KR0135958B1 - Feed and egg adding selenium-yeast - Google Patents

Feed and egg adding selenium-yeast

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KR0135958B1
KR0135958B1 KR1019930017064A KR930017064A KR0135958B1 KR 0135958 B1 KR0135958 B1 KR 0135958B1 KR 1019930017064 A KR1019930017064 A KR 1019930017064A KR 930017064 A KR930017064 A KR 930017064A KR 0135958 B1 KR0135958 B1 KR 0135958B1
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Abstract

본 발명은 사료 1kg당 셀레늄-효모를 셀레늄으로서 0.1 내지 10mg 함유하도록 혼합 조성한 산란계용 사료 조성물 및 이를 산란계에 급여하여 생산된 유기 셀레늄이 다량 함유된 계란에 관한 것이다. 본발명의 사료조정물은 또한 사료 kg당 비타민 E 50 내지 200mg, 바람직하게는 100내지 150mg을 함유함으로써 셀레늄과 비타민 E 의 상승적 작용을 기대할 수 있다.The present invention relates to a feed composition for laying hens having a mixed composition containing 0.1 to 10 mg of selenium-yeast per 1 kg of feed, and eggs containing a large amount of organic selenium produced by feeding them to laying hens. The feed adjuster of the present invention can also be expected to contain synergistic action of selenium and vitamin E by containing 50 to 200 mg, preferably 100 to 150 mg, of vitamin E per kg of feed.

Description

셀레늄-효모 복합체를 첨가한 산란계용 사료조성물 및 셀레늄-함유 계란Feed Composition and Selenium-Containing Eggs for Laying Hens with Selenium-Yeast Complex

본 발명은 셀레늄이 함유된 산란계용 사료조성물 및 그 사료조성물을 급여하여 생산되는 셀레늄-함유 계란에 관한 것이다. 특히, 본 발명은 효모를 이용하여 발효방법에 의해 인체독성이 없고 흡수율이 높은 유기 셀레늄을 생산하여 산란계에 급여함으로서 생산되는 셀레늄-함유 계란에 관한 것이다. 종래에 계란은 단순히 영양을 공급하기 위한 식품으로만 사용되었으나, 최근에는 원하는 영양소나 원소 또는 물질을 산란계용 사료에 혼합조성하므로서 그 영양소나 원소가 다량함유된 계란을 생산하고, 결국 목적하는 성분을 계란을 통하여 인체가 섭취하도록 하기 위한 노력이 계속되고 있다. 그 대표적인 예로 해초류나 등푸른 생선을 주원료로 한 사료를 산란계에 급여시킴으로서 콜레스테롤 함량이 적은 계란를 생산하거나 요오드 성분이 다량 함유된 계란을 얻었으며 기타 필요에 따라 소위 오메가 3 지방산 함량이 높은 계란이나 비타민란, 인삼란 , 해초란 , 유정란 등이 이미 시판되고있다. 최근 고도의 산업화로 공장폐수 등에 의한 수질오염이나 매연으로 인한 공기 오염 등 환경오염은 커다란 사회 문제로 대두되고 있다. 이러한 환경오염은 공업화의 과정에서 어느 정도 감수하지 않을수는 없으나, 이에 따라 많은 근로자들이 작업 환경에서 발생하는 중금속에 의한 중독으로 시달리고 있고 또한 이러한 중독 위험에 지속적으로 노출된 상태에 있다.The present invention relates to a feed composition for laying hens containing selenium and selenium-containing eggs produced by feeding the feed composition. In particular, the present invention relates to a selenium-containing egg produced by fermentation method by producing organic selenium having no human toxicity and high absorption rate by fermentation method using yeast. In the past, eggs were used only as food for nourishment, but in recent years, by mixing and preparing desired nutrients, elements or substances in laying hens' feed, they produce eggs containing a large amount of nutrients or elements, and finally, provide the desired ingredients. Efforts continue to be made by the human body through eggs. For example, feeds based on seaweeds or blue fish are fed to laying hens to produce eggs with low cholesterol or iodine-rich eggs, and other eggs, vitamins, and ginseng eggs with high omega-3 fatty acids. , Seaweed eggs and fertilized eggs are already on the market. Recently, due to high industrialization, environmental pollution such as water pollution caused by factory wastewater, and air pollution caused by soot has become a big social problem. Such environmental pollution is inevitable to some extent in the process of industrialization, but accordingly, many workers suffer from poisoning by heavy metals occurring in the working environment and are continuously exposed to the risk of poisoning.

본 발명자들은 환경오염으로 인한 중금속 해독이 일시적인 투약에 의해서만은 해결될 수없고, 해독성분이 함유된 식품을 지속적으로 섭취함으로써만 지속적으로 노출되는 환경오염으로부터 인체를 보호할수 있을것 이라는데 착안하여 본 발명을 구성하게 되었다.The present inventors realized that heavy metal detoxification due to environmental pollution could not be solved only by temporary dosing, and that the human body could be protected from environmental pollution continuously exposed only by continuously ingesting food containing detoxifying ingredients. It was made up.

