(unknown growth factor)등 유용한 영양성분과 미생물 균체 및 조단백질을 동물에게 공급할 수 있도록 이들을 함유하는 항생제 조성물 및 이를 제조하는 개량된 제조방법을 개발하여 본 발명을 완성하게 되었다.

본 발명의 목적은 환경에 폐해를 주는 폐기물의 발생을 제거함과 동시에 발효에 의해 생산된 항생제와 미생물 균체를 포함한 발효조성물이 들어 있어 동물에 유용한 조단백질이 15% 이상, 항생제 함량이 10 내지 30% 가량 함유된 경제성, 실용성이 있는 사료첨가제용 항생제 조성물 및 그의 제조방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 칼슘이온으로 염화(salting)된 클로로테트라사이클린 칼슘염 형태의 항생제와 미생물 균체를 포함한 발효조성물이 들어 있어 동물에게 유용한 조단백질이 15% 이상, 클로로테트라사이클린 함량이 10 내지 20% 가량 함유된 사료첨가제용 클로로테트라사이클린 칼슘염 항생제 조성물 및 그의 제조방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 암모니움이온으로 염화(salting)된 옥시테트라사이클린 4급 암모니움염 형태의 항생제와 미생물 균체를 포함한 발효조성물이 들어 있어 동물에게 유용한 조단백질이 15% 이상, 옥시테트라사이클린 함량이 10 내지 30% 가량 함유된 옥시테트라사이클린 4급 암모니움염 항생제 조성물 및 그의 제조방법을 제공하는 것이다.

이하 본 발명을 더욱 상세하게 설명한다.

클로로테트라사이클린, 옥시테트라사이클린을 포함한 항생제와 이를 생산하는 미생물 균체를 포함한 발효조성물이 포함되어 있는 사료첨가제용 항생제를 제조하는 본 발명의 방법은 항생제 발효생산이 종료됨과 동시에 균체를 제거하지 않고 균체가 포함된 상태에서 발효물을 산성화 시키고 칼슘이온, 암모니움이온, 염산이온 및 황산이온 등으로 항생제를 염화시킨 다음 건조하는 개량된 방법이다. 종래와 같은 공정은 첫째, 항생제를 발효생산하고 둘째, 발효가 종료된 발효액을 산성화시켜 균체를 포함한 단백질 및 유기물을 변성시켜 침전, 여과시켜 버리고 셋째, 여과된 여액을 중성 pH로 조절한 다음 목적하는 항생제를 안정된 형태나 칼슘이온, 암모니움이온, 염산이온, 황산이온 등을 항생제에 결합시켜 결정화를 유도시킨 후 넷째, 다량의 수분을 함유한 결정 항생제를 건조, 분쇄하는 복잡한 공정이다. 이와같은 공정에 의해 발생되는 균체 슬러지 및 폐수로 인하여 환경오염이 발생되는 문제점을 지니고 있는 반면에 본 발명은 이를 개선한 것으로 환경폐기물이 전혀 발생되지 않는 특징이 있으면서 미생물 균체를 포함한 발효조성물이 제품내에 함유되어 있는 큰 장점이 있다. 본 발명을 좀 더 구체적으로 설명하자면, 즉 동결건조 또는 냉동 보관되어 있던 항생제 생산균주를 한천배지에서 활성화 시키는 배양을 실시하여 항생제를 생산하는 균주가 충분히 성장하도록 한 후 액체배지가 들어있는 플라스크에 접종하여 배양한 다음 심부배양을 실시한다. 심부배양의 탄소원으로는 포도당(glucose), 당밀(molasses), 슈크로스(sucrose) 또는 전분(starch)을 사용하고, 유기 질소원으로 대두분, 글루텐, 씨에스엘(corn steep liquor) 또는 땅콩분 등을 사용한다.

무기염으로 인산칼슘, 황산마그네슘, 인, 염화나트륨 등을 사용하고, 배양액의 pH 조절과 생산된 항생제가 생산균주의 생육을 억제하는 것을 방지하기 위하여 이온과 항생제가 결합하여 비이성계를 형성하도록 하기 위하여 탄산칼슘, 수산화나트륨, 암모니아수 등을 넣는다. 또한 거품의 방지와 탄소원의 공급으로 식물성 오일인 땅콩유, 미강유, 콩기름 및 유채기름 등이 사용되며 필요시 거품발생을 방지하기 위하여 폴리프로필렌 글리콜(polypropyrene glycol)과 실리콘 계열의 오일을 사용한다.

