JPWO2019004304A1 - 細胞保存容器 - Google Patents
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Abstract
保存時に破損しにくい細胞保存容器を提供すること。細胞保存容器１は、可撓性を有する樹脂部材により構成され細胞収容部１１を有する容器本体１０と、容器本体１０に接続され細胞収容部１１に細胞を導入する細胞導入チューブ２０と、細胞導入チューブ２０を挟むように配置され、細胞導入チューブ２０における容器本体１０との接続部の近傍を保護する一対のチューブ保護部４０と、を備える。チューブ保護部４０は、容器本体１０を構成するシート状部材５０，６０により構成されることが好ましい。
Description
本発明は、生体試料から採取された間葉系細胞を含む組織由来細胞、造血幹細胞を含む血液細胞、それらの細胞を培養した細胞や遺伝子改変された細胞を含む細胞浮遊液、及び血漿を含む体液やそれらの抽出物を保存する細胞保存容器に関する。
従来、造血幹細胞移植（末梢血幹細胞、臍帯血や骨髄細胞）では、必要に応じて細胞は凍結・解凍して移植されている。また、生体組織試料から採取調製されて得られた間葉系細胞に代表される組織細胞、それらの細胞を培養した細胞や遺伝子改変された細胞は、再生医療や免疫細胞療法、遺伝子細胞治療等、様々な用途に用いられている。こうした細胞は、凍害保護液に浮遊され、細胞保存容器に収容されて、凍結され、解凍して使用されるまで長期間凍結保管される（例えば、特許文献１参照）。血漿を含む体液やそれらの抽出物も同様に長期凍結保管されている（以下、これらの細胞、細胞浮遊液、体液等を総称して細胞という）。
特許文献１で提案された細胞保存容器は、可撓性を有する樹脂部材により構成されており、細胞を収容可能な細胞収容部を有する容器本体と、この容器本体に接続され細胞収容部に細胞を導入する細胞導入チューブと、細胞収容部に収容された細胞を導出する細胞導出部と、を備える。
以上の細胞保存容器に細胞を収容して保存する場合には、まず、細胞導入チューブから細胞収容部に細胞が導入される。次いで、細胞導入チューブが容器本体の近傍において溶着されると共に切断されて（溶断されて）密閉される。その後、細胞が収容された細胞保存容器は、凍結保存される。
ここで、細胞保存容器が凍結された場合、この細胞保存容器を構成する樹脂部材は硬化する。そのため、細胞保存容器の保存時に細胞導入チューブの溶断部分が他の細胞保存容器や細胞保存容器を収容する容器等に接触して、この溶断部分において細胞導入チューブが破損してしまうおそれがある。
従って、本発明は、凍結保存時に細胞導入チューブが破損しにくい細胞保存容器を提供することを目的とする。
本発明は、可撓性を有する樹脂部材により構成され細胞収容部を有する容器本体と、前記容器本体に接続され前記細胞収容部に細胞を導入する細胞導入チューブと、前記細胞導入チューブを挟むように配置され、該細胞導入チューブにおける前記容器本体との接続部の近傍を保護する一対のチューブ保護部と、を備える細胞保存容器に関する。
また、前記容器本体は、シート状部材が重ね合わせられると共に周縁部が接合されて形成され、前記チューブ保護部は、前記容器本体の周縁部から延出していることが好ましい。
また、前記チューブ保護部は、前記容器本体を構成するシート状部材により構成されることが好ましい。
また、前記チューブ保護部には、前記細胞導入チューブの外形に対応した凹溝が形成されていることが好ましい。
また、前記凹溝は、前記細胞導入チューブの外形よりも大きく形成されることが好ましい。
また、細胞保存容器は、前記チューブ保護部が前記細胞導入チューブを挟んだ状態を保持させる係止部を更に備えることが好ましい。
また、前記一対のチューブ保護部は、互いに異なる大きさに形成されることが好ましい。
また、前記一対のチューブ保護部は、互いに同一形状に形成され、かつ、重ならない部分を有することが好ましい。