셀레늄은 주기율표상 VI족에 속하는 원소로서 맥주효모, 돼지나 소의 콩팥, 버터, 소맥배아, 굴, 새우, 우유, 현미나 마늘 등에 상당량 함유되어 있으며 사람이나 동물체내에서는 셀레노아미노산으로도 존재하고, 세포막의 손상을 야기하는 과산화수소를 파괴하는 작용을 가진 글루타치온퍼옥시다제를 활성화함으로써 세포막의 과산화적 손상을 방지하여 종양성 질환을 예방하는 작용을 가진 것으로 알려져 있다. 많은 연구에서 셀레늄은 종양질환을 억제하는 효과가 있는 것으로 발표되고 있는데 이는 많은 암환자에서 혈청내 셀레늄 농도가 비정상적으로 낮게 나타나는 것으로도 확인할 수 있다. 또한 납중독에 의한 빈현현상은 납이 적혈구의 용혈작용과 헤모글로빈 합성에 관여하는 S-아미노레불린산데하이드라제(ALAD) 효소의 활성을 저해하여 아미노레불린산의 뇨배설을 증가시킴으로써 조혈작용을 저해할 뿐 아니라, 납이 ALAD의 SH기를 불활성화시켜 조혈기능이 악화됨으로써 발생하는 것으로 알려져 있다. 이러한 납중독은 생체내 항산화제로 알려진 셀레늄에 의해 해독될 수 있다는 보고가 있는데, 이는 납에 의해 활성이 약화된 셀레늄-의존성 항산화계 효소인 글루타치온퍼옥시다제가 셀레늄 보충으로 그 활성이 현저하게 증가되기 때문이다. 이는 흰쥐의 납중독시에 식이내 셀레늄을 0.5ppm의 농도로 첨가하면 비첨가군에 비하여 간장조직의 과산화적 손상이 감소되는 것으로부터 입증되고 있다. 셀레늄의 이러한 납중독 해독작용은 ALAD의 SH기가 Se 로 치환되므로써 납에 의한 SH기의 불활성화가 방지되기 때문인 것으로 설명되고 있다. 기타 유사한 기전에 의해 셀레늄은 납 이외에도 카드뮴, 수은 등의 중금속 해독작용을 나타내는 것으로 보고되어 있다. 이러한 셀레늄의 작용효과를 요약하면 다음과 같다.Selenium is an element belonging to group VI of the periodic table and is contained in beer yeast, pig or beef kidney, butter, wheat germ, oyster, shrimp, milk, brown rice, garlic, etc. By activating glutathione peroxidase, which has a function of destroying hydrogen peroxide, which causes damage to the cell membrane, it is known to have a function of preventing peroxidative damage of the cell membrane to prevent tumorous diseases. In many studies, selenium has been shown to have an inhibitory effect on tumor disease, which can be seen in many cancer patients with abnormally low levels of serum selenium. In addition, the phenomena caused by lead poisoning lead to hematopoietic action by increasing the urinary excretion of aminolevulinic acid by inhibiting the activity of S-aminolevulinate dehydrase (ALAD) enzyme, which is involved in hemolysis of hemoglobin and hemoglobin synthesis. In addition to inhibiting, lead is known to be caused by inactivation of the SH phase of ALAD, resulting in deterioration of hematopoietic function. It has been reported that lead poisoning can be detoxified by selenium, which is known as an antioxidant in vivo, because glutathione peroxidase, a selenium-dependent antioxidant enzyme whose activity is weakened by lead, is significantly increased by selenium supplementation. to be. This was proved by adding 0.5 ppm of dietary selenium to lead poisoning in rats, which reduced the peroxidative damage of hepatic tissues compared to the non-added group. This lead poisoning detoxification action of selenium is explained because the inactivation of SH group by lead is prevented by replacing SH group of ALAD with Se. Other similar mechanisms have reported that selenium exhibits heavy metal detoxification effects such as cadmium and mercury in addition to lead. The effect of selenium is summarized as follows.

0 셀레늄의 황산화력은 비타민 E의 1970배에 달하며 비타민 E와 셀레늄을 병용하면 상승효과가 나타난다.Sulfate of selenium is 1970 times more than vitamin E. The combination of vitamin E and selenium is synergistic.

0 비듬과 건선의 치료효과를 나타내며 산소의 이용율을 증가시켜 심장과 폐기능을 높여준다.0 It is a treatment effect of dandruff and psoriasis and increases the utilization of oxygen to improve heart and lung function.

0 비타민 C 및 E와 같이 불포화 지방산의 산화를 억제하여 과산화지질의 생성을 억제할 뿐 아니라 과산화지질과 단백질의 결합물인 노페물질을 분해한다.0 By inhibiting the oxidation of unsaturated fatty acids, such as vitamins C and E, not only inhibits the production of lipid peroxide, but also decomposes the nope substance, which is a combination of lipid peroxide and protein.

0 수은, 카드뮴, 납 등의 중금속과 결합하여 이들을 불활성화시키고 간 세포의 괴사를 방지하며 간경화증을 예방한다.It binds to heavy metals such as mercury, cadmium, and lead to inactivate them, prevents necrosis of liver cells and prevents cirrhosis of the liver.

0 면역기능을 향상시키고 상당량(약 25 내지 40%)이 고환, 정랑, 전립선 등의 성기관에 집중되어 성적기능을 향상시킨다.0 improve immune function and a significant amount (about 25 to 40%) is concentrated in the sex organs, such as testicles, spermatozoa, prostate, improve sexual function.

0 인체의 노화를 지연시키고 암을 예방하며 폐와 심장기능을 향상시킨다.0 Delays aging of the body, prevents cancer and improves lung and heart function.

