JPWO2020185846A5 - - Google Patents

Claims (22)

1. ２本鎖核酸の検出方法であって、
   （Ａ）２本鎖核酸を１つ以上含む細胞を含む試料を、標的プローブセットと接触させることであって、前記標的プローブセットが、標的２本鎖核酸の第１の鎖に特異的にハイブリダイゼーションする第１のプローブと、前記２本鎖核酸の第２の鎖に特異的にハイブリダイゼーションする第２のプローブを含む標的プローブ対を含む、前記接触させることと、
   （Ｂ）その試料と、前記第１の標的プローブに対する結合部位と、前記第２の標的プローブに対する結合部位と、増幅剤に対する複数の結合部位を含むプレ増幅剤とを接触させることと、
   （Ｃ）その試料を複数の増幅剤と接触させることであって、前記増幅剤が、前記プレ増幅剤に対する結合部位と、標識プローブに対する複数の結合部位を含む、前記接触させることと、
   （Ｄ）その試料を複数の標識プローブと接触させることであって、前記標識プローブが、標識と、前記増幅剤に対する結合部位を含む、前記接触させることと、
   （Ｅ）前記標的２本鎖核酸に結合した前記標識プローブを検出することによって、前記標的２本鎖核酸を検出することと、
   を含む前記方法。
2. 前記標的プローブセットが、同じ標的核酸に特異的にハイブリダイゼーションする標的プローブ対を２対以上含む、請求項１に記載の方法。
3. 前記２本鎖核酸が、ＤＮＡ、ＲＮＡまたはＤＮＡ／ＲＮＡハイブリッドである、請求項１に記載の方法。
4. 前記試料が、組織検体であるか、または組織検体から抽出したものである、請求項１に記載の方法。
5. 前記試料が、血液試料であるか、または血液試料から抽出したものである、請求項１に記載の方法。
6. 前記試料が、細胞学的試料であるか、または細胞学的試料から抽出したものである、請求項１に記載の方法。
7. （Ａ）標的２本鎖核酸を含む少なくとも１つの固定された浸透化細胞と、
   （Ｂ）前記標的２本鎖核酸の第１の鎖に特異的にハイブリダイゼーションした第１のプローブと、前記２本鎖核酸の第２の鎖に特異的にハイブリダイゼーションした第２のプローブを含む標的プローブ対を含む標的プローブセットと、
   （Ｃ）前記第１の標的プローブに対する結合部位と、前記第２の標的プローブに対する結合部位と、増幅剤に対する複数の結合部位を含むプレ増幅剤であって、前記第１の標的プローブと前記第２の標的プローブにハイブリダイゼーションされている前記プレ増幅剤と、
   （Ｄ）前記プレ増幅剤に対する結合部位と、標識プローブに対する複数の結合部位を含む複数の増幅剤であって、前記プレ増幅剤にハイブリダイゼーションされている前記複数の増幅剤と、
   （Ｅ）標識と、前記増幅剤に対する結合部位を含む複数の標識プローブであって、前記増幅剤にハイブリダイゼーションされている前記複数の標識プローブと、
   を含む、固定された浸透化細胞の試料であって、
   前記ハイブリダイゼーションにより、検出可能な標識が前記標的２本鎖核酸上に供給される前記試料。
8. 前記標的プローブセットが、同じ標的核酸に特異的にハイブリダイゼーションする標的プローブ対を２対以上含む、請求項７に記載の試料。
9. 前記２本鎖核酸が、ＤＮＡ、ＲＮＡまたはＤＮＡ／ＲＮＡハイブリッドである、請求項７に記載の試料。
10. 前記試料が、組織検体であるか、または組織検体から抽出したものである、請求項７に記載の試料。
11. 前記試料が、血液試料であるか、または血液試料から抽出したものである、請求項７に記載の試料。
12. 前記試料が、細胞学的試料であるか、または細胞学的試料から抽出したものである、請求項７に記載の試料。
13. （Ａ）標的２本鎖核酸を含む固定された浸透化細胞を少なくとも１つ含む複数の固定された浸透化細胞が上に固定化されているスライドと、
    （Ｂ）前記標的２本鎖核酸の第１の鎖に特異的にハイブリダイゼーションした第１のプローブと、前記２本鎖核酸の第２の鎖に特異的にハイブリダイゼーションした第２のプローブを含む標的プローブ対を含む標的プローブセットと、
    （Ｃ）前記第１の標的プローブに対する結合部位と、前記第２の標的プローブに対する結合部位と、増幅剤に対する複数の結合部位を含むプレ増幅剤であって、前記第１の標的プローブと前記第２の標的プローブにハイブリダイゼーションされている前記プレ増幅剤と、
    （Ｄ）前記プレ増幅剤に対する結合部位と、標識プローブに対する複数の結合部位を含む複数の増幅剤であって、前記プレ増幅剤にハイブリダイゼーションされている前記複数の増幅剤と、
    （Ｅ）標識と、前記増幅剤に対する結合部位を含む複数の標識プローブであって、前記増幅剤にハイブリダイゼーションされている前記複数の標識プローブと、
    を含むスライドであって、
    前記ハイブリダイゼーションにより、検出可能な標識が前記標的２本鎖核酸上に供給される前記スライド。
14. 前記標的プローブセットが、同じ標的核酸に特異的にハイブリダイゼーションする標的プローブ対を２対以上含む、請求項１３に記載のスライド。
15. 前記２本鎖核酸が、ＤＮＡ、ＲＮＡまたはＤＮＡ／ＲＮＡハイブリッドである、請求項１３に記載のスライド。
16. 前記試料が、組織検体であるか、または組織検体から抽出したものである、請求項１３に記載のスライド。
17. 前記試料が、血液試料であるか、または血液試料から抽出したものである、請求項１３に記載のスライド。
18. 前記試料が、細胞学的試料であるか、または細胞学的試料から抽出したものである、請求項１３に記載のスライド。
19. 標的２本鎖核酸を検出するためのキットであって、
    （Ａ）第１の標的プローブに対する結合部位と、第２の標的プローブに対する結合部位と、増幅剤に対する複数の結合部位を含むプレ増幅剤と、
    （Ｂ）前記プレ増幅剤に対する結合部位と、標識プローブに対する複数の結合部位を含む複数の増幅剤と、
    （Ｃ）標識と、前記増幅剤に対する結合部位を含む複数の標識プローブと、
    を含む前記キット。
20. 前記キットが、標的プローブセットを含み、前記標的プローブセットが、標的２本鎖核酸の第１の鎖に特異的にハイブリダイゼーションする第１のプローブと、前記標的２本鎖核酸の第２の鎖に特異的にハイブリダイゼーションする第２のプローブを含む標的プローブ対を含む、請求項１９に記載のキット。
21. 前記標的プローブセットが、同じ標的核酸に特異的にハイブリダイゼーションする標的プローブ対を２対以上含む、請求項２０に記載のキット。
22. 細胞を浸透化するための試薬を少なくとも１つ含む、請求項１９に記載のキット。