JP2020537635A - 継続管理及び継続識別による生体サンプル追跡を用いた患者固有の免疫療法手順を実施する方法及びシステム - Google Patents

継続管理及び継続識別による生体サンプル追跡を用いた患者固有の免疫療法手順を実施する方法及びシステム Download PDF

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Abstract

患者固有の免疫療法手順を実施する方法及び装置を記載する。コンピューティングデバイスは、患者に対してトランスフェクトされたT細胞を作製する要求を受信する。コンピューティングデバイスは、細胞注文要求に関連付けられた患者固有識別子を生成する。コンピューティングデバイスは、患者の血流に注入するトランスフェクトされたT細胞を作製するプロセスを開始する。このプロセスは、患者の血液サンプルに対して白血球アフェレーシス手順を実施して、サンプルからT細胞を収集することと、収集したT細胞を容器に移すことと、患者固有識別子を該容器にラベル付けすることと、収集されたT細胞を製造施設に送ることと、細胞修飾技術を使用して、収集されたT細胞からトランスフェクトされたT細胞を作製することと、製造施設からトランスフェクトされたT細胞を受け取ることと、トランスフェクトされたT細胞を患者の血流に注入することとを含む。コンピューティングデバイスは、患者固有識別子を含む各工程の追跡イベントを記録して、患者のT細胞の継続管理を生成する。【選択図】図1A

Description

[関連出願の相互参照]
本出願は、2017年9月15日付で出願された米国仮特許出願第62/559,330号及び2017年10月2日付で出願された米国仮特許出願第62/556,912号及の利益を主張し、その開示全体が引用することにより本明細書の一部をなす。
本出願は、概して、継続管理(chain-of-custody)及び継続識別(chain-of-identity)による生体サンプル追跡を用いて患者固有の免疫療法手順を実施する、コンピュータープログラム製品を含む、方法及び装置に関する。
近年、医療技術の進歩により、様々な形態の癌を含む様々な種類の病気及び疾患を治療するための免疫療法の使用が台頭してきた。一般的に、免疫療法は、免疫応答を賦活又は抑制することによる疾患の治療である。多くの場合、免疫細胞等の患者自身の生体材料に変更を加えたものが、免疫応答を開始及び/又は補足するために患者に再導入される。
例えば、改変免疫細胞は、特に腫瘍学における治療的処置において望ましい性質を持つことが示されている。改変免疫細胞の2つの主なタイプは、キメラ抗原受容体(「CAR」又は「CAR−T」と称される)及びT細胞受容体(「TCR」)を含むものである。これらの改変細胞は、標的細胞を認識して死滅させる能力を保持又は増強しながら、抗原特異性を付与するように設計されている。キメラ抗原受容体は、例えば、(i)抗原特異的成分(「抗原結合分子」)、(ii)細胞外ドメイン、(iii)1つ以上の共刺激ドメイン、及び(iv)1つ以上の活性化ドメインを含み得る。各ドメインは異種である、すなわち、異なるタンパク質鎖に由来する(又はそれに対応する)配列で構成される場合がある。
免疫療法を受ける多くの患者は重病であるため、かかる免疫療法手順の有効性における重要な要因は、治療上の利益が最大化され得るように、修飾された生体材料をできるだけ早く患者に提供する能力である。また、多くのタイプの免疫療法が特定の患者に合わせて調整されている(すなわち、患者自身の細胞を使用している)ことから、製造の遅れ、材料の誤表示及び患者の誤認を避けるために、抽出から修飾、その後患者に再び注入するまで、免疫療法のプロセスを通して患者の生体材料を正確に追跡することを保証することが重要である。しかしながら、既存の免疫療法手順には概して、患者の生体材料を自動的に追跡し、製造プロセスを通して生体材料が特定の患者の身元に結び付けられることを保証する技術的なメカニズムがない。
したがって、必要とされているのは、継続管理及び継続識別による生体サンプル追跡を用いた患者固有の免疫療法手順を実施する方法及びシステムである。本明細書に記載される技術は、既存のシステムに比べると、免疫療法手順の間に患者固有の生体サンプルに継続的で自動的な継続管理及び継続識別を提供する特定の技術的利点を提供し、当事者(患者、医師、製造業者及びその他の医療関係者等)が免疫療法手順の現在の段階及び手順中の患者の生体サンプルの状態をすばやく理解して追跡するために使用することができる、コンピューター化された情報ポータルを作成する。かかる高度な追跡は、継続管理及び継続識別を維持するための技術的解決策を持たず、生命にかかわる病気に対処する患者にとっては計り知れないほど深刻なものとなることもある製造プロセス中の遅延が生じる既存のシステムに対する改善である。
本発明は、一態様では、患者固有の免疫療法手順を実施する方法を特徴とする。コンピューティングデバイスは、患者に対してトランスフェクトされたT細胞を作製する細胞注文要求を受信する。コンピューティングデバイスは、細胞注文要求に関連づけられた患者固有識別子を生成し、該患者固有識別子は、患者識別要素、販売注文識別子及び細胞注文ロット番号を含む。コンピューティングデバイスは、患者の血流に注入するトランスフェクトされたT細胞を作製するプロセスを開始する。該プロセスは、患者の血液サンプルに対して白血球アフェレーシス手順を実施して、サンプルからT細胞を収集することと、収集されたT細胞を容器に移すことと、患者固有識別子を該容器にラベル付けすることと、収集されたT細胞を製造施設に送ることと、細胞修飾技術を使用して、収集されたT細胞からトランスフェクトされたT細胞を作製することと、製造施設からトランスフェクトされたT細胞を受け取ることと、トランスフェクトされたT細胞を患者の血流に注入することとを含む。コンピューティングデバイスは、上記プロセスの各工程の追跡イベントを記録し、各追跡イベントは患者固有識別子を含む。追跡イベントは、プロセス中の患者のT細胞の継続管理を含む。
本発明は、別の態様では、免疫療法手順中に細胞の注文を追跡する方法を特徴とする。コンピューティングデバイスは、患者に対してトランスフェクトされたT細胞を作製する細胞注文要求を受信する。コンピューティングデバイスは、細胞注文要求に関連付けられた患者固有識別子を生成し、該患者固有識別子は、患者識別要素、販売注文識別子及び細胞注文ロット番号を含む。コンピューティングデバイスは、患者の血流に注入するトランスフェクトされたT細胞を作製するプロセスを監視し、該プロセスは、サンプルからT細胞を収集するために患者の血液サンプルに対して白血球アフェレーシス手順が実施されたというインディシアを受信することと、収集されたT細胞が容器に移されたというインディシアを受信することと、該容器に患者固有識別子がラベル付けされたというインディシアを受信することと、収集されたT細胞が製造施設に送られたというインディシアを受信することと、細胞修飾技術を使用して、収集されたT細胞からトランスフェクトされたT細胞が作製されたというインディシアを受信することと、トランスフェクトされたT細胞が製造施設から受け取られたというインディシアを受信することと、トランスフェクトされたT細胞が患者の血流に注入されたというインディシアを受信することとを含む。コンピューティングデバイスは、インディシアを受信すると追跡イベントを記録し、各追跡イベントは患者固有識別子を含む。コンピューティングデバイスは、プロセス中に追跡イベントを保存することにより、患者のT細胞の継続管理を維持する。
本発明は、別の態様では、患者固有の免疫療法手順を実施する方法を特徴とする。患者に対してトランスフェクトされたT細胞を作製する細胞注文要求が受信される。プロセッサ上で実行されるイベント追跡モジュールは、細胞注文要求に関連付けられた患者固有識別子を生成する。患者の血流に注入するトランスフェクトされたT細胞を作製するプロセスを開始する。該プロセスは、患者の血液のサンプルに対して白血球アフェレーシス手順を実施して、サンプルからT細胞を収集することと、収集したT細胞を容器に移すことと、患者固有識別子を該容器にラベル付けすることと、収集されたT細胞を製造施設に送ることと、細胞修飾技術を使用して、収集されたT細胞からトランスフェクトされたT細胞を作製することと、上記製造施設からトランスフェクトされたT細胞を受け取ることと、該トランスフェクトされたT細胞を患者の血流に注入することとを含む。イベント追跡モジュールは、白血球アフェレーシス手順の地点にある第1のクライアントデバイスから、白血球アフェレーシス手順を確認して患者固有識別子を含む第1の追跡イベントを受信する。イベント追跡モジュールは、患者固有識別子に関するデータ構造に第1の追跡イベントを統合し、該データ構造がデータベースに保存され、統合工程が第1の追跡イベントと共に第1のタイムスタンプを記録する。イベント追跡モジュールは、製造施設にある第2のクライアントデバイスから、製造施設での収集されたT細胞の受け取りを確認し、患者固有識別子を含む第2の追跡イベントを受信する。イベント追跡モジュールは、患者固有識別子に関するデータ構造に第2の追跡イベントを統合し、該統合工程は、第2の追跡イベントと共に第2のタイムスタンプを記録する。
本発明は、別の態様では、患者固有の免疫療法手順を実施する方法を特徴とする。プロセッサ上で実行される追跡モジュールは、患者に対してトランスフェクトされたT細胞を作製する細胞注文要求を受信する。追跡モジュールは、細胞注文要求に関連付けられた、患者を識別する患者固有識別子、及び細胞注文ロットを生成する。データベースは、細胞の注文を追跡するデータレコードを生成し、該データレコードは、患者固有識別子に従ってデータベースで識別される。追跡モジュールは、収集されたT細胞の製造施設への出荷準備ができていることを示す第1の追跡イベントを受信する。患者固有識別子に対応するデータレコードは、第1の追跡イベントに従って更新される。追跡モジュールは、製造施設で受け取られた容器に基づいて、収集されたT細胞が製造施設で受け取られたことを示す第2の追跡イベントを受信する。患者固有識別子に対応するデータレコードは、第2の追跡イベントに従って更新される。追跡モジュールは、細胞修飾技術を使用して収集されたT細胞からトランスフェクトされたT細胞を作製した製造施設に基づいて、トランスフェクトされたT細胞が作製されたことを示す第3の追跡イベントを受信する。患者固有識別子に対応するデータレコードは、第3の追跡イベントに従って更新される。追跡モジュールは、製造施設から受け取ったトランスフェクトされたT細胞に基づいて、トランスフェクトされたT細胞が受け取られたことを示す第4の追跡イベントを受信する。患者固有識別子に対応するデータレコードは、第4の追跡イベントに従って更新される。追跡モジュールは、患者の血流に注入されたトランスフェクトされたT細胞に基づいて、トランスフェクトされたT細胞が患者の血流に注入されたことを示す第5の追跡イベントを受信する。患者固有識別子に対応するデータレコードは、第5の追跡イベントに従って更新され、ここで、第1、第2、第3、第4及び第5の追跡イベントはそれぞれ、患者固有識別子、タイムスタンプ及びイベント識別子を含み、患者固有識別子に対応するデータレコードは、データレコードがそれぞれのイベントに従って更新される時に、規則的な順序で、第1、第2、第3、第4及び第5の追跡イベントを保存する。
上記の態様のいずれにも、以下の1つ以上の特徴が含まれ得る。
幾つかの実施の形態では、前記トランスフェクトされたT細胞は、キメラ抗原受容体(CAR)をコードするポリヌクレオチドで前記収集されたT細胞をトランスフェクトすることにより作製され、前記CARが標的分子に特異的に結合する抗原結合分子を含む。前記抗原結合分子が一本鎖可変フラグメント(scFv)であることが好ましい。
幾つかの実施の形態では、標的分子は血液由来の癌関連抗原であることが想定される。本発明の血液由来の癌関連抗原は、急性骨髄白血病(AML)、慢性骨髄性白血病(CML)、慢性骨髄単球性白血病(CMML)、若年性骨髄単球性白血病、非定型慢性骨髄白血病、急性前骨髄球性白血病(APL)、急性単芽球性白血病、急性赤白血病(acute erythroid leukemia)、急性巨核芽球性白血病、リンパ芽球性白血病、B系統急性リンパ芽球性白血病(B-lineage acute lymphoblastic leukemia)、B細胞慢性リンパ球性白血病、B細胞非ホジキンリンパ腫、骨髄異形成症候群(MDS)、骨髄増殖性障害、骨髄新生物、骨髄肉腫)、及び芽球性形質細胞様樹状細胞新生物(BPDCN)からなる群から選択される1つ以上の癌に関連している。
幾つかの実施の形態では、標的分子はウイルス感染関連抗原である。本発明のウイルス感染は、例えばHIVを含む任意のウイルスによって引き起こされ得る。
本発明のキメラ抗原受容体(CAR)は、少なくとも1つの共刺激ドメインを更に含み得る。本発明の共刺激ドメインとしては、CD28、OX−40、4−1BB/CD137、CD2、CD7、CD27、CD30、CD40、プログラム細胞死−1(PD−1)、誘導性T細胞共刺激分子(ICOS)、リンパ球機能関連抗原−1(LFA−1、CD11a/CD18)、CD3ガンマ、CD3デルタ、CD3イプシロン、CD247、CD276(B7−H3)、LIGHT(TNFSF14)、NKG2C、Igアルファ(CD79a)、DAP−10、Fcガンマ受容体、MHCクラスI分子、TNF受容体タンパク質、免疫グロブリンタンパク質、サイトカイン受容体、インテグリン、シグナル伝達リンパ球活性化分子(SLAMタンパク質)、活性化NK細胞受容体、BTLA、Tollリガンド受容体、ICAM−1、B7−H3、CDS、ICAM−1、GITR、BAFFR、LIGHT、HVEM(LIGHTR)、KIRDS2、SLAMF7、NKp80(KLRF1)、NKp44、NKp30、NKp46、CD19、CD4、CD8アルファ、CD8ベータ、IL−2Rベータ、IL−2Rガンマ、IL−7Rアルファ、ITGA4、VLA1、CD49a、ITGA4、IA4、CD49D、ITGA6、VLA−6、CD49f、ITGAD、CD11d、ITGAE、CD103、ITGAL、CD11a、LFA−1、ITGAM、CD11b、ITGAX、CD11c、ITGB1、CD29、ITGB2、CD18、LFA−1、ITGB7、NKG2D、TNFR2、TRANCE/RANKL、DNAM1(CD226)、SLAMF4(CD244、2B4)、CD84、CD96(Tactile)、CEACAM1、CRT AM、Ly9(CD229)、CD160(BY55)、PSGL1、CD100(SEMA4D)、CD69、SLAMF6(NTB−A、Ly108)、SLAM(SLAMF1、CD150、IPO−3)、BLAME(SLAMF8)、SELPLG(CD162)、LTBR、LAT、GADS、SLP−76、PAG/Cbp、CD19a、CD83と特異的に結合するリガンド、又はそれらの任意の組合せのシグナル伝達ドメイン、又は他の好適な部分が挙げられるが、これらに限定されない。
共刺激ドメインはCD28を含むことが好ましい。本発明のCD28共刺激ドメインは、例えば、配列番号2、配列番号4、配列番号6及び配列番号8からなる群から選択される配列を含む。
他の実施の形態では、共刺激ドメインはCD8を含む。本発明のCD8共刺激ドメインは、例えば、配列番号14を含む。
本発明のキメラ抗原受容体(CAR)は、少なくとも1つの活性化ドメインを更に含み得る。本発明の活性化ドメインは、例えばCD3を含む。CD3活性化ドメインはCD3ゼータを含むことが好ましい。本発明のCD3ゼータ活性化ドメインは、例えば、配列番号10を含む。
好ましい実施の形態では、キメラ抗原受容体(CAR)は、抗CD19 scFv、CD28、及びCD3ゼータの全部又は一部を含む。
さらなる好ましい実施の形態では、キメラ抗原受容体(CAR)は、
抗CD19 scFv、CD8及び4−1BBの全部若しくは一部、
抗BCMA scFv及びCD8の全部若しくは一部、
抗CD19 scFv、CD28及び4−1BBの全部若しくは一部、
抗CD22 scFv及びCD8の全部若しくは一部、
抗CD19 scFv、CD28及びEGFRt/19−28z/4−1BBLの全部若しくは一部、
抗MUC16 scFv及びCD28の全部若しくは一部、
抗CD171の全部若しくは一部、
抗CD123及びCD28の全部若しくは一部、
抗BCMA、CD8及び4−1BBの全部若しくは一部、
抗CD19及びCD28の全部若しくは一部、
抗CD19及びCD8の全部若しくは一部、又は、
CD28の全部若しくは一部、
を含む。
さらなる好ましい実施の形態では、CARは、リーダー配列(CSF2RA)、抗CD19 scFv、Whitlowリンカー、CD28スペーサー、CD28共刺激ドメイン及びCD3ゼータを含む。かかるCARの一例は、配列番号146のヌクレオチド配列及び配列番号147のアミノ酸配列によってコードされる。
さらなる好ましい実施の形態では、CARは、リーダー配列(CD8)、抗CD19 scFv、Whitlowリンカー、CD28Tスペーサー、CD28共刺激ドメイン及びCD3ゼータを含む。かかるCARの一例は、配列番号148のヌクレオチド配列及び配列番号149のアミノ酸配列によってコードされる。
別の好ましい実施の形態では、CARは、リーダー配列(CD8a)、抗CD19 scFv、Whitlowリンカー、CD8aスペーサー及び膜貫通ドメイン、CD28共刺激ドメイン、並びにCD3ゼータを含む。かかるCARの一例は、配列番号150のヌクレオチド配列及び配列番号151のアミノ酸配列によってコードされる。
さらなる好ましい態様では、CARは、リーダー配列(CD8)、抗CLL−1 scFv、G4Sリンカー、ミニスペーサー、CD28T(CD28の細胞外/膜貫通領域)、CD28(CD28の細胞内共刺激領域)及びCD3ゼータを含む。かかるCARの一例は、配列番号154のヌクレオチド配列及び配列番号155のアミノ酸配列によってコードされる。
さらなる好ましい実施の形態では、CARは、リーダー配列(CD8a)、抗BCMA scFv、Whitlowリンカー、CD28Tスペーサー、CD28共刺激ドメイン及びCD3ゼータを含む。かかるCARの一例は、配列番号156のヌクレオチド配列及び配列番号157のアミノ酸配列によってコードされる。
幾つかの実施の形態では、トランスフェクトされたT細胞は、T細胞受容体(TCR)をコードするポリヌクレオチドで収集されたT細胞をトランスフェクトすることにより作製される。本発明のTCRは、腫瘍関連抗原に結合し得る。腫瘍関連抗原は、副腎皮質癌、肛門癌、膀胱癌、骨癌、脳癌、乳癌、カルチノイド癌、癌腫、子宮頸癌、結腸癌、子宮内膜癌、食道癌、肝外胆管癌、頭蓋外胚細胞癌、眼癌、胆嚢癌、胃癌(gastric cancer)、胚細胞腫瘍、妊娠性絨毛性腫瘍、頭頸部癌、下咽頭癌、膵島細胞癌、腎臓癌、大腸癌、喉頭癌、白血病、口唇及び口腔の癌、肝臓癌、肺癌、リンパ腫、悪性中皮腫、メルケル細胞癌、菌状息肉腫、骨髄異形成症候群、骨髄増殖性障害、鼻咽頭癌、神経芽細胞腫、口腔癌、中咽頭癌、骨肉腫、卵巣上皮癌、卵巣胚細胞癌、膵癌、副鼻腔及び鼻腔の癌、副甲状腺癌、陰茎癌、下垂体癌、形質細胞新生物、前立腺癌、横紋筋肉腫、直腸癌、腎細胞癌、腎盂及び尿管の移行上皮癌、唾液腺癌、セザリー症候群、皮膚癌、小腸癌、軟部肉腫、胃癌(stomach cancer)、精巣癌、胸腺腫、甲状腺癌、尿道癌、子宮癌、膣癌、外陰癌及びウィルムス腫瘍からなる群から選択される1つ以上の癌に関連している。
或る特定の態様では、本出願は、血液癌に対する標的分子に適している場合がある。幾つかの実施の形態では、癌は白血球の癌である。他の実施の形態では、癌は形質細胞の癌である。幾つかの実施の形態では、癌は白血病、リンパ腫又は骨髄腫である。或る特定の実施の形態では、癌は、急性リンパ芽球性白血病(ALL)(非T細胞ALLを含む)、急性リンパ性白血病(ALL)、及び血球貪食性リンパ組織球症(HLH))、B細胞前リンパ球性白血病、B細胞急性リンパ性白血病(「BALL」)、芽球性形質細胞様樹状細胞新生物、バーキットリンパ腫、慢性リンパ球性白血病(CLL)、慢性骨髄性白血病(CML)、慢性骨髄白血病(CML)、慢性若しくは急性肉芽腫性疾患、慢性若しくは急性白血病、びまん性大細胞型B細胞リンパ腫、びまん性大細胞型B細胞リンパ腫(DLBCL)、濾胞性リンパ腫、濾胞性リンパ腫(FL)、有毛細胞白血病、血球貪食症候群(マクロファージ活性化症候群(MAS))、ホジキン病、大細胞肉芽腫、白血球接着不全症、悪性リンパ増殖性疾患、MALTリンパ腫、マントル細胞リンパ腫、辺縁帯リンパ腫、意義不明の単クローン性ガンマグロブリン血症(MGUS)、多発性骨髄腫、骨髄異形成及び骨髄異形成症候群(MDS)、限定されるものではないが、急性骨髄白血病(AML)を含む骨髄疾患、非ホジキンリンパ腫(NHL)、形質細胞増殖性障害(例えば、無症候性骨髄腫(くすぶり型多発性骨髄腫又は無痛性骨髄腫)、形質芽球性リンパ腫、形質細胞様樹状細胞新生物、形質細胞腫(例えば、形質細胞異常増殖症;孤立性骨髄腫;孤立性形質細胞腫;髄外性形質細胞腫;及び多発性形質細胞腫))、POEMS症候群(Crow−Fukase症候群;高月病;PEP症候群)、縦隔原発大細胞型B細胞リンパ腫(PMBCL)、小細胞若しくは大細胞濾胞性リンパ腫、脾辺縁帯リンパ腫(SMZL)、全身性アミロイド軽鎖アミロイドーシス、T細胞急性リンパ性白血病(TALL)、T細胞リンパ腫、形質転換濾胞性リンパ腫、ワルデンストロームマクログロブリン血症、又はそれらの組み合わせである。
さらなる好ましい実施の形態では、TCRは、AV38−2可変アルファ鎖、BV7−2可変ベータ鎖、マウス定常アルファドメイン、マウス定常ベータドメイン、TRAJ40、フーリン−SG SG−P2A及びTRBJ1−3を含む。かかるTCRの一例は、配列番号152のヌクレオチド配列及び配列番号153のアミノ酸配列によりコードされる。
さらなる好ましい実施の形態では、TCRは、TCRベータ鎖可変領域、TCRベータ鎖定常領域、P2Aペプチド(フーリン切断部位及びリンカーを含む)、TCRアルファ鎖可変領域及びTCRアルファ鎖定常領域を含む。かかるTCRの一例は、配列番号158のヌクレオチド配列及び配列番号159のアミノ酸配列によりコードされる。かかるTCRの別の例は、配列番号160のヌクレオチド配列及び配列番号161のアミノ酸配列によりコードされる。
他の実施の形態では、本発明のTCRはウイルス感染関連抗原に結合する。本発明のウイルス感染は、例えばHIVを含む任意のウイルスによって引き起こされ得る。
本発明のポリヌクレオチドは、ベクターの成分であり得る。適切なベクターとしては、レトロウイルスベクター、DNAベクター、プラスミド、RNAベクター、アデノウイルスベクター、アデノウイルス関連ベクター、レンチウイルスベクター、又はそれらの任意の組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。ベクターはレンチウイルスベクターであることが好ましい。本発明のレンチウイルスベクターとしては、pGAR及びその誘導体が挙げられるが、これらに限定されない。
幾つかの実施の形態では、トランスフェクトされたT細胞を作製するプロセスを開始することは、リモートコンピューティングデバイスから白血球アフェレーシス手順を実施するためのタイムスロットを要求することと、タイムスロットが白血球アフェレーシス手順を実施するために利用可能であるというタイムスロットの要求に応じてインディシアを受信することと、リモートコンピューティングデバイスで利用可能なタイムスロットの承諾を確認することとを更に含む。
幾つかの実施の形態では、トランスフェクトされたT細胞を作製するプロセスを開始することは、前記トランスフェクトされたT細胞が作製された後に第1のサイトから出荷されたというインディシアを受信することと、前記トランスフェクトされたT細胞が注入される前に第2のサイトで受け取られたというインディシアを受信することとを更に含み、前記コンピューティングデバイスが、前記トランスフェクトされたT細胞が出荷されたというインディシアを受信すると、追跡イベントを記録し、前記コンピューティングデバイスが、前記トランスフェクトされたT細胞が第2のサイトで受け取られたというインディシアを受信すると、追跡イベントを記録する。
幾つかの実施の形態では、前記患者識別要素は、前記免疫療法手順に関連付けられた第1の患者IDと、前記白血球アフェレーシス手順又は前記トランスフェクトされたT細胞の注入の1つ以上を行う施設に関連付けられた第2の患者IDとを含む。幾つかの実施の形態では、前記コンピューティングデバイスは、前記追跡イベントを規則的な順序で保存する。幾つかの実施の形態では、規則的な順序は時系列で配列される。
本発明の他の態様及び利点は、例示のみのために本発明の原理を示す添付の図面と併せて、以下の詳細な説明から明らかになるであろう。
上記の本発明の利点は、さらなる利点と共に、添付の図面と併せて以下の説明を参照することにより、よりよく理解され得る。図面は必ずしも縮尺通りではなく、代わりに総じて本発明の原理を説明することに重点が置かれている。
継続管理及び継続識別による生体サンプル追跡を用いて患者固有の免疫療法手順を実施するためのシステムのブロック図である。 継続管理及び継続識別による生体サンプル追跡を用いて患者固有の免疫療法手順を実施するためのシステムの詳細なブロック図である。 継続管理及び継続識別による生体サンプル追跡を用いて患者固有の免疫療法手順を実施するコンピューター化された方法のフロー図である。 患者固有の免疫療法手順中に患者固有の情報を受信するために、ユーザーインターフェースモジュールによって生成された例示的なスクリーンショットである。 患者固有の免疫療法手順中に患者固有の情報を受信するために、ユーザーインターフェースモジュールによって生成された例示的なスクリーンショットである。 患者固有の免疫療法手順中に、抽出サイト及び注入サイトの確認を受信し、予約をスケジュールするために、ユーザーインターフェースモジュールによって生成された例示的なスクリーンショットである。 患者固有の免疫療法手順中に、抽出サイト及び注入サイトの確認を受信し、予約をスケジュールするために、ユーザーインターフェースモジュールによって生成された例示的なスクリーンショットである。 患者固有の免疫療法手順中に、抽出サイト及び注入サイトの確認を受信し、予約をスケジュールするために、ユーザーインターフェースモジュールによって生成された例示的なスクリーンショットである。 患者固有の免疫療法手順中に、抽出サイト及び注入サイトの確認を受信し、予約をスケジュールするために、ユーザーインターフェースモジュールによって生成された例示的なスクリーンショットである。 患者固有の免疫療法手順中に、生体材料の継続管理を表示するためにユーザーインターフェースモジュールによって生成された例示的なスクリーンショットである。 患者固有の免疫療法手順中に、生体材料の継続管理を表示するためにユーザーインターフェースモジュールによって生成された例示的なスクリーンショットである。
図1Aは、継続管理及び継続識別による生体サンプル追跡を用いて患者固有の免疫療法手順を実施するためのシステム100のブロック図である。図1Aのシステムは、複数のクライアントコンピューティングデバイス102a〜102dと、通信ネットワーク104と、ユーザーインターフェースモジュール108a、イベント追跡モジュール108b及び継続管理モジュール108cを備えたサーバーコンピューティングデバイス106と、データベース110とを含む。
クライアントコンピューティングデバイス102a〜102dは、通信ネットワーク104に接続することで、サーバーコンピューティングデバイス106と通信して、本明細書に記載される継続管理及び継続識別による生体サンプル追跡を用いた患者固有の免疫療法手順を実施するプロセスに関する入力を提供し、出力を受信する。幾つかの実施形態では、各クライアントコンピューティングデバイス102a〜102dは、例えば、本明細書に記載される方法及びシステムからもたらされる入力を受信し、出力を提示する詳細なグラフィカルユーザーインターフェース(GUI)を提供するために、それぞれのディスプレイデバイスに結合され得る。例えば、クライアントコンピューティングデバイス102a〜102dは、例えば、クライアントコンピューティングデバイス102a〜102cのユーザーに、本明細書に記載される方法と関連する機能にアクセスするためのウェブベースのポータルを提供する、サーバーコンピューティングデバイス106のユーザーインターフェースモジュール108aに接続され得る。
例示的なクライアントデバイス102a〜102dとしては、デスクトップコンピューター、ラップトップコンピューター、タブレット、モバイルデバイス、スマートフォン及びインターネット家電が挙げられるが、これらに限定されない。図1Aのシステムのコンポーネントに接続することができる他のタイプのコンピューティングデバイスが、本発明の範囲から逸脱することなく使用され得ることが十分理解されよう。クライアントコンピューティングデバイス102a〜102dはそれぞれ、異なるユーザタイプに関連付けられ得ることを理解されたい。例えば、クライアントコンピューティングデバイス102aは、ユーザープロファイルを生成し、患者固有の免疫療法手順に関する更新を受信するために、図1Aのシステムにアクセスする患者に関連付けられ得て、クライアントコンピューティングデバイス102bは、患者の免疫療法を開始するために、患者を治療しており、図1Aのシステムにアクセスする医師に関連付けられ得て、クライアントコンピューティングデバイス102cは、患者に免疫療法手順を施している病院又は他の施設に関連付けられ得て、また、クライアントコンピューティングデバイス102dは、免疫療法手順で使用するための(本明細書に記載する)患者固有の免疫療法製品を作製している製造施設に関連付けられ得る。
通信ネットワーク104は、本明細書に記載される継続管理及び継続識別による生体サンプル追跡を用いる患者固有の免疫療法手順を実施するプロセスを行うため、システム100の他のコンポーネントが互いに通信することを可能にする。ネットワーク104は、LAN等のローカルネットワーク、又はインターネット及び/又はセルラーネットワーク等の広域ネットワークであってもよい。幾つかの実施形態では、ネットワーク104は、図1Aのシステムのコンポーネントが互いに通信することを可能にする幾つかの別個のネットワーク及び/又はサブネットワーク(例えば、セルラーからインターネットまで)で構成される。
サーバーコンピューティングデバイス106は、プロセッサ上で実行され、サーバーコンピューティングデバイス106のメモリモジュールと相互作用して、本明細書に記載される継続管理及び継続識別による生体サンプル追跡を用いた患者固有の免疫療法手順を実施するための機能を実施する専用ハードウェア及び/又はソフトウェアモジュールを含むハードウェア及びソフトウェアのモジュールの組み合わせである。サーバーコンピューティングデバイス106は、サーバーコンピューティングデバイス106のプロセッサ上で実行及び/又はプロセッサと相互作用する、ユーザーインターフェースモジュール108a、イベント追跡モジュール108b及び継続管理モジュール108c(上述のもの)を含む。
幾つかの実施形態では、ユーザーインターフェースモジュール108a、イベント追跡モジュール108b及び継続管理モジュール108cは、サーバーコンピューティングデバイス106内の1つ以上の専用プロセッサにプログラムされたコンピューターソフトウェア命令の特殊なセットであり、特殊なコンピューターソフトウェア命令を実行するための具体的に指定されたメモリの場所及び/又はレジスターを含み得る。モジュール108a〜108cは同じサーバーコンピューティングデバイス106内で実行されるものとして図1Aに示されているが、幾つかの実施形態では、モジュール108a〜108cの機能は、複数のサーバーコンピューティングデバイス間で分散され得る。図1Aに示されるように、サーバーコンピューティングデバイス106は、記載される機能を実施する目的でデータを交換するために、モジュール108a〜108cが互いに通信することを可能にする。本発明の範囲から逸脱することなく、様々なアーキテクチャ、リソース、及び構成(例えば、クラスタコンピューティング、仮想コンピューティング、クラウドコンピューティング)に配置された任意の数のコンピューティングデバイスが使用され得ることを理解されたい。モジュール108a〜108cの例示的な機能を以下に詳しく記載する。
データベース110は、サーバーコンピューティングデバイス106に結合されたコンピューティングデバイス(又は幾つかの実施形態では、コンピューティングデバイスのセット)であり、本明細書に記載される継続管理及び継続識別による生体サンプル追跡を用いた患者固有の免疫療法手順を実施するプロセスに関するデータの特定のセグメントを受信、生成及び保存するように構成される。幾つかの実施形態では、データベース110の全部又は一部は、サーバーコンピューティングデバイス106と統合されてもよく、又は1つ以上の別々のコンピューティングデバイス上に配置されてもよい。データベース110は、以下でより詳細に記載するように、図1Aのシステムの他のコンポーネントによって使用されるデータの部分を保存するように構成された1つ以上のデータベースを備えてもよい。幾つかの実施形態では、データベース110は、物流管理、サプライチェーン、輸送、CRM及び他のタイプのモジュールを含む本明細書に記載される方法及びシステムを支持するための多様な機能を可能にする様々なモジュールを含む、Oracle社のE−Business Suite(EBS)等の企業ビジネススイート(business suite)を含む。
図1Bは、継続管理及び継続識別による生体サンプル追跡を用いた患者固有の免疫療法手順を実施するため図1Aのシステムの詳細なブロック図である。図1Bに示すように、サーバーコンピューティングデバイス106は、ハードウェアアーキテクチャ全体の中心的なコンポーネントであり、クライアントコンピューティングデバイス102a〜102e及びデータベース110とインターフェースで連結し、スケジューリングモジュール114及び医師のマスターデータフィード116ともインターフェースで連結する。幾つかの実施形態では、サーバーコンピューティングデバイス106及び対応するモジュール108a〜108cは、カリフォルニア州サンフランシスコのSalesforce.com, Inc.から入手可能なSalesforceプラットフォームを活用して、本明細書に記載される或る特定の機能を統合する。クライアントコンピューティングデバイス102a〜102eは、サーバーコンピューティングデバイス106と通信して、免疫療法手順における患者登録を実施し、本明細書に記載される継続管理及び継続識別の追跡を(例えば、ブラウザベースのユーザーインターフェースを介して)監視する。
例えば、クライアントコンピューティングデバイス102aは、免疫療法手順を受けている患者に関連付けられ得て、患者が追跡を監視するとともに、(例えば、DocuSign又は他の同様の技術を介して)免疫療法手順に参加するために必要な文書に電子的に署名するために、ブラウザソフトウェア及び電子メールソフトウェアを含めてもよい。同様に、クライアントコンピューティングデバイス102b〜102dは、治療医が、ブラウザソフトウェアを使用して、患者を免疫療法手順に登録し、システムで細胞の注文を行い、継続管理及び継続識別による追跡を監視し得る異なる病院に配置されてもよい。クライアントコンピューティングデバイス102b〜102dは、デバイスがサーバーコンピューティングデバイス106に対して認証できるようにするシングルサインオン(SSO:single-sign-on)モジュールも含む(例えば、SAML2.0がサポートするSSO又はサーバーの特定のユーザー名/パスワードを使用)。クライアントコンピューティングデバイス102eは、サーバーコンピューティングデバイス106の管理者が、ブラウザソフトウェアを使用して、サーバーと通信し、システム内の他の参加者から電子メール等の通信を受信し、継続管理及び継続識別による追跡を監視できるように、管理又は製造サイトに配置され得る。
上述のように、データベース110は、サーバーコンピューティングデバイス106のデータを管理する企業ビジネススイートを備えてもよく、生体サンプルに対する継続管理及び継続識別による追跡及び物流管理を可能にするモジュールを含む。例えば、データベース110は、要求に応じて承認済み顧客サイトをサーバー106に送信し、サーバー106から細胞注文エントリーデータを受信し、細胞注文予約及びアフェレーシスロット更新情報をサーバー106に提供し得る。
スケジューリングモジュール114は、サーバーコンピューティングデバイス106に統合されてもよく、又は別々のコンピューティングデバイス上に存在してもよい。スケジューリングモジュール114は、サーバーコンピューティングデバイス106に対して認証及び通信を行い、細胞注文及び免疫療法手順に関する或る特定の情報(例えば、患者ID、アフェレーシスサイト、注入サイト及び製品コード)を受信し、カレンダリング(calendaring)及びスケジューリングの機能をサーバー106に提供し得る(例えば、治療医がアフェレーシスの日/時刻を選択し、生体サンプルが製造プロセスを一旦経た後に生体サンプルの予定配送日/時刻を提供することを可能にする)。また、サーバーコンピューティングデバイス106は、医師のマスターデータフィード116(例えば、Heroku(登録商標)アプリケーションと統合されたVeeva(登録商標)CRMプラットフォームを使用して提供される)と通信して、治療医に関する或る特定の情報を受信し得る。
図2は、図1Aのシステム及び/又は図1Bのシステムを使用して、継続管理及び継続識別による生体サンプル追跡を用いて患者固有の免疫療法手順を実施するコンピューター化された方法200のフロー図である。理解されるように、本明細書に記載される方法及びシステムは、患者固有の免疫療法手順を実施することに関して提示される。本明細書で使用される「患者固有の免疫療法手順」とは、免疫系の分子又は細胞成分を使用して、癌、病原性又は他の疾患を引き起こす細胞を標的とする及び/又は破壊する任意の手順を意味する。免疫療法の手順は、患者の免疫系の成分を利用して、その患者自身の癌、病理又は他の疾患を治療する場合、「患者固有」である。
本明細書で使用される「患者」及び「被験体」という用語は区別なく使用され、ヒト及び非ヒト動物と並んで、正式に診断された障害があるもの、正式に認識された障害のないもの、医療処置を受けているもの、障害を発症するリスクのあるもの等を含む。ヒトに加えて、本発明の範囲内の動物のカテゴリーとしては、例えば、農業動物、飼育動物、実験動物等が挙げられる。農業動物の幾つかの例としては、ウシ、ブタ、ウマ、ヤギ等が挙げられる。飼育動物の幾つかの例としては、イヌ、ネコ等が挙げられる。実験動物の幾つかの例としては、ラット、マウス、ウサギ、モルモット等が挙げられる。
「白血球アフェレーシス」という用語は、血液サンプルから白血球を選択的に分離及び除去することを含む特定の形態のアフェレーシスを指す。白血球アフェレーシスの間、T細胞を含む有核白血球を赤血球及び血漿から分離する細胞分離装置に取り出した血液を通す。次いで、分離されたT細胞を収集して、本発明の細胞修飾技術で使用することができる。或る特定の実施形態では、赤血球及び血漿は、分離プロセスの一部として個体に戻される。さらなる実施形態では、赤血球及び血漿は廃棄されるか、又はさらなる分析のために保存される。
本明細書で使用される「T細胞」及び「Tリンパ球」という用語は区別されない。T細胞は、胸腺での発達により、及びCD3複合体のタンパク質に関連するヘテロ二量体受容体により定義されるリンパ球のサブセットである。本発明のT細胞としては、ナイーブT細胞、細胞傷害性T細胞、ヘルパーT細胞、サプレッサーT細胞、調節性T細胞、記憶T細胞、NKT細胞、γδ細胞、CD8αα細胞、リンホカイン活性化細胞、TCR発現細胞、そのサブタイプ、及びキメラ受容体鎖を発現し得る他の任意の細胞タイプが挙げられるが、これらに限定されない。
T細胞は、1つ以上の所望の標的に対して特異性を持つように改変され得る。例えば、T細胞は、1つ以上のシグナル伝達分子及び/又は1つ以上の活性化ドメイン、例えばCD3ゼータと併せて、抗体の1つ以上の一本鎖可変フラグメント(「scFv」)等の抗原結合分子をコードするDNA又は他の遺伝物質で形質導入され得る。標的細胞を認識して破壊するCAR−T細胞の能力に加えて、T細胞療法の成功は、抗原に応答して増殖する能力を持続及び維持するCAR−T細胞の能力の恩恵を受ける。
本明細書で使用される「細胞修飾技術」という用語には、トランスフェクション及び形質導入が含まれるが、これらに限定されない。「トランスフェクション」という用語及びその文法的変形は、外来又は外因性DNAの細胞への導入を指す。多くのトランスフェクション技術が当技術分野においてよく知られており、本明細書に開示されている。例えば、Graham et al., 1973, Virology 52:456、Sambrook et al., 2001, Molecular Cloning: A Laboratory Manual(同上)、Davis et al., 1986, Basic Methods in Molecular Biology, Elsevier、Chu et al., 1981, Gene 13:197を参照されたい。トランスフェクション技術としては、リン酸カルシウム−DNA共沈、DEAE−デキストラン媒介トランスフェクション、カチオン性脂質媒介送達、ポリブレン媒介トランスフェクション、エレクトロポレーション、ソノポレーション、マイクロインジェクション、リポソーム融合、リポフェクション(脂質トランスフェクション)、ポリマートランスフェクション、ナノ粒子、ポリプレックス、受容体媒介遺伝子送達、ポリリジン、ヒストン、キトサン及びペプチドによって媒介される送達、プロトプラスト融合、レトロウイルス感染、並びにバイオリスティックス(例えば、遺伝子銃)が挙げられるが、これらに限定されない。「形質導入」という用語及びその文法的変形は、外来DNAがウイルスベクターを介して細胞に導入されるプロセスを指す。Jones et al., (1998). Genetics: principles and analysis. Boston: Jones & Bartlett Publを参照されたい。
本明細書で使用される「注入する」という用語及びその文法的変形は、血管を通して体内に溶液を導入することを意味する。本発明の注入には、血管への全血以外の流体の治療的導入が含まれるが、これに限定されない。例えば、本発明のトランスフェクトされたT細胞は、例えば、筋肉内、静脈内、動脈内、腹腔内又は皮下で患者の血流に注入され得る。
キメラ抗原受容体(CAR又はCAR−T)は遺伝子組み換え受容体であり、T細胞受容体(TCR)は遺伝子改変受容体であり得ることが理解されよう。これらの改変受容体は、当技術分野で知られている技術に従って、T細胞を含む免疫細胞に容易に挿入され、免疫細胞により発現され得る。CARを用いて、特異抗原を認識することと、その抗原に結合すると免疫細胞を活性化してその抗原を持つ細胞を攻撃し破壊することとの両方を行うように単一の受容体をプログラム化することができる。これらの抗原が腫瘍細胞に存在する場合、CARを発現する免疫細胞が腫瘍細胞を標的にして死滅させ得る。
CARは、その標的抗原と相互作用する抗原結合分子を組み込むことにより、抗原(細胞表面抗原等)に結合するように改変され得る。本明細書で使用される「抗原結合分子」は、特定の標的分子に結合する任意のタンパク質を意味する。抗原結合分子としては、抗体及び免疫学的に機能的なフラグメント等のその結合部分が挙げられるが、これらに限定されない。ペプチボディ(すなわち、ペプチド結合ドメインを含むFc融合分子)は、適切な抗原結合分子の別の例である。
抗原結合分子の「免疫学的に機能的なフラグメント」(又は「フラグメント」)という用語は、全長鎖に存在するアミノ酸の少なくとも幾つかを欠くが、それでも抗原に特異的に結合することができる抗体の一部(その部分の取得又は合成の方法にかかわらず)を含む抗原結合分子の一種である。かかるフラグメントは、標的抗原に結合するという点で生物学的に活性であり、所与のエピトープへの結合について、無傷の抗体を含む他の抗原結合分子と競合する可能性がある。幾つかの実施形態では、フラグメントは中和フラグメントである。一態様では、かかるフラグメントは、全長の軽鎖又は重鎖に存在する少なくとも1つのCDRを保持し、幾つかの実施形態では、単一の重鎖及び/又は軽鎖又はその一部を含む。これらのフラグメントは、組換えDNA技術によって生産されてもよく、又は無傷の抗体を含む抗原結合分子の酵素的若しくは化学的な切断によって生産されてもよい。
免疫学的に機能的な免疫グロブリンフラグメントとしては、scFvフラグメント、Fabフラグメント(Fab’、F(ab’)等)、1つ以上のCDR、ダイアボディ(同じ鎖上の2つのドメイン間で対合するには短すぎる短ペプチドリンカーを介して接続されている、軽鎖可変ドメインと同じポリペプチド上の重鎖可変ドメイン)、ドメイン抗体、及び一本鎖抗体が挙げられるが、これらに限定されない。これらのフラグメントは、ヒト、マウス、ラット、ラクダ科動物、又はウサギを含むがこれらに限定されない任意の哺乳動物源に由来し得る。当業者によって理解されるように、抗原結合分子は非タンパク質成分を含み得る。
幾つかの実施形態では、抗原結合分子は腫瘍細胞上の抗原に結合する。幾つかの実施形態では、抗原結合分子は、過剰増殖性疾患に関与する細胞上の抗原、又はウイルス抗原若しくは細菌抗原に結合する。さらなる実施形態では、抗原結合分子は、その相補性決定領域(CDR)の1つ以上を含む抗体又はそのフラグメントである。さらなる実施形態では、抗原結合分子は一本鎖可変フラグメント(scFv)である。
抗原結合分子はその抗体フラグメントであることが好ましい。抗原結合分子は、1つ以上の一本鎖可変フラグメント(「scFv」)を含むことがより好ましい。scFvは、互いに連結された抗体の重鎖及び軽鎖の可変領域を有する一本鎖抗体フラグメントである。米国特許第7,741,465号、同第6,319,494号、国際公開第88/01649号、米国特許第4,946,778号、及び米国特許第5,260,203号並びにEshhar et al., Cancer Immunol Immunotherapy (1997) 45: 131-136を参照することができ、それらの内容は、それらの全体が引用することにより更に本明細書の一部をなす。scFvは、標的抗原と特異的に相互作用する親抗体の能力を保持する。scFvは、一本鎖の一部として他のCAR成分と共に発現されるように改変することができるため、キメラ抗原受容体への使用に好ましい(同上)。Krause et al., J. Exp. Med., Volume 188, No. 4, 1998 (619-626)、Finney et al., Journal of Immunology, 1998, 161: 2791-2797も参照されたい。
抗原結合分子が通例、対象の抗原を認識し、結合することが可能なようにCARの細胞外部分に含有されることが理解されよう。2つ以上の対象の標的に対して特異性を有する二重特異性及び多重特異性CARが本発明の範囲内に企図される。
