KR0124414B1 - 생물학적 활성을 가진 분자의 수송에 유용한 입자성 담체 및 이의 제조방법 - Google Patents

생물학적 활성을 가진 분자의 수송에 유용한 입자성 담체 및 이의 제조방법

Info

Publication number
KR0124414B1
KR0124414B1 KR1019900700145A KR900700145A KR0124414B1 KR 0124414 B1 KR0124414 B1 KR 0124414B1 KR 1019900700145 A KR1019900700145 A KR 1019900700145A KR 900700145 A KR900700145 A KR 900700145A KR 0124414 B1 KR0124414 B1 KR 0124414B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
particulate carrier
core
carrier
layer
bvsm
Prior art date
Application number
KR1019900700145A
Other languages
English (en)
Other versions
KR900701256A (ko
Inventor
사마인 다니엘
벡 쟌루이스
코엔 에디스
뉴엔 프레드릭
페이로 마리안느
Original Assignee
에무르 로리아
바디오벡터 테라퓨틱스 소시에떼 아노님
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 에무르 로리아, 바디오벡터 테라퓨틱스 소시에떼 아노님 filed Critical 에무르 로리아
Publication of KR900701256A publication Critical patent/KR900701256A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR0124414B1 publication Critical patent/KR0124414B1/ko

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
    • A61K9/5107—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/5123—Organic compounds, e.g. fats, sugars
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127—Liposomes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
    • A61K9/5107—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/513—Organic macromolecular compounds; Dendrimers
    • A61K9/5161—Polysaccharides, e.g. alginate, chitosan, cellulose derivatives; Cyclodextrin
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S977/00—Nanotechnology
    • Y10S977/70—Nanostructure
    • Y10S977/778—Nanostructure within specified host or matrix material, e.g. nanocomposite films
    • Y10S977/783—Organic host/matrix, e.g. lipid
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S977/00—Nanotechnology
    • Y10S977/70—Nanostructure
    • Y10S977/788—Of specified organic or carbon-based composition
    • Y10S977/797—Lipid particle
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S977/00—Nanotechnology
    • Y10S977/70—Nanostructure
    • Y10S977/788—Of specified organic or carbon-based composition
    • Y10S977/802—Virus-based particle
    • Y10S977/803—Containing biological material in its interior
    • Y10S977/805—Containing drug
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S977/00—Nanotechnology
    • Y10S977/70—Nanostructure
    • Y10S977/788—Of specified organic or carbon-based composition
    • Y10S977/802—Virus-based particle
    • Y10S977/806—Virus-based particle with exterior chemical attachment
    • Y10S977/808—Exterior attachment for targeting, e.g. drug targeting
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S977/00—Nanotechnology
    • Y10S977/70—Nanostructure
    • Y10S977/827—Nanostructure formed from hybrid organic/inorganic semiconductor compositions
    • Y10S977/829—Organic or biological core coated with inorganic shell
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S977/00—Nanotechnology
    • Y10S977/902—Specified use of nanostructure
    • Y10S977/904—Specified use of nanostructure for medical, immunological, body treatment, or diagnosis
    • Y10S977/915—Therapeutic or pharmaceutical composition
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S977/00—Nanotechnology
    • Y10S977/902—Specified use of nanostructure
    • Y10S977/904—Specified use of nanostructure for medical, immunological, body treatment, or diagnosis
    • Y10S977/918—Immunological
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
    • Y10T428/00—Stock material or miscellaneous articles
    • Y10T428/29—Coated or structually defined flake, particle, cell, strand, strand portion, rod, filament, macroscopic fiber or mass thereof
    • Y10T428/2982—Particulate matter [e.g., sphere, flake, etc.]
    • Y10T428/2989—Microcapsule with solid core [includes liposome]

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Nanotechnology (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Materials For Medical Uses (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Manufacturing Of Micro-Capsules (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

내용없음.