0 백내장과 류마티스 관절염을 예방하며 비타민 E와 상승작용을 일으켜 근이 영양증(muscular dystrophy)을 치료한다.It prevents cataracts and rheumatoid arthritis and synergizes with vitamin E to treat muscle dystrophy.

그러나, 위와 같이 중금속 해독에 탁월한 효능을 나타내는 셀레늄이 일상적인 식사을 통해서는 충분량 공급되지 못하므로 중금속에 노출되는 노동자나 운전자 등은 의약품 형태로라도 셀레늄 제제를 지속적으로 복용해야 한다. 그러나, 이러한 계속적인 복용은 번거롭고 불편하며 또한 비경제적 이어서 효과적인 셀레늄의 공급이 이루어지기 어려운 실정이다. 본 발명자는 최근 산란계용 사료에 필요한 영양소나 원소의 공금원을 첨가함으로써 그런 성분이 다량 함유된 계란을 생산하는 경향이 높아지는 현상에 착안하여 본 발명의 세레늄난을 발명하게 되었다. 종전에도 셀레늄난이 보고된 바는 있다. 예를 들어 중국 특허 공개번호 CN85108031 호에는 무기 셀레늄 공급원으로서 나트륨 셀레나이트(NA2Se03)를 산란계용 사료에 첨가하여 셀레늄이 함유된 계란을 생산하는 방법이 기술되어 있다. 그러나 위와 같은 셀레늄난에는 상당한 문제점이 내포되어 있는데 첫째는, 무기셀레늄을 사용하는 경우 대부분의 셀레늄이 난황에 무기 셀레늄 형태로 존재하게 되고, 따라서 독성을 무시할 수 없으며 둘째로는, 그 흡수율이 저하되어 충분한 효과를 기대하기 어려웠다. 따라서, 본 발명자는 무기 셀레늄대신 효모발효 방법을 이용해서 셀레늄-효모복합체 형태의 유기 셀레늄을 제조하고 이렇게 제조된 유기 셀레늄을 산란계용 사료에 첨가하므로써 흡수율이 높고 인체 이용성이 좋은 안전한 셀레늄란을 생산하는데 성공하고 본 발명을 완성하였다. 따라서, 본 발명은 유기 셀레늄 공급원으로서 셀레늄-효모 복합체를 함유하는 산란계용 사료 조성물에 관한 것이다. 또한 본 발명은 이러한 산란계용 사료 조성물의 제조방법 및 이 사료 조성물을 급여하여 생산되는 셀레늄-함유 계란에 관한 것이다. 본 발명을 더욱 구체적으로 설명하면 무기 셀레늄, 예를 들면 나트륨셀레나이트를 맥주효모인 사카로마이세스 칼스버젠시스(Saccharomyces carlsbergensis) 또는 빵효모인 시카로마이세스 세레비지애(Sasccharomyces cerevisiae)가 접종된 발효조에 서서히 공급하여 발효시키고 배양이 종료된 후 효모균주를 분리하여 얻은 페이스트상의 효모균체를 세척 정제하여 얻는다. 수득된 효모균체중에 셀레늄은 결합된 상태로 존재하며, 수득된 셀레늄-효모를 동결건조시켜 산란계용 사료에 적당량 혼합하여 본 발명의 사료조성물을 수득할 수 있다. 본 발명의 셀레늄-효모 제조방법에 따르면, 발효과정에서 효모가 Na2SeO3를 흡수하여 함황 아미노산인 시스테인과 메티오닌의 합성시에 S 대신에 S와 성질이 비슷한 Se를 이용함으로써 다음 구조식과 같은 셀레늄-함유 아미노산을 합성하고, 이러한 아However, since selenium, which is excellent in detoxifying heavy metals as described above, cannot be supplied in sufficient amounts through daily meals, workers or drivers exposed to heavy metals should continuously take selenium preparations even in medicine. However, such continuous doses are cumbersome, inconvenient and uneconomical, making it difficult to provide an effective supply of selenium. The present inventors have recently invented the serenium nan of the present invention by focusing on the tendency of producing eggs containing a large amount of such components by adding a source of nutrients or elements necessary for laying hens. Selenium eggs have been reported before. For example, Chinese Patent Publication No. CN85108031 describes a method for producing selenium-containing eggs by adding sodium selenite (NA2Se03) as a source of inorganic selenium to feed for laying hens. However, there are significant problems in the selenium column as described above. First, when using inorganic selenium, most of the selenium is present in the form of inorganic selenium in egg yolk, so the toxicity cannot be ignored. Second, its absorption rate is lowered. It was difficult to expect enough effect. Therefore, the present inventors have successfully produced organic selenium in the form of selenium-yeast complex using a yeast fermentation method instead of inorganic selenium, and by adding the organic selenium thus prepared to the feed for laying hens, seleniumlan with high absorption rate and good human availability is successfully produced. This invention was completed. Accordingly, the present invention relates to a feed composition for laying hens containing a selenium-yeast complex as an organic selenium source. The present invention also relates to a method for producing a feed composition for laying hens and a selenium-containing egg produced by feeding the feed composition. More specifically, the present invention is inoculated with inorganic selenium, for example, sodium selenite, which is inoculated with saccharomyces carlsbergensis, which is a brewer's yeast, or Sasccharomyces cerevisiae, which is a baker's yeast. It is gradually fed into a fermenter and fermented. After the completion of the cultivation, the yeast cells obtained by separating the yeast strain are obtained by washing and purifying. Selenium is present in the yeast cells obtained in a combined state, and the obtained selenium-yeast is lyophilized to be mixed in a suitable amount for laying hens to obtain a feed composition of the present invention. According to the selenium-yeast manufacturing method of the present invention, in the fermentation process, the yeast absorbs Na2SeO3 and uses se similar to S in the synthesis of sulfur-containing amino acids cysteine and methionine. And synthesize these

미노산들이 모여 단백질을 구성하게 된다.Mino acids come together to form proteins.

