JPWO2019098241A1 - 乳房炎用医薬組成物、および治療方法 - Google Patents

Abstract

安全で、取り扱い性や経済性に優れた新しい乳房炎用医薬を提供する。本発明の乳房炎用医薬組成物は、オゾン溶存グリセリンを含み、乳房炎の治療に利用できる。本発明の乳房炎用医薬組成物の投与対象は、例えば、ヒト、ヒトを除く非ヒト動物であり、ウシ、ヤギ、ヒツジ等の搾乳動物を含む。

Description

本発明は、乳房炎用医薬組成物、およびそれを用いた治療方法に関する。

乳房炎とは、乳房内に侵入した微生物の定着と増殖によって起きる乳管系や乳腺組織の炎症をいい、哺乳動物において大きな問題となっている。特に乳牛においては、疾病の３割を占め、生産乳量の減少や乳質の低下等の経済的な問題を引き起こしている。

乳房炎の治療については、広く抗生物質が用いられているが、抗生物質の抗菌スペクトルの狭さや、耐性菌の出現によって、十分な治療効果が得られないこともあった。また、乳牛に抗生物質を用いた場合、乳における薬剤残留によって、牛乳が出荷停止となり経済的損失が大きく、抗生物質の代替となる殺菌剤のニーズがあった。

抗生物質の代替となる殺菌剤として、オゾンガスを用いて乳牛の乳房炎を治療する試みがなされてきた（特許文献１〜４、非特許文献１〜３）。

オゾンガスは、病原微生物の種類を選ぶことなく作用し、また、抗生物質の場合のように薬剤残留による出荷への影響がないとされており（特許文献１）、抗生物質に代替し得る治療効果が期待できる（非特許文献１および２）。しかしながら、オゾンガスは、化学的に不安定であるばかりでなく、強力な酸化力を有することから、人体に有毒であり、取り扱いが困難である。しかも、オゾン発生装置等の大掛かりな装置が必要となり、簡便に用いることができないという欠点があった。

オゾン発生装置を携帯型にすることも検討されてきたが（特許文献２）、装置が複雑化し、製造コストが高騰する虞がある。また、オゾンガスは化学的安定性の点で取り扱い性が悪いところ、オゾンガスを冷却することで劣化を抑制する試みがなされているが（特許文献３）、専用の気密性容器が必要となり、簡便に用いることができない。

特開平９−１５４８６２号公報 特開２００８−２８９５２３号公報 特開２００３−６３８０５号公報 特開平９−２８９９９５号公報 特開２００５−２３２０９４号公報 特開２０１１−４２６８９号公報

Ogata A. et al. "Intramammary application of ozone therapy to acute clinical mastitis in dairy cows", J Vet Med Sci. (2000) 62(7):681-686. 岡本誠、「牛の甚急性乳房炎に対するオゾンガス乳房内注入による乳汁中エンドトキシン濃度の変化および治療効果」、家畜診療、52巻12号、721〜726頁、2005年12月。 Joo, Kwon-Hyun et al. "Therapeutic effect of ozone gas on bovine mastitis", Journal of Veterinary Clinics (2005) 22(4): 314-317. Shinozuka Y. et al. "Therapeutic efficacy of mammary irrigation regimen in dairy cattle diagnosed with acute coliform mastitis", J Vet Med Sci. (2009) 71(3):269-273.

オゾンガス以外の態様、例えば、オゾン水やオゾン軟膏の態様について言及されている文献も存在するが（特許文献４、非特許文献３）、実際に乳房炎の治療効果を示したとされる報告はなされていない。また、オゾン溶存グリセリンの形態が、創傷用の外用剤としての用途の報告にすぎない（特許文献５および６）。そして、急性大腸菌性乳房炎に対してオゾン水を用いて乳房洗浄を行った場合は、生理食塩水で乳房洗浄を行った場合と有意差がないことが報告されている（非特許文献４）。このように、オゾンを利用した乳房炎の治療法は、未だ実用的なレベルには達しておらず、とりわけオゾンガス以外の態様においては、実質的な議論もなされていないのが現状である。