或る特定の実施形態では、抗原結合分子のポリペプチド構造は、それぞれ、モノクローナル抗体、二重特異性抗体、ミニボディ、ドメイン抗体、合成抗体(本明細書では「抗体模倣物」と称されることがある)、キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、抗体融合物(本明細書では「抗体コンジュゲート」と称されることがある)、及びそれらのフラグメントを含むが、これらに限定されない抗体に基づく。幾つかの実施形態では、抗原結合分子はアビマーを含むか、又はそれからなる。
抗原結合分子は、解離定数(K)が約1×10−7Mの場合、その標的抗原に「特異的に結合する」と言われる。抗原結合分子は、Kが1×10−9M〜5×10−9Mである場合に「高親和性」、及びKが1×10−10M〜5×10−10Mである場合に「非常に高親和性」で抗原に特異的に結合する。一実施形態では、抗原結合分子は10−9MのKを有する。一実施形態では、解離速度(off-rate)は1×10−5未満である。
当業者は、本発明の標的分子が、トランスフェクトされたT細胞に特異性を移すことが望まれる任意の分子であり得ることを理解するであろう。「標的分子」又は「抗原」という用語は、抗原結合分子が結合することのできる分子又は分子の一部を指す。或る特定の実施形態では、標的は、1つ以上のエピトープを有し得る。
本発明の標的分子としては、血液由来の癌関連抗原が挙げられるが、これに限定されないことが好ましい。血液由来の癌関連抗原の非限定的な例としては、急性骨髄白血病(AML)、慢性骨髄性白血病(CML)、慢性骨髄単球性白血病(CMML)、若年性骨髄単球性白血病、非定型慢性骨髄白血病、急性前骨髄球性白血病(APL)、急性単芽球性白血病、急性赤白血病、急性巨核球性白血病、リンパ芽球性白血病、B系統急性リンパ芽球性白血病、B細胞慢性リンパ球性白血病、B細胞非ホジキンリンパ腫、骨髄異形成症候群(MDS)、骨髄増殖性障害、骨髄新生物、骨髄肉腫)、及び芽球性形質細胞様樹状細胞新生物(BPDCN)からなる群から選択される1つ以上の癌と関連する抗原が挙げられる。
幾つかの実施形態では、抗原は、腫瘍関連抗原、例えば、5T4、アルファフェトプロテイン(AFP)、B7−1(CD80)、B7−2(CD86)、BCMA、B−ヒト絨毛性ゴナドトロピン、CA−125、癌胎児性抗原(CEA)、癌胎児性抗原(CEA)、CD123、CD133、CD138、CD19、CD20、CD22、CD23、CD24、CD25、CD30、CD33、CD34、CD4、CD40、CD44、CD56、CD8、CLL−1、c−Met、CMV特異抗原、CSPG4、CTLA−4、ジシアロガングリオシドGD2、管上皮ムチン、EBV特異抗原、EGFR変異体III(EGFRvIII)、ELF2M、エンドグリン、エフリンB2、上皮成長因子受容体(EGFR)、上皮細胞接着分子(EpCAM)、上皮腫瘍抗原、ErbB2(HER2/neu)、線維芽細胞関連タンパク質(fap)、FLT3、葉酸結合タンパク質、GD2、GD3、神経膠腫関連抗原、スフィンゴ糖脂質、gp36、HBV特異抗原、HCV特異抗原、HER1−HER2、HER2−HER3の組み合わせ、HERV−K、高分子量黒色腫関連抗原(HMW−MAA)、HIV−1エンベロープ糖タンパク質gp41、HPV特異抗原、ヒトテロメラーゼ逆転写酵素、IGFI受容体、IGF−II、IL−11Rアルファ、IL−13R−a2、インフルエンザウイルス特異抗原;CD38、インスリン成長因子(IGFI)−1、腸内カルボキシルエステラーゼ、カッパ鎖、LAGA−1a、ラムダ鎖、ラッサウイルス特異抗原、レクチン反応性AFP、系統特異又は組織特異抗原、例えばCD3、MAGE、MAGE−A1、主要組織適合遺伝子複合体(MHC)分子、腫瘍特異的ペプチドエピトープを提示する主要組織適合遺伝子複合体(MHC)分子、M−CSF、黒色腫関連抗原、メソテリン、メソテリン、MN−CA IX、MUC−1、mut hsp72、変異p53、変異p53、変異ras、好中球エラスターゼ、NKG2D、Nkp30、NY−ESO−1、p53、PAP、プロスターゼ、プロスターゼ特異抗原(PSA)、前立腺癌腫瘍抗原−1(PCTA−1)、前立腺特異抗原、プロステイン、PSMA、RAGE−1、ROR1、RU1、RU2(AS)、表面接着分子、サバイビン及びテロメラーゼ、TAG−72、フィブロネクチンのエクストラドメインA(EDA)及びエクストラドメインB(EDB)、並びにテネイシンCのA1ドメイン(TnC A1)、サイログロブリン、腫瘍間質抗原、血管内皮成長因子受容体−2(VEGFR2)、ウイルス特異的表面抗原、例えばHIV特異抗原(例えば、HIV gp120)、並びにこれらの表面マーカーの任意の誘導体又は変異体から選択される。
幾つかの実施形態では、本発明の標的分子には、ウイルス感染関連抗原が含まれる。本発明のウイルス感染は、例えばHIVを含む任意のウイルスによって引き起こされ得る。
可能な標的分子のこの一覧は排他的であることを意図するものではなく、当業者は、本発明のキメラ抗原受容体を標的とするのに有用となり得る多くの追加の分子を知っているであろう。
キメラ抗原受容体は、それらの効力を増大するために共刺激(シグナル伝達)ドメインを組み込むことができる。米国特許第7,741,465号及び同第6,319,494号、並びにKrause et al.及びFinney et al.(上掲)、Song et al., Blood 119:696-706 (2012)、Kaloset al., Sci Transl. Med. 3:95 (2011)、Porter et al., N. Engl. J. Med. 365:725-33 (2011)、並びにGross et al., Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol. 56:59-83 (2016)を参照されたい。例えば、CD28は、T細胞上に自然に見られる共刺激タンパク質である。様々な共刺激分子が本明細書に規定されるが、付加的な共刺激分子も本発明の範囲内に含まれることが理解されよう。
CD28の完全な天然(native)アミノ酸配列は、NCBI参照配列:NP_006130.1に記載される。完全な天然CD28核酸配列はNCBI参照配列:NM_006139.1に記載される。
或る特定のCD28ドメインをキメラ抗原受容体に使用した。本発明に従い、「CD28T」と称する新規のCD28細胞外(ヒンジ)構築物が予期せぬことに、CAR構築物中に利用した場合に或る特定の利益をもたらすことが今回見出された。この構築物は、細胞外CD28配列からの複数のアミノ酸の切断(除去)にも関わらず、CD28を含有するCARの特性を保持する(時には超える)能力を示す。これらの利益としては、同等の若しくは優れたサイトカイン産生、同等の若しくは優れた細胞溶解活性、及び/又は同等の若しくは優れたCAR発現レベルが挙げられる。
細胞外ドメイン並びにCD28膜貫通及び細胞内ドメインを含むCD28T分子のヌクレオチド配列を下記配列番号1に規定する:
CTTGATAATGAAAAGTCAAACGGAACAATCATTCACGTGAAGGGCAAGCACCTCTGTCCGTCACCCTTGTTCCCTGGTCCATCCAAGCCATTCTGGGTGTTGGTCGTAGTGGGTGGAGTCCTCGCTTGTTACTCTCTGCTCGTCACCGTGGCTTTTATAATCTTCTGGGTTAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGC
対応するアミノ酸配列を下記配列番号2に規定する:
LDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVRSK RSRLLHSDYM NMTPRRPGPT RKHYQPYAPP RDFAAYRS
CD28Tの細胞外部分のヌクレオチド配列を下記配列番号3に規定する:
CTTGATAATGAAAAGTCAAACGGAACAATCATTCACGTGAAGGGCAAGCACCTCTGTCCGTCACCCTTGTTCCCTGGTCCATCCAAGCCA
CD28T細胞外ドメインの対応するアミノ酸配列を下記配列番号4に規定する:
LDNEKSNGTI IHVKGKHLCP SPLFPGPSKP
CD28膜貫通ドメインのヌクレオチド配列を下記配列番号5に規定する:
TTCTGGGTGTTGGTCGTAGTGGGTGGAGTCCTCGCTTGTTACTCTCTGCTCGTCACCGTGGCTTTTATAATCTTCTGGGTT
CD28膜貫通ドメインのアミノ酸配列を下記配列番号6に規定する:
FWVLVVVGGV LACYSLLVTV AFIIFWV
CD28細胞内シグナル伝達ドメインのヌクレオチド配列を下記配列番号7に規定する:
AGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGC
CD28細胞内シグナル伝達ドメインのアミノ酸配列を下記配列番号8に規定する:
RSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRS
本発明への使用に適した付加的なCD28配列は、下記配列番号11に規定されるCD28ヌクレオチド配列を含む:
ATTGAGGTGATGTATCCACCGCCTTACCTGGATAACGAAAAGAGTAACGGTACCATCATTCACGTGAAAGGTAAACACCTGTGTCCTTCTCCCCTCTTCCCCGGGCCATCAAAGCCC
対応するアミノ酸配列を下記配列番号12に規定する:
IEVMYPPPYLDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKP
本発明が少なくとも1つの配列番号1又は配列番号3の単離核酸配列を含む抗原結合分子、CAR、TCR等に関することが理解されよう。本発明が、細胞外部分が少なくとも1つの配列番号1又は配列番号3の単離核酸配列からなる抗原結合分子、CAR、TCR等に関することが更に理解されよう。付加的に、本発明が、細胞外部分が少なくとも1つの配列番号1又は配列番号3の単離核酸配列から本質的になる抗原結合分子、CAR、TCR等に関することが理解されよう。
本発明が少なくとも1つの配列番号2又は配列番号4のアミノ酸配列を含む抗原結合分子、CAR、TCR等に関することが理解されよう。本発明が、細胞外部分が少なくとも1つの配列番号2又は配列番号4のアミノ酸配列からなる抗原結合分子、CAR、TCR等に関することが更に理解されよう。本発明が、細胞外部分が少なくとも1つの配列番号2又は配列番号4のアミノ酸配列から本質的になる抗原結合分子、CAR、TCR等に関することも理解されよう。
細胞外及び/又は膜貫通ドメインの別の適切な供給源は、CD8の一部又は全てに由来する(又はそれに対応する)ことができる。
適切なCD8細胞外及び膜貫通ドメインのヌクレオチド配列を、下記配列番号13に規定する:
GCTGCAGCATTGAGCAACTCAATAATGTATTTTAGTCACTTTGTACCAGTGTTCTTGCCGGCTAAGCCTACTACCACACCCGCTCCACGGCCACCTACCCCAGCTCCTACCATCGCTTCACAGCCTCTGTCCCTGCGCCCAGAGGCTTGCCGACCGGCCGCAGGGGGCGCTGTTCATACCAGAGGACTGGATTTCGCCTGCGATATCTATATCTGGGCACCCCTGGCCGGAACCTGCGGCGTACTCCTGCTGTCCCTGGTCATCACGCTCTATTGTAATCACAGGAAC
対応するアミノ酸配列を下記配列番号14に規定する:
AAALSNSIMYFSHFVPVFLPAKPTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCNHRN
構造的には、本明細書に記載されるドメインが免疫細胞又は他の細胞に対する位置に相当することが理解されよう。このため、これらのドメインは(i)「ヒンジ」若しくは細胞外(EC)ドメイン、(ii)膜貫通(TM)ドメイン、及び/又は(iii)細胞内/細胞質ドメイン(IC)の一部であり得る。細胞内成分は、CD3ファミリーメンバー、好ましくはCD3ゼータの一部等の活性化ドメインを部分的に含むことが多い。このドメインは、抗原結合分子がその標的に結合した際にT細胞を活性化することが可能である。細胞内ドメインが通例、本明細書に記載される1つ以上の共刺激分子を更に含むことが理解されよう。
本明細書で使用される「共刺激分子」は、増殖、活性化、分化等を含むが、これらに限定されないT細胞応答を媒介するシグナルを生じる分子を指す。共刺激分子は、本明細書に記載される活性化分子によって生じる一次シグナルに加えて、シグナルを生じることができる。
本発明の範囲内である適切な共刺激ドメインは、例えばCD28、CD28T、OX40、4−1BB/CD137、CD2、CD3(アルファ、ベータ、デルタ、イプシロン、ガンマ、ゼータ)、CD4、CD5、CD7、CD9、CD16、CD22、CD27、CD30、CD33、CD37、CD40、CD45、CD64、CD80、CD86、CD134、CD137、CD154、PD−1、ICOS、リンパ球機能関連抗原−1(LFA−1、CD11a/CD18)、CD247、CD276(B7−H3)、LIGHT(腫瘍壊死因子スーパーファミリーメンバー14;TNFSF14)、NKG2C、Igアルファ(CD79a)、DAP−10、Fcガンマ受容体、MHCクラスI分子、TNF、TNFr、インテグリン、シグナル伝達リンパ球活性化分子、BTLA、Tollリガンド受容体、ICAM−1、B7−H3、CDS、ICAM−1、GITR、BAFFR、LIGHT、HVEM(LIGHTR)、KIRDS2、SLAMF7、NKp80(KLRF1)、NKp44、NKp30、NKp46、CD19、CD4、CD8アルファ、CD8ベータ、IL−2Rベータ、IL−2Rガンマ、IL−7Rアルファ、ITGA4、VLA1、CD49a、ITGA4、IA4、CD49D、ITGA6、VLA−6、CD49f、ITGAD、CD11d、ITGAE、CD103、ITGAL、CD11a、LFA−1、ITGAM、CD11b、ITGAX、CD11c、ITGB1、CD29、ITGB2、CD18、LFA−1、ITGB7、NKG2D、TNFR2、TRANCE/RANKL、DNAM1(CD226)、SLAMF4(CD244、2B4)、CD84、CD96(Tactile)、CEACAM1、CRT AM、Ly9(CD229)、CD160(BY55)、PSGL1、CD100(SEMA4D)、CD69、SLAMF6(NTB−A、Ly108)、SLAM(SLAMF1、CD150、IPO−3)、BLAME(SLAMF8)、SELPLG(CD162)、LTBR、LAT、GADS、SLP−76、PAG/Cbp、CD19a、CD83リガンド若しくはフラグメント、又はそれらの組合せ等の共刺激ドメインに由来し得る(又は共刺激ドメインに対応し得る)。上に挙げられていない付加的な共刺激分子又はそのフラグメントも本発明の範囲内に含まれることが理解されよう。
幾つかの実施形態では、共刺激ドメインは、配列番号140に規定される4−1BB核酸配列、及び配列番号141に規定される対応するアミノ酸配列の全部又は一部を含み得る。他の実施形態では、共刺激ドメインは、配列番号142に規定されるOX40のアミノ酸配列の全部又は一部を含み得る。Hombach et al., Oncoimmunology. 2012 Jul.1; 1(4):458-466も参照されたい。さらなる他の実施形態では、共刺激ドメインは、Guedan et al., August 14, 2014; Blood:124 (7)及びShen et al., Journal of Hematology & Oncology (2013) 6:33に記載されるICOS分子の全部又は一部を含み得る。さらなる他の実施形態では、共刺激ドメインは、Song et al., Oncoimmunology. 2012 Jul. 1;1(4): 547-549に記載されるCD27の全部又は一部を含み得る。
本発明の改変T細胞は抗原結合分子(scFv等)、細胞外ドメイン(「ヒンジ」ドメインを含み得る)、膜貫通ドメイン及び細胞内ドメインを含む。細胞内ドメインは少なくとも部分的に活性化ドメインを含み、好ましくはCD3ゼータ、CD3イプシロン、CD3ガンマ又はその一部等のCD3ファミリーメンバーで構成されていてもよい。
抗原結合分子(例えば、1つ以上のscFv)が、分子/構築物の細胞外部分に位置することで、その標的(単数又は複数)を認識し、結合することが可能なように改変されることが更に理解されよう。
ヒンジ領域は、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA、IgD、IgE、IgM、又はそれらのフラグメント等の免疫グロブリンファミリーのメンバーの幾つか又は全部を含み得ることが理解されよう。
幾つかの実施形態では、細胞外ドメインは、抗原結合分子と膜貫通ドメインの間に位置する。
本発明における特定の使用の細胞外ドメインは、CD28、OX−40、4−1BB/CD137、CD2、CD7、CD27、CD30、CD40、プログラム細胞死−1(PD−1)、誘導性T細胞共刺激分子(ICOS)、リンパ球機能関連抗原−1(LFA−1、CD11a/CD18)、CD3ガンマ、CD3デルタ、CD3イプシロン、CD247、CD276(B7−H3)、LIGHT(TNFSF14)、NKG2C、Igアルファ(CD79a)、DAP−10、Fcガンマ受容体、MHCクラスI分子、TNF受容体タンパク質、免疫グロブリンタンパク質、サイトカイン受容体、インテグリン、シグナル伝達リンパ球活性化分子(SLAMタンパク質)、活性化NK細胞受容体、BTLA、Tollリガンド受容体、ICAM−1、B7−H3、CDS、ICAM−1、GITR、BAFFR、LIGHT、HVEM(LIGHTR)、KIRDS2、SLAMF7、NKp80(KLRF1)、NKp44、NKp30、NKp46、CD19、CD4、CD8アルファ、CD8ベータ、IL−2Rベータ、IL−2Rガンマ、IL−7Rアルファ、ITGA4、VLA1、CD49a、ITGA4、IA4、CD49D、ITGA6、VLA−6、CD49f、ITGAD、CD11d、ITGAE、CD103、ITGAL、CD11a、LFA−1、ITGAM、CD11b、ITGAX、CD11c、ITGB1、CD29、ITGB2、CD18、LFA−1、ITGB7、NKG2D、TNFR2、TRANCE/RANKL、DNAM1(CD226)、SLAMF4(CD244、2B4)、CD84、CD96(Tactile)、CEACAM1、CRT AM、Ly9(CD229)、CD160(BY55)、PSGL1、CD100(SEMA4D)、CD69、SLAMF6(NTB−A、Ly108)、SLAM(SLAMF1、CD150、IPO−3)、BLAME(SLAMF8)、SELPLG(CD162)、LTBR、LAT、GADS、SLP−76、PAG/Cbp、CD19a、CD83と特異的に結合するリガンド、又はそれらの任意の組合せの全て又は一部に由来する(すなわち、それを含む)ことができる。細胞外ドメインは、天然供給源又は合成供給源のいずれに由来していてもよい。
細胞外ドメインは、「スペーサー」領域と称される場合があるヒンジ部分を含むことが多い。本明細書に記載される分子の一部又は誘導体を含む様々なヒンジを本発明に従って用いることができる。
CARは、CARの細胞外ドメインに融合した膜貫通ドメインを用いて設計することができる。これは同様にCARの細胞内ドメインに融合していてもよい。場合によっては、膜貫通ドメインは、同じ又は異なる表面膜タンパク質の膜貫通ドメインへのかかるドメインの結合を回避し、受容体複合体の他のメンバーとの相互作用を最小限に抑えるためにアミノ酸置換によって選択又は修飾することができる。膜貫通ドメインは、天然供給源又は合成供給源のいずれに由来していてもよい。供給源が天然である場合、ドメインは任意の膜結合又は膜貫通タンパク質に由来することができる。本発明における特定の使用の膜貫通領域は、CD28、CD28T、OX−40、4−1BB/CD137、CD2、CD7、CD27、CD30、CD40、プログラム細胞死−1(PD−1)、誘導性T細胞共刺激分子(ICOS)、リンパ球機能関連抗原−1(LFA−1、CD11a/CD18)、CD3ガンマ、CD3デルタ、CD3イプシロン、CD247、CD276(B7−H3)、LIGHT(TNFSF14)、NKG2C、Igアルファ(CD79a)、DAP−10、Fcガンマ受容体、MHCクラスI分子、TNF受容体タンパク質、免疫グロブリンタンパク質、サイトカイン受容体、インテグリン、シグナル伝達リンパ球活性化分子(SLAMタンパク質)、活性化NK細胞受容体、BTLA、Tollリガンド受容体、ICAM−1、B7−H3、CDS、ICAM−1、GITR、BAFFR、LIGHT、HVEM(LIGHTR)、KIRDS2、SLAMF7、NKp80(KLRF1)、NKp44、NKp30、NKp46、CD19、CD4、CD8アルファ、CD8ベータ、IL−2Rベータ、IL−2Rガンマ、IL−7Rアルファ、ITGA4、VLA1、CD49a、ITGA4、IA4、CD49D、ITGA6、VLA−6、CD49f、ITGAD、CD11d、ITGAE、CD103、ITGAL、CD11a、LFA−1、ITGAM、CD11b、ITGAX、CD11c、ITGB1、CD29、ITGB2、CD18、LFA−1、ITGB7、NKG2D、TNFR2、TRANCE/RANKL、DNAM1(CD226)、SLAMF4(CD244、2B4)、CD84、CD96(Tactile)、CEACAM1、CRT AM、Ly9(CD229)、CD160(BY55)、PSGL1、CD100(SEMA4D)、CD69、SLAMF6(NTB−A、Ly108)、SLAM(SLAMF1、CD150、IPO−3)、BLAME(SLAMF8)、SELPLG(CD162)、LTBR、LAT、GADS、SLP−76、PAG/Cbp、CD19a、CD83と特異的に結合するリガンド、又はそれらの任意の組合せに由来する(それを含む、又はそれに対応する)ことができる。
任意に、短リンカーがCARの細胞外、膜貫通及び細胞内ドメインのいずれか又は幾つかの間で連結を形成してもよい。
他の実施形態では、本発明のCAR中の膜貫通ドメインはCD8膜貫通ドメインである。一実施形態では、CD8膜貫通ドメインは、配列番号13の核酸配列の膜貫通部分を含む。別の実施形態では、CD8膜貫通ドメインは、配列番号14中に含有される膜貫通アミノ酸配列をコードする核酸配列を含む。
或る特定の実施形態では、本発明のCAR中の膜貫通ドメインはCD28膜貫通ドメインである。一実施形態では、CD28膜貫通ドメインは配列番号5の核酸配列を含む。一実施形態では、CD28膜貫通ドメインは、配列番号6のアミノ酸配列をコードする核酸配列を含む。別の実施形態では、CD28膜貫通ドメインは配列番号6のアミノ酸配列を含む。
本発明の改変T細胞の細胞内(細胞質)ドメインは、免疫細胞の正常エフェクター機能の少なくとも1つの活性化をもたらすことができる。T細胞のエフェクター機能は、例えばサイトカインの分泌を含む細胞溶解活性又はヘルパー活性を指す場合がある。
適切な細胞内分子が、CD28、CD28T、OX−40、4−1BB/CD137、CD2、CD7、CD27、CD30、CD40、プログラム細胞死−1(PD−1)、誘導性T細胞共刺激分子(ICOS)、リンパ球機能関連抗原−1(LFA−1、CD11a/CD18)、CD3ガンマ、CD3デルタ、CD3イプシロン、CD247、CD276(B7−H3)、LIGHT(TNFSF14)、NKG2C、Igアルファ(CD79a)、DAP−10、Fcガンマ受容体、MHCクラスI分子、TNF受容体タンパク質、免疫グロブリンタンパク質、サイトカイン受容体、インテグリン、シグナル伝達リンパ球活性化分子(SLAMタンパク質)、活性化NK細胞受容体、BTLA、Tollリガンド受容体、ICAM−1、B7−H3、CDS、ICAM−1、GITR、BAFFR、LIGHT、HVEM(LIGHTR)、KIRDS2、SLAMF7、NKp80(KLRF1)、NKp44、NKp30、NKp46、CD19、CD4、CD8アルファ、CD8ベータ、IL−2Rベータ、IL−2Rガンマ、IL−7Rアルファ、ITGA4、VLA1、CD49a、ITGA4、IA4、CD49D、ITGA6、VLA−6、CD49f、ITGAD、CD11d、ITGAE、CD103、ITGAL、CD11a、LFA−1、ITGAM、CD11b、ITGAX、CD11c、ITGB1、CD29、ITGB2、CD18、LFA−1、ITGB7、NKG2D、TNFR2、TRANCE/RANKL、DNAM1(CD226)、SLAMF4(CD244、2B4)、CD84、CD96(Tactile)、CEACAM1、CRT AM、Ly9(CD229)、CD160(BY55)、PSGL1、CD100(SEMA4D)、CD69、SLAMF6(NTB−A、Ly108)、SLAM(SLAMF1、CD150、IPO−3)、BLAME(SLAMF8)、SELPLG(CD162)、LTBR、LAT、GADS、SLP−76、PAG/Cbp、CD19a、CD83と特異的に結合するリガンド、又はそれらの任意の組合せに由来する(又はそれに対応する)シグナル伝達ドメインを含む(include (i.e., comprise))が、これらに限定されないことが理解されよう。
好ましい実施形態では、CARの細胞内/細胞質ドメインは、CD3ゼータドメイン自体を含むように設計するか、又は本発明のCARとの関連で有用な任意の他の所望の細胞内ドメイン(複数の場合もある)と組み合わせることができる。例えば、CARの細胞内ドメインは、CD3ゼータ鎖部分及び共刺激シグナル伝達分子の一部を含み得る。本発明のCARの細胞内シグナル伝達部分中の細胞内シグナル伝達配列は、ランダムに又は指定の順序で互いに連結することができる。
別の好ましい実施形態では、細胞内ドメインは、CD3ゼータの活性化ドメイン及びCD28のシグナル伝達ドメインを含むように設計される。別の実施形態では、細胞内ドメインは、CD3ゼータの活性化ドメイン及び4−1BBのシグナル伝達ドメインを含むように設計される。別の実施形態では、CAR中の細胞内ドメインはCD28及びCD3ゼータの一部を含むように設計され、細胞内CD28は配列番号7に規定される核酸配列及び配列番号8に規定されるアミノ酸配列を含む。CD3ゼータ核酸配列は配列番号9に規定され、アミノ酸配列は配列番号8に規定される。
本明細書で使用される「活性化」又は「刺激」は、シグナル伝達事象を媒介する、活性化分子とその同族リガンドとの結合によって誘導される一次応答を指す。
「活性化分子」又は「刺激分子」はT細胞上の分子、例えば抗原提示細胞上に存在する同族刺激リガンドと特異的に結合するTCR/CD3複合体を指す。適切な活性化分子は本明細書に記載される。
本発明の範囲内の適切な活性化ドメインは、活性化/刺激分子、例えばCD3又はCD3ゼータ等に由来し得る(又はそれに対応し得る)ことが理解されよう。CD3は、天然T細胞上のT細胞受容体の要素であり、CARにおいて重要な細胞内活性化要素であることが示されている。
好ましい実施形態では、CD3はCD3ゼータであり、そのヌクレオチド配列を下記配列番号9に規定する:
AGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG
細胞内CD3ゼータの対応するアミノ酸を下記配列番号10に規定する:
RVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPR RKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR
本発明によるCARの好ましい配向の1つが、抗原結合分子(scFv等)を細胞外及び/又はヒンジドメイン、共刺激ドメイン及び活性化ドメインと共に含むことが理解されよう。複数のドメインを共に利用することができることが更に理解されよう。
本発明による例示的なCAR構築物を表1に規定する。
Figure 2020537635
「ベクター」の用語は、タンパク質コード情報を宿主細胞に伝達するために使用される任意の分子又は実体(例えば核酸、プラスミド、バクテリオファージ又はウイルス)を意味する。「発現ベクター」又は「発現構築物」の用語は、宿主細胞の形質転換に適切であり、それに動作可能に(operatively)連結された1つ以上の異種コード領域の発現を(宿主細胞と共に)指向及び/又は制御する核酸配列を含有するベクターを指す。発現構築物は、転写、翻訳に影響するか又は制御し、イントロンが存在する場合には、それに操作可能に連結されたコード領域のRNAスプライシングに影響する配列を含み得るが、これに限定されない。
「宿主細胞」の用語は、核酸配列で形質転換されているか、又は核酸配列で形質転換することが可能であり、それにより対象の遺伝子を発現する細胞を指す。この用語は、子孫の形態又は遺伝子構造が元の親細胞と同一であるかに関わらず、対象の遺伝子が存在する限りにおいて親細胞の子孫を含む。
「形質転換」の用語は細胞の遺伝的特徴の変化を指し、細胞は新たなDNA又はRNAを含有するように修飾されている場合に形質転換されている。例えば、細胞は新たな遺伝物質をトランスフェクション、形質導入又は他の技法により導入することによってその天然状態から遺伝子修飾される場合に形質転換される。トランスフェクション又は形質導入の後に、形質転換DNAを細胞の染色体に物理的に組み込むことによって細胞のDNAと組み換えるか、又は複製することなくエピソーム要素として一時的に維持するか、又はプラスミドとして独立して複製することができる。細胞は、形質転換DNAが細胞の分裂により複製される場合に「安定的に形質転換されている」とみなされる。
本発明は、本発明のキメラ抗原受容体(CAR)及びT細胞受容体(TCR)をコードする単離ポリヌクレオチド並びに該ポリヌクレオチドを含むベクターに更に関する。当該技術分野で既知の任意のベクターが本発明に適切である。幾つかの実施の形態では、ベクターはウイルスベクターである。幾つかの実施の形態では、ベクターはレトロウイルスベクター(pMSVG1等)、DNAベクター、マウス白血病ウイルスベクター、SFGベクター、プラスミド、RNAベクター、アデノウイルスベクター、バキュロウイルスベクター、エプスタインバーウイルスベクター、パポバウイルスベクター、ワクシニアウイルスベクター、単純ヘルペスウイルスベクター、アデノ随伴ウイルスベクター(AAV)、レンチウイルスベクター(pGAR等)、又はそれらの任意の誘導体若しくは組合せである。
pGAR配列は以下の通りである:
CTGACGCGCCCTGTAGCGGCGCATTAAGCGCGGCGGGTGTGGTGGTTACGCGCAGCGTGACCGCTACACTTGCCAGCGCCCTAGCGCCCGCTCCTTTCGCTTTCTTCCCTTCCTTTCTCGCCACGTTCGCCGGCTTTCCCCGTCAAGCTCTAAATCGGGGGCTCCCTTTAGGGTTCCGATTTAGTGCTTTACGGCACCTCGACCCCAAAAAACTTGATTAGGGTGATGGTTCACGTAGTGGGCCATCGCCCTGATAGACGGTTTTTCGCCCTTTGACGTTGGAGTCCACGTTCTTTAATAGTGGACTCTTGTTCCAAACTGGAACAACACTCAACCCTATCTCGGTCTATTCTTTTGATTTATAAGGGATTTTGCCGATTTCGGCCTATTGGTTAAAAAATGAGCTGATTTAACAAAAATTTAACGCGAATTTTAACAAAATATTAACGCTTACAATTTGCCATTCGCCATTCAGGCTGCGCAACTGTTGGGAAGGGCGATCGGTGCGGGCCTCTTCGCTATTACGCCAGCTGGCGAAAGGGGGATGTGCTGCAAGGCGATTAAGTTGGGTAACGCCAGGGTTTTCCCAGTCACGACGTTGTAAAACGACGGCCAGTGAATTGTAATACGACTCACTATAGGGCGACCCGGGGATGGCGCGCCAGTAATCAATTACGGGGTCATTAGTTCATAGCCCATATATGGAGTTCCGCGTTACATAACTTACGGTAAATGGCCCGCCTGGCTGACCGCCCAACGACCCCCGCCCATTGACGTCAATAATGACGTATGTTCCCATAGTAACGCCAATAGGGACTTTCCATTGACGTCAATGGGTGGAGTATTTACGGTAAACTGCCCACTTGGCAGTACATCAAGTGTATCATATGCCAAGTACGCCCCCTATTGACGTCAATGACGGTAAATGGCCCGCCTGGCATTATGCCCAGTACATGACCTTATGGGACTTTCCTACTTGGCAGTACATCTACGTATTAGTCATCGCTATTACCATGCTGATGCGGTTTTGGCAGTACATCAATGGGCGTGGATAGCGGTTTGACTCACGGGGATTTCCAAGTCTCCACCCCATTGACGTCAATGGGAGTTTGTTTTGGCACCAAAATCAACGGGACTTTCCAAAATGTCGTAACAACTCCGCCCCATTGACGCAAATGGGCGGTAGGCGTGTACGGTGGGAGGTCTATATAAGCAGAGCTGGTTTAGTGAACCGGGGTCTCTCTGGTTAGACCAGATCTGAGCCTGGGAGCTCTCTGGCTAACTAGGGAACCCACTGCTTAAGCCTCAATAAAGCTTGCCTTGAGTGCTTCAAGTAGTGTGTGCCCGTCTGTTGTGTGACTCTGGTAACTAGAGATCCCTCAGACCCTTTTAGTCAGTGTGGAAAATCTCTAGCAGTGGCGCCCGAACAGGGACTTGAAAGCGAAAGGGAAACCAGAGGAGCTCTCTCGACGCAGGACTCGGCTTGCTGAAGCGCGCACGGCAAGAGGCGAGGGGCGGCGACTGGTGAGTACGCCAAAAATTTTGACTAGCGGAGGCTAGAAGGAGAGAGATGGGTGCGAGAGCGTCAGTATTAAGCGGGGGAGAATTAGATCGCGATGGGAAAAAATTCGGTTAAGGCCAGGGGGAAAGAAAAAATATAAATTAAAACATATAGTATGGGCAAGCAGGGAGCTAGAACGATTCGCAGTTAATCCTGGCCTGTTAGAAACATCAGAAGGCTGTAGACAAATACTGGGACAGCTACAACCATCCCTTCAGACAGGATCAGAAGAACTTAGATCATTATATAATACAGTAGCAACCCTCTATTGTGTGCATCAAAGGATAGAGATAAAAGACACCAAGGAAGCTTTAGACAAGATAGAGGAAGAGCAAAACAAAAGTAAGACCACCGCACAGCAAGCCGCCGCTGATCTTCAGACCTGGAGGAGGAGATATGAGGGACAATTGGAGAAGTGAATTATATAAATATAAAGTAGTAAAAATTGAACCATTAGGAGTAGCACCCACCAAGGCAAAGAGAAGAGTGGTGCAGAGAGAAAAAAGAGCAGTGGGAATAGGAGCTTTGTTCCTTGGGTTCTTGGGAGCAGCAGGAAGCACTATGGGCGCAGCGTCAATGACGCTGACGGTACAGGCCAGACAATTATTGTCTGGTATAGTGCAGCAGCAGAACAATTTGCTGAGGGCTATTGAGGCGCAACAGCATCTGTTGCAACTCACAGTCTGGGGCATCAAGCAGCTCCAGGCAAGAATCCTGGCTGTGGAAAGATACCTAAAGGATCAACAGCTCCTGGGGATTTGGGGTTGCTCTGGAAAACTCATTTGCACCACTGCTGTGCCTTGGAATGCTAGTTGGAGTAATAAATCTCTGGAACAGATTTGGAATCACACGACCTGGATGGAGTGGGACAGAGAAATTAACAATTACACAAGCTTAATACACTCCTTAATTGAAGAATCGCAAAACCAGCAAGAAAAGAATGAACAAGAATTATTGGAATTAGATAAATGGGCAAGTTTGTGGAATTGGTTTAACATAACAAATTGGCTGTGGTATATAAAATTATTCATAATGATAGTAGGAGGCTTGGTAGGTTTAAGAATAGTTTTTGCTGTACTTTCTATAGTGAATAGAGTTAGGCAGGGATATTCACCATTATCGTTTCAGACCCACCTCCCAACCCCGAGGGGACCCGACAGGCCCGAAGGAATAGAAGAAGAAGGTGGAGAGAGAGACAGAGACAGATCCATTCGATTAGTGAACGGATCTCGACGGTATCGGTTAACTTTTAAAAGAAAAGGGGGGATTGGGGGGTACAGTGCAGGGGAAAGAATAGTAGACATAATAGCAACAGACATACAAACTAAAGAATTACAAAAACAAATTACAAAATTCAAAATTTTATCGCGATCGCGGAATGAAAGACCCCACCTGTAGGTTTGGCAAGCTAGCTTAAGTAACGCCATTTTGCAAGGCATGGAAAATACATAACTGAGAATAGAGAAGTTCAGATCAAGGTTAGGAACAGAGAGACAGCAGAATATGGGCCAAACAGGATATCTGTGGTAAGCAGTTCCTGCCCCGGCTCAGGGCCAAGAACAGATGGTCCCCAGATGCGGTCCCGCCCTCAGCAGTTTCTAGAGAACCATCAGATGTTTCCAGGGTGCCCCAAGGACCTGAAAATGACCCTGTGCCTTATTTGAACTAACCAATCAGTTCGCTTCTCGCTTCTGTTCGCGCGCTTCTGCTCCCCGAGCTCAATAAAAGAGCCCACAACCCCTCACTCGGCGCGCCAGTCCTTCGAAGTAGATCTTTGTCGATCCTACCATCCACTCGACACACCCGCCAGCGGCCGCTGCCAAGCTTCCGAGCTCTCGAATTAATTCACGGTACCCACCATGGCCTAGGGAGACTAGTCGAATCGATATCAACCTCTGGATTACAAAATTTGTGAAAGATTGACTGGTATTCTTAACTATGTTGCTCCTTTTACGCTATGTGGATACGCTGCTTTAATGCCTTTGTATCATGCTATTGCTTCCCGTATGGCTTTCATTTTCTCCTCCTTGTATAAATCCTGGTTGCTGTCTCTTTATGAGGAGTTGTGGCCCGTTGTCAGGCAACGTGGCGTGGTGTGCACTGTGTTTGCTGACGCAACCCCCACTGGTTGGGGCATTGCCACCACCTGTCAGCTCCTTTCCGGGACTTTCGCTTTCCCCCTCCCTATTGCCACGGCGGAACTCATCGCCGCCTGCCTTGCCCGCTGCTGGACAGGGGCTCGGCTGTTGGGCACTGACAATTCCGTGGTGTTGTCGGGGAAGCTGACGTCCTTTTCATGGCTGCTCGCCTGTGTTGCCACCTGGATTCTGCGCGGGACGTCCTTCTGCTACGTCCCTTCGGCCCTCAATCCAGCGGACCTTCCTTCCCGCGGCCTGCTGCCGGCTCTGCGGCCTCTTCCGCGTCTTCGCCTTCGCCCTCAGACGAGTCGGATCTCCCTTTGGGCCGCCTCCCCGCCTGGTTAATTAAAGTACCTTTAAGACCAATGACTTACAAGGCAGCTGTAGATCTTAGCCACTTTTTAAAAGAAAAGGGGGGACTGGAAGGGCGAATTCACTCCCAACGAAGACAAGATCTGCTTTTTGCTTGTACTGGGTCTCTCTGGTTAGACCAGATCTGAGCCTGGGAGCTCTCTGGCTAACTAGGGAACCCACTGCTTAAGCCTCAATAAAGCTTGCCTTGAGTGCTTCAAGTAGTGTGTGCCCGTCTGTTGTGTGACTCTGGTAACTAGAGATCCCTCAGACCCTTTTAGTCAGTGTGGAAAATCTCTAGCAGGCATGCCAGACATGATAAGATACATTGATGAGTTTGGACAAACCACAACTAGAATGCAGTGAAAAAAATGCTTTATTTGTGAAATTTGTGATGCTATTGCTTTATTTGTAACCATTATAAGCTGCAATAAACAAGTTAACAACAACAATTGCATTCATTTTATGTTTCAGGTTCAGGGGGAGGTGTGGGAGGTTTTTTGGCGCGCCATCGTCGAGGTTCCCTTTAGTGAGGGTTAATTGCGAGCTTGGCGTAATCATGGTCATAGCTGTTTCCTGTGTGAAATTGTTATCCGCTCACAATTCCACACAACATACGAGCCGGAAGCATAAAGTGTAAAGCCTGGGGTGCCTAATGAGTGAGCTAACTCACATTAATTGCGTTGCGCTCACTGCCCGCTTTCCAGTCGGGAAACCTGTCGTGCCAGCTGCATTAATGAATCGGCCAACGCGCGGGGAGAGGCGGTTTGCGTATTGGGCGCTCTTCCGCTTCCTCGCTCACTGACTCGCTGCGCTCGGTCGTTCGGCTGCGGCGAGCGGTATCAGCTCACTCAAAGGCGGTAATACGGTTATCCACAGAATCAGGGGATAACGCAGGAAAGAACATGTGAGCAAAAGGCCAGCAAAAGGCCAGGAACCGTAAAAAGGCCGCGTTGCTGGCGTTTTTCCATAGGCTCCGCCCCCCTGACGAGCATCACAAAAATCGACGCTCAAGTCAGAGGTGGCGAAACCCGACAGGACTATAAAGATACCAGGCGTTTCCCCCTGGA
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適切な付加的な例示的なベクターとしては、例えばpBABE−puro、pBABE−neo largeTcDNA、pBABE−hygro−hTERT、pMKO.1 GFP、MSCV−IRES−GFP、pMSCV PIG(Puro IRES GFP空プラスミド)、pMSCV−loxp−dsRed−loxp−eGFP−Puro−WPRE、MSCV IRES Luciferase、pMIG、MDH1−PGK−GFP_2.0、TtRMPVIR、pMSCV−IRES−mCherry FP、pRetroX GFP T2A Cre、pRXTN、pLncEXP及びpLXIN−Lucが挙げられる。
さらなる実施形態では、種々の発現ベクターの混合物は、免疫エフェクター細胞のドナー集団を遺伝的に修飾する際に使用され得て、各ベクターは、本明細書に開示される種々のCARをコードする。得られる形質導入された免疫エフェクター細胞は、改変細胞の混合集団を形成し、一定割合の改変細胞が2以上のCARを発現する。
本発明の好ましい実施形態では、CARは、抗CD19 scFv、CD28及びCD3ゼータの全部又は一部を含む。
本発明のトランスフェクトされたT細胞はまた、T細胞受容体(TCR)をコードするポリヌクレオチドで、収集されたT細胞をトランスフェクトすることにより作製され得る。T細胞受容体(TCR)は、主要組織適合性複合体(MHC)分子に結合したペプチドとして抗原フラグメントの認識を担うT細胞の表面に見られる分子である。TCRは2つの異なるタンパク質鎖で構成されており、ヒトTCRのおよそ95%において、TCRはアルファ(α)鎖及びベータ(β)鎖からなる。ヒトT細胞のおよそ5%において、TCRはガンマ及びデルタ(γ/δ)鎖からなる。各鎖は、いずれも免疫グロブリンスーパーファミリーである、2つの細胞外ドメイン:可変(V)領域及び定常(C)領域で構成される。他の免疫グロブリンと同様に、TCRのα鎖及びβ鎖(又はガンマ及びデルタ(γ/δ)鎖)の可変ドメインには、それぞれ3つの超可変領域又は相補性決定領域(CDR)がある。TCRが抗原ペプチド及びMHC(ペプチド/MHC)と結合すると、T細胞が活性化され、標的細胞を攻撃し破壊することができる。
本発明のTCRは、例えば、腫瘍関連抗原に結合し得る。本明細書で使用される「腫瘍関連抗原」とは、副腎皮質癌、肛門癌、膀胱癌、骨癌、脳癌、乳癌、カルチノイド癌、癌腫、子宮頸癌、結腸癌、子宮内膜癌、食道癌、肝外胆管癌、頭蓋外胚細胞癌、眼癌、胆嚢癌、胃癌、胚細胞腫瘍、妊娠性絨毛性腫瘍、頭頸部癌、下咽頭癌、膵島細胞癌、腎臓癌、大腸癌、喉頭癌、白血病、口唇及び口腔の癌、肝臓癌、肺癌、リンパ腫、悪性中皮腫、メルケル細胞癌、菌状息肉腫、骨髄異形成症候群、骨髄増殖性障害、鼻咽頭癌、神経芽細胞腫、口腔癌、中咽頭癌、骨肉腫、卵巣上皮癌、卵巣胚細胞癌、膵癌、副鼻腔及び鼻腔の癌、副甲状腺癌、陰茎癌、下垂体癌、形質細胞新生物、前立腺癌、横紋筋肉腫、直腸癌、腎細胞癌、腎盂及び尿管の移行上皮癌、唾液腺癌、セザリー症候群、皮膚癌、小腸癌、軟部肉腫、胃癌、精巣癌、胸腺腫、甲状腺癌、尿道癌、子宮癌、膣癌、外陰癌及びウィルムス腫瘍からなる群から選択される1つ以上の癌に関連している任意の抗原を指す。
特定の態様では、本出願は、血液癌の標的分子に適している可能性がある。幾つかの実施形態では、癌は白血球細胞の癌である。他の実施形態では、癌は形質細胞の癌である。幾つかの実施形態では、癌は白血病、リンパ腫又は骨髄腫である。或る特定の実施形態では、癌は、急性リンパ芽球性白血病(ALL)(非T細胞ALLを含む)、急性リンパ性白血病(ALL)、及び血球貪食性リンパ組織球症(HLH))、B細胞前リンパ球性白血病、B細胞急性リンパ性白血病(「BALL」)、芽球性形質細胞様樹状細胞新生物、バーキットリンパ腫、慢性リンパ球性白血病(CLL)、慢性骨髄性白血病(CML)、慢性骨髄白血病(CML)、慢性若しくは急性肉芽腫性疾患、慢性若しくは急性白血病、びまん性大細胞型B細胞リンパ腫、びまん性大細胞型B細胞リンパ腫(DLBCL)、濾胞性リンパ腫、濾胞性リンパ腫(FL)、有毛細胞白血病、血球貪食症候群(マクロファージ活性化症候群(MAS))、ホジキン病、大細胞肉芽腫、白血球接着不全症、悪性リンパ増殖性疾患、MALTリンパ腫、マントル細胞リンパ腫、辺縁帯リンパ腫、意義不明の単クローン性ガンマグロブリン血症(MGUS)、多発性骨髄腫、骨髄異形成及び骨髄異形成症候群(MDS)、限定されるものではないが、急性骨髄白血病(AML)を含む骨髄疾患、非ホジキンリンパ腫(NHL)、形質細胞増殖性障害(例えば、無症候性骨髄腫(くすぶり型多発性骨髄腫又は無痛性骨髄腫)、形質芽球性リンパ腫、形質細胞様樹状細胞新生物、形質細胞腫(例えば、形質細胞異常増殖症;孤立性骨髄腫;孤立性形質細胞腫;髄外性形質細胞腫;及び多発性形質細胞腫)、POEMS症候群(Crow−Fukase症候群;高月病;PEP症候群)、縦隔原発大細胞型B細胞リンパ腫(PMBCL)、小細胞若しくは大細胞濾胞性リンパ腫、脾辺縁帯リンパ腫(SMZL)、全身性アミロイド軽鎖アミロイドーシス、T細胞急性リンパ性白血病(「TALL」)、T細胞リンパ腫、形質転換濾胞性リンパ腫、ワルデンストロームマクログロブリン血症、又はそれらの組み合わせである。
