JPWO2021207669A5

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Publication number: JPWO2021207669A5
Application number: JP2022561460A
Authority: JP
Publication date: 2024-04-19

Claims

第１のモノマー構築物および第２のモノマー構築物を含む活性化可能サイトカイン構築物（ＡＣＣ）であって、
（ａ）前記第１のモノマー構築物は、第１の成熟サイトカインタンパク質（ＣＰ１）、第１の切断可能部分（ＣＭ１）、および第１のダイマー化ドメイン（ＤＤ１）を含み、
前記ＣＭ１は、前記ＣＰ１と前記ＤＤ１の間に配置され；および
（ｂ）前記第２のモノマー構築物は、第２の成熟サイトカインタンパク質（ＣＰ２）、第２の切断可能部分（ＣＭ２）、および第２のダイマー化ドメイン（ＤＤ２）を含み、
前記ＣＭ２は、前記ＣＰ２と前記ＤＤ２の間に配置され；または
（ａ）前記第１のモノマー構築物は、第１の成熟サイトカインタンパク質（ＣＰ１）、第１のダイマー化ドメイン（ＤＤ１）を含み、および
（ｂ）前記第２のモノマー構築物は、第２の成熟サイトカインタンパク質（ＣＰ２）、切断可能部分（ＣＭ）、および第２のダイマー化ドメイン（ＤＤ２）を含み、前記ＣＭは、前記ＣＰ２と前記ＤＤ２の間に配置され、前記ＣＭは、プロテアーゼの基質として機能し、または
（ａ）前記第１のモノマー構築物は、第１の成熟サイトカインタンパク質（ＣＰ１）、切断可能部分（ＣＭ）、および第１のダイマー化ドメイン（ＤＤ１）を含み、前記ＣＭは、前記ＣＰ１と前記ＤＤ１の間に配置され、および
（ｂ）前記第２のモノマー構築物は、第２の成熟サイトカインタンパク質（ＣＰ２）、および第２のダイマー化ドメイン（ＤＤ２）を含み、
前記ＣＭは、プロテアーゼの基質として機能し、または
（ａ）前記第１のモノマー構築物は、第１の成熟サイトカインタンパク質（ＣＰ１）、および第１のダイマー化ドメイン（ＤＤ１）を含み、および
（ｂ）前記第２のモノマー構築物は、第２の成熟サイトカインタンパク質（ＣＰ２）、および第２のダイマー化ドメイン（ＤＤ２）を含み、前記ＣＰ１、前記ＣＰ２、またはＣＰ１およびＣＰ２の両方は、プロテアーゼの基質として機能するアミノ酸配列を含み、
さらに（ｃ）前記ＤＤ１および前記ＤＤ２は、相互に結合しそれにより前記第１のモノマー構築物および前記第２のモノマー構築物のダイマーを形成し、および
さらに（ｄ）前記少なくとも１つのＣＰ１および／またはＣＰ２活性の対照レベルに比べて少なくとも１つのＣＰ１および／またはＣＰ２活性の低減されたレベルを有することを特徴とする、
活性化可能サイトカイン構築物（ＡＣＣ）。
前記第１のモノマー構築物が、前記ＣＰ１、前記ＣＭ１、および前記ＤＤ１を含む第１のポリペプチドを含む、かつ／または
前記第２のモノマー構築物が、前記ＣＰ２、前記ＣＭ２、および前記ＤＤ２を含む第２のポリペプチドを含む、請求項１に記載のＡＣＣ。
前記ＤＤ１および前記ＤＤ２が、１対のＦｃドメイン；ヒトＩＬ－１５受容体のアルファ鎖（ＩＬ１５Ｒα）由来のスシドメインと可溶性ＩＬ－１５；バルナーゼとバルンスター；ＰＫＡとＡＫＡＰ；変異ＲＮアーゼＩフラグメントをベースにしたアダプター／ドッキングタグモジュール；エピトープとｓｄＡｂ；エピトープとｓｃＦｖ；およびタンパク質シンタキシン、シナプトタグミン、シナプトブレビン、およびＳＮＡＰ２５の相互作用に基づくＳＮＡＲＥモジュール、抗原結合ドメインとエピトープからなる群より選択される対である、請求項１～２のいずれか１項またはこれらの組み合わせに記載のＡＣＣ。