また、前記容器本体は、シート状部材が重ね合わせられると共に周縁部が接合されて形成されると共に、前記細胞収容部から外方に延出するシール部を有し、前記細胞収容部は、該細胞収容部の断面の内壁側が曲線形状となるように前記シート状部材が立体成形されて構成されていることが好ましい。
また、前記細胞収容部は、平面方向の断面形状及び厚さ方向の断面形状が楕円形状に形成されることが好ましい。
また、前記細胞導入チューブは、前記細胞収容部における長径側の端部に接続されることが好ましい。
また、細胞保存容器は、前記細胞収容部における前記細胞導入チューブが接続される側と反対側の端部に配置される細胞導出部を更に備えることが好ましい。
また、前記シール部は、平面視において矩形形状に形成されることが好ましい。
本発明の細胞保存容器によれば、保存時に破損しにくい。
以下、本発明の細胞保存容器の好ましい各実施形態について、図面を参照しながら説明する。本発明の細胞保存容器は、生体試料から採取された幹細胞等の細胞を凍結保存する場合に用いられる。
本明細書において、細胞とは、生体試料から採取された間葉系細胞を含む組織由来細胞、造血幹細胞を含む血液細胞、それらの細胞を培養した細胞や遺伝子改変された細胞を含む細胞浮遊液及び血漿を含む体液やそれらの抽出物を総称していう。
本明細書において、細胞とは、生体試料から採取された間葉系細胞を含む組織由来細胞、造血幹細胞を含む血液細胞、それらの細胞を培養した細胞や遺伝子改変された細胞を含む細胞浮遊液及び血漿を含む体液やそれらの抽出物を総称していう。
まず、第１実施形態の細胞保存容器１について、図１〜図４を参照しながら説明する。
第１実施形態の細胞保存容器１は、図１〜図３に示すように、容器本体１０と、細胞導入チューブ２０と、ポート部材３０と、チューブ保護部４０と、を備える。
第１実施形態の細胞保存容器１は、図１〜図３に示すように、容器本体１０と、細胞導入チューブ２０と、ポート部材３０と、チューブ保護部４０と、を備える。
容器本体１０は、ＥＶＡ樹脂（エチレン−酢酸ビニル共重合樹脂）等の可撓性を有する熱可塑性樹脂部材により構成される。容器本体１０は、熱可塑性樹脂からなる第１シート状部材５０及び第２シート状部材６０が重ね合わせられると共に、それぞれの周縁部の大部分が接合されることで扁平な袋状に形成される。第１実施形態では、容器本体１０は、平面視で矩形状に形成される。
容器本体１０は、細胞収容部１１と、シール部１２と、を備える。細胞収容部１１は、第１シート状部材５０及び第２シート状部材６０に囲まれた空間であり、所定の量の細胞を収容する。細胞収容部１１の容量は、好ましくは１０ｍＬ〜５００ｍＬ、より好ましくは２５ｍＬ〜２００ｍＬである。
シール部１２は、細胞収容部１１の周縁において第１シート状部材５０と第２シート状部材６０とが接合された部分により構成される。シール部１２は、図１〜３に示すように、容器本体１０の全周に亘って形成される。シール部１２の幅は、細胞保存容器１の強度を確保する観点から、３ｍｍ〜２０ｍｍであることが好ましく、５ｍｍ〜１５ｍｍであることがより好ましい。
細胞導入チューブ２０は、生体試料から採取された細胞を無菌的かつ気密の状態で細胞収容部１１に導く。この細胞導入チューブ２０は、ＥＶＡ樹脂等の熱可塑性樹脂により構成される。細胞導入チューブ２０の一端部は、容器本体１０の一方の短辺部分の一端側に接続される。より具体的には、図２に示すように、第１シート状部材５０及び第２シート状部材６０の周縁部の短辺部分の一端側には、それぞれ、細胞導入チューブ２０の外形に対応した形状の断面視半円形状の凹溝５１，６１が真空成形等により形成されている。そして、細胞導入チューブ２０は、一端部が細胞収容部１１に連通するように凹溝５１，６１に配置され、この状態で第１シート状部材５０及び第２シート状部材６０の周縁部が接合されることで容器本体１０に接続される。
細胞導入チューブ２０の他端側は、例えば、血液等の生体試料を収容する生体試料収容容器（図示せず）に無菌的かつ気密に接続される。
