JP2020512983A

JP2020512983A - 最適化された多機能性ｔ細胞を含むキメラ受容体ｔ細胞を使用する治療

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Publication number: JP2020512983A
Application number: JP2019553470A
Authority: JP
Inventors: ジョンエム．ロッシ; エイドリアンアイ．ボット
Original assignee: Kite Pharma Inc
Current assignee: Kite Pharma Inc
Priority date: 2017-04-03
Filing date: 2018-04-03
Publication date: 2020-04-30
Also published as: AU2021250858A1; US11357796B2; AU2018250148B2; KR20190130024A; SG11201908980PA; CN110494158A; CA3057880A1; TW201902493A; AU2018250148A1; AR111360A1; IL269629A; US20180296601A1; SG10201912624VA; WO2018187332A1; JP2022166297A; EP3655022A1; US20220265721A1; KR20220144888A

Abstract

本開示は、有効用量のキメラ受容体（例えば、ＣＡＲ又はＴＣＲ）で遺伝子改変されたＴ細胞化学療法を投与することを含む悪性腫瘍の治療方法を提供する。本開示の幾つかの態様は、患者に投与する前に、多機能性Ｔ細胞を含むＴ細胞免疫療法薬の有効用量を決定する方法に関する。【選択図】図１Ａ〜図１Ｃ

Description

関連出願の相互参照
本出願は、２０１７年４月３日付で出願された米国仮特許出願第６２／４８１，００３号の利益を主張し、その開示全体が引用することにより本明細書の一部をなす。

配列表
本出願は、ＡＳＣＩＩフォーマットで電子的に提出された配列表を含み、その全体が引用することにより本明細書の一部をなす。２０１８年４月３日付けで作製された上記ＡＳＣＩＩコピーの名前はＫＰＩ−０１９ＷＯ＿ＳＴ２５．ｔｘｔであり、５６４バイトのサイズである。

ヒト癌は、元は正常細胞で構成され、この正常細胞が遺伝的又はエピジェネティックな変換を受けて異常な癌細胞となる。そうすることで、癌細胞は、正常細胞によって発現されるものとは明確に異なるタンパク質及び他の抗原を発現し始める。これらの異常な腫瘍抗原は、身体の自然免疫系によって、癌細胞を特異的に標的とし死滅させるのに使用され得る。しかしながら、癌細胞は、Ｔリンパ球及びＢリンパ球等の免疫細胞が癌細胞を標的とすることに成功しないように様々な機構を利用する。

ヒトＴ細胞療法は、患者において癌細胞を標的とし、死滅させるために富化又は改変されたヒトＴ細胞に頼っている。Ｔ細胞が特定の癌細胞を標的とし死滅させる能力を増加するため、特定の標的癌細胞へとＴ細胞を方向づけるコンストラクトを発現するようＴ細胞を操作する方法が開発された。特定の腫瘍抗原と相互作用することができる結合ドメインを含む、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）及び操作されたＴ細胞受容体（ＴＣＲ）は、Ｔ細胞が特定の腫瘍抗原を発現する癌細胞を標的とし、死滅させることを可能とする。

多数の免疫プログラムを展開することが可能な個々のＴ細胞を含む注入前の産物中のＣＡＲＴ細胞のサブセットは、ＣＡＲＴ細胞の効力を統制する。ＣＤ１９^＋標的細胞で刺激されたＣＤ４^＋Ｔ細胞及びＣＤ８^＋Ｔ細胞の両方についての多機能性プロファイルは、選択エフェクター分子（グランザイムＢ）、刺激性／免疫制御性サイトカイン（ＩＦＮ−γ、ＩＬ−５）、及びケモカイン（ＩＬ−８、ＭＩＰ−１α）から構成される。ＣＤ８^＋Ｔ細胞とは異なり、ＣＤ４^＋Ｔ細胞のサブセットは、ＩＬ−１７Ａを分泌する多機能性細胞も含んでいた。ＣＤ４^＋Ｔ細胞及びＣＤ８^＋Ｔ細胞の多様性並びに多機能性Ｔ細胞集団への共同関与は、ＣＤ２８共刺激ドメインを有するＣＡＲ産物と一致している。

本明細書に記載されるように、ＣＡＲＴ細胞治療に起因する臨床応答及び毒性は、キメラ受容体Ｔ細胞又は規定のＴ細胞亜集団の多機能性強度インデックス（Polyfunctional Strength Index）（ＰＳＩ）と関連性がある。

本明細書には、Ｔ細胞の多機能性と関連性があり、臨床転帰と相関するキメラ受容体Ｔ細胞（例えば、ＣＡＲＴ細胞又は外因性ＴＣＲ細胞）についての新規の産物特質が記載される。多機能性インデックス（polyfunctionality index）と、コンディショニング駆動性ＩＬ−１５（強力なＴ細胞増殖能を有するサイトカイン）又はｉｎｖｉｖｏでのＣＡＲＴ細胞増殖との組み合わせは、ＣＡＲＴ細胞療法後の臨床転帰と関連している。

ＣＡＲＴ細胞の多機能性のモニタリングは、主要な産物特質として有用であり、Ｔ細胞増殖能等のその他の特性を補完する。幾つかの実施の形態においては、多機能性は、少なくとも製造前のＴ細胞の状態により決定される。幾つかの実施の形態において、多機能性及び臨床転帰は、Ｔ細胞の遺伝的プログラミング、製造方法、又は投与方略を最適化することにより操作することができる。

本開示は、患者に有効用量のキメラ受容体を投与することを含む上記患者における悪性腫瘍を治療する方法であって、１つ以上のキメラ抗原受容体を有する複数のＴ細胞を得ることと、有効量の多機能性ＣＡＲＴ細胞を含む用量の上記Ｔ細胞を投与することとを含む、方法に関する。多機能性Ｔ細胞は、例えばＣＤ８^＋多機能性Ｔ細胞及びＣＤ４^＋多機能性Ｔ細胞を含む。

本方法は、多機能性強度インデックスのパーセンテージを使用して多機能性ＣＡＲＴ細胞の有効パーセンテージを得ることで、所望の用量を決定することを更に含む。多機能性強度インデックスは、所望のパーセントの多機能性Ｔ細胞の決定を、予め決められたサイトカインプロファイルの計算と一緒に組み入れることを含む。予め決められたサイトカインプロファイルは、例えばグランザイムＢ、ＩＦＮ−γ、ＭＩＰ１ａ、パーフォリン、ＴＮＦａ、ＴＮＦｂ、ＧＭＣＳＦ、ＩＬ−２、ＩＬ−５、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−２１、ＣＣＩ−１１、ＩＰ−１０、ＭＩＰ１ｂ、ＲＡＮＴＥＳ、ＩＬ−４、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３、ＩＬ−２２、ＴＧＦ−ｂ１、ＳＣＤ１３７、ＳＣＤ４０Ｌ、ＩＬ−１ｂ、ＩＬ−６、ＩＬ−１７ａ、ＩＬ−１７ｆ、ＭＣＰ−１、及びＭＣＰ−４の少なくとも１つの測定及び選択を含む。幾つかの実施の形態においては、ＣＤ１９を発現する標的細胞で刺激すると、全ての産物細胞の２０％〜２５％は多機能性であった。

キメラ受容体は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）及び／又はＴ細胞受容体（ＴＣＲ）であり得る。

本開示はさらに、患者に、有効パーセンテージの多機能性ＣＡＲＴ細胞を含む有効用量のキメラ抗原受容体及びＴ細胞受容体からなる群から選択されるキメラ受容体を投与することを含む上記患者における悪性腫瘍を治療する方法に関する。本発明はさらに、多機能性ＣＡＲＴ細胞のパーセンテージを調節することを含むキメラ受容体治療における不所望な副作用を軽減する方法、及び多機能性ＣＡＲＴ細胞のパーセンテージを調節することを含むキメラ受容体治療の効力を増大させる方法に関する。

１つの態様においては、本開示は、患者における悪性腫瘍を治療する方法であって、（ａ）１つ以上のキメラ受容体を有する複数のＴ細胞を得ることと、予め決められた量の多機能性Ｔ細胞を含む有効用量の前記Ｔ細胞を前記患者に投与することとを含む、方法を提供する。

幾つかの実施の形態においては、前記予め決められた量の多機能性Ｔ細胞は、１５％超、２０％超、２０％超、２５％超、３０％超の多機能性Ｔ細胞である。

幾つかの実施の形態においては、多機能性Ｔ細胞の前記予め決められた量は、多機能性強度インデックス（ＰＳＩ）を使用して決定される。

幾つかの実施の形態においては、前記多機能性強度インデックス（ＰＳＩ）は、前記多機能性細胞のパーセンテージに、該多機能性細胞により分泌されるタンパク質の平均強度の合計を掛けることによって計算される。

幾つかの実施の形態においては、前記多機能性強度インデックス（ＰＳＩ）は、前記多機能性細胞のパーセンテージに、該多機能性細胞により分泌されるタンパク質の平均蛍光強度の合計を掛けることによって計算される。幾つかの実施の形態においては、前記多機能性強度インデックス（ＰＳＩ）は、２５０超、３５０超、４５０超、又は５５０超である。

幾つかの実施の形態においては、前記多機能性強度インデックス（ＰＳＩ）は、（ｉ）多機能性Ｔ細胞の所望のパーセンテージを決定することと、（ｉｉ）予め決められたサイトカインプロファイルを得ることとを含む方法によって得られる。

幾つかの実施の形態においては、有効用量は、多機能性強度インデックスに、Ｔ細胞の総数を掛けることにより得られたＰＳＩの用量を含む。幾つかの実施の形態においては、前記有効用量は、ＰＳＩ×注入されたＴ細胞の単位において、少なくとも３．５×１０^１０又は少なくとも７．７×１０^１０を含む。

幾つかの実施の形態においては、前記予め決められた量の多機能性Ｔ細胞は、少なくとも２．４×１０^７個又は少なくとも４．２×１０^７個の多機能性Ｔ細胞を含む。

幾つかの実施の形態においては、前記有効用量は、腫瘍負荷と比例して調節される。

幾つかの実施の形態においては、多機能性Ｔ細胞の前記予め決められた量は、コンポジットインデックスを使用して決定される。幾つかの実施の形態においては、前記コンポジットインデックスは、少なくとも２つの評価指標を含む。幾つかの実施の形態においては、前記評価指標は、各評価指標をそれらの各々の標準偏差によって割ることにより正規化される。

幾つかの実施の形態においては、前記コンポジットインデックスは、多機能性強度インデックス（ＰＳＩ）及び／又はＴ細胞注入前の患者のＩＬ−１５の血清レベルを含む。幾つかの実施の形態においては、前記コンポジットインデックスは、前記多機能性強度インデックス（ＰＳＩ）を決定することと、前記Ｔ細胞注入前の患者のＩＬ−１５の血清レベルを測定することとを含む方法によって得られる。幾つかの実施の形態においては、前記コンポジットインデックスは、３超である。

幾つかの実施の形態においては、前記予め決められたサイトカインプロファイルを得ることは、グランザイムＢ、ＩＦＮ−γ、ＭＩＰ１ａ、パーフォリン、ＴＮＦａ、ＴＮＦｂ、ＧＭＣＳＦ、ＩＬ−２、ＩＬ−５、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−２１、ＣＣＩ−１１、ＩＰ−１０、ＭＩＰ１ｂ、ＲＡＮＴＥＳ、ＩＬ−４、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３、ＩＬ−２２、ＴＧＦ−ｂ１、ＳＣＤ１３７、ＳＣＤ４０Ｌ、ＩＬ−１ｂ、ＩＬ−６、ＩＬ−１７ａ、ＩＬ−１７ｆ、ＭＣＰ−１、及びＭＣＰ−４の少なくとも１つを測定することを含む。

幾つかの実施の形態においては、前記予め決められたサイトカインプロファイルを得ることは、グランザイムＢ、ＩＦＮ−γ、ＭＩＰ１ａ、パーフォリン、ＴＮＦａ、ＴＮＦｂ、ＧＭＣＳＦ、ＩＬ−２、ＩＬ−５、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−２１、ＣＣＩ−１１、ＩＰ−１０、ＭＩＰ１ｂ、ＲＡＮＴＥＳ、ＩＬ−４、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３、ＩＬ−２２、ＴＧＦ−ｂ１、ＳＣＤ１３７、ＳＣＤ４０Ｌ、ＩＬ−１ｂ、ＩＬ−６、ＩＬ−１７ａ、ＩＬ−１７ｆ、ＭＣＰ−１、及びＭＣＰ−４の少なくとも１つを選択することを含む。

幾つかの実施の形態においては、前記キメラ受容体は、腫瘍抗原を標的とする。

幾つかの実施の形態においては、前記キメラ受容体は、腫瘍関連表面抗原、例えば５Ｔ４、アルファフェトプロテイン（ＡＦＰ）、Ｂ７−１（ＣＤ８０）、Ｂ７−２（ＣＤ８６）、ＢＣＭＡ、Ｂ−ヒト絨毛膜性生殖腺刺激ホルモン、ＣＡ−１２５、癌胚抗原（ＣＥＡ）、癌胚抗原（ＣＥＡ）、ＣＤ１２３、ＣＤ１３３、ＣＤ１３８、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２３、ＣＤ２４、ＣＤ２５、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３４、ＣＤ４、ＣＤ４０、ＣＤ４４、ＣＤ５６、ＣＤ８、ＣＬＬ−１、ｃ−Ｍｅｔ、ＣＭＶ特異抗原、ＣＳ−１、ＣＳＰＧ４、ＣＴＬＡ−４、ＤＬＬ３、ジシアロガングリオシドＧＤ２、膵管上皮ムチン、ＥＢＶ特異抗原、ＥＧＦＲ変異体ＩＩＩ（ＥＧＦＲｖＩＩＩ）、ＥＬＦ２Ｍ、エンドグリン、エフリンＢ２、上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）、上皮細胞接着分子（ＥｐＣＡＭ）、上皮性腫瘍抗原、ＥｒｂＢ２（ＨＥＲ２／ｎｅｕ）、線維芽細胞関連タンパク質（ｆａｐ）、ＦＬＴ３、葉酸結合タンパク質、ＧＤ２、ＧＤ３、細胞膠腫関連抗原、スフィンゴ糖脂質、ｇｐ３６、ＨＢＶ特異抗原、ＨＣＶ特異抗原、ＨＥＲ１−ＨＥＲ２、ＨＥＲ２−ＨＥＲ３の組み合わせ、ＨＥＲＶ−Ｋ、高分子量黒色腫関連抗原（ＨＭＷ−ＭＡＡ）、ＨＩＶ−１型エンベロープ糖タンパク質ｇｐ４１、ＨＰＶ特異抗原、ヒトテロメラーゼ逆転写酵素、ＩＧＦＩ受容体、ＩＧＦ−ＩＩ、ＩＬ−１１Ｒアルファ、ＩＬ−１３Ｒ−ａ２、インフルエンザウイルス特異抗原、ＣＤ３８、インスリン増殖因子（ＩＧＦＩ）−１、腸カルボキシルエステラーゼ、カッパー鎖、ＬＡＧＡ−１ａ、ラムダ鎖、ラッサ熱ウイルス特異抗原、レクチン反応性ＡＦＰ、系譜特異又は組織特異抗原、例えばＣＤ３、ＭＡＧＥ、ＭＡＧＥ−Ａ１、主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）分子、腫瘍特異的ペプチドエピトープを提示する主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）分子、Ｍ−ＣＳＦ、黒色腫関連抗原、メソテリン、メソテリン、ＭＮ−ＣＡＩＸ、ＭＵＣ−１、ｍｕｔｈｓｐ７０−２、変異ｐ５３、変異ｐ５３、変異ｒａｓ、好中球エラスターゼ、ＮＫＧ２Ｄ、Ｎｋｐ３０、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ｐ５３、ＰＡＰ、プロスターゼ、前立腺特異抗原（ＰＳＡ）、前立腺癌腫瘍抗原−１（ＰＣＴＡ−１）、前立腺特異抗原タンパク質、ＳＴＥＡＰ１、ＳＴＥＡＰ２、ＰＳＭＡ、ＲＡＧＥ−１、ＲＯＲ１、ＲＵ１、ＲＵ２（ＡＳ）、表面接着分子、サバイビング（suviving）及びテロメラーゼ、ＴＡＧ−７２、フィブロネクチンのエクストラドメインＡ（ＥＤＡ）及びエクストラドメインＢ（ＥＤＢ）、並びにテネイシンＣのＡ１ドメイン（ＴｎＣＡ１）、サイログロブリン、腫瘍間質抗原、血管内皮増殖因子受容体−２（ＶＥＧＦＲ２）、ウイルス特異表面抗原、例えばＨＩＶ特異抗原（例えば、ＨＩＶｇｐ１２０）、並びにこれらの表面マーカーの任意の誘導体又は変異体から選択される腫瘍抗原を標的とする。

幾つかの実施の形態においては、前記キメラ受容体は、特異的にＣＤ１９を標的とする。

幾つかの実施の形態においては、前記キメラ受容体は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）である。

幾つかの実施の形態においては、前記キメラ受容体は、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）である。

幾つかの実施の形態においては、前記悪性腫瘍は、固形腫瘍、肉腫、癌腫、リンパ腫、多発性骨髄腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、原発性縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＰＭＢＣ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫（ＦＬ）、形質転換濾胞性リンパ腫、脾辺縁帯リンパ腫（ＳＭＺＬ）、慢性若しくは急性の白血病、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）（非Ｔ細胞ＡＬＬを含む）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、Ｔ細胞リンパ腫、１つ以上のＢ細胞急性リンパ性白血病（「ＢＡＬＬ」）、Ｔ細胞急性リンパ性白血病（「ＴＡＬＬ」）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、Ｂ細胞前リンパ球性白血病、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍、バーキットリンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、毛様細胞白血病、小細胞型若しくは大細胞型濾胞性リンパ腫、悪性リンパ増殖性状態、ＭＡＬＴリンパ腫、マントル細胞リンパ腫、辺縁帯リンパ腫、骨髄異形成及び骨髄異形成症候群、形質芽球性リンパ腫、形質細胞様樹状細胞腫瘍、ワルデンストレームマクログロブリン血症、形質細胞増殖性障害、例えば、無症候性骨髄腫（くすぶり型多発性骨髄腫又は無痛性骨髄腫）、意義不明の単クローン性γグロブリン血症（ＭＧＵＳ）、形質細胞腫（例えば、形質細胞異常増殖症、孤在性骨髄腫、孤在性形質細胞腫、髄外性形質細胞腫、及び多発性形質細胞腫）、全身性アミロイド軽鎖アミロイドーシス、ＰＯＥＭＳ症候群（Ｃｒｏｗ−Ｆｕｋａｓｅ症候群、高月病、及びＰＥＰ症候群としても知られる）、又はそれらの組み合わせである。

幾つかの実施の形態においては、前記悪性腫瘍は、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、原発性縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、高悪性度Ｂ細胞リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、転移性黒色腫、形質転換濾胞性リンパ腫、濾胞性リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、及び多発性骨髄腫である。

幾つかの実施の形態においては、前記悪性腫瘍は、非ホジキンリンパ腫である。

幾つかの実施の形態においては、前記多機能性ＣＡＲＴ細胞は、少なくとも２種のタンパク質又はサイトカインを一度に同時分泌する。

幾つかの実施の形態においては、前記タンパク質又はサイトカインは、グランザイムＢ、ＩＦＮ−γ、ＭＩＰ１ａ、パーフォリン、ＴＮＦａ、ＴＮＦｂ、ＧＭＣＳＦ、ＩＬ−２、ＩＬ−５、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−２１、ＣＣＩ−１１、ＩＰ−１０、ＭＩＰ１ｂ、ＲＡＮＴＥＳ、ＩＬ−４、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３、ＩＬ−２２、ＴＧＦ−ｂ１、ＳＣＤ１３７、ＳＣＤ４０Ｌ、ＩＬ−１ｂ、ＩＬ−６、ＩＬ−１７ａ、ＩＬ−１７ｆ、ＭＣＰ−１、及びＭＣＰ−４の１つ以上を含む。

幾つかの実施の形態においては、前記悪性腫瘍は、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、原発性縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、高悪性度Ｂ細胞リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、転移性黒色腫、形質転換濾胞性リンパ腫、濾胞性リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、及び多発性骨髄腫の少なくとも１つから選択される。

幾つかの実施の形態においては、前記方法は、全体用量を調整することで、多機能性細胞の総数を調節することを更に含む。幾つかの実施の形態においては、前記方法は、全体用量を調整することで、全体の多機能性強度インデックス（ＰＳＩ）を調節することを更に含む。

１つの態様においては、本開示は、患者における悪性腫瘍を治療する方法であって、（ａ）１つ以上のキメラ受容体を有する複数のＴ細胞を得ることと、（ｂ）前記Ｔ細胞の多機能性強度インデックス（ＰＳＩ）を測定することと、（ｃ）予め決められた量の多機能性Ｔ細胞を含む有効用量を準備することと、（ｄ）前記患者に、前記予め決められた量の多機能性Ｔ細胞を含む有効用量を投与することとを含む、方法を提供する。

幾つかの実施の形態においては、多機能性Ｔ細胞の前記予め決められた量を最適化することで、治療に応答性である患者の可能性を高める。

１つの態様においては、本開示は、患者がキメラ受容体治療に応答性であるかどうかを決定する方法であって、（ａ）キメラ受容体を有する複数のＴ細胞を得ることと、（ｂ）前記複数のＴ細胞中の多機能性Ｔ細胞の量を決定することと、（ｃ）患者がキメラ受容体治療に応答性であるかどうかを、前記多機能性Ｔ細胞の量に基づいて決定することとを含む、方法を提供する。

１つの態様においては、本開示は、患者における悪性腫瘍を治療する方法であって、（ａ）１つ以上のキメラ受容体を有する複数のＴ細胞を得ることと、（ｂ）予め決められた量の多機能性Ｔ細胞を含む有効用量を準備することと、（ｃ）前記患者に、前記予め決められた量の多機能性Ｔ細胞を含む有効用量を投与することとを含む、方法を提供する。

幾つかの実施の形態においては、前記予め決められた量の多機能性Ｔ細胞は、１５％超、２０％超、２０％超、２５％超、３０％超の多機能性Ｔ細胞である。多機能性Ｔ細胞の前記予め決められた量は、多機能性強度インデックス（ＰＳＩ）を使用して決定される。

幾つかの実施の形態においては、前記予め決められた量の多機能性Ｔ細胞は、少なくとも２．４×１０^７個又は少なくとも４．２×１０^７個の多機能性Ｔ細胞である。

幾つかの実施の形態においては、前記コンポジットインデックスは、多機能性強度インデックス（ＰＳＩ）及び／又はＴ細胞注入前の患者のＩＬ−１５の血清レベルを含む。幾つかの実施の形態においては、前記コンポジットインデックスは、多機能性強度インデックス（ＰＳＩ）を決定することと、Ｔ細胞注入前の患者のＩＬ−１５の血清レベルを測定することとを含む。

幾つかの実施の形態においては、前記コンポジットインデックスは、３超である。幾つかの実施の形態においては、前記予め決められたサイトカインプロファイルを得ることは、グランザイムＢ、ＩＦＮ−γ、ＭＩＰ１ａ、パーフォリン、ＴＮＦａ、ＴＮＦｂ、ＧＭＣＳＦ、ＩＬ−２、ＩＬ−５、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−２１、ＣＣＩ−１１、ＩＰ−１０、ＭＩＰ１ｂ、ＲＡＮＴＥＳ、ＩＬ−４、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３、ＩＬ−２２、ＴＧＦ−ｂ１、ＳＣＤ１３７、ＳＣＤ４０Ｌ、ＩＬ−１ｂ、ＩＬ−６、ＩＬ−１７ａ、ＩＬ−１７ｆ、ＭＣＰ−１、及びＭＣＰ−４の少なくとも１つを測定することを含む。

幾つかの実施の形態においては、前記キメラ受容体は、腫瘍抗原を標的とする。幾つかの実施の形態においては、前記キメラ受容体は、腫瘍関連表面抗原、例えば５Ｔ４、アルファフェトプロテイン（ＡＦＰ）、Ｂ７−１（ＣＤ８０）、Ｂ７−２（ＣＤ８６）、ＢＣＭＡ、Ｂ−ヒト絨毛膜性生殖腺刺激ホルモン、ＣＡ−１２５、癌胚抗原（ＣＥＡ）、癌胚抗原（ＣＥＡ）、ＣＤ１２３、ＣＤ１３３、ＣＤ１３８、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２３、ＣＤ２４、ＣＤ２５、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３４、ＣＤ４、ＣＤ４０、ＣＤ４４、ＣＤ５６、ＣＤ８、ＣＬＬ−１、ｃ−Ｍｅｔ、ＣＭＶ特異抗原、ＣＳ−１、ＣＳＰＧ４、ＣＴＬＡ−４、ＤＬＬ３、ジシアロガングリオシドＧＤ２、膵管上皮ムチン、ＥＢＶ特異抗原、ＥＧＦＲ変異体ＩＩＩ（ＥＧＦＲｖＩＩＩ）、ＥＬＦ２Ｍ、エンドグリン、エフリンＢ２、上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）、上皮細胞接着分子（ＥｐＣＡＭ）、上皮性腫瘍抗原、ＥｒｂＢ２（ＨＥＲ２／ｎｅｕ）、線維芽細胞関連タンパク質（ｆａｐ）、ＦＬＴ３、葉酸結合タンパク質、ＧＤ２、ＧＤ３、細胞膠腫関連抗原、スフィンゴ糖脂質、ｇｐ３６、ＨＢＶ特異抗原、ＨＣＶ特異抗原、ＨＥＲ１−ＨＥＲ２、ＨＥＲ２−ＨＥＲ３の組み合わせ、ＨＥＲＶ−Ｋ、高分子量黒色腫関連抗原（ＨＭＷ−ＭＡＡ）、ＨＩＶ−１型エンベロープ糖タンパク質ｇｐ４１、ＨＰＶ特異抗原、ヒトテロメラーゼ逆転写酵素、ＩＧＦＩ受容体、ＩＧＦ−ＩＩ、ＩＬ−１１Ｒアルファ、ＩＬ−１３Ｒ−ａ２、インフルエンザウイルス特異抗原、ＣＤ３８、インスリン増殖因子（ＩＧＦＩ）−１、腸カルボキシルエステラーゼ、カッパー鎖、ＬＡＧＡ−１ａ、ラムダ鎖、ラッサ熱ウイルス特異抗原、レクチン反応性ＡＦＰ、系譜特異又は組織特異抗原、例えばＣＤ３、ＭＡＧＥ、ＭＡＧＥ−Ａ１、主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）分子、腫瘍特異的ペプチドエピトープを提示する主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）分子、Ｍ−ＣＳＦ、黒色腫関連抗原、メソテリン、メソテリン、ＭＮ−ＣＡＩＸ、ＭＵＣ−１、ｍｕｔｈｓｐ７０−２、変異ｐ５３、変異ｐ５３、変異ｒａｓ、好中球エラスターゼ、ＮＫＧ２Ｄ、Ｎｋｐ３０、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ｐ５３、ＰＡＰ、プロスターゼ、前立腺特異抗原（ＰＳＡ）、前立腺癌腫瘍抗原−１（ＰＣＴＡ−１）、前立腺特異抗原タンパク質、ＳＴＥＡＰ１、ＳＴＥＡＰ２、ＰＳＭＡ、ＲＡＧＥ−１、ＲＯＲ１、ＲＵ１、ＲＵ２（ＡＳ）、表面接着分子、サバイビング及びテロメラーゼ、ＴＡＧ−７２、フィブロネクチンのエクストラドメインＡ（ＥＤＡ）及びエクストラドメインＢ（ＥＤＢ）、並びにテネイシンＣのＡ１ドメイン（ＴｎＣＡ１）、サイログロブリン、腫瘍間質抗原、血管内皮増殖因子受容体−２（ＶＥＧＦＲ２）、ウイルス特異表面抗原、例えばＨＩＶ特異抗原（例えば、ＨＩＶｇｐ１２０）、並びにこれらの表面マーカーの任意の誘導体又は変異体から選択される腫瘍抗原を標的とする。