배양이 종료된 후 항생제제를 직접 제조하기 위해서는 다음과 같은 방법을 사용한다. 발효 종료액의 pH는 황산이나 염산을 이용하여 1.2 내지 2.5, 바람직하게는 1.8로 유지시킨 후 1 내지 5시간, 바람직하게는 2시간 동안 실온에서 교반한다. 여기에 탄산칼슘을 투입하여 pH가 약산성 부근이 되도록하고 소량의 수산화나트륨과 세틸트리메틸암모니움을 넣어 pH를 상승시킴으로 항생제를 결정화 시킨다. 발효액 상태에서 결정화는 0.3 내지 3시간 동안 실온에서 연속적인 교반으로 실시한다. 발효액내 항생제의 염화(salting)되어 결정화가 종료된 후 미생물 균체가 포함된 발효액을 연속식 분사건조기로 건조함으로서 사료첨가용 항생제제가 제조된다. 상기와 같은 제조방법으로 제조된 본 발명의 항생제 조성물온 항생제가 10~30% 정도 존재하며 상기에서 언급한 바와 같은 심부배양의 탄소원, 무기염 등 항생제 발효조성물이 함유되어 있어 이를 분석해 보면 동물에게 유익한 조단백질이 15 내지 30%, 탄수화물이 25 내지 35%, 회분이 5 내지 10% 가량 존재하며 미량의 각종 비타민, 미네랄, 아미노산, 미지성장인자(unknowm growth factor) 등의 영양성분이 포함되는 특징이 있다. 또한 동물용 사료첨가제의 제조방법에 있어 여러단계의 공정을 거치지 아니하고, 동시에 각종 환경에 악 영향을 주는 폐기물의 발생을 근원적으로 방지할 수 있는 특징이 있다. 더 나아가 이와같은 방법의 제조방법은 항생제 정제과정에서 발생되는 항생제의 손실이 발생되지 않은 매우 효율적인 회수방법인 동시에 목적한 항생제 뿐만 아니라 동물에게 유익한 영양성분인 균체를 포함한 발효조성물을 동시에 공급할 수 있는 경제적이고, 실용성이 뛰어난 특징을 갖고 있다.

이하 본 발명을 하기 실시예에 의거하여 보다 구체적으로 설명하지만, 본 발명의 범위가 이에 한정되는 것은 아니다.

[실시예 1]

[클로로테트라사이클린 발효]

클로로테트라사이클린 발효균주로 스트렙토마이세스 아우레오파이센스(Streptomyces aureofaciens ATCC 10762)를 2.0% 슈크로스, 0.5% 씨에스 분말(corn steep powder), 0.03% 황산마그네슘, 2.0% 제일인산칼륨, 0.2% 인산암모니윰, 2.0% 한천으로 조제된 사면배지에 현탁포자를 골고루 접종하여 28℃에서 10일간 배양하였다. 사면배지에서 배양된 스트렙토마이세스 아우레오파시엔스균을 3.0%슈크로즈, 2.4% 씨에스엘, 0.5% 탄산칼슘, 0.2% 황산암모늄이 함유된 액체배지 ㎖당 10⁴가량의 포자를 접종하여 28℃에서 200rpm의 교반속도로 24시간 동안 배양하고 동일한 배지조성을 갖은 액체배지에 1차 배양된 균량을 5%정도 되도록 접종하였다. 2차 심부배양은 26℃에서 교반속도 250rpm, 통기량 0.6vvm으로 36시간 동안 배양하고 2.5% 전분, 2.5% 씨에브엘, 2.0% 슈크로즈, 1.5% 옥수수분, 0.8% 카제인 가수분해물, 0.3% 탄산칼슘, 0.2% 황산암모늄, 0.01% 황산구리, 0.008% 황산망간 및 3.0% 식물성 오일로 조성된 본 배지에 2차 배양된 균량을 10% 가량 접종하였다. 본 배양은 교반속도 250rpm, 통기량 0.8vvm, 온도 26 내지 28℃, pH 6.0 내지 7.5로 50시간 동안 발효를 진행하고 난 후 pH를 5.8 내지 6.0으로 변화를 주고 발효액의 2ppm에 해당하는 벤질티오시아네이트(benzylthiocyanate)을 공급하여 클로로테트라사이클린 생산이 촉진되도록하며 24시간마다 2.0% 옥수수분, 0.5% 슈크로즈, 1.0% 대두분, 0.05% 탄산칼슘을 5회 공급하여 목적하는 클로로테트라사이클린을 생산하였다.