Description

생물학적 활성을 가진 분자의 수송에 유용한 입자성 담체 및 이의 제조방법
본 발명은 생물학적 활성을 가진 분자의 수송에 특히 유용한 새로운 입자성 담체에 관한 것이다.
생물학적 또는 생화학적 시스템 내부로 화합물(활성성분)을 침투시켜 반응시키는 과정에 입자성 담체를 사용하여 활성산물을 캡슐화하는 방법이 때로는 유용하다.
이와 같은 예로서,
(1) 유리상태로 신체 또는 생화학적 시스템 내에서 극히 짧은 수명을 갖는 화합물에 대해서, 담체는 화합물을 보호하고 일정한 확산이 이루어지도록 한다.
(2) 특정 형태의 세포에만 작용해야 하거나 일정한 형태로 제공되어야 하는 화합물인 경우로 특히 항암제 및 항원에 대한 경우에 있어서, 담체는 선택된 목표물을 향해 제공된다.
(3) 점막(장, ENT계, 질 또는 표피)에 있어서 자연적으로 흡수되지 않는 화합물인 경우에는 담체가 장벽통과의 촉진을 위해 코팅물질로서 작용한다.
상기 형태의 입자성 담체는 유용한 적재, 안정성, 생체대사 및 유효성분의 확산도와 관련한 일정한 요구를 만족해야만 한다. 부가하여 이러한 담체가 가치를 갖기 위해서는 신체나 자연계에서의 분자 수송에 대하여 가능한 한 자연계에 가까워야 하고 대사균형을 방해하지 않아야 한다.
담체가 사용되는 자연 수송 시스템에 있어서, 가장 흥미있는 대상은 지방단백질이다.
모든 지방단백질은 인지질로 둘러싸인 내부 지질 코어(core)를 가진 구조적으로 일정한 형태의 조직이다. 더욱이 아포(apo) 지방단백질은 인지질층에 고정되어 지방단백질의 유도를 확실하게 한다.
지방단백질의 크기, 수송하려는 지질의 성질 및 아포지방단백질의 구조가 상이한 여러 가지 형태의 지방단백질이 있다. 예를 들면, 유미입자는 비교적 큰 지방단백질(1㎛)이고 소화로부터 생기는 지방수송을 담당한다. 저밀도 지방단백질 또는 LDL은 그보다 더 작으며(20-50nm), 콜레스테롤 수송을 담당한다. 크기가 작은 LDL은 조직내에서 콜레스테롤을 확산시킬 수 있다.
그러나 리포좀에는 제약 산업에서 사용되지 못하는 몇가지 단점이 있다. 특히 리포좀에는 깨지기 쉬움, 이질성, 낮은 수송능력 및 산업규모로의 생산에 따른 어려움등이 있다.
그러므로 구조적으로 자연 담체에 근접되지만 리포좀이 갖는 결점을 해결한 유용한 담체의 존재가 바람직하다.
본 발명은 인지질/당지질/다당류 성질의 입자성 담체에 관한 것으로, 이는 또한, 초분자, 생체담체(BVSM, Bio Vecteurs Supra Moleculaires)로 명명되었으며, 효소반응, 화학반응, 면역반응, 진단시험 또는 발효에 알맞는 여러 가지 생화학적계 및 생물학적계(진행세포 또는 원핵세포)에서 천연, 합성, 반합성 또는 재조합을 기원으로 하는 분자의 수송을 허용한다.
이미 유효물질의 수송을 위한 입자성계가 설명되었지만, 이들 어느것도, 조절될 수 있고, 매우 안정하고, 친액성 형태로 되고, 완전히 대사되고, 상기 자연 담체와 매우 유사한 구조 및 표면을 갖는 규정크기의 실제물이 얻어지게 하는 본 발명에 따르는 입자성 담체의 특수한 다중층의 구조를 갖지 않는다.
특히 본 발명은 다음의 것을 포함하는 것을 특징으로 하는 담체에 관한 것이다.
(1) 본질적으로 가교결합된 친수성 중합체, 예를 들어 다당류인 친수성 비액체인 코어
(2) 일반적으로 코어와 공유결합한 지질류의 제1층(또는 링) 및
(3) 인지질, 바이오 합성세제 또는 미셀을 구성할 수 있는 계면활성제와 같이 소수성으로 안정화되는 양친매성 화합물이 제2층(또는 껍질).
친수성 코어(특히 다당류 코어)는 여러가지 방식으로 생성될 수 있는데 특히 다당류인 경우에 곧은 사슬 또는 가지 사슬의 생체 분해될 수 있는 다당류가 사용됨이 바람직할 것이다.
예를 들면 덱스트란, 녹말 또는 셀룰로오스 형태의 천연 또는 합성 다당류 또는 상기 화합물의 유도체이다. 특히 양이온 또는 음이온 전하를 띤 유도체이다.
상기 다당류의 분자량은 50,000에서 수백만(거의 천만)달톤까지 매우 넓은 범위로 다양하다. 다당류를 가교결합시키는 과정은 공지된 기술이고, 당류의 히드록실기와 반응할 수 있는 이중용기(bifunctional) 반응제를 사용함으로서 실행될 수 있다; 관련된 반응제로는 특히 에피클로로히드린, 에피브로모히드린, 비스-에폭시드, 혼합된 디카르복실산 무수물 또는 옥시염화인(POCl3)의 무수물이 있다.
상기 형태의 과정을 수행할 때의 특수한 매개변수는 기술적으로 공지되어 있다. 일반적으로 겔이 생성된다.
상기 겔의 직경이 약 10마이크론인 입자 생성을 위해서는 기계적으로 분쇄할 필요가 있다. 따라서 본 발명에 따른 담체 생성을 위해서는 초음파법 또는 프렌치 프레스(French press)에서의 압출과 같은 방법으로 수행될 수 있는 새로운 파쇄의 실시가 필요하다.
본 발명에 따른 입자성 담체에서는 10nm내지 5㎛ 크기를 가진 코어의 사용이 바람직하지만, 어떤 경우에는 그보다 더 크거나 또는 작은 크기의 입자를 사용하는 것도 가능하다; 바람직한 입자 크기는 20nm내지 70nm 사이고, 특히 50nm 근방이 바람직하다.
친수성 다당류 코어의 성질은 코어의 당류에 이온기, 산성기 또는 염기성기의 치환체를 도입함으로써 변형될 수 있다. 코어의 내부 및 표면에서 균일하게 일어나는 이러한 치환은 가교결합 전후 또는 도중에서 일으키게 할 수 있다. 이러한 이온성은 자체는 이온성이지만 코어에 대해서는 반대 전하를 갖는 화합물의 캡슐화에 특히 유용하다.
균일한 크기를 요하는 특정한 경우에 있어서, 생성된 입자의 직경비율에 따라 적당한 방법, 특히, 원심분리에 의해서 정제하는 것이 필요하다.
지질을 이용한 코어로부터 유도된 히드록실기 또는 히드록실기로부터 출발한 화학결합에 의해서 제1층(또는 링)이 얻어진다.
이러한 형태의 이식조직(grafting)은 공지된 기술로써, 다당류에 불용성인 디클로로메탄, 헥산 또는 톨루엔 및 지질 화합물에 상응하는 소수성 라디칼 커플링제와 같은 비양성자성 매질에서 당류의 히드록실기의 반응을 이용하는 것으로 구성되어 있다.
제1지질층의 합성에 있어서, 그리프트 반응이 본 분야에 잘 알려져 있지만, 본 발명에 따른 방법은 디클로로메탄, 헥산 또는 톨루엔과 같이 다당류에 대해서 불용성인 비양성자성 매질에서 반응을 일으킴으로 유용한 변형을 발생시킨다. 이는 유도체 형성을 표면에서 효과적으로 일으키고 피리딘과 같이 다당류의 용매인 경우의 코어벌크에서는 비효과적이다. 상기 변형은 한편으로는 중심의 친수성 코어를 보존할 수 있는 반면 코어의 입자성 구조를 유지할 수 있게 하므로 매우 중요하다. 실제로 상기 구조는 당류의 히드록시기들 사이에서의 가교결합 반응에 의해 생성되고, 또한 가교제로 연결되지 않은 당류 사이에서의 수소결합이 존재함으로서 생성된다. 다당류에 적합한 용매(즉, 피리딘)을 사용하여 덩어리내에 유도체 형성이 이루어질 때 상기 결합은 깨지고, 동시에 입자성 구조를 상실하게 된다(이때 아세트산 셀룰로오스 형태의 섬유구조가 생성된다).
제1지질층의 이온성 화합물의 캡슐화를 증진시키기 위해서 기본적 이온특성을 가진 지질링을 생산하는 것이 가능하다는 것이 알려져있다. 상기 이온성질은 양이온기 또는 음이온기 및 다당류 코어에서 당류의 히드록실기와 공유결합을 형성할 수 있는 다른 작용기를 수반하는 화합물과 다당류 코어의 방향선택적 반응에 의해 부여될 수 있다. 예를 들면, 알콜 또는 당에 의해 나타나는 OH기와 반응하여 유리 카르복실기를 소유한 숙신산의 모노 에스테르를 제공하는 무수 숙신산등과 같은 내부 디카르복실산 무수물을 가진 경우이다.
이온 화합물을 가지고 유도체를 생성하는 반응은 지방산과의 아실화반응 이전에 또는 동시에 일으킬 수 있다. 다당류 코어의 표면에 이온기의 존재는 지방산을 평행하게 그래프트시킬 수 있음을 알았다. 그러나, 인지질층을 이루기 위해 필요한 소수성을 보존하기 위해서는, 이온성질이 우세할 필요가 없고(숙신산에 대해 40몰% 이하) 사용되는 지방산은 충분히 길어야 됨을(탄소 14개 이상) 알았다.
하나는 지질이고, 다른 하나는 이온성인 반응 혼합물을 사용하여 방향선택성을 보장하기 위해, 상기에서 언급했듯이 다당류에 적합한 비용제로된 비양성자성 매질에서의 유도체 형성반응을 일으키는데 그래프트가 편리하다.