ポート部材３０は、細胞収容部１１に収容された細胞を取り出す細胞導出部として機能する。ポート部材３０は、細胞導入チューブ２０と同様のＥＶＡ樹脂等の熱可塑性樹脂により構成される。
ポート部材３０は、図２に示すように、筒状部３１と、筒状部３１の一端側から長手方向に延出する一対のガード部３２と、を備える。ポート部材３０は、容器本体１０における細胞導入チューブ２０が配置された短辺部分の他端側に配置される。
より具体的には、第１シート状部材５０及び第２シート状部材６０の周縁部の短辺部分の他端側には、それぞれ、ポート部材３０の外形に対応した形状の断面視半円形状の凹部５２，６２が真空成形等により形成されている。そして、ポート部材３０は、図１に示すように、一対のガード部３２が細胞収容部１１の内部に位置し、かつ、一対のガード部３２が第１シート状部材５０及び第２シート状部材６０に対向するように凹部５２，６２に配置される。また、ポート部材３０の他端部は、第１シート状部材５０及び第２シート状部材６０の外縁よりも内側、かつ、凹部５２，６２の端部よりも内側に配置される。この状態で、第１シート状部材５０及び第２シート状部材６０の周縁部が接合されることで、ポート部材３０は、一端側が細胞収容部１１に連通し他端側がシール部１２に覆われた状態で容器本体１０と一体化される。
より具体的には、第１シート状部材５０及び第２シート状部材６０の周縁部の短辺部分の他端側には、それぞれ、ポート部材３０の外形に対応した形状の断面視半円形状の凹部５２，６２が真空成形等により形成されている。そして、ポート部材３０は、図１に示すように、一対のガード部３２が細胞収容部１１の内部に位置し、かつ、一対のガード部３２が第１シート状部材５０及び第２シート状部材６０に対向するように凹部５２，６２に配置される。また、ポート部材３０の他端部は、第１シート状部材５０及び第２シート状部材６０の外縁よりも内側、かつ、凹部５２，６２の端部よりも内側に配置される。この状態で、第１シート状部材５０及び第２シート状部材６０の周縁部が接合されることで、ポート部材３０は、一端側が細胞収容部１１に連通し他端側がシール部１２に覆われた状態で容器本体１０と一体化される。
チューブ保護部４０は、シート状に形成され、細胞導入チューブ２０を挟むように一対配置される。そして、細胞導入チューブ２０における容器本体１０との接続部の近傍を保護する。ここで、細胞導入チューブ２０における容器本体１０との接続部の近傍とは、当該接続部（シール部１２の外縁）から５０ｍｍ程度までの範囲を示し、細胞収容部１１に細胞が収容された後に、細胞導入チューブ２０が溶断される部分を示す。
第１実施形態では、チューブ保護部４０は、第１シート状部材５０及び第２シート状部材６０の一部により構成される。具体的には、チューブ保護部４０は、第１シート状部材５０及び第２シート状部材６０における細胞導入チューブ２０が配置される部分を、容器本体１０を構成する部分（シール部１２の外縁）から更に細胞導入チューブ２０の延びる方向に延出させ、かつ、これら延出させた第１シート状部材５０及び第２シート状部材６０を接合しないことで形成される。ここで、延出させた第１シート状部材５０及び第２シート状部材６０は細胞導入チューブ２０とも接合されない。これにより、一対のチューブ保護部４０は、基端部のみがシール部１２の外縁において接合され、先端側が細胞導入チューブ２０を挟むように延出した形状となる。
第１実施形態では、チューブ保護部４０は、第１シート状部材５０及び第２シート状部材６０の一部により構成される。具体的には、チューブ保護部４０は、第１シート状部材５０及び第２シート状部材６０における細胞導入チューブ２０が配置される部分を、容器本体１０を構成する部分（シール部１２の外縁）から更に細胞導入チューブ２０の延びる方向に延出させ、かつ、これら延出させた第１シート状部材５０及び第２シート状部材６０を接合しないことで形成される。ここで、延出させた第１シート状部材５０及び第２シート状部材６０は細胞導入チューブ２０とも接合されない。これにより、一対のチューブ保護部４０は、基端部のみがシール部１２の外縁において接合され、先端側が細胞導入チューブ２０を挟むように延出した形状となる。