이러한 셀레노아미노산들로 구성된 단백질을 함유하는 셀레늄-효모를 산란계가 섭취하면 단백질이 분해되어 셀레노아미노산들이 난 알부민의 합성에 이용되며, 이에 따라 셀레늄란을 수득할 수 있게 된다. 본 발명에서 이용되는 맥주효모인 사카로마이세스 칼스버젠시스는 종배양(seed culture)하여 수득한 효모균체 및 맥주제조 후에 남은 페효모중의 어느 것이나를 사용할 수 있다. 또한, 종배양으로부터 시작하여 셀레늄-효모 복합체를 제조할 경우에는 맥주효모 뿐 아니라 빵효모인 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces ceravi siae)를 사용할 수도 있다. 본 발명에 따르는 셀레늄 효모중에 함유된 셀레늄의 비율은 사용된 효모의 종류나 무기 셀레늄의 사용량 또는 효모의 발효조건 등에 따라 다양할 수 있으므로, 목적하는 셀레늄 함량에 알맞도록 무기 셀레늄의 사용량을 조정할 수 있다. 일반적으로 셀레늄의 1일 권장 복용량(RDA)은 성인의 경우 50 내지 200㎛이며 이 권장량의 10 배를 초과하는 경우 독성이 나타나는 것으로 보고되어 있다. 따라서, 한개의 계란에 50 내지 200㎛의 셀레늄이 함유되도록 하는 것이 바람직하다고 볼 수 있다. 본 발명자의 실험결과에 의하면 무기 셀레늄을 효모발효하여 유기 셀레늄 효모 복합체를 생산할 때 그 수율을 약 30 내지 40%정도로 나타났고 급여된 셀레늄이 계란으로 이전되는 평균 비율은 약 35 내지 40%로 나타났으므로, 만약 산란계가 셀레늄이 50 내지 200㎛ 함유된 계란을 1 일에 한개씩 생산하도록 하는 경우 산란계에 대한 1일 셀레늄 급여량은 100 내지 600㎛ 정도되어야 하며 셀레늄-효모 복합체중 셀레늄 함유비율이 평균 약 0.05%임을 고려해 볼때 위와 같은 셀레늄을 산란계에 급여시키기 위해서는 셀레늄-효모 복합체를 1일 0.2 내지 1.2 g은 복용할 수 있도록 사료에 혼합하여야 할 것이다. 따라서 산란계의 1일 사료 섭취량을 약 100g으로 추정할때 사료 1kg 당 본 발명의 셀레늄-효모 복합체를 약 2 내지 12g 혼합조성하는 것이 바람직하다. 그러나, 통상 사료 kg 당 0.1 내지 10 mg의 셀레늄이 함유되도록 셀레늄-효모 복합체의 사용량이나 그 복합체중의 셀레늄 함량을 조절하여 산란계용 사료로써 이용할 수 있다. 본 발명의 셀레늄-효모 복합체는 건조시켜 분말상태로 산란계 사료에 첨가하여 사용하며 셀레늄-효모 복합체중의 셀레늄 함량은 공지의 산소 소화장치를 이용하여 정량할 수 있다. 본 발명의 효모 발효법에 의해 제조된 셀레늄-효모 복합체는 무기셀레늄 사용량이나 발효조건 및 시간 등에 따라 그 셀레늄 함량에 차이가 있으나 보통 0.01 내지 0.1%의 셀레늄 함량을 나타내며 이와같은 셀레늄-효모 복합체를 첨가한 사료를 산란계에 급여시키는 경우 약 3.0㎍ 이상 최대 150㎍까지의 셀레늄을 함유한 계란을 얻을 수 있다.When a laying hen takes selenium-yeast containing a protein composed of these selenaminoamino acids, the protein is decomposed to be used for the synthesis of albumin containing selenaminoamino acids, thereby obtaining seleniumlan. Saccharomyces Carlsbergensis, the brewer's yeast used in the present invention, can be used either of yeast cells obtained by seed culture and the remaining yeast after beer production. In addition, when producing selenium-yeast complexes starting from the seed culture, Saccharomyces ceravi siae, which is not only brewer's yeast but also bread yeast, may be used. Since the ratio of selenium contained in the selenium yeast according to the present invention may vary depending on the type of yeast used, the amount of inorganic selenium or the fermentation conditions of the yeast, the amount of inorganic selenium can be adjusted to suit the desired selenium content. . In general, the recommended daily dose (RDA) of selenium is 50-200 μm for adults and reported to be toxic if it exceeds 10 times this recommended amount. Therefore, it can be seen that it is desirable to contain selenium of 50 to 200㎛ in one egg. According to the experimental results of the present inventors, when the organic selenium yeast complex was produced by fermenting inorganic selenium, the yield was about 30 to 40%, and the average ratio of the transferred selenium to the eggs was about 35 to 40%. Therefore, if the laying hens are to produce one egg containing 50 to 200 μm of selenium per day, the daily selenium feed for the laying hens should be about 100 to 600 μm, and the selenium content in the selenium-yeast complex averages about 0.05. Considering the percentages, in order to feed the selenium to the laying hens, the selenium-yeast complex should be mixed with the feed so that 0.2-1.2 g of selenium can be taken per day. Therefore, when estimating the daily feed intake of laying hens to about 100g, it is preferable to mix about 2 to 12g of the selenium-yeast complex of the present invention per kg of feed. However, the amount of selenium-yeast complex or the content of selenium in the complex can be adjusted so as to contain 0.1 to 10 mg of selenium per kg of feed, and it can be used as a feed for laying hens. The selenium-yeast complex of the present invention is dried and added to the laying hen feed in a powder state, and the selenium content in the selenium-yeast complex can be quantified using a known oxygen digester. The selenium-yeast complex produced by the yeast fermentation method of the present invention has a difference in selenium content depending on the amount of inorganic selenium, fermentation conditions, and time, but usually shows a selenium content of 0.01 to 0.1%, and such a selenium-yeast complex is added. When feed is given to laying hens, eggs containing selenium up to about 3.0 µg and up to 150 µg can be obtained.