최후로 외부 지질 껍질은 상기에서 설명했듯이 미셀을 조작할 수 있는 어떤 이온성 또는 비이온성 계면활성제 또는 인지질로 생성시킬 수 있다. 상기 외부 껍질은 리포좀 제조에 사용되는 방법과 유사한 방법으로 바람직하게 생성된다. 즉, 에테르 또는 에탄올의 주입, 세제의 투석, 가역상 제조 또는 플라스크법등이 가장 잘 알려져 있다.
특히, 상기 입자성 운반체는 층 또는 코어중 어느 하나에 생물학적 활성도를 가진 분자수송에 의해 사용하고자 한 것이다.
생물학적 활성도를 가지는 상기 분자중에서 하기의 것들이 언급될 필요가 있다; 항생물질 및 항비루스제; 단백질, 프로테오글리칸 및 펩티드; 다당류 및 지방다당류; 항체; 살충제 및 살균제; 심장혈관계에 작용하는 화합물; 항암제; 항 말라리아제; 및 항천식제.
경험적으로 보면 수송하는 분자의 선택에 제한은 없다.
사실상 생물학적 활성도를 소유한 모든 분자는 캡슐화될 수 있다. 기타 많은 화합물, 예를 들면 소염제, 마취제, 피임제, 펩티드, 구충제, 비타민, 프로스타글란딘, 신경억제제, 항억제제 등등이 첨가될 수 있다.
어떤 경우에는 특히 방사선 표지법 또는 형광 형태나 NMR 탐지 형태의 방법으로 독특하게 표지된 본 발명에 따르는 입자성 담체를 사용할 수 있는데, 상기 표지는 영상 및/또는 진단을 허용하도록 하기 위함이다.
유효 성분은 다당류 코어의 내부 또는 지질환이나 외부 인지질 껍질에 삽입될 수 있다. 상기 삽입은 소수성결합, 수소결합 또는 이온결합을 거쳐 자발적으로 달성될 수 있고 또는 적당한 리간드의 화학적 그래프트후에 달성될 수도 있다.
후자의 경우에 분자는 입자의 외부에 위치할 수 있고 소수성 리간드에 의해 후자에 결합될 수 있다. 그러므로 공간적으로 한정된 네개의 영역이 판별되어진다. 이와 같은 공간상의 영역 분할은 초분자라는 용어를 채택하도록 한다.
결국 본 발명은 본 발명에 따른 입자성 담체를 포함하는 약제학적 또는 진단학상의 또는 영상조성물에 관한 것이다.
하기에서는 특성의 함수로서 여러가지 생성물을 적재시키는 예가 설명된다. 특히, 부티로신 등의 아미노 글리코시드류의 항생 물질인 크기가 작은 친수성 생성물; 산성을 가진 내부 지질환에 위치한 프로프라노롤등의 양친매성 생성물; 외부 인지질 껍질에 위치한 것 이외에는 상기와 동일한 프로프라노롤; 내부 지질층에 위치한 델타메트린 등의 살충 항생물질인 고도의 소수성 화합물; 시토크롬 C등의 막 단백질; 크기가 크지만 S형-살모넬라 미네소타(Salmonella minnesota)의 지방다당류인 지질 잔기를 소유한 친수성 화합물; 지방산 사슬에 의해 변형된 효소 단백질; 지방산 사슬에 의해 변형된 모노클로날 항체; 에리트로마이신 등의 소수성 항생물질; BVSM 표면에 고정된 과산화 효소인 천연 효소 단백질; 산성 다당류 코어 내부에 캡슐화된 동일 과산화 효소.
본 발명에 따른 입자성 담체는 특히 예를 들면 여과에 의해 또는 20분 동안 120℃ 고압증기 멸균기에서의 처리로 살균소독될 수 있다. 상기 담체는 특별한 주의없이 친액화될 수 있다. 친액조건은 비록 반드시 필요한 과정은 아닐지라도 재수화가 가능토록 말토오스와 같은 친액건조 첨가제 존재하에서 달성될 수 있다. 또한 상기 담체는 분무화되어질 수 있다(atomized). 분무화하기 위해 현탁액에 당 또는 다당류를 첨가하면 입자가 글리코시드로 코팅이 되어 입자들 사이의 응집현상을 제거하고 물에서의 보다 좋은 재현탁이 가능하게 한다. 하기의 예들은 고려되어지는 입자성 담체의 여러층에 생성물을 삽입하기 위해 이용되는 몇몇 과정이 보다 명백해지게 한다.
상기한 다양성에 덧붙여 BVSM은 물리화학적 특성이 흥미롭다. 하기에서는 상기 나노입자 형태의 다양한 장점중에서 특히 다음을 언급한다.
(1) 수송되어지는 생성물, 요구되는 캡슐화 정도 및 선택된 타겟에의 적합화를 가능케하는 다중층의 기본 단위구조 형태.
(2) 나노입자(nanoparticles)의 반응성 또는 나노입자의 장 및 피부흡수를 촉진하기 위해 입자 표면상태를 변형시킬 가능성.
(3) 리포좀과 유사한 방식으로 BVSM의 외부 인지질 껍질은 세포막과 유사하고 그와 상호작용할 수 있고,
(4) 다당류 코어의 중합체 구조에 기인한 매우 고도의 화학 안정성.
(5) 완전한 생체 분해력 및 생체대사.
(6) 여러 가지 화학성질의 유효성분에 대한 충분한 캡슐화 용량.
(7) 생물학적계 및 조직에서의 확산을 조절할 수 있는 균일한 방식으로 매우 작은 크기(50nm)로 생성되어질 가능성 및 한정된 크기.
(8) 제조과정을 산업규모화할 가능성.
하기 실시예에서는 본 발명의 특성 및 장점을 더욱 많이 설명하고 있다.
가교결합된 다당류 코어의 제조
수산화 나트륨(NaOH) 트랩이 장착된 2리터 용량의 반응기에서 분자량이 29,000인 덱스트란 150g 및 1M-NaOH 용액 150ml를 혼합한다. 덱스트란 용액이 균일해졌을 때 용액을 강렬히 저어주면서 에피클로로히드린 12ml를 첨가한다. 이 반응 혼합물을 물중탕을 이용하여 80℃로 가열한다.
에피클로로히드린을 첨가한 후에는 교반을 멈추고, 이때 10시간 동안 온도를 80℃로 유지한다.
약간의 탄성이 있고 깨지기 쉬운 겔이 얻어진다. 상기 겔을 물 1.850ℓ로 현탁시키고, 그런 다음 직경이 수십 마이크론되는 입자를 얻기 위해서 스크루우(screw) 장치(위어링(Waring)형 혼합기)를 사용하여 현탁액을 기계적으로 분쇄시킨다.
그런 다음 가교결합된 덱스트란을 한외 파쇄시켜(ultrafragmentation) 크기가 50nm인 나노입자를 얻는다. 상기 파쇄는 나노분쇄를 허용하는 충분히 강렬한 방법에 의해 수행될 수 있다. 예로서 다음 두가지 방법이 제공된다.
(ⅰ) 초음파에 의한 한외 파쇄
미리 생성된 조 현탁액을 초음파 탐침(250왓트 전력)을 사용하여 30분 동안 음파처리를 한다. 직경이 100nm이하인 입자 20%를 포함한 불균일 혼합물이 생성된다.
(ⅱ) 프렌치 프레스를 이용한 파쇄
미리 생성된 조 현탁액을 140m 파스칼의 실제 압력하에서 프렌치 프레스를 사용하여 압출시킨다. 이 조작을 3회 되풀이한다. 이때 직경이 100nm 이상인 입자의 비율은 5% 이하이다. 전자현미기술로 측정한 평균 직경은 50nm이다.
나노입자는 1000g 내지 6000g 사이에선 15분간 분별 원심분리에 의해 정제된다. 2000g 이하에서 침전되는 입자의 크기는 100nm 이상인 반면, 2000g 내지 5000g 사이에서 침전되는 입자의 크기는 10 내지 100nm 사이이다. 상기 값은 다양하고 가교결합 조건 및 사용된 다당류의 성질에 좌우된다.
입자의 크기는 코울터(Coulter) 나노사이저를 사용하여 전자현미기술(20,000내지 100,000배 확대)로 측정된다. 입자는 비교적 정회전타원체 형태이다.
초기 다당류의 90%는 가교결합된 불용성 형태로 발견되는 반면, 10%는 용해성 다당류 형태로 발견된다. 이때 측정은 안트론(anthrone)법을 사용하여 실시한다. 가교결합된 다당류 입자의 탈수 반응은 뷰히(Buchi) 190분무기를 사용하면 달성된다. 입자의 농도는 5%이고 건조공기의 온도는 200℃이다.
산 가교결합된 다당류 코어의 제조
중합 및 파쇄에 의해 미리 생성된 다당류 코어 50g을 증류수에 1ℓ에 분산시키고 NaOH를 사용해 pH를 8로 조절한다. 무수 숙신산 20g을 첨가하여 현탁액을 실온에서 2시간 동안 교반한다. 그런 다음 변형된 나노입자를 원심분리시키고 가용성 반응 생성물 및 염이 제거되도록 씻어준다.
상기 반응으로 숙신산 모노에스테르가 형성된다.
염기 가교결합된 다당류 코어의 제조
다당류 코어 50g을 상기와 동일하게 증류수에 1ℓ에 분산시킨다. pH는 8로 조절하고 염화 글리시딜 트리메틸 암모늄 20g을 첨가한다.
현탁액을 실온에서 24시간 동안 저어준다. 변형된 나노입자를 원심분리 시키고 가용성 반응 생성물 및 염이 제거되도록 씻어준다. 상기 반응으로 당류에 1-트리메틸아미노, 2-올-1-프로필록시가 그래프트된다.