前述のように、乳房炎の治療においてオゾンガスを用いるためには、大掛かりな装置が必要となり、オゾンガスの化学的安定性、安全性等の観点から、取り扱いが容易ではない。このため、結局、乳房炎の治療においては、オゾンガスではなく、抗生物質を用いることを余儀なくされている。本発明者らは、現状では、抗生物質による耐性菌の出現の問題や乳における薬剤残留の問題等は、オゾンガスを用いることでは実質的には解決されていないことから、依然として、抗生物質の代替となる殺菌剤を得ることが急務であるとの認識を抱くに至った。すなわち、本発明の課題は、安全で、取り扱い性や経済性に優れた新しい乳房炎用医薬を提供することにある。

本発明者らは、かかる課題を解決するために鋭意研究を重ねる中で、オゾン溶存グリセリンを乳房炎に罹患した患畜に投与することによって、極めて効果的に乳房炎を治療することができることを見出し、本発明を完成するに至った。すなわち本発明は、以下に関する。

本発明の乳房炎用医薬組成物は、オゾン溶存グリセリンを含む。

本発明の動物の乳房炎の治療方法は、前記本発明の乳房炎用医薬組成物を乳房内へ投与する投与工程を含む。

本発明のオゾン溶存グリセリンは、乳房炎の治療に使用するためのオゾン溶存グリセリンである。

本発明の医薬組成物は、乳房炎を治療できる。本発明の医薬組成物は、特に、有毒で化学的に不安定なオゾンガスを用いないことから、安全性および取り扱い性に優れている。また、本発明の医薬組成物は、オゾンガスを用いた場合に問題となっていたオゾンガス発生装置等の特別な機器を用意する必要がなく、比較的低コストで、簡便に用いることができる。

本発明は、オゾンガス以外の態様で、初めて乳房炎に対する治療効果を確認したものであり、乳房炎の治療におけるオゾンの利用について新たな途を拓くものである。また、本発明において有効成分であるオゾン溶存グリセリンは、これまで外用剤としての実用化に止まるものであって、オゾン溶存グリセリンの利用の側面においても新たな途を拓くものである。

本発明によれば、乳房炎の治療において、抗生物質の代替となる実用的な新たな医薬組成物を提供することができる。このため、本発明によれば、例えば、抗生物質のような耐性菌の問題を回避できる。また、本発明におけるオゾン溶存グリセリンは、オゾンとグリセリンからなり、例えば、乳中の薬剤残留による出荷停止の問題も回避できる。

＜医薬組成物＞
本発明の医薬組成物は、前述のように、オゾン溶存グリセリンを含む乳房炎用医薬組成物である。（以下、「組成物」ともいう）。本発明の組成物は、乳房炎の有効成分として、オゾン溶存グリセリンを使用することが特徴であって、その他の構成については、何ら制限されない。

本発明の組成物は、乳房炎に対する治療用の医薬組成物である。本発明において、「治療」とは、例えば、いわゆる、乳房炎の症状を緩和したり、乳房炎を治癒するための行為の他、乳房炎への罹患を防止する予防の行為の意味も含む。すなわち、本発明の組成物は、例えば、乳房炎の緩和、治癒、および予防のために使用でき、いずれか１つを目的として使用されてもよいし、２つ以上を目的として使用されてもよい。

本発明の組成物は、例えば、有効成分のみからなる組成物でもよいし、さらに、有効成分以外の添加成分を含む組成物でもよい。前記有効成分は、例えば、オゾン溶存グリセリンのみからなってもよいし、オゾン溶存グリセリンの他に、さらに、他の有効成分を含んでもよいが、オゾン溶存グリセリンは、前述のような効果を奏することから、前記有効成分は、オゾン溶存グリセリンからなることが好ましい。

本発明の組成物は、前記オゾン溶存グリセリンの他に、例えば、グリセリン以外の希釈物質をさらに含んでもよい。前記希釈物質は、例えば、水性溶媒であり、水、緩衝液、または生理的食塩水等が挙げられる。

