JPWO2020049001A5

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Publication number: JPWO2020049001A5
Application number: JP2021512914A
Authority: JP
Publication date: 2022-06-15
Anticipated expiration: 2039-09-03

Claims

ＣＴＬＡ－４に特異的に結合し、イピリムマブと比較してＣＴＬＡ－４陽性細胞に対する改善された枯渇効果を有する抗体分子。
イピリムマブと比較して、ＣＤ４陽性細胞に対する改善された枯渇効果を有する、請求項１に記載の抗体分子。
イピリムマブと比較して、Ｔｒｅｇに対する改善された枯渇効果を有する、請求項１または２に記載の抗体分子。
前記抗体分子が、
（ｉ）ＣＤ１６－１５８Ｖ対立遺伝子をＧＦＰとともに発現するように安定的にトランスフェクトされたＮＫ－９２細胞株を使用して実行されるインビトロＡＤＣＣ試験であって、前記ＡＤＣＣ試験が、以下の連続したステップ：
１）標的細胞としての、健康なドナーの末梢血から単離されたＣＴＬＡ－４陽性細胞、ＣＤ４陽性細胞、またはＴｒｅｇを、提供するステップ、
２）次に、前記標的細胞をＣＤ３／ＣＤ２８およびｒｈＩＬ－２で刺激するステップ、
３）次に、前記標的細胞を前記抗体分子とプレインキュベートし、次いでＮＫ細胞と混合するステップ、
４）次に、前記標的細胞を、１つのＨＥＰＥＳバッファー、ピルビン酸ナトリウム、およびＦＢＳ低ＩｇＧを含有するＲＰＭＩ１６４０＋ＧｌｕｔａＭＡＸ培地でインキュベートするステップ、
５）溶解をフローサイトメトリーによって決定するステップ、
６）ステップ３で前記抗体分子の代わりに使用されるイピリムマブを用いて、ステップ１～５を繰り返すか、または並行して実行するステップ、
７）前記抗体分子の前記溶解の結果をイピリムマブの溶解の結果と比較し、イピリムマブと比較して前記抗体分子の改善された溶解が、前記抗体分子が、ＣＴＬＡ－４陽性細胞、ＣＤ４陽性細胞および／またはＴｒｅｇに対する改善した枯渇効果を有することを示しているステップ、を含む、インビトロＡＤＣＣ試験、ならびに／あるいは
（ｉｉ）ＰＢＭＣ－ＮＯＧ／ＳＣＩＤモデルにおけるインビボ試験であって、前記インビボ試験は以下の連続したステップ：
１）単離されたヒトＰＢＭＣを洗浄し、滅菌ＰＢＳに再懸濁するステップ、
２）ＮＯＧマウスにステップ１）からの細胞懸濁液を静脈内注射するステップ、
３）前記ＮＯＧマウスから脾臓を単離し、単一細胞懸濁液にするステップ、
４）ステップ３）からの前記細胞懸濁液を滅菌ＰＢＳに再懸濁するステップ、
５）ＳＣＩＤマウスにステップ４からの懸濁液を腹腔内注射するステップ、
６）次に、前記ＳＣＩＤマウスを前記抗体分子、イピリムマブ、またはアイソタイプ対照モノクローナル抗体のいずれかで処理するステップ、
７）処理された前記ＳＣＩＤマウスの腹腔内液を収集するステップ、
８）ヒトＴ細胞サブセットを、次のマーカー：ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ２５、ＣＤ１２７を使用してＦＡＣＳによって同定および定量化するステップ、
９）前記抗体分子で処理された前記マウスからの前記Ｔ細胞サブセットの同定および定量化の結果を、イピリムマブで処理された前記マウスからの前記Ｔ細胞サブセットの同定および定量化の結果、ならびにアイソタイプ対照モノクローナル抗体で処理された前記マウスからの前記Ｔ細胞サブセットの同定および定量化の結果と比較し、イピリムマブで処理されたマウスの前記腹腔内液中のＣＴＬＡ－４陽性細胞、ＣＤ４陽性細胞および／またはＴｒｅｇの数と比較して試験対象の前記抗体分子で処理されたマウスの前記腹腔内液中のＣＴＬＡ－４陽性細胞、ＣＤ４陽性細胞、および／またはＴｒｅｇの数が少ないことが、前記抗体分子がイピリムマブと比較してＣＴＬＡ－４陽性細胞、ＣＤ４陽性細胞および／またはＴｒｅｇに対する改善した枯渇効果を有することを示しているステップ、を含む、ＰＢＭＣ－ＮＯＧ／ＳＣＩＤモデルでのインビボ試験、において改善された枯渇が示される場合に、イピリムマブと比較して、ＣＴＬＡ－４陽性細胞、ＣＤ４陽性細胞および／またはＴｒｅｇに対する改善された枯渇効果を有するとみなされる、請求項１～３のいずれか一項に記載の抗体分子。