치환되는 정도는 대략 당(sugar) 1개당 0.5당량이고 적정(titration)에 의해 측정된다. 동일한 전하의 이온기 사이에 존재하는 반발의 결과로 이온 치환체는 입자 부피에 균일한 형태로 분배된다.
[실시예2]
실시예 1에 따른 지질 특성을 소유한 지질환의 제조
디클로로메탄 1ℓ에 현탁된 직경이 50nm인 분무된(atomized) 다당류 입자 100g에 디메틸 아미노 피리딘 75g 및 옥타노일 클로라이드 100g을 혼합한다. 상기 혼합물을 공기로부터 차폐시켜 온도 37℃에선 20시간동안 저어준다. 반응후 입자의 회수 및 세척은 디클로로메탄을 증발시킨 다음 메탄올로 세번을 씻어주면 이루어진다. 각각의 세척후에 입자를 원심분리(회전속도 5000rpm에서 20분간)에 의해 회수한다.
반응 동력학의 연구에 의해 보다 많이 또는 적게 밀집되고, 생성되는 입자의 내부에서 보다 깊이 또는 얇게 설정된 지질층이 성분의 화학양론, 사용된 용매 및 선택된 온도의 함수로서 얻어질 수 있다.
하기의 예로 50nm의 직경을 가진 입자에 대한 실시조건의 함수로 지방산의 그래프트 정도가 다양함을 나타낸다.
다당류 코어에 그래프트된 지방산은 로웨리(Lauwerys)법으로 측정된다.
[실시예 3]
이온성 지질환의 제조
산성 : 상기 과정을 스테아로일 클로라이드(C18) 및 무수 숙신산의 혼합물을 사용함으로 변형시킨다. 디클로로메탄올 1ℓ에 현탁된 크기가 50nm인 분무된 다당류 입자 100g에 디메틸 아미노 피리딘 75g 및 스테아로일 클로라이드 160g(0.8당량) 및 무수 숙신산(0.2당량) 12g을 혼합한다. C18/무수 숙신산의 몰비는 다양할 수 있고 생성된 그래프트 정도는 아래와 같다 :
염기성 : 산 염화물/염화 글리시딜 트리메틸 암모늄의 혼합물을 사용하며 상기와 유사한 과정이다.
[실시예 4]
외부 지질 껍질의 제조
클로로포름 1.5ℓ중의 인지질(1/3은 포스파티딜 에탄올 아민, 1/3은 포스파티딜 에탄올 콜린, 1/3은 포스파티딜 에탄올 이노시톨) 30g을 옥탄산(지방산 5%)으로 아실화된 입자(30-100nm) 150g에 첨가한다. 5리터 플라스크에 혼합물을 넣고 회전증발기에서 감압으로 건조시킨 다음, 증류수 2리터를 첨가하여 매 10분마다 저어주면서 30분 동안 40℃에서 방치한다.
분말 상태로 아실 코어 및 인지질을 혼합한 다음, 저어주면서 필요한 양의 물을 점차적으로 첨가하는 변형된 상기 방법을 사용할 수 있다.
물론 상기 변형 방법은 다량의 BVSM을 제조할 때 더욱 적당하다.
이때 BVSM은 음파 파쇄(용기에서 1시간 30분 동안) 또는 프렌치 프레스의 압출로 균일한 현탁액 형태로 생성된다. 과량의 인지질이 존재한 결과 실시 과정중에 형성될 수 있는 리포좀(SUV)은 원심분리(회전속도 15,000rpm에서 30분간)로 제거시킨다 : 침전물에 존재하는 BVSM은 회수된다.
초음파 용기에서 몇분동안 분산시킴으로서 재현탁된 BVSM은 우유액의 형태이다. 상기 현탁액은 안정하나 최종적으로는 수일동안 방치한 후에 안정해진다 : 이때 유연한 방식의 간단한 교반으로도 다시 출발(starting) 현탁액을 생성시키는 데 충분하다.
인지질의 측정은 아메스(Ames) 및 더빈(Dubin)법으로 인을 정량하므로서 실시된다. 옥탄산의 그래프트 정도가 5%인 코어의 경우에 BVSM과 관련된 인지질의 양은 15%이다.
[실시예 5]
여과에 의한 50nm BVSM의 살균
10nm 이하의 직경을 가진 BVSM의 살균은 아세트산 셀룰로오스 또는 폴리 카보네이트막(직경 0.22㎛의 세공)을 통해 여과시킴으로서 달성된다. 상기 여과시는 막힘 현상을 포함하지 않으면서 상승된 압력의 사용을 필요로 한다. 완전한 살균을 위해서는 연속된 두번의 여과가 필요하다. 여과후에 생성된 현탁액은 매우 균일하고 침전되는 경향이 극히 낮으며(수주일), 이는 막의 압출 효과에 기인하여 고도로 분산된 상태의 현탁액임을 나타낸다.
그러므로 생성된 BVSM은 특별한 주의없이 120℃에서 20분 동안 고압 증기 멸균기에서 처리할 수 있다. 고압증기 멸균기 처리후에도 BVSM 현탁액은 변하지 않을 것으로 나타난다. 또한 특별한 주의 없이 BVSM을 냉동시킬 수도 있다. 용해후에 얻어진 현탁액은 출발 현탁액과 동일하다. BVSM을 직접 냉동건조시킬 수도 있지만 5% 말토오스와 같은 냉동건조 첨가제의 첨가로 냉동건조 및 재수화 후에 얻어지는 완전한 현탁액 및 보다 양호한 결과를 얻을 수 있다(AED절 참조).
[실시예 6]
BVSM의 연구
부(negatire) 착색후 전자현미기술에 의한 BVSM의 관찰(100,000배 확대)에서 상기 BVSM은 평균 직경 40nm인 거의 정회전타원체 형태로 존재함을 알려준다.
응집물이 없는 분산 상태로 입자는 관찰된다. 다당류 코어에서는 나타나지 않고 BVSM 입자 주위에서 헤일로우(halo)가 존재하는 것은 외부 인지질 껍질이 존재함을 알려준다.
분별 엔탈피 분석연구를 디팔미토일 포스파티딜 콜린(DPPC)으로 둘러싸인 BVSM에 대해 실시하고, DPPC 리포좀을 사용한 것과 비교해 본다. 후자의 경우에는 40℃의 전이온도가 관찰되며 이것은 문헌값과 일치한다. 지질환에 존재하는 지방산과 상관이 없이 큰 크기의 BVSM 경우(20-80㎛) 유사한 전이 온도가 관찰된다 : C8-40.9℃, C12-40.2℃, 16-40.7℃. 크기가 50nm인 BVSM인 경우에는 전이는 옥탄산으로 아실화된 BVSM인 경우에만 관찰된다(40℃).
상기 결과는 외부 지질 껍질이 리포좀 형태의 유기적 조직임을 알려준다. 그러나 이 조직은 지질환을 구성하는 지방산의 성질 및 입자의 크기에 의존한다.
더구나 전이온도는 BVSM의 냉동건조에 영향받지 않는다.
[실시예 7]
BVSM에 부티로신의 적재
부티로신(Parke Davis)은 아미노 글리코시드계의 항생물질이다.
부티로신은 아미노 당류에 글리코시드 결합으로 결합된 아미노 실리톨(sic)로 구성되는 분자이다. 그러므로 상기 분자는 물 및 물과 저급 알콜의 혼합물에서만 용해되는 매우 높은 극성 및 이온성 생성물이다.
먼저 탄소수 8개인 아실화된 다당류 코어(지방산 0.6%) 및 아소렉틴(Fluka) 10g을 사용해 상기 언급한 플라스크법으로 블랭크 BVSM을 제조한다.
리포좀 불순물을 제거하기 위해 BVSM을 세척한 후, 부티로신 황산염(Parke Davis) 10g을 포함한 메탄올/물(50 : 50) 혼합물 250ml에 현탁액으로 BVSM을 취한다. 이렇게 해서 생성된 현탁액을 회전 증발기를 사용하여 감압(30℃, 30mmHg)하에서 농축시킨다. 현탁액이 풀처럼되면 메탄올/물 혼합물 250ml를 첨가한다. 이때 실시는 3번을 되풀이한다.
최종 농축후 잔류물에 물 250ml를 첨가하여 원심분리하고, 이온쌍 고성능 액체 크로마토그래피 및 고초균(Bacillus subtilis)에서의 미생물학적 측정에 의해 원심분리된 상층액중에서 부티로신을 정량한다. 그 결과 상층액중에는 3g의 부티로신 또는 다르게는 BVSM이 포함된 펠릿(pellet)중에 7g이 존재함이 확인된다. 그러므로 아실화된 코어무게와 관련하여 14%의 적재정도 및 캡슐화 수득율 70%가 얻어진다. 연속된 원심분리로 유리 부티로신을 씻어낸 후에는 BVSM을 포함한 현탁액으로부터의 상층액의 분석으로 부티로신을 검출할 수 없다.
그러므로 상기 부티로신은 BVSM 내부에 안정한 방식으로 캡슐화되어 있다.
BVSM중의 캡슐화된 부티로신은 페트리(Petri)접시의 고초균에 더이상 활성적이 아니다. 이러한 결과로 부티로신이 입자내부, 다당류 코어 안에 위치하고 있는 것이 설명되어진다. 다른 아미노 글리코시드류, 특히 젠타마이신을 사용해서도 유사한 결과가 얻어진다.
[실시예 8]
BVSM에 프로프라노롤의 적재
(ⅰ) 산 특성의 내부 지질환내의 적재
프로프라노롤(ICI Pharma)은 친유성 방향족 부분 및 이차 아민의 존재에 기인한 염기성 이온 부분을 가진 양친매성 구조를 소유한 베타-차단제이다.