[실시예 2]

[미생물 균제가 포함된 클로로테트라사이클린 칼슘염 항생제제의 제조]

스트렙토마이세스 아우레오파시엔스 ATCC 10762에 의해 발효가 종료된 발효액의 pH는 7.15이었다. 균체가 함유된 발효액 3ℓ를 교반기가 부착된 용기에 넣고 실온에서 연속적으로 교반하면서 다음과 같은 시험을 실시하였다. 324g의 황산을 3시간 동안 천천히 넣어 pH를 1.72로 조절하였다. 여기에 96g 의 탄산칼슘을 이산화탄소가 급격히 발생되는 것을 방지하면서 천천히 넣어 완전히 용해시켜 pH가 5.8이 되도록 한 다음 수산화나트륨 용액을 천천히 넣으면서 pH가 7.8이 되도록 하고 클로로테트라사이클린 칼슘염의 안정화를 증진시키기 위하여 1.8g의 소디움메타비설피트(sodium meta B sulfite)를 넣어 충분히 교반하여 완전히 녹인 후 분사건조기(Spray dryer)을 이용하여 액량이 분사되는 노즐을 통하여 연속적으로 분사 건조한 결과 미생물 균체가 포함된 클로로테트라사이클린 칼슘염이 제조되었다.

[실시예 3]

[옥시테트라사이클린 발효]

옥시테트라사이클린 발효균주로 스트렙토마이세스 리모수스(Streptomyces rimosus ATCC 10970)를 1.0% 대두분, 1.0% 셀레로즈, 0.5% 염화나트륨, 0.05% 효모추출물, 0.03% 호아산마그네슘(pH 7.0)으로 조제된 액체배지 ㎖당 10⁵가량의 포자를 접종하여 30℃에서 200rpm의 교반속도로 36시간 동안 배양하고, 1.5% 대두분, 0.7% 옥수수분, 0.5% 탄산칼슘, 0.4% 질산나트륨, 0.2% 카제인 가수분해물(pH 7.0)의 배지 조성을 갖은 액체배지에 1차 심부배양된 균량을 5% 정도되도록 접종하였다. 2차 심부배양은 30℃에서 교반속도 250rpm, 통기량 0.8vvm으로 24시간 동안 2차 심부배양하고 본 발효는 3.0% 대두분, 0.5% 옥수수분, 0.5% 탄산칼슘, 0.4% 식물성오일, 0.3% 질산나트륨, 0.2% 황산암모늄, 0.01% 황산구리, 0.008% 황산망간(pH 7.0)으로 조성된 본 발효배지에 2차 심부배양된 균량을 10% 가량 접종하였다. 본 배양은 교반속도 250rpm, 통기량 0.8vvm, 온도 30℃, pH 7.5로 50시간 동안 발효를 진행하고 난 후 24시간마다 2.0% 옥수수분, 0.1% 황산암모늄, 0.1% 질산나트륨, 0.5% 슈크로즈, 1.0% 대두분, 0.05% 탄산칼슘을 3회 공급하여 목적하는 옥시테트라사이클린을 생산하였다.