前記抗体分子が、配列番号３、６、８、１０、１２および１４からなる群から選択される１～６個のＣＤＲを含む抗体分子からなる群から選択される、請求項１～４のいずれか一項に記載の抗体分子。
前記抗体分子が、ＣＤＲ、ＶＨ－ＣＤＲ１、ＶＨ－ＣＤＲ２、ＶＨ－ＣＤＲ３、ＶＬ－ＣＤＲ１およびＶＬ－ＣＤＲ３のうちの１～６個を含む抗体分子からなる群から選択され、
存在する場合、ＶＨ－ＣＤＲ１は、配列番号１５、２２、２９および３５からなる群から選択され、
存在する場合、ＶＨ－ＣＤＲ２は、配列番号１６、２３、３０、および３６からなる群から選択され、
存在する場合、ＶＨ－ＣＤＲ３は、配列番号１７、２４、３１および３７からなる群から選択され、
存在する場合、ＶＬ－ＣＤＲ１は、配列番号１０および３８からなる群から選択され、
存在する場合、ＶＬ－ＣＤＲ２は、配列番号１８、２５、３２および３９からなる群から選択され、
存在する場合、ＶＬ－ＣＤＲ３は、配列番号１９、２６および４０からなる群から選択される、請求項１～５のいずれか一項に記載の抗体分子。
前記抗体分子が、配列番号１５、１６、１７、１０、１８および１９を有する６個のＣＤＲまたは配列番号２２、２３、２４、１０、２５および２６を有する６個のＣＤＲを含む、請求項１～６のいずれか一項に記載の抗体分子。
ＣＴＬＡ－４に特異的に結合する抗体分子であって、前記抗体分子は、配列番号１５、１６、１７、１０、１８および１９を有する６個のＣＤＲまたは配列番号２２、２３、２４、１０、２５および２６を有する６個のＣＤＲを含む、抗体分子。
前記抗体分子が、配列番号２０および２７からなる群から選択される可変重鎖ならびに／または配列番号２１および２８からなる群から選択される可変軽鎖を含む、請求項１～８のいずれか一項に記載の抗体分子。
前記抗体分子が、配列番号４３の重鎖定常領域および／または配列番号４４の軽鎖定常領域を含む、請求項１～９のいずれか一項に記載の抗体分子。
前記抗体分子が、請求項７～１０のいずれか一項に記載の抗体分子と、ＣＴＬＡ－４への結合について競合することができる抗体分子である、請求項１～６のいずれか一項に記載の抗体分子。
前記抗体分子が、フルサイズ抗体、キメラ抗体、一本鎖抗体、Ｆａｂ、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ’、および（Ｆａｂ’）_２からなる群から選択される、請求項１～１１のいずれか一項に記載の抗体分子。
ヒトＣＴＬＡ－４（ｈＣＴＬＡ－４）に、および／またはカニクイザルＣＴＬＡ－４（ｃｍＣＴＬＡ－４）に、および／またはマウスＣＴＬＡ－４（ｍＣＴＬＡ－４）に、結合する、請求項１～１２のいずれか一項に記載の抗体分子。
ヒトＣＤ２８に結合しない、請求項１～１３のいずれか一項に記載の抗体分子。
前記抗体分子が、ヒトＩｇＧ抗体、ヒト化ＩｇＧ抗体、およびヒト由来のＩｇＧ抗体からなる群から選択される、請求項１～１４のいずれか一項に記載の抗体分子。
前記抗体分子がヒトＩｇＧ１抗体である、請求項１５に記載の抗体分子。
前記抗体分子がモノクローナル抗体である、請求項１～１６のいずれか一項に記載の抗体分子。
請求項１～１７のいずれか一項に記載の抗体分子をコードする、単離されたヌクレオチド配列。
配列番号４５～５２からなる群から選択される配列を含む、またはそれからなる、請求項１８に記載の単離されたヌクレオチド配列。