본 발명에 따르는 셀레늄-효모복합체 함유 사료조성물에는 또한, 필요에 따라 셀레늄과 항산화력에서 상승작용이 있는 비타민 E를 첨가할 수 있다. 이 때, 비타민 E의 첨가량은 셀레늄-효모복합체 함유 사료조성물에 사료 조성물 1kg 당 50mg 내지 200mg[사료중에 0.005%(w/w) - 0.020%(w/w)의 농도로 존재], 바람직하게는 100mg 내 지 150mg [사료중에 0.010%(w/w) - 0.015%(w/w)의 농도로 존재]의 함량으로 첨가된다. 이 농도의 비타민을 첨가하여 제조된 사료조성물을 산란계에 급여하면 비타민 E가 3.0mg 에서 12mg까지 함유된 계란을 얻을 수 있다. 이러한 비타민 E 농도는 셀레늄 및 비타민 E를 첨가하지 않은 일반계란에서의 비타민 E 함량인 1.1mg 에 비해 약 3배 에서 12배 까지의 높은 농도이다. 이하 본 발명을 하기 실시예, 비교예 및 시험예에 의해 설명하지만, 이들에 의해 본 발명 범위가 제한되는 것은 아니다.The selenium-yeast complex-containing feed composition according to the present invention may also be added with vitamin E, which is synergistic in selenium and antioxidant power, if necessary. At this time, the amount of vitamin E added is 50 mg to 200 mg per kg of feed composition in the selenium-yeast complex-containing feed composition [concentration of 0.005% (w / w)-0.020% (w / w) in the feed], preferably 100 mg to 150 mg [0.010% (w / w)-0.015% (w / w) present in the feed) is added. Feed compositions prepared with the addition of vitamins to this level can be fed to laying hens to obtain eggs containing between 3.0 and 12 mg of vitamin E. This vitamin E concentration is about 3 to 12 times higher than the vitamin E content of 1.1 mg in eggs without added selenium and vitamin E. Hereinafter, the present invention will be described by the following examples, comparative examples and test examples, but the scope of the present invention is not limited thereto.

실시예1Example 1

셀레늄-효모 복합체의 제조Preparation of Selenium-Yeast Complex

13.2g의 NH4Cl, 1.7g 의 KH2PO4, 1.02g의 MgSO47H20, 1.11g의 KCl 및 27mg 의 티아민을 2.1ℓ의 물에 용해시키고 여기에 당밀 390g을 가한 후 멸균처리하여 최소배지로 사용한다. 이때, pH는 NH4OH를 사용하여 6.5로 조정하며, 공기의 주입량은 4ℓ/분으로, 멸균 필터를 통과시켜 공급한다. 이렇게 제조된 최소배지에 두산 기술원 보유 맥주효모인 사카로마이세스 칼스버젠시스(Saccharomyces carlsbergensis) 효모 105g을 접종 한 후 30℃에서 약 8시간동안 배양시킨다.13.2 g of NH4Cl, 1.7 g of KH2PO4, 1.02 g of MgSO47H20, 1.11 g of KCl, and 27 mg of thiamine are dissolved in 2.1 L of water, 390 g of molasses is added thereto, followed by sterilization to be used as a minimal medium. At this time, the pH is adjusted to 6.5 by using NH 4 OH, the injection amount of air is supplied by passing through a sterile filter 4 L / min. Thus inoculated 105g of yeast Saccharomyces carlsbergensis yeast beer bred in Doosan Institute of Technology, and then incubated at 30 ℃ for about 8 hours.