상기에서 언급된 팔미토일 클로라이드 및 무수 숙신산(75/25) 혼합물을 사용하여 아실화시킨 코어 50g으로 현탁액을 생성한다. 코어를 메탄올/물(50 : 50) 용액 500ml에 분산시킨다. 상기 현탁액에 염기성 프로프라노롤 10g을 첨가하고, 용매를 회전증발기를 사용하여 감압(40℃, 30mmHg)하에서 증발시킨다. 완전히 증발된 후에 잔류물에는 상기와 동일한 메탄올/물 혼합물 200ml를 첨가하고, 다시 현탁액을 증발시킨다. 3번의 증발 순환뒤에 분말형태의 인지질(레시틴) 10g을 잔류물에 첨가한다. 그런 다음 물 500ml를 소량씩 첨가하면서 일정하게 저어준다. 이때 먼저 위어링형 혼합기를 사용하여 현탁액을 균일화시킨 다음, 다음파처리 또는 프렌치 프레스의 압출로 균일화시킨다.
현탁액을 원심분리하고, 290nm에서 흡광도를 측정하므로서 상층액중의 프로프라노롤을 정량한다.
프로프라노롤 약 2g이 상층액중에서 검출되거나 또는 다르게는 BVSM중에서 8g이 검출된다. 그러므로 적재(sic)되는정도가 16%이며 캡슐화 수득률은 80%이다.
(ⅱ) 외부 지질 껍질안에 프로프라노롤의 적재
여기에서의 과정은 부티로신인 경우와 같다. 블랭크(C8)을 먼저 제조하고 그런 다음 프로프라노롤을 메탄올/물(50 : 50) 용액에 첨가하고, 몇번의 농축 순환을 실시한다(그러나 건조는 하지 않음). 그런 다음 잔류물을 물로 재현탁시키며, 현탁액을 균일화시켜 원심분리하고(5000g, 10분간), 상층액중에서 UV 분광 분석에 의해 290nm에서 프로프라노롤을 정량한다. 상기와 동량으로 실시했을 때 30%의 캡슐화 수득률 및 6%의 적재도가 확인되며, 이들 측정치는 앞서의 측정치보다 반이상이 낮다.
[실시예 9]
BVSM에 델타 메트린 적재
델타 메트린 (Roussel Uclaf)의 피레트린제계의 살충제이다. 이 물질은 유기 용매에만 용해되는 극히 소수성인 화합물이다.
적재는 탄소 16개인 코어(지방산 8%의 그래프트) 50g에서 시작한다.
상기 코어를 델타 메트린 5g을 포함한 에탄올 500ml에 현탁시킨다. 용매는 회전 증발기를 사용하여 감압(30℃, 30mmHg)하에서 증발시킨다. 잔류물에 에탄올 300ml를 첨가하고, 다시 현탁액을 증발시킨다. 3번의 증발 순환후에 건조 잔류물에 인지질(아소렉틴) 10g을 첨가하고, 물 500ml를 소량씩 첨가하면서 계속 저어준다. 이때 현탁액을 위어링 혼합기로 균일화시키고 프렌치 프레스를 사용한 다음 원심분리한다.
수용액에서 델타 메트린이 불용성이라면 측정은 상층액에서 실시하지 않고 BVSM에서 델타 메트린을 추출한 후에 실시한다. 몇번을 씻어낸 후에(물 및 메탄올/물 혼합물), 현탁액을 원심분리한다(5000g, 10분간). 상층액은 제거시키고 BVSM을 포함한 펠릿을 무수 에탄올(500ml)로 재현탁시킨다. 30분 동안 저어준 후에 현탁액은 원심분리하여(3000g, 5분간) 상층액을 회수시키고 펠릿은 무수 알콜 500ml로 재현탁시킨다. 3번의 추출후에 상층액을 모두 혼합하고 278nm에서 흡광도 측정으로 델타 메트린을 측정한다.
100%의 캡슐화 수득률 및 10%의 적재정도에 상응하는 델타 메트린 5g이 확인된다. 캡슐화 수득률의 높은 값은 델타 메트린의 매우 높은 소수성 및 물에서의 불용성에 기인한다.
[실시예 10]
BVSM에 시토크롬 C 적재
시토크롬 C는 지질 부위(내부환 및 외부 껍질)와의 친화력이 우수한 막단백질이다. 여러 가지 과정에 대한 효과를 비교하기 위해 아실화된 코어에서의 캡슐화, BVSM에서의 캡슐화 및 두 방법을 결합하여 실시한다.
사용된 과정은 상기에서 설명된 과정과 동일하다. 사용된 양은 C18 코어 50g, 아소렉틴 10g 및 시토크롬 C10g이고 메탄올 대신 단백질의 변성을 보다 적게 일으키는 아세토 니트릴을 사용한다.
두 방법의 결합
제1캡슐화는 C8코어에서 실시되고, 그런 다음 인지질의 첨가 및 통상적 처리로 BVSM은 제조된다. 이 단계에서 BVSM의 원심분리 및 상층액에서의 시토크롬 정량 대신에 아세토 니트릴이 첨가되고 두번의 추가 농축 순환이 감압(30℃, 30mmHg)하에서 실시된다. 그런 다음 잔류물을 물에 첨가하여 현탁액을 만들고, 이 현탁액을 균일화시키고 원심분리하며, 407nm에서 흡광도 측정으로 시토크롬 C를 상층액중에서 정량한다.
결과가 하기에 도시된다.
두 방법을 결합하여 사용했을 때 가장 좋은 결과를 얻었다.
[실시예 11]
BVSM에 살모넬라 미네소타(S)의 지방다당류(LPS) 적재
LPS는 다당류(또는 0-항원) 부분 및 소수성 부분인 지질 A로 된 고분자이다. 또한 LPS는 일반적으로 세균의 외부에 위치하고 있는 그램음성 세균의 막성분이다. 그러므로 LPS가 선택하는 위치는 인지질 외부껍질이다. 이 과정에서는 블랭크 BVSM으로부터 출발하는, 젠타 마이신 및 프로프라노롤 경우에 사용된 과정이 다시 사용된다.
블랭크 BVSM은 상기와 동일 방법으로 제조된다 : LPS(L2137, Sigma)를 메탄올/물(30/70) 혼합물중의 현탁액으로 있는 BVSM에 첨가한다. 세번의 농축 순환을 실시하여 잔류물은 물로 재현탁시키며, 현탁액을 균일화시켜 원심분리하고 LPS는 듀보이스(Dubois)(안트론)법으로 상층에서 정량한다.
C8 코어 50g 및 LPS 5g으로 출발하면 LPS 4g의 캡슐화가 달성되고 상응하는 캡슐화 수득률은 80%이고 적재정도는 8%가 된다.
[실시예 12]
BVSM에 소수성 사슬로 변형된 알파-키모트립신 적재
변형된 알파-키모트립신의 제조 :
아세톤 10ml에 용해시킨 팔미토일 클로라이드 50mg을 인산 완충제(pH8에서 0.145M NaCl 및 1% 콜레이트가 혼합된 10M 용액) 100ml에 첨가한다. 이 용액은 초음파 장치를 사용하여 균일화시킨다. 그런 다음 완충제 10ml에 용해된 알파-키모트립신(250mg)을 첨가한다. 4℃에서 2시간 방치한 후에 원심분리로(1시간, 20,000g) 침전물을 분리하고 세제로 투석시킨다.
BVSM에 변형된 알파-키모트립신의 결합 :
블랭크 BVSM의 현탁액은 C8 코어 및 아소렉틴 400mg에서 출발되는 통상적 방법으로 제조되며, 미리 생성된 변형된 알파-키모트립신 용액을 블랭크 BVSM 현탁액에 첨가하고 이 혼합물의 아세톤 니트릴 농도를 10%로 조절한 다음, 회전 증발기에서 감압(1mmHg, 4℃)하에서 농축시킨다.
실시는 3회 되풀이 하여 잔류물은 물 50ml로 재현탁시키고 현탁액은 균일화시켜 원심분리한다.
브래드포드(Bradford)법으로 BVSM내의 단백질을 정량하면 약 200mg이 검출되며, 80%의 캡슐화 수득률 및 10%의 적재정도와 상응한다.
[실시예 13]
BVSM에 지방산 사슬로 변형된 모노클로날 항체 적재
변형된 항체의 제조 :
2% 디옥시콜레이트가 포함된 PBS 완충제 50㎕중의 팔미트산의 N-히드록시-숙신 이미드 에스테르 22㎍에 정제된 안티-HLA-B2m 착물인 SAF1 Class 1(Biosys) 1mg을 첨가한다.
상기 혼합물을 12시간 동안 37℃에서 배양하고, 과량의 팔미트산이 제거되도록 디옥시콜레이트 0.15%를 포함한 PBS 완충제안의 세파덱스(Sephadex) G-75컬럼에서 크로마토그래프를 실시한다. 면역 글로불린을 포함한 빈 용량 피이크를 모아 투석시킨다.
BVSM 내의 항체 결합 :
물 200㎕에 C8 코어 20mg이 첨가된 것과 상응하는 블랭크 BVSM의 현탁액을 사용한다. 미리 생성된 항체 용액을 첨가하고, 혼합물의 아세토니트릴 농도를 10%로 만든다. 그런 다음 스피드 백(Speed Vac)형 장치를 사용하여 감압하에서(건조되지 않게) 농축시킨다(4℃, 0.01mmHg). 혼합물을 아세토니트릴/물(10 : 90)용액 500㎕로 재현탁액시킨 다음 다시 농축시킨다. 농축을 세번 되풀이한 후에 물 500㎕를 현탁액에 첨가하여 균일화시키고 원심분리한다. 브래드포드(Bradford)법에 의한 침전물내의 단백질 정량으로 대략 100%의 캡슐화 수득률 및 5%의 적재정도에 상응하는 단백질 1mg이 존재함을 알게된다.
[실시예 14]
BVSM에 에리트로마이신 적재
물/메탄올(50 : 50) 용액 500ml중의 C12 아실화된 코어(5중량%) 50g을 혼합하여 현탁액을 생성한다. 에리트로마이신(Eli Lilly) 10g을 상기 현탁액에 첨가하고, 회전 증발기 사용으로 감압(40℃, 300mmHg)하에서 용매를 증발시킨다. 완전히 증발된 후에 상기와 동일한 메탄올/물 혼합용액 200ml를 잔류물에 첨가하고 현탁액을 다시 증발시킨다.