[실시예 4]

[미생물 균체가 포함된 옥시테트라사이클린 4급 암모니움염 항생제제의 제조]

스트렙토마이세스 리모수스 ATCC 10970에 의해 발효가 종료된 배양액의 pH는 7.56이었다. 균체가 함유된 배양액 3ℓ를 교반기가 부착된 용기에 넣고 실온에서 연속적으로 교반하면서 다음과 같은 시험을 실시하였다. 90분 동안 360g의 황산을 천천히 투입하여 발효액의 pH를 1.8로 조절하였다. 여기에 48g의 탄산칼슘을 천천히 첨가하여 이산화탄소가 급격히 발생되는 것을 방지하고 발효액의 pH를 5.4로 한 후 계속 교반하면서 수산화나트륨 용액으로 발효액의 pH가 9.3이 되도록 하였다. pH가 안정화 된 후 10g의 세틸트리메틸암모니움염을 넣고 2시간 동안 추가로 충분히 교반하여 완전히 녹인 후 분사건조기(Spray dryer)을 이용하여 액량이 분사되는 노즐을 통하여 연속적으로 분사 건조한 결과 미생물 균체가 포함된 옥시테트라사이클린 4급 암모니움염이 제조되었다.

[실시예 5]

[클로로테트라사이클린 분석]

미생물 균체가 함유된 클로로테트라사이클린 항생제의 분석은 다음과 같이 실시하였다. 상기 실시예 2의 방법으로 제조한 시료 2g을 정확히 달아 250㎖ 용량플라스크에 취하고 100㎖의 산성 메탄놀을 넣어 수분간 흔들어 준 뒤 10분간 25㎑ 주파수가 발생되는 초음파 발생기에서 항생제를 추출한 다음 최종용량을 맞춘다. 항생제를 추출한 산성 메탄놀 용액 50㎖을 위하여 3,000rpm에서 10분간 원심분리하여 맑은 상충액 5㎖를 50㎖ 용량플라스크에 취하고 분석할 수 있는 농도로 희석하여 고속액체크로마토그라피로 분석하였다. 분석은 노바팩 씨 18(Novapak C 18, 30cm × 3.9mm) 컬럼을 사용하였고, 이동상은 메탄놀, 아세톤니트릴, 0.01M옥살산이 1:1.5:3.5로 혼합한 후 염산으로 pH를 2.0으로 조정하여 사용하였다. 유속은 분당 1.0㎖이었고 분석 파장은 360nm이었다. 이와같은 방법으로 상기 실시예 2의 방법으로 제조한 항생제를 분석한 결과 클로로테트라사이클린으로 12.5% 이었다.

[실시예 6]

[옥시테트라사이클린 분석]

미생물 균체가 함유된 옥시테트라사이클린 항생제의 분석은 다음과 같이 실시하였다. 상기 실시예 4의 방법으로 제조한 시료 1g을 정확히 달아 100㎖ 용량플라스크에 취하고 80㎖의 산성 메탄놀을 넣어 수분간 흔들어 준 뒤 10분간 25㎑ 주파수가 발생되는 초음파 발생기에서 항생제를 추출한 다음 최종용량을 맞춘다. 항생제를 추출한 산성 메탄놀 용액 50㎖을 위하여 3,000rpm에서 10분간 원심분리하여 맑은 상충액 5㎖를 50㎖ 용량플라스크에 취하고 분석할 수 있는 농도로 희석하여 고속액체크로마토그라피로 분석하였다. 분석은 마이크로본다팩 씨 18(μBondapack C 18, 30cm × 4.0mm) 컬럼을 사용하였고, 이동상은 아세톤니트릴, 0.01M 인산나트륨 완충용액이 30:70으로 혼합된 용액을 사용하였다. 유속은 분당 1.0㎖이었고 분석 파장은 280nm이었다. 이와같은 방법으로 상기 실시예 4의 방법으로 제조한 항생제를 분석한 결과 옥시테트라사이클린으로 21.4% 이었다.

[실시예 7]

[항생제제의 조단백질 분석]