前記ＤＤ１および前記ＤＤ２が、１対のＦｃドメインである、請求項３に記載のＡＣＣ。
前記ＣＰ１および前記ＣＰ２が、同じである、請求項１～４のいずれか１項またはこれらの組み合わせに記載のＡＣＣ。
前記ＣＰ１および／または前記ＣＰ２が、インターフェロンである、または任意選択で、
前記ＣＰ１および前記ＣＰ２が、インターフェロンである、または任意選択で、
前記ＣＰ１および／または前記ＣＰ２が、インターロイキンを含む、
請求項１～４のいずれか１項またはこれらの組み合わせに記載のＡＣＣ。
前記第１のモノマー構築物が、少なくとも１つのリンカーを含む、または任意選択で、
前記少なくとも１つのリンカーが、前記ＣＰ１と前記ＣＭ１の間に配置されるリンカーＬ１および／または前記ＣＭ１と前記ＤＤ１の間に配置されるリンカーＬ２である、
請求項１～６のいずれか１項またはこれらの組み合わせに記載のＡＣＣ。
前記第２のモノマー構築物が、少なくとも１つのリンカーを含む、または任意選択で、
前記少なくとも１つのリンカーが、前記ＣＰ２と前記ＣＭ２の間に配置されるリンカーＬ３および／または前記ＣＭ２と前記ＤＤ２の間に配置されるリンカーＬ４である、
請求項１～７のいずれか１項またはこれらの組み合わせに記載のＡＣＣ。
前記第１のモノマー構築物が、リンカーＬ１を含みかつ前記第２のモノマー構築物が、リンカーＬ３を含み、かつ任意選択で、
Ｌ１およびＬ３が、同じである、
請求項８に記載のＡＣＣ。
前記第２のモノマー構築物が、リンカーＬ２を含みかつ前記第２のモノマー構築物が、リンカーＬ４を含み、かつ任意選択で、
Ｌ２およびＬ４が、同じである、
請求項８～９のいずれか１項に記載のＡＣＣ。
各リンカーが、１アミノ酸～約１５アミノ酸の全長を有する、または任意選択で、
各リンカーが、少なくとも５アミノ酸の全長を有する、
請求項８～１０のいずれか１項に記載のＡＣＣ。
前記第１のモノマー構築物が、前記ＣＰ１、前記ＣＭ１、および、前記ＣＭ１のＣ末端に直接または間接的に連結される、前記ＤＤ１を、ＮからＣ末端方向で含む、または任意選択で、
前記第１のモノマー構築物が、前記ＣＰ１、前記ＣＭ１、および、前記ＣＭ１のＮ末端に直接または間接的に連結される、前記ＤＤ１を、ＣからＮ末端方向で含む、
請求項１～１１のいずれか１項またはこれらの組み合わせに記載のＡＣＣ。
前記第２のモノマー構築物が、前記ＣＰ２、前記ＣＭ２、および、前記ＣＭ２のＣ末端に直接または間接的に連結される、前記ＤＤ２を、ＮからＣ末端方向で含む、または任意選択で、
前記第２のポリペプチドが、前記ＣＰ２、前記ＣＭ２、および、前記ＣＭ２に直接または間接的に連結される、前記ＤＤ２を、ＣからＮ末端方向で含む、
請求項１～１２のいずれか１項またはこれらの組み合わせに記載のＡＣＣ。
前記第１のモノマー構築物が、ＮからＣ末端方向に、前記ＣＰ１、前記ＣＭ１、および前記ＤＤ１を含み、前記ＣＰ１および前記ＣＭ１が、相互に直接に隣接し、前記ＣＭ１および前記ＤＤ１が、相互に直接に隣接し、前記ＣＭ１が、１０アミノ酸以下のペプチドであり、前記第２モノマー構築物が、前記第１のモノマー構築物と同じであり、かつ前記第１および第２のモノマー構築物が、少なくとも２つのジスルフィド結合を介して相互に共有結合される、請求項１２に記載のＡＣＣ。
前記少なくとも１つのＣＰ１および／またはＣＰ２活性が、表面プラズモン共鳴法を用いて測定されるその同族受容体に対する前記ＣＰ１および／または前記ＣＰ２の結合親和性（Ｋ_Ｄ）である、または任意選択で、