증발을 세번 되풀이한 후에 분말형태의 인지질(아소렉틴) 10g을 잔류물에 첨가한다. 그런 다음 통상적인 방법을 따른다. C18 컬럼에서 HPLC에 의해 상층액중에서 에리트로마이신을 정량하고 228nm에서의 UV 분광 분석으로 탐지한다. 상층액에서 에리트로마이신은 발견되지 않는다.
모든 생성물이 BVSM내에 캡슐화되어 존재한다. 그러므로 캡슐화 수득률은 100%이고 적지정도는 20%이다.
[실시예 15]
BVSM 표면에 과산화 효소 적재
과산화 효소(Sigma)는 분자량 40,000달톤이고 등전점이 7.2인 효소이다. 목적하는 것은 BVSM 지지체에 이를 시킴이 없이 안정한 방식으로 효소를 고정화시키는 것이다.
크기 1내지 3㎛인 중성 BVSM 다당류 입자가 사용된다. 스테아로일 클로라이드로 아실화된 상기 입자 50g을 500ml 플라스크에 넣고 과산화 효소 5g 및 수소화 레시틴 5g을 잘 혼합한다. 그런 다음 강렬히 저어주면서 증류수 250ml를 소량씩 첨가한다. 생성된 현탁액을 강렬히 저어주면서 37℃에서 항온저장한(incubated) 다음, 초음파 탱크에서 1분동안 초음파 처리를 실시한다. BVSM을 원심분리하고, 402nm에서 흡광도 측정으로 상층액중의 캡슐화되지 않은 과산화소를 정량한다. 상층액중에서 95%의 캡슐화도에 상응하는 250mg 과산화 효소가 검출된다.
상기에서 사용된 것과 동일한 산성 BVSM 다당류 입자가 사용된다.
스테아로일 클로라이드(0.8당량)/무수 숙신산(0.2당량) 혼합물로 아실화한 입자 50g을 앞서와 같이 500ml플라스크에 넣고 과산화 효소 5g 및 수소화 레시틴 5g을 혼합한다. 상기와 같이 동일한 처리를 한 후에 현탁액을 원심분리하고, 402nm에서 흡광도 측정으로 상층액중의 캡슐화되지 않은 과산화 효소를 정량한다. 92.5%의 캡슐화도에 상응하는 375g이 검출된다.
[실시예 16]
BVSM의 산성 다당류 코어에 과산화 효소 적재
산성 다당류 코어 10g은 다당류 코어와 무수 숙신산을 반응시킴으로서 실시예 1에 따라 제조된다. 코어의 직경은 1 내지 8마이크론이고, 코어에는 분자량 50,000달톤 이하의 단백질을 입자의 내부틈으로 침투시킬 수 있는 충분히 큰 틈이 존재한다. 코어에 pH 5.5 아세트산염 완충제 100ml 및 과산화 효소 5g을 첨가하여 24시간동안 천천히 저어준다. 그런 다음 입자를 원심분리하고, 402nm에서 흡광도 측정으로 상층액중의 과산화 효소를 정량한다. 90%의 캡슐화 수득률 및 45%의 캡슐화도에 상응하는 500mg이 검출된다. 입자를 증류수로 씻은 후 냉동건조하고, 스테아로일 클로라이드로 통상적 조건하에서 아실화한다.
아실화된 입자에 수소화 레시틴 1g을 혼합하고, 증류수 150ml를 소량씩 첨가하면서 저어준다. 37℃에서 30분간 저어준 후에 BVSM의 균일 현탁액이 얻어진다. 비록 아실화 반응은 코어의 주변에서만 일어나지만, 상기 반응 도중 과산화 효소 일부는 아세틸화(sic)된다.
[실시예 17]
BVSM안에 캡슐화된 생성물에 대한 안정성 연구
실시예 7에서 설명했듯이 본 연구는 프로프라노롤로 적재된 BVSM에서 실행된다. 또한 다른 생성물을 가지고도 유사한 결과가 얻어진다.
산성 BVSM에서 프로프라노롤 8.4%가 적재된 산성 BVSM의 현탁액으로부터의 상층액의 209nm에서의 흡광도 측정으로 프로프라노롤의 누출이 계산된다.
BVSM(코어 500mg, 프로프라노롤에 42mg)을 물 20ml로 현탁시킨다. 상층액에서의 분석으로 전체의 4%에 상응하는 1.76mg의 유리프로프라노롤이 존재함이 확인된다.
냉동건조 및 분무화는 탈수소화되는 BVSM 현탁액에 5% 말토오스(W/V)를 첨가함으로 실행된다.
모든 경우에 누출되는 매우 낮은 분무화될 때 조차도 감소한다.
[실시예 18]
캡슐화된 항생물질의 약물 동력학적 연구
실시예 6에 따른 부티로신 및 실시예 13에 따른 에리로트 마이신등 항생물질의 캡슐화에 대한 영향을 약물 동력학적으로 평가하기 위해, 유리형 및 캡슐형으로 투여한 후에 상기 두가지 항생물질에 대한 시간의 함수로 혈장에서 정량을 실시한다.
실험과정
대략 3kg의 백색 뉴질랜드(White New Zealand)형의 수토끼에 정맥 및 피하에 주사한다. 시료는 귀 측면 정맥에서 피/시료 약 200㎕를 채취한다. 피를 즉시 회전속도 8000rpm에서 15분간 원심분리한다.
혈청을 회수하여 사용할 때 까지 4℃에서 저장한다.
정량방법
에리트로 마이신과 마찬가지로 부티로신은 고초균이 1000cfu/ml로 접종되어 37℃에서 18시간 동안 배양된 한천 배지(bioMerieux)에서의 용균지대 측정(한천 실린더법)에 의해 정량한다. 바이오메오스(BioMerieux) 한천 배지는 증류수 1ℓ당 비오겔리톤(Bio-Gelytone) 6g, 효모 추출을 3g, 육즙 1.5g 및 한천 15g으로 구성된다. 배지의 pH는 9로 조절한다.
과정 :
혈청시료를 한천 배지내에 만들어진 웰(wells)에 넣는다(30㎕/웰).
또한 알려진 양의 항생물질을 갖는 기준 용액도 접시에 넣는다.
(1) 피하주사 : 주사되는 양은 유리 또는 캡슐형 부티로신 9mg을 포함한 1ml이다.
유리 부티로신은 혈장내로 매우 급속히 확산되며 6시간 후에 제거됨이 발견된다. 대조하여 캡슐형 부티로신은 오랜시간(4시간)후에 순환계에 나타나며 저 수준이지만 충분한 수준을 유지한다.
(2) 정맥주사
유리형 또는 BVSM 100mg내의 캡슐형의 부티로신 5mg이 포함된 생리적 용액 4ml를 주사한다. 용액은 NaCl 8g/ℓ, KCl 0.2g/ℓ, 무수 CaC 0.1g/ℓ(sic), MgCl20.1g/ℓ, Na2HPO43.18g/ℓ 및 KH2PO40.2g/ℓ로 제조되며 pH 7.4로 조절한다.
온수를 사용해 혈관 확장을 하고 70℃에서 에탄올로 소독을 한 후에 귀와 외부 정맥에 천천히 주사한다.
유리 부티로신은 혈장내로 매우 급속히 확산되며 또한 매우 급속히 제거된다. 또한 캡슐형 부티로신도 매우 급속히 확산을 시작하지만 경과 시간동안 매우 느린 속도를 유지한다.
그러므로 BVSM의 대사는 피하주사보다 정맥주사인 경우에 더욱 급속히 부티로신을 유리함을 나타낸다. 상기 두가지 경우에 항생물의 유리는 BVSM의 캡슐화에 의해 조절되고 안정화된다.
에리트로마이신
주사량은 유리형 또는 캡슐형 에리트로마이신 15mg을 포함한 1ml이다. 용해도에 따라 유리 에리트로마이신은 물/에탄올(85 : 15) 혼합물에 용해된다.
에리트로마이신은 혈장내로 비교적 천천히 확산됨을 발견한다.
유리상태가 캡슐형태보다 더 높은 초기수준이 혈장에서 달성되게 할 수 있다.
24시간 경과 후 두 형태사이의 차이는 더 이상 관찰되지 않는다.
[실시예 19]
BVSM표면에 고정된 과산화 효소의 효소 활성 연구
효소 활성은 오르토-페닐렌 디아민 법으로 측정된다.
과정 :
(1) 반응물들의 두가지 용액을 제조한다.
ⅰ) 용액 A : pH 5의 시트르산염 완충제(시트르산/NaH2PO4)중의 시판제품인 33% 과산화수소 용액의 0.012%(V/V) 과산화수소 용액.
ⅱ) 용액 B : 오르토-페닐렌디아민에 시트르산염 완충제를 혼합한 0.04%(Wt/v) 용액.
(2) 5ml 시험관에 다음 물질을 연속하여 첨가한다.
ⅰ) 시트르산 완충용액 50㎕중의 용액으로서 표준 과산화 효소 또는 측정하려는 과산화 효소
ⅱ) 용액 A 500㎕
ⅲ) 용액 B 500ml
(3) 혼합물을 볼텍스 혼합기로 교반한다.
(4) 혼합물을 실온에서 30분간 항온저장시키고, 완충제에 대하여 492nm 흡광도를 측정한다.
BVSM에 고정화된 과산화 효소의 활성 측정
과산화 효소 함유 BVSM을 원심분리하여 씻어내고 물로 재현탁시킨다. 10,000배 희석된 분취량이 채취되며 상기 희석된 분취량 500㎕는 효소시험에 사용된다.
그러므로 BVSM 표면에 고정된 과산화 효소의 효소활성은 BVSM 자체 구조에 많이 의존한다. 과산화 효소의 고정과 필연적으로 관련된 반응 속도의 감소를 고려한다면 산성 BVSM에서 얻어진 결과가 특히 유리하다.