第１実施形態では、一対のチューブ保護部４０は、互いに異なる大きさに形成される。具体的には、一対のチューブ保護部４０は、図３に示すように、延出方向の長さの短い第１チューブ保護部４１と、延出方向の長さの長い第２チューブ保護部４２と、からなる。
図４に示すように、チューブ保護部４０の幅Ｗ１は、細胞導入チューブ２０の外径Ｄ１よりも広く形成される。チューブ保護部４０の幅Ｗ１は、細胞導入チューブ２０を好適に保護する観点から、細胞導入チューブ２０の外径Ｄ１の２倍〜１０倍であることが好ましく、３倍〜７倍であることがより好ましい。
図４に示すように、チューブ保護部４０の幅Ｗ１は、細胞導入チューブ２０の外径Ｄ１よりも広く形成される。チューブ保護部４０の幅Ｗ１は、細胞導入チューブ２０を好適に保護する観点から、細胞導入チューブ２０の外径Ｄ１の２倍〜１０倍であることが好ましく、３倍〜７倍であることがより好ましい。
チューブ保護部４０には、図２に示すように、細胞導入チューブ２０の外形に対応した凹溝５１，６１が形成されている。第１実施形態では、これら凹溝５１，６１は、シール部１２に形成された凹溝５１，６１と連続して一体的に形成されている。また、第１実施形態では、凹溝５１、６１の幅Ｗ２は、細胞導入チューブ２０の外径Ｄ１と略等しく、また凹溝５１，６１の深さＨ１は、細胞導入チューブ２０の外径Ｄ１の略２分の１に形成される。
次に第１実施形態の細胞保存容器１の使用方法について、図５Ａ〜図５Ｃを参照して説明する。
細胞保存容器１は、細胞導入チューブ２０を介して血液バッグ等の生体試料収容容器に無菌的かつ気密に接続されて用いられる。
細胞保存容器１に細胞を収容する場合、生体試料収容容器において分離された所定の細胞（例えば、血清や臍帯血）は、細胞導入チューブ２０を介して細胞収容部１１に導入される。
次いで、細胞収容部１１に細胞が収容された後、図５Ａ及び図５Ｂに示すように、細胞導入チューブ２０は、容器本体１０との接続部の近傍において溶断される。これにより、細胞保存容器１は密閉される。このとき、図５Ｂに示すように、一対のチューブ保護部４０をめくるようにして、細胞導入チューブ２０における一対のチューブ保護部４０に挟まれた部分が溶断される。これにより、細胞導入チューブ２０における溶断部分２１は、図５Ｃに示すように、一対のチューブ保護部４０により挟まれることで、外部に露出せず保護される。
この状態で、細胞保存容器１は、凍結保存される。
細胞保存容器１は、細胞導入チューブ２０を介して血液バッグ等の生体試料収容容器に無菌的かつ気密に接続されて用いられる。
細胞保存容器１に細胞を収容する場合、生体試料収容容器において分離された所定の細胞（例えば、血清や臍帯血）は、細胞導入チューブ２０を介して細胞収容部１１に導入される。
次いで、細胞収容部１１に細胞が収容された後、図５Ａ及び図５Ｂに示すように、細胞導入チューブ２０は、容器本体１０との接続部の近傍において溶断される。これにより、細胞保存容器１は密閉される。このとき、図５Ｂに示すように、一対のチューブ保護部４０をめくるようにして、細胞導入チューブ２０における一対のチューブ保護部４０に挟まれた部分が溶断される。これにより、細胞導入チューブ２０における溶断部分２１は、図５Ｃに示すように、一対のチューブ保護部４０により挟まれることで、外部に露出せず保護される。
この状態で、細胞保存容器１は、凍結保存される。
凍結保存された細胞保存容器１に収容された細胞を使用する場合には、まず、細胞収容部１１に収容された細胞を解凍する。次いで、容器本体１０のポート部材３０を覆っている部分（シール部１２）をハサミ等で切断してポート部材３０の先端（他端部）を露出させる。その後、先端に注射針が取り付けられたシリンジ（図示せず）等を用いて解凍された細胞をポート部材３０から採取する。
以上説明した第１実施形態の細胞保存容器１によれば、以下のような効果を奏する。