本発明の組成物において、前記オゾン溶存グリセリンのオゾン濃度は、特に制限されず、例えば、治療の目的、対象動物の種類、乳房炎の程度等に応じて、適宜設定できる。前記オゾン溶存グリセリンのオゾン濃度は、例えば、１ｐｐｍ〜１００００ｐｐｍであり、１０ｐｐｍ〜１００００ｐｐｍであり、好ましくは、１００ｐｐｍ〜４０００ｐｐｍである。また、本発明の組成物のオゾン濃度は、例えば、１〜１００００ｐｐｍ、１０ｐｐｍ〜１００００ｐｐｍであり、好ましくは、１００ｐｐｍ〜４０００ｐｐｍである。

本発明の組成物は、例えば、種々の乳房炎を治療できる。前記乳房炎としては、例えば、乳汁および乳房は正常であるが、体細胞の増加が認められ、有意な細菌が分離される潜在性乳房炎や、亜急性乳房炎、急性乳房炎、甚急性乳房炎等の臨床症状が認められる臨床性乳房炎や、臨床性乳房炎が治癒せずに進行した慢性乳房炎等があげられ、これらの乳房炎に対して、治療できる。

本発明の組成物の対象は、例えば、特に限定されず、ヒトまたは非ヒト動物を対象とすることができる。本発明の組成物の対象となる非ヒト動物としては、例えば、ウシ、スイギュウ、ヤギ、ヒツジ、ヤク、ウマおよびラクダ等の搾乳動物であり、特に好ましくは乳牛である。前記対象は、例えば、すでに乳房炎を発症した動物でもよいし、乳房炎の発症が確認されていない動物でもよい。

本発明に用いるオゾン溶存グリセリンの製造方法は、特に制限されず、例えば、グリセリン溶液とオゾンを含む気体とを、気液接触させることで製造することができる。

前記グリセリン溶液は、グリセリンが高濃度であることが好ましい。前記高濃度のグリセリン溶液としては、例えば、グリセリン濃度７５重量％以上のグリセリン溶液を用いることができ、具体例として、日本薬局方品の８４〜８７重量％のグリセリン溶液が好ましく、日本薬局方品のグリセリン濃度９８重量％以上の濃グリセリン溶液がより好ましく、濃度９８．５重量％以上の精製グリセリン溶液がさらに好ましい。前記グリセリン溶液は、例えば、グリセリン濃度が相対的に高い程、オゾンをより高濃度に溶存させることができる。前記グリセリン溶液において、グリセリンに対する溶媒は、特に制限されず、例えば、水等の水性溶媒である。

前記オゾンを含む気体は、オゾンが高濃度であることが好ましい。前記オゾン濃度の高い気体の製造方法は、特に制限されず、例えば、酸素ガスに無声放電することでオゾンを生成するオゾン発生装置を用いて製造することができる。酸素ガスを用いる場合には、例えば、医療用の酸素ボンベを用いてもよいし、また、酸素発生装置で製造された酸素ガスを用いてもよい。

前記グリセリン溶液と前記オゾンを含む気体とを気液接触させる方法としては、特に制限されず、例えば、タンクに高濃度（例えば、９８重量％以上）のグリセリン溶液を入れ、散気管を用いて前記タンク内に前記オゾン濃度の高い気体を微細な気泡として放出する方法がある。具体的には、例えば、オゾン濃度８０ｇ／ｋＬ（約３７０００ｐｐｍ）の気体を、前記濃グリセリン溶液中に、約７日間曝気することにより、オゾン濃度約３０００ｐｐｍのオゾン溶存グリセリン溶液を製造することができる。曝気の時間は、特に制限されず、例えば、相対的により長時間行うことにより、オゾン濃度がより高濃度のオゾン溶存グリセリン溶液を製造することができる。