Claims (25)

  1. 친수성의 10nm-5㎛의 평균 크기를 가진 고체 코어 ; 코어와 공유결합된 지질류의 제1층 ; 및 소수성 작용에 의해 제1층과 결합된 양친매성 화합물의 제2층(표층)으로 구성된 입자성 담체.
  2. 제1항에 있어서, 친수성 코어가 가교결합(crosslink)된 친수성 중합체로 구성된 입자성 담체.
  3. 제2항에 있어서, 가교결합된 친수성 중합체는 가교결합된 다당류로 구성된 입자성 담체.
  4. 제3항에 있어서, 다당류는 덱스트란(dextran), 녹말, 셀룰로오스 및 이들의 유도체에서 선택된 입자성 담체.
  5. 제4항에 있어서, 다당류 유도체는 코어의 부피에 균일하게 분포된 산성이나 염기성 이온 전하를 운반하는 입자성 담체.
  6. 제5항에 있어서, 다당류 유도체는 다당류의 OH 작용기(sic)와 공유결합할 수 있는 화합물의 반응에 의해서 얻어진 입자성 담체.
  7. 제7항에 있어서, 화합물은 숙신산 또는 이의 유도체로 이루어진 입자성 담체.
  8. 제1항에 있어서, 코어는 20-70㎛의 평균 크기를 가진 입자성 담체.
  9. 제1항에 있어서, 제1층은 스테롤, 지방산, 지방성 아민, 인지질, 소수성 아미노산 및 알콕시에테르와 이들의 혼합물로 이루어진 화합물로 구성된 입자성 담체.
  10. 제1항에 있어서, 지질층은 히드록실 작용기 또는 코어의 히드록실 작용기에서 유도된 작용기에 의해 코어와 화학결합된 입자성 담체
  11. 제1항에 있어서, 제2층은 인지질 또는 계면활성제로 구성된 입자성 담체.
  12. 제1항에 있어서, 층들의 하나 또는 코어가 생물학적 활성을 가진 분자로 구성된 입자성 담체.
  13. 제1항에 있어서, 생물학적 활성을 가진 분자는 다음과 같은 것을 포함하고 있는 입자성 담체.
    -항생물질 및 항바이러스제.
    -단백질, 프로토글리칸(sic) 및 펩티드.
    -다당류 및 지방다당류.
    -항체.
    -살충제 및 살균제.
    -심장 혈관계에 작용하는 화합물.
    -항암제.
    -항말라리아제, 및
    -항천식제.
  14. 제1항에 있어서, 담체가 라벨화되어 있는 입자성 담체.
  15. 제14항에 있어서, 담체가 방사선으로 라벨화되어 있는 입자성 담체.
  16. 제1항에 있어서, 담체가 살균되어 있는 입자성 담체.
  17. 제1항에 있어서, 담체는 친액성 형태이거나 친액제와 함께 입자화되어 있는 입자성 담체.
  18. 제17항에 있어서, 친액제가 당으로 되어 있는 입자성 담체.
  19. 입자성 담체를 제조하는 방법에 있어서, 다음의 단계로 구성된 제조방법, (가) 10nm-50㎛크기의 입자를 얻을 수 있는 조건에서 친수성 중합체를 가교결합하여 제조하고, (나) 제1층을 형성하기 위해 코어의 표면에 있는 반응 작용기에 지질 화합물을 화학결합시키고, (다) 최종적으로 제2층을 형성하기 위해 양친매성 화합물을 제1층과 소수성 접촉을 갖도록 제공하는 단계.
  20. 제19항에 있어서, (가) 단계에서 입자는 파쇄에 의해 생성되는 제조방법.
  21. 제19항 또는 제20항에 있어서, (나) 단계는 다당류에 의해 불용성인 비양성자성 매질에서 이루어지는 제조방법.
  22. 제19항에 있어서, (다) 단계는 리포좀 제조방법에 따라 이루어지는 제조방법.
  23. 제19항에 있어서, 생물학적 활성을 가진 분자가 (가), (나) 및 (다)의 한 단계중에 도입되거나 최종 담체에 도입되는 제조방법.
  24. 생물학적 활성을 가진 조성물에 있어서, 다음으로 구성된 담체를 포함하고 있는 조성물.
    친수성의 고체 코어;
    코어와 공유결합된 지질류의 제1층; 및
    소수성 작용에 의해 제1층과 결합된 양친매성 화합물.
  25. 제14항 또는 제15항중 어느 한 항에 있어서, 진단제로 이용하는 것을 특징으로하는 입자성 담체.
KR1019900700145A 1988-05-27 1989-05-11 생물학적 활성을 가진 분자의 수송에 유용한 입자성 담체 및 이의 제조방법 KR0124414B1 (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR8807110 1988-05-27
FR8807110A FR2631826B1 (fr) 1988-05-27 1988-05-27 Vecteur particulaire utile notamment pour le transport de molecules a activite biologique et procede pour sa preparation
PCT/FR1989/000229 WO1989011271A1 (fr) 1988-05-27 1989-05-11 Vecteur particulaire utile notamment pour le transport de molecules a activite biologique et procede pour sa preparation