幾つかの実施の形態においては、抗原は、5T4、アルファフェトプロテイン(AFP)、B7−1(CD80)、B7−2(CD86)、BCMA、B−ヒト絨毛性ゴナドトロピン、CA−125、癌胎児性抗原(CEA)、癌胎児性抗原(CEA)、CD123、CD133、CD138、CD19、CD20、CD22、CD23、CD24、CD25、CD30、CD33、CD34、CD4、CD40、CD44、CD56、CD8、CLL−1、c−Met、CMV特異抗原、CSPG4、CTLA−4、ジシアロガングリオシドGD2、管上皮ムチン、EBV特異抗原、EGFR変異体III(EGFRvIII)、ELF2M、エンドグリン、エフリンB2、上皮成長因子受容体(EGFR)、上皮細胞接着分子(EpCAM)、上皮腫瘍抗原、ErbB2(HER2/neu)、線維芽細胞関連タンパク質(fap)、FLT3、葉酸結合タンパク質、GD2、GD3、神経膠腫関連抗原、スフィンゴ糖脂質、gp36、HBV特異抗原、HCV特異抗原、HER1−HER2、HER2−HER3の組み合わせ、HERV−K、高分子量黒色腫関連抗原(HMW−MAA)、HIV−1エンベロープ糖タンパク質gp41、HPV特異抗原、ヒトテロメラーゼ逆転写酵素、IGFI受容体、IGF−II、IL−11Rアルファ、IL−13R−a2、インフルエンザウイルス特異抗原、CD38、インスリン成長因子(IGFI)−1、腸カルボキシルエステラーゼ、カッパ鎖、LAGA−1a、ラムダ鎖、ラッサウイルス特異抗原、レクチン反応性AFP、系統特異又は組織特異抗原、例えばCD3、MAGE、MAGE−A1、主要組織適合性複合体(MHC)分子、腫瘍特異的ペプチドエピトープを提示する主要組織適合性複合体(MHC)分子、M−CSF、黒色腫関連抗原、メソテリン、メソテリン、MN−CA IX、MUC−1、mut hsp72、変異p53、変異p53、変異ras、好中球エラスターゼ、NKG2D、Nkp30、NY−ESO−1、p53、PAP、プロスターゼ、プロスターゼ特異抗原(PSA)、前立腺癌腫瘍抗原−1(PCTA−1)、前立腺特異抗原、プロステイン、PSMA、RAGE−1、ROR1、RU1、RU2(AS)、表面接着分子、サバイビン及びテロメラーゼ、TAG−72、フィブロネクチンのエクストラドメインA(EDA)及びエクストラドメインB(EDB)、並びにテネイシンCのA1ドメイン(TnC A1)、サイログロブリン、腫瘍間質抗原、血管内皮成長因子受容体−2(VEGFR2)、ウイルス特異表面抗原、例えばHIV特異抗原(例えば、HIV gp120)、並びにこれらの表面マーカーの任意の誘導体又は変異体等の腫瘍抗原を標的とする。
本発明のTCRはまた、ウイルス感染関連抗原に結合し得る。ウイルス感染関連抗原としては、例えばHIVによって引き起こされるウイルス感染を含む任意のウイルス感染に関連する抗原が挙げられる。
本明細書に記載される患者固有の免疫療法手順を開始するために、クライアントコンピューティングデバイス102aにいる医師又は他の医療関係者は、(例えば、ウェブポータル、ウェブサイト又は他の同様のプラットフォームを介して)サーバーコンピューティングデバイス106のユーザーインターフェースモジュール108aにアクセスする。ユーザーインターフェースモジュール108aは、医師が患者を登録し、患者固有の免疫療法手順を開始するために、クライアントコンピューティングデバイス102a上で医師に提示するためのユーザーインターフェース画面及び/又は要素を生成する。ユーザーインターフェースモジュール108aは、医師が患者の識別情報(例えば、氏名、生年月日)、人口統計学的属性(例えば、性別)、及び医療提供者情報(例えば、医師名、病院名)を入力できるようにするUI画面を生成し得る。ユーザーインターフェースモジュール108aはまた、医療提供者に固有の又は病院固有のユーザー識別子(例えば、医療記録番号、病院患者ID)を入力するためのUI要素を提供してもよい。図3A及び図3Bは、システムへの新しい患者の登録を可能にするユーザーインターフェースモジュール108aによって生成された例示的なスクリーンショットである。図3Aは、患者登録データ入力画面を示し、図3Bは、患者情報のレビュー及び確認画面を示す。
図2に戻って、クライアントコンピューティングデバイス102aは、患者に対してトランスフェクトされたT細胞を作製する要求を生成し、サーバーコンピューティングデバイス106は要求を受信する(202)。上述のように、クライアントコンピューティングデバイス102aにいる医師は、必要な患者情報を提供することにより、ユーザーインターフェースモジュール108aとインタラクトして患者を登録する。患者情報が完全に入力され、正確であるという確認をクライアントインターフェースモジュール108aがクライアントコンピューティングデバイス102aから受信すると、ユーザーインターフェースモジュール108aはデータベース110にデータを保存する。また、ユーザーインターフェースモジュール108aは、以下に記載されるサンプル追跡及び継続管理/継続識別プロセスの一部として使用される患者固有識別子を生成する(204)。一実施形態では、患者固有識別子は、患者識別要素(例えば、患者ID番号)、販売注文識別子、及び細胞注文ロット番号を含む。例えば、ユーザーインターフェースモジュール108aは、患者識別要素、販売注文番号、及び細胞注文ロット番号を、患者、販売注文、及び細胞ロットの組み合わせを一意に識別する識別子(例えば、9桁の数字コード)でインデックス付けされたデータベーステーブルにマッピングすることにより、患者固有識別子を生成し得る。
次に、クライアントコンピューティングデバイス102aにいる医師は、ユーザーインターフェースモジュール108aとインタラクトして、患者から生体材料を取得する予約をスケジュールし、変更された生体材料を患者に迅速に戻す時間的感受性のため、製造施設が生体材料を入手した直後に該材料を処理する能力を有していることを確認する。ユーザーインターフェースモジュール108aは、抽出キット(例えば、白血球アフェレーシスキット)を届ける(drop-off)材料抽出サイト(例えば、サイトの名称、住所、連絡先)の確認、並びに製造施設からの材料(例えばトランスフェクトされたT細胞)を配送する、変更された材料の配送及び治療サイト(例えば、サイトの名称、住所、連絡先)の確認を要求する。図4A〜図4Dは、これらのサイトの確認及び予約のスケジューリングを可能にする、ユーザーインターフェースモジュール108aによって生成される例示的なスクリーンショットである。図4Aは、届け先サイトの確認画面を示し、図4Bは材料配送サイトの確認画面を示し、図4Cは、予約スケジューラーを開く画面を示し、図4Dは予約スケジューラーを示す。幾つかの実施形態では、ユーザーインターフェースモジュール108aは、データベース110と併せて製造施設のリモートコンピューティングデバイスと通信して、生体材料修飾のスケジューリングを調整し、修飾された材料が迅速に患者に戻されるように最も効率的な処理スケジュールを確保する。
図2に戻って、細胞注文プロセスが上記のように完了すると、プロセス206が開始されて、抽出サイトで生体材料抽出手順を実施し、修飾のために抽出された材料を製造施設に出荷し、患者の血流に注入して戻すため、修飾された材料を配送サイトに返送する。最初に、患者は材料抽出サイトに到着し、患者の血液サンプルに対して手順(例えば、白血球アフェレーシス手順)が実施され(206a)、サンプルからT細胞を収集する。手順が実行されると、抽出サイトのクライアントコンピューティングデバイス(例えばデバイス102b)は、サーバーコンピューティングデバイス106のイベント追跡モジュール108bと通信して、手順の実施に対応する追跡イベントをモジュール108bに送信する。例えば、クライアントコンピューティングデバイス102bにいる臨床医は、ユーザーインターフェースに情報を入力することにより追跡イベントを送信してもよい。別の例では、クライアントコンピューティングデバイス102bは、手順に関する情報がクライアントコンピューティングデバイス102bによってキャプチャされると(例えば、バーコードをスキャンする)、追跡イベントをモジュール108bに(例えば、APIを介して)自動的に送信することができる。
追跡イベントは、患者固有識別子、タイムスタンプ、イベントID(例えば、材料抽出手順が実施されたことを示す)、及びプロセスに関連する他の情報(例えば、細胞注文ロット番号、販売注文番号、サイト場所等)を含み得る。イベント追跡モジュール108bは、クライアントコンピューティングデバイス102bから受信した情報に基づいてデータベース110に追跡イベントを保存する。これは生体材料の抽出及び修飾プロセスの第1のステップであるため、イベント追跡モジュール108bは、継続管理モジュール108cに追跡イベントの受信を通知する。継続管理モジュール108cは、患者、医師、製造業者及び他の関係者が生体材料の正確な状態を理解し、生体材料が紛失又は取り扱いミスを回避するために常に考慮されること保証できるように、規則的な順序で追跡イベント(及び本明細書に記載されるその後の各追跡イベント)を組み込む継続管理データ構造を(例えば、データベース110に)生成する。一例では、継続管理データ構造は、例えば、追跡イベントのタイムスタンプに従って、追跡イベントの各々を連続して共に接続する連結リストであってもよい。
次に、収集されたT細胞を容器(例えば、チューブ、バイアル又は他のタイプの生体材料運搬装置)に移し(206b)、別の追跡イベントをキャプチャし、イベント追跡モジュール108bに送信して上に記載される継続管理データ構造に統合する。次いで、容器に患者固有識別子をラベル付けし(206c)、別の追跡イベントをキャプチャし、継続管理モジュール108cと通信するためにイベント追跡モジュール108bに送信して継続管理データ構造に統合する。例えば、収集されたT細胞を収容する容器に、患者固有識別子を含むバーコードがラベル付けされた後、抽出サイトでスキャンされ、これは、収集されたT細胞が製造施設に出荷できる状態であることを示す。バーコードをスキャンすると、クライアントコンピューティングデバイス102bは追跡イベントを生成し、イベント追跡モジュール108bにイベントを送信する。
次いで、抽出サイトは、収集されたT細胞を製造施設に送り(206d)、製造施設でトランスフェクトされたT細胞を生成する手順を実施する。収集されたT細胞が製造施設に出荷されるとき、及び収集されたT細胞が製造施設で受け取られるときの両方で、T細胞の出荷及び受け取りを記録するために使用される1つ以上のデバイスは、イベント追跡モジュール108bと通信して継続管理モジュール108cと通信するための特定のアクティビティに関連付けられた追跡イベントを送信して、継続管理に統合する。このようにして、継続管理モジュール108cは、継続管理データ構造を最新の情報で自動的且つ連続的に更新し、その情報は、ユーザーインターフェースモジュール108aによって生成された1つ以上の画面に反映される。
次いで、製造施設は、細胞修飾技術を使用して収集されたT細胞からトランスフェクトされたT細胞を作製し(206e)、クライアントコンピューティングデバイス(例えばデバイス102c)は、使用されている特定の細胞修飾技術に基づいて1つ以上の追跡イベントを生成する。例えば、細胞修飾技術は、(i)修飾前の収集されたT細胞の品質保証、(ii)T細胞の修飾、(ii)トランスフェクトされたT細胞のリリース検査(release testing)、及び(iv)注入サイトに返送するためのトランスフェクトされたT細胞の最終処理等の幾つかのフェーズを含み得る。これらのフェーズのそれぞれについて、クライアントコンピューティングデバイス102cは、追跡イベントをキャプチャし、継続管理モジュール108cによる継続管理データ構造への統合のためにイベント追跡モジュール108bに追跡イベントを送信する。
トランスフェクトされたT細胞が出荷されると、注入サイトはトランスフェクトされたT細胞を受け取り(206f)、クライアントコンピューティングデバイス(例えばデバイス102d)は、継続管理モジュール108cによる継続管理データ構造への統合のためのイベント追跡モジュール108bへの送信のため追跡イベントを生成する。例えば、クライアントコンピューティングデバイス102dは、出荷及び/又はトランスフェクトされたT細胞に関連付けられたバーコードをスキャンして、追跡イベントを自動的に生成し、イベントをサーバーコンピューティングデバイス106に送信することができる。
受け取った後、トランスフェクトされたT細胞を患者の血流に注入して(206g)、プロセスが完了する。同時に、クライアントコンピューティングデバイス102dは、追跡イベントを生成し、継続管理モジュール108cによる継続管理データ構造への統合のためイベント追跡モジュール108bにイベントを送信する。
図5A及び図5Bは、クライアントコンピューティングデバイス102a〜102dが特定の患者、生体材料及び細胞修飾プロセスに関連する継続管理を見ることができるようにするために、ユーザーインターフェースモジュール108aによって生成される例示的なスクリーンショットである。図5Aに示されるように、白血球アフェレーシスプロセス中の生体材料の継続管理(手順のスケジューリング、手順の完了及び抽出されたT細胞の出荷準備の工程を含む)が画面上部のタイムラインにキャプチャされ、ここでは白血球アフェレーシス過程の各工程がタイムライン上の時点に関連付けられ、配送プロセス中の生体材料の継続管理(例えば、抽出サイトから出荷されたT細胞、製造施設に配送されたT細胞)は、画面下部のタイムラインにキャプチャされる。上述のように、イベント追跡モジュール108b及び継続管理モジュール108cが追跡イベントを記録すると、ユーザーインターフェースモジュール108aは、継続管理データ構造を走査して、画面上に継続管理の現在の状況を図に表す。
図5Bに示すように、製造プロセス(QA、製造、リリース検査及び出荷の完了を含む)中の生体材料の継続管理は、画面上部のタイムラインに示され、生体材料の継続管理は、最終製品の配送プロセス(出荷及び注入サイトへの配送を含む)の間、画面の中央に示される。さらに、治療日を含む治療の詳細が画面の下部に表示される。また、継続管理は常に特定の患者に関連付けられているため、製造の全てのフェーズで患者と生体材料との間の完全な継続識別が確保される。
上述の技術は、デジタル及び/又はアナログの電子回路、又はコンピューターハードウェア、ファームウェア、ソフトウェア又はそれらの組み合わせで実装され得る。実装はコンピュータープログラム製品、すなわち、データ処理装置、例えば、プログラム可能なプロセッサ、コンピューター、及び/又は複数のコンピューターによる実行のため又はそれらの動作を制御するための機械可読記憶装置に有形に具体化されたコンピュータープログラムとするものであってもよい。コンピュータープログラムは、ソースコード、コンパイル済みコード、解釈コード及び/又はマシンコードを含むコンピューター言語又はプログラミング言語の任意の形式で書かれてもよく、コンピュータープログラムはスタンドアロンプログラムとして、又はコンピューティング環境での使用に適したサブルーチン、要素若しくは他のユニットを含む任意の形式で展開され得る。コンピュータープログラムは、1台のコンピューター又は1つ以上のサイトの複数のコンピューターで実行されるように展開され得る。コンピュータープログラムは、クラウドコンピューティング環境(Amazon(登録商標)AWS、Microsoft(登録商標)Azure、IBM(登録商標)等)において展開され得る。
方法の工程は、コンピュータープログラムを実行する1つ以上のプロセッサによって実施されて、入力データを操作し及び/又は出力データを生成することにより、本発明の機能を実施し得る。方法の工程はまた、専用ロジック回路、例えばFPGA(フィールドプログラマブルゲートアレイ)、FPAA(フィールドプログラマブルアナログアレイ)、CPLD(複合プログラマブル論理デバイス)、PSoC(プログラマブルシステムオンチップ)、ASIP(特定用途向け命令セットプロセッサ)、又はASIC(特定用途向け集積回路)によって実施されてもよく、そのようなものとして機器を実装してもよい。サブルーチンは、保存されたコンピュータープログラム及び/又はプロセッサの一部、及び/又は1つ以上の機能を実装する特殊な回路を指す場合がある。
コンピュータープログラムの実行に適したプロセッサとしては、例として、本明細書に記載される方法を実施するために実行可能な命令で具体的にプログラムされた専用マイクロプロセッサが挙げられる。概して、プロセッサは、読み取り専用メモリ若しくはランダムアクセスメモリ、又はその両方から命令及びデータを受信する。コンピューターの必須の要素は、命令を実行するためのプロセッサ、並びに命令及び/又はデータを保存するための1つ以上のメモリデバイスである。キャッシュ等のメモリデバイスを使用して、データを一時的に保存することができる。メモリデバイスは、長期的なデータストレージにも使用され得る。概して、コンピューターはまた、データを保存するための1つ以上の大容量記憶装置(例えば磁気ディスク、光磁気ディスク又は光ディスク)からデータを受信する若しくはそれらに対してデータを転送する、又はその両方を行うため、該大容量記憶装置を含む又はそれに動作可能に結合される。また、ネットワークから命令及び/又はデータを受信し、及び/又はネットワークに命令及び/又はデータを転送するために、コンピューターは通信ネットワークに動作可能に結合されてもよい。コンピュータープログラムの命令及びデータを具体化するのに適したコンピューター可読記憶媒体としては、例として、半導体メモリデバイス、例えば、DRAM、SRAM、EPROM、EEPROM、及びフラッシュメモリデバイス;磁気ディスク、例えば、内蔵ハードディスク又はリムーバブルディスク;光磁気ディスク;並びに光ディスク、例えばCD、DVD、HD−DVD及びブルーレイディスクを含む、あらゆる形態の揮発性及び不揮発性のメモリが挙げられる。プロセッサ及びメモリを、特殊用途の論理回路によって補完してもよく及び/又はそれに組み込んでもよい。
ユーザーとのインタラクションを提供するために、上記の技術は、表示デバイス、例えば、ユーザーに情報を表示するためのCRT(陰極線管)、プラズマ、又はLCD(液晶ディスプレイ)モニター、モバイルデバイスのディスプレイ又はスクリーン、ホログラフィックデバイス及び/又はプロジェクター、並びにユーザーがコンピューターに入力を提供できる(例えば、ユーザーインターフェース要素とインタラクトする)、キーボード及びポインティングデバイス、例えば、マウス、トラックボール、タッチパッド又はモーションセンサーと通信するコンピューティングデバイス上で実装されてもよい。他の種類のデバイスを使用して、ユーザーとのインタラクションを提供することもでき、例えば、ユーザーに提供されるフィードバックは、任意の形式の感覚フィードバック、例えば視覚フィードバック、聴覚フィードバック又は触覚フィードバック等であってもよく、ユーザーからの入力は、音響、音声及び/又は触覚入力を含む任意の形式で受信され得る。
上述の技術は、バックエンドコンポーネントを含む分散コンピューティングシステムで実装されてもよい。バックエンドコンポーネントは、例えば、データサーバー、ミドルウェアコンポーネント及び/又はアプリケーションサーバーであってもよい。上述の技術は、フロントエンドコンポーネントを含む分散コンピューティングシステムで実装されてもよい。フロントエンドコンポーネントは、例えば、グラフィカルユーザーインターフェース、ユーザーが実装例とインタラクトすることができるウェブブラウザ、及び/又は送信デバイス用の他のグラフィカルユーザーインターフェースを有するクライアントコンピューターであってもよい。上記の技術は、かかるバックエンド、ミドルウェア又はフロントエンドのコンポーネントの任意の組み合わせを含む分散コンピューティングシステムで実装されてもよい。
コンピューティングシステムのコンポーネントは、デジタル又はアナログのデータ通信(例えば、通信ネットワーク)の任意の形式又は媒体を含むことができる伝送媒体によって相互接続され得る。伝送媒体は、任意の構成で1つ以上のパケットベースのネットワーク及び/又は1つ以上の回路ベースのネットワークを含んでもよい。パケットベースのネットワークには、例えば、インターネット、キャリアインターネットプロトコル(IP)ネットワーク(例えば、ローカルエリアネットワーク(LAN)、ワイドエリアネットワーク(WAN)、キャンパスエリアネットワーク(CAN)、メトロポリタンエリアネットワーク(MAN)、ホームエリアネットワーク(HAN))、プライベートIPネットワーク、IP構内交換機(IPBX)、ワイヤレスネットワーク(例えば、無線アクセスネットワーク(RAN)、Bluetooth、近距離無線通信(NFC)ネットワーク、Wi−Fi、WiMAX、汎用パケット無線サービス(GPRS)ネットワーク、HiperLAN)、及び/又は他のパケットベースのネットワークが含まれ得る。回線ベースのネットワークには、例えば、公衆交換電話網(PSTN)、レガシー構内交換機(PBX)、無線ネットワーク(例えば、RAN、符号分割多元接続(CDMA)ネットワーク、時分割多元接続(TDMA)ネットワーク、モバイル通信用グローバルシステム(GSM)ネットワーク)、及び/又は他の回線ベースのネットワークが含まれ得る。
伝送媒体を介する情報転送は、1つ以上の通信プロトコルに基づく場合がある。通信プロトコルには、例えば、イーサネットプロトコル、インターネットプロトコル(IP)、ボイスオーバーIP(VOIP)、ピアツーピア(P2P)プロトコル、ハイパーテキスト転送プロトコル(HTTP)、セッション開始プロトコル(SIP)、H.323、メディアゲートウェイ制御プロトコル(MGCP)、No.7信号方式(SS7:Signaling System #7)、モバイル通信用グローバルシステム(GSM)プロトコル、プッシュツートーク(Push-to-Talk)(PTT)プロトコル、PTTオーバーセルラー(PTT over Cellular)(POC)プロトコル、ユニバーサルモバイル電気通信システム(UMTS:Universal Mobile Telecommunications System)、3GPPロングタームエボリューション(Long Term Evolution)(LTE)、及び/又は他の通信プロトコルが含まれ得る。
コンピューティングシステムのデバイスには、例えば、コンピューター、ブラウザデバイスを備えたコンピューター、電話、IP電話、モバイルデバイス(例えば、携帯電話、パーソナルデジタルアシスタント(PDA)デバイス、スマートフォン、タブレット、ラップトップコンピューター、電子メールデバイス)及び/又は他の通信デバイスが含まれ得る。ブラウザデバイスとしては、例えば、ワールドワイドウェブブラウザ(例えば、Google, Inc.製のChrome(登録商標)、Microsoft Corporationから入手可能なMicrosoft(登録商標) Internet Explorer(登録商標)、及び/又はMozilla Corporationから入手可能なMozilla(登録商標) Firefox)を有するコンピューター(例えばデスクトップコンピューター及び/又はラップトップコンピューター)が挙げられる。モバイルコンピューティングデバイスとしては、例えばResearch in Motion製のBlackberry(登録商標)、Apple Corporation製のiPhone(登録商標)、及び/又はAndroid(登録商標)ベースのデバイスが挙げられる。IP電話としては、例えばCisco Systems, Inc.から入手可能なCisco(登録商標) Unified IP電話7985G及び/又はCisco(登録商標) Unifiedワイヤレス電話7920が挙げられる。
追加の定義
「ポリペプチド」又は「タンパク質」の用語は、天然配列の1つ以上のアミノ酸の欠失、付加及び/又は置換を含み、好ましくはそれに8つ以下のアミノ酸置換を有するタンパク質のアミノ酸配列を有する巨大分子を指す。ポリペプチド又はタンパク質は、本明細書に規定されるように単離するのが好ましい。「ポリペプチドフラグメント」の用語は、完全長天然タンパク質と比較してアミノ末端欠失、カルボキシル末端欠失及び/又は内部欠失を有する単離ポリペプチドを指す。かかるフラグメントは、天然タンパク質と比較して修飾アミノ酸を含有していてもよい。有用なポリペプチドフラグメントとしては、抗原結合分子の免疫機能フラグメントが挙げられる。有用なフラグメントとしては、1つ以上のCDR領域、重鎖及び/又は軽鎖の可変ドメイン、抗体鎖の他の部分の一部分等が挙げられるが、これらに限定されない。
「抗体」の用語は、任意のアイソタイプの無傷免疫グロブリン、又は標的抗原/分子への特異的結合について無傷抗体と競合することができるそのフラグメントを指し、例えばキメラ、ヒト化、完全ヒト及び二重特異性抗体を含む。「抗体」は、本明細書で規定される抗原結合分子種である。無傷抗体は概して、少なくとも2つの完全長重鎖及び2つの完全長軽鎖を含むが、場合によっては、重鎖のみを含む場合があるラクダ科動物において自然に発生する抗体等のように、より小数の鎖を含み得る。抗体は単一供給源のみに由来していてもよく、又はキメラであってもよい、すなわち、下記で更に説明するように抗体の異なる部分が2つの異なる抗体に由来していてもよい。抗原結合分子、抗体又は結合フラグメントは、ハイブリドーマ中で組み換えDNA法、又は無傷抗体の酵素的若しくは化学的切断によって作製することができる。他に指定のない限り、「抗体」の用語は2つの完全長重鎖及び2つの完全長軽鎖を含む抗体に加えて、その誘導体、変異体、フラグメント及び突然変異タンパク質を含み、その例を以下に記載する。さらに、明白に除外されない限り、抗体はモノクローナル抗体、二重特異性抗体、ミニボディ、ドメイン抗体、合成抗体(本明細書では「抗体模倣物」と称されることがある)、キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、抗体融合体(本明細書では「抗体コンジュゲート」と称されることがある)及びそのフラグメントのそれぞれを含む。
可変領域は通例、3つの超可変領域(すなわち、「CDR」)によって接合される比較的保存されたフレームワーク領域(FR)の同じ全体構造を示す。各々の対の2つの鎖からのCDRは通例、フレームワーク領域によって整列し、特異的エピトープへの結合が可能となる。N末端からC末端に向かって、軽鎖及び重鎖可変領域はどちらも通例、ドメインFR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3及びFR4を含む。慣例により、重鎖のCDR領域は通例、HC CDR1、CDR2及びCDR3と称される。軽鎖のCDR領域は通例、LC CDR1、CDR2及びCDR3と称される。各ドメインへのアミノ酸の割当ては通例、Kabat、Chothiaの定義又はAbM定義に従う。
「Kabatナンバリング」の用語及び類似の用語は、当該技術分野において認められ、抗体の重鎖及び軽鎖の可変領域、又はその抗原結合部分中のアミノ酸残基をナンバリングするシステムを指す。或る特定の態様では、Kabatナンバリングシステムに従って、抗体のCDRを特定することができる(例えば、Kabat EA & Wu TT (1971) Ann NY Acad Sci 190: 382-391及びKabat EA et al., (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242を参照されたい)。Kabatナンバリングシステムを使用すると、抗体重鎖分子内のCDRは通例、35に続いて任意に1つ又は2つの付加的なアミノ酸(Kabatナンバリングスキームでは35A及び35Bと呼ばれる)を含み得るアミノ酸31位〜35位(CDR1)、アミノ酸50位〜65位(CDR2)及びアミノ酸95位〜102位(CDR3)に存在する。Kabatナンバリングシステムを使用すると、抗体軽鎖分子内のCDRは通例、アミノ酸24位〜34位(CDR1)、アミノ酸50位〜56位(CDR2)及びアミノ酸89位〜97位(CDR3)に存在する。特定の実施形態では、本明細書に記載される抗体のCDRは、Kabatナンバリングスキームに従って決定された。
或る特定の態様では、抗体のCDRは、免疫グロブリンの構造ループの位置を参照する、Chothiaナンバリングスキームに従って特定され得る(例えば、Chothia C & LeskAM, (1987), J Mol Biol 196: 901-917、Al-Lazikani B et al., (1997) J Mol Biol 273: 927-948、Chothia C et al., (1992) J Mol Biol 227: 799-817、Tramontano A et al., (1990) J Mol Biol 215(1): 175-82、及び米国特許第7,709,226号を参照されたい)。通例、Kabatナンバリング規定を使用する場合、ChothiaのCDR−H1ループは重鎖のアミノ酸26〜32、33又は34に存在し、ChothiaのCDR−H2ループは重鎖のアミノ酸52〜56に存在し、ChothiaのCDR−H3ループは重鎖のアミノ酸95〜102に存在するのに対し、ChothiaのCDR−L1ループは軽鎖のアミノ酸24〜34に存在し、ChothiaのCDR−L2ループは軽鎖のアミノ酸50〜56に存在し、ChothiaのCDR−L3ループは軽鎖のアミノ酸89〜97に存在する。ChothiaのCDR−HIループの末端は、Kabatナンバリング規定を使用して番号を付与した場合には、ループの長さに応じてH32〜H34の間で変動する(これは、KabatナンバリングスキームがH35A及びH35Bに挿入を置くため、すなわち35Aも35Bも存在しない場合には32でループが終了し、35Aのみが存在する場合には33でループが終了し、35Aと35Bとの両方が存在する場合には34でループが終了するからである)。
特定の実施形態では、本明細書に記載される抗体のCDRはChothiaナンバリングスキームに従って特定された。
CDRの幾つかの定義、すなわちKabatナンバリング、Chothiaナンバリング、AbMナンバリング又は接触(contact)ナンバリングが一般に使用されている。AbM定義は、Oxford Molecular社のAbM抗体モデリングソフトウェアによって使用される2つの折衷案である。接触定義は、利用可能な複雑な結晶構造の分析に基づく。
Figure 2020537635
本明細書で使用される「重鎖」の用語は、抗体に関して使用される場合、定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて、IgGのサブクラス、例えばIgG、IgG、IgG及びIgGを含む、IgA、IgD、IgE、IgG及びIgMのクラスの抗体をそれぞれ生じさせる、任意の異なる種類、例えばアルファ(α)、デルタ(δ)、イプシロン(ε)、ガンマ(γ)及びミュー(μ)を指す場合がある。
本明細書で使用される「軽鎖」の用語は、抗体に関して使用される場合、定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて、任意の異なる種類、例えばカッパー(κ)又はラムダ(λ)を指す場合がある。軽鎖アミノ酸配列は当該技術分野で既知である。特定の実施形態では、軽鎖はヒト軽鎖である。
「可変領域」又は「可変ドメイン」の用語は通例、重鎖中のアミノ末端のおよそ120個〜130個のアミノ酸及び軽鎖中の約100個〜110個のアミノ末端アミノ酸を含む、抗体の軽鎖及び/又は重鎖の一部を指す。抗体の可変領域が通例、特定の抗体のその標的に対する特異性を決定する。
可変性は、抗体又は抗原結合分子の可変ドメイン全体に均等に分布せず、重鎖及び軽鎖可変領域の各々のサブドメイン(sub-domains)に濃縮される。これらのサブドメインは、本明細書で更に説明されるように「超可変領域」又は「相補性決定領域」(CDR)と呼ばれる。可変ドメインのより保存された(すなわち、非超可変)部分は、「フレームワーク」領域(FRM又はFR)と呼ばれ、三次元空間に6つのCDRの足場をもたらし、抗原結合表面を形成する。自然発生重鎖及び軽鎖の可変ドメインは各々、β−シート構造を接続し、場合によってはその一部を形成するループを形成する3つの超可変領域によって接続された、主にβ−シート構成を採用する4つのFRM領域(FR1、FR2、FR3及びFR4)を含む。各鎖の超可変領域は、FRMにより他の鎖の超可変領域と極めて接近して結び付けられ、抗原結合部位の形成に寄与する(本明細書で更に説明されるKabat et al.を参照されたい)。
通例、CDRは、カノニカル構造に分類することができるループ構造を形成する。「カノニカル構造」の用語は、抗原結合(CDR)ループに採用される主鎖立体配座を指す。比較構造研究から、6つの抗原結合ループのうち5つが限られたレパートリーの利用可能な立体配座しか有しないことが見出されている。各カノニカル構造は、ポリペプチド骨格のねじれ角によって特徴付けることができる。したがって、対応する抗体間のループは、ループの大部分の高いアミノ酸配列可変性にも関わらず、非常によく似た三次元構造を有し得る(Chothia and Lesk, J. MoI. Biol., 1987, 196: 901、Chothia et al., Nature, 1989, 342: 877、Martin and Thornton, J. MoI. Biol, 1996, 263: 800)。さらに、採用されるループ構造とその周辺のアミノ酸配列との間に関連性が認められる。特定のカノニカルクラスの立体配座は、ループの長さ、並びにループ内及び保存されたフレームワーク内(すなわち、ループの外側)の主要位置に存在するアミノ酸残基によって決まる。したがって、特定のカノニカルクラスへの割当ては、これらの主要アミノ酸残基の存在に基づいて行うことができる。
「カノニカル構造」の用語は、例えばKabat(本明細書のKabat et al.)によってカタログ化されるように、抗体の線状配列に関する考察(considerations)も含み得る。Kabatナンバリングスキーム(システム)は、抗体可変ドメインのアミノ酸残基を一貫した方式でナンバリングするために広く採用されている標準であり、本明細書の他の部分にも言及されるように、本発明に適用される好ましいスキームである。付加的な構造的考察を抗体のカノニカル構造の決定に用いることもできる。例えば、Kabatナンバリングには完全に反映されない差異は、Chothia et al.のナンバリングシステムによって説明され、及び/又は他の技法、例えば結晶構造解析及び二次元又は三次元計算論モデリングによって明らかにすることができる。したがって、所与の抗体配列を、特に適切なシャーシ(chassis)配列の同定を可能にするカノニカルクラスに分類することができる(例えば、様々なカノニカル構造をライブラリーに含めたいという要望に基づく)。抗体アミノ酸配列のKabatナンバリング及びChothia et al.(本明細書)によって記載される構造的考察及び抗体構造のカノニカル態様の解釈に対するそれらの影響は、文献中に記載されている。種々のクラスの免疫グロブリンのサブユニット構造及び三次元配置は当該技術分野で既知である。抗体構造の概要については、Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, eds. Harlow et al., 1988を参照されたい。
軽鎖のCDR3及び特に重鎖のCDR3は、軽鎖及び重鎖可変領域における抗原結合の最も重要な決定因子となる可能性がある。一部の抗体構築物では、重鎖CDR3が抗原と抗体との間の主要接触部位を構成するようである。CDR3単独を変化させるin vitro選択スキームを、抗体の結合特性を変化させるか、又はどの残基が抗原の結合に寄与するかを決定するために用いることができる。したがって、CDR3は通例、抗体結合部位における分子多様性の最大の供給源である。例えば、H3は2つのアミノ酸残基と短いか、又は26アミノ酸より大きいものであり得る。
本明細書で使用される場合、「定常領域」及び「定常ドメイン」の用語は同義であり、当該技術分野で一般的な意味を有する。定常領域は、抗原への抗体の結合に直接関与しないが、Fc受容体との相互作用等の様々なエフェクター機能を示すことができる軽鎖及び/又は重鎖の抗体部分、例えばカルボキシル末端部分である。免疫グロブリン分子の定常領域は概して、免疫グロブリン可変ドメインと比べてより保存されたアミノ酸配列を有する。
「Fc」領域は、抗体のCH1ドメイン及びCH2ドメインを含む2つの重鎖フラグメントを含む。2つの重鎖フラグメントは、2つ以上のジスルフィド結合及びCH3ドメインの疎水性相互作用によって結合されている。
「Fabフラグメント」は、1つの軽鎖と、1つの重鎖のCH1及び可変領域とを含む。Fab分子の重鎖は、別の重鎖分子とジスルフィド結合を形成することはできない。「Fab’」フラグメント」は、1つの軽鎖と、VHドメイン及びCH1ドメイン、またCH1ドメインとCH2ドメインとの間の領域を含む1つの重鎖の一部とを含むため、2つのFab’フラグメントの2つの重鎖の間に鎖間ジスルフィド結合が形成され、F(ab’)分子が形成され得る。「F(ab’)フラグメント」には、2つの軽鎖と、CH1ドメインとCH2ドメインとの間の定常領域の一部を含む2つの重鎖とが含まれるため、2つの重鎖の間に鎖間ジスルフィド結合が形成される。したがって、F(ab’)フラグメントは、2つの重鎖間のジスルフィド結合によって結合された2つのFab’フラグメントで構成されている。
「Fv領域」には、重鎖と軽鎖の両方の可変領域が含まれるが、定常領域はない。
「二価抗原結合分子」は、2つの抗原結合部位を含む。場合によっては、2つの結合部位は同じ抗原特異性を持つ。二価抗原結合分子は二重特異性であってもよい。「多重特異性抗原結合分子」は、2以上の抗原又はエピトープを標的とするものである。「二重特異性(bispecific)」、「二重特異性(dual-specific)」又は「二官能性(bifunctional)」の抗原結合分子は、それぞれ2つの異なる抗原結合部位を有するハイブリッド抗原結合分子又は抗体である。二重特異性抗原結合分子の2つの結合部位は、同一又は異なるタンパク質標的に存在し得る2つの異なるエピトープに結合する。
「結合親和性」は概して、分子(例えば、抗体)の単一結合部位とその結合パートナー(例えば、抗原)との間の非共有結合相互作用の全体の強度を指す。他に指定がない限り、本明細書で使用される「結合親和性」は、結合対のメンバー(例えば、抗体及び抗原)の間の1:1の相互作用を反映する固有の結合親和性を指す。パートナーYに対する分子Xの親和性は概して、解離定数(K)によって表すことができる。親和性は、平衡解離定数(K)及び平衡会合定数(K)を含むが、これらに限定されない当該技術分野で既知の多数の方法で測定し及び/又は表すことができる。Kはkoff/konの商から算出され、Kはkon/koffの商から算出される。konは例えば抗原に対する抗体の会合速度定数を指し、koffは例えば抗原に対する抗体の解離を指す。kon及びkoffは、BIAcore(登録商標)又はKinExA等の当業者に既知の技法によって決定することができる。
「中和する」の用語は、リガンドに結合し、リガンドの生物学的効果を阻止又は低減する抗原結合分子、scFv又は抗体のそれぞれを指す。これは、例えばリガンド上の結合部位を直接ブロッキングするか、又はリガンドに結合し、間接的な手段(リガンドにおける構造変化又はエネルギー変化等)によりリガンドの結合能力を変化させることによって行うことができる。幾つかの実施形態では、この用語は、抗原結合分子が結合するタンパク質が生物学的機能を行うのを妨げることを意味する場合もある。
「競合する」の用語は、同じエピトープについて競合する抗原結合分子との関連で使用される場合、試験される抗原結合分子(例えば、抗体又はその免疫機能フラグメント)が、抗原への参照抗原結合分子の特異的結合を阻止又は阻害する(例えば、低減する)アッセイによって決定される抗原結合分子間の競合を意味する。多数のタイプの競合的結合アッセイ、例えば固相直接又は間接放射免疫測定法(RIA)、固相直接又は間接酵素免疫測定法(EIA)、サンドイッチ競合アッセイ(Stahli et al., 1983, Methods in Enzymology 9:242-253);固相直接ビオチン−アビジンEIA(Kirkland et al., 1986, J. Immunol. 137:3614-3619)、固相直接標識アッセイ、固相直接標識サンドイッチアッセイ(Harlow and Lane, 1988, Antibodies, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Press);I−125標識を用いる固相直接標識RIA(Morel et al., 1988, Molec. Immunol. 25:7-15);固相直接ビオチン−アビジンEIA(Cheung, et al., 1990, Virology 176:546-552);及び直接標識RIA(Moldenhauer et al., 1990, Scand. J. Immunol. 32:77-82)を用いて、或る抗原結合分子が別の抗原結合分子と競合するかを決定することができる。
本明細書で使用される場合、「エピトープ」の用語は、抗体が特異的に結合することができる抗原の局在化領域を指す。エピトープは、例えばポリペプチドの隣接するアミノ酸(直鎖の又は隣接するエピトープ)であってもよく、又はエピトープは、例えば、ポリペプチド(複数の場合がある)の2以上の隣接しない領域に共に由来するもの(配座、非直鎖、不連続、又は隣接しないエピトープ)であってもよい。或る特定の実施形態では、抗体が結合するエピトープは、例えば、NMR分光法、X線回折結晶学研究、ELISAアッセイ、質量分析と結合された水素/重水素交換(例えば液体クロマトグラフィーエレクトロスプレー質量分析)、アレイに基づくオリゴペプチド走査アッセイ、及び/又は突然変異誘発マッピング(例えば部位特異的変異誘発マッピング)によって特定され得る。X線結晶学研究のため、結晶化は、当該技術分野の既知の方法(例えば、Giege R. et al., (1994) Acta Crystallogr D Biol Crystallogr50(Pt 4): 339-350、McPherson A (1990) Eur J Biochem 189: 1-23、ChayenNE (1997) Structure 5: 1269-1274、McPherson A (1976) J Biol Chem 251: 6300-6303)のいずれかを使用して遂行され得る。抗体:抗原の結晶は、良く知られているX線回折技術を使用して研究され得て、X−PLOR(Yale University, 1992、Molecular Simulations, Inc.によって配布;例えば、Meth Enzymol (1985) volumes 114 & 115, eds Wyckoff HW et al.,を参照されたい;米国特許出願公開第2004/0014194号)、及びBUSTER(Bricogne G (1993) Acta CrystallogrD Biol Crystallogr 49(Pt 1): 37-60、Bricogne G (1997) Meth Enzymol276A: 361-423, ed Carter CW、RoversiP et al., (2000) Acta Crystallogr D Biol Crystallogr 56(Pt 10): 1316-1323)等のコンピューターソフトウェアを使用してリファインされ得る。突然変異誘発マッピング研究は、当業者に知られている任意の方法を使用して遂行され得る。例えば、アラニンスキャニング突然変異誘発技術を含む、突然変異誘発技術の説明について、Champe M et al., (1995) J Biol Chem 270: 1388-1394、及びCunningham BC & Wells JA (1989) Science 244: 1081-1085を参照されたい。
「遺伝的に改変された」又は「改変された」の用語は、コーディング領域若しくは非コーディング領域、若しくはそれらの一部分の欠失、又はコーディング領域若しくはその一部分の挿入を含むが、これらに限定されない、細胞のゲノムを修飾する方法を指す。幾つかの実施形態では、修飾される細胞はリンパ球、例えば、患者又はドナーのいずれかから得ることができるT細胞である。細胞は、例えば細胞のゲノムに組み込まれる、キメラ抗原受容体(CAR)又はT細胞受容体(TCR)等の外来構築物を発現するように修飾され得る。
「免疫応答」は、侵入病原体、病原体に感染した細胞若しくは組織、癌性若しくは他の異常な細胞、又は自己免疫若しくは病理学的炎症の場合、正常なヒトの細胞若しくは組織の選択的な標的化、それらへの結合、それらに対する損傷、それらの破壊、及び/又は脊椎動物の身体からのそれらの排除をもたらす、免疫系の細胞(例えばTリンパ球、Bリンパ球、ナチュラルキラー(NK)細胞、マクロファージ、好酸球、肥満細胞、樹状細胞、及び好中球)及びこれらの細胞のいずれか又は肝臓によって産生される可溶性高分子(Ab、サイトカイン及び補体を含む)の作用を指す。
「免疫療法」の用語は、免疫応答を誘導する、増強する、抑制する、又は他の形で調整することを含む方法による、疾患に冒された、又は疾患にかかる若しくは疾患の再発を患うリスクがある被験体の治療を指す。免疫療法の例としては、T細胞療法が挙げられるが、これに限定されない。T細胞療法は、養子T細胞療法(adoptive T cell therapy)、腫瘍浸潤リンパ球(TIL)免疫療法、自己細胞治療、操作された自己細胞療法(eACT)及び同種異系T細胞移植を含み得る。しかしながら、当業者は、本明細書に開示されるコンディショニング法(conditioning methods)が任意の移植T細胞療法の有効性を増強し得ることを認識するであろう。T細胞療法の例は、米国特許出願公開第2014/0154228号及び同第2002/0006409号、米国特許第5,728,388号、並びに国際公開第2008/081035号に記載されている。
免疫療法のT細胞は、当該技術分野で既知の任意の供給源に由来し得る。例えば、T細胞は、造血幹細胞集団からin vitroで分化されてもよく、又はT細胞は被験体から得られてもよい。T細胞を、例えば末梢血単核細胞(PBMC)、骨髄、リンパ節組織、臍帯血、胸腺組織、感染部位に由来する組織、腹水、胸水、脾臓組織及び腫瘍から得ることができる。加えて、T細胞は、当該技術分野において利用可能な1つ以上のT細胞株に由来してもよい。また、T細胞は、FICOLL(登録商標)分離及び/又はアフェレーシス等の当業者に既知の様々な技術を使用して被験体から収集された血液単位から得ることもできる。T細胞療法用のT細胞を単離する付加的な方法は、米国特許出願公開第2013/0287748号に開示され、その全体が引用することにより本明細書の一部をなす。
養子細胞移植としても知られる、「eACT(登録商標)」と略すことができる「操作された自己細胞療法」の用語は、患者自身のT細胞を収集し、続いて1つ以上の特定の腫瘍細胞又は悪性腫瘍の細胞表面上に発現される1つ以上の抗原を認識し、標的化するように遺伝子操作するプロセスである。T細胞は、例えばキメラ抗原受容体(CAR)又はT細胞受容体(TCR)を発現するように改変することができる。CAR陽性(+)T細胞は、少なくとも1つの共刺激ドメイン及び少なくとも1つの活性化ドメインを含む細胞内シグナル伝達部分に連結された、特定の腫瘍抗原に対する特異性を有する細胞外一本鎖可変フラグメント(scFv)を発現するように改変される。共刺激ドメインは例えばCD28に由来する(又はそれに対応する)ことができ、活性化ドメインは例えばCD3−ゼータに由来する(又はそれに対応する)ことができる。或る特定の実施形態では、CARは2つ、3つ、4つ又はそれ以上の共刺激ドメインを有するように設計される。