（１）細胞保存容器１が凍結保存されている状態では、細胞保存容器１を構成する熱可塑性樹脂は硬化する。そのため、細胞保存容器１の保存時に細胞導入チューブ２０の溶断部分２１が他の細胞保存容器や細胞保存容器を収容する容器等に接触して破損し、細胞保存容器１が開放して収容物が流出してしまう、また収容された細胞が汚染されてしまうおそれがある。そこで、細胞保存容器１を、細胞導入チューブ２０を挟むように配置される一対のチューブ保護部４０を含んで構成した。これにより、細胞収容部１１に細胞を導入した後、細胞導入チューブ２０を溶断した場合に、細胞導入チューブ２０の溶断部分２１をチューブ保護部４０により挟み込んで保護できる。よって、細胞導入チューブ２０の溶断部分２１が他の細胞保存容器や細胞保存容器を収容する容器等に接触しにくくできるので、細胞保存容器１が凍結された場合に細胞保存容器１を構成する樹脂部材が硬化しても、細胞導入チューブ２０の溶断部分２１を破損しにくくできる。
（２）容器本体１０を、第１シート状部材５０と第２シート状部材６０とを重ね合わせると共に周縁部を接合されて形成し、チューブ保護部４０を容器本体１０の周縁部から延出させて構成した。これにより、細胞導入チューブ２０における容器本体１０との接続部分の近傍（例えば、容器本体１０（シール部１２）の外縁から５０ｍｍまでの範囲であり、細胞を細胞収容部１１に導入した後、溶断部分２１となる箇所）を好適に保護できる。よって、残存部がより短くなるように細胞導入チューブ２０を溶断でき、かつ、溶断部分２１を好適に保護できる。その結果、細胞導入チューブ２０部分に残存する空気の量を低減できるので、空気に接触することに起因する細胞の品質の劣化を低減できる。また、残存する細胞導入チューブ２０の長さが長い場合には、細胞収容部１１に収容された細胞の一部が細胞導入チューブ２０の残存部分に付着すること等により利用可能な細胞の量が減少してしまうおそれがあるが、残存部を短くすることで細胞収容部１１に収容された細胞をより有効に利用できる。更に、チューブ保護部４０を容器本体１０の周縁部から延出させて構成することで、細胞導入チューブ２０と容器本体１０との接続部の近傍の強度を高められるので、細胞導入チューブ２０が容器本体１０との接続部において折れてしまうことを防げる。
（３）チューブ保護部４０を、容器本体１０を構成するシート状部材（第１シート状部材５０及び第２シート状部材６０）により構成した。これにより、容器本体１０とチューブ保護部４０を一体的に形成できるので、細胞保存容器１の製造効率を向上させられる。
（４）チューブ保護部４０に、細胞導入チューブ２０の外形に対応した凹溝５１，６１を形成した。これにより、チューブ保護部４０により細胞導入チューブ２０をより好適に挟めるので、チューブ保護部４０による細胞導入チューブ２０（溶断部分２１）の保護性能及び耐破損性を向上させられる。
（５）一対のチューブ保護部４０を、互いに異なる大きさに（延出方向の長さを異ならせるように）形成した（図３及び図５Ｃ参照）。これにより、細胞収容部１１に細胞を導入した後、細胞導入チューブ２０を溶断する場合に、細胞導入チューブ２０を挟んでいる一対のチューブ保護部４０を容易にめくって開くことができる（図５Ａ及び図５Ｂ参照）。よって、一対のチューブ保護部４０を含む細胞保存容器１の操作性を向上させられる。
次に、第２実施形態の細胞保存容器１Ａにつき、図６〜図９を参照しながら説明する。第２実施形態の細胞保存容器１Ａは、主として、細胞収容部１１Ａの形状、及び凹溝５１Ａ，６１Ａの形状において第１実施形態と異なる。尚、第２実施形態以降の説明にあたって、同一構成要件については同一符号を付し、その説明を省略もしくは簡略化する。