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR900701256A KR900701256A (ko) 1990-12-01
KR0124414B1 true KR0124414B1 (ko) 1997-11-25

Family

ID=9366698

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1019900700145A KR0124414B1 (ko) 1988-05-27 1989-05-11 생물학적 활성을 가진 분자의 수송에 유용한 입자성 담체 및 이의 제조방법

Country Status (11)

Country Link
US (1) US5151264A (ko)
EP (1) EP0344040B1 (ko)
JP (1) JP2864033B2 (ko)
KR (1) KR0124414B1 (ko)
AT (1) ATE77741T1 (ko)
CA (1) CA1341259C (ko)
DE (1) DE68901955T2 (ko)
ES (1) ES2054048T3 (ko)
FR (1) FR2631826B1 (ko)
GR (1) GR3005670T3 (ko)
WO (1) WO1989011271A1 (ko)

Families Citing this family (62)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2646777B1 (fr) * 1989-05-12 1993-09-03 Bio Serae Lab Procede de preparation d'un produit particulaire antimicrobien, produit antimicrobien obtenu et applications
US5736371A (en) * 1991-06-04 1998-04-07 A Et S Biovecteurs Biodegradable particulate vector for transporting molecules having biological activity
FR2677249B1 (fr) * 1991-06-04 1995-03-17 Biovecteurs As Vecteur particulaire biodegradable et procede de synthese.
US5534501A (en) * 1991-06-04 1996-07-09 A Et S Biovecteurs Particle for use as a milk fat globule substitute, composition containing same and process for the preparation of said particle
FR2677272B1 (fr) * 1991-06-05 1995-03-03 Biovecteurs As Vecteur particulaire a tropisme selectif, procede de preparation et composition pharmaceutique.
FR2677897B1 (fr) * 1991-06-24 1993-10-01 Oreal Procede de preparation de particules submicroniques en presence de vesicules lipidiques et compositions correspondantes.
US5336507A (en) * 1992-12-11 1994-08-09 Sterling Winthrop Inc. Use of charged phospholipids to reduce nanoparticle aggregation
FR2702160B1 (fr) * 1993-03-02 1995-06-02 Biovecteurs As Vecteurs particulaires synthétiques et procédé de préparation.
FR2704145B1 (fr) * 1993-04-21 1995-07-21 Pasteur Institut Vecteur particulaire et composition pharmaceutique le contenant.
US5534259A (en) * 1993-07-08 1996-07-09 Liposome Technology, Inc. Polymer compound and coated particle composition
US5571531A (en) * 1994-05-18 1996-11-05 Mcmaster University Microparticle delivery system with a functionalized silicone bonded to the matrix
FR2723849B1 (fr) * 1994-08-31 1997-04-11 Biovector Therapeutics Sa Procede pour augmenter l'immunogenicite, produit obtenu et composition pharmaceutique
US5635487A (en) * 1994-12-29 1997-06-03 Wolff; Jon A. Amphipathic, micellar delivery systems for biologically active polyions
US5498705A (en) * 1995-02-22 1996-03-12 Kimberly-Clark Corporation Modified polysaccharides having improved absorbent properties and process for the preparation thereof
FR2742357B1 (fr) * 1995-12-19 1998-01-09 Rhone Poulenc Rorer Sa Nanoparticules stabilisees et filtrables dans des conditions steriles
US5776490A (en) * 1996-01-26 1998-07-07 The Center For Innovative Technology Complex protein-walled microcapsules containing lipid-walled microcapsules and method for producing same
US6344202B1 (en) * 1996-07-12 2002-02-05 University Of Manitoba DNA immunization against chlaymdia infection
FR2753902B1 (fr) * 1996-09-27 1999-04-02 Ioualalen Karim Nouveau type de matrice ionique biodegradable de polarite interne modulable a polymere greffe
FR2754828B1 (fr) * 1996-10-23 1998-12-24 Univ Toulouse Structure membranaire artificielle, procede et polymere pour sa preparation, procede de preparation de ce polymere, particule et film comprenant cette structure
US6096291A (en) * 1996-12-27 2000-08-01 Biovector Therapeutics, S.A. Mucosal administration of substances to mammals
FR2757876B1 (fr) * 1996-12-27 1999-04-09 Biovector Therapeutics Sa Conjuges d'un vecteur particulaire et d'oligonucleotides, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques les contenant
US5961990A (en) * 1997-05-02 1999-10-05 Kobo Products S.A.R.L. Cosmetic particulate gel delivery system and method of preparing complex gel particles
US6319507B1 (en) 1997-05-02 2001-11-20 Kobo Products, Inc. Agar gel bead composition and method
IL138841A (en) 1998-04-24 2005-09-25 Basf Corp Composition in the form of extruded granules containing an organosilicone surfactant and an active ingredient
ATE252114T1 (de) * 1999-01-25 2003-11-15 Ecosynthetix Inc Nanopartikel auf der basis von biopolymer
US6395714B1 (en) 1999-02-24 2002-05-28 Aventis Pasteur Limited Expressing gp140 fragment of primary HIV-1 isolate
US6811783B1 (en) * 1999-09-07 2004-11-02 Aventis Pasteur Limited Immunogenic compositions for protection against chlamydial infection
AU2023401A (en) * 1999-12-01 2001-06-12 Natco Pharma Limited A rapid acting freeze dired oral pharmaceutical composition for treating migraine
US20030072807A1 (en) * 2000-12-22 2003-04-17 Wong Joseph Chung-Tak Solid particulate antifungal compositions for pharmaceutical use
US7193084B2 (en) * 2000-12-22 2007-03-20 Baxter International Inc. Polymorphic form of itraconazole
US6951656B2 (en) * 2000-12-22 2005-10-04 Baxter International Inc. Microprecipitation method for preparing submicron suspensions
US20040022862A1 (en) * 2000-12-22 2004-02-05 Kipp James E. Method for preparing small particles
US8067032B2 (en) * 2000-12-22 2011-11-29 Baxter International Inc. Method for preparing submicron particles of antineoplastic agents
US20050048126A1 (en) 2000-12-22 2005-03-03 Barrett Rabinow Formulation to render an antimicrobial drug potent against organisms normally considered to be resistant to the drug
US6869617B2 (en) * 2000-12-22 2005-03-22 Baxter International Inc. Microprecipitation method for preparing submicron suspensions
US6977085B2 (en) * 2000-12-22 2005-12-20 Baxter International Inc. Method for preparing submicron suspensions with polymorph control
US6884436B2 (en) * 2000-12-22 2005-04-26 Baxter International Inc. Method for preparing submicron particle suspensions
US9700866B2 (en) 2000-12-22 2017-07-11 Baxter International Inc. Surfactant systems for delivery of organic compounds
US20040126900A1 (en) * 2001-04-13 2004-07-01 Barry Stephen E High affinity peptide- containing nanoparticles
US20030108585A1 (en) * 2001-05-04 2003-06-12 Roe R. Michael Polymer conjugates of insecticidal peptides or nucleic acids or insecticides and methods of use thereof
CA2446215A1 (en) * 2001-05-04 2002-11-14 North Carolina State University Polymer conjugates of insecticidal peptides or nucleic acids and methods of use thereof
US20060003012A9 (en) * 2001-09-26 2006-01-05 Sean Brynjelsen Preparation of submicron solid particle suspensions by sonication of multiphase systems
CA2461349C (en) 2001-09-26 2011-11-29 Baxter International Inc. Preparation of submicron sized nanoparticles via dispersion and solvent or liquid phase removal
US7112340B2 (en) 2001-10-19 2006-09-26 Baxter International Inc. Compositions of and method for preparing stable particles in a frozen aqueous matrix
EP1620078A2 (en) * 2003-05-02 2006-02-01 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Biodegradable nanoparticles comprising an aminoglycoside and a polymer like a polysaccharide
US7166305B2 (en) * 2003-06-11 2007-01-23 Mgp Ingredients, Inc. Polyvalent metal-substituted starch products
US6809197B1 (en) 2003-06-11 2004-10-26 Mgp Ingredients, Inc. Emulsion stabilizing starch products
WO2005027873A2 (en) * 2003-06-20 2005-03-31 Alnis Biosciences, Inc. Therapeutic aminoglycoside-containing hydrogel nanoparticles
EP1674081A1 (de) 2004-12-23 2006-06-28 KTB Tumorforschungsgesellschaft mbH Herstellung von lipidbasierten Nanopartikeln unter Einsatz einer dualen asymmetrischen Zentrifuge
JP2006248978A (ja) * 2005-03-10 2006-09-21 Mebiopharm Co Ltd 新規なリポソーム製剤
DE102005037844A1 (de) * 2005-08-04 2007-04-05 Intendis Gmbh Wasserfreies Mehr-Phasen-Gel-System
US8865197B2 (en) * 2005-09-06 2014-10-21 Israel Oceanographic And Limnological Research Ltd. Food formulation for aquatic animals with integrated targeted delivery of bioactive agents
US20070128247A1 (en) * 2005-12-01 2007-06-07 Kato Yasushi P Method for Ionically Cross-Linking Polysaccharide Material for Thin Film Applications and Products Produced Therefrom
KR100792557B1 (ko) * 2006-04-05 2008-01-09 한남대학교 산학협력단 나노 캡슐화를 이용하여 제조된 지질 핵 및 고분자 쉘구조를 갖는 단백질 약물 전달용 나노 미립구
WO2008130382A2 (en) 2006-10-31 2008-10-30 East Carolina University Fusion proteins comprising an anti -inflammatory cytokine and an antigen for treatment of immune disorders
US8426467B2 (en) 2007-05-22 2013-04-23 Baxter International Inc. Colored esmolol concentrate
US8722736B2 (en) 2007-05-22 2014-05-13 Baxter International Inc. Multi-dose concentrate esmolol with benzyl alcohol
CA2757287C (en) 2009-03-31 2019-09-10 East Carolina University Cytokines and neuroantigens for treatment of immune disorders
US9801954B2 (en) 2013-11-05 2017-10-31 Arizona Board Of Regents On Behalf Of Arizona State University Lipid substitution on aminoglycoside based polymers: plasmid delivery, anticancer drug delivery and transgene expression
WO2016130928A1 (en) 2015-02-12 2016-08-18 Arizona Board Of Regents On Behalf Of Arizona State University Aminoglycoside hydrogel microbeads and macroporous gels with chemical crosslink, method of preparation and use thereof
WO2017058923A1 (en) 2015-09-28 2017-04-06 East Carolina University Aluminum based adjuvants for tolerogenic vaccination
CN116063687B (zh) * 2021-11-01 2024-05-07 中国石油化工股份有限公司 一种疏水石英砂及其制备方法和应用

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3242051A (en) * 1958-12-22 1966-03-22 Ncr Co Coating by phase separation
GB8601100D0 (en) * 1986-01-17 1986-02-19 Cosmas Damian Ltd Drug delivery system
FR2596399B1 (fr) * 1986-03-28 1988-09-02 Univ Rennes Nanoparticules a base de polymere ou copolymere methacrylique, procede de preparation, et application comme vecteur de medicament

Also Published As

Publication number Publication date
FR2631826A1 (fr) 1989-12-01
EP0344040B1 (fr) 1992-07-01
ES2054048T3 (es) 1994-08-01
FR2631826B1 (fr) 1992-06-19
WO1989011271A1 (fr) 1989-11-30
GR3005670T3 (ko) 1993-06-07
DE68901955T2 (de) 1993-02-04
JP2864033B2 (ja) 1999-03-03
DE68901955D1 (de) 1992-08-06
US5151264A (en) 1992-09-29
EP0344040A1 (fr) 1989-11-29
KR900701256A (ko) 1990-12-01
CA1341259C (fr) 2001-06-19
JPH04500662A (ja) 1992-02-06
ATE77741T1 (de) 1992-07-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR0124414B1 (ko) 생물학적 활성을 가진 분자의 수송에 유용한 입자성 담체 및 이의 제조방법
US5736371A (en) Biodegradable particulate vector for transporting molecules having biological activity
KR100317751B1 (ko) 합성미립벡터및그제조방법
US4636381A (en) Coated ubidecarenone-containing liposome
JP3003045B2 (ja) 粒子状抗菌物質の製造方法および得られた抗菌物質
JP2003517998A (ja) ナノカプセル及びその製造方法
JPH06500795A (ja) 選択的トロピズムを有する粒状物ベクター、その製造法及びその製薬学的組成物
AU2788689A (en) Polyene macrolide pre-liposomal powders
CN112876578B (zh) 靶向肿瘤相关成纤维细胞的两亲性葡聚糖衍生物载体及其药学组合物的制备和应用
CN109350598B (zh) 糖-聚乙二醇-dspe偶联化合物及其制备方法和应用
CN110478331A (zh) 一种载药细菌外膜囊泡及其制备方法和应用
JPH06500570A (ja) 生分解性粒状ベクター及び合成法
US4994496A (en) Use of milk globules as carriers for drugs
CN114146188B (zh) 一种修饰型LMSNs纳米药物载体的制备方法
JP3759759B2 (ja) リポソームおよび薬物運搬体
US5043107A (en) Preparation small unilamellar vesicles including polyene antifungal antibiotics
JP3620059B2 (ja) 反応性小胞体、形成剤および機能性物質固定化小胞体
CN114099692A (zh) 一种抗菌肽-细胞膜复合物、制备方法和应用
JP2705175B2 (ja) 低毒性薬剤‐脂質系
JP3509142B2 (ja) 反応性リポソームおよび形成剤
KR100799657B1 (ko) ｐＨ에 민감한 면역리포좀
Trukhachev et al. Clinical and therapeutic efficacy of biodegradable nanostructures in experimental infections
JP3575037B2 (ja) 反応性小胞体および形成剤
WO1993002709A1 (en) Receptor conjugates for targeting drugs and other agents
CN115814107A (zh) 一种具备骨靶向的治疗骨质疏松症的纳米粒

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
AMND Amendment
N231 Notification of change of applicant
E902 Notification of reason for refusal
AMND Amendment
E601 Decision to refuse application
J2X1 Appeal (before the patent court)

Free format text: APPEAL AGAINST DECISION TO DECLINE REFUSAL

Free format text: TRIAL NUMBER: 1997201001004; APPEAL AGAINST DECISION TO DECLINE REFUSAL

B701 Decision to grant
GRNT Written decision to grant
FPAY Annual fee payment

Payment date: 20060925

Year of fee payment: 10

LAPS Lapse due to unpaid annual fee