幾つかの実施の形態においては、前記キメラ受容体は、特異的にＣＤ１９を標的とする。幾つかの実施の形態においては、前記キメラ受容体は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）である。幾つかの実施の形態においては、前記キメラ受容体は、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）である。

幾つかの実施の形態においては、前記方法は、全体用量を調整することで、多機能性細胞の総数を調節することを更に含む。

幾つかの実施の形態においては、前記方法は、全体用量を調整することで、全体の多機能性強度インデックス（ＰＳＩ）を調節することを更に含む。

１つの態様においては、本開示は、キメラ受容体治療の効力を高める方法であって、多機能性ＣＡＲＴ細胞のパーセンテージを調整することを含む、方法を提供する。

幾つかの実施の形態においては、前記方法は、前記多機能性Ｔ細胞を選択及び単離する工程を更に含む。

１つの態様においては、本開示は、１つ以上のキメラ受容体を有する複数のＴ細胞を含む医薬組成物であって、予め決められた量の多機能性Ｔ細胞を含む、医薬組成物を提供する。幾つかの実施の形態においては、前記組成物は、１５％超の多機能性Ｔ細胞を含む。幾つかの実施の形態においては、前記組成物は、２０％超の多機能性Ｔ細胞を含む。幾つかの実施の形態においては、前記組成物は、２５％超の多機能性Ｔ細胞を含む。

１つの態様においては、本開示は、患者における悪性腫瘍を治療する方法であって、（ａ）前記患者に、予め決められた量の多機能性Ｔ細胞を含む有効用量のキメラ受容体Ｔ細胞免疫療法薬を投与することと、（ｂ）注入後の患者を有害反応の徴候及び症候についてモニタリングすることとを含む、方法を提供する。

１つの態様においては、本開示は、キメラ受容体治療における不所望な副作用を軽減する方法であって、多機能性キメラ受容体Ｔ細胞のパーセンテージを本明細書に記載されるように調節することを含む、方法を提供する。

幾つかの実施の形態においては、多機能性Ｔ細胞の予め決められた量は、重度の有害事象が軽減されるように最適化される。幾つかの実施の形態においては、重度の有害事象は、グレード３＋以上のサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）又はグレード３＋以上の神経毒性（ＮＴ）である。幾つかの実施の形態においては、多機能性Ｔ細胞の予め決められた量は、コンポジットインデックスを使用して決定される。

幾つかの実施の形態においては、コンポジットインデックスは、多機能性強度インデックス（ＰＳＩ）を決定することと、Ｔ細胞注入前の患者のＩＬ−１５の血清レベルを測定することとを含む方法により得られる。幾つかの実施の形態においては、コンポジットインデックスは、多機能性強度インデックス（ＰＳＩ）を決定することと、Ｔ細胞の増殖を測定することとを含む方法により得られるインデックスを含む。幾つかの実施の形態においては、該方法は、多機能性強度インデックス（ＰＳＩ）を使用して、患者がグレード３＋の毒性を生ずる可能性を決定することを含む。

幾つかの実施の形態においては、上記方法は、患者を治療の不所望な副作用の徴候及び症候についてモニタリングすることを含む。幾つかの実施の形態においては、不所望な副作用は、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、神経毒性、過敏反応、重症感染、血球減少症、及び低ガンマグロブリン血症からなる群から選択される。幾つかの実施形態では、不所望な副作用の徴候及び症候は、発熱、低血圧症、頻脈、低酸素症、及び悪寒からなる群から選択され、心不整脈（心房性細動及び心室頻拍を含む）、心停止、心不全、腎不全、毛細血管漏出症候群、低血圧症、低酸素症、臓器毒性、血球貪食性リンパ組織球症／マクロファージ活性化症候群（ＨＬＨ／ＭＡＳ）、発作、脳症、頭痛、振戦、眩暈、失語症、せん妄、不眠症、不安症、アナフィラキシー、発熱性好中球減少症、血小板減少症、好中球減少症、及び貧血症を含む。

図面は、説明を目的とするものにすぎず、限定するものではない。

図１Ａ〜図１Ｆは、Ｔ細胞多機能性を評価するために使用される方法の概略図を示す。図１Ａ及び図１Ｂは、ＣＡＲ（キメラ抗原受容体）コンストラクトの構成及び治療プロトコルの概略図を示す。図１Ｃ及び図１Ｄは、Ｔ細胞刺激後に各単一細胞チャンバーからのタンパク質のＥＬＩＳＡ（酵素結合免疫吸着アッセイ）検出を使用することにより評価された産物のＴ細胞多機能性を示す。図１Ｅ及び図１Ｆは、主要カテゴリー：恒常性／増殖性、炎症性、走化性、制御性、及び免疫エフェクターにわたって３２種の主要な免疫学的に関連する分子の事前に指定されたパネルにおよぶ、多機能性強度インデックス（ＰＳＩ）を通じて測定された多機能性を示す。図１Ｆは、単一細胞のＣＡＲ−Ｔの多機能性（左のパネル）、各ＣＡＲ−Ｔ細胞の分泌強度（中央のパネル）、及び単一細胞のＣＡＲ−Ｔの多機能性強度インデックス（右のパネル）を示す。図２Ａ〜図２Ｄは、ＰＳＩと、客観的応答（ＯＲ）及び治療関連の有害事象（ＡＥ）との関連性を示す図である。単一細胞産物のＰＳＩを、２０人の患者ドナーについて３２種の分泌されたサイトカイン、ケモカイン、及び細胞傷害性分子のパネルのＳＣＢＣプロテオミクス分析を使用することにより決定した。産物を、ＣＡＲＴ細胞のＰＳＩレベルに従って格付けした。ＰＳＩは、示されるようにＯＲ（図２Ａ、図２Ｃ）又はグレード３＋のＣＲＳ（図２Ｂ、図２Ｄ）と関連性があった。結果は、患者−ＰＳＩレベル（図２Ａ、図２Ｂ）及びＰＳＩの平均±ＳＥ（図２Ｃ、図２Ｄ）として示される。全ての統計値を、マン・ホイットニーのＵ検定を使用してコンピュータ計算した。ＡＥ（有害事象）、ＣＲＳ（サイトカイン放出症候群）、ＯＲ（客観的応答）、ＳＣＢＣ（単一細胞バーコードチップ）、ＳＥ（標準誤差）。図３Ａ〜図３Ｆは、ＣＡＲ産物の多機能性とＣＤ１９認識及び臨床転帰との関連性を示す図である。図３Ａは、ＣＤ１９^＋細胞でｅｘｖｉｖｏ刺激されたＣＡＲＴ細胞の単一細胞（左のパネル）及びＣＤ４^＋（中央のパネル）サブセット又はＣＤ８^＋（右のパネル）サブセットの（ＮＧＦＲでトランスフェクションされた）ＣＤ１９⁻細胞と比較したＰＳＩを示す。図３Ｂ〜図３Ｅは、客観的応答と産物のＰＳＩ、産物とＣＤ１９^＋細胞との共培養物において測定されたＩＦＮ−γ又はフローサイトメトリーにより画定されたＴ細胞サブセットの主要産物との間の関連性を示す。ナイーブＴ細胞、セントラルメモリーＴ細胞（ｃｍ）、エフェクターメモリーＴ細胞（ｅｍ）、及びエフェクターＴ細胞（ｅｆｆ）を、ＣＤ４５ＲＡ及びＣＣＲ７について染色することにより画定した。図３Ｆは、図３Ｂ〜図３Ｅからの個々のｐ値（マン・ホイットニーのＵ検定）が、主要な産物の特質と臨床応答との関連性の強さに対応していることを示す。図４Ａ〜図４Ｄは、療法に対するレスポンダー（Ｒ）とノンレスポンダー（ＮＲ）とを識別する、ＣＤ１９刺激により多機能性産物のＣＤ４^＋Ｔ細胞及びＣＤ８^＋Ｔ細胞を駆動する主要なサイトカインを示す図である。図４Ａ（ＣＤ４^＋）及び図４Ｂ（ＣＤ８^＋）は、３２種の分泌されたサイトカイン、ケモカイン、及び細胞傷害性分子のパネルの単一細胞プロテオミクスを、ＣＡＲＴ細胞で治療された２０人の患者からの産物のＴ細胞に対して行ったことを示している。分析は、全ての産物の細胞に対して、又はＣＤ４^＋Ｔ細胞及びＣＤ８^＋Ｔ細胞を選択して実施した。産物のＴ細胞を、分析の前にまずＣＤ１９を発現する標的細胞又はコントロールのＮＧＦＲ細胞で刺激した。グラフは、全ての細胞、並びに別々のＣＤ４^＋サブセット及びＣＤ８^＋サブセットについてのＣＤ１９刺激の有無によるＰＳＩ（平均±ＳＥ）を示す。各産物のＴ細胞亜集団についての主要なサイトカイン駆動因子も示されている。図４Ｃ（ＩＬ−８、ＩＬ−５、ＩＬ−１７ａ、ＩＦＮ−γ、ＭＩＰ−１α）及び図４Ｄ（ＭＩＰ−１α、ＩＦＮ−γ、ＩＬ−８、グランザイムＢ）は、応答性を有しない患者群とＣＡＲＴ細胞療法に対するＯＲを伴う患者群との間の、サイトカインによる産物のＣＤ４^＋（図４Ｃ）及びＣＤ８^＋（図４Ｄ）Ｔ細胞のＰＳＩプロファイルを示す。モック刺激と比較して上方調節されたＣＤ４サイトカイン及びＣＤ８サイトカインが示される。各サイトカインのＰＳＩレベルは、多機能性単一細胞におけるその平均分泌強度を反映している。図表は、ＣＤ８^＋Ｔ細胞集団及びＣＤ４^＋Ｔ細胞集団における多機能性インデックスに寄与するサイトカインを示す。図５Ａ〜図５Ｅは、ｉｎｖｉｖｏでのＣＡＲＴ細胞増殖又はＣＡＲＴ細胞注入前のコンディショニング駆動性ＩＬ−１５と併せたＰＳＩが、客観的応答（ＯＲ）と相関することを示す図である。ｑＰＣＲにより測定された血液中のＣＡＲＴ細胞レベルは、臨床転帰と相関があった。全体の注入前の産物のＰＳＩ単独（図５Ａ）、血液中の注入後のピークＣＡＲレベル単独（図５Ｂ）、又は産物のＰＳＩとピークＣＡＲレベルとの組み合わせ（図５Ｃ）が、ＯＲと関連して示されている。ＣＡＲＴ細胞注入前（０日目）のＩＬ−１５血清レベル単独（図５Ｄ）又は産物のＰＳＩとの組み合わせ（図５Ｅ）が、ＯＲと関連して示されている。統計値を、マン・ホイットニーのＵ検定を使用してコンピュータ計算した（Ｐ値は、多重性のために調節しなかった）。図６Ａ及び図６Ｂは、単一細胞分析により画定された多機能性ＣＤ４^＋Ｔ細胞亜集団及びＣＤ８^＋Ｔ細胞亜集団を示す図である。機能的サブセットを、ＣＤ４^＋（図６Ａ）Ｔ細胞サブセット及びＣＤ８^＋（図６Ｂ）Ｔ細胞サブセット内での主成分分析により決定した。表示は、多次元空間における対象の２次元表示としての、個々の細胞により産生されたサイトカインのクラスター化に基づく。産生されたサイトカインの類似性により画定される主要な多機能性サブセットは、クラスターとして表され、個々のドットは細胞に対応している。ドットの濃淡は、サイトカイン産生レベルを反映している。各々の主要な集団である、それぞれＣＤ４Ｔ細胞及びＣＤ８Ｔ細胞内で最も一般的に表される主要なサイトカインは、この主成分分析（ｘ軸及びｙ軸上に示される）を編成するために使用され、各クラスターを画定するサイトカインが示されている。全ての免疫学的に関連する細胞の約２０％〜２５％を含む多機能性細胞の度数も表されている。図７Ａ及び図７Ｂは、血液中のＣＡＲＴ細胞レベルと併せたＰＳＩと客観的応答（ＯＲ）との間の関連性（図７Ａ）を示し、又は０日目の血清中のＩＬ−１５とＯＲとの間の関連性（図７Ｂ）を示す図である。血液中のＣＡＲＴ細胞レベルを、ｑＰＣＲによって測定した。ＰＳＩ及びｉｎｖｉｖｏでのＣＡＲＴ細胞増殖を統合するコンポジットインデックスは、応答結果と関連性があった（Ｒ＝応答あり、Ｎ＝応答なし）。全産物のＰＳＩ、ＣＤ４^＋のＰＳＩ、及びＩＬ−１７ＡのＰＳＩインデックスを、全てＣＡＲのピークレベルと併せて評価した。共同のＰＳＩ及び０日目のＩＬ−１５レベルの評価指標を、同様に計算した。統計値を、マン・ホイットニーのＵ検定を使用してコンピュータ計算した（Ｐ値は、多重性のために調節しなかった）。ＰＳＩが、血液中のＣＡＲＴ細胞レベルと関連していないことを示す図である。血液中のＣＡＲＴ細胞レベルはｑＰＣＲにより測定され、ＰＳＩ又は臨床転帰（ＯＲ、グレード３＋のＮＥ又はＣＲＳ）と相関があった。全産物のＰＳＩ、ＣＤ４^＋のＰＳＩ、及びＩＬ−１７ＡのＰＳＩが表示されている。統計分析を、スピアマンの相関及びマン・ホイットニーのＵ検定を使用して実施した。図９Ａ〜図９Ｆは、血液中のＣＡＲＴ細胞レベルと併せたＰＳＩと、グレード３＋の神経毒性（ＮＴ）との間の関連性を示す図である。血液中のＣＡＲＴ細胞レベルは、ｑＰＣＲにより測定され、グレード３＋の有害事象と相関があった。ＰＳＩ及びｉｎｖｉｖｏでのＣＡＲＴ細胞増殖を統合するコンポジットインデックスを作成し、ＮＴ又はＣＲＳとそれぞれ関連付けた。統計値を、マン・ホイットニーのＵ検定を使用してコンピュータ計算した。Ｐ値は、多重性のために調節しなかった。図１０Ａ〜図１０Ｆは、血液中のＣＡＲＴ細胞レベルと併せたＰＳＩと、グレード３＋のサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）との間の関連性を示す図である。血液中のＣＡＲＴ細胞レベルは、ｑＰＣＲにより測定され、グレード３＋の有害事象と相関があった。ＰＳＩ及びｉｎｖｉｖｏでのＣＡＲＴ細胞増殖を統合するコンポジットインデックスを作成し、ＮＥ又はＣＲＳとそれぞれ関連付けた。全産物のＰＳＩ、ＣＤ４^＋のＰＳＩ、及びＩＬ−１７ＡのＰＳＩのインデックスを、全てＣＡＲのピークレベルと併せて評価した。統計値を、マン・ホイットニーのＵ検定を使用してコンピュータ計算した。Ｐ値は、多重性のために調節しなかった。図１１Ａ〜図１１Ｆは、血液中の治療前のＩＬ−１５レベルと併せたＰＳＩと、グレード３＋のＮＥとの間の関連性を示す図である。血液中のＩＬ−１５レベルは、ＥＬＩＳＡにより測定され、グレード３＋のＡＥと相関があった。ＰＳＩ及びＩＬ−１５レベルを統合するコンポジットインデックスを作成し、グレード３＋のＮＥ又はＣＲＳとそれぞれ関連付けた。全産物のＰＳＩ、ＣＤ４^＋のＰＳＩ、及びＩＬ−１７ＡのＰＳＩを、全てＩＬ−１５レベルと併せて評価した。統計値を、マン・ホイットニーのＵ検定を使用してコンピュータ計算した。Ｐ値は、多重性のために調節しなかった。図１２Ａ〜図１２Ｆは、治療前の血液中のＩＬ−１５レベルと併せたＰＳＩと、グレード３＋のＣＲＳとの間の関連性を示す図である。血液中のＩＬ−１５レベルは、ＥＬＩＳＡにより測定され、グレード３＋のＡＥと相関があった。ＰＳＩ及びＩＬ−１５レベルを統合するコンポジットインデックスを作成し、グレード３＋のＮＥ又はＣＲＳとそれぞれ関連付けた。全産物のＰＳＩ、ＣＤ４^＋のＰＳＩ、及びＩＬ−１７ＡのＰＳＩを、全てＩＬ−１５レベルと併せて評価した。統計値を、マン・ホイットニーのＵ検定を使用してコンピュータ計算した。Ｐ値は、多重性のために調節しなかった。ＰＳＩを計算する場合に考慮される要素の一般的な概略図を示す。ＩｓｏＰｌｅｘｉｓＳｉｎｇｌｅ−Ｃｅｌｌ，ＨｉｇｈＭｕｌｔｉｐｌｅｘｉｎｇＥＬＩＳＡＳｙｓｔｅｍを使用した注入前のＣＡＲＴ細胞の多機能性の分析の図を示す。

本開示は、キメラ受容体を有する多機能性の操作されたＴ細胞を有効用量、投与することにより患者における悪性腫瘍を治療する方法に関する。本明細書に記載されるように、操作されたＴ細胞の多機能性を使用することで、臨床応答及び毒性の可能性を決定することができる。幾つかの態様においては、操作された細胞の多機能性を使用することで、患者における悪性腫瘍の治療のための有効用量を調整又は最適化することができる。本明細書に記載されるように、注入前のキメラ受容体産物のＴ細胞の多機能性プロファイルを使用することで、キメラ受容体（例えば、ＣＡＲ又はＴＣＲ）Ｔ細胞療法の臨床転帰に影響を与える有効用量を決定することができる。

キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）Ｔ細胞療法による治療後に、インターロイキン（ＩＬ）−１５上昇及びＣＡＲＴ細胞増殖は、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）の転帰と関連していた。本明細書に記載されるように、ＮＨＬを伴う患者からの注入前のＣＡＲ産物の単一細胞分析により、ＣＡＲ産物がＩＦＮγ、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−８、及びＭＩＰ１ａ等のサイトカイン及びケモカインにより表される多数の免疫プログラムを展開することが可能な多機能性Ｔ細胞サブセットを含むことが裏付けられた。臨床応答と有意に関連する注入前のＣＡＲ産物に適用される事前に指定されたＴ細胞の多機能性強度インデックス（ＰＳＩ）、及びＰＳＩとＣＡＲＴ細胞増殖又は治療前の血清ＩＬ−１５レベルとの組み合わせは追加の有意性を与えた。全産物の細胞集団内で、臨床転帰との関連性は、多機能性ＣＤ４^＋Ｔ細胞ではＣＤ８^＋細胞と比較してより大きかった。グレード３＋のサイトカイン放出症候群は、多機能性Ｔ細胞により影響され、グレード３＋の神経毒性及び抗腫瘍効力の両方は、多機能性ＩＬ−１７Ａ産生Ｔ細胞により影響された。

キメラ受容体（例えば、ＣＡＲ又はＴＣＲ）を発現するＴ細胞の遺伝的リプログラミングは、造血系悪性腫瘍の治療のための新規アプローチを提供する。ＣＤ２８及びＣＤ３ζシグナル伝達ドメインから構成される抗ＣＤ１９ＣＡＲが形質導入されたＴ細胞は、ＣＤ１９特異的にインターフェロン（ＩＦＮ）−γを産生し、原発性白血病細胞を死滅させ、ＣＤ１９標的依存性増殖を起こす。Ｂ細胞悪性腫瘍の抗ＣＤ１９ＣＡＲＴ細胞での治療は、かなりの数の患者において長期寛解をもたらす。この治療は、Ｂ細胞上での内因性ＣＤ１９発現によるＢ細胞形成不全と関連性がある。さらに、抗ＣＤ１９ＣＡＲＴ細胞療法での治療は、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）及び神経学的事象（ＮＥ）を引き起こし得る。

本明細書に記載される方法は、ＣＡＲＴ細胞が、機能的観点から互いに補完する複数の免疫プログラムを展開することにより臨床活動を統制するという驚くべき発見に基づいている。ＣＡＲＴ細胞産物の機能性は、ハイコンテントな単一細胞のマルチプレックスサイトカイン分析を使用することにより決定される。多機能性評価により、ＣＡＲＴ細胞産物（ｉｎｖｉｔｒｏにて抗原で刺激すると２種以上のサイトカインを産生することが可能な産物）中で多機能性Ｔ細胞のサブセットの特定が可能となった。さらに、ＣＡＲＴ細胞産物に適用される事前に指定された多機能強度インデックス（ＰＳＩ）と、ｉｎｖｉｖｏでのＣＡＲＴ細胞の増殖、客観的応答、及び毒性とに関連性がある。ＣＡＲＴ細胞産物内の非常に多機能性のＴ細胞は、臨床転帰と有意に関連性があり、ＩＬ−１７Ａを産生する多機能性ＣＤ４^＋Ｔ細胞のサブセットは、グレード３以上のＮＥと関連性がある。

定義
本発明がより容易に理解されるように、まず特定の用語を以下に定義する。以下の用語及び他の用語に対する更なる定義は、本明細書を通して記載される。

本明細書及び添付の特許請求の範囲で使用される、数量を特定していないもの（the singular forms "a," "an" and "the"）は、文脈より別段の明確な指示がない限り複数の指示対象を含む。

具体的に述べられない又は文脈より明らかでない限り、本明細書で使用される「又は」の用語は「又は」と「及び」の両方を含み、それらを包含すると理解される。

本明細書において使用される場合、「及び／又は」の用語は、２つの指定される特徴又は成分の各々ともう一方とを含む、又はもう一方を含まない具体的な開示として理解される。したがって、本明細書において「Ａ及び／又はＢ」等の句で使用される「及び／又は」の用語は、Ａ及びＢ；Ａ又はＢ；Ａ（単独）；及びＢ（単独）を含むことが意図される。同様に、「Ａ、Ｂ、及び／又はＣ」等の句において使用される「及び／又は」の用語は、Ａ、Ｂ及びＣ；Ａ、Ｂ又はＣ；Ａ又はＣ；Ａ又はＢ；Ｂ又はＣ；Ａ及びＣ；Ａ及びＢ；Ｂ及びＣ；Ａ（単独）；Ｂ（単独）；並びにＣ（単独）の態様の各々を包含することが意図される。

本明細書で使用される「例えば」及び「すなわち」の用語は、限定を意図せずに例として使用されるにすぎず、本明細書において明らかに列挙されるそれらの項目のみを指すものと解釈されるべきではない。

「以上」、「少なくとも」、「それよりも多く」等の用語、例えば「少なくとも１つ」は、限定されないが、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９又は１５０、２００、３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００、１０００、２０００、３０００、４０００、５０００、又は示される値よりも多い値を含むと理解される。また、任意のより大きな数、又はその間の分数も含まれる。

逆に、「以下」の用語は示される値よりも小さい各値を含む。例えば、「１００ヌクレオチド以下」は、１００個、９９個、９８個、９７個、９６個、９５個、９４個、９３個、９２個、９１個、９０個、８９個、８８個、８７個、８６個、８５個、８４個、８３個、８２個、８１個、８０個、７９個、７８個、７７個、７６個、７５個、７４個、７３個、７２個、７１個、７０個、６９個、６８個、６７個、６６個、６５個、６４個、６３個、６２個、６１個、６０個、５９個、５８個、５７個、５６個、５５個、５４個、５３個、５２個、５１個、５０個、４９個、４８個、４７個、４６個、４５個、４４個、４３個、４２個、４１個、４０個、３９個、３８個、３７個、３６個、３５個、３４個、３３個、３２個、３１個、３０個、２９個、２８個、２７個、２６個、２５個、２４個、２３個、２２個、２１個、２０個、１９個、１８個、１７個、１６個、１５個、１４個、１３個、１２個、１１個、１０個、９個、８個、７個、６個、５個、４個、３個、２個、１個及び０個のヌクレオチドを含む。また、任意のより小さな数、又はその間の分数も含まれる。

「複数」、「少なくとも２つ」、「２以上」、「少なくとも第２の」等の用語は、限定されないが、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９又は１５０、２００、３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００、１０００、２０００、３０００、４０００、５０００以上を含むと理解される。また、任意のより大きな数、又はその間の分数も含まれる。

明細書を通して、「含んでいる、含む（comprising）」の文言、又は「含む（comprises）」若しくは「含んでいる（comprising）」等の変化形は、示される要素、整数若しくは工程、又は要素、整数若しくは工程の群を含むことを含意するが、任意の他の要素、整数若しくは工程、又は要素、整数若しくは工程の群を排除しないと理解される。本明細書において「含んでいる、含む」の言葉と共に態様が記載される場合はいつでも、「からなる」及び／又は「から本質的になる」の用語で記載される他の類似の態様も提供されると理解される。

具体的に述べられておらず又は文脈より明らかでない限り、本明細書で使用される「約」の用語は、当業者によって決定される特定の値又は組成に対する許容可能な誤差範囲に含まれる値又は組成を指し、その値又は組成がどのように測定され又は決定されるのか、すなわち測定システムの制限に部分的に依存する。例えば、「約」又は「およそ」は、当該技術分野における１回の実施当たりの１以上の標準偏差の範囲内を意味し得る。「約」又は「およそ」は、最大１０％（すなわち±１０％）の範囲を意味し得る。したがって、「約」は、示される値よりも１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、０．５％、０．１％、０．０５％、０．０１％、又は０．００１％大きい又は小さい範囲に含まれると理解され得る。例えば、約５ｍｇは、４．５ｍｇ〜５．５ｍｇの間の任意の量を含み得る。さらに、特に生物学的なシステム又はプロセスに関して、上記用語は、或る値の最大１０倍又は最大５倍を意味する場合がある。特定の値又は組成が本開示で提供される場合、別段の指示がない限り、「約」又は「およそ」の意味は、その特定の値又は組成に対する許容可能な誤差の範囲に含まれるとされる。

本明細書に記載されるように、任意の濃度範囲、パーセンテージの範囲、比率範囲、又は整数の範囲は、別段の指示がない限り、述べられる範囲に含まれる任意の整数、また適切な場合には、その分数（或る整数の１０分の１、及び１００分の１等）の値を含むものと理解される。

本明細書で使用される単位、接頭辞及び記号は、それらの国際単位系（ＳＩ：Systeme International de Unites）の容認される形態で提示される。数値範囲は、その範囲を規定する数字を含む。

別段の規定がない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語は、この開示が関係する技術分野の当業者によって一般に理解されるのと同じ意味を有する。例えば、Juo, "The Concise Dictionary of Biomedicine and Molecular Biology", 2^nd ed., (2001), CRC Press、"The Dictionary of Cell & Molecular Biology", 5^th ed., (2013), Academic Press、及び"The Oxford Dictionary Of Biochemistry And Molecular Biology", Cammack et al. eds., 2^nd ed, (2006), Oxford University Pressは、この開示で使用される多くの用語の一般的な辞書を当業者に提供する。