本発明に用いるオゾン溶存グリセリンのオゾン濃度は、乳房炎の治療目的に応じて、適宜、調整することができ、特に限定されない。オゾン溶存グリセリンのオゾン濃度は、典型的には、例えば、１ｐｐｍ〜１００００ｐｐｍ、１０ｐｐｍ〜１００００ｐｐｍであり、好ましくは、１００ｐｐｍ〜４０００ｐｐｍである。

＜治療方法＞
本発明の乳房炎の治療方法は、前述のように、医薬組成物を乳房内に投与する工程を含み、前記医薬組成物が、前記本発明の乳房炎用医薬組成物である。本発明の治療方法は、前記本発明の組成物を使用することが特徴であって、その他の工程および条件は、何ら制限されない。

本発明の治療方法において、前記治療目的は、特に制限されず、前述のように、すでに罹患した対象について、乳房炎の緩和、および治癒を目的としてもよいし、罹患していない対象または罹患の有無が不明な対象について、乳房炎の予防を目的としてもよく、両方であってもよい。すなわち、本発明の治療方法は、例えば、乳房炎を発症した対象に前記組成物を投与する、いわゆる治療でもよいし、乳房炎を発症していない対象に前記組成物を投与する予防でもよいし、乳房炎の発症の有無にかかわらず対象に前記組成物を投与する治療および予防でもよい。

本発明の治療方法において、前記組成物の乳房内への投与方法は、特に制限されない。前記投与方法は、例えば、乳房へ注射による注入、乳頭口からカニューレによる注入等によって行われてもよい。例えば、治療対象への侵襲性の低減等の観点から、乳房内への投与は、乳頭口からカニューレによる注入が好ましい。

本発明の治療方法において、治療対象に対する前記組成物の投与条件は、特に制限されず、前記治療対象の種類、大きさ、治療および予防等の目的、症状の程度等に応じて、適宜決定できる。前記組成物の投与は、例えば、１日あたりの投与回数が、１〜２回であり、好ましくは１回である。また、体重にかかわらず、例えば、これまで認可されている乳房炎用注入軟膏と同様に、１ｍｌから１０ｍｌを投与してもよい。

＜オゾン溶存グリセリン＞
本発明のオゾン溶存グリセリンは、前述のように、乳房炎の治療に使用するためのオゾン溶存グリセリンである。本発明のオゾン溶存グリセリンは、前述した本発明の乳房炎医薬組成物および治療方法の記載を援用できる。

また、本発明のオゾン溶存グリセリンの使用は、乳房炎治療の医薬の製造のためのオゾン溶存グリセリンの使用である。

以下、本発明について、さらに詳細に実施例を用いて説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。

［実施例１］オゾン溶存グリセリン（オゾンジェル）の調製
濃グリセリンとオゾンとを気液接触させ、以下に示すようにして、オゾン溶存グリセリン溶液（オゾンジェル）を製造した。ここで、前記濃グリセリンとは、日本薬局方品の９８重量％以上の濃度のグリセリンを意味する。
接触槽として、容量５０Ｌのテフロン（登録商標）製タンクを用いた。前記タンクの底面に散気管を設置し、オゾンを微細な気泡として前記タンク内に供給することができるようにした。９０体積％以上の高濃度酸素を含む高濃度酸素気体を原料として、毎時１００ｇのオゾン発生能力を有する無声放電式オゾン発生装置を使用した。

前記タンクに２２ｋｇの前記濃グリセリンを入れ、前記オゾン発生装置に毎分２０Ｌの前記高濃度酸素気体を送り込み、オゾンを含む気体を発生させ、前記発生した気体を、前記散気管から前記タンク内に７日間以上放出し、終濃度４０００ｐｐｍのオゾン濃度のオゾン溶存グリセリン溶液を得た。

［実施例２］オゾン溶存グリセリン（オゾンジェル）の殺菌効果
実施例１で調製されたオゾン溶存グリセリン（オゾン濃度４０００ｐｐｍ）について、各種の乳房炎の原因菌に対する殺菌効果を、下記方法により確認した。