따로 NaSeO3 84mg, ZnSO4·H2O 1.8mg 및 당밀 480g 을 골고루 섞어, 배양중인 발효조에 펌프를 이용하여 연속적으로 약 18시간 동안 공급한다. 셀레늄 혼합물의 공급이 끝난 후 동일 조건하에서 약 2시간 정도 더 배양한 후 발효조의 운전을 중지하고 배양균체를 회수함으로써 발효를 중지시킨다. 배양이 끝난 효모 균주를 원심 분리기로 분리하여 페이스트 상태의 황갈색 셀레늄-효모 복합체를 약 200g 수득하였다. 수득된 셀레늄-효모 복합체중의 셀레늄 함량을 측정하기 위하여 공지의 산소 소화장치를 이용하여 정량한 결과 셀레늄은 전체의 약 0.02 %의 비율로 함유되어 있음을 확인하였다.Separately, 84 mg of NaSeO3, 1.8 mg of ZnSO 4 · H 2 O, and 480 g of molasses are mixed and fed to the fermenter in culture for about 18 hours continuously using a pump. After the feeding of the selenium mixture, the fermentation tank is stopped by incubating for about 2 hours under the same conditions and stopping the fermentation by recovering the cultured cells. The cultured yeast strains were separated by centrifugation to obtain about 200 g of a tan selenium-yeast complex in paste state. In order to measure the selenium content in the obtained selenium-yeast complex, as a result of quantification using a known oxygen digestion apparatus, it was confirmed that selenium was contained at a rate of about 0.02% of the total.

실시예 2Example 2

맥주효모대신 빵효모인 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae)이용하는 것을 제외하고는 실시예 1과 동일한 배지조성을 그대로 이용하여 셀레늄이 보다 고농도로 축척된 효모복합체를 제조하였다. 먼저, 종배양을 하기 위하여 효모 추출물 1 중량 %, 글루코즈 2중량%, 펩톤 1 중량%의 완전배지 200ml 에 순수배양한 사카로마이세스 세레비지에 효모 1 콜로니를 접종하여 30℃에서 24시간 동안 진탕배양한다.A yeast complex in which selenium was accumulated at a higher concentration was prepared using the same medium composition as in Example 1 except that Saccharomyces cerevisiae, which is bread yeast instead of beer yeast, was used. First, inoculated with yeast 1 colony in Saccharomyces cerevisiae pure cultured in 200ml of complete medium of 1% by weight of yeast extract, 2% by weight of glucose, 1% by weight of peptone for shaking, and shaking at 30 ° C. for 24 hours. Incubate.

배양이 끝난 종배양물을 실시예 1과 동일하게 2.1L 최소배지에 접종하고, 같은 조건으로 배양하나 셀레늄 농도는 실시예 1의 약 100배인 840mg 을 사용한다. 배양이 끝난 효모균주를 원심분리기로 분리하여 셀레늄-효모 복합체 페이스트 약 200g 을 수득하였다. 수득된 셀레늄-효모복합체중의 셀레늄 함량은 실시예 1의 약 10배인 0.2 중량%의 비율로 함유되어 있음을 알 수 있었다.Inoculated in the 2.1L minimum medium cultured seed culture in the same manner as in Example 1, and cultured under the same conditions but the selenium concentration is about 100 times of Example 1 using 840mg. The cultured yeast strain was separated by centrifugation to obtain about 200 g of selenium-yeast complex paste. The selenium content in the obtained selenium-yeast complex was found to be contained at a ratio of 0.2% by weight, which is about 10 times that of Example 1.

실시예 3Example 3

셀레늄-함유 계란의 제조Preparation of Selenium-Containing Eggs

실시에 1 및 2에서 제조된 셀레늄-효모 복합체( 1kg당 500mg의 셀레늄 함유) 5g, 12.5g, 50g, 125g 및 250g을 각각 25kg의 사료에 첨가하고 균일하게 혼합하여 사료 1kg당 각각 0.1mg, 0.25mg, 1mg, 2.5mg 및 5mg의 셀레늄이 함유된 사료를 제조하였다. 이와같이 제조된 사료 조성물을 각각 10마리씩으로 구성된 5군의 산란계에게 하루평균 약 110g 씩 투여하여 10일에 각 산란계군 당 평균 80개의 계란을 수거하였으며 그중 3일 간격으로 20개씩 총 60개를 무작위로 선택하여 난황과 난백을 분리시키고 동결건조한다음 난황과 난백을 각각 200mg씩 정확히 정량하여 4x4cm의 여과지에 싸서 산소 소화장치를 이용하여 셀레늄의 함량을 측정하였다. 동결건조된5 g, 12.5 g, 50 g, 125 g and 250 g of selenium-yeast complex (containing 500 mg of selenium per kg) prepared in Examples 1 and 2 were added to 25 kg of feed and mixed uniformly, respectively 0.1 mg, 0.25 per kg of feed. Feed containing mg, 1 mg, 2.5 mg and 5 mg of selenium was prepared. The feed composition thus prepared was administered to a group of five laying hens, each containing 10 eggs, at an average of about 110 grams per day, and on average, 80 eggs were collected from each laying group on the 10th day. After separating the yolk and egg white, and freeze-dried, 200mg of egg yolk and egg white were accurately quantified and wrapped in 4x4cm filter paper, and the selenium content was measured using an oxygen digester. Lyophilized

계란 1개당 평균 중량이 15.4g이고 이중 난백이 63%, 난황이 37%에 해당하는 것으로 계산하여 계란 1개중 난배과 난황에 함유된 총 셀레늄의 양을 계산하였다.The total weight of selenium contained in egg and egg yolk in one egg was calculated by calculating an average weight of 15.4 g per egg, egg white of 63%, and egg yolk of 37%.