「自己」の用語は、後に再導入される同じ個体に由来する任意の物質を指す。例えば、本明細書に記載される操作された自己細胞療法(eACT(登録商標))の方法は、リンパ球を患者から収集し、これを続いて例えばCAR構築物を発現するように改変した後、同じ患者に投与し戻すことを含む。
「同種異系」の用語は、或る個体に由来する、後に同じ種の別の個体に導入される任意の物質を指す(例えば、同種異系T細胞移植)。
標準的な技法を組み換えDNA、オリゴヌクレオチド合成、並びに組織培養及び形質転換に使用することができる(例えばエレクトロポレーション、リポフェクション)。酵素反応及び精製法は製造業者の仕様書に従って、又は当該技術分野で一般に達成されるように、又は本明細書に記載されるように行うことができる。上述の技法及び手順は概して当該技術分野で既知の従来の方法に従って、本明細書全体にわたって引用及び論考される様々な一般参照文献及びより具体的な参照文献に記載されるように行うことができる。例えば、Sambrook et al. Molecular Cloning: A Laboratory Manual (2d ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (1989))(あらゆる目的で引用することにより本明細書の一部をなす)を参照されたい。
「含む(comprise)」、「含む(include)」及び/又は各々の複数形には制限がなく、列挙された部分を含み、列挙されていない追加の部分を含み得る。「及び/又は」には制限がなく、列挙された部分の1つ以上、及び列挙された部分の組み合わせを含む。
本明細書の記載が例示的かつ説明的なものにすぎず、特許請求される本発明を限定するものではないことが理解される。本願においては、他に具体的な指定がない限り、単数形の使用は複数形を含む。
特許、特許出願、記事、書籍及び論文を含むが、これらに限定されない本願に引用される全ての文献又は文献の一部分は、いかなる目的についても全体が引用することにより明白に本明細書の一部をなす。本開示に従って用いられる場合、以下の用語は他に指定がない限り、以下の意味を有すると理解されるものとする。
本願においては、「又は」の使用は他に指定がない限り、「及び/又は」を意味する。さらに、「含む(including)」の用語、並びに「含む(includes)」及び「含まれる(included)」等の他の形態の使用は限定的なものではない。また、「要素」又は「成分」等の用語は、他に具体的な指定がない限り、1つの単位を含む要素及び成分、並びに2つ以上のサブユニットを含む要素及び成分の両方を包含する。
本明細書における参照文献の引用は、かかる参照文献が本発明に対する先行技術の認識として解釈されるべきではない。引用することにより本明細書の一部をなす参照文献に提供される定義又は用語のいずれかが本明細書に提供される用語及び考察とは異なる場合は、本発明の用語及び定義を優先する。
当業者は、本発明の趣旨又は本質的な特徴から逸脱することなく、主題が他の特定の形態で具体化され得ることを認識するであろう。したがって、前述の実施形態は、本明細書に記載される主題を限定するのではなく、あらゆる点で例示と見なされるものである。
以下の配列により本発明を更に例証する。
CD28T DNA 細胞外、膜貫通、細胞内
CTTGATAATGAAAAGTCAAACGGAACAATCATTCACGTGAAGGGCAAGCACCTCTGTCCGTCACCCTTGTTCCCTGGTCCATCCAAGCCATTCTGGGTGTTGGTCGTAGTGGGTGGAGTCCTCGCTTGTTACTCTCTGCTCGTCACCGTGGCTTTTATAATCTTCTGGGTTAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGC(配列番号1)
CD28T 細胞外、膜貫通、細胞内AA
LDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRS(配列番号2)
CD28T DNA−細胞外
CTTGATAATGAAAAGTCAAACGGAACAATCATTCACGTGAAGGGCAAGCACCTCTGTCCGTCACCCTTGTTCCCTGGTCCATCCAAGCCA(配列番号3)
CD28T AA−細胞外
LDNEKSNGTI IHVKGKHLCP SPLFPGPSKP(配列番号4)
CD28 DNA 膜貫通ドメイン
TTCTGGGTGTTGGTCGTAGTGGGTGGAGTCCTCGCTTGTTACTCTCTGCTCGTCACCGTGGCTTTTATAATCTTCTGGGTT(配列番号5)
CD28 AA 膜貫通ドメイン
FWVLVVVGGV LACYSLLVTV AFIIFWV(配列番号6)
CD28 DNA 細胞内ドメイン
AGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGC(配列番号7)
CD28 AA 細胞内ドメイン
RSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRS(配列番号8)
CD3ゼータ DNA
AGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG(配列番号9)
CD3ゼータ AA
RVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR(配列番号10)
CD28 DNA
ATTGAGGTGATGTATCCACCGCCTTACCTGGATAACGAAAAGAGTAACGGTACCATCATTCACGTGAAAGGTAAACACCTGTGTCCTTCTCCCCTCTTCCCCGGGCCATCAAAGCCC(配列番号11)
CD28 AA
IEVMYPPPYLDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKP(配列番号12)
CD8 DNA 細胞外及び膜貫通ドメイン
GCTGCAGCATTGAGCAACTCAATAATGTATTTTAGTCACTTTGTACCAGTGTTCTTGCCGGCTAAGCCTACTACCACACCCGCTCCACGGCCACCTACCCCAGCTCCTACCATCGCTTCACAGCCTCTGTCCCTGCGCCCAGAGGCTTGCCGACCGGCCGCAGGGGGCGCTGTTCATACCAGAGGACTGGATTTCGCCTGCGATATCTATATCTGGGCACCCCTGGCCGGAACCTGCGGCGTACTCCTGCTGTCCCTGGTCATCACGCTCTATTGTAATCACAGGAAC(配列番号13)
CD8 AA 細胞外及び膜貫通ドメイン
AAALSNSIMYFSHFVPVFLPAKPTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCNHRN(配列番号14)
クローン24C1 HC DNA
CAGGTGCAGCTGCAGGAATCCGGACCGGGGCTGGTGAAGCCCAGCGAGACTCTGAGTCTCACGTGTACAGTTTCTGGAGGTAGCATTAGCTCCTACTATTGGTCATGGATAAGGCAGCCCCCCGGGAAGGGATTGGAATGGATCGGCTATATTTACTACAGTGGGAGCACCAATTACAACCCCTCACTGAAGTCTAGAGTTACAATCAGCGTTGACACCTCAAAGAATCAGTTCAGTTTGAAATTGTCTAGCGTCACAGCAGCTGATACAGCCGTCTATTATTGTGTTTCTCTGGTCTATTGCGGTGGGGATTGTTACAGTGGCTTTGACTATTGGGGGCAGGGTACTCTGGTTACAGTTTCTTCC(配列番号15)
クローン24C1 HC AA(CDRに下線)
YYSGSTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCVSLVYCGGDCYSGFDYWGQGTLVTVSS(配列番号16)
クローン24C1 HC AA CDR1:GGSISSY(配列番号17)
クローン24C1 HC AA CDR2:YYSGS(配列番号18)
クローン24C1 HC AA CDR3:LVYCGGDCYS GFDY(配列番号19)
クローン24C1 LC DNA
GACATCCAGTTGACACAGAGCCCGAGTTCCTTGTCCGCCTCCGTCGGGGATAGAGTGTCATTTACCTGTCAGGCCTCTCAGGATATTAATAACTTTCTGAATTGGTATCAGCAAAAGCCCGGAAAGGCACCCAAGCTGTTGATTTACGACGCCAGTAACCTGGAGACAGGCGTGCCCTCCCGGTTTAGTGGTAGCGGAAGCGGTACGGATTTTACCTTTACTATCAGCTCTCTCCAACCCGAAGACATTGCAACCTACTATTGTCAACAATATGGAAACCTGCCTTTTACATTTGGCGGCGGCACCAAGGTGGAGATTAAGCGG(配列番号20)
クローン24C1 LC AA(CDRに下線)
DIQLTQSPSSLSASVGDRVSFTCQASQDINNFLNWYQQKPGKAPKLLIYDASNLETGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQYGNLPFTFGGGTKVEIKR(配列番号21)
クローン24C1 LC CDR1 AA:QASQDINNFLN(配列番号22)
クローン24C1 LC CDR2 AA:DASNLET(配列番号23)
クローン24C1 LC CDR3 AA:QQYGNLPFT(配列番号24)
クローン24C1 CD28T CD3ゼータ CAR DNA 重鎖及び軽鎖
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCGCAGGTCCAACTGCAAGAAAGCGGACCCGGACTGGTGAAGCCTTCTGAGACACTTAGTCTGACGTGCACGGTCAGTGGCGGCTCCATCTCCTCCTATTATTGGTCATGGATACGACAACCCCCAGGTAAGGGCCTGGAATGGATTGGCTATATCTACTATTCAGGAAGCACGAACTACAATCCCAGCCTGAAGTCCCGAGTGACAATTTCAGTAGATACCAGTAAAAACCAGTTCAGTCTTAAACTGTCAAGCGTGACAGCTGCCGACACCGCTGTGTATTACTGCGTCTCACTGGTGTATTGTGGAGGGGATTGTTATAGCGGGTTCGATTATTGGGGACAGGGAACCCTGGTGACTGTATCTTCCGGCGGCGGCGGCTCAGGGGGTGGCGGTAGTGGCGGTGGGGGTTCCGATATTCAACTGACACAATCCCCCAGCTCACTCAGCGCCAGCGTGGGGGACAGGGTTAGCTTTACCTGTCAAGCCTCTCAGGATATAAATAACTTTCTGAACTGGTATCAACAGAAGCCTGGGAAGGCGCCCAAACTCCTGATCTATGATGCGTCCAACCTGGAAACTGGCGTGCCTTCACGCTTTAGCGGCTCTGGCAGTGGTACAGACTTCACTTTTACCATCTCTTCACTTCAGCCGGAGGACATCGCCACATATTACTGTCAACAGTACGGAAACTTGCCCTTTACTTTTGGAGGCGGCACCAAAGTTGAAATCAAAAGGGCCGCTGCCCTGGATAACGAAAAGAGCAATGGGACTATAATACATGTTAAAGGAAAACACCTGTGTCCATCTCCCCTGTTCCCTGGACCGTCAAAGCCATTTTGGGTGCTCGTGGTTGTCGGTGGCGTTCTCGCCTGTTATAGCTTGCTGGTGACAGTAGCCTTCATTATCTTTTGGGTGAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGGTAA(配列番号25)
クローン24C1 CD28T CD3ゼータ CAR AA 重鎖及び軽鎖(シグナルペプチドは太字)
Figure 2020537635
クローン24C1 CD28T CD3ゼータ CAR DNA 重鎖及び軽鎖
CAGGTCCAACTGCAAGAAAGCGGACCCGGACTGGTGAAGCCTTCTGAGACACTTAGTCTGACGTGCACGGTCAGTGGCGGCTCCATCTCCTCCTATTATTGGTCATGGATACGACAACCCCCAGGTAAGGGCCTGGAATGGATTGGCTATATCTACTATTCAGGAAGCACGAACTACAATCCCAGCCTGAAGTCCCGAGTGACAATTTCAGTAGATACCAGTAAAAACCAGTTCAGTCTTAAACTGTCAAGCGTGACAGCTGCCGACACCGCTGTGTATTACTGCGTCTCACTGGTGTATTGTGGAGGGGATTGTTATAGCGGGTTCGATTATTGGGGACAGGGAACCCTGGTGACTGTATCTTCCGGCGGCGGCGGCTCAGGGGGTGGCGGTAGTGGCGGTGGGGGTTCCGATATTCAACTGACACAATCCCCCAGCTCACTCAGCGCCAGCGTGGGGGACAGGGTTAGCTTTACCTGTCAAGCCTCTCAGGATATAAATAACTTTCTGAACTGGTATCAACAGAAGCCTGGGAAGGCGCCCAAACTCCTGATCTATGATGCGTCCAACCTGGAAACTGGCGTGCCTTCACGCTTTAGCGGCTCTGGCAGTGGTACAGACTTCACTTTTACCATCTCTTCACTTCAGCCGGAGGACATCGCCACATATTACTGTCAACAGTACGGAAACTTGCCCTTTACTTTTGGAGGCGGCACCAAAGTTGAAATCAAAAGGGCCGCTGCCCTGGATAACGAAAAGAGCAATGGGACTATAATACATGTTAAAGGAAAACACCTGTGTCCATCTCCCCTGTTCCCTGGACCGTCAAAGCCATTTTGGGTGCTCGTGGTTGTCGGTGGCGTTCTCGCCTGTTATAGCTTGCTGGTGACAGTAGCCTTCATTATCTTTTGGGTGAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG(配列番号27)
クローン24C1 CD28T CD3ゼータ CAR AA 重鎖及び軽鎖
QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSISSYYWSWIRQPPGKGLEWIGYIYYSGSTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCVSLVYCGGDCYSGFDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIQLTQSPSSLSASVGDRVSFTCQASQDINNFLNWYQQKPGKAPKLLIYDASNLETGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQYGNLPFTFGGGTKVEIKRAAALDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR(配列番号28)
クローン24C1 CD28 CD3ゼータ CAR DNA 重鎖及び軽鎖
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCGCAGGTGCAGCTGCAGGAATCCGGACCGGGGCTGGTGAAGCCCAGCGAGACTCTGAGTCTCACGTGTACAGTTTCTGGAGGTAGCATTAGCTCCTACTATTGGTCATGGATAAGGCAGCCCCCCGGGAAGGGATTGGAATGGATCGGCTATATTTACTACAGTGGGAGCACCAATTACAACCCCTCACTGAAGTCTAGAGTTACAATCAGCGTTGACACCTCAAAGAATCAGTTCAGTTTGAAATTGTCTAGCGTCACAGCAGCTGATACAGCCGTCTATTATTGTGTTTCTCTGGTCTATTGCGGTGGGGATTGTTACAGTGGCTTTGACTATTGGGGGCAGGGTACTCTGGTTACAGTTTCTTCCGGGGGGGGAGGCTCTGGGGGCGGAGGCTCAGGTGGTGGAGGCAGCGACATCCAGTTGACACAGAGCCCGAGTTCCTTGTCCGCCTCCGTCGGGGATAGAGTGTCATTTACCTGTCAGGCCTCTCAGGATATTAATAACTTTCTGAATTGGTATCAGCAAAAGCCCGGAAAGGCACCCAAGCTGTTGATTTACGACGCCAGTAACCTGGAGACAGGCGTGCCCTCCCGGTTTAGTGGTAGCGGAAGCGGTACGGATTTTACCTTTACTATCAGCTCTCTCCAACCCGAAGACATTGCAACCTACTATTGTCAACAATATGGAAACCTGCCTTTTACATTTGGCGGCGGCACCAAGGTGGAGATTAAGCGGGCGGCAGCTATTGAGGTGATGTATCCACCGCCTTACCTGGATAACGAAAAGAGTAACGGTACCATCATTCACGTGAAAGGTAAACACCTGTGTCCTTCTCCCCTCTTCCCCGGGCCATCAAAGCCCTTCTGGGTTCTTGTGGTCGTGGGAGGCGTGCTTGCTTGTTATTCTCTGCTCGTTACCGTGGCGTTTATCATTTTTTGGGTTAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGGTAA(配列番号29)
クローン24C1 CD28 CD3ゼータ CAR AA 重鎖及び軽鎖
(シグナルペプチドは太字)
Figure 2020537635
クローン24C1 CD28 CD3ゼータ CAR DNA 重鎖及び軽鎖
CAGGTGCAGCTGCAGGAATCCGGACCGGGGCTGGTGAAGCCCAGCGAGACTCTGAGTCTCACGTGTACAGTTTCTGGAGGTAGCATTAGCTCCTACTATTGGTCATGGATAAGGCAGCCCCCCGGGAAGGGATTGGAATGGATCGGCTATATTTACTACAGTGGGAGCACCAATTACAACCCCTCACTGAAGTCTAGAGTTACAATCAGCGTTGACACCTCAAAGAATCAGTTCAGTTTGAAATTGTCTAGCGTCACAGCAGCTGATACAGCCGTCTATTATTGTGTTTCTCTGGTCTATTGCGGTGGGGATTGTTACAGTGGCTTTGACTATTGGGGGCAGGGTACTCTGGTTACAGTTTCTTCCGGGGGGGGAGGCTCTGGGGGCGGAGGCTCAGGTGGTGGAGGCAGCGACATCCAGTTGACACAGAGCCCGAGTTCCTTGTCCGCCTCCGTCGGGGATAGAGTGTCATTTACCTGTCAGGCCTCTCAGGATATTAATAACTTTCTGAATTGGTATCAGCAAAAGCCCGGAAAGGCACCCAAGCTGTTGATTTACGACGCCAGTAACCTGGAGACAGGCGTGCCCTCCCGGTTTAGTGGTAGCGGAAGCGGTACGGATTTTACCTTTACTATCAGCTCTCTCCAACCCGAAGACATTGCAACCTACTATTGTCAACAATATGGAAACCTGCCTTTTACATTTGGCGGCGGCACCAAGGTGGAGATTAAGCGGGCGGCAGCTATTGAGGTGATGTATCCACCGCCTTACCTGGATAACGAAAAGAGTAACGGTACCATCATTCACGTGAAAGGTAAACACCTGTGTCCTTCTCCCCTCTTCCCCGGGCCATCAAAGCCCTTCTGGGTTCTTGTGGTCGTGGGAGGCGTGCTTGCTTGTTATTCTCTGCTCGTTACCGTGGCGTTTATCATTTTTTGGGTTAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG(配列番号31)
クローン24C1 CD28 CD3ゼータ CAR AA 重鎖及び軽鎖
QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSISSYYWSWIRQPPGKGLEWIGYIYYSGSTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCVSLVYCGGDCYSGFDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIQLTQSPSSLSASVGDRVSFTCQASQDINNFLNWYQQKPGKAPKLLIYDASNLETGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQYGNLPFTFGGGTKVEIKRAAAIEVMYPPPYLDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLST ATKDTYDALHMQALPPR(配列番号32)
クローン24C1 CD8 CD3ゼータ CAR DNA 重鎖及び軽鎖
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCGCAGGTGCAATTGCAAGAGTCCGGCCCCGGACTCGTTAAACCCAGTGAGACGCTTAGCCTGACCTGTACCGTCTCAGGGGGCAGCATCTCCTCTTATTACTGGAGCTGGATCAGGCAGCCTCCAGGAAAAGGCCTTGAATGGATTGGGTACATCTACTACTCTGGCTCAACAAATTATAATCCATCCCTGAAGTCCCGCGTGACTATCTCTGTGGACACCAGCAAGAATCAGTTTTCACTGAAGTTGTCTAGTGTTACCGCGGCCGACACCGCCGTATACTACTGTGTGTCTCTTGTGTACTGTGGCGGCGACTGCTATTCCGGGTTCGACTACTGGGGCCAAGGGACTCTGGTAACCGTGTCCTCAGGCGGCGGCGGGTCAGGAGGAGGCGGCAGTGGAGGTGGCGGCTCCGACATCCAGCTGACACAATCACCATCTTCCCTTTCAGCTTCAGTCGGGGACAGAGTGTCCTTCACATGCCAGGCCAGCCAGGATATCAATAACTTCCTGAACTGGTACCAACAGAAACCCGGAAAGGCTCCAAAGCTCCTGATCTATGATGCTTCCAACCTGGAGACCGGCGTGCCCTCCAGGTTCAGTGGTTCAGGATCAGGCACTGACTTTACGTTCACCATATCCAGTCTTCAGCCCGAAGACATTGCAACCTATTACTGCCAACAATACGGGAACCTTCCCTTTACATTCGGAGGCGGCACCAAGGTGGAAATCAAAAGGGCTGCAGCATTGAGCAACTCAATAATGTATTTTAGTCACTTTGTACCAGTGTTCTTGCCGGCTAAGCCTACTACCACACCCGCTCCACGGCCACCTACCCCAGCTCCTACCATCGCTTCACAGCCTCTGTCCCTGCGCCCAGAGGCTTGCCGACCGGCCGCAGGGGGCGCTGTTCATACCAGAGGACTGGATTTCGCCTGCGATATCTATATCTGGGCACCCCTGGCCGGAACCTGCGGCGTACTCCTGCTGTCCCTGGTCATCACGCTCTATTGTAATCACAGGAACAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGGTAA(配列番号33)
クローン24C1 CD8 CD3ゼータ CAR AA 重鎖及び軽鎖
(シグナルペプチドは太字)
Figure 2020537635
クローン24C1 CD8 CD3ゼータ CAR DNA 重鎖及び軽鎖
CAGGTGCAATTGCAAGAGTCCGGCCCCGGACTCGTTAAACCCAGTGAGACGCTTAGCCTGACCTGTACCGTCTCAGGGGGCAGCATCTCCTCTTATTACTGGAGCTGGATCAGGCAGCCTCCAGGAAAAGGCCTTGAATGGATTGGGTACATCTACTACTCTGGCTCAACAAATTATAATCCATCCCTGAAGTCCCGCGTGACTATCTCTGTGGACACCAGCAAGAATCAGTTTTCACTGAAGTTGTCTAGTGTTACCGCGGCCGACACCGCCGTATACTACTGTGTGTCTCTTGTGTACTGTGGCGGCGACTGCTATTCCGGGTTCGACTACTGGGGCCAAGGGACTCTGGTAACCGTGTCCTCAGGCGGCGGCGGGTCAGGAGGAGGCGGCAGTGGAGGTGGCGGCTCCGACATCCAGCTGACACAATCACCATCTTCCCTTTCAGCTTCAGTCGGGGACAGAGTGTCCTTCACATGCCAGGCCAGCCAGGATATCAATAACTTCCTGAACTGGTACCAACAGAAACCCGGAAAGGCTCCAAAGCTCCTGATCTATGATGCTTCCAACCTGGAGACCGGCGTGCCCTCCAGGTTCAGTGGTTCAGGATCAGGCACTGACTTTACGTTCACCATATCCAGTCTTCAGCCCGAAGACATTGCAACCTATTACTGCCAACAATACGGGAACCTTCCCTTTACATTCGGAGGCGGCACCAAGGTGGAAATCAAAAGGGCTGCAGCATTGAGCAACTCAATAATGTATTTTAGTCACTTTGTACCAGTGTTCTTGCCGGCTAAGCCTACTACCACACCCGCTCCACGGCCACCTACCCCAGCTCCTACCATCGCTTCACAGCCTCTGTCCCTGCGCCCAGAGGCTTGCCGACCGGCCGCAGGGGGCGCTGTTCATACCAGAGGACTGGATTTCGCCTGCGATATCTATATCTGGGCACCCCTGGCCGGAACCTGCGGCGTACTCCTGCTGTCCCTGGTCATCACGCTCTATTGTAATCACAGGAACAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG(配列番号35)
クローン24C1 CD8 CD3ゼータ CAR AA 重鎖及び軽鎖
QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSISSYYWSWIRQPPGKGLEWIGYIYYSGSTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCVSLVYCGGDCYSGFDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIQLTQSPSSLSASVGDRVSFTCQASQDINNFLNWYQQKPGKAPKLLIYDASNLETGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQYGNLPFTFGGGTKVEIKRAAALSNSIMYFSHFVPVFLPAKPTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCNHRNRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATK DTYDALHMQALPPR(配列番号36)
クローン24C1 CD28T CD3ゼータ CAR DNA 重鎖及び軽鎖
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCGGATATCCAGCTCACGCAATCCCCCTCAAGCTTGAGTGCCTCCGTGGGCGACCGGGTGTCCTTCACATGTCAGGCAAGCCAAGACATAAATAATTTCCTGAATTGGTACCAACAAAAACCCGGCAAGGCTCCCAAACTCCTGATTTATGATGCCTCCAATCTGGAGACCGGGGTCCCTTCTAGATTCAGCGGAAGTGGCAGCGGCACAGACTTTACATTTACTATCTCTTCTCTGCAACCAGAGGACATCGCCACATACTATTGCCAGCAATACGGCAATCTGCCCTTCACCTTCGGAGGCGGAACCAAGGTAGAAATTAAAAGGGGCGGTGGAGGCTCCGGAGGGGGGGGCTCTGGCGGAGGGGGCTCCCAAGTACAATTGCAGGAGTCAGGGCCTGGACTCGTGAAGCCTTCAGAAACTTTGTCACTGACATGTACAGTGTCCGGCGGAAGCATTTCCAGTTACTATTGGTCCTGGATTAGACAGCCACCCGGCAAAGGACTGGAATGGATTGGATATATCTACTACTCTGGATCTACAAACTATAATCCCAGCCTCAAATCCAGGGTCACTATTAGTGTGGATACATCAAAGAATCAGTTCTCCTTGAAGCTGAGCTCAGTCACTGCTGCCGACACCGCAGTGTACTATTGTGTGAGCCTGGTCTACTGCGGCGGAGATTGCTACAGCGGTTTCGATTACTGGGGCCAGGGCACCCTGGTTACCGTTAGTTCCGCGGCTGCTCTTGATAACGAGAAGTCCAACGGTACGATTATCCACGTTAAGGGTAAGCACCTTTGCCCTAGCCCGCTGTTCCCAGGCCCCAGTAAGCCCTTTTGGGTCCTCGTTGTGGTAGGTGGGGTACTCGCCTGCTACTCCCTGCTCGTCACTGTCGCATTCATCATCTTCTGGGTCAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGGTAA(配列番号37)
クローン24C1 CD28T CD3ゼータ CAR AA 重鎖及び軽鎖
(シグナルペプチドは太字)
Figure 2020537635
クローン24C1 CD28T CD3ゼータ CAR DNA 重鎖及び軽鎖
GATATCCAGCTCACGCAATCCCCCTCAAGCTTGAGTGCCTCCGTGGGCGACCGGGTGTCCTTCACATGTCAGGCAAGCCAAGACATAAATAATTTCCTGAATTGGTACCAACAAAAACCCGGCAAGGCTCCCAAACTCCTGATTTATGATGCCTCCAATCTGGAGACCGGGGTCCCTTCTAGATTCAGCGGAAGTGGCAGCGGCACAGACTTTACATTTACTATCTCTTCTCTGCAACCAGAGGACATCGCCACATACTATTGCCAGCAATACGGCAATCTGCCCTTCACCTTCGGAGGCGGAACCAAGGTAGAAATTAAAAGGGGCGGTGGAGGCTCCGGAGGGGGGGGCTCTGGCGGAGGGGGCTCCCAAGTACAATTGCAGGAGTCAGGGCCTGGACTCGTGAAGCCTTCAGAAACTTTGTCACTGACATGTACAGTGTCCGGCGGAAGCATTTCCAGTTACTATTGGTCCTGGATTAGACAGCCACCCGGCAAAGGACTGGAATGGATTGGATATATCTACTACTCTGGATCTACAAACTATAATCCCAGCCTCAAATCCAGGGTCACTATTAGTGTGGATACATCAAAGAATCAGTTCTCCTTGAAGCTGAGCTCAGTCACTGCTGCCGACACCGCAGTGTACTATTGTGTGAGCCTGGTCTACTGCGGCGGAGATTGCTACAGCGGTTTCGATTACTGGGGCCAGGGCACCCTGGTTACCGTTAGTTCCGCGGCTGCTCTTGATAACGAGAAGTCCAACGGTACGATTATCCACGTTAAGGGTAAGCACCTTTGCCCTAGCCCGCTGTTCCCAGGCCCCAGTAAGCCCTTTTGGGTCCTCGTTGTGGTAGGTGGGGTACTCGCCTGCTACTCCCTGCTCGTCACTGTCGCATTCATCATCTTCTGGGTCAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG(配列番号39)
クローン24C1 CD28T CD3ゼータ CAR AA 重鎖及び軽鎖
DIQLTQSPSSLSASVGDRVSFTCQASQDINNFLNWYQQKPGKAPKLLIYDASNLETGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQYGNLPFTFGGGTKVEIKRGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSISSYYWSWIRQPPGKGLEWIGYIYYSGSTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCVSLVYCGGDCYSGFDYWGQGTLVTVSSAAALDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR(配列番号40)
クローン24C1 CD28 CD3ゼータ CAR DNA AA 重鎖及び軽鎖
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCGGATATCCAGCTGACCCAGTCTCCATCCTCTTTGAGTGCCTCCGTGGGTGACCGCGTCTCTTTCACTTGCCAAGCCAGCCAAGACATCAACAACTTTCTGAATTGGTACCAGCAGAAACCAGGCAAAGCACCAAAGCTCCTCATCTACGACGCCTCCAACCTGGAAACCGGGGTGCCCAGCAGGTTTAGCGGGAGCGGTTCTGGCACGGATTTTACGTTCACCATCTCCTCTCTGCAGCCCGAGGATATAGCTACTTATTACTGTCAGCAGTACGGGAATCTGCCATTTACTTTTGGGGGTGGAACTAAGGTGGAAATCAAAAGGGGCGGCGGGGGAAGCGGGGGCGGGGGCTCAGGTGGCGGAGGGAGCCAGGTGCAACTCCAGGAAAGTGGCCCAGGATTGGTGAAGCCCAGCGAGACCCTTTCCCTTACTTGTACTGTTAGCGGAGGCAGCATAAGCAGCTACTATTGGTCCTGGATCAGACAGCCACCAGGGAAAGGGCTTGAATGGATTGGCTACATTTACTATTCCGGGTCCACCAACTACAACCCATCCCTCAAGTCCCGCGTGACAATTTCCGTCGACACAAGCAAGAACCAGTTCTCCCTGAAACTTAGTAGCGTCACTGCTGCAGATACAGCAGTGTACTATTGTGTCAGCCTTGTCTACTGTGGCGGCGACTGCTACAGTGGCTTTGATTACTGGGGACAGGGCACGCTCGTGACAGTGTCCAGCGCTGCGGCTATCGAGGTAATGTATCCGCCACCGTATCTGGACAACGAGAAGTCTAATGGGACAATCATTCACGTGAAGGGGAAGCACCTGTGTCCATCCCCCCTGTTTCCGGGTCCCAGTAAACCCTTCTGGGTGCTTGTTGTCGTTGGCGGGGTGCTGGCCTGCTATTCCCTGCTGGTGACCGTCGCGTTTATTATTTTCTGGGTTAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGGTAA(配列番号41)
クローン24C1 CD28 CD3ゼータ CAR AA 重鎖及び軽鎖
(シグナルペプチドは太字)
Figure 2020537635
クローン24C1 CD28 CD3ゼータ CAR DNA 重鎖及び軽鎖
GATATCCAGCTGACCCAGTCTCCATCCTCTTTGAGTGCCTCCGTGGGTGACCGCGTCTCTTTCACTTGCCAAGCCAGCCAAGACATCAACAACTTTCTGAATTGGTACCAGCAGAAACCAGGCAAAGCACCAAAGCTCCTCATCTACGACGCCTCCAACCTGGAAACCGGGGTGCCCAGCAGGTTTAGCGGGAGCGGTTCTGGCACGGATTTTACGTTCACCATCTCCTCTCTGCAGCCCGAGGATATAGCTACTTATTACTGTCAGCAGTACGGGAATCTGCCATTTACTTTTGGGGGTGGAACTAAGGTGGAAATCAAAAGGGGCGGCGGGGGAAGCGGGGGCGGGGGCTCAGGTGGCGGAGGGAGCCAGGTGCAACTCCAGGAAAGTGGCCCAGGATTGGTGAAGCCCAGCGAGACCCTTTCCCTTACTTGTACTGTTAGCGGAGGCAGCATAAGCAGCTACTATTGGTCCTGGATCAGACAGCCACCAGGGAAAGGGCTTGAATGGATTGGCTACATTTACTATTCCGGGTCCACCAACTACAACCCATCCCTCAAGTCCCGCGTGACAATTTCCGTCGACACAAGCAAGAACCAGTTCTCCCTGAAACTTAGTAGCGTCACTGCTGCAGATACAGCAGTGTACTATTGTGTCAGCCTTGTCTACTGTGGCGGCGACTGCTACAGTGGCTTTGATTACTGGGGACAGGGCACGCTCGTGACAGTGTCCAGCGCTGCGGCTATCGAGGTAATGTATCCGCCACCGTATCTGGACAACGAGAAGTCTAATGGGACAATCATTCACGTGAAGGGGAAGCACCTGTGTCCATCCCCCCTGTTTCCGGGTCCCAGTAAACCCTTCTGGGTGCTTGTTGTCGTTGGCGGGGTGCTGGCCTGCTATTCCCTGCTGGTGACCGTCGCGTTTATTATTTTCTGGGTTAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG(配列番号43)
クローン24C1 CD28 CD3ゼータ CAR AA 重鎖及び軽鎖
DIQLTQSPSSLSASVGDRVSFTCQASQDINNFLNWYQQKPGKAPKLLIYDASNLETGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQYGNLPFTFGGGTKVEIKRGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSISSYYWSWIRQPPGKGLEWIGYIYYSGSTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCVSLVYCGGDCYSGFDYWGQGTLVTVSSAAAIEVMYPPPYLDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR(配列番号44)
クローン24C1 CD8 CD3ゼータ CAR DNA 重鎖及び軽鎖
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCGGACATTCAATTGACCCAGTCCCCTAGCAGTCTCTCAGCAAGTGTGGGAGATAGGGTGTCATTCACCTGTCAGGCTTCACAGGACATCAACAACTTCCTCAATTGGTATCAGCAGAAGCCAGGGAAGGCACCAAAGCTGCTCATATATGACGCTTCAAACCTTGAAACCGGAGTACCTAGCCGCTTCAGCGGAAGCGGATCAGGGACTGACTTCACTTTTACCATCTCTTCACTGCAGCCCGAAGACATCGCCACATACTACTGCCAGCAGTACGGAAACTTGCCTTTTACATTTGGGGGCGGCACCAAAGTGGAGATTAAGCGAGGGGGAGGCGGCTCAGGAGGCGGTGGCTCCGGAGGCGGGGGTTCCCAGGTCCAGCTCCAGGAATCCGGCCCAGGTCTGGTTAAGCCCAGTGAAACTTTGTCCCTCACGTGTACTGTGAGCGGTGGTTCAATCTCCTCATACTATTGGTCTTGGATACGGCAACCTCCTGGAAAGGGCCTCGAGTGGATCGGCTATATCTACTATAGTGGCTCCACTAATTACAACCCTTCCCTCAAGTCCAGAGTCACCATTTCCGTGGACACATCTAAGAACCAGTTCAGTCTGAAGTTGTCCAGCGTTACAGCCGCAGACACAGCCGTTTATTACTGTGTGTCTCTTGTTTACTGCGGGGGAGACTGTTATAGCGGCTTCGATTACTGGGGCCAGGGCACCTTGGTCACAGTCTCTTCCGCGGCCGCCCTCTCTAACAGTATTATGTACTTTTCTCATTTTGTACCCGTGTTCCTTCCCGCTAAGCCAACTACTACCCCGGCCCCACGGCCGCCTACCCCTGCACCCACAATAGCCAGTCAGCCTTTGAGCCTGAGACCTGAGGCTTGTCGGCCGGCTGCTGGGGGTGCAGTGCACACACGAGGTCTTGATTTTGCTTGCGACATATACATCTGGGCCCCTCTGGCCGGGACCTGTGGGGTGCTGCTTCTGAGCTTGGTCATCACGCTCTATTGCAACCATCGCAACAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGGTAA(配列番号45)
クローン24C1 CD8 CD3ゼータ CAR AA 重鎖及び軽鎖
(シグナルペプチドは太字)
Figure 2020537635
クローン24C1 CD8 CD3ゼータ CAR DNA 重鎖及び軽鎖
GACATTCAATTGACCCAGTCCCCTAGCAGTCTCTCAGCAAGTGTGGGAGATAGGGTGTCATTCACCTGTCAGGCTTCACAGGACATCAACAACTTCCTCAATTGGTATCAGCAGAAGCCAGGGAAGGCACCAAAGCTGCTCATATATGACGCTTCAAACCTTGAAACCGGAGTACCTAGCCGCTTCAGCGGAAGCGGATCAGGGACTGACTTCACTTTTACCATCTCTTCACTGCAGCCCGAAGACATCGCCACATACTACTGCCAGCAGTACGGAAACTTGCCTTTTACATTTGGGGGCGGCACCAAAGTGGAGATTAAGCGAGGGGGAGGCGGCTCAGGAGGCGGTGGCTCCGGAGGCGGGGGTTCCCAGGTCCAGCTCCAGGAATCCGGCCCAGGTCTGGTTAAGCCCAGTGAAACTTTGTCCCTCACGTGTACTGTGAGCGGTGGTTCAATCTCCTCATACTATTGGTCTTGGATACGGCAACCTCCTGGAAAGGGCCTCGAGTGGATCGGCTATATCTACTATAGTGGCTCCACTAATTACAACCCTTCCCTCAAGTCCAGAGTCACCATTTCCGTGGACACATCTAAGAACCAGTTCAGTCTGAAGTTGTCCAGCGTTACAGCCGCAGACACAGCCGTTTATTACTGTGTGTCTCTTGTTTACTGCGGGGGAGACTGTTATAGCGGCTTCGATTACTGGGGCCAGGGCACCTTGGTCACAGTCTCTTCCGCGGCCGCCCTCTCTAACAGTATTATGTACTTTTCTCATTTTGTACCCGTGTTCCTTCCCGCTAAGCCAACTACTACCCCGGCCCCACGGCCGCCTACCCCTGCACCCACAATAGCCAGTCAGCCTTTGAGCCTGAGACCTGAGGCTTGTCGGCCGGCTGCTGGGGGTGCAGTGCACACACGAGGTCTTGATTTTGCTTGCGACATATACATCTGGGCCCCTCTGGCCGGGACCTGTGGGGTGCTGCTTCTGAGCTTGGTCATCACGCTCTATTGCAACCATCGCAACAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG(配列番号47)
クローン24C1 CD8 CD3ゼータ CAR AA 重鎖及び軽鎖
DIQLTQSPSSLSASVGDRVSFTCQASQDINNFLNWYQQKPGKAPKLLIYDASNLETGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQYGNLPFTFGGGTKVEIKRGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSISSYYWSWIRQPPGKGLEWIGYIYYSGSTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTADTAVYYCVSLVYCGGDCYSGFDYWGQGTLVTVSSAAALSNSIMYFSHFVPVFLPAKPTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCNHRNRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATK DTYDALHMQA LPPR(配列番号48)
クローン24C8 重鎖(HC) DNA
CAGGTACAGCTGCAGGAATCTGGGCCCGGACTTGTCAAGCCAAGTCAGACACTTTCTCTTACATGTACCGTGAGCGGCGGAAGTATAAGCAGTGGAGGCTTTTACTGGTCTTGGATACGGCAGCACCCAGGCAAAGGCTTGGAGTGGATTGGATACATTCATCATTCAGGATCTACACACTATAATCCATCCCTTAAGTCCCGGGTCACCATTAGCATTGATACGTCTAAGAATCTGTTCAGTCTCAGGCTGTCCTCCGTCACTGCTGCCGACACAGCCGTGTACTACTGCGCCTCCTTGGTTTACTGCGGAGGCGACTGTTATAGCGGCTTTGATTATTGGGGGCAGGGGACCCTCGTAACCGTGAGCTCT(配列番号49)