「投与すること、投与する（Administering）」は、当業者に知られている様々な方法及び送達システムのいずれかを使用する、被験体に対する薬剤の物理的な導入を指す。本明細書に開示される製剤に対する例示的な投与経路として、静脈内、筋肉内、皮下、腹腔内、脊髄又は他の非経口的な（parenteral：腸管外）投与経路、例えば注射又は点滴による投与経路が挙げられる。本明細書で使用される「非経口投与」の句は、経腸及び局所の投与以外の、通常は注射による投与様式を意味し、限定されないが、静脈内、筋肉内、動脈内、髄腔内、リンパ管内、病巣内、関節腔内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節内、関節腔下、クモ膜下、脊髄内、硬膜外、及び胸骨内の注射及び点滴、また同様にｉｎｖｉｖｏ電気穿孔を含む。幾つかの実施形態では、上記製剤は、非経口的ではない経路、例えば経口で投与される。他の非経口的ではない経路として、局所、表皮、又は粘膜の投与経路、例えば、鼻腔内、経膣的、直腸、舌下又は局所的なものが挙げられる。また、投与は、例えば１回、複数回、及び／又は１以上の延長された期間に亘って行われ得る。

「抗体」（Ａｂ）の用語は、限定されず、抗原に特異的に結合する糖タンパク質免疫グロブリンを含む。一般に、抗体は、ジスルフィド結合によって相互に連結された少なくとも２本の重（Ｈ）鎖及び２本の軽（Ｌ）鎖、又はそれらの抗原結合分子を含み得る。各Ｈ鎖は、重鎖可変領域（本明細書ではＶＨと略記する）及び重鎖定常領域を含む。重鎖定常領域は、３つの定常ドメイン、すなわちＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３を含む。各軽鎖は、軽鎖可変領域（本明細書ではＶＬと略記する）及び軽鎖定常領域を含む。軽鎖定常領域は、１つの定常ドメイン、すなわちＣＬを含む。ＶＨ領域及びＶＬ領域は、フレームワーク領域（ＦＲ）と称されるより保存される領域が介在する、相補性決定領域（ＣＤＲ）と称される超可変性の領域に更に細分され得る。ＶＨ及びＶＬはそれぞれ、アミノ末端からカルボキシ末端にＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、及びＦＲ４の順で並ぶ、３つのＣＤＲ及び４つのＦＲを含む。重鎖及び軽鎖の可変領域は、抗原と相互作用する結合ドメインを含む。Ａｂの定常領域は、免疫系の様々な細胞（例えばエフェクター細胞）及び古典的補体系の第１成分（Ｃ１ｑ）を含む、宿主の組織又は因子に対する免疫グロブリンの結合を媒介し得る。

抗体として、例えば、モノクローナル抗体、組み換えにより生成された抗体、単一特異的抗体、多重特異的抗体（二重特異的抗体を含む）、ヒト抗体、操作された抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体、免疫グロブリン、合成抗体、２本の重鎖分子及び２本の軽鎖分子を含む四量体抗体、抗体軽鎖単量体、抗体重鎖単量体、抗体軽鎖二量体、抗体重鎖二量体、抗体軽鎖−抗体重鎖対、イントラボディ（intrabodies）、抗体融合体（本明細書では「抗体コンジュゲート」と称されることがある）、ヘテロコンジュゲート抗体、単一ドメイン抗体、一価抗体、単鎖抗体又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、ラクダ化抗体、アフィボディ（affybodies）、Ｆａｂフラグメント、Ｆ（ａｂ’）_２フラグメント、ジスルフィド連結Ｆｖ（ｓｄＦｖ）、抗イディオタイプ（抗Ｉｄ）抗体（例えば抗−抗−Ｉｄ抗体を含む）、ミニボディ（minibodies）、ドメイン抗体、合成抗体（本明細書では「抗体模倣物」と称されることがある）、及び上記のいずれかの抗原結合フラグメントが挙げられ得る。幾つかの実施形態では、本明細書に記載される抗体は、ポリクローナル抗体集団を指す。

「抗原結合分子」、「抗原結合部分」又は「抗体フラグメント」は、抗体の抗原結合部（例えばＣＤＲ）を含む任意の分子を指し、この分子は該抗体に由来する。抗原結合分子は、抗原相補性決定領域（ＣＤＲ）を含み得る。抗体フラグメントの例として、限定されないが、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、及びＦｖフラグメント、ｄＡｂ、直鎖抗体、ｓｃＦｖ抗体、並びに抗原結合分子から形成される多重特異性抗体が挙げられる。ペプチボディ（Peptibodies）（すなわち、ペプチド結合ドメインを含むＦｃ融合分子）は、好適な抗原結合分子の別の例である。幾つかの実施形態では、抗原結合分子は腫瘍細胞上の抗原に結合する。幾つかの実施形態では、抗原結合分子は、過剰増殖性疾患（hyperproliferative disease）に関与する細胞上の抗原、又はウイルス若しくは細菌の抗原に結合する。幾つかの実施形態では、抗原結合分子はＣＤ１９に結合する。更なる実施形態では、抗原結合分子は、その１以上の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む、抗原に特異的に結合する抗体フラグメントである。更なる実施形態では、抗原結合分子は単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）である。幾つかの実施形態では、抗原結合分子は、アビマー（avimers）を含む、又はそれからなる。

「抗原」は、免疫応答を誘発する、又は抗体若しくは抗原結合分子によって結合されることが可能な任意の分子を指す。免疫応答は、抗体産生若しくは特定の免疫適格細胞（immunologically-competent cells）の活性化のいずれか、又はそれらの両方を含み得る。当業者は、実質的に全てのタンパク質又はペプチドを含む任意の高分子が抗原としての役割を果たし得ることを容易に理解する。抗原は内因性に発現され得て、すなわちゲノムＤＮＡによって発現され得るか、又は組み換えによって発現され得る。抗原は、癌細胞等の特定の組織に特異的となり得るか、又は広く発現され得る。さらに、より大きな分子のフラグメントが抗原として作用し得る。幾つかの実施形態では、抗原は腫瘍抗原である。

「中和する、中和すること」の用語は、リガンドに結合し、そのリガンドの生物学的効果を妨げる又は減少させる抗原結合分子、ｓｃＦｖ、抗体、又はそのフラグメントを指す。幾つかの実施形態では、抗原結合分子、ｓｃＦｖ、抗体、又はそのフラグメントは、リガンド上の結合部位を直接遮断する、或いは間接的な手段（リガンドの構造の又はエネルギーの変更等）によってリガンドの結合能を変更する。幾つかの実施形態では、抗原結合分子、ｓｃＦｖ、抗体、又はそのフラグメントは、結合されるタンパク質が生体機能を実施するのを妨げる。

「自己」の用語は、後に再導入されることになっているのと同じ個体に由来する任意の材料を指す。例えば、本明細書に記載される操作された自己細胞療法（ｅＡＣＴ（商標））は、患者からのリンパ球の収集を含み、該リンパ球は、その後、例えばＣＡＲコンストラクトを発現するように操作した後、同じ患者に戻される（administered back）。

「同種異系」の用語は、一個体に由来する任意の材料を指し、該材料はその後、同種の別の個体に導入される（例えば同種異系Ｔ細胞移植）。

「形質導入」及び「形質導入された」の用語は、外来ＤＮＡがウイルスベクターによって細胞へと導入されるプロセスを指す（Jones et al., "Genetics: principles and analysis," Boston: Jones & Bartlett Publ. (1998)を参照されたい）。幾つかの実施形態では、ベクターは、レトロウイルスベクター、ＤＮＡベクター、ＲＮＡベクター、アデノウイルスベクター、バキュロウイルスベクター、エプスタイン−バールウイルスベクター、パポバウイルスベクター、ワクシニアウイルスベクター、単純ヘルペスウイルスベクター、アデノウイルス随伴ベクター、レンチウイルスベクター、又はそれらの任意の組み合わせである。

「癌」は、身体における異常な細胞の制御されていない成長を特徴とする、幅広い各種疾患のグループを指す。制御されていない細胞の分裂及び成長は、隣接する組織に侵入して、またリンパ系又は血流によって身体の離れた部分へと転移し得る、悪性腫瘍の形成をもたらす。「癌」又は「癌組織」は、腫瘍を含む場合がある。本明細書に開示される方法によって治療され得る癌の例として、限定されないが、リンパ腫、白血病、骨髄腫、及び他の白血球の悪性腫瘍（leukocyte malignancies）を含む免疫系の癌が挙げられる。幾つかの実施形態では、本明細書に開示される方法は、例えば、骨癌、膵臓癌、皮膚癌、頭頚部癌、皮膚又は眼内の悪性黒色腫、子宮癌、卵巣癌、直腸癌、肛門部の癌、胃癌、精巣癌、子宮癌、卵管癌、子宮内膜癌、子宮頚癌、膣癌、外陰癌、多発性骨髄腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、縦隔原発大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＰＭＢＣ：primary mediastinal large B cell lymphoma）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ：diffuse large B cell lymphoma）、濾胞性リンパ腫（ＦＬ）、形質転換後濾胞性リンパ腫（transformed follicular lymphoma）、脾辺縁帯リンパ腫（ＳＭＺＬ：splenic marginal zone lymphoma）、食道癌、小腸癌、内分泌系の癌、甲状腺癌、副甲状腺の癌、副腎の癌、軟組織の肉腫、尿道癌、陰茎癌、慢性又は急性の白血病、急性骨髄白血病、慢性骨髄白血病（chronic myeloid leukemia）、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）（非Ｔ細胞ＡＬＬを含む）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、幼少期の固形腫瘍、リンパ球性リンパ腫、膀胱癌、腎臓又は尿管の癌、腎盂癌、中枢神経系（ＣＮＳ）の新生物、原発性ＣＮＳリンパ腫、腫瘍血管新生、脊髄軸腫瘍（spinal axis tumor）、脳幹神経膠腫、下垂体腺腫、カポジ肉腫、類表皮癌、扁平上皮癌、Ｔ細胞リンパ腫、石綿によって誘導されるものを含む、環境によって誘導される癌、他のＢ細胞悪性腫瘍、及び上記癌の組み合わせに由来する腫瘍のサイズを減少するため使用され得る。幾つかの実施形態では、癌は多発性骨髄腫である。特定の癌は、化学療法又は放射線療法に反応性となり得るが、そうでなければその癌は難治性となり得る。難治性癌は、外科的処置に適用できない癌を指し、その癌は最初に化学療法若しくは放射線療法に無反応であるか、又はその癌は経時的に無反応となるいずれかである。

本明細書に使用される「抗腫瘍効果」は、腫瘍体積の減少、腫瘍細胞数の減少、腫瘍細胞増殖の減少、転移の数の減少、全体生存期間又は無増悪生存期間の増加、平均余命の増加、又は腫瘍と関係する様々な生理学的症状の改善として提示され得る、生物学的効果を指す。また、抗腫瘍効果は、腫瘍の発生の予防、例えばワクチンを指す場合がある。

本明細書で使用される「サイトカイン」は、特異抗原との接触に反応して１つの細胞によって放出される非抗体タンパク質を指し、ここで、サイトカインは第２の細胞と相互作用して、第２の細胞における反応を媒介する。本明細書で使用される「サイトカイン」は、細胞間メディエーターとして別の細胞に対して作用する、１つの細胞集団によって放出されるタンパク質を指すことを意味する。サイトカインは、細胞によって内因性に発現され得るか、又は被験体に投与され得る。サイトカインは、マクロファージ、Ｂ細胞、Ｔ細胞、及び肥満細胞を含む免疫細胞によって放出されて、免疫応答を伝播し得る。サイトカインは、レシピエント細胞において様々な反応を誘導し得る。サイトカインは、ホメオスタシスサイトカイン（homeostatic cytokines）、ケモカイン、炎症誘発性サイトカイン、エフェクター及び急性期タンパク質を含み得る。例えば、インターロイキン（ＩＬ）７及びＩＬ−１５を含むホメオスタシスサイトカインは、免疫細胞の生存及び増殖を促進し、炎症誘発性サイトカインは炎症反応を促進し得る。ホメオスタシスサイトカインの例として、限定されないが、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−７、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２ｐ４０、ＩＬ−１２ｐ７０、ＩＬ−１５及びインターフェロン（ＩＦＮ）ガンマが挙げられる。炎症誘発性サイトカインの例として、限定されないが、ＩＬ−１ａ、ＩＬ−１ｂ、ＩＬ−６、ＩＬ−１３、ＩＬ−１７ａ、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）−アルファ、ＴＮＦ−ベータ、線維芽細胞成長因子（ＦＧＦ）２、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、可溶性細胞間接着分子１（ｓＩＣＡＭ−１）、可溶性血管接着分子１（ｓＶＣＡＭ−１）、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）、ＶＥＧＦ−Ｃ、ＶＥＧＦ−Ｄ及び胎盤増殖因子（ＰＬＧＦ）が挙げられる。エフェクターの例として、限定されないが、グランザイムＡ、グランザイムＢ、可溶性Ｆａｓリガンド（ｓＦａｓＬ）及びパーフォリンが挙げられる。急性期タンパク質の例として、限定されないが、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）及び血清アミロイドＡ（ＳＡＡ）が挙げられる。

「ケモカイン」は細胞走化性又は指向性運動を媒介するサイトカインの一種である。ケモカインの例として、限定されないが、ＩＬ−８、ＩＬ−１６、エオタキシン、エオタキシン−３、マクロファージ由来ケモカイン（ＭＤＣ又はＣＣＬ２２）、単球走化性タンパク質１（ＭＣＰ−１又はＣＣＬ２）、ＭＣＰ−４、マクロファージ炎症性タンパク質１α（ＭＩＰ−１α、ＭＩＰ−１ａ）、ＭＩＰ−１β（ＭＩＰ−１ｂ）、ガンマ誘導性タンパク質１０（ＩＰ−１０）、並びに胸腺及び活性化制御ケモカイン（ＴＡＲＣ又はＣＣＬ１７）が挙げられる。

本明細書で使用される場合に、「キメラ受容体」は、特定の分子を認識することが可能な操作された表面発現される分子を指す。特定の腫瘍抗原と相互作用することができる結合ドメインを含む、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）及び操作されたＴ細胞受容体（ＴＣＲ）は、Ｔ細胞が特定の腫瘍抗原を発現する癌細胞を標的とし、死滅させることを可能とする。

「治療的有効量」、「有効用量」、「有効量」又は「治療的に有効な投薬量」の治療剤、例えば操作されたＣＡＲＴ細胞は、単独で又は別の治療剤と組み合わせて使用された場合に、疾患の発症から被験体を保護する、又は疾患症状の重症度の減少、疾患症状のない期間の頻度及び持続期間の増加、若しくは疾患の罹患に起因する機能障害若しくは身体障害の予防によって明示される疾患の退縮を促進する、任意の量である。治療剤の疾患の退縮を促進する能力は、熟練した医師に知られている様々な方法を使用して、例えば、臨床試験中のヒト被験体において、ヒトにおける効能を予測する動物モデル系において、又はｉｎｖｉｔｒｏアッセイにおいて薬剤の活性をアッセイすることによって評価され得る。

本明細書で使用される「リンパ球」の用語は、ナチュラルキラー（ＮＫ：natural killer）細胞、Ｔ細胞、又はＢ細胞を含む。ＮＫ細胞は、生得免疫系の主な成分を占める細胞傷害性（細胞毒性）リンパ球の一種である。ＮＫ細胞は腫瘍及びウイルスによって感染された細胞を拒絶する。ＮＫ細胞は、アポトーシス又はプログラム細胞死のプロセスによって作用する。ＮＫ細胞は、細胞を死滅させるために活性化を必要としないことから、「ナチュラルキラー」と名付けられた。Ｔ細胞は、細胞媒介免疫（抗体が関与しない）において主な役割を果たす。そのＴ細胞受容体（ＴＣＲ）は、他の種類のリンパ球からそれら自体を分化させる。免疫系の特殊化された器官である胸腺は、主としてＴ細胞の成熟を担う。６種類のＴ細胞、すなわち、ヘルパーＴ細胞（例えばＣＤ４^＋細胞）、細胞傷害性Ｔ細胞（ＴＣ、細胞傷害性Ｔリンパ球、ＣＴＬ、Ｔキラー細胞、細胞溶解性Ｔ細胞、ＣＤ８^＋Ｔ細胞又はキラーＴ細胞としても知られる）、メモリーＴ細胞（（ｉ）ナイーブ細胞のようなステムメモリーＴ_ＳＣＭ細胞は、ＣＤ４５ＲＯ⁻、ＣＣＲ７^＋、ＣＤ４５ＲＡ^＋、ＣＤ６２Ｌ^＋（Ｌ−セレクチン）、ＣＤ２７^＋、ＣＤ２８^＋及びＩＬ−７Ｒα^＋であるが、それらは、大量のＣＤ９５、ＩＬ−２Ｒβ、ＣＸＣＲ３及びＬＦＡ−１を発現し、メモリー細胞に特有の多数の機能的な属性を示す；（ｉｉ）セントラルメモリーＴ_ＣＭ細胞は、Ｌ−セレクチン及びＣＣＲ７を発現し、ＩＦＮγ又はＩＬ−４ではなくＩＬ−２を分泌する；並びに（ｉｉｉ）エフェクターメモリーＴ_ＥＭ細胞はＬセレクチンもＣＣＲ７も発現しないものの、ＩＦＮγ及びＩＬ−４のようなエフェクターサイトカインを産生する）、制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ、サプレッサーＴ細胞又はＣＤ４^＋ＣＤ２５^＋制御性Ｔ細胞）、ナチュラルキラーＴ細胞（ＮＫＴ）及びガンマデルタＴ細胞が存在する。一方、Ｂ細胞は、液性免疫（抗体が関与する）で最も重要な役割を果たす。Ｂ細胞は抗体及び抗原を作製し、抗原提示細胞（ＡＰＣ）の役割を行い、抗原の相互作用による活性化の後、メモリーＢ細胞となる。哺乳動物では、未成熟Ｂ細胞は、その名前が由来する骨髄で形成される。

「遺伝子操作された」又は「操作された」の用語は、限定されないが、コーディング領域若しくは非コーディング領域、又はそれらの一部分の欠失、又はコーディング領域若しくはその一部分の挿入を含む、細胞のゲノムを修飾する方法を指す。幾つかの実施形態では、修飾される細胞はリンパ球、例えば、患者又はドナーのいずれかから得ることができるＴ細胞である。Ｔ細胞は、例えば、細胞のゲノムに組み込まれる、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）又はＴ細胞受容体（ＴＣＲ）等の外来コンストラクトを発現するように修飾され得る。

「免疫応答」は、侵入病原体、病原体に感染した細胞若しくは組織、癌性若しくは他の異常な細胞、又は自己免疫若しくは病理学的炎症の場合、正常なヒトの細胞若しくは組織の選択的な標的化、それらへの結合、それらに対する損傷、それらの破壊、及び／又は脊椎動物の身体からのそれらの排除をもたらす、免疫系の細胞（例えばＴリンパ球、Ｂリンパ球、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、マクロファージ、好酸球、肥満細胞、樹状細胞、及び好中球）及びこれらの細胞のいずれか又は肝臓によって産生される可溶性高分子（Ａｂ、サイトカイン、及び補体を含む）の作用を指す。

「免疫療法」の用語は、免疫応答を誘導する、増強する、抑制する、或いは緩和することを含む方法による、疾患に冒された、又は疾患にかかる若しくは疾患の再発を患うリスクがある被験体の治療を指す。免疫療法の例として、限定されないが、Ｔ細胞療法が挙げられる。Ｔ細胞療法は、養子Ｔ細胞療法（adoptive T cell therapy）、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）免疫療法、自己細胞治療、操作された自己細胞療法（ｅＡＣＴ（商標））、及び同種異系Ｔ細胞移植を含み得る。しかしながら、当業者は、本明細書に開示されるコンディショニング法（conditioning methods）が任意の移植Ｔ細胞療法の有効性を増強し得ることを認識するであろう。Ｔ細胞療法の例は、米国特許出願公開第２０１４／０１５４２２８号及び同第２００２／０００６４０９号、米国特許第７，７４１，４６５号、米国特許第６，３１９，４９４号、米国特許第５，７２８，３８８号及び国際公開第２００８／０８１０３５号に記載される。

免疫療法のＴ細胞は、当該技術分野において知られている任意の供給源に由来し得る。例えば、Ｔ細胞は、造血幹細胞集団からｉｎｖｉｔｒｏで分化されてもよく、又はＴ細胞は被験体から得られてもよい。Ｔ細胞を、例えば末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）、骨髄、リンパ節組織、臍帯血、胸腺組織、感染部位に由来する組織、腹水、胸水、脾臓組織及び腫瘍から得ることができる。さらに、Ｔ細胞は、当該技術分野において利用可能な１以上のＴ細胞株に由来してもよい。また、Ｔ細胞は、ＦＩＣＯＬＬ（商標）分離及び／又はアフェレーシス（apheresis）等の当業者に知られている任意の多くの技術を使用して被験体から収集された血液単位から得ることもできる。Ｔ細胞療法用のＴ細胞を単離する更なる方法は、米国特許出願公開第２０１３／０２８７７４８号に開示され、その全体が引用することにより本明細書の一部をなす。

「ｅＡＣＴ（商標）」と略記することができ、養子細胞移植としても知られる「操作された自己細胞療法」の用語は、患者自身のＴ細胞を収集し、その後、１以上の特定の腫瘍細胞又は悪性腫瘍の細胞表面上に発現される１以上の抗原を認識し、標的とするように遺伝的に変更するプロセスである。Ｔ細胞は、例えば、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するように操作され得る。ＣＡＲ陽性（＋）Ｔ細胞は、少なくとも１つの共刺激ドメイン及び少なくとも１つの活性化ドメインを含む細胞内シグナル伝達部に連結された特定の腫瘍抗原に対する特異性を有する細胞外単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）を発現するように操作される。ＣＡＲｓｃＦｖは、例えば、全ての正常なＢ細胞と、限定されるものではないが、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、特段の記載がない限り、原発性縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、高悪性度Ｂ細胞リンパ腫、及び濾胞性リンパ腫から生ずるＤＬＢＣＬ、ＮＨＬ、ＣＬＬ、及び非Ｔ細胞ＡＬＬを含むＢ細胞悪性腫瘍とを含むＢ細胞系譜における細胞により発現される膜貫通タンパク質であるＣＤ１９を標的とするように設計することができる。ＣＡＲＴ細胞療法及びコンストラクトの例は、米国特許出願公開第２０１３／０２８７７４８号、同第２０１４／０２２７２３７号、同第２０１４／００９９３０９号、及び同第２０１４／００５０７０８号に記載され、これらの引用文献はそれらの全体が引用することにより本明細書の一部をなす。

本明細書で使用される「患者」は、癌（例えばリンパ腫又は白血病）に冒された任意のヒトを含む。「被験体」及び「患者」の用語は、本明細書では区別なく使用される。

本明細書で使用される「ｉｎｖｉｔｒｏ細胞」の用語は、ｅｘｖｉｖｏで培養される任意の細胞を指す。特に、ｉｎｖｉｔｒｏ細胞はＴ細胞を含み得る。

「ペプチド」、「ポリペプチド」及び「タンパク質」の用語は区別なく使用され、ペプチド結合によって共有結合的に連結されたアミノ酸残基で構成される化合物を指す。タンパク質又はペプチドは、少なくとも２個のアミノ酸を含み、タンパク質又はペプチドの配列を含み得るアミノ酸の最大数に制限はない。ポリペプチドは、ペプチド結合によって互いにつながれた２個以上のアミノ酸を含む任意のペプチド又はタンパク質を含む。本明細書で使用されるように、上記用語はまた、当該技術分野において、例えばペプチド、オリゴペプチド及びオリゴマーと一般的に称される短い鎖と、当該技術分野において一般的にはタンパク質と称され、多くの種類が存在する、より長い鎖の両方を指す。「ポリペプチド」として、例えば、特に、生物学的に活性なフラグメント、実質的に相同性のポリペプチド、オリゴペプチド、ホモダイマー、ヘテロダイマー、ポリペプチドの変異体、改変ポリペプチド、誘導体、類縁体、融合タンパク質が挙げられる。ポリペプチドは、天然ペプチド、組み換えペプチド、合成ペプチド、又はそれらの組み合わせを含む。

本明細書で使用される「刺激」は、その同族のリガンドと刺激分子を結合することによって誘導される一次応答を指し、ここで、その結合はシグナル伝達事象を媒介する。「刺激分子」は、Ｔ細胞上の分子、例えば、抗原提示細胞上に存在する同族の刺激リガンドと特異的に結合するＴ細胞受容体（ＴＣＲ）／ＣＤ３複合体を指す。「刺激リガンド」は、抗原提示細胞（例えば、ＡＰＣ、樹状細胞、Ｂ細胞等）上に存在する場合、Ｔ細胞上の刺激分子と特異的に結合することができ、それによって、限定されないがＴ細胞の活性化、免疫応答の開始、増殖等を含むＴ細胞による一次応答を媒介するリガンドである。刺激リガンドとして、限定されないが、抗ＣＤ３抗体、ペプチドで充填されたＭＨＣクラスＩ分子、スーパーアゴニスト抗ＣＤ２抗体、及びスーパーアゴニスト抗ＣＤ２８抗体が挙げられる。

本明細書で使用される「共刺激シグナル」は、ＴＣＲ／ＣＤ３ライゲーション等の一次シグナルと組み合わせて、限定されないがＴ細胞の増殖及び／又は主要な分子の上方制御若しくは下方制御等のＴ細胞の応答をもたらすシグナルを指す。

本明細書で使用される「共刺激リガンド」は、Ｔ細胞上の同族の共同刺激分子を特異的に結合する抗原提示細胞上の分子を含む。共刺激リガンドの結合は、限定されないが、Ｔ細胞の増殖、活性化、分化等を含むＴ細胞応答を媒介するシグナルを提供する。共刺激リガンドは、一次シグナルに加えて、刺激分子によって、例えば、ペプチドがロードされた主要組織適合複合体（ＭＨＣ）分子とのＴ細胞受容体（ＴＣＲ）／ＣＤ３複合体の結合によって提供されるシグナルを誘導する。共刺激リガンドとして、限定されないが、３／ＴＲ６、４−１ＢＢリガンド、Ｔｏｌｌリガンド受容体に結合するアゴニスト又は抗体、Ｂ７−１（ＣＤ８０）、Ｂ７−２（ＣＤ８６）、ＣＤ３０リガンド、ＣＤ４０、ＣＤ７、ＣＤ７０、ＣＤ８３、ヘルペスウイルスエントリーメディエーター（ＨＶＥＭ：herpes virus entry mediator）、ヒト白血球抗原Ｇ（ＨＬＡ−Ｇ）、ＩＬＴ４、免疫グロブリン様転写物（ＩＬＴ：immunoglobulin-like transcript）３、誘導性共刺激リガンド（ＩＣＯＳ−Ｌ）、細胞間接着分子（ＩＣＡＭ）、Ｂ７−Ｈ３と特異的に結合するリガンド、リンフォトキシンベータ受容体、ＭＨＣクラスＩ鎖関連タンパク質Ａ（ＭＩＣＡ）、ＭＨＣクラスＩ鎖関連タンパク質Ｂ（ＭＩＣＢ）、ＯＸ４０リガンド、ＰＤ−Ｌ２、又はプログラム細胞死（ＰＤ）Ｌ１が挙げられ得る。共刺激リガンドとして、限定されず、４−１ＢＢ、Ｂ７−Ｈ３、ＣＤ２、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＣＤ７、ＩＣＯＳ、ＣＤ８３と特異的に結合するリガンド、リンパ球機能関連抗原−１（ＬＦＡ−１）、ナチュラルキラー細胞受容体Ｃ（ＮＫＧ２Ｃ）、ＯＸ４０、ＰＤ−１、又は腫瘍壊死因子スーパーファミリーメンバー１４（ＴＮＦＳＦ１４又はＬＩＧＨＴ）等のＴ細胞上に存在する共刺激分子と特異的に結合する抗体が挙げられるが、これらに限定されない。