前記少なくとも１つのＣＰ１および／またはＣＰ２活性が、リンパ腫細胞の増殖のレベルである、または任意選択で、
前記少なくとも１つのＣＰ１および／またはＣＰ２活性が、リンパ腫細胞中のＪＡＫ／ＳＴＡＴ／ＩＳＧＦ３経路活性化のレベルである、または任意選択で、
前記少なくとも１つのＣＰ１および／またはＣＰ２活性が、リンパ腫細胞中のＳＥＡＰ産生のレベルである、
請求項１～１４のいずれか１項またはこれらの組み合わせに記載のＡＣＣ。
前記対照レベルに比べて少なくとも１つのＣＰ１および／またはＣＰ２活性における少なくとも２０倍の低減を特徴とする、または任意選択で、
前記対照レベルに比べて少なくとも１つのＣＰ１および／またはＣＰ２活性における少なくとも５０倍の低減を特徴とする、または任意選択で、
前記対照レベルに比べて少なくとも１つのＣＰ１および／またはＣＰ２活性における少なくとも１００倍の低減を特徴とする、または任意選択で、
前記対照レベルに比べて少なくとも１つのＣＰ１および／またはＣＰ２活性における少なくとも５００倍の低減を特徴とする、
請求項１～１５のいずれか１項またはこれらの組み合わせに記載のＡＣＣ。
前記少なくとも１つのＣＰ１および／またはＣＰ２活性の前記対照レベルが、プロテアーゼへの前記ＡＣＣの曝露後の前記ＡＣＣ中の前記ＣＰ１および／またはＣＰ２の活性である、または任意選択で、
前記少なくとも１つのＣＰ１および／またはＣＰ２活性の前記対照レベルが、対応する野生型成熟サイトカインの前記対応するＣＰ１および／またはＣＰ２活性である、または任意選択で、
前記プロテアーゼへの曝露後に切断産物を生成することを特徴とし、前記切断産物が、前記ＣＰ１および／またはＣＰ２の少なくとも１つの活性を含み、かつ
前記対照レベルが、ＥＣ５０値であり、かつＥＣ５０（対照レベル）に対するＥＣ５０（切断産物）の比率が、約１０未満、または約９未満、または約８未満、または約７未満、または約６未満、または約５未満、または約４未満、または約３未満、または約２未満、または約１．５未満である、
請求項１～１６のいずれか１項またはこれらの組み合わせに記載のＡＣＣ。
第１のモノマー構築物および第２のモノマー構築物を含む活性化可能サイトカイン構築物（ＡＣＣ）であって、
（ａ）前記第１のモノマー構築物が、第１の成熟サイトカインタンパク質（ＣＰ１）、第１の切断可能部分（ＣＭ１）、および第１のダイマー化ドメイン（ＤＤ１）を含み、
（ｂ）前記第２のモノマー構築物が、第２の成熟サイトカインタンパク質（ＣＰ２）、第２の切断可能部分（ＣＭ２）、および第２のダイマー化ドメイン（ＤＤ２）を含み、
（ｃ）前記第１のモノマー構築物が、ＮからＣ末端方向に、前記ＣＰ１、前記ＣＭ１、および前記ＤＤ１を含むポリペプチドであり、さらに、
（ｉ）前記ＣＰ１および前記ＣＭ１が、相互に直接に隣接し、
（ｉｉ）前記ＣＭ１および前記ＤＤ１が、相互に直接に隣接し、
（ｉｉｉ）前記ＣＭ１が、１０アミノ酸以下を含み、かつプロテアーゼの基質として機能し、
（ｉｖ）前記ＣＰ１が、成熟インターフェロンであり
（ｄ）さらに、
（ｉ）前記第２のモノマー構築物が、前記第１のモノマー構築物と同じであり、
（ｉｉ）前記第１のおよび第２のモノマー構築物が、少なくとも１つのジスルフィド結合を介して相互に共有結合され、および
（ｉｉｉ）前記ＤＤ１およびＤＤ２が、１対のヒトＩｇＧＦｃドメインであり、
（ｅ）前記ＤＤ１および前記ＤＤ２が、相互に結合しそれにより前記第１のモノマー構築物および前記第２のモノマー構築物のダイマーを形成し、および
（ｆ）対応する対照インターフェロンに比べて低減されたレベルのインターフェロン活性を有することを特徴とする、