본 발명의 셀레늄 함유 계란과 무기 셀레늄을 각각 사료에 혼합하여 생산된 계란의 차이를 비교하기 위하여 무기 셀레늄 공급원으로서 Na2SeO3 7mg을 25kg의 사료에 첨가하여 사료kg당 0.1mg의 셀레늄이 함유되도록 하여 10 마리의 산란게에 1일 110g씩 급여하고 위에서와 동일한 방법으로 난황과 난백내의 셀레늄 함량을 측정하였다.In order to compare the difference between the eggs produced by mixing the selenium-containing eggs and the inorganic selenium in the feed, respectively, 10 mg of Na2SeO3 was added to 25 kg of feed as an inorganic selenium source to contain 0.1 mg of selenium per kg of feed. Feeding 110g per day to spawning crab of and measured the selenium content in egg yolk and egg white in the same manner as above.

그 결과를 표로 나타내면 다음과 같다.The results are shown in the table as follows.

셀레늄 흡수 분포 비교표Selenium Absorption Distribution Comparison Table

상기 표로부터 알 수 있는 바와 같이 무기 셀레늄을 첨가한 사료를 먹인 산란계에서 생산된 계란의 경우는, 전체 셀레늄의 함량이 동일한 함량을 가진 본 발명의 사료를 투여하여 생산된 계란보다 높게 나타나지만 전체 셀레늄의 약 80%가 난황에 치우쳐 있으며, 본 발명의 유기 셀레늄의 경우는 이와 반대로 난백에 치우쳐 있음을 알 수 있다. 이와같은 결과는 래트셔 제이. 디(Latshaw J.D.)등의 결과와도 유사한 것으로, 이는 유기 셀레늄(특히 셀레늄-메티오닌)과 무기 셀레늄(SeO32-)의 흡수 대시상의 차이에서 기인한다고 보고 있다. 즉, 유리 셀레늄인 셀레늄메티오닌은 장내벽을 통과하는 기전이 메티오닌과 유사하며, 메티오닌 tRNA조차도 메티오닌과 세레노메티오닌을 구분하지 못하기 때문에 단백질내의 셀레늄 양은 메티오닌양과 직접 관계가 있으며, 따라서 메티오닌이 다량 함유되어 있는 난백에서의 셀레늄은 대부분이 세레노메티오닌이라고 생각할 수 있다. 한편, 셀레늄의 농도면에서 볼때, 일반의 셀레늄제품(주로 셀레늄 효모)에서는 하루 50mg 내지 200mg 을 권장하고 있는 바, 앞에서 언급한 셀레늄의 여러가지 효과를 보기 위해서는, 시료 IV 또는 V 농도가 적당하다고 생각되어지며, 필요에 따라서는 이보다 높은 농도의 셀레늄이 포함된 셀레늄란도 가능하리라고 본다.As can be seen from the table, in the case of eggs produced in laying hens fed with feed containing inorganic selenium, the total selenium content is higher than that of eggs produced by administration of the feed of the present invention having the same content, About 80% is biased to egg yolk, and in the case of the organic selenium of the present invention, it can be seen that the bias to the egg white. The result is rattler jay. Similar to the results of Latshaw J.D. et al., This is due to the difference in the absorption dash between organic selenium (particularly selenium-methionine) and inorganic selenium (SeO32-). In other words, selenium methionine, a free selenium, is similar to methionine through the intestinal wall, and even methionine tRNA does not distinguish between methionine and serenomethionine, so the amount of selenium in the protein is directly related to the amount of methionine. Most of the selenium in the egg white is considered to be serenomethionine. On the other hand, in view of the concentration of selenium, general selenium products (mainly selenium yeast) recommend 50 mg to 200 mg per day. In order to see the various effects of selenium mentioned above, it is considered that the sample IV or V concentration is appropriate. If necessary, selenium containing higher concentrations of selenium may be possible.

실시예 4Example 4

비타민E를 함유하는 셀레늄 -함유 계란Selenium-Containing Eggs with Vitamin E

실시예2에서 제조한 셀레늄 -함유 사료조성물에 셀레늄과 황산화력에서 상승작용이 있다고 알려진 비타민 E를 사료 1kg 당 110mg [사료중에 0.011%(w/w)농도로 존재]의 양으로 첨가하여 수득한 사료조성물을 하루에 110g 씩 산란계에게 투과하여 계란 1개(동결건조중량 15.4g당) 당 비타민 E가 6.1mg 함유된 계란을 수득하였다. 이러한 비타민E 농도는 셀레늄 및 비타민 E를 첨가하지 않은 일반계란 (1.1mg)에 비해 약 6배 높은 농도이다.The selenium-containing feed composition prepared in Example 2 was obtained by adding vitamin E, known to be synergistic in selenium and sulfuric acid power, in an amount of 110 mg [0.01% (w / w) in feed] in 1 kg of feed. The feed composition was permeated through laying hens 110g per day to obtain eggs containing 6.1 mg of vitamin E per egg (per 15.4 g of freeze-dried weight). This vitamin E concentration is about 6 times higher than normal eggs (1.1 mg) without selenium and vitamin E.