下記表１に示す原因菌を、それぞれ培地に接種し、３７℃で培養し、菌液濃度約３×１０^８ＣＦＵ／ｍＬに調整した。前記培地は、前記原因菌の種類に応じて一般的な培地を使用した。前記菌液０．１ｍＬに、前記オゾン溶存グリセリン１ｍＬを加え、室温で均一に混合した。そして、混合開始から、０時間（直後）、３時間後、６時間後に、停止液（６０ｍｇ／ｍＬ チオ硫酸ナトリウム水溶液）を添加し、菌浮遊液を調製した。前記原因菌ごとに１０倍希釈系列を調製し、原因菌に対する前記培地を用いた平板培養法により、３７℃で培養を行った。そして、培養後に増殖した集落数（ＣＦＵ）を測定し、１ｍＬあたりの生菌数を算出した（検出限界１．０×１０^２ＣＦＵ／ｍＬ）。また、ブランクとして、前記オゾン溶存グリセリンに代えて、９８％グリセリン１ｍＬを添加して、同様に培養を行い、生菌数を算出した。これらの結果を表１に示す。

前記表１に示すとおり、前記オゾン溶存グリセリンは、乳房炎の代表的な原因菌である黄色ブドウ球菌（Staphylococcus aureus）および表皮ブドウ球菌（Staphylococcus epidermidis）のいずれのブドウ球菌に対しても、強く継続的な殺菌効果を示した。また、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus (MRSA)）に対しても強く継続的な殺菌効果を示しており、耐性菌に対する十分な殺菌効果を示した。さらに、前記オゾン溶存グリセリンは、急性乳房炎等の原因菌である大腸菌（Escherichia coli）および肺炎桿菌（Klebsiella pneumoniae）に対して、強く継続的な殺菌効果を示した。

また、前記オゾン溶存グリセリンは、乳房炎の原因となることが知られている、緑膿菌（Pseudomonas aeruginosa）およびカンジダ・アルビカンス（Candida albicans）に対して強く継続的な殺菌効果を示した。したがって、本発明におけるオゾン溶存グリセリンは、種々の乳房炎に対して広く効果的に予防効果および／または治療効果を奏することが示された。

［実施例３］慢性乳房炎へのオゾン溶存グリセリンの投与
実施例１で調製されたオゾン溶存グリセリンを用い、慢性乳房炎を発症した乳牛に対して投与実験を行った。前記オゾン溶存グリセリンは、オゾン濃度４０００ｐｐｍと１０００ｐｐｍとを使用した。オゾン濃度１０００ｐｐｍのオゾン溶存グリセリンは、前記実施例１で調製した４０００ｐｐｍのオゾン溶存グリセリンを、生理的食塩水で希釈した調製した。乳牛への投与は、ミルクカニューレを用いて、乳頭口から乳房内へ投与した。投与は、１日１回とした。そして、投与開始日と最終観察日に、乳汁を採取し、それぞれの乳汁について、前記乳汁中に含まれる菌種を同定し、体細胞数（白血球、乳腺上皮細胞等の細胞の総数、万個／ｍＬ）を測定した。また、治療効果の有無（有効性の有無）については、体細胞数の結果を含め、臨床的に獣医師によって判断された。なお、体細胞数は、５０万個／ｍＬ以下であれば、乳房炎への影響がないと判断し、最終的に臨床症状が治癒し、且つ、乳汁を合乳することでその合乳における体細胞数が３０万個以下であれば出荷可能という点も加味し、獣医師が治癒判断を行った。

＜投与例１＞
前記オゾン溶存グリセリン（オゾン濃度１０００ｐｐｍ）５ｍｌを生理的食塩水４５ｍｌにて１０倍希釈し、この希釈液総量５０ｍＬを１４日間、前記乳牛３個体に投与した（症例１〜２）。これらの結果を表２に示す。下記表２において、有効性は、獣医師による治療効果の有無の結果であり、〇が、治療効果あり、×が、治療効果無しの判断である（後述する表においても同様）。表２に示すとおり、前記オゾン溶存グリセリンを長期投与した結果、原因となる細菌数が著しく減少し、前記オゾン溶存グリセリンが有効であることが確認された。