請求項１８または１９に記載のヌクレオチド配列を含む、プラスミド。
請求項１８もしくは１９に記載のヌクレオチド配列、または請求項２０に記載のプラスミドを含む、ウイルス。
腫瘍溶解性ウイルスである、請求項２１に記載のウイルス。
腫瘍溶解性ポックスウイルスである、請求項２１に記載のウイルス。
前記ポックスウイルスが、コードポックスウイルス（Ｃｈｏｒｄｏｐｏｘｖｉｒｉｄａｅ）亜科に属する、請求項２３に記載のウイルス。
前記ポックスウイルスが、ワクシニアウイルス、牛痘ウイルス、カナリア痘ウイルス、エクトロメリアウイルスおよび粘液腫ウイルスからなる群から選択される、オルソポックスウイルス属に属する、請求項２３に記載のウイルス。
前記腫瘍溶解性ウイルスが、チミジンキナーゼ（ＴＫ）および／またはリボヌクレオチドレダクターゼ（ＲＲ）の両方の活性に欠陥があり、配列番号２０および配列番号２１、または配列番号５３および配列番号５４をコードするヌクレオチド配列を含む、ワクシニアウイルスである、請求項２２に記載のウイルス。
前記腫瘍溶解性ワクシニアウイルスが、ＧＭ－ＣＳＦをコードするヌクレオチド配列、をさらに含む、請求項２６に記載のウイルス。
前記腫瘍溶解性ワクシニアウイルスが、ヒトＧＭ－ＣＳＦまたはマウスＧＭ－ＣＳＦ（をコードするヌクレオチド配列、をさらに含む、請求項２６に記載のウイルス。
前記腫瘍溶解性ワクシニアウイルスが、配列番号５５もしくは配列番号５６を有するヒトＧＭ－ＣＳＦ；または配列番号５７もしくは配列番号５８を有するマウスＧＭ－ＣＳＦをコードするヌクレオチド配列、をさらに含む、請求項２６に記載のウイルス。
重鎖をコードするカセットが、Ｊ２Ｒ遺伝子座に挿入され、軽鎖をコードするカセットが、Ｉ４Ｌ遺伝子座に挿入される、請求項２１～２９のいずれか一項に記載のウイルス。
請求項１８もしくは１９に記載のヌクレオチド配列、または請求項２０に記載のプラスミド、または請求項２１～３０のいずれか一項に記載のウイルスを含む、細胞。
医薬において使用するための、請求項１～１７のいずれか一項に記載の抗体分子、請求項１８もしくは１９に記載のヌクレオチド配列、請求項２０に記載のプラスミド、請求項２１～３０のいずれか一項に記載のウイルス、または請求項３１に記載の細胞。
癌の治療において使用するための、請求項１～１７のいずれか一項に記載の抗体分子、請求項１８もしくは１９に記載のヌクレオチド配列、請求項２０に記載のプラスミド、請求項２１～３０のいずれか一項に記載のウイルス、または請求項３１に記載の細胞。
癌の治療において使用するための薬学的組成物の製造のための、請求項１～１７のいずれか一項に記載の抗体分子、請求項１８もしくは１９に記載のヌクレオチド配列、請求項２０に記載のプラスミド、請求項２１～３０のいずれか一項に記載のウイルス、または請求項３１に記載の細胞の使用。
請求項１～１７のいずれか一項に記載の抗体分子、請求項１８もしくは１９に記載のヌクレオチド配列、請求項２０に記載のプラスミド、請求項２１～３０のいずれか一項に記載のウイルスまたは請求項３１に記載の細胞、ならびに任意選択で、薬学的に許容される希釈剤、担体、ビヒクルおよび／または賦形剤を含むかまたはそれらからなる薬学的組成物。
癌の治療において使用するための請求項３５に記載の薬学的組成物。
癌の治療のための薬学的組成物であって、治療有効量の、請求項１～１７のいずれか一項に記載の抗体分子、請求項１８もしくは１９に記載のヌクレオチド配列、請求項２０に記載のプラスミド、請求項２１～３０のいずれか一項に記載のウイルス、または請求項３１に記載の細胞、を含む、薬学的組成物。
前記癌が固形癌である、請求項３３に記載の使用のための抗体分子、請求項３３に記載の使用のためのヌクレオチド配列、請求項３３に記載の使用のためのプラスミド、請求項３３に記載の使用のためのウイルス、請求項３３に記載の使用のための細胞、請求項３４に記載の使用、あるいは請求項３６または３７に記載の薬学的組成物。