クローン24C8 AA HC(CDRは下線)
QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCTVSGGSISSGGFYWSWIRQHPGKGLEWIGYIHHSGSTHYNPSLKSRVTISIDTSKNLFSLRLSSVTAADTAVYYCASLVYCGGDCYSGFDYWGQGTLVTVSS(配列番号50)
クローン24C8 HC CDR1 AA:GGSISSGGF(配列番号51)
クローン24C8 HC CDR2 AA:HHSGS(配列番号52)
クローン24C8 HC CDR3 AA:LVYCGGDCYS GFDY(配列番号53)
クローン24C8 軽鎖(LC) DNA
GATATCCAGCTCACTCAAAGCCCCTCTAGTCTCTCTGCCTCAGTGGGGGATCGGGTCAGTTTTACTTGTCAAGCTTCACAGGATATCAACAACTTCCTTAATTGGTATCAGCAGAAGCCAGGAAAAGCACCCAAGCTGCTCATCTATGATGCCTCAAATTTGGAGACGGGTGTTCCCAGTCGATTCTCTGGGTCAGGGTCCGGGACCGACTTTACGTTTACGATCTCCTCTCTGCAGCCCGAAGACATCGCCACATACTATTGTCAACAGTACGGCAACTTGCCTTTCACATTTGGGGGCGGGACTAAGGTTGAAATCAAGAGG(配列番号54)
クローン24C8 LC AA(CDRは下線)
DIQLTQSPSSLSASVGDRVSFTCQASQDINNFLNWYQQKPGKAPKLLIYDASNLETGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQYGNLPFTFGGGTKVEIKR(配列番号55)
クローン24C8 LC CDR1 AA:QASQDINNFLN(配列番号56)
クローン24C8 LC CDR2 AA:DASNLET(配列番号57)
クローン24C8 LC CDR3 AA:QQYGNLPFT(配列番号58)
クローン24C8 CD28T CD3ゼータ CAR DNA 重鎖及び軽鎖
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCGCAGGTACAGCTGCAGGAATCTGGGCCCGGACTTGTCAAGCCAAGTCAGACACTTTCTCTTACATGTACCGTGAGCGGCGGAAGTATAAGCAGTGGAGGCTTTTACTGGTCTTGGATACGGCAGCACCCAGGCAAAGGCTTGGAGTGGATTGGATACATTCATCATTCAGGATCTACACACTATAATCCATCCCTTAAGTCCCGGGTCACCATTAGCATTGATACGTCTAAGAATCTGTTCAGTCTCAGGCTGTCCTCCGTCACTGCTGCCGACACAGCCGTGTACTACTGCGCCTCCTTGGTTTACTGCGGAGGCGACTGTTATAGCGGCTTTGATTATTGGGGGCAGGGGACCCTCGTAACCGTGAGCTCTGGAGGGGGTGGGAGCGGGGGAGGAGGTTCAGGGGGGGGCGGCTCCGATATCCAGCTCACTCAAAGCCCCTCTAGTCTCTCTGCCTCAGTGGGGGATCGGGTCAGTTTTACTTGTCAAGCTTCACAGGATATCAACAACTTCCTTAATTGGTATCAGCAGAAGCCAGGAAAAGCACCCAAGCTGCTCATCTATGATGCCTCAAATTTGGAGACGGGTGTTCCCAGTCGATTCTCTGGGTCAGGGTCCGGGACCGACTTTACGTTTACGATCTCCTCTCTGCAGCCCGAAGACATCGCCACATACTATTGTCAACAGTACGGCAACTTGCCTTTCACATTTGGGGGCGGGACTAAGGTTGAAATCAAGAGGGCCGCTGCACTGGACAATGAGAAGTCCAACGGCACCATCATCCACGTGAAGGGCAAGCACCTGTGCCCTAGTCCTCTGTTCCCAGGCCCATCCAAACCTTTTTGGGTTCTTGTTGTGGTCGGGGGGGTGCTGGCCTGCTATTCTCTGCTGGTCACGGTGGCCTTCATAATTTTCTGGGTTAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGGTAA(配列番号59)
クローン24C8 CD28T CD3ゼータ CAR AA 重鎖及び軽鎖
(シグナルペプチドは太字)
Figure 2020537635
クローン24C8 CD28T CD3ゼータ CAR DNA 重鎖及び軽鎖
CAGGTACAGCTGCAGGAATCTGGGCCCGGACTTGTCAAGCCAAGTCAGACACTTTCTCTTACATGTACCGTGAGCGGCGGAAGTATAAGCAGTGGAGGCTTTTACTGGTCTTGGATACGGCAGCACCCAGGCAAAGGCTTGGAGTGGATTGGATACATTCATCATTCAGGATCTACACACTATAATCCATCCCTTAAGTCCCGGGTCACCATTAGCATTGATACGTCTAAGAATCTGTTCAGTCTCAGGCTGTCCTCCGTCACTGCTGCCGACACAGCCGTGTACTACTGCGCCTCCTTGGTTTACTGCGGAGGCGACTGTTATAGCGGCTTTGATTATTGGGGGCAGGGGACCCTCGTAACCGTGAGCTCTGGAGGGGGTGGGAGCGGGGGAGGAGGTTCAGGGGGGGGCGGCTCCGATATCCAGCTCACTCAAAGCCCCTCTAGTCTCTCTGCCTCAGTGGGGGATCGGGTCAGTTTTACTTGTCAAGCTTCACAGGATATCAACAACTTCCTTAATTGGTATCAGCAGAAGCCAGGAAAAGCACCCAAGCTGCTCATCTATGATGCCTCAAATTTGGAGACGGGTGTTCCCAGTCGATTCTCTGGGTCAGGGTCCGGGACCGACTTTACGTTTACGATCTCCTCTCTGCAGCCCGAAGACATCGCCACATACTATTGTCAACAGTACGGCAACTTGCCTTTCACATTTGGGGGCGGGACTAAGGTTGAAATCAAGAGGGCCGCTGCACTGGACAATGAGAAGTCCAACGGCACCATCATCCACGTGAAGGGCAAGCACCTGTGCCCTAGTCCTCTGTTCCCAGGCCCATCCAAACCTTTTTGGGTTCTTGTTGTGGTCGGGGGGGTGCTGGCCTGCTATTCTCTGCTGGTCACGGTGGCCTTCATAATTTTCTGGGTTAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG(配列番号61)
クローン24C8 CD28T CD3ゼータ CAR AA 重鎖及び軽鎖
QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCTVSGGSISSGGFYWSWIRQHPGKGLEWIGYIHHSGSTHYNPSLKSRVTISIDTSKNLFSLRLSSVTAADTAVYYCASLVYCGGDCYSGFDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIQLTQSPSSLSASVGDRVSFTCQASQDINNFLNWYQQKPGKAPKLLIYDASNLETGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQYGNLPFTFGGGTKVEIKRAAALDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR(配列番号62)
クローン24C8 CD28 CD3ゼータ CAR DNA 重鎖及び軽鎖
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCGCAGGTGCAGCTGCAGGAAAGCGGTCCGGGACTTGTCAAGCCGTCCCAAACGCTGAGTCTGACGTGTACTGTCTCTGGTGGCTCTATTTCTTCCGGGGGCTTTTATTGGTCTTGGATCAGACAACACCCTGGCAAAGGGCTGGAGTGGATAGGGTATATTCACCACTCTGGGTCCACTCACTACAACCCATCATTGAAATCCAGAGTGACTATCTCAATCGACACATCCAAGAACCTTTTCAGCCTGAGGTTGTCATCAGTTACCGCCGCTGACACCGCGGTGTATTATTGCGCCTCTCTCGTGTACTGCGGTGGCGATTGTTATAGTGGCTTTGACTACTGGGGGCAGGGGACATTGGTTACCGTTTCAAGTGGAGGCGGTGGGTCTGGCGGGGGCGGTAGCGGAGGTGGGGGGAGCGACATACAGCTTACGCAGAGCCCCTCCAGCCTTTCAGCCTCCGTGGGGGATAGGGTGTCCTTTACCTGCCAGGCTTCCCAGGACATAAACAACTTCCTCAATTGGTATCAGCAAAAGCCCGGGAAAGCACCAAAGCTGCTCATCTACGATGCCAGCAACCTGGAAACCGGAGTGCCGTCTCGCTTCTCTGGAAGTGGCAGTGGGACCGATTTCACTTTTACAATCTCAAGTTTGCAGCCAGAAGACATTGCAACATACTACTGTCAACAGTACGGCAATCTCCCCTTTACATTTGGGGGGGGAACTAAAGTGGAGATTAAGCGCGCTGCAGCCATTGAAGTTATGTATCCGCCCCCGTATCTGGATAACGAGAAATCTAATGGTACCATAATACATGTGAAGGGGAAGCACCTCTGTCCATCACCGCTGTTCCCCGGCCCTTCAAAACCTTTCTGGGTACTCGTTGTCGTGGGTGGAGTTCTGGCCTGCTATAGTCTGCTGGTGACCGTGGCGTTTATCATCTTCTGGGTAAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGGTAA(配列番号63)
クローン24C8 CD28 CD3ゼータ CAR AA 重鎖及び軽鎖
(シグナルペプチドは太字)
Figure 2020537635
クローン24C8 CD28 CD3ゼータ CAR DNA 重鎖及び軽鎖
CAGGTGCAGCTGCAGGAAAGCGGTCCGGGACTTGTCAAGCCGTCCCAAACGCTGAGTCTGACGTGTACTGTCTCTGGTGGCTCTATTTCTTCCGGGGGCTTTTATTGGTCTTGGATCAGACAACACCCTGGCAAAGGGCTGGAGTGGATAGGGTATATTCACCACTCTGGGTCCACTCACTACAACCCATCATTGAAATCCAGAGTGACTATCTCAATCGACACATCCAAGAACCTTTTCAGCCTGAGGTTGTCATCAGTTACCGCCGCTGACACCGCGGTGTATTATTGCGCCTCTCTCGTGTACTGCGGTGGCGATTGTTATAGTGGCTTTGACTACTGGGGGCAGGGGACATTGGTTACCGTTTCAAGTGGAGGCGGTGGGTCTGGCGGGGGCGGTAGCGGAGGTGGGGGGAGCGACATACAGCTTACGCAGAGCCCCTCCAGCCTTTCAGCCTCCGTGGGGGATAGGGTGTCCTTTACCTGCCAGGCTTCCCAGGACATAAACAACTTCCTCAATTGGTATCAGCAAAAGCCCGGGAAAGCACCAAAGCTGCTCATCTACGATGCCAGCAACCTGGAAACCGGAGTGCCGTCTCGCTTCTCTGGAAGTGGCAGTGGGACCGATTTCACTTTTACAATCTCAAGTTTGCAGCCAGAAGACATTGCAACATACTACTGTCAACAGTACGGCAATCTCCCCTTTACATTTGGGGGGGGAACTAAAGTGGAGATTAAGCGCGCTGCAGCCATTGAAGTTATGTATCCGCCCCCGTATCTGGATAACGAGAAATCTAATGGTACCATAATACATGTGAAGGGGAAGCACCTCTGTCCATCACCGCTGTTCCCCGGCCCTTCAAAACCTTTCTGGGTACTCGTTGTCGTGGGTGGAGTTCTGGCCTGCTATAGTCTGCTGGTGACCGTGGCGTTTATCATCTTCTGGGTAAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG(配列番号65)
クローン24C8 CD28 CD3ゼータ CAR AA 重鎖及び軽鎖
QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCTVSGGSISSGGFYWSWIRQHPGKGLEWIGYIHHSGSTHYNPSLKSRVTISIDTSKNLFSLRLSSVTAADTAVYYCASLVYCGGDCYSGFDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIQLTQSPSSLSASVGDRVSFTCQASQDINNFLNWYQQKPGKAPKLLIYDASNLETGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQYGNLPFTFGGGTKVEIKRAAAIEVMYPPPYLDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR(配列番号66)
クローン24C8 CD8 CD3ゼータ CAR DNA 重鎖及び軽鎖
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCGCAGGTGCAGTTGCAGGAAAGCGGGCCTGGCCTTGTGAAACCAAGCCAGACACTGAGCCTGACATGCACTGTGTCCGGCGGGTCCATATCTTCCGGGGGTTTTTATTGGTCCTGGATACGCCAGCATCCCGGGAAAGGACTTGAATGGATTGGATATATCCACCATTCCGGAAGCACCCACTACAATCCAAGCCTTAAATCCCGGGTGACAATCTCCATCGACACCTCAAAGAATCTTTTTTCCCTGCGGTTGTCTTCAGTAACTGCCGCCGATACCGCTGTGTACTACTGTGCCAGCCTCGTCTATTGCGGCGGAGATTGTTATTCTGGGTTCGATTATTGGGGTCAAGGCACACTGGTAACTGTCAGCAGCGGAGGCGGCGGTTCCGGGGGCGGGGGCAGTGGAGGGGGCGGATCTGACATTCAGCTTACGCAGTCCCCATCTTCACTTAGCGCCAGCGTTGGCGATCGGGTCAGCTTCACGTGTCAAGCAAGTCAGGATATCAACAACTTTCTTAACTGGTACCAGCAGAAGCCAGGCAAGGCACCCAAGTTGCTGATTTACGATGCTTCTAACCTCGAGACGGGAGTGCCTAGCCGCTTCTCCGGGAGCGGCAGCGGCACAGACTTTACCTTTACGATTTCCAGTCTGCAGCCAGAGGATATAGCAACTTATTACTGTCAGCAGTATGGCAACCTCCCTTTTACCTTCGGTGGTGGCACAAAGGTCGAGATTAAAAGAGCCGCAGCGTTGTCCAACTCCATAATGTATTTTTCTCATTTTGTGCCCGTCTTTCTGCCTGCCAAACCTACCACCACCCCCGCCCCACGACCACCTACTCCAGCCCCCACCATCGCCTCCCAGCCCCTCAGCCTGAGGCCAGAGGCTTGTCGCCCTGCTGCGGGGGGCGCTGTCCATACCAGAGGACTCGACTTCGCCTGCGATATTTATATATGGGCCCCCCTCGCCGGCACCTGCGGAGTCTTGCTCCTGAGCCTTGTGATCACGCTTTATTGTAACCATCGGAATAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGGTAA(配列番号67)
クローン24C8 CD8 CD3ゼータ CAR AA 重鎖及び軽鎖
(シグナルペプチドは太字)
Figure 2020537635
クローン24C8 CD8 CD3ゼータ CAR DNA 重鎖及び軽鎖
CAGGTGCAGTTGCAGGAAAGCGGGCCTGGCCTTGTGAAACCAAGCCAGACACTGAGCCTGACATGCACTGTGTCCGGCGGGTCCATATCTTCCGGGGGTTTTTATTGGTCCTGGATACGCCAGCATCCCGGGAAAGGACTTGAATGGATTGGATATATCCACCATTCCGGAAGCACCCACTACAATCCAAGCCTTAAATCCCGGGTGACAATCTCCATCGACACCTCAAAGAATCTTTTTTCCCTGCGGTTGTCTTCAGTAACTGCCGCCGATACCGCTGTGTACTACTGTGCCAGCCTCGTCTATTGCGGCGGAGATTGTTATTCTGGGTTCGATTATTGGGGTCAAGGCACACTGGTAACTGTCAGCAGCGGAGGCGGCGGTTCCGGGGGCGGGGGCAGTGGAGGGGGCGGATCTGACATTCAGCTTACGCAGTCCCCATCTTCACTTAGCGCCAGCGTTGGCGATCGGGTCAGCTTCACGTGTCAAGCAAGTCAGGATATCAACAACTTTCTTAACTGGTACCAGCAGAAGCCAGGCAAGGCACCCAAGTTGCTGATTTACGATGCTTCTAACCTCGAGACGGGAGTGCCTAGCCGCTTCTCCGGGAGCGGCAGCGGCACAGACTTTACCTTTACGATTTCCAGTCTGCAGCCAGAGGATATAGCAACTTATTACTGTCAGCAGTATGGCAACCTCCCTTTTACCTTCGGTGGTGGCACAAAGGTCGAGATTAAAAGAGCCGCAGCGTTGTCCAACTCCATAATGTATTTTTCTCATTTTGTGCCCGTCTTTCTGCCTGCCAAACCTACCACCACCCCCGCCCCACGACCACCTACTCCAGCCCCCACCATCGCCTCCCAGCCCCTCAGCCTGAGGCCAGAGGCTTGTCGCCCTGCTGCGGGGGGCGCTGTCCATACCAGAGGACTCGACTTCGCCTGCGATATTTATATATGGGCCCCCCTCGCCGGCACCTGCGGAGTCTTGCTCCTGAGCCTTGTGATCACGCTTTATTGTAACCATCGGAATAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG(配列番号69)
クローン24C8 CD8 CD3ゼータ CAR AA 重鎖及び軽鎖
QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCTVSGGSISSGGFYWSWIRQHPGKGLEWIGYIHHSGSTHYNPSLKSRVTISIDTSKNLFSLRLSSVTAADTAVYYCASLVYCGGDCYSGFDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIQLTQSPSSLSASVGDRVSFTCQASQDINNFLNWYQQKPGKAPKLLIYDASNLETGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQYGNLPFTFGGGTKVEIKRAAALSNSIMYFSHFVPVFLPAKPTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCNHRNRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTA TKDTYDALHM QALPPR(配列番号70)
クローン20C5.1 HC DNA
CAGGTCCAACTGGTGCAGTCCGGAGCCGAAGTCAAGAAACCAGGTGCCTCCGTTAAAGTGAGTTGCAAAGTCTCTGGATACACTCTGACCGAGCTCTCTATGCACTGGGTCCGGCAGGCCCCCGGCAAGGGATTGGAATGGATGGGCGGGTTCGATCCTGAGGACGGAGAGACTATCTACGCTCAAAAATTCCAGGGACGAGTGACTGTGACCGAAGACACTAGTACCGACACTGCCTACATGGAACTTTCCTCTCTGCGATCAGAAGATACCGCAGTGTACTACTGTGCTACTGAATCTAGGGGCATTGGATGGCCCTACTTCGATTACTGGGGTCAGGGAACTCTGGTGACTGTCTCCAGC(配列番号71)
クローン20C5.1 AA HC(CDRは下線)
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKVSGYTLTELSMHWVRQAPGKGLEWMGGFDPEDGETIYAQKFQGRVTVTEDTSTDTAYMELSSLRSEDTAVYYCATESRGIGWPYFDYWGQGTLVTVSS(配列番号72)
クローン20C5.1 HC AA CDR1:GYTLTEL(配列番号73)
クローン20C5.1 HC AA CDR2:DPEDGE(配列番号74)
クローン20C5.1 HC AA CDR3:ESRGIGWPYFDY(配列番号75)
クローン20C5.1 LC DNA
GATATTCAGATGACTCAATCTCCTTCTTCTCTGTCCGCTTCCGTGGGCGATAGAGTGACCATTACTTGTAGGGCGTCCCAGTCAATCTCCAGTTATTTGAATTGGTATCAGCAGAAGCCCGGGAAAGCACCTAAGCTGTTGATCAGCGGGGCTTCTAGCCTGAAGAGTGGGGTACCTTCACGGTTCAGCGGAAGCGGAAGCGGAACCGATTTCACCCTGACTATCAGCAGCCTGCCACCTGAGGACTTTGCAACTTACTACTGCCAACAGTCATACAGCACTCCGATCACTTTCGGCCAGGGCACCCGGCTCGAAATCAAGCGC(配列番号76)
クローン20C5.1 AA LC(CDRは下線)
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLISGASSLKSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLPPEDFATYYCQQSYSTPITFGQGTRLEIKR(配列番号77)
クローン20C5.1 AA LC CDR1:RASQSISSYLN(配列番号78)
クローン20C5.1 AA LC CDR2:GASSLKS(配列番号79)
クローン20C5.1 AA LC CDR3:QQSYSTPIT(配列番号80)
クローン20C5.1 CD28T CD3ゼータ CAR DNA 重鎖及び軽鎖
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCGCAGGTCCAACTGGTGCAGTCCGGAGCCGAAGTCAAGAAACCAGGTGCCTCCGTTAAAGTGAGTTGCAAAGTCTCTGGATACACTCTGACCGAGCTCTCTATGCACTGGGTCCGGCAGGCCCCCGGCAAGGGATTGGAATGGATGGGCGGGTTCGATCCTGAGGACGGAGAGACTATCTACGCTCAAAAATTCCAGGGACGAGTGACTGTGACCGAAGACACTAGTACCGACACTGCCTACATGGAACTTTCCTCTCTGCGATCAGAAGATACCGCAGTGTACTACTGTGCTACTGAATCTAGGGGCATTGGATGGCCCTACTTCGATTACTGGGGTCAGGGAACTCTGGTGACTGTCTCCAGCGGTGGAGGTGGCAGCGGTGGTGGCGGAAGCGGGGGGGGCGGCTCTGATATTCAGATGACTCAATCTCCTTCTTCTCTGTCCGCTTCCGTGGGCGATAGAGTGACCATTACTTGTAGGGCGTCCCAGTCAATCTCCAGTTATTTGAATTGGTATCAGCAGAAGCCCGGGAAAGCACCTAAGCTGTTGATCAGCGGGGCTTCTAGCCTGAAGAGTGGGGTACCTTCACGGTTCAGCGGAAGCGGAAGCGGAACCGATTTCACCCTGACTATCAGCAGCCTGCCACCTGAGGACTTTGCAACTTACTACTGCCAACAGTCATACAGCACTCCGATCACTTTCGGCCAGGGCACCCGGCTCGAAATCAAGCGCGCTGCTGCTTTGGACAATGAGAAGTCAAACGGCACCATCATACATGTTAAAGGTAAACATCTGTGTCCCTCCCCGCTGTTCCCCGGCCCTTCCAAACCGTTCTGGGTTCTGGTGGTGGTCGGAGGCGTACTCGCTTGCTATAGTCTGCTGGTAACTGTCGCCTTCATCATCTTTTGGGTGAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGGTAA(配列番号81)
クローン20C5.1 CD28T CD3ゼータ CAR AA 重鎖及び軽鎖
(シグナルペプチドは太字)
Figure 2020537635
クローン20C5.1 CD28T CD3ゼータ CAR DNA 重鎖及び軽鎖
CAGGTCCAACTGGTGCAGTCCGGAGCCGAAGTCAAGAAACCAGGTGCCTCCGTTAAAGTGAGTTGCAAAGTCTCTGGATACACTCTGACCGAGCTCTCTATGCACTGGGTCCGGCAGGCCCCCGGCAAGGGATTGGAATGGATGGGCGGGTTCGATCCTGAGGACGGAGAGACTATCTACGCTCAAAAATTCCAGGGACGAGTGACTGTGACCGAAGACACTAGTACCGACACTGCCTACATGGAACTTTCCTCTCTGCGATCAGAAGATACCGCAGTGTACTACTGTGCTACTGAATCTAGGGGCATTGGATGGCCCTACTTCGATTACTGGGGTCAGGGAACTCTGGTGACTGTCTCCAGCGGTGGAGGTGGCAGCGGTGGTGGCGGAAGCGGGGGGGGCGGCTCTGATATTCAGATGACTCAATCTCCTTCTTCTCTGTCCGCTTCCGTGGGCGATAGAGTGACCATTACTTGTAGGGCGTCCCAGTCAATCTCCAGTTATTTGAATTGGTATCAGCAGAAGCCCGGGAAAGCACCTAAGCTGTTGATCAGCGGGGCTTCTAGCCTGAAGAGTGGGGTACCTTCACGGTTCAGCGGAAGCGGAAGCGGAACCGATTTCACCCTGACTATCAGCAGCCTGCCACCTGAGGACTTTGCAACTTACTACTGCCAACAGTCATACAGCACTCCGATCACTTTCGGCCAGGGCACCCGGCTCGAAATCAAGCGCGCTGCTGCTTTGGACAATGAGAAGTCAAACGGCACCATCATACATGTTAAAGGTAAACATCTGTGTCCCTCCCCGCTGTTCCCCGGCCCTTCCAAACCGTTCTGGGTTCTGGTGGTGGTCGGAGGCGTACTCGCTTGCTATAGTCTGCTGGTAACTGTCGCCTTCATCATCTTTTGGGTGAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG(配列番号83)
クローン20C5.1 CD28T CD3ゼータ CAR AA 重鎖及び軽鎖
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKVSGYTLTELSMHWVRQAPGKGLEWMGGFDPEDGETIYAQKFQGRVTVTEDTSTDTAYMELSSLRSEDTAVYYCATESRGIGWPYFDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLISGASSLKSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLPPEDFATYYCQQSYSTPITFGQGTRLEIKRAAALDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR(配列番号84)
クローン20C5.1 CD28 CD3ゼータ CAR DNA 重鎖及び軽鎖
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCGCAGGTGCAGCTTGTGCAGAGCGGGGCCGAGGTGAAGAAGCCCGGGGCCAGCGTCAAAGTGTCCTGTAAGGTCAGCGGTTACACCCTCACCGAGCTGAGCATGCACTGGGTACGGCAGGCTCCCGGCAAAGGTCTTGAGTGGATGGGTGGATTTGATCCAGAAGATGGAGAGACTATCTACGCCCAGAAGTTCCAGGGCCGGGTCACCGTAACAGAAGACACCTCAACTGACACCGCTTACATGGAGCTGAGTTCACTGCGGTCCGAGGACACGGCCGTGTATTATTGTGCCACCGAGAGCCGCGGAATCGGATGGCCTTACTTCGACTACTGGGGACAGGGTACACTTGTTACAGTATCATCCGGGGGTGGCGGCTCTGGTGGGGGCGGCTCCGGAGGGGGTGGATCAGATATCCAAATGACTCAAAGTCCAAGTTCCCTGTCTGCCTCAGTCGGAGATAGAGTCACCATAACCTGCAGGGCAAGTCAGTCCATCTCCTCCTATCTGAACTGGTACCAACAGAAACCTGGAAAGGCGCCTAAGCTCCTGATCTCCGGAGCCTCATCTTTGAAATCCGGTGTCCCATCTCGCTTCAGTGGCTCTGGAAGCGGTACAGATTTTACTTTGACCATTAGCAGCCTCCCACCGGAAGACTTTGCTACATATTACTGCCAGCAGTCTTACTCAACCCCAATCACCTTCGGGCAAGGCACCAGACTCGAAATAAAAAGAGCAGCTGCTATCGAGGTTATGTACCCACCGCCGTACTTGGATAACGAAAAAAGCAATGGGACCATCATTCATGTGAAGGGTAAGCACCTTTGCCCTAGCCCACTGTTTCCTGGCCCGAGTAAACCCTTTTGGGTACTTGTGGTCGTCGGCGGCGTGCTGGCCTGCTACTCACTCCTGGTTACCGTCGCATTCATCATCTTTTGGGTGAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGGTAA(配列番号85)
クローン20C5.1 CD28 CD3ゼータ CAR AA 重鎖及び軽鎖
(シグナルペプチドは太字)
Figure 2020537635
クローン20C5.1 CD28 CD3ゼータ CAR DNA 重鎖及び軽鎖
CAGGTGCAGCTTGTGCAGAGCGGGGCCGAGGTGAAGAAGCCCGGGGCCAGCGTCAAAGTGTCCTGTAAGGTCAGCGGTTACACCCTCACCGAGCTGAGCATGCACTGGGTACGGCAGGCTCCCGGCAAAGGTCTTGAGTGGATGGGTGGATTTGATCCAGAAGATGGAGAGACTATCTACGCCCAGAAGTTCCAGGGCCGGGTCACCGTAACAGAAGACACCTCAACTGACACCGCTTACATGGAGCTGAGTTCACTGCGGTCCGAGGACACGGCCGTGTATTATTGTGCCACCGAGAGCCGCGGAATCGGATGGCCTTACTTCGACTACTGGGGACAGGGTACACTTGTTACAGTATCATCCGGGGGTGGCGGCTCTGGTGGGGGCGGCTCCGGAGGGGGTGGATCAGATATCCAAATGACTCAAAGTCCAAGTTCCCTGTCTGCCTCAGTCGGAGATAGAGTCACCATAACCTGCAGGGCAAGTCAGTCCATCTCCTCCTATCTGAACTGGTACCAACAGAAACCTGGAAAGGCGCCTAAGCTCCTGATCTCCGGAGCCTCATCTTTGAAATCCGGTGTCCCATCTCGCTTCAGTGGCTCTGGAAGCGGTACAGATTTTACTTTGACCATTAGCAGCCTCCCACCGGAAGACTTTGCTACATATTACTGCCAGCAGTCTTACTCAACCCCAATCACCTTCGGGCAAGGCACCAGACTCGAAATAAAAAGAGCAGCTGCTATCGAGGTTATGTACCCACCGCCGTACTTGGATAACGAAAAAAGCAATGGGACCATCATTCATGTGAAGGGTAAGCACCTTTGCCCTAGCCCACTGTTTCCTGGCCCGAGTAAACCCTTTTGGGTACTTGTGGTCGTCGGCGGCGTGCTGGCCTGCTACTCACTCCTGGTTACCGTCGCATTCATCATCTTTTGGGTGAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG(配列番号87)
クローン20C5.1 CD28 CD3ゼータ CAR AA 重鎖及び軽鎖
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKVSGYTLTELSMHWVRQAPGKGLEWMGGFDPEDGETIYAQKFQGRVTVTEDTSTDTAYMELSSLRSEDTAVYYCATESRGIGWPYFDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLISGASSLKSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLPPEDFATYYCQQSYSTPITFGQGTRLEIKRAAAIEVMYPPPYLDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHM QALPPR(配列番号88)
クローン20C5.1 CD8 CD3ゼータ CAR DNA 重鎖及び軽鎖
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCGCAGGTGCAGTTGGTGCAAAGCGGCGCAGAAGTTAAGAAACCTGGGGCGTCAGTTAAGGTGTCTTGCAAAGTATCTGGCTATACCCTCACTGAGCTGTCCATGCATTGGGTAAGGCAGGCTCCTGGAAAGGGGCTCGAATGGATGGGAGGATTTGACCCTGAAGACGGAGAGACCATCTACGCCCAGAAATTCCAGGGTAGAGTAACAGTGACTGAGGACACTAGCACTGACACAGCGTACATGGAGCTGAGTTCTCTGAGAAGTGAGGACACAGCCGTTTACTACTGCGCTACCGAGTCCAGAGGTATTGGCTGGCCATACTTCGACTATTGGGGTCAGGGCACCCTGGTTACAGTGAGTTCAGGAGGCGGGGGCTCTGGGGGGGGCGGTTCCGGAGGGGGGGGCTCAGATATACAGATGACGCAGAGTCCATCAAGTCTCTCAGCCAGCGTGGGAGATCGCGTGACTATTACTTGCCGCGCCAGCCAGAGTATTAGCTCCTATCTGAATTGGTACCAGCAAAAGCCCGGGAAGGCCCCTAAGCTTCTGATTTCTGGCGCCTCCTCTTTGAAGTCAGGTGTGCCAAGCAGATTTAGCGGGTCTGGAAGTGGCACTGACTTTACACTTACTATCTCCAGCCTGCCCCCAGAGGATTTTGCCACATATTACTGTCAGCAAAGCTACTCTACTCCAATCACTTTCGGCCAGGGCACAAGATTGGAGATTAAGAGGGCTGCCGCACTTTCAAATTCCATCATGTATTTCAGCCATTTTGTGCCTGTTTTTCTTCCGGCCAAACCTACAACCACTCCCGCCCCACGCCCACCTACTCCCGCCCCTACCATTGCCTCCCAGCCTCTGTCTCTTAGACCTGAGGCTTGTAGACCTGCTGCCGGCGGAGCCGTGCACACTCGCGGTCTGGACTTCGCCTGCGACATCTATATCTGGGCCCCTCTGGCCGGCACCTGCGGCGTTCTCCTTCTCTCACTCGTAATCACACTCTATTGCAATCACAGGAACAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGGTAA(配列番号89)
クローン20C5.1 CD8 CD3ゼータ CAR AA 重鎖及び軽鎖
(シグナルペプチドは太字)
Figure 2020537635
クローン20C5.1 CD8 CD3ゼータ CAR DNA 重鎖及び軽鎖
CAGGTGCAGTTGGTGCAAAGCGGCGCAGAAGTTAAGAAACCTGGGGCGTCAGTTAAGGTGTCTTGCAAAGTATCTGGCTATACCCTCACTGAGCTGTCCATGCATTGGGTAAGGCAGGCTCCTGGAAAGGGGCTCGAATGGATGGGAGGATTTGACCCTGAAGACGGAGAGACCATCTACGCCCAGAAATTCCAGGGTAGAGTAACAGTGACTGAGGACACTAGCACTGACACAGCGTACATGGAGCTGAGTTCTCTGAGAAGTGAGGACACAGCCGTTTACTACTGCGCTACCGAGTCCAGAGGTATTGGCTGGCCATACTTCGACTATTGGGGTCAGGGCACCCTGGTTACAGTGAGTTCAGGAGGCGGGGGCTCTGGGGGGGGCGGTTCCGGAGGGGGGGGCTCAGATATACAGATGACGCAGAGTCCATCAAGTCTCTCAGCCAGCGTGGGAGATCGCGTGACTATTACTTGCCGCGCCAGCCAGAGTATTAGCTCCTATCTGAATTGGTACCAGCAAAAGCCCGGGAAGGCCCCTAAGCTTCTGATTTCTGGCGCCTCCTCTTTGAAGTCAGGTGTGCCAAGCAGATTTAGCGGGTCTGGAAGTGGCACTGACTTTACACTTACTATCTCCAGCCTGCCCCCAGAGGATTTTGCCACATATTACTGTCAGCAAAGCTACTCTACTCCAATCACTTTCGGCCAGGGCACAAGATTGGAGATTAAGAGGGCTGCCGCACTTTCAAATTCCATCATGTATTTCAGCCATTTTGTGCCTGTTTTTCTTCCGGCCAAACCTACAACCACTCCCGCCCCACGCCCACCTACTCCCGCCCCTACCATTGCCTCCCAGCCTCTGTCTCTTAGACCTGAGGCTTGTAGACCTGCTGCCGGCGGAGCCGTGCACACTCGCGGTCTGGACTTCGCCTGCGACATCTATATCTGGGCCCCTCTGGCCGGCACCTGCGGCGTTCTCCTTCTCTCACTCGTAATCACACTCTATTGCAATCACAGGAACAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG(配列番号91)
クローン20C5.1 CD8 CD3ゼータ CAR AA 重鎖及び軽鎖
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKVSGYTLTELSMHWVRQAPGKGLEWMGGFDPEDGETIYAQKFQGRVTVTEDTSTDTAYMELSSLRSEDTAVYYCATESRGIGWPYFDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLISGASSLKSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLPPEDFATYYCQQSYSTPITFGQGTRLEIKRAAALSNSIMYFSHFVPVFLPAKPTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCNHRNRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR(配列番号92)
クローン20C5.2 HC DNA
CAGGTCCAGTTGGTCGAAAGTGGCGGTGGTGTAGTGCAGCCGGGCCGCAGTTTGAGGCTTTCCTGTGCGGCTTCAGGCTTTACTTTTTCCAGCTATGGAATGCACTGGGTGCGGCAGGCCCCCGGCAAAGGACTTGAGTGGGTGGCCGTCATTTCTTATGACGGATCAGATAAGTACTACGTGGACAGCGTCAAGGGCAGATTCACCATCTCTAGGGACAACAGTAAAAATAGACTCTACCTCCAGATGAATAGCCTCAGAGCTGAAGACACGGCCGTCTACTATTGTGCTCGGGAGCGGTATAGTGGCAGAGACTACTGGGGGCAGGGCACACTCGTTACAGTGAGTAGC(配列番号93)
クローン20C5.2 AA HC(CDRは下線)
QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSDKYYVDSVKGRFTISRDNSKNRLYLQMNSLRAEDTAVYYCARERYSGRDYWGQGTLVTVSS(配列番号94)
クローン20C5.2 HC AA CDR1:GFTFSSY(配列番号95)
クローン20C5.2 HC AA CDR2:SYDGSD(配列番号96)
クローン20C5.2 HC AA CDR3:ERYSGRDY(配列番号97)
クローン20C5.2 LC DNA
GAGATTGTTATGACCCAGAGTCCTGCGACCCTCTCAGTCAGCCCCGGGGAGCGCGCAACTTTGTCTTGCAGAGCTAGTCAGTCCGTGTCCTCTCTTCTGACATGGTACCAGCAAAAGCCCGGGCAGGCTCCGCGCCTTTTGATCTTTGGGGCTTCAACAAGAGCCACTGGGATTCCCGCACGATTCTCTGGCTCCGGGAGCGGTACTGGTTTCACCCTGACGATTAGCAGTCTCCAGAGCGAGGACTTCGCCGTATACTACTGCCAGCAGTACGATACGTGGCCATTCACTTTTGGACCAGGGACTAAAGTGGATTTTAAGCGC(配列番号98)
クローン20C5.2 AA LC(CDRは下線)
EIVMTQSPATLSVSPGERATLSCRASQSVSSLLTWYQQKPGQAPRLLIFGASTRATGIPARFSGSGSGTGFTLTISSLQSEDFAVYYCQQYDTWPFTFGPGTKVDFKR(配列番号99)
クローン20C5.2 AA LC CDR1:RASQSVSSLLT(配列番号100)
クローン20C5.2 AA LC CDR2:GASTRAT(配列番号101)
クローン20C5.2 AA LC CDR3:QQYDTWPFT(配列番号102)
クローン20C5.2 CD28T CD3ゼータ CAR DNA 重鎖及び軽鎖
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCGCAGGTCCAGTTGGTCGAAAGTGGCGGTGGTGTAGTGCAGCCGGGCCGCAGTTTGAGGCTTTCCTGTGCGGCTTCAGGCTTTACTTTTTCCAGCTATGGAATGCACTGGGTGCGGCAGGCCCCCGGCAAAGGACTTGAGTGGGTGGCCGTCATTTCTTATGACGGATCAGATAAGTACTACGTGGACAGCGTCAAGGGCAGATTCACCATCTCTAGGGACAACAGTAAAAATAGACTCTACCTCCAGATGAATAGCCTCAGAGCTGAAGACACGGCCGTCTACTATTGTGCTCGGGAGCGGTATAGTGGCAGAGACTACTGGGGGCAGGGCACACTCGTTACAGTGAGTAGCGGCGGAGGAGGGAGTGGGGGCGGTGGCTCCGGTGGAGGAGGTTCTGAGATTGTTATGACCCAGAGTCCTGCGACCCTCTCAGTCAGCCCCGGGGAGCGCGCAACTTTGTCTTGCAGAGCTAGTCAGTCCGTGTCCTCTCTTCTGACATGGTACCAGCAAAAGCCCGGGCAGGCTCCGCGCCTTTTGATCTTTGGGGCTTCAACAAGAGCCACTGGGATTCCCGCACGATTCTCTGGCTCCGGGAGCGGTACTGGTTTCACCCTGACGATTAGCAGTCTCCAGAGCGAGGACTTCGCCGTATACTACTGCCAGCAGTACGATACGTGGCCATTCACTTTTGGACCAGGGACTAAAGTGGATTTTAAGCGCGCCGCCGCTCTCGATAACGAAAAGTCAAATGGCACCATAATCCACGTCAAAGGCAAGCACCTGTGCCCTTCCCCGCTCTTCCCCGGACCCAGTAAACCATTTTGGGTGCTGGTTGTTGTGGGGGGCGTGCTGGCCTGCTATAGCCTTTTGGTCACTGTAGCCTTCATTATTTTTTGGGTCAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGGTAA(配列番号103)
クローン20C5.2 CD28T CD3ゼータ CAR AA 重鎖及び軽鎖
(シグナルペプチドは太字)
Figure 2020537635
クローン20C5.2 CD28T CD3ゼータ CAR DNA 重鎖及び軽鎖