第２実施形態の細胞保存容器１Ａは、１ｍＬ〜１０ｍＬ程度の小容量の細胞を保存する場合に特に好適に用いられる。第２実施形態では、細胞収容部１１Ａは、細胞収容部１１Ａの断面の内壁側が曲線形状となるように立体的に形成される。より具体的には、細胞収容部１１Ａは、図８及び図９に示すように、厚さ方向の断面形状及び平面方向の断面が共に楕円形状となるように形成される。言い換えれば、細胞収容部１１Ａの内面は、角部を有さない凹曲面により構成されている。第２実施形態では、細胞収容部１１Ａは、図８及び図９に示すように、短径方向の長さ（幅）Ｗ４が２０ｍｍ、長径方向の長さＬ１が３０ｍｍ、厚さＴ１が８ｍｍに形成され、２ｍＬの細胞を収容可能に構成される。細胞収容部１１Ａの楕円形状（立体形状）は、第１シート状部材５０及び第２シート状部材６０を、細胞収容部１１Ａの形状に対応する形状を有する金型を用いて、真空成形すること等により形成される。
また、第２実施形態では、細胞導入チューブ２０は、楕円形状の細胞収容部１１Ａの長径側の一端部に接続され、ポート部材３０は、楕円形状の細胞収容部１１Ａの長径側の他端部（細胞導入チューブ２０とは異なる側）に配置される。
また、第２実施形態では、平面視で楕円形状の細胞収容部１１Ａに対して、シール部１２Ａの外形（外縁）は、矩形形状に形成される。また、シール部１２Ａの幅方向の長さＷ３は、強度を確保する観点から、３ｍｍ〜２０ｍｍであることが好ましく、５ｍｍ〜１５ｍｍであることがより好ましい。更に、シール部１２Ａの細胞導入チューブ２０側の長手方向の長さ（細胞収容部１１Ａの端部からシール部１２Ａの外縁までの長さ）Ｌ２及びシール部１２Ａのポート部材３０側の長さ（凹部５２Ａ，６２Ａの端部から容器本体１０Ａの外縁までの長さ）Ｌ３は、いずれも、細胞保存容器１Ａ（細胞収容部１１Ａ）の強度を確保する観点から、３ｍｍ〜２０ｍｍであることが好ましく、３ｍｍ〜１５ｍｍであることがより好ましい。
シール部１２Ａの各部における長さを、細胞収容部１１Ａに対して上記の範囲とすることで、細胞保存容器１Ａの保存時に外部から衝撃を受けても、この衝撃をシール部１２Ａにより軽減させられる。
シール部１２Ａの各部における長さを、細胞収容部１１Ａに対して上記の範囲とすることで、細胞保存容器１Ａの保存時に外部から衝撃を受けても、この衝撃をシール部１２Ａにより軽減させられる。
第２実施形態では、一対のチューブ保護部４０Ａは、図６〜図８に示すように、容器本体１０Ａの細胞導入チューブ２０が接続された短辺部分の全体から延出して形成される。また、図９に示すように、凹溝５１Ａ，６１Ａのうちのチューブ保護部４０Ａに形成された部分は、細胞導入チューブ２０の外形よりも大きく形成される。具体的には、第２実施形態の凹溝５１Ａ，６１Ａは、図６に示すように、シール部１２Ａに対応する位置に形成されるシール部側凹溝５１１Ａ，６１１Ａと、チューブ保護部４０Ａに対応する位置に形成される保護部側凹溝５１２Ａ，６１２Ａと、を備える。
シール部側凹溝５１１Ａ，６１１Ａは、第１実施形態と同様に細胞導入チューブ２０の外形と略一致する形状及び大きさに形成される。
保護部側凹溝５１２Ａ，６１２Ａは、図９に示すように、細胞導入チューブ２０の外形よりも大きく形成される。具体的には、保護部側凹溝５１２Ａ，６１２Ａは、図８に示すように、シール部側凹溝５１１Ａ，６１１Ａ側を基端側として先端側に向かって拡径する拡径部分５１２Ａａ，６１２Ａａ及び細胞導入チューブ２０の外径よりも大きい大径部分５１２Ａｂ，６１２Ａｂを有する。
保護部側凹溝５１２Ａ，６１２Ａは、図９に示すように、細胞導入チューブ２０の外形よりも大きく形成される。具体的には、保護部側凹溝５１２Ａ，６１２Ａは、図８に示すように、シール部側凹溝５１１Ａ，６１１Ａ側を基端側として先端側に向かって拡径する拡径部分５１２Ａａ，６１２Ａａ及び細胞導入チューブ２０の外径よりも大きい大径部分５１２Ａｂ，６１２Ａｂを有する。