「共刺激分子」は、共刺激リガンドと特異的に結合することにより、限定されないが増殖等のＴ細胞による共刺激応答を媒介する、Ｔ細胞上の同族の結合パートナーである。共刺激分子として、限定されないが、「共刺激分子」は、共刺激リガンドと特異的に結合することにより、限定されないが増殖等のＴ細胞による共刺激応答を媒介する、Ｔ細胞上の同族の結合パートナーである。共刺激分子として、限定されないが、４−１ＢＢ／ＣＤ１３７、Ｂ７−Ｈ３、ＢＡＦＦＲ、ＢＬＡＭＥ（ＳＬＡＭＦ８）、ＢＴＬＡ、ＣＤ３３、ＣＤ４５、ＣＤ１００（ＳＥＭＡ４Ｄ）、ＣＤ１０３、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、ＣＤ１５４、ＣＤ１６、ＣＤ１６０（ＢＹ５５）、ＣＤ１８、ＣＤ１９、ＣＤ１９ａ、ＣＤ２、ＣＤ２２、ＣＤ２４７、ＣＤ２７、ＣＤ２７６（Ｂ７−Ｈ３）、ＣＤ２８、ＣＤ２９、ＣＤ３（アルファ；ベータ；デルタ；イプシロン；ガンマ；ゼータ）、ＣＤ３０、ＣＤ３７、ＣＤ４、ＣＤ４、ＣＤ４０、ＣＤ４９ａ、ＣＤ４９Ｄ、ＣＤ４９ｆ、ＣＤ５、ＣＤ６４、ＣＤ６９、ＣＤ７、ＣＤ８０、ＣＤ８３リガンド、ＣＤ８４、ＣＤ８６、ＣＤ８アルファ、ＣＤ８ベータ、ＣＤ９、ＣＤ９６（Ｔａｃｔｉｌｅ）、ＣＤ１１ａ、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１１ｃ、ＣＤ１１ｄ、ＣＤＳ、ＣＥＡＣＡＭ１、ＣＲＴＡＭ、ＤＡＰ−１０、ＤＮＡＭ１（ＣＤ２２６）、Ｆｃガンマ受容体、ＧＡＤＳ、ＧＩＴＲ、ＨＶＥＭ（ＬＩＧＨＴＲ）、ＩＡ４、ＩＣＡＭ−１、ＩＣＡＭ−１、ＩＣＯＳ、Ｉｇアルファ（ＣＤ７９ａ）、ＩＬ２Ｒベータ、ＩＬ２Ｒガンマ、ＩＬ７Ｒアルファ、インテグリン、ＩＴＧＡ４、ＩＴＧＡ４、ＩＴＧＡ６、ＩＴＧＡＤ、ＩＴＧＡＥ、ＩＴＧＡＬ、ＩＴＧＡＭ、ＩＴＧＡＸ、ＩＴＧＢ２、ＩＴＧＢ７、ＩＴＧＢ１、ＫＩＲＤＳ２、ＬＡＴ、ＬＦＡ−１、ＬＦＡ−１、ＬＩＧＨＴ、ＬＩＧＨＴ（腫瘍壊死因子スーパーファミリーメンバー１４；ＴＮＦＳＦ１４）、ＬＴＢＲ、Ｌｙ９（ＣＤ２２９）、リンパ球機能関連抗原−１（ＬＦＡ−１（ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８））、ＭＨＣクラスＩ分子、ＮＫＧ２Ｃ、ＮＫＧ２Ｄ、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４４、ＮＫｐ４６、ＮＫｐ８０（ＫＬＲＦ１）、ＯＸ４０、ＰＡＧ／Ｃｂｐ、ＰＤ−１、ＰＳＧＬ１、ＳＥＬＰＬＧ（ＣＤ１６２）、シグナル伝達リンパ球活性化分子、ＳＬＡＭ（ＳＬＡＭＦ１；ＣＤ１５０；ＩＰＯ−３）、ＳＬＡＭＦ４（ＣＤ２４４；２Ｂ４）、ＳＬＡＭＦ６（ＮＴＢ−Ａ；Ｌｙ１０８）、ＳＬＡＭＦ７、ＳＬＰ−７６、ＴＮＦ、ＴＮＦｒ、ＴＮＦＲ２、Ｔｏｌｌリガンド受容体、ＴＲＡＮＣＥ／ＲＡＮＫＬ、ＶＬＡ１若しくはＶＬＡ−６、又はそれらのフラグメント、短縮形（truncations）、若しくは組み合わせが挙げられる。

「減少する、減少させる（reducing）」及び「減じる（decreasing）」の用語は、本明細書において区別なく使用され、本来よりも少ない、あらゆる変化を示す。「減少する、減少させる」及び「減じる」は測定前と測定後の比較を必要とする、相対的な用語である。「減少する、減少させる」及び「減じる」は完全な枯渇を含む。

被験体の「治療（Treatment）」又は被験体を「治療する、治療すること（treating）」は、症状、合併症若しくは病状の発症、進行、発現、重症度若しくは再発、又は疾患と関連する生化学的指標の転換、緩和、改善、阻害、遅延又は予防の目的で、被験体に対して行われる任意の種類の処置若しくはプロセス、又は被験体に対する有効成分の投与を指す。幾つかの実施形態では、「治療」又は「治療する、治療すること」は部分寛解を含む。別の実施形態では、「治療」又は「治療する、治療すること」は完全寛解を含む。

本明細書で使用される場合に、「多機能性Ｔ細胞」は、産生される各タンパク質の量（すなわち、分泌されたタンパク質の数と強さの程度との組み合わせ）と一緒に、事前に特定されたパネルから１つの細胞当たり少なくとも２種のタンパク質を同時分泌する細胞を指す。幾つかの実施形態においては、単一細胞の機能的プロファイルは、各々の評価可能な産物について決定される。プロファイルは、エフェクター（グランザイムＢ、ＩＦＮ−γ、ＭＩＰ−１α、パーフォリン、ＴＮＦ−α、ＴＮＦ−β）群、刺激性（ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＬ−２、ＩＬ−５、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−２１）群、制御性（ＩＬ−４、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３、ＩＬ−２２、ＴＧＦ−β１、ｓＣＤ１３７、ｓＣＤ４０Ｌ）群、化学誘引性（ＣＣＬ−１１、ＩＰ−１０、ＭＩＰ−１β、ＲＡＮＴＥＳ）群、及び炎症性（ＩＬ−１ｂ、ＩＬ−６、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−１７Ｆ、ＭＣＰ−１、ＭＣＰ−４）群に分類され得る。幾つかの実施形態においては、各細胞の機能的プロファイルは、細胞の多機能性による各試料の内訳（すなわち、非分泌細胞又は単機能性細胞に対して、何パーセントの細胞が多数のサイトカインを分泌しているか）、及び機能性群による試料の内訳（すなわち、どの単機能性群及び多機能性群が、試料中で細胞により分泌されているか、及びそれらの度数）を含むその他の評価指標の計算を可能にする。

本開示の様々な態様は、以下のサブセクションに更に詳細に記載される。

多機能性及び多機能性強度インデックス（ＰＳＩ）
多機能性強度インデックス（ＰＳＩ）は、サイトカイン強度及び多機能性細胞のパーセンテージを盛り込むことによる多機能性の尺度である（図１３）。幾つかの実施形態においては、多機能性強度インデックス（ＰＳＩ）は、主要カテゴリー：恒常性／増殖性、炎症性、走化性、制御性、及び免疫エフェクターにわたる３２種の主要な免疫学的に関連する分子の事前に指定されたパネルにおよぶ多機能性の尺度である。幾つかの実施形態においては、サイトカイン強度は、ＥＬＩＳＡによって測定され得る（図１４）。

以下で示されるように、ＰＳＩは、多機能性細胞のパーセンテージに、それらの細胞により分泌されるタンパク質の平均蛍光強度（ＭＦＩ）を掛けたものとして定義することができる：

全産物のＰＳＩ、ＣＤ４^＋のＰＳＩ、及びＩＬ−１７ＡのＰＳＩのインデックスを、ＣＡＲのピークレベルと併せて評価することもできる。ＰＳＩ及びｉｎｖｉｖｏでのＣＡＲＴ細胞増殖を統合するコンポジットインデックスを作成し、客観的応答（ＯＲ）と関連付けた。コンポジットインデックスを生成するために、単位分散を有するようにそれぞれの評価指標をまず正規化した後にそれらの評価指標を互いに足し合わせた。この正規化は、その評価指標をそれぞれの標準偏差で割って共通の規模／尺度にすることによって達成された。

幾つかの実施形態においては、客観的応答（ＯＲ）は、改定された悪性リンパ腫のためのＩＷＧ応答基準（Cheson, 2007）に従って決定されると共に、悪性リンパ腫のためのＩＷＧ応答基準（Cheson et al. Journal of Clinical Oncology 32, no. 27 (September 2014) 3059-3067）によって決定される。応答の期間が評価される。Luganoの応答分類基準に従う研究者評価による無憎悪生存率（ＰＦＳ）が評価される。

幾つかの実施形態においては、多機能性細胞の量（例えば、ＰＳＩ、試料中の多機能性細胞のパーセンテージ、インデックスの組み合わせによって決定される）を使用することで、有効用量が決定される。

幾つかの実施形態においては、試料中の多機能性細胞のパーセンテージは、およそ１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、又は５０％より大きい。

幾つかの実施形態においては、試料中の多機能性細胞のパーセンテージは、およそ７０％、６０％、５０％、４０％、３０％、２９％、２８％、２７％、２６％、２５％、２４％、２３％、２２％、２１％、２０％、又は１５％より小さい。幾つかの実施形態においては、試料中の多機能性細胞のパーセンテージは、およそ１０％〜５０％、１５％〜４５％、２０％〜４０％、２５％〜３５％、１５％〜３０％、１５％〜２５％、２０％〜３０％、又は２０％〜２５％の範囲内である。

幾つかの実施形態においては、ＰＳＩは、２５０より大きい、２６０より大きい、２７０より大きい、２８０より大きい、２９０より大きい、３００より大きい、３１０より大きい、３２０より大きい、３３０より大きい、３４０より大きい、３５０より大きい、３６０より大きい、３７０より大きい、３８０より大きい、３９０より大きい、４００より大きい、４１０より大きい、４２０より大きい、４３０より大きい、４４０より大きい、４５０より大きい、４６０より大きい、４７０より大きい、４８０より大きい、４９０より大きい、５００より大きい、５１０より大きい、５２０より大きい、５３０より大きい、５４０より大きい、５５０より大きい、５６０より大きい、５７０より大きい、５８０より大きい、５９０より大きい、又は６００より大きい。

幾つかの実施形態においては、最大ＰＳＩは、２５０、２６０、２７０、２８０、２９０、３００、３１０、３２０、３３０、３４０、３５０、３６０、３７０、３８０、３９０、４００、４１０、４２０、４３０、４４０、４５０、４６０、４７０、４８０、４９０、５００、５１０、５２０、５３０、５４０、５５０、５６０、５７０、５８０、５９０、又は６００である。

幾つかの実施形態においては、ＰＳＩは、およそ２５０〜６００、２５０〜５９０、２５０〜５８０、２５０〜５７０、２５０〜２６０、２５０〜５５０、２５０〜５４０、２５０〜５３０、２５０〜５２０、２５０〜５１０、２５０〜５００、２５０〜４９０、２５０〜４８０、２５０〜４７０、２５０〜４６０、２５０〜４５０、２５０〜４４０、２５０〜４３０、２５０〜４２０、２５０〜４１０、２５０〜４００、２５０〜３９０、２５０〜３８０、２５０〜３７０、２５０〜３６０、２５０〜３５０、２５０〜３４０、２５０〜３３０、２５０〜３２０、２５０〜３１０、２５０〜３００、３００〜６００、３００〜５９０、３００〜５８０、３００〜５７０、３００〜５６０、３００〜５５０、３００〜５４０、３００〜５３０、３００〜５２０、３００〜５１０、３００〜５００、３００〜４９０、３００〜４８０、３００〜４７０、３００〜４６０、３００〜４５０、３００〜４００、３５０〜４５０、４５０〜６００、又は５５０〜６００の範囲内である。

幾つかの実施形態においては、多機能性Ｔ細胞の予め決められた量は、少なくとも２つの評価指標（例えば、多機能性強度インデックス（ＰＳＩ）、及びＴ細胞注入前の患者のＩＬ−１５の血清レベル）を含むコンポジットインデックスを使用して決定される。幾つかの実施形態においては、コンポジットインデックスは、３より大きい、４より大きい、５より大きい、又は６より大きい。幾つかの実施形態においては、コンポジットインデックスは、少なくとも２である。幾つかの実施形態においては、コンポジットインデックスは、およそ２〜６、３〜６、４〜６、又は５〜６の範囲である。

キメラ抗原受容体及びＴ細胞受容体
キメラ抗原受容体（ＣＡＲ又はＣＡＲ−Ｔ）は、遺伝子操作された受容体である。これらの操作された受容体は、当該技術分野で知られている技術によりＴ細胞を含む免疫細胞に容易に挿入され得て、その細胞によって発現され得る。ＣＡＲにより、単一の受容体は、特異抗原を認識するとともに、その抗原に結合した場合に免疫細胞を活性化させてその抗原を持っている細胞を攻撃して破壊するよう、プログラム化され得る。これらの抗原が腫瘍細胞上に存在する場合、ＣＡＲを発現する免疫細胞は、腫瘍細胞を標的とし、死滅させることができる。キメラ抗原受容体は、共刺激（シグナル伝達）ドメインを含むことで、それらの効力が高められる。米国特許第７，７４１，４６５号及び同第６，３１９，４９４号、並びにKrause et al.及びFinney et al.（上記参照）、Song et al., Blood 119:696-706 (2012)、Kalos et al., Sci. Transl. Med. 3:95 (2011)、Porter et al., N. Engl. J. Med. 365:725-33 (2011)、及びGross et al., Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol. 56:59-83 (2016)を参照のこと。

幾つかの実施形態においては、短縮ヒンジドメイン（「ＴＨＤ」）を含む共刺激ドメインは、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、又はそれらのフラグメント等の免疫グロブリンファミリーのメンバーの幾つか又は全てを更に含む。

幾つかの実施形態においては、ＴＨＤは、ヒト完全ヒンジドメイン（「ＣＨＤ」）に由来する。その他の実施形態においては、ＴＨＤは、共刺激タンパク質の齧歯類、マウス、又は霊長類（例えば、非ヒト霊長類）ＣＨＤに由来する。幾つかの実施形態においては、ＴＨＤは、共刺激タンパク質のキメラＣＨＤに由来する。

本発明のＣＡＲ又はＴＣＲのための共刺激ドメインは、膜貫通ドメイン及び／又は細胞内シグナル伝達ドメインを更に含み得る。膜貫通ドメインは、ＣＡＲの細胞外ドメインに融合されるように設計され得る。膜貫通ドメインは、同様にＣＡＲの細胞内ドメインに融合され得る。幾つかの実施形態においては、ＣＡＲ中のドメインの１つと本来関連性がある膜貫通ドメインが使用される。幾つかの場合においては、膜貫通ドメインは、そのようなドメインが同じ又は異なる表面膜タンパク質の膜貫通ドメインに結合することを避けることで、受容体複合体のその他のメンバーとの相互作用を最小限にするように、選択され得るか、又はアミノ酸置換により修飾され得る。膜貫通ドメインは、天然源又は合成源のいずれかに由来し得る。その起源が天然である場合に、上記ドメインは、任意の膜結合タンパク質又は膜貫通タンパク質に由来し得る。本発明の特定の使用の膜貫通領域は、４−１ＢＢ／ＣＤ１３７、活性化ＮＫ細胞受容体、免疫グロブリンタンパク質、Ｂ７−Ｈ３、ＢＡＦＦＲ、ＢＬＡＭＥ（ＳＬＡＭＦ８）、ＢＴＬＡ、ＣＤ１００（ＳＥＭＡ４Ｄ）、ＣＤ１０３、ＣＤ１６０（ＢＹ５５）、ＣＤ１８、ＣＤ１９、ＣＤ１９ａ、ＣＤ２、ＣＤ２４７、ＣＤ２７、ＣＤ２７６（Ｂ７−Ｈ３）、ＣＤ２８、ＣＤ２９、ＣＤ３デルタ、ＣＤ３イプシロン、ＣＤ３ガンマ、ＣＤ３ゼータ、ＣＤ３０、ＣＤ４、ＣＤ４０、ＣＤ４９ａ、ＣＤ４９Ｄ、ＣＤ４９ｆ、ＣＤ６９、ＣＤ７、ＣＤ８４、ＣＤ８、ＣＤ８アルファ、ＣＤ８ベータ、ＣＤ９６（Ｔａｃｔｉｌｅ）、ＣＤ１１ａ、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１１ｃ、ＣＤ１１ｄ、ＣＤＳ、ＣＥＡＣＡＭ１、ＣＲＴＡＭ、サイトカイン受容体、ＤＡＰ−１０、ＤＮＡＭ１（ＣＤ２２６）、Ｆｃガンマ受容体、ＧＡＤＳ、ＧＩＴＲ、ＨＶＥＭ（ＬＩＧＨＴＲ）、ＩＡ４、ＩＣＡＭ−１、ＩＣＡＭ−１、Ｉｇアルファ（ＣＤ７９ａ）、ＩＬ−２Ｒベータ、ＩＬ−２Ｒガンマ、ＩＬ−７Ｒアルファ、誘導性Ｔ細胞共刺激分子（ＩＣＯＳ）、インテグリン、ＩＴＧＡ４、ＩＴＧＡ４、ＩＴＧＡ６、ＩＴＧＡＤ、ＩＴＧＡＥ、ＩＴＧＡＬ、ＩＴＧＡＭ、ＩＴＧＡＸ、ＩＴＧＢ２、ＩＴＧＢ７、ＩＴＧＢｌ、ＫＩＲＤＳ２、ＬＡＴ、ＬＦＡ−１、ＬＦＡ−１、ＣＤ８３と特異的に結合するリガンド、ＬＩＧＨＴ、ＬＴＢＲ、Ｌｙ９（ＣＤ２２９）、リンパ球機能関連抗原−１（ＬＦＡ−１；ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８）、ＭＨＣクラス１分子、ＮＫＧ２Ｃ、ＮＫＧ２Ｄ、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４４、ＮＫｐ４６、ＮＫｐ８０（ＫＬＲＦ１）、ＯＸ−４０、ＰＡＧ／Ｃｂｐ、プログラム細胞死−１（ＰＤ−１）、ＰＳＧＬ１、ＳＥＬＰＬＧ（ＣＤ１６２）、シグナル伝達リンパ球活性化分子（ＳＬＡＭタンパク質）、ＳＬＡＭ（ＳＬＡＭＦ１；ＣＤ１５０；ＩＰＯ−３）、ＳＬＡＭＦ４（ＣＤ２４４；２Ｂ４）、ＳＬＡＭＦ６（ＮＴＢ−Ａ；Ｌｙ１０８）、ＳＬＡＭＦ７、ＳＬＰ−７６、ＴＮＦ受容体タンパク質、ＴＮＦＲ２、ＴＮＦＳＦ１４、Ｔｏｌｌリガンド受容体、ＴＲＡＮＣＥ／ＲＡＮＫＬ、ＶＬＡ１、若しくはＶＬＡ−６、又はそれらのフラグメント、短縮形、若しくはそれらの組み合わせに由来し（すなわち含み）得る。

任意に、短いリンカーは、ＣＡＲの細胞外ドメイン、膜貫通ドメイン、及び細胞内ドメインのいずれか又は幾つかの間で結合を形成し得る。幾つかの実施形態においては、リンカーは、グリシン−グリシン−グリシン−グリシン−セリンの繰り返し（Ｇ４Ｓ）ｎ又はＧＳＴＳＧＳＧＫＰＧＳＧＥＧＳＴＫＧ（配列番号１）に由来し得る。幾つかの実施形態においては、リンカーは、３個〜２０個のアミノ酸、及びＧＳＴＳＧＳＧＫＰＧＳＧＥＧＳＴＫＧ（配列番号１）と少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％同一のアミノ酸配列を有する。

本明細書に記載されるリンカーは、ペプチドタグとしても使用され得る。リンカーペプチド配列は、対象となる１つ以上のタンパク質を結合するための任意の適切な長さの配列であり得て、好ましくは、連結するペプチドの一方又は両方の適切な折り畳み及び／又は機能及び／又は活性を可能にするように十分に柔軟となるように設計される。したがって、リンカーペプチドは、１０個以下、１１個以下、１２個以下、１３個以下、１４個以下、１５個以下、１６個以下、１７個以下、１８個以下、１９個以下、又は２０個以下のアミノ酸の長さを有し得る。幾つかの実施形態においては、リンカーペプチドは、少なくとも３個、少なくとも４個、少なくとも５個、少なくとも６個、少なくとも７個、少なくとも８個、少なくとも９個、少なくとも１０個、少なくとも１１個、少なくとも１２個、少なくとも１３個、少なくとも１４個、少なくとも１５個、少なくとも１６個、少なくとも１７個、少なくとも１８個、少なくとも１９個、又は少なくとも２０個のアミノ酸の長さを有し得る。幾つかの実施形態においては、リンカーは、少なくとも７個かつ２０個以下のアミノ酸、少なくとも７個かつ１９個以下のアミノ酸、少なくとも７個かつ１８個以下のアミノ酸、少なくとも７個かつ１７個以下のアミノ酸、少なくとも７個かつ１６個以下のアミノ酸、少なくとも７個かつ１５個以下のアミノ酸、少なくとも７個かつ１４個以下のアミノ酸、少なくとも７個かつ１３個以下のアミノ酸、少なくとも７個かつ１２個以下のアミノ酸、又は少なくとも７個かつ１１個以下のアミノ酸を有する。或る特定の実施形態においては、リンカーは、１５個〜１７個のアミノ酸を有し、特定の実施形態においては、１６個のアミノ酸を有する。幾つかの実施形態においては、リンカーは、１０個〜２０個のアミノ酸を有する。幾つかの実施形態においては、リンカーは、１４個〜１９個のアミノ酸を有する。幾つかの実施形態においては、リンカーは、１５個〜１７個のアミノ酸を有する。幾つかの実施形態においては、リンカーは、１５個又は１６個のアミノ酸を有する。幾つかの実施形態においては、リンカーは、１６個のアミノ酸を有する。幾つかの実施形態においては、リンカーは、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１５個、１６個、１７個、１８個、１９個、又は２０個のアミノ酸を有する。

幾つかの実施形態においては、スペーサードメインが使用される。幾つかの実施形態においては、スペーサードメインは、ＣＤ４、ＣＤ８ａ、ＣＤ８ｂ、ＣＤ２８、ＣＤ２８Ｔ、４−１ＢＢ、又は本明細書に記載されるその他の分子に由来する。幾つかの実施形態においては、スペーサードメインは、小分子の添加に際して発現を制御するために、化学的に誘導されたダイマライザーを含み得る。幾つかの実施形態においては、スペーサーは使用されない。

本発明の操作されたＴ細胞の細胞内（シグナル伝達）ドメインは、活性化ドメインへのシグナル伝達をもたらし、次いでそれは免疫細胞の正常なエフェクター機能の少なくとも１つを活性化する。Ｔ細胞のエフェクター機能は、例えば、サイトカインの分泌を含む細胞溶解活性又はヘルパー活性であり得る。

或る特定の実施形態においては、好適な細胞内シグナル伝達ドメインは、４−１ＢＢ／ＣＤ１３７、活性化ＮＫ細胞受容体、免疫グロブリンタンパク質、Ｂ７−Ｈ３、ＢＡＦＦＲ、ＢＬＡＭＥ（ＳＬＡＭＦ８）、ＢＴＬＡ、ＣＤ１００（ＳＥＭＡ４Ｄ）、ＣＤ１０３、ＣＤ１６０（ＢＹ５５）、ＣＤ１８、ＣＤ１９、ＣＤ１９ａ、ＣＤ２、ＣＤ２４７、ＣＤ２７、ＣＤ２７６（Ｂ７−Ｈ３）、ＣＤ２８、ＣＤ２９、ＣＤ３デルタ、ＣＤ３イプシロン、ＣＤ３ガンマ、ＣＤ３０、ＣＤ４、ＣＤ４０、ＣＤ４９ａ、ＣＤ４９Ｄ、ＣＤ４９ｆ、ＣＤ６９、ＣＤ７、ＣＤ８４、ＣＤ８、ＣＤ８アルファ、ＣＤ８ベータ、ＣＤ９６（Ｔａｃｔｉｌｅ）、ＣＤ１１ａ、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１１ｃ、ＣＤ１１ｄ、ＣＤＳ、ＣＥＡＣＡＭ１、ＣＲＴＡＭ、サイトカイン受容体、ＤＡＰ−１０、ＤＮＡＭ１（ＣＤ２２６）、Ｆｃガンマ受容体、ＧＡＤＳ、ＧＩＴＲ、ＨＶＥＭ（ＬＩＧＨＴＲ）、ＩＡ４、ＩＣＡＭ−１、ＩＣＡＭ−１、Ｉｇアルファ（ＣＤ７９ａ）、ＩＬ−２Ｒベータ、ＩＬ−２Ｒガンマ、ＩＬ−７Ｒアルファ、誘導性Ｔ細胞共刺激分子（ＩＣＯＳ）、インテグリン、ＩＴＧＡ４、ＩＴＧＡ４、ＩＴＧＡ６、ＩＴＧＡＤ、ＩＴＧＡＥ、ＩＴＧＡＬ、ＩＴＧＡＭ、ＩＴＧＡＸ、ＩＴＧＢ２、ＩＴＧＢ７、ＩＴＧＢｌ、ＫＩＲＤＳ２、ＬＡＴ、ＬＦＡ−１、ＬＦＡ−１、ＣＤ８３と特異的に結合するリガンド、ＬＩＧＨＴ、ＬＴＢＲ、Ｌｙ９（ＣＤ２２９）、Ｌｙ１０８）、リンパ球機能関連抗原−１（ＬＦＡ−１；ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８）、ＭＨＣクラス１分子、ＮＫＧ２Ｃ、ＮＫＧ２Ｄ、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４４、ＮＫｐ４６、ＮＫｐ８０（ＫＬＲＦ１）、ＯＸ−４０、ＰＡＧ／Ｃｂｐ、プログラム細胞死−１（ＰＤ−１）、ＰＳＧＬ１、ＳＥＬＰＬＧ（ＣＤ１６２）、シグナル伝達リンパ球活性化分子（ＳＬＡＭタンパク質）、ＳＬＡＭ（ＳＬＡＭＦ１；ＣＤ１５０；ＩＰＯ−３）、ＳＬＡＭＦ４（ＣＤ２４４；２Ｂ４）、ＳＬＡＭＦ６（ＮＴＢ−Ａ、ＳＬＡＭＦ７、ＳＬＰ−７６、ＴＮＦ受容体タンパク質、ＴＮＦＲ２、ＴＮＦＳＦ１４、Ｔｏｌｌリガンド受容体、ＴＲＡＮＣＥ／ＲＡＮＫＬ、ＶＬＡ１、若しくはＶＬＡ−６、又はそれらのフラグメント、短縮形、若しくはそれらの組み合わせを包含する（すなわち含む）が、それらに限定されない。