＜投与例２＞
前記オゾン溶存グリセリン（オゾン濃度４０００ｐｐｍ）５ｍｌを生理的食塩水４５ｍｌにて１０倍希釈し、この希釈液総量５０ｍＬを短期または長期で投与した（症例４および５）。これらの結果を表３に示す。表３に示すとおり、前記オゾン溶存グリセリンを長期投与または短期投与した結果、原因となる細菌数が著しく減少し、前記オゾン溶存グリセリンが有効であることが確認された。

＜投与例３＞
前記オゾン溶存グリセリン（オゾン濃度１０００ｐｐｍ）５ｍｌをそのまま乳房内へ投与した（症例６）。この結果を表４に示す。表４に示すとおり、前記オゾン溶存グリセリンを希釈せずに原液をそのまま注入しても、細菌数が著しく減少し有効であることが確認された。

＜投与例４＞
前記オゾン溶存グリセリン（オゾン濃度４０００ｐｐｍ）５ｍｌをそのまま乳房内へ投与した（症例７〜２１）。これらの結果を表５に示す。表５に示すとおり、１５症例中１３症例で有効であり、有効率８６．６％であった。本実施例における投与対象は、慢性乳房炎の乳牛であり、慢性乳房炎は、耐性により抗生物質が無効になったことで慢性化している。したがって、慢性乳房炎の乳牛に対して、このような極めて高い有効率を示すということは、耐性菌の影響を受けることなく、効果的に慢性乳房炎を治療できることを意味する。

このように、本発明の組成物の投与によって、体細胞数が減少したことにより、出荷可能な乳量が増加し、乳房炎による乳量損失を低減することができた。また、前記組成物の投与による、乳牛への悪影響は見られなかった。

慢性乳房炎は、臨床性乳房炎が治癒せずに進行したものであり、これまで抗生物質の投与などを試みても治療できなかった例も含まれる。本発明の組成物の投与によって、慢性乳房炎を極めて高い有効率で治療できたことは、極めて優れた結果である。

以上、実施形態を参照して本発明を説明したが、本発明は、上記実施形態に限定されるものではない。本発明の構成や詳細には、本発明のスコープ内で当業者が理解しうる様々な変更をできる。

この出願は、２０１７年１１月１６日に出願された日本出願特願２０１７−２２０７７５を基礎とする優先権を主張し、その開示のすべてをここに取り込む。

本発明の乳房炎用医薬組成物は、例えば、ヒト用または非ヒト動物用として用いることができる。特に乳牛等の搾乳動物の乳房炎を治療でき、ヒトに対する医薬のみならず、動物に対する医薬としても有用である。

Claims (14)

1. オゾン溶存グリセリンを含む、乳房炎用医薬組成物。
2. グリセリン以外の希釈物質をさらに含む、請求項１に記載の医薬組成物。
3. 前記希釈物質が、水性溶媒である、請求項２記載の医薬組成物。
4. 前記水性溶媒が、水または生理的食塩水である、請求項３に記載の医薬組成物。
5. 有効成分として、前記オゾン溶存グリセリンを含む、請求項１から３のいずれか一項に記載の乳房炎用医薬組成物。
6. 前記乳房炎が、慢性乳房炎である、請求項１から５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
7. 搾乳動物用の医薬組成物である、請求項１から６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
8. 前記搾乳動物が、乳牛である、請求項６に記載の医薬組成物。
9. 医薬組成物を乳房内に投与する投与工程を含み、
   前記医薬組成物が、請求項１から８のいずれか一項に記載の乳房炎用医薬組成物である、乳房炎の治療方法。
10. 前記投与工程において、乳頭口から、カニューレによって前記医薬組成物を注入する、請求項９に記載の方法。
11. 投与対象の動物が、非ヒト動物である、請求項９または１０記載の方法。
12. 前記非ヒト動物が、搾乳動物である、請求項１１に記載の方法。
13. 前記搾乳動物が、乳牛である、請求項１２に記載の方法。
14. 乳房炎の治療に使用するためのオゾン溶存グリセリン。