비교실험예Comparative Experiment

본 발명에 따라 제조한 셀레늄 함유 계란과 무기 셀레늄 첨가 사료를 급여하여 얻은 셀레늄 함유 계란내의 셀레늄 형태를 비교하기 위하여 상기 실험군에서 얻은 계란 과 실험군 VI에서 얻은 계란의 난황과 난백을 분리하여 3,3 - 디아미노벤지딘과의 반응을 조사하였다. 3,3 - 디아미노벤지딘은 HC1용액상에서 무기 셀레늄(SeO32-)과 반응하여 황색의 플라즈셀레놀을 생성하나 셀레노메티오닌이나 셀레노시스테인 같은 유기 셀레늄과는 발색 반응을 나타내지 않는 성질을 이용하여 계란 내의 함유된 셀레늄의 종류를 판별하는 방법이다. 이 비교실험 결과 난백에서는 무기 셀레늄이 전혀 검출되지 않았으나, 실험군V의 계란, 즉 본 발명 계란의 난황에서는 3.2㎍의 무기 셀레늄이 검출되었으며 실험군VI에서 얻은 계란의 난황중에는 10.7mg 의 무기 셀레늄이 확이되었다. 이와같은 실험결과로부터 무기 셀레늄 사료를 급여하여 얻은 계란의 난황에 있는 셀레늄은 전체 13.4㎎ 중 약 80%에 달하는 10.7㎍이 무기 셀레늄 상태로 존재하였으며 본 발명의 유기 셀레늄 사료를 급여시켜 얻은 계란의 난황에 포함된 전체 19.3㎍중 약 16%에 불과한 3.2㎍만이 무기형태로 포함되어 있음을 알 수 있다. 무기셀레늄이 독성이 높고 소화 흡수력이 낮아서 효율이 떨어진다는 점을 고려해볼때 본 발명의 유기 셀레늄 첨가사료를 급여시켜 얻은 계란의 품질이 휠씬 우수함을 확인할 수 있었다.In order to compare the selenium form in the selenium-containing eggs obtained by feeding the selenium-containing eggs and the inorganic selenium-containing feed prepared according to the present invention, the egg yolks and egg whites of the eggs obtained in the above experimental group and the experimental group VI were separated and separated. The reaction with diaminobenzidine was investigated. 3,3-diaminobenzidine reacts with inorganic selenium (SeO32-) in HC1 solution to form yellow plasmoselenol, but it does not develop color reaction with organic selenium such as selenomethionine or selenocysteine. It is a method of determining the kind of selenium contained in the resin. As a result of this comparison, no inorganic selenium was detected in egg white, but 3.2 μg of inorganic selenium was detected in egg of experimental group V, that is, egg of the present invention, and 10.7 mg of inorganic selenium was found in egg yolk of experimental group VI. It became. From the results of the experiment, selenium in egg yolk obtained by feeding inorganic selenium feed was present in inorganic selenium, which is about 80% of 13.4 mg of total 13.4 mg, and egg yolk obtained by feeding organic selenium feed of the present invention. It can be seen that only 3.2 μg, which is about 16% of the total 19.3 μg, is contained in the inorganic form. Considering that inorganic selenium has high toxicity and low digestive absorption ability, it was confirmed that the quality of the eggs obtained by feeding the organic selenium feed of the present invention was much better.

Claims (11)

셀레늄-효모 복합체를 첨가한 산란계용 사료 조성물.Feed composition for laying hens with added selenium-yeast complex. 제1항에 있어서, 사료 1kg 당 0.1 내지 10mg 의 셀레늄이 함유된 사료 조성물The feed composition of claim 1, wherein the feed composition contains 0.1 to 10 mg of selenium per kg of feed. 제 1 또는 2항에 있어서, 셀레늄-효모 복합체중의 셀레늄 함량이 0.01 내지 0.1%임을 특징으로 하는 사료 조성물Feed composition according to claim 1 or 2, characterized in that the selenium content in the selenium-yeast complex is 0.01 to 0.1%. 제 1항에 있어서, 추가로 비타민E가 첨가된 산란계용 사료 조성물.The feed composition for laying hens according to claim 1, wherein vitamin E is further added. 제 4항에 있어서, 비타민E가 사료 kg 당 50 내지 200 mg 의 양으로 첨가된 산란계용 사료조성물.5. The laying composition for laying hens according to claim 4, wherein the vitamin E is added in an amount of 50 to 200 mg per kg feed. 제 5항에 있어서, 비타민 E가 사료 kg당 100내지 150mg의 양으로 첨가된 산란계용 사료조성물.6. The feed composition for laying hens according to claim 5, wherein the vitamin E is added in an amount of 100 to 150 mg per kg feed. 무기 셀레늄을 사카로마이세스 칼스버젠시스(Saccharomyces carlsbergensis) 또는 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae)와 함께 배지에서 발효시킴을 특징으로 하는 셀레늄-효모 복합체의 제조방법.A method of producing a selenium-yeast complex characterized by fermenting an inorganic selenium in a medium with Saccharomyces carlsbergensis or Saccharomyces cerevisiae. 제 1항 내지 6항중의 어느 하나에 따르는 사료조성물을 산란계에게 급여하여 생산된 셀레늄 함유란.A selenium-containing egg produced by feeding a laying composition according to any one of claims 1 to 6 to a laying hen. 제 8항에 있어서, 계란 1개당 셀레늄 약 3.0 내지 1개당 150㎎ 을 함유하는 계란.9. The egg of claim 8, containing from about 3.0 to about 150 mg of selenium per egg. 제 9항에 있어서 난황보다 난백에서의 셀레늄 할량이 더 높은 계란10. The egg of claim 9 having a higher selenium yield in egg white than egg yolk 제 8항에 있어서, 계란 1개당 셀레늄 약 3.0 내지 150㎎및 비타민 E약 3.0 내지 12mg을 함유하는 계란.9. The egg of claim 8, which contains about 3.0 to 150 mg of selenium and about 3.0 to 12 mg of vitamin E per egg.
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