ＴＣＲは、抗原反応性を伝えるために導入され得る。幾つかの実施形態においては、抗原反応性は、ペプチドのＭＨＣ提示により限定される。ＴＣＲは、α／βＴＣＲ、γ／δＴＣＲ等であり得る。幾つかの実施形態においては、ＴＣＲは、マウス定常鎖（２Ａ結合）を有するＨＰＶ−１６Ｅ７ＴＣＲである。幾つかの実施形態においては、それらの鎖は、ＩＲＥＳ又は任意の２Ａファミリーのメンバーの配列（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ、Ｆ２Ａ等）によって連結され得る。幾つかの実施形態においては、ＴＣＲは、ＨＰＶ認識ＴＣＲ、又はその他のウイルス性反応性ＴＣＲ（例えば、ＥＢＶ、インフルエンザ等）である。幾つかの実施形態においては、癌反応性ＴＣＲ又は癌関連抗原反応性ＴＣＲが使用され得る（例えば、ＮＹＥＳＯ、ＭＡＲＴ１、ｇｐ１００等）。

幾つかの実施形態においては、ＴＣＲは、正常／健康なペプチド反応性又はその他の抗原反応性／拘束性のＴＣＲである。幾つかの実施形態においては、ＴＣＲは、マウスＭＨＣ又はその他の非ヒトＭＨＣに対して反応性である。幾つかの実施形態においては、ＴＣＲは、クラスＩ拘束性ＴＣＲ又はクラスＩＩ拘束性ＴＣＲである。

抗原結合分子
適切なＣＡＲは、抗原（例えば、細胞表面抗原）に結合するように、その標的となる抗原と相互作用する抗原結合分子を導入することによって操作され得る。幾つかの実施形態においては、抗原結合分子は、その抗体フラグメント、例えば１種以上の単鎖抗体フラグメント（「ｓｃＦｖ」）である。ｓｃＦｖは、互いに連結された抗体の重鎖及び軽鎖の可変領域を有する単鎖抗体フラグメントである。米国特許第７，７４１，４６５号及び同第６，３１９，４９４号、並びにEshhar et al., Cancer Immunol Immunotherapy (1997) 45: 131-136を参照のこと。ｓｃＦｖは、親抗体の標的抗原と特異的に相互作用する能力を維持している。ｓｃＦｖは、キメラ抗原受容体において有用である。それというのも、ｓｃＦｖは、その他のＣＡＲ成分と一緒に単鎖の一部として発現されるように操作され得るからである。同上。Krause et al., J. Exp. Med., Volume 188, No. 4, 1998 (619-626)、Finney et al., Journal of Immunology, 1998, 161: 2791-2797も参照のこと。抗原結合分子は、典型的には、対象となる抗原を認識して結合することができるようにＣＡＲの細胞外部分の範囲内に含まれることを理解されたい。対象となる２つ以上の標的に特異性を有する二重特異性及び多重特異性のＣＡＲが、本発明の範囲内で考慮される。

幾つかの実施形態においては、ポリヌクレオチドは、本発明のＴＨＤと、標的抗原に特異的に結合する抗原結合分子とを含むＣＡＲ又はＴＣＲをコードする。幾つかの実施形態においては、標的抗原は、腫瘍抗原である。幾つかの実施の形態においては、前記抗原は、腫瘍関連表面抗原、例えば５Ｔ４、アルファフェトプロテイン（ＡＦＰ）、Ｂ７−１（ＣＤ８０）、Ｂ７−２（ＣＤ８６）、ＢＣＭＡ、Ｂ−ヒト絨毛膜性生殖腺刺激ホルモン、ＣＡ−１２５、癌胚抗原（ＣＥＡ）、癌胚抗原（ＣＥＡ）、ＣＤ１２３、ＣＤ１３３、ＣＤ１３８、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２３、ＣＤ２４、ＣＤ２５、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３４、ＣＤ４、ＣＤ４０、ＣＤ４４、ＣＤ５６、ＣＤ８、ＣＬＬ−１、ｃ−Ｍｅｔ、ＣＭＶ特異抗原、ＣＳ−１、ＣＳＰＧ４、ＣＴＬＡ−４、ＤＬＬ３、ジシアロガングリオシドＧＤ２、膵管上皮ムチン、ＥＢＶ特異抗原、ＥＧＦＲ変異体ＩＩＩ（ＥＧＦＲｖＩＩＩ）、ＥＬＦ２Ｍ、エンドグリン、エフリンＢ２、上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）、上皮細胞接着分子（ＥｐＣＡＭ）、上皮性腫瘍抗原、ＥｒｂＢ２（ＨＥＲ２／ｎｅｕ）、線維芽細胞関連タンパク質（ｆａｐ）、ＦＬＴ３、葉酸結合タンパク質、ＧＤ２、ＧＤ３、細胞膠腫関連抗原、スフィンゴ糖脂質、ｇｐ３６、ＨＢＶ特異抗原、ＨＣＶ特異抗原、ＨＥＲ１−ＨＥＲ２、ＨＥＲ２−ＨＥＲ３の組み合わせ、ＨＥＲＶ−Ｋ、高分子量黒色腫関連抗原（ＨＭＷ−ＭＡＡ）、ＨＩＶ−１型エンベロープ糖タンパク質ｇｐ４１、ＨＰＶ特異抗原、ヒトテロメラーゼ逆転写酵素、ＩＧＦＩ受容体、ＩＧＦ−ＩＩ、ＩＬ−１１Ｒアルファ、ＩＬ−１３Ｒ−ａ２、インフルエンザウイルス特異抗原、ＣＤ３８、インスリン増殖因子（ＩＧＦＩ）−１、腸カルボキシルエステラーゼ、カッパー鎖、ＬＡＧＡ−１ａ、ラムダ鎖、ラッサ熱ウイルス特異抗原、レクチン反応性ＡＦＰ、系譜特異又は組織特異抗原、例えばＣＤ３、ＭＡＧＥ、ＭＡＧＥ−Ａ１、主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）分子、腫瘍特異的ペプチドエピトープを提示する主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）分子、Ｍ−ＣＳＦ、黒色腫関連抗原、メソテリン、ＭＮ−ＣＡＩＸ、ＭＵＣ−１、ｍｕｔｈｓｐ７０−２、変異ｐ５３、変異ｐ５３、変異ｒａｓ、好中球エラスターゼ、ＮＫＧ２Ｄ、Ｎｋｐ３０、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ｐ５３、ＰＡＰ、プロスターゼ、前立腺特異抗原（ＰＳＡ）、前立腺癌腫瘍抗原−１（ＰＣＴＡ−１）、前立腺特異抗原タンパク質、ＳＴＥＡＰ１、ＳＴＥＡＰ２、ＰＳＭＡ、ＲＡＧＥ−１、ＲＯＲ１、ＲＵ１、ＲＵ２（ＡＳ）、表面接着分子、サバイビング及びテロメラーゼ、ＴＡＧ−７２、フィブロネクチンのエクストラドメインＡ（ＥＤＡ）及びエクストラドメインＢ（ＥＤＢ）、並びにテネイシンＣのＡ１ドメイン（ＴｎＣＡ１）、サイログロブリン、腫瘍間質抗原、血管内皮増殖因子受容体−２（ＶＥＧＦＲ２）、ウイルス特異表面抗原、例えばＨＩＶ特異抗原（例えば、ＨＩＶｇｐ１２０）、並びにこれらの表面マーカーの任意の誘導体又は変異体から選択される。

操作されたＴ細胞及び使用
本開示の細胞は、被験体から得られるＴ細胞を通じて得ることができる。Ｔ細胞は、例えば末梢血単核細胞、骨髄、リンパ節組織、臍帯血、胸腺組織、感染部位に由来する組織、腹水、胸水、脾臓組織、及び腫瘍から得られてもよい。さらに、Ｔ細胞は、当該技術分野において利用可能な１以上のＴ細胞株に由来し得る。また、Ｔ細胞は、ＦＩＣＯＬＬ（商標）分離及び／又はアフェレーシス等の当業者に知られている数多くの技術を使用して被験体から収集された血液単位から得られてもよい。幾つかの実施形態では、アフェレーシスによって収集された細胞を洗浄して血漿画分を除去し、後の処理に適切なバッファー又は培地に入れる。幾つかの実施形態では、細胞をＰＢＳで洗浄する。理解されるように、洗浄工程は、例えばＣｏｂｅ（商標）２９９１細胞処理装置、ＢａｘｔｅｒＣｙｔｏＭａｔｅ（商標）等の半自動フロースルー遠心分離機等を使用することによって使用され得る。幾つかの実施形態では、洗浄された細胞を１以上の生体適合性のバッファー、又はバッファーを含む若しくは含まない他の生理食塩水溶液に再懸濁する。幾つかの実施形態では、アフェレーシス試料の望ましくない成分が除去される。Ｔ細胞療法用にＴ細胞を単離する追加の方法は、米国特許出願公開第２０１３／０２８７７４８号に開示され、その全体が引用することにより本明細書の一部をなす。

幾つかの実施形態では、Ｔ細胞は、例えば赤血球の溶解及びＰＥＲＣＯＬＬ（商標）勾配による遠心分離を使用することによる単球の枯渇によってＰＢＭＣから単離される。幾つかの実施形態では、ＣＤ４^＋、ＣＤ８^＋、ＣＤ２８^＋、ＣＤ４５ＲＡ^＋及びＣＤ４５ＲＯ^＋のＴ細胞等のＴ細胞の特定の亜集団は、当該技術分野において知られている正又は負の選択技術によって更に単離される。例えば、負の選択によるＴ細胞集団の富化は、負に選択される細胞に特有の表面マーカーに対する抗体の組み合わせによって遂行され得る。幾つかの実施形態では、負に選択される細胞に存在する細胞表面マーカーに対するモノクローナル抗体のカクテルを使用する負の磁気免疫付着（negative magnetic immunoadherence）又はフローサイトメトリーによる細胞の選別及び／又は選択を使用することができる。例えば、負の選択によってＣＤ４^＋細胞を富化するため、モノクローナル抗体カクテルは、典型的には、ＣＤ８、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ１６、ＣＤ２０及びＨＬＡ−ＤＲに対する抗体を含む。幾つかの実施形態では、フローサイトメトリー及び細胞選別は、本開示における使用に対する目的の細胞集団を単離するために使用される。

幾つかの実施形態では、ＰＢＭＣは、本明細書に記載される方法を使用して、免疫細胞（ＣＡＲ等）により遺伝子修飾に直接使用される。幾つかの実施形態では、ＰＢＭＣを単離した後、Ｔリンパ球を更に単離し、遺伝子修飾及び／又は拡大の前又は後のいずれかに、細胞傷害性Ｔリンパ球とヘルパーＴリンパ球の両方を、ナイーブ、メモリー、及びエフェクターのＴ細胞亜集団へと選別する。

幾つかの実施形態では、ＣＤ８^＋細胞は、これら各種のＣＤ８^＋細胞と関連する細胞表面抗原を同定することによって、ナイーブ細胞、セントラルメモリー細胞、及びエフェクター細胞へと更に選別される。幾つかの実施形態では、セントラルメモリーＴ細胞の表現型マーカーの発現は、ＣＣＲ７、ＣＤ３、ＣＤ２８、ＣＤ４５ＲＯ、ＣＤ６２Ｌ、及びＣＤ１２７の発現を含み、グランザイムＢに対して陰性である。幾つかの実施形態では、セントラルメモリーＴ細胞は、ＣＤ８^＋、ＣＤ４５ＲＯ^＋及びＣＤ６２Ｌ^＋のＴ細胞である。幾つかの実施形態では、エフェクターＴ細胞は、ＣＣＲ７、ＣＤ２８、ＣＤ６２Ｌ及びＣＤ１２７に対して陰性であり、グランザイムＢ及びパーフォリンに対して陽性である。幾つかの実施形態では、ＣＤ４^＋Ｔ細胞は亜集団へと更に選別される。例えば、ＣＤ４^＋ヘルパーＴ細胞は、細胞表面抗原を有する細胞集団を同定することによって、ナイーブ細胞、セントラルメモリー細胞及びエフェクター細胞へと選別され得る。

幾つかの実施形態では、免疫細胞、例えばＴ細胞は、単離に続いて、既知の方法を使用して遺伝子修飾されるか、又は遺伝子修飾に先だってｉｎｖｉｔｒｏで免疫細胞が活性化され、拡大される（又は、前駆細胞の場合、分化される）。別の実施形態では、免疫細胞、例えばＴ細胞は、本明細書に記載されるキメラ抗原受容体によって遺伝子修飾され（例えば、ＣＡＲ又はＴＣＲをコードする１以上のヌクレオチド配列を含むウイルスベクターによって形質導入される）、次いでｉｎｖｉｔｒｏで活性化及び／又は拡大される。Ｔ細胞を活性化及び拡大する方法は当該技術分野において知られており、例えば米国特許第６，９０５，８７４号、同第６，８６７，０４１号、及び同第６，７９７，５１４号、並びにＰＣＴ公報国際公開第２０１２／０７９０００号に記載され、それらの内容は、それらの全体が引用することにより本明細書の一部をなす。一般的には、かかる方法は、ＰＢＭＣ又は単離されたＴ細胞と、一般的にはビーズ又は他の表面に付着された抗ＣＤ３抗体及び抗ＣＤ２８抗体等の刺激物質及び共刺激物質とを、ＩＬ−２等の適切なサイトカインを含む培養培地中で接触させることを含む。同じビーズに付着された抗ＣＤ３抗体及び抗ＣＤ２８抗体は、「代理」抗原提示細胞（ＡＰＣ）としての役割を果たす。一例は、ヒトＴ細胞の生理学的な活性化に対するＣＤ３／ＣＤ２８活性化因子／刺激因子システムである、Ｄｙｎａｂｅａｄｓ（商標）システムである。他の実施形態では、米国特許第６，０４０，１７７号及び同第５，８２７，６４２号、並びにＰＣＴ公報国際公開第２０１２／１２９５１４号（それらの内容は、それらの全体が引用することにより本明細書の一部をなす）に記載されるような方法を使用して、フィーダー細胞、並びに適切な抗体及びサイトカインによって、Ｔ細胞は活性化され、刺激されて増殖する。

幾つかの実施形態では、Ｔ細胞はドナー被験体から得られる。幾つかの実施形態では、ドナー被験体は、癌又は腫瘍に冒されたヒト患者である。幾つかの実施形態では、ドナー被験体は癌又は腫瘍に冒されていないヒト患者である。

幾つかの実施形態では、上記組成物は、薬学的に許容可能な担体、希釈剤、可溶化剤、乳化剤、防腐剤、及び／又はアジュバントを含む。幾つかの実施形態では、上記組成物は賦形剤を含む。

幾つかの実施形態では、上記組成物は、非経口的な送達に対し、吸入に対し、又は経口等の消化管による送達に対して選択される。かかる薬学的に許容可能な組成物の作製は、当業者の能力の範囲に含まれる。幾つかの実施形態では、バッファーを使用して上記組成物を生理学的ｐＨ又はわずかに低いｐＨ、典型的には約５〜約８の範囲のｐＨに維持する。幾つかの実施形態では、非経口投与が検討される場合、上記組成物は、薬学的に許容可能なビヒクル中、追加の治療剤と共に又はそれを伴わずに、本明細書に記載される組成物を含む、パイロジェンフリー（pyrogen-free）の非経口的に許容可能な水溶液の形態である。幾つかの実施形態では、非経口注射用のビヒクルは滅菌蒸留水であり、該蒸留水中において、少なくとも１つの追加の治療剤と共に又はそれを伴わずに、本明細書に記載される組成物が適切に保存される無菌の等張液として製剤化される。幾つかの実施形態では、上記作製は、所望の分子と、製品の制御放出又は持続放出を提供する、高分子化合物（ポリ乳酸又はポリグリコール酸等）、ビーズ、又はリポソームとの製剤化を含み、その後、デポー注射によって送達される。幾つかの実施形態では、所望の分子を導入するために、埋め込み可能な薬物送達デバイスが使用される。

幾つかの実施形態では、癌の治療を、それを必要とする被験体において行う方法は、Ｔ細胞療法を含む。幾つかの実施形態では、本明細書に開示されるＴ細胞療法は操作された自己細胞療法（ｅＡＣＴ（商標））である。この実施形態によれば、上記方法は、患者から血液細胞を収集することを含み得る。単離された血液細胞（例えばＴ細胞）は、その後、本明細書に開示されるＣＡＲ又はＴＣＲを発現するように操作され得る。特定の実施形態では、ＣＡＲＴ細胞又はＴＣＲＴ細胞は患者に投与される。幾つかの実施形態では、ＣＡＲＴ細胞又はＴＣＲＴ細胞は、患者において腫瘍又は癌を治療する。幾つかの実施形態では、ＣＡＲＴ細胞又はＴＣＲＴ細胞は、腫瘍又は癌のサイズを減少する。

幾つかの実施形態では、Ｔ細胞療法における使用に対するドナーＴ細胞は、（例えば自己Ｔ細胞療法に対しては）患者から得られる。他の実施形態では、Ｔ細胞療法における使用に対するドナーＴ細胞は、患者でない被験体から得られる。

幾つかの実施形態では、Ｔ細胞は治療的有効量で投与され得る。例えば、Ｔ細胞の治療的有効量は、少なくとも約１０^４個の細胞、少なくとも約１０^５個の細胞、少なくとも約１０^６個の細胞、少なくとも約１０^７個の細胞、少なくとも約１０^８個の細胞、少なくとも約１０^９個の細胞、又は少なくとも約１０^１０個の細胞となり得る。別の実施形態では、Ｔ細胞の治療的有効量は、約１０^４個の細胞、約１０^５個の細胞、約１０^６個の細胞、約１０^７個の細胞、又は約１０^８個の細胞である。幾つかの実施形態では、ＣＡＲＴ細胞の治療的有効量は、約２×１０^６細胞／ｋｇ、約３×１０^６細胞／ｋｇ、約４×１０^６細胞／ｋｇ、約５×１０^６細胞／ｋｇ、約６×１０^６細胞／ｋｇ、約７×１０^６細胞／ｋｇ、約８×１０^６細胞／ｋｇ、約９×１０^６細胞／ｋｇ、約１×１０^７細胞／ｋｇ、約２×１０^７細胞／ｋｇ、約３×１０^７細胞／ｋｇ、約４×１０^７細胞／ｋｇ、約５×１０^７細胞／ｋｇ、約６×１０^７細胞／ｋｇ、約７×１０^７細胞／ｋｇ、約８×１０^７細胞／ｋｇ、又は約９×１０^７細胞／ｋｇである。

幾つかの実施形態においては、治療的有効量のＣＡＲ陽性生存Ｔ細胞は、最大用量約１×１０^８個のＣＡＲ陽性生存Ｔ細胞までの、体重１ｋｇ当たり約１×１０^６個から約２×１０^６個の間のＣＡＲ陽性生存Ｔ細胞である。

治療方法
本明細書に開示される方法は、被験体において癌を治療するため、腫瘍のサイズを減少させるため、腫瘍細胞を死滅させるため、腫瘍細胞増殖を予防するため、腫瘍の成長を予防するため、患者から腫瘍を排除するため、腫瘍の再燃を予防するため、腫瘍転移を予防するため、患者において寛解を誘導するため、又はそれらの任意の組み合わせに使用され得る。幾つかの実施形態では、上記方法は完全奏功を誘導する。他の実施形態では、上記方法は部分奏功を誘導する。

治療され得る癌は、血管新生化されていない、まだ実質的に血管新生化されていない、又は血管新生化された腫瘍を含む。また、癌は固形腫瘍又は非固形腫瘍を含み得る。幾つかの実施形態では、癌は血液の癌である。幾つかの実施形態では、癌は白血球の癌である。他の実施形態では、癌は形質細胞の癌である。幾つかの実施形態では、癌は白血病、リンパ腫又は骨髄腫である。幾つかの実施形態では、上記癌は、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）（非Ｔ細胞ＡＬＬを含む）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、及び血球貪食リンパ組織球増多症（ＨＬＨ））、Ｂ細胞前リンパ球性白血病、Ｂ細胞急性リンパ性白血病（「ＢＡＬＬ」）、芽球性形質細胞様樹状細胞新生物、バーキットリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、慢性骨髄白血病（ＣＭＬ）、慢性若しくは急性の肉芽腫性疾患、慢性若しくは急性の白血病、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫、濾胞性リンパ腫（ＦＬ）、毛様細胞性白血病、血球貪食症候群（マクロファージ活性化症候群（ＭＡＳ））、ホジキン病、大細胞肉芽腫（large cell granuloma）、白血球接着不全症、悪性リンパ増殖性状態、ＭＡＬＴリンパ腫、マントル細胞リンパ腫、辺縁帯リンパ腫、意義不明の単クローン性γグロブリン血症（ＭＧＵＳ）、多発性骨髄腫、脊髄形成異常及び骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、限定されないが急性骨髄白血病（ＡＭＬ）を含む骨髄疾患、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、形質細胞増殖性障害（例えば、無症候性骨髄腫（くすぶり型多発性骨髄腫又は無痛性骨髄腫））、形質芽球性リンパ腫、形質細胞様樹状細胞新生物、形質細胞腫（例えば、形質細胞異常増殖症；孤立性骨髄腫；孤立性形質細胞腫；髄外性形質細胞腫；及び多発性形質細胞腫）、ＰＯＥＭＳ症候群（Ｃｒｏｗ−Ｆｕｋａｓｅ症候群、高月病、及びＰＥＰ症候群）、縦隔原発大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＰＭＢＣ）、小細胞若しくは大細胞濾胞性リンパ腫、脾辺縁帯リンパ腫（ＳＭＺＬ）、全身性アミロイド軽鎖アミロイドーシス、Ｔ細胞急性リンパ性白血病（「ＴＡＬＬ」）、Ｔ細胞リンパ腫、形質転換後濾胞性リンパ腫、ワルデンストレームマクログロブリン血症、又はそれらの組み合わせである。

幾つかの実施形態では、癌は骨髄腫である。特定の一実施形態では、癌は多発性骨髄腫である。幾つかの実施形態では、癌は白血病である。幾つかの実施形態では、癌は急性骨髄白血病である。

幾つかの実施形態では、上記方法は化学療法剤を投与することを更に含む。幾つかの実施形態では、選択される化学療法剤は、リンパ枯渇（lymphodepleting）（プレコンディショニング）化学療法剤である。有益なプレコンディショニング治療のレジメンは、相関的な有益なバイオマーカーと共に、米国仮特許出願第６２／２６２，１４３号及び同第６２／１６７，７５０号に記載され、それらの全体が引用することにより本明細書の一部をなす。これらは、例えば、指定される有益な用量のシクロホスファミド（２００ｍｇ／ｍ^２／日〜２０００ｍｇ／ｍ^２／日）及び指定される用量のフルダラビン（２０ｍｇ／ｍ^２／日〜９００ｍｇ／ｍ^２／日）を患者に投与することを含むＴ細胞療法を必要とする患者をコンディショニングする方法を記載する。或る一つのかかる投薬レジメンは、治療的有効量の操作されたＴ細胞の患者への投与の３日前に、約５００ｍｇ／ｍ^２／日のシクロホスファミド及び約６０ｍｇ／ｍ^２／日のフルダラビンを毎日患者に投与することを含む、患者を治療することを含む。

幾つかの実施形態では、抗原結合分子、形質導入された（或いは操作された）細胞（ＣＡＲ又はＴＣＲ等）、及び化学療法剤は、各々、被験体における疾患又は状態を治療するのに有効な量で投与される。

幾つかの実施形態では、本明細書に開示されるＣＡＲを発現する免疫エフェクター細胞を含む組成物は、任意の数の化学療法剤と併せて投与され得る。化学療法剤の例として、チオテパ及びシクロホスファミド（ＣＹＴＯＸＡＮ（商標））等のアルキル化剤；ブスルファン、インプロスルファン及びピポスルファン等のアルキルスルホン酸塩；ベンゾドーパ（benzodopa）、カルボコン、メツレドーパ（meturedopa）、及びウレドーパ（uredopa）等のアジリジン；アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド、トリエチレンチオホスホラミド（triethylenethiophosphaoramide）、及びトリメチロロメラミン（trimethylolomelamine）のレジメ（resume）を含む、エチレンイミン及びメチラメラミン（methylamelamines）；クロラムブチル、クロルナファジン、コロホスファミド（cholophosphamide）、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、塩酸メクロレタミンオキシド、メルファラン、ノベムビチン（novembichin）、フェネステリン（phenesterine）、プレドニムスチン（prednimustine）、トロホスファミド（trofosfamide）、ウラシルマスタード等のナイトロジェンマスタード；カルムスチン、クロロゾトシン、ホテムスチン、ロムスチン、ニムスチン及びラニムスチン（ranimustine）等のニトロソウレア；アクラシノマイシン（aclacinomysins）、アクチノマイシン、アントラマイシン（authramycin）、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カリチアマイシン、カラビシン（carabicin）、カルミノマイシン、カルジオリピン、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン（detorubicin）、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、ドキソルビシン、エピルビシン、エソルビシン（esorubicin）、イダルビシン、マルセロマイシン（marcellomycin）、マイトマイシン、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン（potfiromycin）、ピューロマイシン、ケラマイシン（quelamycin）、ロドルビシン（rodorubicin）、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシン（zorubicin）等の抗生物質；メトトレキセート及び５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）等の代謝拮抗薬；デノプテリン、メトトレキセート、プテロプテリン、トリメトレキセート等の葉酸類縁体；フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン（thiamiprine）、チオグアニン等のプリン類縁体；アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン、５−ＦＵ等のピリミジン類縁体；カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン等のアンドロゲン；アミノグルテチミド、マイトテイン、トリロスタン等の抗副腎剤；フロリン酸（frolinic acid）等の葉酸補液；アセグラトン；アルドホスファミドグリコシド；アミノレブリン酸；アムサクリン；ベストラブシル（bestrabucil）；ビスアントレン；エダトラキサート（edatraxate）；デフォファミン（defofamine）；デメコルチン；ジアジコン；エルフォルミチン（elformithine）；酢酸エリプチニウム；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキウレア；レンティナン；ロニダミン；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダモール；ニトラクリン（nitracrine）；ペントスタチン；フェナメット（phenamet）；ピラルビシン；ポドフィリン酸；２−エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（商標）；ラゾキサン；シゾフィラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジクオン；２、２’，２’’−トリクロロトリエチルアミン；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン（gacytosine）；アラビノシッド（「Ａｒａ−Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；タキソイド、例えばパクリタキセル（ＴＡＸＯＬ（商標）、Ｂｒｉｓｔｏｌ−ＭｙｅｒｓＳｑｕｉｂｂ）及びドセタキセル（ＴＡＸＯＴＥＲＥ（商標）、Ｒｈｏｎｅ−ＰｏｕｌｅｎｃＲｏｒｅｒ）；クロラムブチル；ゲムシタビン；６−チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキセート；シスプラチン及びカルボプラチン等の白金類縁体；ビンブラスチン；白金；エトポシド（ＶＰ−１６）；イホスファミド；マイトマイシンＣ；ミトキサントロン；ビンクリスチン；ビノレルビン；ナベルビン；ノバントロン；テニポシド；ダウノマイシン；アミノプテリン；ゼローダ；イバンドロン酸；ＣＰＴ−１１；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ２０００；ジフルオロメチルオミチン（ＤＭＦＯ）；Ｔａｒｇｒｅｔｉｎ（商標）（ベキサロテン）、Ｐａｎｒｅｔｉｎ（商標）（アリトレチノイン）等のレチノイン酸誘導体；ＯＮＴＡＫ（商標）（デニロイキンジフチトクス）；エスペラミシン；カペシタビン；並びに上記のいずれかの薬学的に許容可能な塩、酸又は誘導体が挙げられる。幾つかの実施形態では、本明細書に開示されるＣＡＲ及び／又はＴＣＲを発現する免疫エフェクター細胞を含む組成物は、腫瘍に対するホルモンの作用を調節又は阻害するように作用する抗ホルモン剤、例えば、タモキシフェン、ラロキシフェン、アロマターゼ阻害４（５）−イミダゾール、４−ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン（keoxifene）、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン、及びトレミフェン（フェアストン）を含む抗エストロゲン薬；並びにフルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、リュープロリド及びゴセレリン等の抗アンドロゲン薬；並びに上記のいずれかの薬学的に許容可能な塩、酸又は誘導体と併せて投与され得る。また適切な場合には、限定されないが、ＣＨＯＰ、すなわち、シクロホスファミド（Ｃｙｔｏｘａｎ（商標））、ドキソルビシン（ヒドロキシドキソルビシン）、ビンクリスチン（Ｏｎｃｏｖｉｎ（商標））及びプレドニゾンを含む化学療法剤の組み合わせが投与される。