活性化可能サイトカイン構築物（ＡＣＣ）。
第１のモノマー構築物および第２のモノマー構築物を含む活性化可能サイトカイン構築物（ＡＣＣ）であって、
（ａ）前記第１のモノマー構築物が、第１の成熟サイトカインタンパク質（ＣＰ１）、第１の切断可能部分（ＣＭ１）、および第１のダイマー化ドメイン（ＤＤ１）を含み、
（ｂ）前記第２のモノマー構築物が、第２の成熟サイトカインタンパク質（ＣＰ２）、第２の切断可能部分（ＣＭ２）、および第２のダイマー化ドメイン（ＤＤ２）を含み、
（ｃ）前記第１のモノマー構築物が、ＮからＣ末端方向に、前記ＣＰ１、前記ＣＭ１、および前記ＤＤ１を含むポリペプチドであり、さらに、
（ｉ）前記ＣＰ１および前記ＣＭ１が、相互に直接に隣接し、
（ｉｉ）前記ＣＭ１および前記ＤＤ１が、相互に直接に隣接し、
（ｉｉｉ）前記ＣＰ１が、配列番号１と少なくとも８５％同一である配列を含み、
（ｉｖ）前記ＣＭ１が、配列番号１００と少なくとも８５％同一である配列を含み、
（ｄ）さらに、
（ｉ）前記第２のモノマー構築物が、前記第１のモノマー構築物と同じであり、
（ｉｉ）前記第１のおよび第２のモノマー構築物が、少なくとも１つのジスルフィド結合を介して相互に共有結合され、および
（ｉｉｉ）前記ＤＤ１およびＤＤ２が、１対のヒトＩｇＧ４Ｆｃドメインであり、
（ｅ）前記ＤＤ１および前記ＤＤ２が、相互に結合しそれにより前記第１のモノマー構築物および前記第２のモノマー構築物のダイマーを形成し、および
（ｆ）ペグ化インターフェロンα２ｂのインターフェロンα活性に比べて低減されたレベルのインターフェロン活性を有することを特徴とする、
活性化可能サイトカイン構築物（ＡＣＣ）。
１２アミノ酸以下を含むリンキング領域を含む、または任意選択で、前記リンキング領域が７～１２アミノ酸を含む、または任意選択で、前記リンキング領域が７アミノ酸を含む、請求項１～１９のいずれか１項またはこれらの組み合わせに記載のＡＣＣ。
請求項１～２０のいずれか１項またはこれらの組み合わせに記載のＡＣＣを含む組成物。
医薬組成物である、請求項２１に記載の組成物。
癌を治療するための薬剤の製造における、請求項１～２０のいずれか１項またはこれらの組み合わせに記載のＡＣＣまたは請求項２１または２２に記載の組成物の使用。
請求項１～２０のいずれか１項またはこれらの組み合わせに記載のＡＣＣのＣＰ１およびＣＭ１を含むポリペプチドをコードする核酸であって、任意選択で、
前記ポリペプチドが、請求項１～２０のいずれか１項またはこれらの組み合わせに記載のＤＤ１をさらに含む、
核酸。
請求項１～２０のいずれか１項またはこれらの組み合わせに記載のＡＣＣのＣＰ２およびＣＭ２を含むポリペプチドをコードする核酸であって、任意選択で、
前記ポリペプチドが、請求項１～２０のいずれか１項またはこれらの組み合わせに記載のＤＤ２をさらに含む、
核酸。
請求項２４～２５のいずれか１項またはこれらの組み合わせに記載の核酸を含むベクターであって、任意選択で、発現ベクターである、ベクター。
請求項２４～２５のいずれか１項またはこれらの組み合わせに記載の核酸または請求項２６に記載のベクターを含む細胞。
ＡＣＣを製造するのに十分な条件下にて液体培地中で請求項２７に記載の細胞を培養すること；および
前記細胞または前記液体培地から前記ＡＣＣを回収すること、
を含むＡＣＣを製造する方法。
前記細胞または前記液体培地から回収された前記ＡＣＣを単離すること
をさらに含み、任意選択で、
単離されたＡＣＣを医薬組成物へと処方することをさらに含む、
請求項２８に記載の方法。