본 발명에서 개발된 제조방법에 따라 제조된 항생제제의 조단백질의 분석은 다음과 같이 실시하였다. 시료 2g을 정확히 달아서 키달(kjeldal) 플라스크에 취한 후 1g의 분해촉매(0.1g 황산구리와 0.9g의 황산칼륨 혼합물)와 7㎖의 진한 황산 그리고 1㎖의 과산화수소 용액을 차례로 가하였다. 처음 5분간은 약한 불로 서서히 가열하고, 그 다음부터는 액이 투명한 푸른색을 띠게 될 때까지 1 내지 2시간 동안 세게 가열하였다. 가열 후 냉각시킨 분해액에 20ℓ의 물을 조심스럽게 가한 것을 키달장치의 깔대기를 통해 증류관 속에 넣고 트랩을 장치한 수증기 발생기에 연결하였다. 삼각플라스크에는 3방울의 혼합지시약(브로모클레졸블루와 메틸레드를 95%의 에탄올용액에 녹인 0.1% 용액의 혼합)을 탄 붕산용액(1g의 붕산을 25㎖의 끊는물에 녹인 것) 15㎖을 넣었다. 깔대기를 통해 40%의 수산화나트륨 30㎖을 가한 후 10㎖의 물로 씻어 내고, 재빨리 깔대기의 핀치콕을 잠그고 수증기를 보내어 암모니아를 증류한다. 이때 냉각기 끝이 붕산용액속에 잠기도록 주의하였다. 100㎖의 증류액을 받은 다음에 냉각기 끝이 플라스크의 액면위에 오게하여 수 분간 증류를 계속하고, 마지막으로 냉각기 끝을 소량의 물로 씻어 내었다. 증류액이 분홍색을 띠기 시작할 때까지 0.01N 염산용액으로 적정하였다(그 정적값 x ㎖). 한편, 시료 대신 물을 사용하여 공 시험을 한 적정값(y ㎖)을 측정하여 t=x-y 값을 구하였다.

0.01N 염산 1㎖ = 14/100mg N

단백질 시료용액 1㎖ = 14/100 × t mg의 N, 또 1mg N = 6.25 mg 단백질, 따라서 1㎖의 시료용액 속의 총 단백질량 = 14/100 × t × 6.25 = 6.25 × 14/100 × t mg

이와같은 방법으로 미생물 균체를 포함한 항생제제내의 조단백질량을 분석한 결과 표 1과 같은 결과를 얻었다.

Claims

클로로테트라사이클린 또는 옥시테트라사이클린 생산균주를 배양한 발효액을 균체가 포함된 상태에서 산성화시킨 후, 금속이온 또는 암모늄이온으로 클로로테트라사이클린 또는 옥시테트라사이클린을 염화(salting)시킨 다음, 건조시켜 제조됨을 특징으로 하는 염화된 클로로테트라사이클린 또는 염화된 옥시테트라사이클린, 균체, 및 발효액건조물이 포함된 사료용 항생제 조성물.
제1항에 있어서, 발효액건조물중 조단백질이 15∼30%, 탄수화물이 25~35%, 회분이 5∼10% 임을 특징으로 하는 염화된 클로로테트라사이클린 또는 염화된 옥시테트라사이클린, 균체, 및 발효액건조물이 포함된 사료용 항생제 조성물.
제1항에 있어서, 염화된 클로로테트라사이클린 또는 염화된 옥시테트라사이클린이 10∼30% 임을 특징으로 하는 염화된 클로로테트라사이클린 또는 염화된 옥시테트라사이클린, 균체, 및 발효액건조물이 포함된 사료용 항생제 조성물.
제1항에 있어서, 염화된 클로로테크라사이클린이 클로로테트라사이클린 칼슘염인 것을 특징으로 하는 염화된 클로로테트라사이클린 또는 염화된 옥시테트라사이클린, 균체, 및 발효액건조물이 포함된 사료용 항생제 조성물.
제1항에 있어서, 염화된 옥시테트라사이클린이 옥시테트라사이클린 4급 암모늄염인 것을 특징으로 하는 염화된 클로로테트라사이클린 또는 염화된 옥시테트라사이클린, 균체, 및 발효액건조물이 포함된 사료용 항생제 조성물.
클로로테트라사이클린 또는 옥시테트라사이클린 생산균주를 배양한 발효액을 균체가 포함된 상태에서 산성화시킨 후, 금속이온 또는 암모늄이온으로 클로로테트라사이클린 또는 옥시테트라사이클린을 염화(salting)한 다음, 건조시키는 것을 특징으로 하는 염화된 클로로테트라사이클린 또는 염화된 옥시테트라사이클린, 균체, 및 발효액건조물이 포함된 사료용 항생제 조성물의 제조방법.