幾つかの実施形態では、化学療法剤は、操作された細胞又は核酸の投与と同時に又は投与の１週以内に投与される。他の実施形態では、化学療法剤は、操作された細胞又は核酸の投与の後、１週間〜４週間、すなわち１週間〜１ヶ月、１週間〜２ヶ月、１週間〜３ヶ月、１週間〜６ヶ月、１週間〜９ヶ月、又は１週間〜１２ヶ月投与される。幾つかの実施形態では、化学療法剤は、細胞又は核酸を投与する少なくとも１ヶ月前に投与される。幾つかの実施形態では、上記方法は、２以上の化学療法剤を投与することを更に含む。

様々な追加の治療剤が、本明細書に記載される組成物と併せて使用され得る。例えば、有用な可能性がある追加の治療剤として、ニボルマブ（ＯＰＤＩＶＯ（商標））、ペンブロリズマブ（ＫＥＹＴＲＵＤＡ（商標））、ペンブロリズマブ、ピディリズマブ（CureTech）、及びアテゾリズマブ（Roche）等のＰＤ−１阻害剤が挙げられる。

本明細書に開示される組成物及び方法との併用に適している追加の治療剤として、限定されないが、イブルチニブ（ＩＭＢＲＵＶＩＣＡ（商標））、オファツムマブ（ＡＲＺＥＲＲＡ（商標））、リツキシマブ（ＲＩＴＵＸＡＮ（商標））、ベバシズマブ（ＡＶＡＳＴＩＮ（商標））、トラスツズマブ（ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（商標））、トラスツズマブエムタンシン（ＫＡＤＣＹＬＡ（商標））、イマチニブ（ＧＬＥＥＶＥＣ（商標））、セツキシマブ（ＥＲＢＩＴＵＸ（商標））、パニツムマブ（ＶＥＣＴＩＢＩＸ（商標））、カツマキソマブ、イブリツモマブ、オファツムマブ、トシツモマブ、ブレンツキシマブ、アレムツズマブ、ゲムツズマブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、バンデタニブ、アファチニブ、ラパチニブ、ネラチニブ、アキシチニブ、マシチニブ、パゾパニブ、スニチニブ、ソラフェニブ、トセラニブ、レスタウルチニブ、アキシチニブ、セジラニブ、レンバチニブ、ニンテダニブ、パゾパニブ、レゴラフェニブ、セマクサニブ、ソラフェニブ、スニチニブ、チボザニブ、トセラニブ、バンデタニブ、エントレクチニブ、カボザンチニブ、イマチニブ、ダサチニブ、ニロチニブ、ポナチニブ、ラドチニブ（radotinib）、ボスチニブ、レスタウルチニブ、ルキソリチニブ、パクリチニブ、コビメチニブ、セルメチニブ、トラメチニブ、ビニメチニブ、アレクチニブ、セリチニブ、クリゾチニブ、アフリベルセプト、アジポチド、デニロイキンジフチトクス、エベロリムス及びテムシロリムス等のｍＴＯＲ阻害剤、ソニデギブ及びビスモデギブ等のヘッジホッグ阻害剤、ＣＤＫ阻害剤（パルボシクリブ）等のＣＤＫ阻害剤が挙げられる。

幾つかの実施形態では、ＣＡＲ免疫細胞を有する組成物は、抗炎症剤と共に投与される。抗炎症剤又は抗炎症薬として、限定されないが、ステロイド及びグルココルチコイド（ベタメタゾン、ブデソニド、デキサメタゾン、酢酸ヒドロコルチゾン、ヒドロコルチゾン、ヒドロコルチゾン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン、プレドニゾン、トリアムシノロンを含む）、アスピリン、イブプロフェン、ナプロキセン、メトトレキセート、スルファサラジン、レフルノミド、抗ＴＮＦ薬、シクロホスファミド、及びミコフェノール酸（mycophenolate）を含む非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）が挙げられ得る。例示的なＮＳＡＩＤとして、イブプロフェン、ナプロキセン、ナプロキセンナトリウム、Ｃｏｘ−２阻害剤、及びシアリレート（sialylates）が挙げられる。例示的な鎮痛剤として、アセトアミノフェン、オキシコドン、塩酸プロポキシフェンのトラマドールが挙げられる。例示的なグルココルチコイドとして、コルチゾン、デキサメタゾン、ヒドロコルチゾン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン、又はプレドニゾンが挙げられる。例示的な生物学的応答修飾物質として、細胞表面マーカー（例えばＣＤ４、ＣＤ５等）に対する分子、サイトカイン阻害剤（例えば、ＴＮＦアンタゴニスト（例えば、エタネルセプト（ＥＮＢＲＥＬ（商標））、アダリムマブ（ＨＵＭＩＲＡ（商標））及びインフリキシマブ（ＲＥＭＩＣＡＤＥ（商標）））、ケモカイン阻害剤、及び接着分子阻害剤が挙げられる。生物学的応答修飾物質は、分子の組み換え形態と並んで、モノクローナル抗体も含む。例示的なＤＭＡＲＤとして、アザチオプリン、シクロホスファミド、シクロスポリン、メトトレキセート、ペニシラミン、レフルノミド、スルファサラジン、ヒドロキシクロロキン、金（経口（オーラノフィン）及び筋肉内）、及びミノサイクリンが挙げられる。

幾つかの実施形態では、本明細書に記載される組成物は、サイトカインと併せて投与される。サイトカインの例は、リンホカイン、モノカイン及び従来のポリペプチドホルモンである。サイトカインの中でも、ヒト成長ホルモン、Ｎ−メチオニルヒト成長ホルモン及びウシ成長ホルモン等の成長ホルモン；副甲状腺ホルモン；チロキシン；インスリン；プロインスリン；リラキシン；プロリラキシン；卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）、甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）及び黄体形成ホルモン（ＬＨ）等の糖タンパク質ホルモン；肝臓増殖因子（ＨＧＦ）；線維芽細胞成長因子（ＦＧＦ）；プロラクチン；胎盤性ラクトゲン；ミューラー阻害物質；マウス性腺刺激ホルモン関連ペプチド；インヒビン；アクチビン；血管内皮細胞増殖因子；インテグリン；トロンボポイエチン（ＴＰＯ）；ＮＧＦ−ベータ等の神経成長因子（ＮＧＦ）；血小板増殖因子；ＴＧＦ−アルファ及びＴＧＦ−ベータ等のトランスフォーミング増殖因子（ＴＧＦ）；インスリン様増殖因子Ｉ及びＩＩ；エリスロポエチン（ＥＰＯ、Ｅｐｏｇｅｎ（商標）、Ｐｒｏｃｒｉｔ（商標））；骨誘導因子；インターフェロン−アルファ、ベータ及びガンマ等のインターフェロン；マクロファージ−ＣＳＦ（Ｍ−ＣＳＦ）；顆粒球マクロファージ−ＣＳＦ（ＧＭ−ＣＳＦ）；及び顆粒球−ＣＳＦ（Ｇ−ＣＳＦ）等のコロニー刺激因子（ＣＳＦ）；ＩＬ−１、ＩＬ−１アルファ、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２；ＩＬ−１５等のインターロイキン（ＩＬ）、ＴＮＦ−アルファ又はＴＮＦ−ベータ等の腫瘍壊死因子；並びにＬＩＦ及びｋｉｔリガンド（ＫＬ）を含む他のポリペプチド因子が挙げられる。本明細書で使用されるサイトカインの用語は、天然起源の又は組み換え細胞培養物由来のタンパク質、及び本来の配列のサイトカインの生物学的に活性な等価物を含む。

投与
幾つかの実施形態においては、本明細書に記載される操作されたＴ細胞を使用することで、患者における悪性腫瘍が治療され、それには（ａ）１つ以上のキメラ受容体を有する複数のＴ細胞を得ることと、（ｂ）予め決められた量の多機能性Ｔ細胞を含む有効用量の上記Ｔ細胞を上記患者に投与することとが含まれる。

幾つかの実施形態においては、Ｔ細胞は治療的有効量で投与され得る。例えば、治療的有効量のＴ細胞は、少なくとも約１０^４個の細胞、少なくとも約１０^５個の細胞、少なくとも約１０^６個の細胞、少なくとも約１０^７個の細胞、少なくとも約１０^８個の細胞、少なくとも約１０^９個の細胞、又は少なくとも約１０^１０個の細胞であり得る。別の実施形態では、治療的有効量のＴ細胞は、約１０^４個の細胞、約１０^５個の細胞、約１０^６個の細胞、約１０^７個の細胞、又は約１０^８個の細胞である。幾つかの実施形態では、ＣＡＲＴ細胞の治療的有効量は、約２×１０^６細胞／ｋｇ、約３×１０^６細胞／ｋｇ、約４×１０^６細胞／ｋｇ、約５×１０^６細胞／ｋｇ、約６×１０^６細胞／ｋｇ、約７×１０^６細胞／ｋｇ、約８×１０^６細胞／ｋｇ、約９×１０^６細胞／ｋｇ、約１×１０^７細胞／ｋｇ、約２×１０^７細胞／ｋｇ、約３×１０^７細胞／ｋｇ、約４×１０^７細胞／ｋｇ、約５×１０^７細胞／ｋｇ、約６×１０^７細胞／ｋｇ、約７×１０^７細胞／ｋｇ、約８×１０^７細胞／ｋｇ、又は約９×１０^７細胞／ｋｇである。

幾つかの実施形態においては、治療的有効量又は有効用量は、多機能性Ｔ細胞の量によって決定される。多機能性Ｔ細胞の量は、少なくとも約１０^４個の多機能性細胞、少なくとも約１０^５個の多機能性細胞、少なくとも約１０^６個の多機能性細胞、少なくとも約１０^７個の多機能性細胞、少なくとも約１０^８個の多機能性細胞、少なくとも約１０^９個の多機能性細胞、又は少なくとも約１０^１０個の多機能性細胞であり得る。

幾つかの実施形態においては、有効用量は、多機能性強度インデックスに、Ｔ細胞の総数を掛けることにより得られたＰＳＩの用量を含む。幾つかの実施形態においては、有効用量は、少なくとも３．５×１０^１０又は少なくとも７．７×１０^１０を含む。幾つかの実施形態においては、多機能性Ｔ細胞の予め決められた量は、多機能性強度インデックスに、細胞の総数（例えば、最大用量約１×１０^８個の生存Ｔ細胞までの、体重１ｋｇ当たり約２×１０^６個の生存Ｔ細胞）を掛けることによって得られる。幾つかの実施形態においては、有効用量は、およそ３．５×１０^１０個から７．７×１０^１０個までの多機能性Ｔ細胞の範囲である。幾つかの実施形態においては、ＰＳＩの有効用量は、ＰＳＩ×注入されたＴ細胞の単位において、およそ３．５×１０^１０〜４．５×１０^１０、３．５×１０^１０〜５．５×１０^１０、３．５×１０^１０〜６．５×１０^１０、３．５×１０^１０〜７．５×１０^１０、３．５×１０^１０〜７．８×１０^１０、３．５×１０^１０〜８．０×１０^１０、３．５×１０^１０〜９．０×１０^１０、３．５×１０^１０〜１０．０×１０^１０、４．５×１０^１０〜５．５×１０^１０、４．５×１０^１０〜６．５×１０^１０、４．５×１０^１０〜７．５×１０^１０、４．５×１０^１０〜７．８×１０^１０、４．５×１０^１０〜８．０×１０^１０、４．５×１０^１０〜９．０×１０^１０、４．５×１０^１０〜１０．０×１０^１０、５．５×１０^１０〜６．５×１０^１０、５．５×１０^１０〜７．５×１０^１０、５．５×１０^１０〜７．８×１０^１０、５．５×１０^１０〜８．０×１０^１０、５．５×１０^１０〜９．０×１０^１０、５．５×１０^１０〜１０．０×１０^１０、６．５×１０^１０〜７．５×１０^１０、６．５×１０^１０〜７．８×１０^１０、６．５×１０^１０〜８．０×１０^１０、６．５×１０^１０〜９．０×１０^１０、６．５×１０^１０〜１０．０×１０^１０、７．５×１０^１０〜８．０×１０^１０、７．５×１０^１０〜９．０×１０^１０、７．５×１０^１０〜１０．０×１０^１０の範囲である。

幾つかの実施形態においては、有効量は、ＰＳＩ×注入されたＴ細胞の単位において、少なくともおよそ３．０×１０^１０、３．１×１０^１０、３．２×１０^１０、３．３×１０^１０、３．４×１０^１０、３．５×１０^１０、３．６×１０^１０、３．７×１０^１０、３．８×１０^１０、３．９×１０^１０、４．０×１０^１０、４．１×１０^１０、４．２×１０^１０、４．３×１０^１０、４．４×１０^１０、４．５×１０^１０、４．６×１０^１０、４．７×１０^１０、４．８×１０^１０、４．９×１０^１０、５．０×１０^１０、５．１×１０^１０、５．２×１０^１０、５．３×１０^１０、５．４×１０^１０、５．５×１０^１０、５．６×１０^１０、５．７×１０^１０、５．８×１０^１０、５．９×１０^１０、６．０×１０^１０、６．１×１０^１０、６．２×１０^１０、６．３×１０^１０、６．４×１０^１０、６．５×１０^１０、６．６×１０^１０、６．７×１０^１０、６．８×１０^１０、６．９×１０^１０、又は７．０×１０^１０、７．１×１０^１０、７．２×１０^１０、７．３×１０^１０、７．４×１０^１０、７．５×１０^１０、７．６×１０^１０、７．７×１０^１０、７．８×１０^１０、７．９×１０^１０、８．０×１０^１０を含む。幾つかの実施形態においては、有効用量は、ＰＳＩ×注入されたＴ細胞の単位において、少なくともおよそ３．５×１０^１０を含む。幾つかの実施形態においては、有効用量は、ＰＳＩ×注入されたＴ細胞の単位において、少なくともおよそ７．７×１０^１０を含む。

幾つかの実施形態においては、多機能性Ｔ細胞の予め決められた量は、多機能性Ｔ細胞のパーセンテージに、細胞の総数（例えば、最大用量約１×１０^８個の生存Ｔ細胞までの、体重１ｋｇ当たり約２×１０^６個の生存Ｔ細胞）を掛けることによって得られる。幾つかの実施形態においては、予め決められた量の多機能性Ｔ細胞は、少なくともおよそ１．０×１０^７、１．１×１０^７、１．２×１０^７、１．３×１０^７、１．４×１０^７、１．５×１０^７、１．６×１０^７、１．７×１０^７、１．８×１０^７、１．９×１０^７、２．０×１０^７、２．１×１０^７、２．２×１０^７、２．３×１０^７、２．４×１０^７、２．５×１０^７、２．６×１０^７、２．７×１０^７、２．８×１０^７、２．９×１０^７、３．０×１０^７、３．１×１０^７、３．２×１０^７、３．３×１０^７、３．４×１０^７、３．５×１０^７、３．６×１０^７、３．７×１０^７、３．８×１０^７、３．９×１０^７、４．０×１０^７、４．１×１０^７、４．２×１０^７、４．３×１０^７、４．４×１０^７、４．５×１０^７、４．６×１０^７、４．７×１０^７、４．８×１０^７、４．９×１０^７、又は５．０×１０^７の多機能性Ｔ細胞である。幾つかの実施形態においては、予め決められた量の多機能性Ｔ細胞は、およそ２．４×１０^７〜４．２×１０^７である。幾つかの実施形態においては、予め決められた量の多機能性Ｔ細胞は、およそ２．０×１０^７〜５．０×１０^７、２．０×１０^７〜４．５×１０^７、２．０×１０^７〜４．０×１０^７、及び１．０×１０^７〜３．５×１０^７の多機能性Ｔ細胞の範囲である。

モニタリング
幾つかの実施形態においては、キメラ受容体Ｔ細胞免疫療法薬の投与は、認可された医療機関で行われる。

幾つかの実施形態においては、本明細書に開示される方法は、患者を注入後に少なくとも毎日７日間にわたり認可された医療機関で、ＣＲＳ及び神経毒性の徴候及び症候についてモニタリングすることを含む。

幾つかの実施形態においては、患者は、認可された医療機関の近接範囲内で注入後に少なくとも４週間にわたって留まるよう指示される。

重度の有害反応の管理
幾つかの実施形態においては、上記方法は、有害反応の管理を含む。幾つかの実施の形態においては、有害反応は、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、神経毒性、過敏反応、重症感染、血球減少症、及び低ガンマグロブリン血症からなる群から選択される。

幾つかの実施形態では、有害反応の徴候及び症候は、発熱、低血圧症、頻脈、低酸素症、及び悪寒からなる群から選択され、心不整脈（心房性細動及び心室頻拍を含む）、心停止、心不全、腎不全、毛細血管漏出症候群、低血圧症、低酸素症、臓器毒性、血球貪食性リンパ組織球症／マクロファージ活性化症候群（ＨＬＨ／ＭＡＳ）、発作、脳症、頭痛、振戦、眩暈、失語症、せん妄、不眠症、不安症、アナフィラキシー、発熱性好中球減少症、血小板減少症、好中球減少症、及び貧血症を含む。

サイトカイン放出症候群
幾つかの実施形態においては、上記方法は、多機能性ＣＡＲＴ細胞のパーセンテージを調整することによって、キメラ受容体治療においてＣＲＳを予防又はその重症度を軽減することを含む。幾つかの実施形態においては、多機能性Ｔ細胞は、患者に投与した後に不活性化される。

幾つかの実施形態においては、上記方法は、ＣＲＳを臨床症状に基づき特定することを含む。幾つかの実施形態においては、上記方法は、発熱、低酸素症、及び低血圧症のその他の原因を評価し、治療することを含む。グレード２以上のＣＲＳ（例えば、輸液反応性でない低血圧症又は酸素補給を必要とする低酸素症）を経験している患者は、連続的な心電図遠隔測定法及びパルスオキシメトリーを用いてモニタリングされるべきである。幾つかの実施形態においては、重度のＣＲＳを経験している患者については、心機能の評価のために心エコー図を実施することが検討される。重度又は生命を脅かすＣＲＳについては、集中治療の支持療法が検討される場合がある。

幾つかの実施形態においては、上記方法は、患者を注入後に少なくとも毎日７日間にわたり認可された医療機関で、ＣＲＳの徴候及び症候についてモニタリングすることを含む。幾つかの実施形態においては、上記方法は、患者を注入後４週間にわたりＣＲＳの徴候又は症候についてモニタリングすることを含む。幾つかの実施形態においては、上記方法は、ＣＲＳの徴候又は症候が万一起こったらいつでも、直ちに医師の診察を受けるように患者に助言することを含む。幾つかの実施形態においては、上記方法は、ＣＲＳの最初の徴候が見られた時点で、示されたように支持療法、トシリズマブ又はトシリズマブ及びコルチコステロイドによる治療を開始することを含む。

神経毒性
幾つかの実施形態においては、上記方法は、患者を神経毒性の徴候及び症候についてモニタリングすることを含む。幾つかの実施形態においては、上記方法は、神経症状のその他の原因を除外することを含む。グレード２以上の神経毒性を経験している患者は、連続的な心電図遠隔測定法及びパルスオキシメトリーを用いてモニタリングされるべきである。重度又は生命を脅かす神経毒性の場合には集中治療の支援療法が提供される。

幾つかの実施形態においては、上記方法は、患者を注入後に少なくとも毎日７日間にわたり認可された医療機関で、神経毒性の徴候及び症候についてモニタリングすることを含む。幾つかの実施形態においては、上記方法は、患者を注入後４週間にわたり神経毒性の徴候又は症候についてモニタリングすることを含む。

二次性悪性腫瘍
幾つかの実施形態においては、ＣＤ１９指向性遺伝子改変自己Ｔ細胞免疫療法で治療された患者は、二次性悪性腫瘍を発症する場合がある。幾つかの実施形態においては、上記方法は、二次性悪性腫瘍について生涯にわたりモニタリングすることを含む。

本明細書で挙げられる全ての出版物、特許、及び特許出願は、それぞれの個々の出版物、特許、又は特許出願が、引用することにより本明細書の一部をなすと具体的に個別に示されるのと同じ程度で、引用することにより本明細書の一部をなす。しかしながら、本明細書における参考文献の引用は、そのような参考文献が本発明の先行技術であることの承認として解釈されるべきではない。引用することにより本明細書の一部をなす参考文献に示される定義又は用語のいずれかが、本明細書に示される用語及び考察と異なる限りにおいては、本明細書の用語及び定義が優先される。

本発明を、以下の実施例によって更に説明するが、実施例は、更なる限定として解釈されるべきではない。本明細書全体を通して引用される全ての参考文献の内容は、引用することにより明確に本明細書の一部をなす。

実施例１：患者の背景情報及び産物の特性評価
注入前のＣＡＲＴ細胞産物の多機能性プロファイルは、臨床応答及び毒性と関連性がある
本研究（ＮＣＴ００９２４３２６）のコホートは、最近記載された臨床転帰を有する２２人の患者を含んでいた。２２人の治療される患者のうち、１９人は、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）を有し、２人は濾胞性リンパ腫を有し、そして１人は、マントル細胞リンパ腫を有していた（表１）。ＤＬＢＣＬを有する１９人の患者のうち、１１人は、化学療法不応性のリンパ腫を有していた。ＤＬＢＣＬを有するその他の５人の患者は、プロトコル登録前の最後の治療としての自家幹細胞移植（ＡＳＣＴ）後１０ヶ月以内に再発したリンパ腫を有していた。ＤＬＢＣＬを有する１１人の患者は、セカンドラインの年齢調整国際予後指数（Hamlin, P.A. et al. Age-adjusted International Prognostic Index predicts autologous stem cell transplantation outcome for patients with relapsed or primary refractory diffuse large B-cell lymphoma. Blood 102, 1989-1996.）によれば高リスクであった。プロトコル登録前に受けた特有のリンパ腫療法の数の中央値は４であった（範囲は１〜７）。客観的応答（ＯＲ）は、Cheson 2014の基準（Cheson et al. Journal of Clinical Oncology 32, no. 27 (September 2014) 3059-3067）により定義される部分的（ＰＲ）又は完全（ＣＲ）な応答として定義される。安定（ＳＤ）及び進行（ＰＤ）は、客観的応答の欠如に相当する（ノンレスポンダー）。このコホートにおける２０人の患者からの産物を、単一細胞マルチプレックスサイトカインプロファイリングによって評価することができた。ＮＥ及びサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）を、以前に報告されたように格付けした（Kochenderfer, J.N. et al. Lymphoma remissions caused by anti-CD19 chimeric antigen receptor T cells are associated with high serum interleukin-15 levels. J Clin Oncol 35, 1803-1813 (2017). Epub 2017 Mar 14.）。表１に示されるように、評価可能な患者の主要な背景情報的特性は、年齢、性別、及び腫瘍組織学（びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、形質転換濾胞性リンパ腫（ＴＦＬ）、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、濾胞性リンパ腫（ＦＬ））、Chesonの基準による最良の応答（ＢＲＥＳＰ）、及び被験体がグレード３＋の神経毒性（表１においてＮＴが付けられる）又はグレード３＋のサイトカイン放出症候群（表１においてＣＲＳが付けられる）を有したかどうかである。

臨床応答及び毒性は、ｉｎｖｉｖｏでＣＡＲＴ細胞増殖の増大、並びにＩＬ−１５、ＩＬ−１０、及びグランザイムＢの血清レベルの増加と関連性があった。ｅｘｖｉｖｏでのＣＤ１９^＋標的細胞との共培養に応答して、産物のＴ細胞は多岐にわたるサイトカイン、ケモカイン、及び免疫エフェクター分子を急速に分泌する。これらのサイトカイン及びケモカイン、並びにＴ細胞の異種集団で一般的に利用される表現型マーカーによって定義されるＴ細胞特性は、臨床転帰と有意に関連性がなかった（データは示していない）。抗ＣＤ１９ＣＡＲＴ細胞療法における臨床転帰に関連するパラメーターを決定するために、産物のＴ細胞を、恒常性／増殖性分子、炎症性分子、走化性分子、制御性分子、及び免疫エフェクター分子の度数及び産生レベルに基づく多機能性強度インデックス（ＰＳＩ）を使用することによって単一細胞レベルで特性評価した。この分析を実行するために、単一細胞のバーコードチップ（ＳＣＢＣ）プラットフォーム及び事前に指定された式を利用した（図１４）。簡潔には、産物のＰＳＩを、多機能性細胞のパーセンテージに、それらの細胞により分泌されるサイトカインの平均蛍光強度（ＭＦＩ）を掛けたものとして定義した（図１Ａ〜図１Ｆ）。

単一細胞のサイトカインプロファイリング及びＰＳＩの計算によるＴ細胞多機能性評価
フローサイトメトリーによるｓｃＦｖの表面発現により測定される、約４０％〜６０％のＣＡＲ陽性Ｔ細胞を含む凍結保存されたＣＡＲＴ細胞産物を解凍し、ＩＬ−２（１０ｎｇ／ｍＬ、Biolegend社）を有する細胞療法システム（Cell Therapy Systems）（ＣＴＳ）完全培地中で１×１０^６／ｍＬの密度で３７℃の５％のＣＯ_２インキュベーター中で培養した。一晩回復させた後に、Ｆｉｃｏｌｌ−ＰａｑｕｅＰｌｕｓ培地（Fisher Scientific社）を使用して、生存Ｔ細胞を富化した。ＣＤ４^＋／ＣＤ８^＋Ｔ細胞サブセットを、抗ＣＤ４又は抗ＣＤ８のマイクロビーズ（Miltenyi Biotec社、ドイツ、ベルギッシュ・グラートバハ）を使用して分離し、次いでＣＤ１９又は神経増殖因子受容体（ＮＧＦＲ）のいずれかが１：２の比率で形質導入されたＫ５６２細胞で２０時間にわたり３７℃の５％のＣＯ_２で刺激した。共培養されたＣＤ４^＋又はＣＤ８^＋Ｔ細胞を、抗ＣＤ１９又は抗ＮＧＦＲ結合磁気ビーズを使用することによるＣＤ１９−Ｋ５６２又はＮＧＦＲ−Ｋ５６２細胞の除去によって更に富化した。ＣＤ４^＋又はＣＤ８^＋ＣＡＲＴ細胞の存在を確認するために、ＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ６４７結合抗ＣＤ４又は抗ＣＤ８抗体を用いて室温で１０分間にわたり試料を染色し、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で１回すすぎ、そしてＣＴＳ完全培地中で１×１０^６／ｍＬの密度で再懸濁させた。およそ３０μＬの細胞懸濁液を、単細胞セクレトミクス評価用の単一細胞のバーコードチップ（ＳＣＢＣ）マイクロチップにロードした。