保護部側凹溝５１２Ａ，６１２Ａの大径部分の幅Ｗ５は、細胞導入チューブ２０の外径Ｄ１の２倍〜４倍であることが好ましい。また、保護部側凹溝５１２Ａ，６１２Ａの大径部分の深さＨ２は、細胞導入チューブ２０の外径Ｄ１の１．４倍〜３．５倍であることが好ましい。保護部側凹溝５１２Ａ，６１２Ａの大径部分の幅Ｗ５を、細胞導入チューブ２０の外径Ｄ１の２倍〜４倍の範囲とすることで、細胞導入チューブ２０の溶断部分２１の幅が細胞導入チューブ２０の外径Ｄ１よりも広くなってしまった場合にも、この溶断部分２１を保護部側凹溝５１２Ａ，６１２Ａに好適に収容できる。また、保護部側凹溝５１２Ａ，６１２Ａの大径部分の幅Ｗ５を、細胞導入チューブ２０の外径Ｄ１の２倍〜４倍の範囲とすることで、細胞導入チューブ２０とチューブ保護部４０Ａとの間に空隙を形成できるので、外部からの衝撃をより細胞導入チューブ２０（溶断部分２１）に伝わりにくくでき、また、他の細胞収容容器等が直接細胞導入チューブ２０（溶断部分２１）に接触する機会を少なくできる。
次に第２実施形態の細胞保存容器１の使用方法について説明する。細胞保存容器１Ａは、第１実施形態と同様に、細胞導入チューブ２０を介して血液バッグ等の生体試料収容容器に無菌的かつ気密に接続されて用いられる。
細胞保存容器１Ａに細胞を収容する場合、生体試料収容容器において分離された所定の細胞（例えば、血清や臍帯血）は、細胞導入チューブ２０を介して細胞収容部１１Ａに導入される。ここで、第２実施形態では、細胞収容部１１Ａの内壁（内面）が角部を有さない曲面により構成されている。これにより、細胞収容部１１Ａへの細胞が導入されるのと入れ替わりに細胞収容部１１Ａからスムーズに空気が排出され、細胞収容部１１Ａに気泡を残存しにくくできる。よって、細胞収容部１１Ａに設定された量の細胞を好適に導入できる。
次いで、細胞収容部１１Ａに細胞が収容された後、細胞導入チューブ２０は、第１実施形態と同様に溶断される。これにより、細胞保存容器１Ａは密閉される。この状態で、細胞保存容器１Ａは、凍結保存される。
凍結保存された細胞保存容器１Ａに収容された細胞を使用する場合には、まず、細胞収容部１１Ａに収容された細胞を解凍する。次いで、容器本体１０Ａのポート部材３０を覆っている部分（シール部１２Ａ）をハサミ等で切断してポート部材３０の先端（他端部）を露出させる。その後、先端に注射針が取り付けられたシリンジ（図示せず）等を用いて解凍された細胞をポート部材３０から採取する。
以上説明した第２実施形態の細胞保存容器１Ａによれば、上述した（１）〜（５）の効果を奏する他、以下のような効果を奏する。
（６）凹溝５１Ａ，６１Ａ（保護部側凹溝５１２Ａ，６１２Ａ）を、細胞導入チューブ２０の外形よりも大きく形成したことで、細胞導入チューブ２０の溶断部分２１の幅が細胞導入チューブ２０の外径Ｄ１よりも広くなってしまった場合にも、この溶断部分２１を保護部側凹溝５１２Ａ，６１２Ａに好適に収容できる。また、細胞導入チューブ２０とチューブ保護部４０Ａとの間に空隙を形成できるので、外部からの衝撃をより細胞導入チューブ２０（溶断部分２１）に伝わりにくくできる。
（７）細胞収容部１１Ａを、断面の内壁側が曲線形状となるようにシート状部材（第１シート状部材５０及び第２シート状部材６０）を立体成形して構成した。これにより、細胞収容部１１Ａの内部において細胞導入チューブ２０に向けて気泡をスムーズに移動させられるので、細胞導入チューブ２０から細胞を導入するときに細胞収容部１１Ａに気泡を残存しにくくできる。特に、小容量の細胞を保存する場合には、細胞収容部１１Ａに気泡が残存することによる細胞の収容量不足の影響が大きくなるため、本実施形態の細胞保存容器１は、１ｍＬ〜１０ｍＬ程度の小容量の細胞を保存する細胞保存容器に好適に適用できる。
（７）細胞収容部１１Ａを、断面の内壁側が曲線形状となるようにシート状部材（第１シート状部材５０及び第２シート状部材６０）を立体成形して構成した。これにより、細胞収容部１１Ａの内部において細胞導入チューブ２０に向けて気泡をスムーズに移動させられるので、細胞導入チューブ２０から細胞を導入するときに細胞収容部１１Ａに気泡を残存しにくくできる。特に、小容量の細胞を保存する場合には、細胞収容部１１Ａに気泡が残存することによる細胞の収容量不足の影響が大きくなるため、本実施形態の細胞保存容器１は、１ｍＬ〜１０ｍＬ程度の小容量の細胞を保存する細胞保存容器に好適に適用できる。