CAGGTCCAGTTGGTCGAAAGTGGCGGTGGTGTAGTGCAGCCGGGCCGCAGTTTGAGGCTTTCCTGTGCGGCTTCAGGCTTTACTTTTTCCAGCTATGGAATGCACTGGGTGCGGCAGGCCCCCGGCAAAGGACTTGAGTGGGTGGCCGTCATTTCTTATGACGGATCAGATAAGTACTACGTGGACAGCGTCAAGGGCAGATTCACCATCTCTAGGGACAACAGTAAAAATAGACTCTACCTCCAGATGAATAGCCTCAGAGCTGAAGACACGGCCGTCTACTATTGTGCTCGGGAGCGGTATAGTGGCAGAGACTACTGGGGGCAGGGCACACTCGTTACAGTGAGTAGCGGCGGAGGAGGGAGTGGGGGCGGTGGCTCCGGTGGAGGAGGTTCTGAGATTGTTATGACCCAGAGTCCTGCGACCCTCTCAGTCAGCCCCGGGGAGCGCGCAACTTTGTCTTGCAGAGCTAGTCAGTCCGTGTCCTCTCTTCTGACATGGTACCAGCAAAAGCCCGGGCAGGCTCCGCGCCTTTTGATCTTTGGGGCTTCAACAAGAGCCACTGGGATTCCCGCACGATTCTCTGGCTCCGGGAGCGGTACTGGTTTCACCCTGACGATTAGCAGTCTCCAGAGCGAGGACTTCGCCGTATACTACTGCCAGCAGTACGATACGTGGCCATTCACTTTTGGACCAGGGACTAAAGTGGATTTTAAGCGCGCCGCCGCTCTCGATAACGAAAAGTCAAATGGCACCATAATCCACGTCAAAGGCAAGCACCTGTGCCCTTCCCCGCTCTTCCCCGGACCCAGTAAACCATTTTGGGTGCTGGTTGTTGTGGGGGGCGTGCTGGCCTGCTATAGCCTTTTGGTCACTGTAGCCTTCATTATTTTTTGGGTCAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG(配列番号105)
クローン20C5.2 CD28T CD3ゼータ CAR AA 重鎖及び軽鎖
QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSDKYYVDSVKGRFTISRDNSKNRLYLQMNSLRAEDTAVYYCARERYSGRDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEIVMTQSPATLSVSPGERATLSCRASQSVSSLLTWYQQKPGQAPRLLIFGASTRATGIPARFSGSGSGTGFTLTISSLQSEDFAVYYCQQYDTWPFTFGPGTKVDFKRAAALDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR(配列番号106)
クローン20C5.2 CD28 CD3ゼータ CAR DNA 重鎖及び軽鎖
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCGCAGGTGCAGCTCGTGGAGTCTGGCGGCGGCGTGGTCCAGCCCGGCCGGTCCCTGCGCCTGTCCTGCGCCGCCAGCGGGTTTACTTTTTCCTCCTACGGCATGCACTGGGTGCGCCAGGCTCCCGGCAAGGGCCTCGAGTGGGTCGCCGTGATCTCATACGATGGGTCAGACAAATACTATGTCGATTCTGTTAAAGGGCGGTTTACCATTTCAAGAGATAACTCTAAGAATAGGCTGTATTTGCAGATGAACAGCCTGAGGGCTGAAGATACCGCAGTGTACTATTGCGCTAGGGAGCGGTATAGTGGCCGCGATTACTGGGGACAGGGTACACTGGTGACCGTGAGCTCTGGGGGTGGCGGAAGCGGGGGTGGCGGAAGCGGCGGAGGGGGTAGTGAAATTGTGATGACCCAGTCTCCGGCTACACTTTCAGTCTCCCCTGGGGAGAGAGCTACACTGTCATGCAGAGCGTCCCAGTCCGTCTCTTCTCTCCTTACCTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCCAGGCTCCTCGACTGCTGATCTTCGGTGCCTCCACAAGGGCGACCGGGATTCCAGCCCGCTTCTCAGGTTCTGGGAGCGGAACTGGTTTCACTTTGACAATCAGTTCACTGCAGTCAGAGGATTTCGCCGTGTACTACTGCCAGCAATACGACACATGGCCATTCACTTTCGGACCCGGTACCAAAGTCGATTTCAAGAGAGCCGCGGCCATCGAGGTTATGTACCCACCACCATATCTGGACAATGAAAAAAGCAATGGAACCATTATCCATGTGAAGGGTAAACACCTCTGCCCTAGCCCACTTTTCCCTGGCCCATCAAAGCCCTTCTGGGTCTTGGTGGTCGTGGGGGGTGTGCTGGCCTGTTACAGCCTTCTGGTGACGGTTGCTTTCATTATCTTCTGGGTTAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGGTAA(配列番号107)
クローン20C5.2 CD28 CD3ゼータ CAR AA 重鎖及び軽鎖
(シグナルペプチドは太字)
Figure 2020537635
クローン20C5.2 CD28 CD3ゼータ CAR DNA 重鎖及び軽鎖
CAGGTGCAGCTCGTGGAGTCTGGCGGCGGCGTGGTCCAGCCCGGCCGGTCCCTGCGCCTGTCCTGCGCCGCCAGCGGGTTTACTTTTTCCTCCTACGGCATGCACTGGGTGCGCCAGGCTCCCGGCAAGGGCCTCGAGTGGGTCGCCGTGATCTCATACGATGGGTCAGACAAATACTATGTCGATTCTGTTAAAGGGCGGTTTACCATTTCAAGAGATAACTCTAAGAATAGGCTGTATTTGCAGATGAACAGCCTGAGGGCTGAAGATACCGCAGTGTACTATTGCGCTAGGGAGCGGTATAGTGGCCGCGATTACTGGGGACAGGGTACACTGGTGACCGTGAGCTCTGGGGGTGGCGGAAGCGGGGGTGGCGGAAGCGGCGGAGGGGGTAGTGAAATTGTGATGACCCAGTCTCCGGCTACACTTTCAGTCTCCCCTGGGGAGAGAGCTACACTGTCATGCAGAGCGTCCCAGTCCGTCTCTTCTCTCCTTACCTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCCAGGCTCCTCGACTGCTGATCTTCGGTGCCTCCACAAGGGCGACCGGGATTCCAGCCCGCTTCTCAGGTTCTGGGAGCGGAACTGGTTTCACTTTGACAATCAGTTCACTGCAGTCAGAGGATTTCGCCGTGTACTACTGCCAGCAATACGACACATGGCCATTCACTTTCGGACCCGGTACCAAAGTCGATTTCAAGAGAGCCGCGGCCATCGAGGTTATGTACCCACCACCATATCTGGACAATGAAAAAAGCAATGGAACCATTATCCATGTGAAGGGTAAACACCTCTGCCCTAGCCCACTTTTCCCTGGCCCATCAAAGCCCTTCTGGGTCTTGGTGGTCGTGGGGGGTGTGCTGGCCTGTTACAGCCTTCTGGTGACGGTTGCTTTCATTATCTTCTGGGTTAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG(配列番号109)
クローン20C5.2 CD28 CD3ゼータ CAR AA 重鎖及び軽鎖
QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSDKYYVDSVKGRFTISRDNSKNRLYLQMNSLRAEDTAVYYCARERYSGRDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEIVMTQSPATLSVSPGERATLSCRASQSVSSLLTWYQQKPGQAPRLLIFGASTRATGIPARFSGSGSGTGFTLTISSLQSEDFAVYYCQQYDTWPFTFGPGTKVDFKRAAAIEVMYPPPYLDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR(配列番号110)
クローン20C5.2 CD8 CD3ゼータ CAR DNA 重鎖及び軽鎖
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCGCAGGTGCAGTTGGTTGAATCAGGAGGGGGTGTGGTGCAACCCGGTCGGTCACTGCGCCTCAGTTGTGCTGCTTCCGGGTTTACTTTCAGCTCATATGGGATGCACTGGGTACGGCAGGCTCCAGGTAAAGGCTTGGAATGGGTGGCGGTGATCAGCTATGACGGCTCTGACAAATATTATGTGGACTCCGTGAAAGGCAGATTCACCATCAGTCGAGACAACTCAAAGAATAGACTCTACTTGCAGATGAATAGCCTCCGGGCCGAAGATACTGCAGTCTATTATTGCGCCCGGGAGCGCTACAGTGGAAGAGACTATTGGGGGCAAGGAACTCTTGTCACAGTCTCATCTGGCGGCGGCGGCAGCGGTGGGGGCGGATCTGGCGGGGGCGGCAGCGAAATCGTTATGACTCAGAGTCCTGCCACACTGAGCGTTAGCCCTGGTGAGAGAGCAACACTTAGCTGCAGAGCTAGTCAGAGTGTTTCCAGTCTTTTGACATGGTACCAACAGAAGCCCGGTCAAGCTCCACGACTGCTCATCTTCGGTGCATCCACCCGCGCAACCGGGATACCCGCCCGGTTTTCCGGTTCTGGAAGTGGCACAGGATTCACGCTCACCATTTCTTCTCTGCAGTCTGAAGACTTTGCCGTGTATTACTGCCAGCAGTACGATACCTGGCCCTTTACCTTTGGCCCAGGTACTAAAGTGGATTTTAAACGAGCTGCTGCACTTTCCAATAGTATTATGTACTTTTCACATTTTGTGCCCGTGTTCCTGCCTGCGAAGCCTACGACAACCCCAGCCCCTAGGCCGCCCACACCGGCCCCAACTATTGCCTCCCAGCCATTGTCTCTGAGACCCGAAGCTTGCAGACCTGCTGCTGGAGGCGCCGTTCACACCCGAGGATTGGATTTCGCATGTGACATTTACATCTGGGCCCCTTTGGCCGGAACCTGCGGTGTGCTGCTGCTGTCACTCGTGATTACACTTTACTGCAACCACCGAAACAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGGTAA(配列番号111)
クローン20C5.2 CD8 CD3ゼータ CAR AA 重鎖及び軽鎖
(シグナルペプチドは太字)
Figure 2020537635
クローン20C5.2 CD8 CD3ゼータ CAR DNA 重鎖及び軽鎖
CAGGTGCAGTTGGTTGAATCAGGAGGGGGTGTGGTGCAACCCGGTCGGTCACTGCGCCTCAGTTGTGCTGCTTCCGGGTTTACTTTCAGCTCATATGGGATGCACTGGGTACGGCAGGCTCCAGGTAAAGGCTTGGAATGGGTGGCGGTGATCAGCTATGACGGCTCTGACAAATATTATGTGGACTCCGTGAAAGGCAGATTCACCATCAGTCGAGACAACTCAAAGAATAGACTCTACTTGCAGATGAATAGCCTCCGGGCCGAAGATACTGCAGTCTATTATTGCGCCCGGGAGCGCTACAGTGGAAGAGACTATTGGGGGCAAGGAACTCTTGTCACAGTCTCATCTGGCGGCGGCGGCAGCGGTGGGGGCGGATCTGGCGGGGGCGGCAGCGAAATCGTTATGACTCAGAGTCCTGCCACACTGAGCGTTAGCCCTGGTGAGAGAGCAACACTTAGCTGCAGAGCTAGTCAGAGTGTTTCCAGTCTTTTGACATGGTACCAACAGAAGCCCGGTCAAGCTCCACGACTGCTCATCTTCGGTGCATCCACCCGCGCAACCGGGATACCCGCCCGGTTTTCCGGTTCTGGAAGTGGCACAGGATTCACGCTCACCATTTCTTCTCTGCAGTCTGAAGACTTTGCCGTGTATTACTGCCAGCAGTACGATACCTGGCCCTTTACCTTTGGCCCAGGTACTAAAGTGGATTTTAAACGAGCTGCTGCACTTTCCAATAGTATTATGTACTTTTCACATTTTGTGCCCGTGTTCCTGCCTGCGAAGCCTACGACAACCCCAGCCCCTAGGCCGCCCACACCGGCCCCAACTATTGCCTCCCAGCCATTGTCTCTGAGACCCGAAGCTTGCAGACCTGCTGCTGGAGGCGCCGTTCACACCCGAGGATTGGATTTCGCATGTGACATTTACATCTGGGCCCCTTTGGCCGGAACCTGCGGTGTGCTGCTGCTGTCACTCGTGATTACACTTTACTGCAACCACCGAAACAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG(配列番号113)
クローン20C5.2 CD8 CD3ゼータ CAR AA 重鎖及び軽鎖
QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSDKYYVDSVKGRFTISRDNSKNRLYLQMNSLRAEDTAVYYCARERYSGRDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEIVMTQSPATLSVSPGERATLSCRASQSVSSLLTWYQQKPGQAPRLLIFGASTRATGIPARFSGSGSGTGFTLTISSLQSEDFAVYYCQQYDTWPFTFGPGTKVDFKRAAALSNSIMYFSHFVPVFLPAKPTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCNHRNRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR(配列番号114)
クローン20C5.2 CD28T CD3ゼータ CAR DNA 重鎖及び軽鎖
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCGGAGATTGTGATGACCCAGTCCCCTGCTACCCTGTCCGTCAGTCCGGGCGAGAGAGCCACCTTGTCATGCCGGGCCAGCCAGTCCGTCAGCAGTCTCCTGACTTGGTATCAGCAAAAACCAGGGCAGGCACCGCGGCTTTTGATTTTTGGTGCAAGCACACGCGCCACTGGCATTCCAGCTAGGTTTTCTGGAAGTGGATCTGGGACAGGCTTCACTCTGACAATCAGTAGCCTGCAGAGTGAGGACTTTGCTGTTTACTACTGTCAACAGTACGACACCTGGCCATTCACATTCGGGCCCGGCACCAAGGTCGACTTCAAGAGGGGCGGTGGAGGTTCAGGTGGTGGCGGGTCAGGCGGCGGTGGGTCTCAGGTTCAACTGGTGGAATCAGGTGGCGGCGTTGTCCAACCGGGGCGATCACTTCGACTTTCCTGTGCTGCCTCAGGCTTTACTTTTTCATCCTATGGGATGCACTGGGTTCGGCAGGCTCCCGGAAAAGGACTCGAGTGGGTTGCAGTGATCTCTTACGATGGCTCAGACAAGTATTATGTGGACTCAGTCAAGGGGAGATTCACAATAAGCCGAGACAACTCCAAAAACCGGCTTTATCTCCAGATGAACAGCCTTAGAGCGGAAGATACCGCGGTATACTACTGTGCCCGCGAGAGGTATTCCGGCAGAGACTACTGGGGACAGGGCACACTGGTCACCGTGAGTTCTGCCGCAGCGCTCGATAACGAAAAGAGCAACGGAACCATTATCCACGTTAAGGGCAAGCACCTGTGCCCCAGTCCCCTCTTCCCAGGACCATCTAAACCCTTCTGGGTTCTGGTAGTAGTTGGAGGGGTCCTTGCATGTTACTCCCTTTTGGTCACCGTCGCCTTCATTATTTTCTGGGTGAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGGTAA(配列番号115)
クローン20C5.2 CD28T CD3ゼータ CAR AA 重鎖及び軽鎖
(シグナルペプチドは太字)
Figure 2020537635
クローン20C5.2 CD28T CD3ゼータ CAR DNA 重鎖及び軽鎖
GAGATTGTGATGACCCAGTCCCCTGCTACCCTGTCCGTCAGTCCGGGCGAGAGAGCCACCTTGTCATGCCGGGCCAGCCAGTCCGTCAGCAGTCTCCTGACTTGGTATCAGCAAAAACCAGGGCAGGCACCGCGGCTTTTGATTTTTGGTGCAAGCACACGCGCCACTGGCATTCCAGCTAGGTTTTCTGGAAGTGGATCTGGGACAGGCTTCACTCTGACAATCAGTAGCCTGCAGAGTGAGGACTTTGCTGTTTACTACTGTCAACAGTACGACACCTGGCCATTCACATTCGGGCCCGGCACCAAGGTCGACTTCAAGAGGGGCGGTGGAGGTTCAGGTGGTGGCGGGTCAGGCGGCGGTGGGTCTCAGGTTCAACTGGTGGAATCAGGTGGCGGCGTTGTCCAACCGGGGCGATCACTTCGACTTTCCTGTGCTGCCTCAGGCTTTACTTTTTCATCCTATGGGATGCACTGGGTTCGGCAGGCTCCCGGAAAAGGACTCGAGTGGGTTGCAGTGATCTCTTACGATGGCTCAGACAAGTATTATGTGGACTCAGTCAAGGGGAGATTCACAATAAGCCGAGACAACTCCAAAAACCGGCTTTATCTCCAGATGAACAGCCTTAGAGCGGAAGATACCGCGGTATACTACTGTGCCCGCGAGAGGTATTCCGGCAGAGACTACTGGGGACAGGGCACACTGGTCACCGTGAGTTCTGCCGCAGCGCTCGATAACGAAAAGAGCAACGGAACCATTATCCACGTTAAGGGCAAGCACCTGTGCCCCAGTCCCCTCTTCCCAGGACCATCTAAACCCTTCTGGGTTCTGGTAGTAGTTGGAGGGGTCCTTGCATGTTACTCCCTTTTGGTCACCGTCGCCTTCATTATTTTCTGGGTGAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG(配列番号117)
クローン20C5.2 CD28T CD3ゼータ CAR AA 重鎖及び軽鎖
EIVMTQSPATLSVSPGERATLSCRASQSVSSLLTWYQQKPGQAPRLLIFGASTRATGIPARFSGSGSGTGFTLTISSLQSEDFAVYYCQQYDTWPFTFGPGTKVDFKRGGGGSGGGGSGGGGSQVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSDKYYVDSVKGRFTISRDNSKNRLYLQMNSLRAEDTAVYYCARERYSGRDYWGQGTLVTVSSAAALDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR(配列番号118)
クローン20C5.2 CD28 CD3ゼータ CAR DNA 重鎖及び軽鎖
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCGGAGATCGTCATGACACAGAGTCCAGCTACCCTGAGCGTGTCCCCTGGAGAGAGAGCCACCCTGTCCTGTAGGGCTAGTCAGAGTGTGTCCAGCCTCCTCACCTGGTATCAACAGAAGCCTGGTCAAGCTCCCCGGCTGCTTATCTTCGGGGCCAGCACGCGAGCCACAGGCATCCCGGCCAGATTCTCTGGCTCTGGCAGTGGCACCGGGTTCACTCTCACGATCTCATCCCTGCAGTCAGAGGATTTCGCTGTGTATTACTGTCAGCAGTACGATACATGGCCCTTCACCTTCGGCCCGGGCACAAAAGTAGATTTCAAGCGCGGCGGCGGGGGTAGTGGGGGCGGGGGATCAGGAGGAGGGGGCTCCCAAGTACAGCTGGTTGAGAGCGGCGGCGGGGTGGTTCAGCCCGGGCGCAGCCTCAGGCTGAGTTGCGCAGCATCAGGATTCACATTCAGTTCTTATGGAATGCATTGGGTCAGACAGGCTCCCGGGAAGGGCCTTGAATGGGTGGCAGTCATTAGCTACGACGGAAGCGATAAGTACTATGTGGACTCAGTTAAAGGGAGATTTACTATCAGCCGCGACAATTCCAAAAACAGATTGTATTTGCAGATGAACTCCCTCAGGGCGGAGGACACTGCTGTATATTACTGCGCACGAGAGAGATACTCCGGCCGAGACTATTGGGGCCAAGGAACATTGGTAACTGTGAGCTCCGCCGCAGCTATTGAGGTCATGTACCCCCCACCTTATCTCGATAATGAGAAGAGTAATGGGACTATAATTCACGTAAAGGGCAAACACCTGTGCCCTTCCCCGCTGTTTCCAGGTCCAAGTAAGCCGTTCTGGGTCCTGGTTGTGGTGGGAGGGGTGCTGGCCTGCTATTCTCTGTTGGTTACCGTGGCCTTTATCATTTTCTGGGTGAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGGTAA(配列番号119)
クローン20C5.2 CD28 CD3ゼータ CAR AA 重鎖及び軽鎖
(シグナルペプチドは太字)
Figure 2020537635
クローン20C5.2 CD28 CD3ゼータ CAR DNA 重鎖及び軽鎖
GAGATCGTCATGACACAGAGTCCAGCTACCCTGAGCGTGTCCCCTGGAGAGAGAGCCACCCTGTCCTGTAGGGCTAGTCAGAGTGTGTCCAGCCTCCTCACCTGGTATCAACAGAAGCCTGGTCAAGCTCCCCGGCTGCTTATCTTCGGGGCCAGCACGCGAGCCACAGGCATCCCGGCCAGATTCTCTGGCTCTGGCAGTGGCACCGGGTTCACTCTCACGATCTCATCCCTGCAGTCAGAGGATTTCGCTGTGTATTACTGTCAGCAGTACGATACATGGCCCTTCACCTTCGGCCCGGGCACAAAAGTAGATTTCAAGCGCGGCGGCGGGGGTAGTGGGGGCGGGGGATCAGGAGGAGGGGGCTCCCAAGTACAGCTGGTTGAGAGCGGCGGCGGGGTGGTTCAGCCCGGGCGCAGCCTCAGGCTGAGTTGCGCAGCATCAGGATTCACATTCAGTTCTTATGGAATGCATTGGGTCAGACAGGCTCCCGGGAAGGGCCTTGAATGGGTGGCAGTCATTAGCTACGACGGAAGCGATAAGTACTATGTGGACTCAGTTAAAGGGAGATTTACTATCAGCCGCGACAATTCCAAAAACAGATTGTATTTGCAGATGAACTCCCTCAGGGCGGAGGACACTGCTGTATATTACTGCGCACGAGAGAGATACTCCGGCCGAGACTATTGGGGCCAAGGAACATTGGTAACTGTGAGCTCCGCCGCAGCTATTGAGGTCATGTACCCCCCACCTTATCTCGATAATGAGAAGAGTAATGGGACTATAATTCACGTAAAGGGCAAACACCTGTGCCCTTCCCCGCTGTTTCCAGGTCCAAGTAAGCCGTTCTGGGTCCTGGTTGTGGTGGGAGGGGTGCTGGCCTGCTATTCTCTGTTGGTTACCGTGGCCTTTATCATTTTCTGGGTGAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG(配列番号121)
クローン20C5.2 CD28 CD3ゼータ CAR AA 重鎖及び軽鎖
EIVMTQSPATLSVSPGERATLSCRASQSVSSLLTWYQQKPGQAPRLLIFGASTRATGIPARFSGSGSGTGFTLTISSLQSEDFAVYYCQQYDTWPFTFGPGTKVDFKRGGGGSGGGGSGGGGSQVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSDKYYVDSVKGRFTISRDNSKNRLYLQMNSLRAEDTAVYYCARERYSGRDYWGQGTLVTVSSAAAIEVMYPPPYLDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR(配列番号122)
クローン20C5.2 CD8 CD3ゼータ CAR DNA 重鎖及び軽鎖
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCGGAAATAGTGATGACTCAGTCCCCGGCCACCCTCAGCGTGTCCCCCGGGGAGCGAGCGACCCTGTCATGCAGGGCTTCCCAGAGTGTCAGCTCCCTGCTCACTTGGTATCAGCAAAAGCCGGGGCAGGCTCCCCGCCTCCTCATCTTCGGGGCATCAACTAGGGCCACCGGCATTCCTGCAAGATTTTCCGGGTCTGGCAGCGGCACCGGCTTCACCCTTACCATTAGCTCTCTGCAGTCTGAGGACTTCGCCGTTTACTATTGTCAGCAGTATGATACTTGGCCCTTTACCTTCGGTCCCGGAACTAAGGTGGACTTCAAGCGCGGGGGGGGTGGATCTGGAGGTGGTGGCTCCGGGGGCGGTGGAAGCCAGGTCCAGTTGGTTGAGAGCGGCGGCGGAGTGGTGCAGCCCGGGAGGTCCTTGCGGCTGAGCTGTGCAGCCTCCGGTTTTACTTTTTCTAGCTATGGAATGCATTGGGTAAGACAGGCTCCCGGAAAAGGCCTCGAGTGGGTGGCGGTCATTAGCTATGATGGATCTGATAAATACTATGTGGACTCAGTTAAGGGGCGCTTCACAATCTCAAGAGACAATAGCAAAAATAGACTGTACCTGCAGATGAATAGTCTGCGCGCCGAGGACACTGCCGTGTACTACTGCGCCCGCGAGAGATACAGCGGACGGGATTACTGGGGCCAGGGTACCCTCGTAACGGTGTCCTCCGCTGCCGCCCTTAGCAACAGCATTATGTACTTTTCTCATTTCGTGCCAGTCTTTCTCCCAGCAAAGCCCACCACTACCCCGGCCCCCAGGCCGCCTACTCCTGCCCCCACTATCGCGTCTCAGCCTCTCTCCTTGCGGCCCGAGGCCTGCCGGCCAGCCGCAGGGGGCGCCGTACATACTCGGGGTTTGGATTTCGCTTGCGACATATATATTTGGGCCCCCCTCGCCGGCACATGTGGAGTGCTGCTCCTGAGTCTCGTTATAACCCTCTATTGCAACCATAGAAACAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGGTAA(配列番号123)
クローン20C5.2 CD8 CD3ゼータ CAR AA 重鎖及び軽鎖
(シグナルペプチドは太字)
Figure 2020537635
クローン20C5.2 CD8 CD3ゼータ CAR DNA 重鎖及び軽鎖
GAAATAGTGATGACTCAGTCCCCGGCCACCCTCAGCGTGTCCCCCGGGGAGCGAGCGACCCTGTCATGCAGGGCTTCCCAGAGTGTCAGCTCCCTGCTCACTTGGTATCAGCAAAAGCCGGGGCAGGCTCCCCGCCTCCTCATCTTCGGGGCATCAACTAGGGCCACCGGCATTCCTGCAAGATTTTCCGGGTCTGGCAGCGGCACCGGCTTCACCCTTACCATTAGCTCTCTGCAGTCTGAGGACTTCGCCGTTTACTATTGTCAGCAGTATGATACTTGGCCCTTTACCTTCGGTCCCGGAACTAAGGTGGACTTCAAGCGCGGGGGGGGTGGATCTGGAGGTGGTGGCTCCGGGGGCGGTGGAAGCCAGGTCCAGTTGGTTGAGAGCGGCGGCGGAGTGGTGCAGCCCGGGAGGTCCTTGCGGCTGAGCTGTGCAGCCTCCGGTTTTACTTTTTCTAGCTATGGAATGCATTGGGTAAGACAGGCTCCCGGAAAAGGCCTCGAGTGGGTGGCGGTCATTAGCTATGATGGATCTGATAAATACTATGTGGACTCAGTTAAGGGGCGCTTCACAATCTCAAGAGACAATAGCAAAAATAGACTGTACCTGCAGATGAATAGTCTGCGCGCCGAGGACACTGCCGTGTACTACTGCGCCCGCGAGAGATACAGCGGACGGGATTACTGGGGCCAGGGTACCCTCGTAACGGTGTCCTCCGCTGCCGCCCTTAGCAACAGCATTATGTACTTTTCTCATTTCGTGCCAGTCTTTCTCCCAGCAAAGCCCACCACTACCCCGGCCCCCAGGCCGCCTACTCCTGCCCCCACTATCGCGTCTCAGCCTCTCTCCTTGCGGCCCGAGGCCTGCCGGCCAGCCGCAGGGGGCGCCGTACATACTCGGGGTTTGGATTTCGCTTGCGACATATATATTTGGGCCCCCCTCGCCGGCACATGTGGAGTGCTGCTCCTGAGTCTCGTTATAACCCTCTATTGCAACCATAGAAACAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG(配列番号125)
クローン20C5.2 CD8 CD3ゼータ CAR AA 重鎖及び軽鎖
EIVMTQSPATLSVSPGERATLSCRASQSVSSLLTWYQQKPGQAPRLLIFGASTRATGIPARFSGSGSGTGFTLTISSLQSEDFAVYYCQQYDTWPFTFGPGTKVDFKRGGGGSGGGGSGGGGSQVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSDKYYVDSVKGRFTISRDNSKNRLYLQMNSLRAEDTAVYYCARERYSGRDYWGQGTLVTVSSAAALSNSIMYFSHFVPVFLPAKPTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCNHRNRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR(配列番号126)
CARシグナルペプチドDNA
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCG(配列番号127)
CARシグナルペプチド:MALPVTALLLPLALLLHAARP(配列番号128)
scFv G4SリンカーDNA
GGCGGTGGAGGCTCCGGAGGGGGGGGCTCTGGCGGAGGGGGCTCC(配列番号129)
scFv G4sリンカー:GGGGSGGGGSGGGGS(配列番号130)
scFv Whitlowリンカー DNA
GGGTCTACATCCGGCTCCGGGAAGCCCGGAAGTGGCGAAGGTAGTACAAAGGGG(配列番号131)
scFv Whitlowリンカー:GSTSGSGKPGSGEGSTKG(配列番号132)
CD28 AA 細胞外ドメイン
MLRLLLALNLFPSIQVTGNKILVKQSPMLVAYDNAVNLSCKYSYNLFSREFRASLHKGLDSAVEVCVVYGNYSQQLQVYSKTGFNCDGKLGNESVTFYLQNLYVNQTDIYFCKIEVMYPPPYLDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKP(配列番号133)
GX(配列番号134)
(配列番号135)
101112DY(配列番号136)
ASQXLX11(配列番号137)
ASX(配列番号138)
QQXPXT(配列番号139)
4−1BB 核酸配列(細胞内ドメイン)
AAGCGCGGCAGGAAGAAGCTCCTCTACATTTTTAAGCAGCCTTTTATGAGGCCCGTACAGACAACACAGGAGGAAGATGGCTGTAGCTGCAGATTTCCCGAGGAGGAGGAAGGTGGGTGCGAGCTG(配列番号140)
4−1BB AA(細胞内ドメイン)
KRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCEL(配列番号141)
OX40 AA
RRDQRLPPDAHKPPGGGSFRTPIQEEQADAHSTLAKI(配列番号142)
リーダー配列 AA
MALPVTALLLPLALLLHAARP(配列番号143)
追加のG4Sリンカー:GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS(配列番号144)
CD3ゼータ変異体 AA
RVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR(配列番号145)
Axi Cel(KTE−C19) DNA(配列番号146)
Atgcttctcctggtgacaagccttctgctctgtgagttaccacacccagcattcctcctgatcccagacatccagatgacacagactacatcctccctgtctgcctctctgggagacagagtcaccatcagttgcagggcaagtcaggacattagtaaatatttaaattggtatcagcagaaaccagatggaactgttaaactcctgatctaccatacatcaagattacactcaggagtcccatcaaggttcagtggcagtgggtctggaacagattattctctcaccattagcaacctggagcaagaagatattgccacttacttttgccaacagggtaatacgcttccgtacacgttcggaggggggactaagttggaaataacaggctccacctctggatccggcaagcccggatctggcgagggatccaccaagggcgaggtgaaactgcaggagtcaggacctggcctggtggcgccctcacagagcctgtccgtcacatgcactgtctcaggggtctcattacccgactatggtgtaagctggattcgccagcctccacgaaagggtctggagtggctgggagtaatatggggtagtgaaaccacatactataattcagctctcaaatccagactgaccatcatcaaggacaactccaagagccaagttttcttaaaaatgaacagtctgcaaactgatgacacagccatttactactgtgccaaacattattactacggtggtagctatgctatggactactggggtcaaggaacctcagtcaccgtctcctcagcggccgcaattgaagttatgtatcctcctccttacctagacaatgagaagagcaatggaaccattatccatgtgaaagggaaacacctttgtccaagtcccctatttcccggaccttctaagcccttttgggtgctggtggtggttgggggagtcctggcttgctatagcttgctagtaacagtggcctttattattttctgggtgaggagtaagaggagcaggctcctgcacagtgactacatgaacatgactccccgccgccccgggcccacccgcaagcattaccagccctatgccccaccacgcgacttcgcagcctatcgctccagagtgaagttcagcaggagcgcagacgcccccgcgtaccagcagggccagaaccagctctataacgagctcaatctaggacgaagagaggagtacgatgttttggacaagagacgtggccgggaccctgagatggggggaaagccgagaaggaagaaccctcaggaaggcctgtacaatgaactgcagaaagataagatggcggaggcctacagtgagattgggatgaaaggcgagcgccggaggggcaaggggcacgatggcctttaccagggtctcagtacagccaccaaggacacctacgacgcccttcacatgcaggccctgccccctcgc
Axi Cel(KTE−C19) AA(配列番号147)
MLLLVTSLLLCELPHPAFLLIPDIQMTQTTSSLSASLGDRVTISCRASQDISKYLNWYQQKPDGTVKLLIYHTSRLHSGVPSRFSGSGSGTDYSLTISNLEQEDIATYFCQQGNTLPYTFGGGTKLEITGSTSGSGKPGSGEGSTKGEVKLQESGPGLVAPSQSLSVTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPRKGLEWLGVIWGSETTYYNSALKSRLTIIKDNSKSQVFLKMNSLQTDDTAIYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTSVTVSSAAAIEVMYPPPYLDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR
ヒト化抗CD19 CAR DNA(配列番号148)
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCGGATATTCAAATGACCCAGTCCCCGTCCTCCCTGAGTGCCTCCGTCGGTGACCGTGTTACGATTACCTGCCGTGCGAGCCAAGACATCTCTAAATACCTGAACTGGTATCAGCAAAAACCGGATCAGGCACCGAAACTGCTGATCAAACATACCTCACGTCTGCACTCGGGTGTGCCGAGCCGCTTTAGTGGTTCCGGCTCAGGTACCGATTACACCCTGACGATCAGCTCTCTGCAGCCGGAAGACTTTGCCACGTATTACTGCCAGCAAGGTAATACCCTGCCGTATACGTTCGGCCAAGGTACCAAACTGGAAATCAAAGGCTCGACGAGCGGCTCTGGTAAACCGGGCTCTGGTGAAGGCAGTACCAAAGGTGAAGTGCAGCTGGTTGAAAGCGGTGGTGGTCTGGTTCAACCGGGTCGTTCCCTGCGTCTGTCATGTACGGCGAGTGGTGTCTCCCTGCCGGACTATGGCGTGTCCTGGATTCGTCAGCCGCCGGGTAAAGGCCTGGAATGGATTGGTGTCATCTGGGGCAGTGAAACCACGTATTACAACTCGGCCCTGAAAAGCCGTTTCACCATCTCTCGCGATAACAGTAAAAATACGCTGTACCTGCAGATGAATAGCCTGCGCGCGGAAGACACCGCCGTTTACTACTGCGCAAAACATTACTACTACGGTGGCAGCTATGCTATGGATTACTGGGGTCAAGGCACGCTGGTCACCGTTTCGTCAGCCGCTGCCCTTGATAATGAAAAGTCAAACGGAACAATCATTCACGTGAAGGGCAAGCACCTCTGTCCGTCACCCTTGTTCCCTGGTCCATCCAAGCCATTCTGGGTGTTGGTCGTAGTGGGTGGAGTCCTCGCTTGTTACTCTCTGCTCGTCACCGTGGCTTTTATAATCTTCTGGGTTAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCAcctagg
ヒト化抗CD19 CAR AA(配列番号149)
MALPVTALLLPLALLLHAARPDIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDISKYLNWYQQKPDQAPKLLIKHTSRLHSGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYYCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGSTSGSGKPGSGEGSTKGEVQLVESGGGLVQPGRSLRLSCTASGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYNSALKSRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSAAALDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR
完全ヒト抗CD19 CAR DNA(配列番号150)
Atggccctgcctgtgacagctctgctgctgcccctggccctgctgctgcatgccgccagacctgagatcgtgctgacccagtctcccggcaccctgtctctcagcccaggagagagagccaccctgagctgcagagccagccagagcgtgtccagcagctacctggcctggtatcagcagaagcccggacaggcccccagactgctgatctacggcgccagctctagagccaccggcatccccgacagattcagcggcagcggcagtggcaccgacttcaccctgaccatcagcagactggaacccgaggacttcgccgtgtactactgccagcagtacggcagcagccggttcaccttcggccctggcaccaaggtggacatcaagggcagcacctccggcagcggcaagcctggctctggcgagggctctaccaagggccaggtgcagctggtgcagtctggcgccgaagtgaagaaacccggctctagcgtgaaggtgtcctgcaaggacagcggcggcaccttcagcagctacgccatcagctgggtgcgccaggccccaggacaggggctggaatggatgggcggcatcatccccatcttcggcaccaccaactacgcccagcagttccagggcagagtgaccatcaccgccgacgagagcaccagcaccgcctacatggaactgagcagcctgcggagcgaggacacagccgtgtattactgtgcccgcgaggccgtggccgccgactggctggatccttggggacagggcaccctggtgacagtgtccagcttcgtgcccgtgttcctgcccgccaagcctaccaccacccctgcccctagacctcccaccccagccccaacaatcgccagccagcctctgtccctgcggcccgaagcctgtagacctgctgccggcggagccgtgcacaccagaggcctggacttcgcctgcgatatctacatctgggcccctctggccggcacctgtggcgtgctgctgctgagcctggtgatcaccctgtactgcaaccaccggaacagaagcaagcggagccggctgctgcacagcgactacatgaacatgaccccaagacggcctggccccacccggaagcactaccagccttacgcccctcccagagacttcgccgcctaccggtccagagtgaagttcagcagatccgccgacgcccctgcctaccagcagggacagaaccagctgtacaacgagctgaacctgggcagacgggaagagtacgacgtgctggacaagcggagaggccgggaccccgagatgggcggaaagcccagacggaagaacccccaggaaggcctgtataacgaactgcagaaagacaagatggccgaggcctacagcgagatcggcatgaagggcgagcggaggcgcggcaagggccacgatggcctgtaccagggcctgagcaccgccaccaaggacacctacgacgccctgcacatgcaggccctgccccccaga
完全ヒト抗CD19 CAR AA(配列番号151)
MALPVTALLLPLALLLHAARPEIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQYGSSRFTFGPGTKVDIKGSTSGSGKPGSGEGSTKGQVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKDSGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTTNYAQQFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCAREAVAADWLDPWGQGTLVTVSSFVPVFLPAKPTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCNHRNRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR
MAGE A3/A6 TCR DNA(配列番号152)
atggcatgccctggcttcctgtgggcacttgtgatctccacctgtcttgaatttagcatggctcagacagtcactcagtctcaaccagagatgtctgtgcaggaggcagagaccgtgaccctgagctgcacatatgacaccagtgagagtgattattatttattctggtacaagcagcctcccagcaggcagatgattctcgttattcgccaagaagcttataagcaacagaatgcaacagagaatcgtttctctgtgaacttccagaaagcagccaaatccttcagtctcaagatctcagactcacagctgggggatgccgcgatgtatttctgtgctctccggagctcaggaacctacaaatacatctttggaacaggcaccaggctgaaggttttagcaaatatccagaaccctgaacctgctgtgtaccagttaaaagatcctcggtctcaggacagcaccctctgcctgttcaccgactttgactcccaaatcaatgtgccgaaaaccatggaatctggaacgttcatcactgacaaaactgtgctggacatgaaagctatggattccaagagcaatggggccattgcctggagcaaccagacaagcttcacctgccaagatatcttcaaagagaccaacgccacctaccccagttcagacgttccctgtgatgccacgttgactgagaaaagctttgaaacagatatgaacctaaactttcaaaacctgtcagttatgggactccgaatcctcctgctgaaagtagccggatttaacctgctcatgacgctgaggctgtggtccagtcgggccaagcggtccggatccggagccaccaacttcagcctgctgaagcaggccggcgacgtggaggagaaccccggccccatgggcaccaggctcctcttctgggtggccttctgtctcctgggggcagatcacacaggagctggagtctcccagtcccccagtaacaaggtcacagagaagggaaaggatgtagagctcaggtgtgatccaatttcaggtcatactgccctttactggtaccgacagagcctggggcagggcctggagtttttaatttacttccaaggcaacagtgcaccagacaaatcagggctgcccagtgatcgcttctctgcagagaggactgggggatccgtctccactctgacgatccagcgcacacagcaggaggactcggccgtgtatctctgtgccagcatccggacagggccttttttctctggaaacaccatatattttggagagggaagttggctcactgttgtagaggacctgagaaacgtgaccccacccaaggtctccttgtttgagccatcaaaagcagagattgcaaacaaacaaaaggctaccctcgtgtgcttggccaggggcttcttccctgaccacgtggagctgagctggtgggtgaatggcaaggaggtccacagtggggtcagcacggaccctcaggcctacaaggagagcaattatagctactgcctgagcagccgcctgagggtctctgctaccttctggcacaatcctcgaaaccacttccgctgccaagtgcagttccatgggctttcagaggaggacaagtggccagagggctcacccaaacctgtcacacagaacatcagtgcagaggcctggggccgagcagactgtggaatcacttcagcatcctatcatcagggggttctgtctgcaaccatcctctatgagatcctactggggaaggccaccctatatgctgtgctggtcagtggcctggtgctgatggctatggtcaaaagaaagaactcatga
MAGE A3/A6 TCR AA(配列番号153)
M A C P G F L W A L V I S T C L E F S M A Q T V T Q S Q P E M S V Q E A E T V T L S C T Y D T S E S D Y Y L F W Y K Q P P S R Q M I L V I R Q E A Y K Q Q N A T E N R F S V N F Q K A A K S F S L K I S D S Q L G D A A M Y F C A L R S S G T Y K Y I F G T G T R L K V L A N I Q N P E P A V Y Q L K D P R S Q D S T L C L F T D F D S Q I N V P K T M E S G T F I T D K T V L D M K A M D S K S N G A I A W S N Q T S F T C Q D I F K E T N A T Y P S S D V P C D A T L T E K S F E T D M N L N F Q N L S V M G L R I L L L K V A G F N L L M T L R L W S S R A K R S G S G A T N F S L L K Q A G D V E E N P G PM G T R L L F W V A F C L L G A D H T G A G V S Q S P S N K V T E K G K D V E L R C D P I S G H T A L Y W Y R Q S L G Q G L E F L I Y F Q G N S A P D K S G L P S D R F S A E R T G G S V S T L T I Q R T Q Q E D S A V Y L C A SI R T G P F F S G N T I Y F G E G S W L T V V E D L R N V T P P K V S L F E P S K A E I A N K Q K A T L V C L A R G F F P D H V E L S W W V N G K E V H S G V S T D P Q A Y K E S N Y S Y C L S S R L R V S A T F W H N P R N H F R C Q V Q F H G L S E E D K W P E G S P K P V T Q N I S A E A W G R A D C G I T S A S Y H Q G V L S A T I L Y E I L L G K A T L Y A V L V S G L V L M A M V K R K N S Stop
抗CLL−1 CAR DNA(配列番号154)
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCGCAGGTCCAACTGCAAGAAAGCGGACCCGGACTGGTGAAGCCTTCTGAGACACTTAGTCTGACGTGCACGGTCAGTGGCGGCTCCATCTCCTCCTATTATTGGTCATGGATACGACAACCCCCAGGTAAGGGCCTGGAATGGATTGGCTATATCTACTATTCAGGAAGCACGAACTACAATCCCAGCCTGAAGTCCCGAGTGACAATTTCAGTAGATACCAGTAAAAACCAGTTCAGTCTTAAACTGTCAAGCGTGACAGCTGCCGACACCGCTGTGTATTACTGCGTCTCACTGGTGTATTGTGGAGGGGATTGTTATAGCGGGTTCGATTATTGGGGACAGGGAACCCTGGTGACTGTATCTTCCGGCGGCGGCGGCTCAGGGGGTGGCGGTAGTGGCGGTGGGGGTTCCGATATTCAACTGACACAATCCCCCAGCTCACTCAGCGCCAGCGTGGGGGACAGGGTTAGCTTTACCTGTCAAGCCTCTCAGGATATAAATAACTTTCTGAACTGGTATCAACAGAAGCCTGGGAAGGCGCCCAAACTCCTGATCTATGATGCGTCCAACCTGGAAACTGGCGTGCCTTCACGCTTTAGCGGCTCTGGCAGTGGTACAGACTTCACTTTTACCATCTCTTCACTTCAGCCGGAGGACATCGCCACATATTACTGTCAACAGTACGGAAACTTGCCCTTTACTTTTGGAGGCGGCACCAAAGTTGAAATCAAAAGGGCCGCTGCCCTGGATAACGAAAAGAGCAATGGGACTATAATACATGTTAAAGGAAAACACCTGTGTCCATCTCCCCTGTTCCCTGGACCGTCAAAGCCATTTTGGGTGCTCGTGGTTGTCGGTGGCGTTCTCGCCTGTTATAGCTTGCTGGTGACAGTAGCCTTCATTATCTTTTGGGTGAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCCGAGTGAAATTTTCTAGATCAGCTGATGCTCCCGCCTATCAGCAGGGACAGAATCAACTTTACAATGAGCTGAACCTGGGTCGCAGAGAAGAGTACGACGTTTTGGACAAACGCCGGGGCCGAGATCCTGAGATGGGGGGGAAGCCGAGAAGGAAGAATCCTCAAGAAGGCCTGTACAACGAGCTTCAAAAAGACAAAATGGCTGAGGCGTACTCTGAGATCGGCATGAAGGGCGAGCGGAGACGAGGCAAGGGTCACGATGGCTTGTATCAGGGCCTGAGTACAGCCACAAAGGACACCTATGACGCCCTCCACATGCAGGCACTGCCCCCACGC
抗CLL−1 CAR AA(配列番号155)
MALPVTALLLPLALLLHAARPQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSISSYYWSWIRQPPGKGLEWIGYIYYSGSTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCVSLVYCGGDCYSGFDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIQLTQSPSSLSASVGDRVSFTCQASQDINNFLNWYQQKPGKAPKLLIYDASNLETGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQYGNLPFTFGGGTKVEIKRAAALDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR
抗BCMA CAR DNA(配列番号156)
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCGCAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCGTGGTCCAGCCTGGGAGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCGTCTGGATTCACCTTCAGTAGCTATGGCATGCACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGCAAGGGGCTGGAGTGGGTGGCAGTTATATCGTATGATGGAAGTAATAAATACTATGCAGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCGGTGTACTACTGCGTCAAGGGGCCGTTGCAGGAGCCGCCATACGATTATGGAATGGACGTATGGGGCCAGGGAACAACTGTCACCGTCTCCTCAGGGTCTACATCCGGCTCCGGGAAGCCCGGAAGTGGCGAAGGTAGTACAAAGGGGGAAATAGTGATGACGCAGTCTCCAGCCACCCTGTCTGTGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTAGCAGCAACTTAGCCTGGTACCAGCAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATAGCGCATCCACCAGGGCCACTGGTATCCCAGCCAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGTCTGAAGATTTTGCAGTTTATTACTGTCAGCAGCACCACGTCTGGCCTCTCACTTTTGGCGGAGGGACCAAGGTTGAGATCAAACGGGCCGCTGCCCTTGATAATGAAAAGTCAAACGGAACAATCATTCACGTGAAGGGCAAGCACCTCTGTCCGTCACCCTTGTTCCCTGGTCCATCCAAGCCATTCTGGGTGTTGGTCGTAGTGGGTGGAGTCCTCGCTTGTTACTCTCTGCTCGTCACCGTGGCTTTTATAATCTTCTGGGTTAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG
抗BCMA CAR AA(配列番号157)
MALPVTALLLPLALLLHAARPQVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSNKYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVKGPLQEPPYDYGMDVWGQGTTVTVSSGSTSGSGKPGSGEGSTKGEIVMTQSPATLSVSPGERATLSCRASQSVSSNLAWYQQKPGQAPRLLIYSASTRATGIPARFSGSGSGTEFTLTISSLQSEDFAVYYCQQHHVWPLTFGGGTKVEIKRAAALDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR
C185 E711−19/HLA−A*02:01 特異的TCR DNA(配列番号158)
atgggcaccagactgttcttttatgtggccctgtgtctgctgtggaccggccacatggatgccggaattacacagagccccagacacaaagtgaccgagacaggcacccctgtgacactgagatgccaccagaccgagaaccaccgctacatgtactggtacagacaggatccaggccacggcctgagactgatccactacagctacggcgtgaaggacaccgacaagggcgaagtgtctgacggctacagcgtgtccagaagcaagaccgaggatttcctgctgaccctggaaagcgccacaagcagccagaccagcgtgtacttttgtgccatcagcggctacaagaacaccgaggcctttttcggccaaggcaccaggctgacagtggtggaagatctgaagaacgtgttcccacctgaggtggccgtgtttgagccttctgaggccgagatcagccacacacagaaagccacactcgtgtgcctggccaccggcttttatcccgatcacgtggaactgtcttggtgggtcaacggcaaagaggtgcacagcggcgttagcacagaccctcagcctctgaaagagcagcccgctctgaacgacagcagatactgtctgagcagcagactgagagtgtccgccaccttctggcagaaccccagaaaccacttcagatgccaggtgcagttctacggcctgtccgagaatgacgagtggacccaggatagagccaagccagtgacacagattgtgtctgccgaagcctggggcagagccgattgtggctttacaagcgagagctaccagcagggcgtgctgtctgccacaatcctgtatgagatcctgctgggcaaagccactctgtacgctgtgctggtgtctgccctggtgctgatggccatggtcaagagaaaggacagcagaggcagagccaagagatctggcagcggcgccacaaactttagcctgctgaaacaggccggcgacgtggaagagaaccctggacctatgaagtccctgcgggtgctgctggttattctgtggctgcagctgagctgggtttggagccagggacagcaagtgatgcagatccctcagtaccagcacgtgcaagaaggcgaggacttcaccacctactgcaacagcagcacaaccctgagcaacatccagtggtacaagcagaggcctggcgggcaccctgtgtttctgatccagctggttaagagcggcgaagtgaagaagcagaagcggctgacctttcagttcggcgaggccaagaagaacagcagcctgcacattaccgccacacagaccaccgacgtgggcacatatttttgcgctggcagagaaggcggcagcgagaagctggtttttggcaagggcaccaaactgaccgtgaatcccgacattcagaaccccgatccagccgtgtaccagctgagagacagcaagagcagcgacaagagcgtgtgtctgttcaccgacttcgactcccagaccaatgtgtcccagagcaaggactccgacgtgtacatcaccgataagaccgtgctggacatgcggagcatggacttcaagagcaatagcgccgtggcttggagcaacaagagcgactttgcctgcgccaacgccttcaacaacagcatcatccccgaggacacattcttcccaagtcctgagagcagctgcgacgtgaagctggtggaaaagagcttcgagacagacaccaacctgaacttccagaacctgagcgtgatcggcttcagaatcctgctgctgaaggtggccggcttcaacctgctgatgactctgagactgtggtccagctgaattcggatccaagcttaggcctgctcgctttcttgctgtcccatttctattaaaggttcctttgttc
C185 E711−19/HLA−A*02:01 特異的TCR AA(配列番号159)
MGTRLFFYVALCLLWTGHMDAGITQSPRHKVTETGTPVTLRCHQTENHRYMYWYRQDPGHGLRLIHYSYGVKDTDKGEVSDGYSVSRSKTEDFLLTLESATSSQTSVYFCAISGYKNTEAFFGQGTRLTVVEDLKNVFPPEVAVFEPSEAEISHTQKATLVCLATGFYPDHVELSWWVNGKEVHSGVSTDPQPLKEQPALNDSRYCLSSRLRVSATFWQNPRNHFRCQVQFYGLSENDEWTQDRAKPVTQIVSAEAWGRADCGFTSESYQQGVLSATILYEILLGKATLYAVLVSALVLMAMVKRKDSRGRAKRSGSGATNFSLLKQAGDVEENPGPMKSLRVLLVILWLQLSWVWSQGQQVMQIPQYQHVQEGEDFTTYCNSSTTLSNIQWYKQRPGGHPVFLIQLVKSGEVKKQKRLTFQFGEAKKNSSLHITATQTTDVGTYFCAGREGGSEKLVFGKGTKLTVNPDIQNPDPAVYQLRDSKSSDKSVCLFTDFDSQTNVSQSKDSDVYITDKTVLDMRSMDFKSNSAVAWSNKSDFACANAFNNSIIPEDTFFPSPESSCDVKLVEKSFETDTNLNFQNLSVIGFRILLLKVAGFNLLMTLRLWSS
E711−19/HLA−A*02:01 特異的TCR DNA(配列番号160)
atgggacctggattgctttgttgggccctgctgtgtctgcttggagctggacttgtggatgccggcgtgacacagtctcccacacacctgatcaagaccagaggccagcaagtgaccctgagatgtagccctaagagcggccacgacaccgtgtcttggtatcagcaggctcttggccagggacctcagttcatcttccagtactacgaggaagaggaacggcagcggggcaacttccctgatagattctctggccatcagttccccaactacagcagcgagctgaacgtgaacgctctgctgctgggcgatagcgccctgtatctgtgtgccagttctcttggttggagaggcggcagatacaacgagcagttctttggccctggcaccagactgaccgtgctggaagatctgaagaacgtgttcccacctgaggtggccgtgtttgagccttctgaggccgagatcagccacacacagaaagccacactcgtgtgcctggccaccggcttttatcccgatcacgtggaactgtcttggtgggtcaacggcaaagaggtgcacagcggcgttagcacagaccctcagcctctgaaagagcagcccgctctgaacgacagcagatactgtctgagcagcagactgagagtgtccgccaccttctggcagaaccccagaaaccacttcagatgccaggtgcagttctacggcctgtccgagaatgacgagtggacccaggatagagccaagccagtgacacagattgtgtctgccgaagcctggggcagagccgattgtggctttacaagcgagagctaccagcagggcgtgctgtctgccacaatcctgtatgagatcctgctgggcaaagccactctgtacgctgtgctggtgtctgccctggtgctgatggccatggtcaagagaaaggacagcagaggcagagccaagagatctggcagcggcgccacaaactttagcctgctgaaacaggccggcgacgtggaagagaaccctggacctatgaagtccctgcgggtgctgctggttattctgtggctgcagctgagctgggtttggagccagggacagaacatcgaccagcctaccgagatgacagccaccgaaggcgccatcgtgcagatcaattgcacctaccagaccagcggcttcaacggcctgttctggtatcaacagcatgccggcgaggcccctaccttcctgagctataatgtgctggacggcctggaagaaaagggcagattcagcagcttcctgtccagaagcaagggctacagctacctgctgctgaaagaactccagatgaaggacagcgcctcctacctgtgtgcctccgtggatggaaacaacagactggccttcggcaagggcaaccaggtggtggtcatccccgacattcagaaccccgatccagccgtgtaccagctgagagacagcaagagcagcgacaagagcgtgtgtctgttcaccgacttcgactcccagaccaatgtgtcccagagcaaggactccgacgtgtacatcaccgataagaccgtgctggacatgcggagcatggacttcaagagcaatagcgccgtggcttggagcaacaagagcgactttgcctgcgccaacgccttcaacaacagcatcatccccgaggacacattcttcccaagtcctgagagcagctgcgacgtgaagctggtggaaaagagcttcgagacagacaccaacctgaacttccagaacctgagcgtgatcggcttcagaatcctgctgctgaaggtggccggcttcaacctgctgatgactctgagactgtggtccagctgaattcggatccaagcttaggcctgctcgctttcttgctgtcccatttctattaaaggttcctttgttc
E711−19/HLA−A*02:01 特異的TCR AA(配列番号161)
MGPGLLCWALLCLLGAGLVDAGVTQSPTHLIKTRGQQVTLRCSPKSGHDTVSWYQQALGQGPQFIFQYYEEEERQRGNFPDRFSGHQFPNYSSELNVNALLLGDSALYLCASSLGWRGGRYNEQFFGPGTRLTVLEDLKNVFPPEVAVFEPSEAEISHTQKATLVCLATGFYPDHVELSWWVNGKEVHSGVSTDPQPLKEQPALNDSRYCLSSRLRVSATFWQNPRNHFRCQVQFYGLSENDEWTQDRAKPVTQIVSAEAWGRADCGFTSESYQQGVLSATILYEILLGKATLYAVLVSALVLMAMVKRKDSRGRAKRSGSGATNFSLLKQAGDVEENPGPMKSLRVLLVILWLQLSWVWSQGQNIDQPTEMTATEGAIVQINCTYQTSGFNGLFWYQQHAGEAPTFLSYNVLDGLEEKGRFSSFLSRSKGYSYLLLKELQMKDSASYLCASVDGNNRLAFGKGNQVVVIPDIQNPDPAVYQLRDSKSSDKSVCLFTDFDSQTNVSQSKDSDVYITDKTVLDMRSMDFKSNSAVAWSNKSDFACANAFNNSIIPEDTFFPSPESSCDVKLVEKSFETDTNLNFQNLSVIGFRILLLKVAGFNLLMTLRLWSS
Axi Cel(KTE−C19)リーダー(CSF2RA) DNA(配列番号162)
Atgcttctcctggtgacaagccttctgctctgtgagttaccacacccagcattcctcctgatccca
Axi Cel(KTE−C19)リーダー(CSF2RA) AA(配列番号163)
MLLLVTSLLLCELPHPAFLLIP
Axi Cel(KTE−C19) scFv 重鎖 DNA(配列番号164)
gacatccagatgacacagactacatcctccctgtctgcctctctgggagacagagtcaccatcagttgcagggcaagtcaggacattagtaaatatttaaattggtatcagcagaaaccagatggaactgttaaactcctgatctaccatacatcaagattacactcaggagtcccatcaaggttcagtggcagtgggtctggaacagattattctctcaccattagcaacctggagcaagaagatattgccacttacttttgccaacagggtaatacgcttccgtacacgttcggaggggggactaagttggaaataaca
Axi Cel(KTE−C19) scFv 重鎖 AA(配列番号165)
DIQMTQTTSSLSASLGDRVTISCRASQDISKYLNWYQQKPDGTVKLLIYHTSRLHSGVPSRFSGSGSGTDYSLTISNLEQEDIATYFCQQGNTLPYTFGGGTKLEIT
Axi Cel(KTE−C19) リンカー(Whitlow) DNA(配列番号166)
ggctccacctctggatccggcaagcccggatctggcgagggatccaccaagggc
Axi Cel(KTE−C19) リンカー(Whitlow) AA(配列番号167)
GSTSGSGKPGSGEGSTKG
Axi Cel(KTE−C19) scFv 軽鎖 DNA(配列番号168)
gaggtgaaactgcaggagtcaggacctggcctggtggcgccctcacagagcctgtccgtcacatgcactgtctcaggggtctcattacccgactatggtgtaagctggattcgccagcctccacgaaagggtctggagtggctgggagtaatatggggtagtgaaaccacatactataattcagctctcaaatccagactgaccatcatcaaggacaactccaagagccaagttttcttaaaaatgaacagtctgcaaactgatgacacagccatttactactgtgccaaacattattactacggtggtagctatgctatggactactggggtcaaggaacctcagtcaccgtctcctca
Axi Cel(KTE−C19) scFv 軽鎖 AA(配列番号169)
EVKLQESGPGLVAPSQSLSVTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPRKGLEWLGVIWGSETTYYNSALKSRLTIIKDNSKSQVFLKMNSLQTDDTAIYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTSVTVSS
Axi Cel(KTE−C19)ミニスペーサー DNA(配列番号170)
gcggccgca
Axi Cel(KTE−C19)ミニスペーサー AA(配列番号171)
AAA
Axi Cel(KTE−C19)CD28スペーサー(CD28の細胞外/TM領域) DNA(配列番号172)
attgaagttatgtatcctcctccttacctagacaatgagaagagcaatggaaccattatccatgtgaaagggaaacacctttgtccaagtcccctatttcccggaccttctaagcccttttgggtgctggtggtggttgggggagtcctggcttgctatagcttgctagtaacagtggcctttattattttctgggtg
Axi Cel(KTE−C19)CD28スペーサー(CD28の細胞外/TM領域) AA(配列番号173)
IEVMYPPPYLDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWV
Axi Cel(KTE−C19)CD28共刺激(CD28の細胞内領域) DNA(配列番号174)
aggagtaagaggagcaggctcctgcacagtgactacatgaacatgactccccgccgccccgggcccacccgcaagcattaccagccctatgccccaccacgcgacttcgcagcctatcgctcc
Axi Cel(KTE−C19)CD28共刺激(CD28の細胞内領域) AA(配列番号175)
RSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRS
Axi Cel(KTE−C19) CD3ゼータ DNA(配列番号176)
agagtgaagttcagcaggagcgcagacgcccccgcgtaccagcagggccagaaccagctctataacgagctcaatctaggacgaagagaggagtacgatgttttggacaagagacgtggccgggaccctgagatggggggaaagccgagaaggaagaaccctcaggaaggcctgtacaatgaactgcagaaagataagatggcggaggcctacagtgagattgggatgaaaggcgagcgccggaggggcaaggggcacgatggcctttaccagggtctcagtacagccaccaaggacacctacgacgcccttcacatgcaggccctgccccctcgc
Axi Cel(KTE−C19) CD3ゼータ AA(配列番号177)
RVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR
Axi Cel(KTE−C19) VL CDR1(Chothia)(配列番号178)
RASQDISKYLN
Axi Cel(KTE−C19) VL CDR2(Chothia)(配列番号179)
HTSRLHS
Axi Cel(KTE−C19) VL CDR3(Chothia)(配列番号180)
QQGNTLPYT
Axi Cel(KTE−C19) VH CDR1(Chothia)(配列番号181)
GVSLPDY
Axi Cel(KTE−C19) VH CDR2(Chothia)(配列番号182)
WGSET
Axi Cel(KTE−C19) VH CDR3(Chothia)(配列番号183)
HYYYGGSYAMDY
Axi Cel(KTE−C19) VL CDR1(Kabat)(配列番号184)
RASQDISKYLN
Axi Cel(KTE−C19) VL CDR2(Kabat)(配列番号185)
HTSRLHS
Axi Cel(KTE−C19) VL CDR3(Kabat)(配列番号186)
QQGNTLPYT
Axi Cel(KTE−C19) VH CDR1(Kabat)(配列番号187)
DYGVS
Axi Cel(KTE−C19) VH CDR2(Kabat)(配列番号188)
VIWGSETTYYNSALKS
Axi Cel(KTE−C19) VH CDR3(Kabat)(配列番号189)
HYYYGGSYAMDY
ヒト化抗CD19 CAR CD8 リーダー DNA(配列番号190)
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCG
ヒト化抗CD19 CAR CD8 リーダー AA(配列番号191)
MALPVTALLLPLALLLHAARP
ヒト化抗CD19 CAR scFv 重鎖 DNA(配列番号192)
GATATTCAAATGACCCAGTCCCCGTCCTCCCTGAGTGCCTCCGTCGGTGACCGTGTTACGATTACCTGCCGTGCGAGCCAAGACATCTCTAAATACCTGAACTGGTATCAGCAAAAACCGGATCAGGCACCGAAACTGCTGATCAAACATACCTCACGTCTGCACTCGGGTGTGCCGAGCCGCTTTAGTGGTTCCGGCTCAGGTACCGATTACACCCTGACGATCAGCTCTCTGCAGCCGGAAGACTTTGCCACGTATTACTGCCAGCAAGGTAATACCCTGCCGTATACGTTCGGCCAAGGTACCAAACTGGAAATCAAA
ヒト化抗CD19 CAR scFv 重鎖 AA(配列番号193)
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDISKYLNWYQQKPDQAPKLLIKHTSRLHSGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYYCQQGNTLPYTFGQGTKLEIK
ヒト化抗CD19 CAR リンカー(Whitlow) DNA(配列番号194)
GGCTCGACGAGCGGCTCTGGTAAACCGGGCTCTGGTGAAGGCAGTACCAAAGGT
ヒト化抗CD19 CAR リンカー(Whitlow) AA(配列番号195)
GSTSGSGKPGSGEGSTKG
ヒト化抗CD19 CAR scFv 軽鎖 DNA(配列番号196)
GAAGTGCAGCTGGTTGAAAGCGGTGGTGGTCTGGTTCAACCGGGTCGTTCCCTGCGTCTGTCATGTACGGCGAGTGGTGTCTCCCTGCCGGACTATGGCGTGTCCTGGATTCGTCAGCCGCCGGGTAAAGGCCTGGAATGGATTGGTGTCATCTGGGGCAGTGAAACCACGTATTACAACTCGGCCCTGAAAAGCCGTTTCACCATCTCTCGCGATAACAGTAAAAATACGCTGTACCTGCAGATGAATAGCCTGCGCGCGGAAGACACCGCCGTTTACTACTGCGCAAAACATTACTACTACGGTGGCAGCTATGCTATGGATTACTGGGGTCAAGGCACGCTGGTCACCGTTTCGTCA
ヒト化抗CD19 CAR scFv 軽鎖 AA(配列番号197)
EVQLVESGGGLVQPGRSLRLSCTASGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYNSALKSRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSS
ヒト化抗CD19 CARミニスペーサー DNA(配列番号198)
GCCGCTGCC
ヒト化抗CD19 CARミニスペーサー AA(配列番号199)
AAA
ヒト化抗CD19 CAR CD28Tスペーサー(CD28の細胞外/TM領域) DNA(配列番号200)
CTTGATAATGAAAAGTCAAACGGAACAATCATTCACGTGAAGGGCAAGCACCTCTGTCCGTCACCCTTGTTCCCTGGTCCATCCAAGCCATTCTGGGTGTTGGTCGTAGTGGGTGGAGTCCTCGCTTGTTACTCTCTGCTCGTCACCGTGGCTTTTATAATCTTCTGGGTT
ヒト化抗CD19 CAR CD28Tスペーサー(CD28の細胞外/TM領域) AA(配列番号201)
LDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWV
ヒト化抗CD19 CAR CD28共刺激(CD28の細胞内領域) DNA(配列番号202)
AGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGC
ヒト化抗CD19 CAR共刺激(CD28の細胞内領域) AA(配列番号203)
RSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRS
ヒト化抗CD19 CAR CD3ゼータ DNA(配列番号204)
AGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCAcctagg
ヒト化抗CD19 CAR CD3ゼータ AA(配列番号205)
RVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR
ヒト化抗CD19 CAR VL 完全ヒト抗CD19 CDR1(Chothia)(配列番号206)
RASQSVSSSYLA
ヒト化抗CD19 CAR VL 完全ヒト抗CD19 CDR2(Chothia)(配列番号207)
GASSRAT
ヒト化抗CD19 CAR VL 完全ヒト抗CD19 CDR3(Chothia)(配列番号208)
QQYGSSRFT
ヒト化抗CD19 CAR VH 完全ヒト抗CD19 CDR1(Chothia)(配列番号209)
GGTFSSY
ヒト化抗CD19 CAR VH 完全ヒト抗CD19 CDR2(Chothia)(配列番号210)
IPIFGT
ヒト化抗CD19 CAR VH 完全ヒト抗CD19 CDR3(Chothia)(配列番号211)
EAVAADWLDP
ヒト化抗CD19 CAR VL 完全ヒト抗CD19 CDR1(Kabat)(配列番号212)
RASQSVSSSYLA
ヒト化抗CD19 CAR VL 完全ヒト抗CD19 CDR2(Kabat)(配列番号213)
GASSRAT
ヒト化抗CD19 CAR VL 完全ヒト抗CD19 CDR3(Kabat)(配列番号214)
QQYGSSRFT
ヒト化抗CD19 CAR VH 完全ヒト抗CD19 CDR1(Kabat)(配列番号215)
SYAIS
ヒト化抗CD19 CAR VH 完全ヒト抗CD19 CDR2(Kabat)(配列番号216)
GIIPIFGTTNYAQQFQG
ヒト化抗CD19 CAR VH 完全ヒト抗CD19 CDR3(Kabat)(配列番号217)
EAVAADWLDP
完全ヒト抗CD19 CAR リーダー(CD8a) DNA(配列番号218)
Atggccctgcctgtgacagctctgctgctgcccctggccctgctgctgcatgccgccagacct
完全ヒト抗CD19 CAR リーダー(CD8a) AA(配列番号219)
MALPVTALLLPLALLLHAARP
完全ヒト抗CD19 CAR scFv 軽鎖 DNA(配列番号220)
gagatcgtgctgacccagtctcccggcaccctgtctctcagcccaggagagagagccaccctgagctgcagagccagccagagcgtgtccagcagctacctggcctggtatcagcagaagcccggacaggcccccagactgctgatctacggcgccagctctagagccaccggcatccccgacagattcagcggcagcggcagtggcaccgacttcaccctgaccatcagcagactggaacccgaggacttcgccgtgtactactgccagcagtacggcagcagccggttcaccttcggccctggcaccaaggtggacatcaag
完全ヒト抗CD19 CAR scFv 軽鎖 AA(配列番号221)
EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQYGSSRFTFGPGTKVDIK
完全ヒト抗CD19 CAR リンカー(Whitlow) DNA(配列番号222)
ggcagcacctccggcagcggcaagcctggctctggcgagggctctaccaagggc
完全ヒト抗CD19 CAR リンカー(Whitlow) AA(配列番号223)
GSTSGSGKPGSGEGSTKG
完全ヒト抗CD19 CAR scFv 重鎖 DNA(配列番号224)
caggtgcagctggtgcagtctggcgccgaagtgaagaaacccggctctagcgtgaaggtgtcctgcaaggacagcggcggcaccttcagcagctacgccatcagctgggtgcgccaggccccaggacaggggctggaatggatgggcggcatcatccccatcttcggcaccaccaactacgcccagcagttccagggcagagtgaccatcaccgccgacgagagcaccagcaccgcctacatggaactgagcagcctgcggagcgaggacacagccgtgtattactgtgcccgcgaggccgtggccgccgactggctggatccttggggacagggcaccctggtgacagtgtccagc
完全ヒト抗CD19 CAR scFv 重鎖 AA(配列番号225)
QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKDSGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTTNYAQQFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCAREAVAADWLDPWGQGTLVTVSS
完全ヒト抗CD19 CAR CD8aスペーサー及びTM領域 DNA(配列番号226)
ttcgtgcccgtgttcctgcccgccaagcctaccaccacccctgcccctagacctcccaccccagccccaacaatcgccagccagcctctgtccctgcggcccgaagcctgtagacctgctgccggcggagccgtgcacaccagaggcctggacttcgcctgcgatatctacatctgggcccctctggccggcacctgtggcgtgctgctgctgagcctggtgatcaccctgtactgcaaccaccggaac
完全ヒト抗CD19 CAR CD8aスペーサー及びTM領域 AA(配列番号227)
FVPVFLPAKPTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCNHRN
完全ヒト抗CD19 CAR CD28 costim. DNA(配列番号228)
agaagcaagcggagccggctgctgcacagcgactacatgaacatgaccccaagacggcctggccccacccggaagcactaccagccttacgcccctcccagagacttcgccgcctaccggtcc
完全ヒト抗CD19 CAR CD28 costim. AA(配列番号229)
RSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRS
完全ヒト抗CD19 CAR CD3ゼータ DNA(配列番号230)
agagtgaagttcagcagatccgccgacgcccctgcctaccagcagggacagaaccagctgtacaacgagctgaacctgggcagacgggaagagtacgacgtgctggacaagcggagaggccgggaccccgagatgggcggaaagcccagacggaagaacccccaggaaggcctgtataacgaactgcagaaagacaagatggccgaggcctacagcgagatcggcatgaagggcgagcggaggcgcggcaagggccacgatggcctgtaccagggcctgagcaccgccaccaaggacacctacgacgccctgcacatgcaggccctgccccccaga
完全ヒト抗CD19 CAR CD3ゼータ AA(配列番号231)
RVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR
MAGE A3/A6 TCRコンストラクト−可変α鎖−AV38−2 DNA(配列番号232)
atggcatgccctggcttcctgtgggcacttgtgatctccacctgtcttgaatttagcatggctcagacagtcactcagtctcaaccagagatgtctgtgcaggaggcagagaccgtgaccctgagctgcacatatgacaccagtgagagtgattattatttattctggtacaagcagcctcccagcaggcagatgattctcgttattcgccaagaagcttataagcaacagaatgcaacagagaatcgtttctctgtgaacttccagaaagcagccaaatccttcagtctcaagatctcagactcacagctgggggatgccgcgatgtatttctgtgct
MAGE A3/A6 TCRコンストラクト−可変α鎖−AV38−2 AA(配列番号233)
M A C P G F L W A L V I S T C L E F S M A Q T V T Q S Q P E M S V Q E A E T V T L S C T Y D T S E S D Y Y L F W Y K Q P P S R Q M I L V I R Q E A Y K Q Q N A T E N R F S V N F Q K A A K S F S L K I S D S Q L G D A A M Y F C A L R S S G T Y K Y I F G T G T R L K V L A N