各試料について、３２プレックスアッセイは、約２０００個のＴ細胞から分泌されたタンパク質を測定した（図１Ａ〜図１Ｆ）。（ＳＣＢＣ上にロードされた）細胞試料の顕微鏡及びマイクロアレイスキャン及びタンパク質分泌の生データを、独自開発した画像処理ソフトウェアを使用して分析することで、単一細胞を含むチャンバーの位置を決定し、引き続きそれらの分泌の読み取り値を抽出した。空の細胞チャンバーからのデータを使用して、それぞれの分析されたタンパク質についてのバックグラウンド強度レベルを測定した。次いで単一細胞の読み取り値をバックグラウンドの読み取り値を使用して正規化することで、有意の分泌を決定し、アッセイをまたいでプロファイルを比較する。独自開発したソフトウェア及びＲ統計パッケージを、統計データ解析及び可視化のために使用した。

機能的プロファイルを、各々の評価可能な産物について決定した。プロファイルは、エフェクター（グランザイムＢ、ＩＦＮ−γ、ＭＩＰ−１α、パーフォリン、ＴＮＦ−α、ＴＮＦ−β）群、刺激性（ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＬ−２、ＩＬ−５、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−２１）群、制御性（ＩＬ−４、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３、ＩＬ−２２、ＴＧＦ−β１、ｓＣＤ１３７、ｓＣＤ４０Ｌ）群、化学誘引性（ＣＣＬ−１１、ＩＰ−１０、ＭＩＰ−１β、ＲＡＮＴＥＳ）群、及び炎症性（ＩＬ−１ｂ、ＩＬ−６、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−１７Ｆ、ＭＣＰ−１、ＭＣＰ−４）群に分類された。多機能性ＣＡＲ産物Ｔ細胞は、産生される各タンパク質の量（すなわち、分泌されたタンパク質の数と強さの程度との組み合わせ）と一緒に事前に特定された細胞当たりのパネルからの少なくとも２種のタンパク質を同時分泌する細胞として定義した。任意の所与のサイトカインについてのカットオフを、細胞を有しないウェル中のバックグラウンドレベル＋３ＳＤに基づいてコンピュータ計算した。各細胞の機能的プロファイルを知ることで、細胞の多機能性による各試料の内訳（すなわち、非分泌細胞又は単機能性細胞に対して、何パーセントの細胞が多数のサイトカインを分泌しているか）、及び機能性群による試料の内訳（すなわち、どの単機能性群及び多機能性群が、試料中で細胞により分泌されているか、及びそれらの度数）等の様々なその他の評価指標の計算が可能となる。

各試料のＰＳＩをコンピュータ計算した（Ma, C. et al. Multifunctional T-cell analyses to study response and progression in adoptive cell transfer immunotherapy. Cancer Discov 3, 418-29 (2013)）。

ＣＤ４^＋及びＣＤ８^＋のＰＳＩを、各ドナーの対応するＣＤ１９−Ｋ５６２又はＮＧＦＲ−Ｋ５６２刺激された試料についてコンピュータ計算した。ＣＤ４^＋及びＣＤ８^＋のＰＳＩの平均である全ＰＳＩもコンピュータ計算した。

ＣＤ４^＋のＰＳＩ計算は、試料の全ての多機能性ＣＤ４^＋細胞の読み取り値を解析することにより実施した。各読み取り値は、シグナル強度（ＭＦＩ、無作為な蛍光強度）のｎ次元ベクトル（ｎ＝分析されたサイトカインの数）であった。各サイトカインの平均シグナル強度を、多機能性細胞一式全体にわたって求めた。この数に多機能性細胞の割合を掛けることで、個々のサイトカインのＰＳＩ値（例えば、ＩＬ−１７ＡＣＤ４^＋のＰＳＩ）が得られた。全ての個々のサイトカインのＰＳＩ値を合計することで、試料についての全体のＣＤ４^＋のＰＳＩが得られた。同じ計算を実施することで、ＣＤ８^＋のＰＳＩ及び各サイトカインの個々のＣＤ８^＋のＰＳＩを求めた。ＣＤ４^＋及びＣＤ８^＋のＰＳＩを平均することで、各試料についての全ＰＳＩインデックスが得られた。単機能性細胞のパーセンテージにそのサイトカインの分泌強度を掛けたものとして定義される単機能性強度インデックス（monofunctional strength index）又はＭＳＩの評価指標も計算した。

これらの患者の臨床転帰（客観的応答、ＣＲＳ、及びＮＴ）を認識して、注入前の単一細胞のＣＡＲＴデータと臨床転帰との間の何らかの顕著な統計的に有意な関連性が決定された。より具体的には、全ＰＳＩ、ＣＤ４^＋のＰＳＩ、ＣＤ８^＋のＰＳＩ、ＩＬ−１７ＡＣＤ４^＋のＰＳＩと臨床転帰との間の関連性が決定された。マン・ホイットニーのＵ検定を使用して、これらの関連性のＰ値を決定した。さらに、これらの単一細胞の評価指標（例えば、ＰＳＩ）と、本明細書全体を通じて記載されたその他の注入前及び注入後の評価指標（例えば、ｉｎｖｉｖｏでのＣＡＲＴ細胞増殖、０日目の患者のＩＬ−１５のレベル、共培養物及び血清のサイトカインレベル、Ｔ細胞表現型度数）との間の何らかの関連性を、これらの評価指標間でのスピアマン相関を測定することにより決定した。

ＣＤ１９^＋細胞で刺激されたＣＡＲ産物のＴ細胞の多機能性プロファイルは、エフェクター分子、刺激性／増殖性サイトカイン、及びケモカインによって左右された。主成分分析（ＰＣＡ）を含む詳細な評価により、産物のＴ細胞の複雑かつ不均質な機能的プロファイルが示され、その際、両方の多機能性のＣＤ４^＋及びＣＤ８^＋Ｔ細胞サブセットは、主にＩＦＮ−γ、ＩＬ−８、ＩＬ−５、グランザイムＢ及び／又は（マクロファージ炎症性タンパク質）ＭＩＰ−１αを分泌する（図６Ａ及び図６Ｂ）。とりわけ、ＣＤ４^＋であるがＣＤ８^＋でないＴ細胞集団にも、ＩＬ−１７Ａ陽性多機能性Ｔ細胞が含まれていた。

図６Ａ及び図６Ｂに示されるように、機能的サブセットを、ＣＤ４^＋及びＣＤ８^＋の産物のＴ細胞サブセット内で主成分分析により決定した。表示は、多次元空間における対象の２次元表示としての個々の細胞により産生されたサイトカインを用いたクラスター化に基づく。産生されたサイトカインの類似性により画定される主要な多機能性サブセットは、クラスターとして表され、個々のドットは細胞に対応している。ドットの濃淡は、サイトカイン産生レベルを反映している。ＣＤ１９^＋細胞で刺激されていないＴ細胞集団の多機能性が、コントロールとして重ね合わされている（青色、ＮＧＦＲ）。各々の主要な集団である、それぞれＣＤ４Ｔ細胞及びＣＤ８Ｔ細胞内で最も一般的に表される主要なサイトカインは、この主成分分析（ｘ軸及びｙ軸上に示される）を編成するために使用され、各クラスターを画定するサイトカインが示されている。全ての免疫学的に関連する細胞のわずか約２０％〜２５％しか含まない多機能性細胞の度数も表されている。

全体的に、産物は広範囲のＰＳＩ値を表した。多機能性細胞は、サイトカインを産生する全ての産物のＴ細胞のわずか２０％〜２５％しか含んでいなかった。全般の産物のＰＳＩは、ＯＲと有意に関連性があった（Ｐ＝０．０１１９、図２Ｃ）。中央値のＰＳＩは、レスポンダーについてノンレスポンダーに対して２倍の高さであった。より高い産物のＰＳＩはまた、グレード３＋のサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ、Ｐ＝０．０１７４、図２Ｄ）と統計学的に関連性があった。ＰＳＩの結果とは異なって、産物における単機能性Ｔ細胞に対応する同様にコンピュータ計算されたインデックスは、ＯＲ、グレード３＋のＮＴ、又はグレード３＋のＣＲＳとの関連性を有しなかった（データは示していない）。共培養物におけるフローサイトメトリーによって定義される主要な産物の表現型及びＩＦＮ−γは、臨床応答と関連性がなかった（図３Ａ〜図３Ｆ）。

応答性である患者における産物の多機能性Ｔ細胞により産生される主要なサイトカイン及びケモカインは、ＣＤ４及びＣＤ８のＴ細胞の両方にＩＦＮ−γ、ＭＩＰ−１α、ＩＬ−８を含み、ＣＤ８Ｔ細胞にグランザイムＢを含み、ＣＤ４Ｔ細胞にＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−５を含んでいた（図４Ａ〜図４Ｄ）。

驚くべきことに、これらの結果は、産物中の多機能性Ｔ細胞の度数及びサイトカイン産生レベルの組み合わせが、ＣＡＲＴ細胞による治療に対する臨床応答及び毒性に関連することを示唆している。

ｉｎｖｉｖｏでのＣＡＲＴ細胞レベルの測定
血液中のＣＡＲＴ細胞増殖を、ｑＰＣＲによって測定した。各患者について、治療前及び治療後の複数の時点で回収された末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）からＤＮＡを抽出した。ＤＮＡを、ＱｉａｇｅｎＤＮｅａｓｙｂｌｏｏｄａｎｄｔｉｓｓｕｅｋｉｔ（Qiagen社、ドイツ、ヒルデン）を使用して抽出した。各時点からのＤＮＡを、ＣＡＲに特異的なプライマー及びプローブのセット（Applied Biosystems社、カリフォルニア州、フォスターシティ）を用いて２連で増幅させた。リアルタイムＰＣＲを、ＲｏｃｈｅＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒ４８０リアルタイムＰＣＲシステム（Roche Diagnostics Corp社、インディアナ州、インディアナポリス）を用いて実施した。ＤＮＡの連続１：５希釈を、各患者の注入されたＴ細胞から同じ患者の治療前のＤＮＡ中へと行い、このＤＮＡに対してｑＰＣＲを実行することにより検量線を作成した。

マルチプレックス分析による共培養物及び血清中のサイトカインの測定
共培養実験は、ＣＡＲＴ細胞産物と１：１で混ざったＣＤ１９又はＮＧＦＲ（ネガティブコントロール）を発現するように操作されたＫ５６２細胞を使用して実施した。細胞培養培地を、インキュベート２４時間後に採取して、引き続き分析した。３１個の分析物を、ＭｅｓｏＳｃａｌｅＤｉｓｃｏｖｅｒｙ（MSD（商標）、メリーランド州、ロックビル）、ＭＵＬＴＩ−ＳＰＯＴ（商標）、及びEMD Millipore社（マサチューセッツ州、バーリントン）のＬｕｍｉｎｅｘ（商標）ｘＭＡＰ（商標）マルチプレックスアッセイによって評価した。血清ＩＬ−１５を、EMD Millipore社のＬｕｍｉｎｅｘ（商標）ｘＭＡＰ（商標）マルチプレックスアッセイを用いて測定した。データ取得及び解析を、Ｌｕｍｉｎｅｘ２００（商標）機器及びｘＰＯＮＥＮＴ（商標）３．１データ解析ソフトウェアを使用して実施した。

Ｔ１７細胞及びＴｒｅｇ細胞のパーセンテージのエピジェネティック分析による評価
エピジェネティック分析は、以前に特徴付けられた方法（Baron, U. et al. DNA demethylation in the human FOXP3 locus discriminates regulatory T cells from activated FOXP3(+) conventional T cells. Eur J Immunol 37, 2378-2389 (2007)）に基づいて実施した。ゲノムＤＮＡを、培養された動物細胞のためのプロトコルに従ってＤＮｅａｓｙｔｉｓｓｕｅｋｉｔ（Qiagen社）を使用して単離した。ゲノムＤＮＡのバイサルファイト処理を実施した。ＰＣＲは、１×ＰＣＲバッファー、１ＵのＴａｑＤＮＡポリメラーゼ（Qiagen社）、２００μｍｏｌ／ＬのｄＮＴＰ、それぞれ１２．５ｐｍｏｌのフォワードプライマー及びリバースプライマー、並びに７ｎｇのバイサルファイト処理されたゲノムＤＮＡを含有する２５μＬの最終容量中で、９５℃で１５分間と、９５℃で１分間、５５℃で４５秒間、及び７２℃で１分間の４０サイクルと、７２℃で１０分間の最終伸長工程とで実施した。ＰＣＲ産物を、ＥｘｏＳＡＰ−ＩＴ（USB Corp.社、オハイオ州、クリーブランド）を使用して精製し、ＰＣＲプライマー及びＡＢＩＢｉｇＤｙｅＴｅｒｍｉｎａｔｏｒｖ１．１−ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（Applied Biosystems社）を適用することによってシーケンシングを行い、それに続いてＡＢＩ３１００ジェネティックアナライザにおいてキャピラリー電気泳動を行った。ＥＳＭＥを使用して、ＡＢ１ファイルを解釈した。

フローサイトメトリーによる産物のＴ細胞の表現型の決定
ＣＤ４、ＣＤ８、及びセントラルメモリーについて、表現型をフローサイトメトリーによって決定した（Kochenderfer, et al. B-cell depletion and remissions of malignancy along with cytokine-associated toxicity in a clinical trial of anti-CD19 chimeric-antigen-receptor-transduced T cells. Blood 119, 2709-20 (2012)）。ＣＡＲ陽性ＣＤ３^＋の事象をゲーティングし、メモリーマーカーＣＣＲ７及びＣＤ４５ＲＡを発現する細胞のパーセンテージを決定した。適切なアイソタイプコントロール抗体を、全ての実験において使用した。使用されたメモリー抗体は、抗ＣＤ４５ＲＡ（eBioscience社、カリフォルニア州、サンディエゴ、クローンＨＩ１００）及び抗ＣＣＲ７（R&D Systems社、クローン１５０５０３）であった。

遺伝子発現分析
Ｖｉ−ＣＥＬＬ自動セルカウンター（Beckman Coulter社、カリフォルニア州、ブレア）を使用して、凍結保存してから解凍した細胞を数えた。生細胞懸濁液を、ヒト免疫応答をプロファイリングする７７０プレックスの遺伝子及び３０プレックスのタンパク質発現パネルであるNanoString社のＶａｎｔａｇｅ３ＤＲＮＡ：ＰｒｏｔｅｉｎＩｍｍｕｎｅＣｅｌｌＰｒｏｆｉｌｉｎｇＰａｎｅｌ（ワシントン州、シアトル）へのインプットとして使用した。ＣＤ１９−Ｋ５６２又はＮＧＦＲ−Ｋ５６２試料の場合に、ＲＮＡのために５００００個の細胞を使用し、タンパク質のために１０００００個の細胞を使用した。Ｋ５６２＋ＣＡＲＴ細胞の共培養物の場合に、ＲＮＡのために１５００００個の細胞を使用し、タンパク質のために２０００００個の細胞を使用した。ＣＡＲＴ細胞の場合に、ＲＮＡのために３０００００個の細胞を使用し、タンパク質のために２０００００個の細胞を使用した。抗ＣＤ１９ＣＡＲに特異的なプローブを含む１９１種の追加の免疫及び代謝関連マーカーのカスタム遺伝子発現パネルも、ＲＮＡ：タンパク質アッセイのために作られた細胞溶解物に対して実行した。生データをＭＡＸデジタルアナライザーからｎＳｏｌｖｅｒソフトウェアｖ３．０へとインポートした。イメージング、結合密度、ポジティブコントロールの線形性、及び検出限界を評価する標準的な品質管理チェックを実施した。パネルにおける内部ポジティブコントロールを利用することによって、遺伝子及びタンパク質発現の生データをまず正規化した。次いで、ｍＲＮＡデータをさらに、安定的に発現される一連の参照遺伝子の幾何平均によって正規化し、タンパク質データを、安定的に発現される一連のタンパク質の幾何平均によって正規化した。バックグラウンドを下回って発現されたｍＲＮＡ及びタンパク質は、ネガティブコントロールの平均値＋標準偏差（ＳＤ）の２倍（ｍＲＮＡの場合）、及び免疫グロブリンＧ−ネガティブコントロールの幾何平均の３倍（タンパク質の場合）のカットオフを使用して分析から除外した。

実施例２：産物のＰＳＩと、ＣＡＲＴ細胞増殖又はＣＡＲＴ細胞注入前のＩＬ−１５のレベルとのインデックスの組み合わせは、臨床応答及び毒性と強く相関した
注入後に、ＣＡＲＴ細胞は急速に増殖し、最初の７日〜１４日以内にピークレベルが存在する。注入後１ヶ月間にピーク及び累積レベルとして測定されるＣＡＲＴ細胞の増殖は、ＯＲ及びグレード３＋のＮＴと関連性があるが、グレード３＋のＣＲＳとは関連性がない。

ＰＳＩと、血液中のピークＣＡＲＴ細胞レベル又は０日目のＩＬ−１５血清レベルのいずれかとのインデックスの組み合わせは、いずれかのパラメーター単独に対して、臨床転帰と有意な関連性を有していた。コンディショニング化学療法により高められた０日目のＩＬ−１５血清レベルを、ＣＡＲＴ細胞注入の直前に測定した。ＯＲは、ＣＤ４^＋ＰＳＩ及び０日目のＩＬ−１５、並びにＩＬ−１７ＡのＰＳＩ及び０日目のＩＬ−１５の両方と関連性があった。上記インデックスの組み合わせは、２つの評価指標を同等の分散を有するようにまず正規化した後に、それらを互いに足し合わせることによってコンピュータ計算した。この正規化は、その評価指標をそれぞれの標準偏差で割って共通の規模／尺度にすることによって達成された。

ＰＳＩとＣＡＲＴ細胞の増殖とを組み合わせたこのコンポジットインデックスは、それぞれの各共変量単独と比較して、ＯＲとの関連性を改善した（Ｐ＝０．００４６、多重性のための調節なし）（図５Ａ〜図５Ｅ）。さらに、ＯＲはそれぞれ、ＣＤ４^＋のＰＳＩ及びＣＡＲのピークレベルと関連したが（Ｐ＝０．００２３）、ＣＤ８^＋のＰＳＩ及びＣＡＲのピークレベルとわずかしか関連しなかった（Ｐ＝０．０５０７、図７Ａ及び図７Ｂ）。図７Ａ及び図７Ｂに示されるように、血液中のＣＡＲＴ細胞レベル又は０日目のＩＬ−１５血清レベルと併せたＰＳＩと客観的応答との間に関連性がある。血液中のＣＡＲＴ細胞レベルを、ｑＰＣＲによって測定した。ＰＳＩ及びｉｎｖｉｖｏでのＣＡＲＴ細胞増殖を統合するコンポジットインデックスを作成し、応答結果と関連付けた（Ｒ＝応答あり、Ｎ＝応答なし）。全産物のＰＳＩ、ＣＤ４^＋のＰＳＩ、及びＩＬ−１７ＡのＰＳＩのインデックスを、全てＣＡＲのピークレベルと併せて評価した。２つの評価指標を、１つの共同の評価指標へと組み合わせて、それらの患者の転帰との関連性を試験した。単位分散を有するように評価指標のそれぞれをまず正規化した後にそれらを互いに足し合わせた。この正規化は、その評価指標をそれぞれの標準偏差で割って共通の規模／尺度にすることによって達成された。ＰＳＩ及び０日目のＩＬ−１５レベルの共同の評価指標を、同様に計算した。統計値を、マン・ホイットニーのＵ検定を使用してコンピュータ計算した。Ｐ値は、多重性のために調節しなかった。

図８に示されるように、ＣＡＲのピークレベルとＰＳＩとの間の明らかな関連性はなかった（図８）。ＰＳＩは、血液中のＣＡＲＴ細胞レベルと関連していない。血液中のＣＡＲＴ細胞レベルをｑＰＣＲにより測定し、ＰＳＩ又は臨床転帰（ＯＲ、グレード３＋のＮＥ又はＣＲＳ）と相関があった。全産物のＰＳＩ、ＣＤ４^＋のＰＳＩ、及びＩＬ−１７ＡのＰＳＩが表示されている。統計分析を、スピアマンの相関及びマン・ホイットニーのＵ検定を使用して実施した。

ＰＳＩは、ＣＣＲ７及びＣＤ４５ＲＡの発現に基づいて一般的に評価される産物の表現型と有意に関連していなかった（図３Ａ〜図３Ｆ）。ＣＡＲ遺伝子の発現レベルを、全体の産物においてＴ細胞ハウスキーピング分子と一緒にｎａｎｏｓｔｒｉｎｇによって測定した。全般のＰＳＩは、ＣＡＲｍＲＮＡコピーとＴ細胞特異的マーカーとの間の比率に関連性があることが分かった（表２）。この知見は、産物中のＣＡＲ発現のレベルが、産物のＴ細胞の多機能性と関連していることを示唆している。

表２は、ＰＳＩとＣＡＲ遺伝子発現／Ｔ細胞関連分子の比率との間の関連性を示しており、これらは全てｎａｎｏｓｔｒｉｎｇによって定量的に測定された。ＣＡＲ遺伝子発現は、ＣＤ２８ＣＤ３ζ接合部及びｓｃＦｖのそれぞれのためのプローブを用いて測定した。Ｔ細胞関連ｍＲＮＡを、ＣＤ３Ｄ、ＣＤ３Ｅ、ＣＤ３Ｇ、及びＣＤ６のためのプローブを用いて測定した。ＣＤ３Ｅも、ｎａｎｏｓｔｒｉｎｇによって抗ＣＤ３モノクローナル抗体ＯＫＴ３を使用してタンパク質レベルで測定した。またＰＳＩを、Ｔ細胞分子単独に対しても分析した。分析は、線形回帰によって行った。^＊Ｐ＜０．０５、^＊＊Ｐ＜０．００５。

ＰＳＩ単独とは異なって、産物のＰＳＩ又はＣＤ４^＋のＰＳＩをそれぞれＣＡＲのピークレベルと組み合わせると、グレード３＋のＮＴと有意に関連性があった（図９Ａ〜図９Ｆ）。ＣＤ４^＋及びＣＤ８^＋のＰＳＩを、２つの産物のＴ細胞サブセットに別々に同じ事前に指定された式を適用することにより、各産物について計算した。図９Ａ〜図９Ｆは、血液中のＣＡＲＴ細胞レベルと併せたＰＳＩと、グレード３＋の神経毒性（ＮＴ、図９Ａ〜図９Ｆ）との間の関連性を示している。図１０Ａ〜図１０Ｆは、血液中のＣＡＲＴ細胞レベルと併せたＰＳＩと、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ、図１０Ａ〜図１０Ｆ）との間の関連性を示している。血液中のＣＡＲＴ細胞レベルを、ｑＰＣＲにより測定し、グレード３＋の有害事象と相関があった。ＰＳＩ及びｉｎｖｉｖｏでのＣＡＲＴ細胞増殖を統合するコンポジットインデックスを作成し、神経学的事象（ＮＥ）又はＣＲＳとそれぞれ関連付けた。全産物のＰＳＩ、ＣＤ４^＋のＰＳＩ、及びＩＬ−１７ＡのＰＳＩのインデックスを、全てＣＡＲのピークレベルと併せて評価した。２つの評価指標を、１つの共同の評価指標へと組み合わせて、それらの患者の転帰との関連性を試験した。単位分散を有するように評価指標のそれぞれをまず正規化した後にそれらを互いに足し合わせた。この正規化は、その評価指標をそれぞれの標準偏差で割って共通の規模／尺度にすることによって達成された。統計値を、マン・ホイットニーのＵ検定を使用してコンピュータ計算した。Ｐ値は、多重性のために調節しなかった。

ＩＬ−１７Ａ等のサイトカインを産生する多機能性Ｔ細胞のサブセットがグレード３＋のＮＴと関連性があるかどうかを決定するために、所与のサイトカインを分泌する多機能性Ｔ細胞のパーセンテージに、そのサイトカインの平均シグナル強度を掛けることによって、サイトカイン特異的ＰＳＩをコンピュータ計算した。これらのサイトカインのＰＳＩ値を、転帰に関して分析した。事後的に定義されたＩＬ−１７ＡのＰＳＩ及びＣＡＲのピーク細胞レベルは、グレード３＋のＮＴと有意な関連性を有していた（Ｐ＝０．０００７、図９Ａ〜図９Ｆ）。個別にＣＡＲのピーク細胞レベル及びＩＬ−１７ＡのＰＳＩは、グレード３＋のＮＴと関連性があった（それぞれＰ＝０．００１５及びＰ＝０．０５７４）。ＩＬ−１７ＡのＰＳＩは、エピジェネティックマーキング及び産物の共培養物中でのＩＬ−１７Ａ産生によって測定されたＴｈ１７細胞のパーセンテージと強く相関し（両方の比較についてＰ＜０．０００１）、ＣＤ４／ＣＤ８比、Ｔヘルパー（Ｔｈ）細胞のパーセンテージ、及び産物の共培養物中のＩＬ−６レベルと関連性があった（表３）。グレード３＋のＣＲＳは、全般の産物のＰＳＩ及びＣＡＲのピークレベルと関連性があった（図１０Ａ〜図１０Ｆ）。

主要な産物の特性とＩＬ−１７ＡのＰＳＩとの間の関連付けは、線形回帰によって行った。ＣＤ４：ＣＤ８比は、フローサイトメトリー測定に基づいて計算し、ヘルパーＴ細胞の％及びＴｈ１７細胞の％は、エピジェネティック分析に基づいて測定し、産物及び標的細胞の共培養物中のＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−６は、ＥＬＩＳＡによって測定し、ＩＬ−１７ＡのＰＳＩは、本明細書に記載されるようにコンピュータ計算した。^＊Ｐ＜０．０５、^＊＊Ｐ＜０．００５、^＊＊＊Ｐ＜０．０００５。

ｉｎｖｉｖｏでのＣＡＲＴ細胞増殖又はＣＡＲＴ細胞注入前のコンディショニング駆動性ＩＬ−１５と併せたＰＳＩは、客観的応答（ＯＲ）と相関している（図５Ａ〜図５Ｄ）。産物のＰＳＩと０日目のＩＬ−１５レベルとの組み合わせは、ＯＲと統計的に有意な関連性を有していた（Ｐ＝０．００３３）（図５Ｅ）。客観的応答も、ＰＳＩ（Ｐ＝０．０１１９）（図５Ａ）及びＩＬ−１５（Ｐ＝０．０１５３）（図５Ｄ）と関連性があった。しかしながら、ＰＳＩ及び０日目のＩＬ−１５は、互いに統計的に有意な関連性を有しなかった。さらに、ＣＤ４^＋のＰＳＩ又はＩＬ−１７ＡのＰＳＩと併せた０日目のＩＬ−１５はまた、ＯＲと強い関連性があった（Ｐ＜０．０００４、図７Ａ及び図７Ｂ）。ＩＬ−１５の０日目のレベル＋ＩＬ−１７ＡのＰＳＩは、グレード３＋のＮＴ（図１１Ａ〜図１１Ｆ）及びＣＲＳ（図１２Ａ〜図１２Ｆ）とも関連性があった。産物のＰＳＩと一緒のＣＡＲＴ細胞増殖又はＣＡＲＴ細胞注入前のＩＬ−１５レベルは、共同でＣＡＲＴ細胞療法後の臨床転帰に寄与する。これらの知見は、ＣＡＲＴ細胞療法に関連する、臨床転帰、特にＮＴにおけるＩＬ−１７Ａ多機能性Ｔ細胞の顕著な役割も指摘している。