MAGE A3/A6 TCRコンストラクト−TRAJ40 DNA(配列番号234)
ctccggagctcaggaacctacaaatacatctttggaacaggcaccaggctgaaggttttagcaaat
MAGE A3/A6 TCRコンストラクト−ネズミ定常α−ネズミCA DNA(配列番号235)
atccagaaccctgaacctgctgtgtaccagttaaaagatcctcggtctcaggacagcaccctctgcctgttcaccgactttgactcccaaatcaatgtgccgaaaaccatggaatctggaacgttcatcactgacaaaactgtgctggacatgaaagctatggattccaagagcaatggggccattgcctggagcaaccagacaagcttcacctgccaagatatcttcaaagagaccaacgccacctaccccagttcagacgttccctgtgatgccacgttgactgagaaaagctttgaaacagatatgaacctaaactttcaaaacctgtcagttatgggactccgaatcctcctgctgaaagtagccggatttaacctgctcatgacgctgaggctgtggtccagt
MAGE A3/A6 TCRコンストラクト−ネズミ定常α−ネズミCA AA(配列番号236)
I Q N P E P A V Y Q L K D P R S Q D S T L C L F T D F D S Q I N V P K T M E S G T F I T D K T V L D M K A M D S K S N G A I A W S N Q T S F T C Q D I F K E T N A T Y P S S D V P C D A T L T E K S F E T D M N L N F Q N L S V M G L R I L L L K V A G F N L L M T L R L W S S
MAGE A3/A6 TCRコンストラクト−フューリン−SG SG−P2A DNA(配列番号237)
cgggccaagcggtccggatccggagccaccaacttcagcctgctgaagcaggccggcgacgtggaggagaaccccggcccc
MAGE A3/A6 TCRコンストラクト−フューリン−SG SG−P2A AA(配列番号238)
R A K R S G S G A T N F S L L K Q A G D V E E N P G P
MAGE A3/A6 TCRコンストラクト−可変β鎖−BV7−2 DNA(配列番号239)
atgggcaccaggctcctcttctgggtggccttctgtctcctgggggcagatcacacaggagctggagtctcccagtcccccagtaacaaggtcacagagaagggaaaggatgtagagctcaggtgtgatccaatttcaggtcatactgccctttactggtaccgacagagcctggggcagggcctggagtttttaatttacttccaaggcaacagtgcaccagacaaatcagggctgcccagtgatcgcttctctgcagagaggactgggggatccgtctccactctgacgatccagcgcacacagcaggaggactcggccgtgtatctctgtgccagca
MAGE A3/A6 TCRコンストラクト−可変β鎖−BV7−2 AA(配列番号240)
M G T R L L F W V A F C L L G A D H T G A G V S Q S P S N K V T E K G K D V E L R C D P I S G H T A L Y W Y R Q S L G Q G L E F L I Y F Q G N S A P D K S G L P S D R F S A E R T G G S V S T L T I Q R T Q Q E D S A V Y L C A SI R T G P F F S G N T I Y F G E G S W L T V V E
MAGE A3/A6 TCRコンストラクト−TRBJ1−3 DNA(配列番号241)
tccggacagggccttttttctctggaaacaccatatattttggagagggaagttggctcactgttgtagag
MAGE A3/A6 TCRコンストラクト−ネズミ定常β−ネズミCB1 DNA(配列番号242)
gacctgagaaacgtgaccccacccaaggtctccttgtttgagccatcaaaagcagagattgcaaacaaacaaaaggctaccctcgtgtgcttggccaggggcttcttccctgaccacgtggagctgagctggtgggtgaatggcaaggaggtccacagtggggtcagcacggaccctcaggcctacaaggagagcaattatagctactgcctgagcagccgcctgagggtctctgctaccttctggcacaatcctcgaaaccacttccgctgccaagtgcagttccatgggctttcagaggaggacaagtggccagagggctcacccaaacctgtcacacagaacatcagtgcagaggcctggggccgagcagactgtggaatcacttcagcatcctatcatcagggggttctgtctgcaaccatcctctatgagatcctactggggaaggccaccctatatgctgtgctggtcagtggcctggtgctgatggctatggtcaaaagaaagaactcatga
MAGE A3/A6 TCRコンストラクト−ネズミ定常β−ネズミCB1 AA(配列番号243)
D L R N V T P P K V S L F E P S K A E I A N K Q K A T L V C L A R G F F P D H V E L S W W V N G K E V H S G V S T D P Q A Y K E S N Y S Y C L S S R L R V S A T F W H N P R N H F R C Q V Q F H G L S E E D K W P E G S P K P V T Q N I S A E A W G R A D C G I T S A S Y H Q G V L S A T I L Y E I L L G K A T L Y A V L V S G L V L M A M V K R K N S Stop
MAGE A3/A6 TCR Va CDR1(配列番号244)
TYDTSESDYYLF
MAGE A3/A6 TCR Va CDR2(配列番号245)
QEAYKQQ
MAGE A3/A6 TCR Va CDR3(配列番号246)
ALRSSGTYKYI
MAGE A3/A6 TCR Vb CDR1(配列番号247)
DPISGHTALY
MAGE A3/A6 TCR Vb CDR2(配列番号248)
FQGNSAPDKSG
MAGE A3/A6 TCR Vb CDR3(配列番号249)
ASIRTGPFFSGNTIY
抗CLL−1 CAR CD8 リーダー DNA(配列番号250)
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCG
抗CLL−1 CAR CD8 リーダー AA(配列番号251)
MALPVTALLLPLALLLHAARP
抗CLL−1 CAR scFv 重鎖 DNA(配列番号252)
CAGGTCCAACTGCAAGAAAGCGGACCCGGACTGGTGAAGCCTTCTGAGACACTTAGTCTGACGTGCACGGTCAGTGGCGGCTCCATCTCCTCCTATTATTGGTCATGGATACGACAACCCCCAGGTAAGGGCCTGGAATGGATTGGCTATATCTACTATTCAGGAAGCACGAACTACAATCCCAGCCTGAAGTCCCGAGTGACAATTTCAGTAGATACCAGTAAAAACCAGTTCAGTCTTAAACTGTCAAGCGTGACAGCTGCCGACACCGCTGTGTATTACTGCGTCTCACTGGTGTATTGTGGAGGGGATTGTTATAGCGGGTTCGATTATTGGGGACAGGGAACCCTGGTGACTGTATCTTCC
抗CLL−1 CAR scFv 重鎖 AA(配列番号253)
QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSISSYYWSWIRQPPGKGLEWIGYIYYSGSTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCVSLVYCGGDCYSGFDYWGQGTLVTVSS
抗CLL−1 CAR G4Sリンカー DNA(配列番号254)
GGCGGCGGCGGCTCAGGGGGTGGCGGTAGTGGCGGTGGGGGTTCC
抗CLL−1 CAR G4Sリンカー AA(配列番号255)
GGGGSGGGGSGGGGS
抗CLL−1 CAR scFv 軽鎖 DNA(配列番号256)
GATATTCAACTGACACAATCCCCCAGCTCACTCAGCGCCAGCGTGGGGGACAGGGTTAGCTTTACCTGTCAAGCCTCTCAGGATATAAATAACTTTCTGAACTGGTATCAACAGAAGCCTGGGAAGGCGCCCAAACTCCTGATCTATGATGCGTCCAACCTGGAAACTGGCGTGCCTTCACGCTTTAGCGGCTCTGGCAGTGGTACAGACTTCACTTTTACCATCTCTTCACTTCAGCCGGAGGACATCGCCACATATTACTGTCAACAGTACGGAAACTTGCCCTTTACTTTTGGAGGCGGCACCAAAGTTGAAATCAAAAGG
抗CLL−1 CAR scFv 軽鎖 AA(配列番号257)
DIQLTQSPSSLSASVGDRVSFTCQASQDINNFLNWYQQKPGKAPKLLIYDASNLETGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQYGNLPFTFGGGTKVEIKR
抗CLL−1 CARミニスペーサー DNA(配列番号258)
GCCGCTGCC
抗CLL−1 CARミニスペーサー AA(配列番号259)
AAA
抗CLL−1 CAR CD28T(CD28の細胞外/TM領域) DNA(配列番号260)
CTGGATAACGAAAAGAGCAATGGGACTATAATACATGTTAAAGGAAAACACCTGTGTCCATCTCCCCTGTTCCCTGGACCGTCAAAGCCATTTTGGGTGCTCGTGGTTGTCGGTGGCGTTCTCGCCTGTTATAGCTTGCTGGTGACAGTAGCCTTCATTATCTTTTGGGTG
抗CLL−1 CAR CD28T(CD28の細胞外/TM領域) AA(配列番号261)
LDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWV
抗CLL−1 CAR CD28(CD28の細胞内共刺激領域) DNA(配列番号262)
AGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGC
抗CLL−1 CAR CD28(CD28の細胞内共刺激領域) AA(配列番号263)
RSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRS
抗CLL−1 CAR CD3ゼータ DNA(配列番号264)
CGAGTGAAATTTTCTAGATCAGCTGATGCTCCCGCCTATCAGCAGGGACAGAATCAACTTTACAATGAGCTGAACCTGGGTCGCAGAGAAGAGTACGACGTTTTGGACAAACGCCGGGGCCGAGATCCTGAGATGGGGGGGAAGCCGAGAAGGAAGAATCCTCAAGAAGGCCTGTACAACGAGCTTCAAAAAGACAAAATGGCTGAGGCGTACTCTGAGATCGGCATGAAGGGCGAGCGGAGACGAGGCAAGGGTCACGATGGCTTGTATCAGGGCCTGAGTACAGCCACAAAGGACACCTATGACGCCCTCCACATGCAGGCACTGCCCCCACGC
抗CLL−1 CAR CD3ゼータ AA(配列番号265)
RVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR
CLL scFv(24C1) VL CDR1(配列番号266)
QASQDINNFLN
CLL scFv(24C1) VL CDR2(配列番号267)
DASNLET
CLL scFv(24C1) VL CDR3(配列番号268)
QQYGNLPFT
CLL scFv(24C1) VH CDR1(配列番号269)
GGSISSY
CLL scFv(24C1) VH CDR2(配列番号270)
YYSGS
CLL scFv(24C1) VH CDR3(配列番号271)
LVYCGGDCYSGFDY
抗BCMA CAR リーダー(CD8a) DNA(配列番号272)
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCTGCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCACGCCCG
抗BCMA CAR リーダー(CD8a) AA(配列番号273)
MALPVTALLLPLALLLHAARP
抗BCMA CAR scFv 重鎖 DNA(配列番号274)
CAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCGTGGTCCAGCCTGGGAGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCGTCTGGATTCACCTTCAGTAGCTATGGCATGCACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGCAAGGGGCTGGAGTGGGTGGCAGTTATATCGTATGATGGAAGTAATAAATACTATGCAGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCGGTGTACTACTGCGTCAAGGGGCCGTTGCAGGAGCCGCCATACGATTATGGAATGGACGTATGGGGCCAGGGAACAACTGTCACCGTCTCCTCA
抗BCMA CAR scFv 重鎖 AA(配列番号275)
QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSNKYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVKGPLQEPPYDYGMDVWGQGTTVTVSS
抗BCMA CAR リンカー(Whitlow) DNA(配列番号276)
GGGTCTACATCCGGCTCCGGGAAGCCCGGAAGTGGCGAAGGTAGTACAAAGGGG
抗BCMA CAR リンカー(Whitlow) AA(配列番号277)
GSTSGSGKPGSGEGSTKG
抗BCMA CAR scFv 軽鎖 DNA(配列番号278)
GAAATAGTGATGACGCAGTCTCCAGCCACCCTGTCTGTGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTAGCAGCAACTTAGCCTGGTACCAGCAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATAGCGCATCCACCAGGGCCACTGGTATCCCAGCCAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGTCTGAAGATTTTGCAGTTTATTACTGTCAGCAGCACCACGTCTGGCCTCTCACTTTTGGCGGAGGGACCAAGGTTGAGATCAAACGG
抗BCMA CAR scFv 軽鎖 AA(配列番号279)
EIVMTQSPATLSVSPGERATLSCRASQSVSSNLAWYQQKPGQAPRLLIYSASTRATGIPARFSGSGSGTEFTLTISSLQSEDFAVYYCQQHHVWPLTFGGGTKVEIKR
抗BCMA CARミニスペーサー DNA(配列番号280)
GCCGCTGCC
抗BCMA CARミニスペーサー AA(配列番号281)
AAA
抗BCMA CAR CD28Tスペーサー DNA(配列番号282)
CTTGATAATGAAAAGTCAAACGGAACAATCATTCACGTGAAGGGCAAGCACCTCTGTCCGTCACCCTTGTTCCCTGGTCCATCCAAGCCATTCTGGGTGTTGGTCGTAGTGGGTGGAGTCCTCGCTTGTTACTCTCTGCTCGTCACCGTGGCTTTTATAATCTTCTGGGTT
抗BCMA CAR CD28Tスペーサー AA(配列番号283)
LDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWV
抗BCMA CAR CD28 共刺激領域 DNA(配列番号284)
AGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGC
抗BCMA CAR CD28 共刺激領域 AA(配列番号285)
RSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRS
抗BCMA CAR CD3ゼータ DNA(配列番号286)
AGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG
抗BCMA CAR CD3ゼータ AA(配列番号287)
RVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR
抗BCMA CAR VL CDR1(配列番号288)
RASQSVSSNLA
抗BCMA CAR VL CDR2(配列番号289)
SASTRAT
抗BCMA CAR VL CDR3(配列番号290)
QQHHVWPLTF
抗BCMA CAR VH CDR1(配列番号291)
GFTFSSY
抗BCMA CAR VH CDR2(配列番号292)
VISYDGSNKYYADSVKG
抗BCMA CAR VH CDR3(配列番号293)
VKGPLQEPPYDYGMDV
C185 E711−19/HLA−A*02:01 特異的TCR−TCR β鎖可変領域 DNA(配列番号294)
atgggcaccagactgttcttttatgtggccctgtgtctgctgtggaccggccacatggatgccggaattacacagagccccagacacaaagtgaccgagacaggcacccctgtgacactgagatgccaccagaccgagaaccaccgctacatgtactggtacagacaggatccaggccacggcctgagactgatccactacagctacggcgtgaaggacaccgacaagggcgaagtgtctgacggctacagcgtgtccagaagcaagaccgaggatttcctgctgaccctggaaagcgccacaagcagccagaccagcgtgtacttttgtgccatcagcggctacaagaacaccgaggcctttttcggccaaggcaccaggctgacagtggtg
C185 E711−19/HLA−A*02:01 特異的TCR−TCR β鎖可変領域 AA(配列番号295)
MGTRLFFYVALCLLWTGHMDAGITQSPRHKVTETGTPVTLRCHQTENHRYMYWYRQDPGHGLRLIHYSYGVKDTDKGEVSDGYSVSRSKTEDFLLTLESATSSQTSVYFCAISGYKNTEAFFGQGTRLTVV
C185 E711−19/HLA−A*02:01 特異的TCR−TCR β鎖定常領域 DNA(配列番号296)
gaagatctgaagaacgtgttcccacctgaggtggccgtgtttgagccttctgaggccgagatcagccacacacagaaagccacactcgtgtgcctggccaccggcttttatcccgatcacgtggaactgtcttggtgggtcaacggcaaagaggtgcacagcggcgttagcacagaccctcagcctctgaaagagcagcccgctctgaacgacagcagatactgtctgagcagcagactgagagtgtccgccaccttctggcagaaccccagaaaccacttcagatgccaggtgcagttctacggcctgtccgagaatgacgagtggacccaggatagagccaagccagtgacacagattgtgtctgccgaagcctggggcagagccgattgtggctttacaagcgagagctaccagcagggcgtgctgtctgccacaatcctgtatgagatcctgctgggcaaagccactctgtacgctgtgctggtgtctgccctggtgctgatggccatggtcaagagaaaggacagcagaggc
C185 E711−19/HLA−A*02:01 特異的TCR−TCR β鎖定常領域 AA(配列番号297)
EDLKNVFPPEVAVFEPSEAEISHTQKATLVCLATGFYPDHVELSWWVNGKEVHSGVSTDPQPLKEQPALNDSRYCLSSRLRVSATFWQNPRNHFRCQVQFYGLSENDEWTQDRAKPVTQIVSAEAWGRADCGFTSESYQQGVLSATILYEILLGKATLYAVLVSALVLMAMVKRKDSRG
C185 E711−19/HLA−A*02:01 特異的TCR−P2Aペプチド(フューリン切断部位及びリンカーを伴う) DNA(配列番号298)
agagccaagagatctggcagcggcgccacaaactttagcctgctgaaacaggccggcgacgtggaagagaaccctggacct
C185 E711−19/HLA−A*02:01 特異的TCR−P2Aペプチド(フューリン切断部位及びリンカーを伴う) AA(配列番号299)
RAKRSGSGATNFSLLKQAGDVEENPGP
C185 E711−19/HLA−A*02:01 特異的TCR−TCR α鎖可変領域 DNA(配列番号300)
atgaagtccctgcgggtgctgctggttattctgtggctgcagctgagctgggtttggagccagggacagcaagtgatgcagatccctcagtaccagcacgtgcaagaaggcgaggacttcaccacctactgcaacagcagcacaaccctgagcaacatccagtggtacaagcagaggcctggcgggcaccctgtgtttctgatccagctggttaagagcggcgaagtgaagaagcagaagcggctgacctttcagttcggcgaggccaagaagaacagcagcctgcacattaccgccacacagaccaccgacgtgggcacatatttttgcgctggcagagaaggcggcagcgagaagctggtttttggcaagggcaccaaactgaccgtgaatccc
C185 E711−19/HLA−A*02:01 特異的TCR−TCR α鎖可変領域 AA(配列番号301)
MKSLRVLLVILWLQLSWVWSQGQQVMQIPQYQHVQEGEDFTTYCNSSTTLSNIQWYKQRPGGHPVFLIQLVKSGEVKKQKRLTFQFGEAKKNSSLHITATQTTDVGTYFCAGREGGSEKLVFGKGTKLTVNP
C185 E711−19/HLA−A*02:01 特異的TCR−TCR α鎖定常領域 DNA(配列番号302)
gacattcagaaccccgatccagccgtgtaccagctgagagacagcaagagcagcgacaagagcgtgtgtctgttcaccgacttcgactcccagaccaatgtgtcccagagcaaggactccgacgtgtacatcaccgataagaccgtgctggacatgcggagcatggacttcaagagcaatagcgccgtggcttggagcaacaagagcgactttgcctgcgccaacgccttcaacaacagcatcatccccgaggacacattcttcccaagtcctgagagcagctgcgacgtgaagctggtggaaaagagcttcgagacagacaccaacctgaacttccagaacctgagcgtgatcggcttcagaatcctgctgctgaaggtggccggcttcaacctgctgatgactctgagactgtggtccagctgaattcggatccaagcttaggcctgctcgctttcttgctgtcccatttctattaaaggttcctttgttc
C185 E711−19/HLA−A*02:01 特異的TCR−TCR α鎖定常領域 AA(配列番号303)
DIQNPDPAVYQLRDSKSSDKSVCLFTDFDSQTNVSQSKDSDVYITDKTVLDMRSMDFKSNSAVAWSNKSDFACANAFNNSIIPEDTFFPSPESSCDVKLVEKSFETDTNLNFQNLSVIGFRILLLKVAGFNLLMTLRLWSS
C185 E711−19/HLA−A*02:01 特異的TCR−α CDR1(配列番号304)
TTLSN
C185 E711−19/HLA−A*02:01 特異的TCR−α CDR2(配列番号305)
LVKSGEV
C185 E711−19/HLA−A*02:01 特異的TCR−α CDR3(配列番号306)
AGREGGSEKLV
C185 E711−19/HLA−A*02:01 特異的TCR−β CDR1(配列番号307)
ENHRY
C185 E711−19/HLA−A*02:01 特異的TCR−β CDR2(配列番号308)
SYGVKD
C185 E711−19/HLA−A*02:01 特異的TCR−β CDR3(配列番号309)
AISGYKNTEAF
E711−19/HLA−A*02:01 特異的TCR−TCR β鎖可変領域 DNA(配列番号310)
atgggacctggattgctttgttgggccctgctgtgtctgcttggagctggacttgtggatgccggcgtgacacagtctcccacacacctgatcaagaccagaggccagcaagtgaccctgagatgtagccctaagagcggccacgacaccgtgtcttggtatcagcaggctcttggccagggacctcagttcatcttccagtactacgaggaagaggaacggcagcggggcaacttccctgatagattctctggccatcagttccccaactacagcagcgagctgaacgtgaacgctctgctgctgggcgatagcgccctgtatctgtgtgccagttctcttggttggagaggcggcagatacaacgagcagttctttggccctggcaccagactgaccgtgctg
E711−19/HLA−A*02:01 特異的TCR−TCR β鎖可変領域 AA(配列番号311)
MGPGLLCWALLCLLGAGLVDAGVTQSPTHLIKTRGQQVTLRCSPKSGHDTVSWYQQALGQGPQFIFQYYEEEERQRGNFPDRFSGHQFPNYSSELNVNALLLGDSALYLCASSLGWRGGRYNEQFFGPGTRLTVL
E711−19/HLA−A*02:01 特異的TCR−TCR β鎖定常領域 DNA(配列番号312)
gaagatctgaagaacgtgttcccacctgaggtggccgtgtttgagccttctgaggccgagatcagccacacacagaaagccacactcgtgtgcctggccaccggcttttatcccgatcacgtggaactgtcttggtgggtcaacggcaaagaggtgcacagcggcgttagcacagaccctcagcctctgaaagagcagcccgctctgaacgacagcagatactgtctgagcagcagactgagagtgtccgccaccttctggcagaaccccagaaaccacttcagatgccaggtgcagttctacggcctgtccgagaatgacgagtggacccaggatagagccaagccagtgacacagattgtgtctgccgaagcctggggcagagccgattgtggctttacaagcgagagctaccagcagggcgtgctgtctgccacaatcctgtatgagatcctgctgggcaaagccactctgtacgctgtgctggtgtctgccctggtgctgatggccatggtcaagagaaaggacagcagaggc
E711−19/HLA−A*02:01 特異的TCR−TCR β鎖定常領域 AA(配列番号313)
EDLKNVFPPEVAVFEPSEAEISHTQKATLVCLATGFYPDHVELSWWVNGKEVHSGVSTDPQPLKEQPALNDSRYCLSSRLRVSATFWQNPRNHFRCQVQFYGLSENDEWTQDRAKPVTQIVSAEAWGRADCGFTSESYQQGVLSATILYEILLGKATLYAVLVSALVLMAMVKRKDSRG
E711−19/HLA−A*02:01 特異的TCR−P2A(フューリン切断部位及びリンカーを伴う) DNA(配列番号314)
agagccaagagatctggcagcggcgccacaaactttagcctgctgaaacaggccggcgacgtggaagagaaccctggacct
E711−19/HLA−A*02:01 特異的TCR−P2A(フューリン切断部位及びリンカーを伴う) AA(配列番号315)
RAKRSGSGATNFSLLKQAGDVEENPGP
E711−19/HLA−A*02:01 特異的TCR−TCR α鎖可変領域 DNA(配列番号316)
atgaagtccctgcgggtgctgctggttattctgtggctgcagctgagctgggtttggagccagggacagaacatcgaccagcctaccgagatgacagccaccgaaggcgccatcgtgcagatcaattgcacctaccagaccagcggcttcaacggcctgttctggtatcaacagcatgccggcgaggcccctaccttcctgagctataatgtgctggacggcctggaagaaaagggcagattcagcagcttcctgtccagaagcaagggctacagctacctgctgctgaaagaactccagatgaaggacagcgcctcctacctgtgtgcctccgtggatggaaacaacagactggccttcggcaagggcaaccaggtggtggtcatcccc
E711−19/HLA−A*02:01 特異的TCR−TCR α鎖可変領域 AA(配列番号317)
MKSLRVLLVILWLQLSWVWSQGQNIDQPTEMTATEGAIVQINCTYQTSGFNGLFWYQQHAGEAPTFLSYNVLDGLEEKGRFSSFLSRSKGYSYLLLKELQMKDSASYLCASVDGNNRLAFGKGNQVVVIP
E711−19/HLA−A*02:01 特異的TCR−TCR α鎖定常領域 DNA(配列番号318)
gacattcagaaccccgatccagccgtgtaccagctgagagacagcaagagcagcgacaagagcgtgtgtctgttcaccgacttcgactcccagaccaatgtgtcccagagcaaggactccgacgtgtacatcaccgataagaccgtgctggacatgcggagcatggacttcaagagcaatagcgccgtggcttggagcaacaagagcgactttgcctgcgccaacgccttcaacaacagcatcatccccgaggacacattcttcccaagtcctgagagcagctgcgacgtgaagctggtggaaaagagcttcgagacagacaccaacctgaacttccagaacctgagcgtgatcggcttcagaatcctgctgctgaaggtggccggcttcaacctgctgatgactctgagactgtggtccagctgaattcggatccaagcttaggcctgctcgctttcttgctgtcccatttctattaaaggttcctttgttc
E711−19/HLA−A*02:01 特異的TCR−TCR α鎖定常領域 AA(配列番号319)
DIQNPDPAVYQLRDSKSSDKSVCLFTDFDSQTNVSQSKDSDVYITDKTVLDMRSMDFKSNSAVAWSNKSDFACANAFNNSIIPEDTFFPSPESSCDVKLVEKSFETDTNLNFQNLSVIGFRILLLKVAGFNLLMTLRLWSS
E711−19/HLA−A*02:01 特異的TCR−α CDR1(配列番号320)
TSGFNG
E711−19/HLA−A*02:01 特異的TCR−α CDR2(配列番号321)
NVLDGL
E711−19/HLA−A*02:01 特異的TCR−α CDR3(配列番号322)
ASVDGNNRLA
E711−19/HLA−A*02:01 特異的TCR−β CDR1(配列番号323)
SGHDT
E711−19/HLA−A*02:01 特異的TCR−β CDR2(配列番号324)
YYEEEE
E711−19/HLA−A*02:01 特異的TCR−β CDR3(配列番号325)
ASSLGWRGGRYNEQF

Claims (32)

  1. 患者固有の免疫療法手順を実施する方法であって、
    コンピューティングデバイスによって、患者のためのトランスフェクトされたT細胞を作製するための細胞注文要求を受信すること、
    前記コンピューティングデバイスによって、前記細胞注文要求に関連付けられた患者固有識別子を生成すること(該患者固有識別子が、患者識別要素、販売注文識別子、及び細胞注文ロット番号を含む)、
    前記コンピューティングデバイスによって、前記患者の血流に注入するためのトランスフェクトされたT細胞を作製するプロセスを開始すること、
    を含み、
    該プロセスが、
    前記患者の血液サンプルに対して白血球アフェレーシス手順を実施して、該サンプルからT細胞を収集すること、
    前記収集されたT細胞を容器に移すことと、
    前記患者固有識別子を前記容器にラベル付けすること、
    前記収集されたT細胞を製造施設に移送すること、
    細胞修飾技術を使用して、前記収集されたT細胞からトランスフェクトされたT細胞を作製すること、
    前記製造施設から前記トランスフェクトされたT細胞を受け取ること、及び
    前記トランスフェクトされたT細胞を前記患者の血流に注入すること、
    を含み、
    前記コンピューティングデバイスが、前記プロセスの各工程に関して追跡イベントを記録し、各追跡イベントが前記患者固有識別子を含み、
    前記追跡イベントが、前記プロセス中の前記患者のT細胞の継続管理を含む、方法。
  2. 前記トランスフェクトされたT細胞が、キメラ抗原受容体(CAR)をコードするポリヌクレオチドで前記収集されたT細胞をトランスフェクトすることにより作製され、前記CARが標的分子に特異的に結合する抗原結合分子を含む、請求項1に記載の方法。
  3. 前記抗原結合分子が一本鎖可変フラグメントである、請求項2に記載の方法。
  4. 前記標的分子が血液由来の癌関連抗原である、請求項2に記載の方法。
  5. 前記標的分子がウイルス感染関連抗原である、請求項2に記載の方法。
  6. 前記キメラ抗原受容体(CAR)が少なくとも1つの共刺激ドメインを更に含む、請求項2に記載の方法。
  7. 前記キメラ抗原受容体(CAR)が少なくとも1つの活性化ドメインを更に含む、請求項2に記載の方法。
  8. 前記ポリヌクレオチドがベクターの構成要素である、請求項2に記載の方法。
  9. 前記トランスフェクトされたT細胞が、T細胞受容体(TCR)をコードするポリヌクレオチドで前記収集されたT細胞をトランスフェクトすることにより作製される、請求項1に記載の方法。
  10. 前記TCRが腫瘍関連抗原に結合する、請求項9に記載の方法。
  11. 前記TCRがウイルス感染関連抗原に結合する、請求項9に記載の方法。
  12. 前記ポリヌクレオチドがベクターの構成要素である、請求項9に記載の方法。
  13. トランスフェクトされたT細胞を作製するプロセスを開始することが、
    前記コンピューティングデバイスによって、前記トランスフェクトされたT細胞が作製された後に第1のサイトから出荷されたというインディシアを受信すること、及び
    前記トランスフェクトされたT細胞が注入される前に第2のサイトで受け取られたというインディシアを受信すること、
    を更に含み、
    前記コンピューティングデバイスが、前記トランスフェクトされたT細胞が出荷されたというインディシアを受信すると、追跡イベントを記録し、
    前記コンピューティングデバイスが、前記トランスフェクトされたT細胞が第2のサイトで受け取られたというインディシアを受信すると、追跡イベントを記録する、請求項1に記載の方法。
  14. 前記患者識別要素が、前記免疫療法手順に関連付けられた第1の患者IDと、前記白血球アフェレーシス手順又は前記トランスフェクトされたT細胞の注入の1つ以上を行う施設に関連付けられた第2の患者IDとを含む、請求項1に記載の方法。
  15. 前記コンピューティングデバイスが、前記追跡イベントを規則的な順序で保存する、請求項1に記載の方法。
  16. 免疫療法手順中に細胞の注文を追跡する方法であって:
    コンピューティングデバイスによって、患者のためのトランスフェクトされたT細胞を作製する細胞注文要求を受信すること;
    前記コンピューティングデバイスによって、前記細胞注文要求に関連付けられた患者固有識別子を生成すること(前記患者固有識別子が、患者識別要素、販売注文識別子、及び細胞注文ロット番号を含む);
    前記コンピューティングデバイスによって、前記患者の血流に注入するトランスフェクトされたT細胞を作製するプロセスを監視すること、
    (該プロセスが、
    前記サンプルからT細胞を収集するため、前記患者の血液サンプルに対して白血球アフェレーシス手順が実施されたというインディシアを受信すること、
    前記収集されたT細胞が容器に移されたというインディシアを受信すること、
    前記容器に前記患者固有識別子がラベル付けされたというインディシアを受信すること、
    前記収集されたT細胞が製造施設に送られたというインディシアを受信すること、
    細胞修飾技術を使用して、前記収集されたT細胞からトランスフェクトされたT細胞が作製されたというインディシアを受信すること、
    前記トランスフェクトされたT細胞が前記製造施設から受け取られたというインディシアを受信すること、及び
    前記トランスフェクトされたT細胞が前記患者の血流に注入されたというインディシアを受信すること、
    を含む);
    前記コンピューティングデバイスによって、インディシアが受信された時に追跡イベントを記録すること(各追跡イベントが前記患者固有識別子を含む);並びに
    前記コンピューティングデバイスによって、前記プロセス中に前記追跡イベントを保存することにより、前記患者のT細胞の継続管理を維持すること、
    を含む、方法。
  17. 前記トランスフェクトされたT細胞が、キメラ抗原受容体(CAR)をコードするポリヌクレオチドで前記収集されたT細胞をトランスフェクトすることにより作製され、前記CARが標的分子に特異的に結合する抗原結合分子を含む、請求項16に記載の方法。
  18. 前記抗原結合分子が一本鎖可変フラグメントである、請求項17に記載の方法。
  19. 前記標的分子が血液由来の癌関連抗原である、請求項17に記載の方法。
  20. 前記標的分子がウイルス感染関連抗原である、請求項17に記載の方法。
  21. 前記キメラ抗原受容体(CAR)が少なくとも1つの共刺激ドメインを更に含む、請求項17に記載の方法。
  22. 前記キメラ抗原受容体(CAR)が少なくとも1つの活性化ドメインを更に含む、請求項17に記載の方法。
  23. 前記ポリヌクレオチドがベクターの構成要素である、請求項17に記載の方法。
  24. 前記トランスフェクトされたT細胞が、T細胞受容体(TCR)をコードするポリヌクレオチドで前記収集されたT細胞をトランスフェクトすることにより作製される、請求項16に記載の方法。
  25. 前記TCRが腫瘍関連抗原に結合する、請求項24に記載の方法。
  26. 前記TCRがウイルス感染関連抗原に結合する、請求項24に記載の方法。
  27. 前記ポリヌクレオチドがベクターの構成要素である、請求項24に記載の方法。
  28. トランスフェクトされたT細胞を作製するプロセスを開始することが、
    前記コンピューティングデバイスによって、前記トランスフェクトされたT細胞が作製された後に第1のサイトから出荷されたというインディシアを受信すること、及び
    前記トランスフェクトされたT細胞が注入される前に第2のサイトで受け取られたというインディシアを受信すること、
    を更に含み、
    前記コンピューティングデバイスが、前記トランスフェクトされたT細胞が出荷されたというインディシアを受信すると、追跡イベントを記録し、
    前記コンピューティングデバイスが、前記トランスフェクトされたT細胞が第2のサイトで受け取られたというインディシアを受信すると、追跡イベントを記録する、請求項16に記載の方法。
  29. 前記患者識別要素が、前記免疫療法手順に関連付けられた第1の患者IDと、前記白血球アフェレーシス手順又は前記トランスフェクトされたT細胞の注入の1つ以上を行う施設に関連付けられた第2の患者IDとを含む、請求項16に記載の方法。
  30. 前記コンピューティングデバイスが、前記追跡イベントを規則的な順序で保存する、請求項16に記載の方法。
  31. 患者固有の免疫療法手順を実施する方法であって:
    患者のためのトランスフェクトされたT細胞を作製する細胞注文要求を受信すること;
    プロセッサ上で実行されるイベント追跡モジュールにより、前記細胞注文要求に関連付けられた患者固有識別子を生成すること;
    前記患者の血流に注入するトランスフェクトされたT細胞を作製するプロセスを開始すること
    (該プロセスが、
    前記患者の血液サンプルに対して白血球アフェレーシス手順を実施して、前記サンプルからT細胞を収集することと、
    前記収集されたT細胞を容器に移すことと、
    前記患者固有識別子を前記容器にラベル付けすることと、
    前記収集されたT細胞を製造施設に送ることと、
    細胞修飾技術を使用して、前記収集されたT細胞からトランスフェクトされたT細胞を作製することと、
    前記製造施設からトランスフェクトされたT細胞を受け取ることと、及び
    前記トランスフェクトされたT細胞を前記患者の血流に注入すること
    を含む);
    白血球アフェレーシス手順の地点にある第1のクライアントデバイスから、白血球アフェレーシス手順を確認し、前記患者固有識別子を含む第1の追跡イベントを前記イベント追跡モジュールに受信すること;
    前記イベント追跡モジュールによって、前記患者固有識別子に関するデータ構造に前記第1の追跡イベントを統合すること(該データ構造がデータベースに保存され、前記統合工程が前記第1の追跡イベントと共に第1のタイムスタンプを記録する);
    前記製造施設にある第2のクライアントデバイスから、前記製造施設での前記収集されたT細胞の受け取りを確認し、患者固有識別子を含む第2の追跡イベントを前記イベント追跡モジュールに受信すること;並びに、
    前記イベント追跡モジュールによって、前記患者固有識別子に関する前記データ構造に前記第2の追跡イベントを統合すること(該統合工程が、前記第2の追跡イベントと共に第2のタイムスタンプを記録する);
    を含む、方法。
  32. 患者固有の免疫療法手順を実施する方法であって:
    プロセッサ上で実行された追跡モジュールによって、患者に対してトランスフェクトされたT細胞を作製する細胞注文要求を受信すること;
    前記追跡モジュールによって、前記細胞注文要求に関連付けられた、患者を識別する患者固有識別子、及び細胞注文ロットを生成すること;
    前記細胞の注文を追跡するデータレコードをデータベースに生成すること(該データレコードが、前記患者固有識別子に従って前記データベースで識別される);
    前記追跡モジュールによって、前記収集されたT細胞の製造施設への出荷の準備ができていることを示す第1の追跡イベントを受信すること;
    前記第1の追跡イベントに従って、前記患者固有識別子に対応するデータレコードを更新すること;
    前記製造施設で受け取られた容器に基づく前記追跡モジュールによって、前記収集されたT細胞が製造施設で受け取られたことを示す第2の追跡イベントを受信すること;
    前記第2の追跡イベントに従って前記患者固有識別子に対応するデータレコードを更新すること;
    細胞修飾技術を使用して前記収集されたT細胞からトランスフェクトされたT細胞を作製した製造施設に基づく前記追跡モジュールにより、前記トランスフェクトされたT細胞が作製されたことを示す第3の追跡イベントを受信すること;
    前記第3の追跡イベントに従って、前記患者固有識別子に対応するデータレコードを更新すること;
    前記製造施設から受け取ったトランスフェクトされたT細胞に基づく前記追跡モジュールによって、前記トランスフェクトされたT細胞が受け取られたことを示す第4の追跡イベントを受信すること;
    前記第4の追跡イベントに従って、前記患者固有識別子に対応するデータレコードを更新すること;
    前記患者の血流に注入されたトランスフェクトされたT細胞に基づく追跡モジュールによって、前記トランスフェクトされたT細胞が前記患者の血流に注入されたことを示す第5の追跡イベントを受信すること;及び
    前記第5の追跡イベントに従って、前記患者固有識別子に対応するデータレコードを更新すること;
    を含み、
    前記第1、第2、第3、第4及び第5の追跡イベントのそれぞれが、前記患者固有識別子、タイムスタンプ及びイベント識別子を含み、
    前記患者固有識別子に対応するデータレコードが、該データレコードがそれぞれのイベントに従って更新される時に、規則的な順序で、前記第1、第2、第3、第4及び第5の追跡イベントを保存する、
    方法。
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