血液中の治療前のＩＬ−１５レベルと併せたＰＳＩと、グレード３＋のＮＥ（図１１Ａ〜図１１Ｆ）又はＣＲＳ（図１２Ａ〜図１２Ｆ）との間に関連性がある。血液中のＩＬ−１５レベルは、ＥＬＩＳＡにより測定され、グレード３＋のＡＥと相関があった。ＰＳＩ及びＩＬ−１５レベルを統合するコンポジットインデックスは、それぞれグレード３＋のＮＥ又はＣＲＳと関連していた。全産物のＰＳＩ、ＣＤ４^＋のＰＳＩ、及びＩＬ−１７ＡのＰＳＩを、全てＩＬ−１５レベルと併せて評価した。統計値を、マン・ホイットニーのＵ検定を使用してコンピュータ計算した。Ｐ値は、多重性のために調節しなかった。

Claims

患者における悪性腫瘍を治療する方法であって、
（ａ）１つ以上のキメラ受容体を有する複数のＴ細胞を得ることと、
（ｂ）予め決められた量の多機能性Ｔ細胞を含む有効用量の前記Ｔ細胞を前記患者に投与することと、
を含む、方法。
前記予め決められた量の多機能性Ｔ細胞は、１５％超、２０％超、２０％超、２５％超、３０％超の多機能性Ｔ細胞である、請求項１に記載の方法。
多機能性Ｔ細胞の前記予め決められた量は、多機能性強度インデックス（ＰＳＩ）を使用して決定される、請求項１に記載の方法。
前記多機能性強度インデックス（ＰＳＩ）は、前記多機能性細胞のパーセンテージに、該多機能性細胞により分泌されるタンパク質の平均蛍光強度の合計を掛けることによって計算される、請求項３に記載の方法。
前記多機能性強度インデックス（ＰＳＩ）は、２５０超、３５０超、４５０超、又は５５０超である、請求項３又は４に記載の方法。
前記多機能性強度インデックス（ＰＳＩ）は、（ｉ）多機能性Ｔ細胞の所望のパーセンテージを決定することと、（ｉｉ）予め決められたサイトカインプロファイルを得ることとを含む方法によって得られる、請求項３〜５のいずれか一項に記載の方法。
前記有効用量は、ＰＳＩ×注入されたＴ細胞の単位において、少なくとも３．５×１０^１０又は少なくとも７．７×１０^１０を含む、請求項３〜６のいずれか一項に記載の方法。
前記予め決められた量の多機能性Ｔ細胞は、少なくとも２．４×１０^７個又は少なくとも４．２×１０^７個の多機能性Ｔ細胞を含む、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
前記有効用量は、腫瘍負荷と比例して調節される、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
多機能性Ｔ細胞の前記予め決められた量は、コンポジットインデックスを使用して決定される、請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
前記コンポジットインデックスは、少なくとも２つの評価指標を含む、請求項１０に記載の方法。
前記評価指標は、各評価指標をそれらの各々の標準偏差によって割ることにより正規化される、請求項１１に記載の方法。
前記コンポジットインデックスは、多機能性強度インデックス（ＰＳＩ）及び／又はＴ細胞注入前の患者のＩＬ−１５の血清レベルを含む、請求項１０〜１２のいずれか一項に記載の方法。
前記コンポジットインデックスは、前記多機能性強度インデックス（ＰＳＩ）を決定することと、前記Ｔ細胞注入前の患者のＩＬ−１５の血清レベルを測定することとを含む方法によって得られる、請求項１０〜１３のいずれか一項に記載の方法。
前記コンポジットインデックスは、３超である、請求項１０〜１４のいずれか一項に記載の方法。
前記予め決められたサイトカインプロファイルを得ることは、グランザイムＢ、ＩＦＮ−γ、ＭＩＰ１ａ、パーフォリン、ＴＮＦａ、ＴＮＦｂ、ＧＭＣＳＦ、ＩＬ−２、ＩＬ−５、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−２１、ＣＣＩ−１１、ＩＰ−１０、ＭＩＰ１ｂ、ＲＡＮＴＥＳ、ＩＬ−４、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３、ＩＬ−２２、ＴＧＦ−ｂ１、ＳＣＤ１３７、ＳＣＤ４０Ｌ、ＩＬ−１ｂ、ＩＬ−６、ＩＬ−１７ａ、ＩＬ−１７ｆ、ＭＣＰ−１、及びＭＣＰ−４の少なくとも１つを測定することを含む、請求項６〜１５のいずれか一項に記載の方法。
前記予め決められたサイトカインプロファイルを得ることは、グランザイムＢ、ＩＦＮ−γ、ＭＩＰ１ａ、パーフォリン、ＴＮＦａ、ＴＮＦｂ、ＧＭＣＳＦ、ＩＬ−２、ＩＬ−５、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−２１、ＣＣＩ−１１、ＩＰ−１０、ＭＩＰ１ｂ、ＲＡＮＴＥＳ、ＩＬ−４、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３、ＩＬ−２２、ＴＧＦ−ｂ１、ＳＣＤ１３７、ＳＣＤ４０Ｌ、ＩＬ−１ｂ、ＩＬ−６、ＩＬ−１７ａ、ＩＬ−１７ｆ、ＭＣＰ−１、及びＭＣＰ−４の少なくとも１つを選択することを含む、請求項６〜１６のいずれか一項に記載の方法。
前記キメラ受容体は、腫瘍抗原を標的とする、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の方法。
前記キメラ受容体は、腫瘍関連表面抗原、例えば５Ｔ４、アルファフェトプロテイン（ＡＦＰ）、Ｂ７−１（ＣＤ８０）、Ｂ７−２（ＣＤ８６）、ＢＣＭＡ、Ｂ−ヒト絨毛膜性生殖腺刺激ホルモン、ＣＡ−１２５、癌胚抗原（ＣＥＡ）、癌胚抗原（ＣＥＡ）、ＣＤ１２３、ＣＤ１３３、ＣＤ１３８、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２３、ＣＤ２４、ＣＤ２５、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３４、ＣＤ４、ＣＤ４０、ＣＤ４４、ＣＤ５６、ＣＤ８、ＣＬＬ−１、ｃ−Ｍｅｔ、ＣＭＶ特異抗原、ＣＳ−１、ＣＳＰＧ４、ＣＴＬＡ−４、ＤＬＬ３、ジシアロガングリオシドＧＤ２、膵管上皮ムチン、ＥＢＶ特異抗原、ＥＧＦＲ変異体ＩＩＩ（ＥＧＦＲｖＩＩＩ）、ＥＬＦ２Ｍ、エンドグリン、エフリンＢ２、上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）、上皮細胞接着分子（ＥｐＣＡＭ）、上皮性腫瘍抗原、ＥｒｂＢ２（ＨＥＲ２／ｎｅｕ）、線維芽細胞関連タンパク質（ｆａｐ）、ＦＬＴ３、葉酸結合タンパク質、ＧＤ２、ＧＤ３、細胞膠腫関連抗原、スフィンゴ糖脂質、ｇｐ３６、ＨＢＶ特異抗原、ＨＣＶ特異抗原、ＨＥＲ１−ＨＥＲ２、ＨＥＲ２−ＨＥＲ３の組み合わせ、ＨＥＲＶ−Ｋ、高分子量黒色腫関連抗原（ＨＭＷ−ＭＡＡ）、ＨＩＶ−１型エンベロープ糖タンパク質ｇｐ４１、ＨＰＶ特異抗原、ヒトテロメラーゼ逆転写酵素、ＩＧＦＩ受容体、ＩＧＦ−ＩＩ、ＩＬ−１１Ｒアルファ、ＩＬ−１３Ｒ−ａ２、インフルエンザウイルス特異抗原、ＣＤ３８、インスリン増殖因子（ＩＧＦＩ）−１、腸カルボキシルエステラーゼ、カッパー鎖、ＬＡＧＡ−１ａ、ラムダ鎖、ラッサ熱ウイルス特異抗原、レクチン反応性ＡＦＰ、系譜特異又は組織特異抗原、例えばＣＤ３、ＭＡＧＥ、ＭＡＧＥ−Ａ１、主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）分子、腫瘍特異的ペプチドエピトープを提示する主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）分子、Ｍ−ＣＳＦ、黒色腫関連抗原、メソテリン、メソテリン、ＭＮ−ＣＡＩＸ、ＭＵＣ−１、ｍｕｔｈｓｐ７０−２、変異ｐ５３、変異ｐ５３、変異ｒａｓ、好中球エラスターゼ、ＮＫＧ２Ｄ、Ｎｋｐ３０、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ｐ５３、ＰＡＰ、プロスターゼ、前立腺特異抗原（ＰＳＡ）、前立腺癌腫瘍抗原−１（ＰＣＴＡ−１）、前立腺特異抗原タンパク質、ＳＴＥＡＰ１、ＳＴＥＡＰ２、ＰＳＭＡ、ＲＡＧＥ−１、ＲＯＲ１、ＲＵ１、ＲＵ２（ＡＳ）、表面接着分子、サバイビング及びテロメラーゼ、ＴＡＧ−７２、フィブロネクチンのエクストラドメインＡ（ＥＤＡ）及びエクストラドメインＢ（ＥＤＢ）、並びにテネイシンＣのＡ１ドメイン（ＴｎＣＡ１）、サイログロブリン、腫瘍間質抗原、血管内皮増殖因子受容体−２（ＶＥＧＦＲ２）、ウイルス特異表面抗原、例えばＨＩＶ特異抗原（例えば、ＨＩＶｇｐ１２０）、並びにこれらの表面マーカーの任意の誘導体又は変異体から選択される腫瘍抗原を標的とする、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の方法。
前記キメラ受容体は、特異的にＣＤ１９を標的とする、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の方法。
前記キメラ受容体は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）である、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の方法。
前記キメラ受容体は、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）である、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の方法。
前記悪性腫瘍は、固形腫瘍、肉腫、癌腫、リンパ腫、多発性骨髄腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、原発性縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＰＭＢＣ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫（ＦＬ）、形質転換濾胞性リンパ腫、脾辺縁帯リンパ腫（ＳＭＺＬ）、慢性若しくは急性の白血病、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）（非Ｔ細胞ＡＬＬを含む）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、Ｔ細胞リンパ腫、１つ以上のＢ細胞急性リンパ性白血病（「ＢＡＬＬ」）、Ｔ細胞急性リンパ性白血病（「ＴＡＬＬ」）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、Ｂ細胞前リンパ球性白血病、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍、バーキットリンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、毛様細胞白血病、小細胞型若しくは大細胞型濾胞性リンパ腫、悪性リンパ増殖性状態、ＭＡＬＴリンパ腫、マントル細胞リンパ腫、辺縁帯リンパ腫、骨髄異形成及び骨髄異形成症候群、形質芽球性リンパ腫、形質細胞様樹状細胞腫瘍、ワルデンストレームマクログロブリン血症、形質細胞増殖性障害、例えば、無症候性骨髄腫（くすぶり型多発性骨髄腫又は無痛性骨髄腫）、意義不明の単クローン性γグロブリン血症（ＭＧＵＳ）、形質細胞腫（例えば、形質細胞異常増殖症、孤在性骨髄腫、孤在性形質細胞腫、髄外性形質細胞腫、及び多発性形質細胞腫）、全身性アミロイド軽鎖アミロイドーシス、ＰＯＥＭＳ症候群（Ｃｒｏｗ−Ｆｕｋａｓｅ症候群、高月病、及びＰＥＰ症候群としても知られる）、又はそれらの組み合わせである、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の方法。
前記悪性腫瘍は、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、原発性縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、高悪性度Ｂ細胞リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、転移性黒色腫、形質転換濾胞性リンパ腫、濾胞性リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、及び多発性骨髄腫である、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の方法。
前記悪性腫瘍は、非ホジキンリンパ腫である、請求項１〜２４のいずれか一項に記載の方法。
前記多機能性ＣＡＲＴ細胞は、少なくとも２種のタンパク質又はサイトカインを一度に同時分泌する、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
前記タンパク質又はサイトカインは、グランザイムＢ、ＩＦＮ−γ、ＭＩＰ１ａ、パーフォリン、ＴＮＦａ、ＴＮＦｂ、ＧＭＣＳＦ、ＩＬ−２、ＩＬ−５、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−２１、ＣＣＩ−１１、ＩＰ−１０、ＭＩＰ１ｂ、ＲＡＮＴＥＳ、ＩＬ−４、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３、ＩＬ−２２、ＴＧＦ−ｂ１、ＳＣＤ１３７、ＳＣＤ４０Ｌ、ＩＬ−１ｂ、ＩＬ−６、ＩＬ−１７ａ、ＩＬ−１７ｆ、ＭＣＰ−１、及びＭＣＰ−４の１つ以上を含む、請求項２６に記載の方法。
前記悪性腫瘍は、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、原発性縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、高悪性度Ｂ細胞リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、転移性黒色腫、形質転換濾胞性リンパ腫、濾胞性リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、及び多発性骨髄腫の少なくとも１つから選択される、請求項１〜２７のいずれか一項に記載の方法。
全体用量を調整することで、多機能性細胞の総数を調節することを更に含む、請求項１〜２８のいずれか一項に記載の方法。
全体用量を調整することで、全体の多機能性強度インデックス（ＰＳＩ）を調節することを更に含む、請求項１〜２９のいずれか一項に記載の方法。
患者における悪性腫瘍を治療する方法であって、
（ａ）１つ以上のキメラ受容体を有する複数のＴ細胞を得ることと、
（ｂ）前記Ｔ細胞の多機能性強度インデックス（ＰＳＩ）を測定することと、
（ｃ）予め決められた量の多機能性Ｔ細胞を含む有効用量を準備することと、
（ｄ）前記患者に、前記予め決められた量の多機能性Ｔ細胞を含む有効用量を投与することと、
を含む、方法。
多機能性Ｔ細胞の前記予め決められた量を最適化することで、治療に応答性である患者の可能性を高める、請求項３１に記載の方法。
患者がキメラ受容体治療に応答性であるかどうかを決定する方法であって、
（ａ）キメラ受容体を有する複数のＴ細胞を得ることと、
（ｂ）前記複数のＴ細胞中の多機能性Ｔ細胞の量を決定することと、
（ｃ）患者がキメラ受容体治療に応答性であるかどうかを、前記多機能性Ｔ細胞の量に基づいて決定することと、
を含む、方法。
患者における悪性腫瘍を治療する方法であって、
（ａ）１つ以上のキメラ受容体を有する複数のＴ細胞を得ることと、
（ｂ）予め決められた量の多機能性Ｔ細胞を含む有効用量を準備することと、
（ｃ）前記患者に、前記予め決められた量の多機能性Ｔ細胞を含む有効用量を投与することと、
を含む、方法。
前記予め決められた量の多機能性Ｔ細胞は、１５％超、２０％超、２０％超、２５％超、３０％超の多機能性Ｔ細胞である、請求項３１〜３４のいずれか一項に記載の方法。
多機能性Ｔ細胞の前記予め決められた量は、多機能性強度インデックス（ＰＳＩ）を使用して決定される、請求項３１〜３４のいずれか一項に記載の方法。
前記多機能性強度インデックス（ＰＳＩ）は、前記多機能性細胞のパーセンテージに、該多機能性細胞により分泌されるタンパク質の平均蛍光強度の合計を掛けることによって計算される、請求項３１〜３６のいずれか一項に記載の方法。
前記多機能性強度インデックス（ＰＳＩ）は、２５０超、３５０超、４５０超、又は５５０超である、請求項３１〜３７のいずれか一項に記載の方法。
前記多機能性強度インデックス（ＰＳＩ）は、（ｉ）多機能性Ｔ細胞の所望のパーセンテージを決定することと、（ｉｉ）予め決められたサイトカインプロファイルを得ることとを含む方法によって得られる、請求項３１〜３８のいずれか一項に記載の方法。
前記有効用量は、ＰＳＩ×注入されたＴ細胞の単位において、少なくとも３．５×１０^１０又は少なくとも７．７×１０^１０を含む、請求項３１〜３９のいずれか一項に記載の方法。
前記予め決められた量の多機能性Ｔ細胞は、少なくとも２．４×１０^７個又は少なくとも４．２×１０^７個の多機能性Ｔ細胞である、請求項３１〜４０のいずれか一項に記載の方法。
前記有効用量は、腫瘍負荷と比例して調節される、請求項３１〜４１のいずれか一項に記載の方法。
多機能性Ｔ細胞の前記予め決められた量は、コンポジットインデックスを使用して決定される、請求項３１〜４２のいずれか一項に記載の方法。
前記コンポジットインデックスは、少なくとも２つの評価指標を含む、請求項４３に記載の方法。
前記評価指標は、各評価指標をそれらの各々の標準偏差によって割ることにより正規化される、請求項４４に記載の方法。
前記コンポジットインデックスは、多機能性強度インデックス（ＰＳＩ）及び／又はＴ細胞注入前の患者のＩＬ−１５の血清レベルを含む、請求項４３〜４５のいずれか一項に記載の方法。
前記コンポジットインデックスは、多機能性強度インデックス（ＰＳＩ）を決定することと、Ｔ細胞注入前の患者のＩＬ−１５の血清レベルを測定することとを含む方法により得られる、請求項４３〜４６のいずれか一項に記載の方法。
前記コンポジットインデックスは、３超である、請求項４３〜４７のいずれか一項に記載の方法。
前記予め決められたサイトカインプロファイルを得ることは、グランザイムＢ、ＩＦＮ−γ、ＭＩＰ１ａ、パーフォリン、ＴＮＦａ、ＴＮＦｂ、ＧＭＣＳＦ、ＩＬ−２、ＩＬ−５、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−２１、ＣＣＩ−１１、ＩＰ−１０、ＭＩＰ１ｂ、ＲＡＮＴＥＳ、ＩＬ−４、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３、ＩＬ−２２、ＴＧＦ−ｂ１、ＳＣＤ１３７、ＳＣＤ４０Ｌ、ＩＬ−１ｂ、ＩＬ−６、ＩＬ−１７ａ、ＩＬ−１７ｆ、ＭＣＰ−１、及びＭＣＰ−４の少なくとも１つを測定することを含む、請求項３９〜４８のいずれか一項に記載の方法。
前記予め決められたサイトカインプロファイルを得ることは、グランザイムＢ、ＩＦＮ−γ、ＭＩＰ１ａ、パーフォリン、ＴＮＦａ、ＴＮＦｂ、ＧＭＣＳＦ、ＩＬ−２、ＩＬ−５、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−２１、ＣＣＩ−１１、ＩＰ−１０、ＭＩＰ１ｂ、ＲＡＮＴＥＳ、ＩＬ−４、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３、ＩＬ−２２、ＴＧＦ−ｂ１、ＳＣＤ１３７、ＳＣＤ４０Ｌ、ＩＬ−１ｂ、ＩＬ−６、ＩＬ−１７ａ、ＩＬ−１７ｆ、ＭＣＰ−１、及びＭＣＰ−４の少なくとも１つを選択することを含む、請求項３９〜４９のいずれか一項に記載の方法。
前記キメラ受容体は、腫瘍抗原を標的とする、請求項３１〜５０のいずれか一項に記載の方法。
前記キメラ受容体は、腫瘍関連表面抗原、例えば５Ｔ４、アルファフェトプロテイン（ＡＦＰ）、Ｂ７−１（ＣＤ８０）、Ｂ７−２（ＣＤ８６）、ＢＣＭＡ、Ｂ−ヒト絨毛膜性生殖腺刺激ホルモン、ＣＡ−１２５、癌胚抗原（ＣＥＡ）、癌胚抗原（ＣＥＡ）、ＣＤ１２３、ＣＤ１３３、ＣＤ１３８、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２３、ＣＤ２４、ＣＤ２５、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３４、ＣＤ４、ＣＤ４０、ＣＤ４４、ＣＤ５６、ＣＤ８、ＣＬＬ−１、ｃ−Ｍｅｔ、ＣＭＶ特異抗原、ＣＳ−１、ＣＳＰＧ４、ＣＴＬＡ−４、ＤＬＬ３、ジシアロガングリオシドＧＤ２、膵管上皮ムチン、ＥＢＶ特異抗原、ＥＧＦＲ変異体ＩＩＩ（ＥＧＦＲｖＩＩＩ）、ＥＬＦ２Ｍ、エンドグリン、エフリンＢ２、上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）、上皮細胞接着分子（ＥｐＣＡＭ）、上皮性腫瘍抗原、ＥｒｂＢ２（ＨＥＲ２／ｎｅｕ）、線維芽細胞関連タンパク質（ｆａｐ）、ＦＬＴ３、葉酸結合タンパク質、ＧＤ２、ＧＤ３、細胞膠腫関連抗原、スフィンゴ糖脂質、ｇｐ３６、ＨＢＶ特異抗原、ＨＣＶ特異抗原、ＨＥＲ１−ＨＥＲ２、ＨＥＲ２−ＨＥＲ３の組み合わせ、ＨＥＲＶ−Ｋ、高分子量黒色腫関連抗原（ＨＭＷ−ＭＡＡ）、ＨＩＶ−１型エンベロープ糖タンパク質ｇｐ４１、ＨＰＶ特異抗原、ヒトテロメラーゼ逆転写酵素、ＩＧＦＩ受容体、ＩＧＦ−ＩＩ、ＩＬ−１１Ｒアルファ、ＩＬ−１３Ｒ−ａ２、インフルエンザウイルス特異抗原、ＣＤ３８、インスリン増殖因子（ＩＧＦＩ）−１、腸カルボキシルエステラーゼ、カッパー鎖、ＬＡＧＡ−１ａ、ラムダ鎖、ラッサ熱ウイルス特異抗原、レクチン反応性ＡＦＰ、系譜特異又は組織特異抗原、例えばＣＤ３、ＭＡＧＥ、ＭＡＧＥ−Ａ１、主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）分子、腫瘍特異的ペプチドエピトープを提示する主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）分子、Ｍ−ＣＳＦ、黒色腫関連抗原、メソテリン、メソテリン、ＭＮ−ＣＡＩＸ、ＭＵＣ−１、ｍｕｔｈｓｐ７０−２、変異ｐ５３、変異ｐ５３、変異ｒａｓ、好中球エラスターゼ、ＮＫＧ２Ｄ、Ｎｋｐ３０、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ｐ５３、ＰＡＰ、プロスターゼ、前立腺特異抗原（ＰＳＡ）、前立腺癌腫瘍抗原−１（ＰＣＴＡ−１）、前立腺特異抗原タンパク質、ＳＴＥＡＰ１、ＳＴＥＡＰ２、ＰＳＭＡ、ＲＡＧＥ−１、ＲＯＲ１、ＲＵ１、ＲＵ２（ＡＳ）、表面接着分子、サバイビング及びテロメラーゼ、ＴＡＧ−７２、フィブロネクチンのエクストラドメインＡ（ＥＤＡ）及びエクストラドメインＢ（ＥＤＢ）、並びにテネイシンＣのＡ１ドメイン（ＴｎＣＡ１）、サイログロブリン、腫瘍間質抗原、血管内皮増殖因子受容体−２（ＶＥＧＦＲ２）、ウイルス特異表面抗原、例えばＨＩＶ特異抗原（例えば、ＨＩＶｇｐ１２０）、並びにこれらの表面マーカーの任意の誘導体又は変異体から選択される腫瘍抗原を標的とする、請求項３１〜５１のいずれか一項に記載の方法。
前記キメラ受容体は、特異的にＣＤ１９を標的とする、請求項３１〜５２のいずれか一項に記載の方法。
前記キメラ受容体は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）である、請求項３１〜５３のいずれか一項に記載の方法。
前記キメラ受容体は、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）である、請求項３１〜５４のいずれか一項に記載の方法。
前記悪性腫瘍は、固形腫瘍、肉腫、癌腫、リンパ腫、多発性骨髄腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、原発性縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＰＭＢＣ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫（ＦＬ）、形質転換濾胞性リンパ腫、脾辺縁帯リンパ腫（ＳＭＺＬ）、慢性若しくは急性の白血病、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）（非Ｔ細胞ＡＬＬを含む）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、Ｔ細胞リンパ腫、１つ以上のＢ細胞急性リンパ性白血病（「ＢＡＬＬ」）、Ｔ細胞急性リンパ性白血病（「ＴＡＬＬ」）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、Ｂ細胞前リンパ球性白血病、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍、バーキットリンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、毛様細胞白血病、小細胞型若しくは大細胞型濾胞性リンパ腫、悪性リンパ増殖性状態、ＭＡＬＴリンパ腫、マントル細胞リンパ腫、辺縁帯リンパ腫、骨髄異形成及び骨髄異形成症候群、形質芽球性リンパ腫、形質細胞様樹状細胞腫瘍、ワルデンストレームマクログロブリン血症、形質細胞増殖性障害、例えば、無症候性骨髄腫（くすぶり型多発性骨髄腫又は無痛性骨髄腫）、意義不明の単クローン性γグロブリン血症（ＭＧＵＳ）、形質細胞腫（例えば、形質細胞異常増殖症、孤在性骨髄腫、孤在性形質細胞腫、髄外性形質細胞腫、及び多発性形質細胞腫）、全身性アミロイド軽鎖アミロイドーシス、ＰＯＥＭＳ症候群（Ｃｒｏｗ−Ｆｕｋａｓｅ症候群、高月病、及びＰＥＰ症候群としても知られる）、又はそれらの組み合わせである、請求項３１〜５５のいずれか一項に記載の方法。
前記悪性腫瘍は、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、原発性縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、高悪性度Ｂ細胞リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、転移性黒色腫、形質転換濾胞性リンパ腫、濾胞性リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、及び多発性骨髄腫である、請求項３１〜５６のいずれか一項に記載の方法。
前記悪性腫瘍は、非ホジキンリンパ腫である、請求項３１〜５７のいずれか一項に記載の方法。
前記多機能性ＣＡＲＴ細胞は、少なくとも２種のタンパク質又はサイトカインを一度に同時分泌する、請求項３１〜５８のいずれか一項に記載の方法。
前記タンパク質又はサイトカインは、グランザイムＢ、ＩＦＮ−γ、ＭＩＰ１ａ、パーフォリン、ＴＮＦａ、ＴＮＦｂ、ＧＭＣＳＦ、ＩＬ−２、ＩＬ−５、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−２１、ＣＣＩ−１１、ＩＰ−１０、ＭＩＰ１ｂ、ＲＡＮＴＥＳ、ＩＬ−４、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３、ＩＬ−２２、ＴＧＦ−ｂ１、ＳＣＤ１３７、ＳＣＤ４０Ｌ、ＩＬ−１ｂ、ＩＬ−６、ＩＬ−１７ａ、ＩＬ−１７ｆ、ＭＣＰ−１、及びＭＣＰ−４の１つ以上を含む、請求項５９に記載の方法。
前記悪性腫瘍は、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、原発性縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、高悪性度Ｂ細胞リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、転移性黒色腫、形質転換濾胞性リンパ腫、濾胞性リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、及び多発性骨髄腫の少なくとも１つから選択される、請求項３１〜６０のいずれか一項に記載の方法。
全体用量を調整することで、多機能性細胞の総数を調節することを更に含む、請求項３１〜６１のいずれか一項に記載の方法。
全体用量を調整することで、全体の多機能性強度インデックス（ＰＳＩ）を調節することを更に含む、請求項３１〜６２のいずれか一項に記載の方法。
キメラ受容体治療の効力を高める方法であって、多機能性ＣＡＲＴ細胞のパーセンテージを調整することを含む、方法。
前記多機能性Ｔ細胞を選択及び単離することを含む、請求項６４に記載の方法。
１つ以上のキメラ受容体を有する複数のＴ細胞を含む医薬組成物であって、予め決められた量の多機能性Ｔ細胞を含む、医薬組成物。
１５％超の多機能性Ｔ細胞を含む、請求項６６に記載の医薬組成物。
２０％超の多機能性Ｔ細胞を含む、請求項６６に記載の医薬組成物。
２５％超の多機能性Ｔ細胞を含む、請求項６６に記載の医薬組成物。