（８）細胞収容部１１Ａの平面方向の断面及び厚さ方向の断面形状を楕円形状とした。これにより、細胞収容部１１Ａの内部において気泡を細胞導入チューブ２０に向けてよりスムーズに移動させられるので、細胞導入チューブ２０から細胞を導入するときに細胞収容部１１Ａに気泡をより残存しにくくできる。
（９）細胞導入チューブ２０を、細胞収容部１１Ａにおける長径側の一端部に接続した。これにより、細胞導入チューブ２０を、楕円形状の細胞収容部１１Ａの長手方向の端部に配置できる。よって、細胞収容部１１Ａに更に気泡を残存しにくくできる。
（１０）細胞保存容器１を、細胞導出部として機能するポート部材３０を含んで構成し、このポート部材３０を、細胞収容部１１Ａにおける細胞導入チューブ２０が配置された側と反対側の端部（長径側の他端部）に配置した。これにより、楕円形状の細胞収容部１１Ａを有する細胞保存容器１Ａにおいて、細胞の導入を妨げない位置に細胞導出部を配置できるので、細胞の導入及び取り出しをスムーズに行え、また、収容した細胞を残存させることなく取り出せる。
（１１）シール部１２Ａを、平面視において矩形形状に形成した。これにより、曲線形状となるように細胞収容部１１Ａを形成した場合であっても、容器本体１０Ａを平面視で矩形形状に構成できるので、細胞保存容器１Ａをキャニスタ等の収納容器に収納した場合における収納性を向上させられる。また、細胞保存容器１Ａの保存時にキャニスタ等に接触した場合に、衝撃をシール部１２Ａにより軽減させられる。更に、例えば、細胞収容部１１Ａを小容量（例えば、２ｍｌ）とした場合には、曲線形状となった細胞収容部１１Ａにはラベル等を付しにくいが、シール部１２Ａを矩形形状とすることで、このシール部１２Ａにラベル等を容易に付すことができる。よって、細胞保存容器１Ａの内容表示等を好適に行える。
次に、第３実施形態の細胞保存容器１Ａにつき、図１０を参照しながら説明する。第３実施形態の細胞保存容器１Ａは、細胞収容部１１Ａの構成において第２実施形態と異なる他は、第２実施形態と同様の構成を備える。
第３実施形態では、細胞収容部１１Ａは、略円筒形状を有するように立体的に形成される。第３実施形態においても、細胞収容部１１Ａの立体形状は、第１シート状部材５０及び第２シート状部材６０を、細胞収容部１１Ａの形状に対応する形状を有する金型を用いて、真空成形すること等により形成される。
第３実施形態の細胞保存容器１Ａによれば、上述した（１）〜（６）、（９）〜（１１）の効果を奏する。
第３実施形態では、細胞収容部１１Ａは、略円筒形状を有するように立体的に形成される。第３実施形態においても、細胞収容部１１Ａの立体形状は、第１シート状部材５０及び第２シート状部材６０を、細胞収容部１１Ａの形状に対応する形状を有する金型を用いて、真空成形すること等により形成される。
第３実施形態の細胞保存容器１Ａによれば、上述した（１）〜（６）、（９）〜（１１）の効果を奏する。
次に、第４実施形態の細胞保存容器１Ｂにつき、図１１を参照しながら説明する。第４実施形態の細胞保存容器１Ｂは、主として、一対のチューブ保護部４０Ｂの構成において第１実施形態と異なる。
第４実施形態では、一対のチューブ保護部４０Ｂは、容器本体１０Ｂを構成するシート状部材とは別体のシート状部材により構成される。そして、一対のチューブ保護部４０Ｂは、細胞導入チューブ２０と容器本体１０との接続部の近傍において、細胞導入チューブ２０に接合されることで、細胞導入チューブ２０を挟み込むように配置される。
第４実施形態の細胞保存容器１Ｂによれば、上述した（１）、（４）〜（６）の効果を奏する他、以下のような効果を奏する。
第４実施形態の細胞保存容器１Ｂによれば、上述した（１）、（４）〜（６）の効果を奏する他、以下のような効果を奏する。
（１２）チューブ保護部４０Ｂを、容器本体１０Ｂを構成するシート状部材とは別体のシート状部材により構成した。これにより、チューブ保護部４０Ｂの材質の選択の自由度を高められる。よって、より衝撃吸収性の高い材質の部材によりチューブ保護部を構成することができる。
次に、第５実施形態の細胞保存容器１Ｃにつき、図１２を参照しながら説明する。
第５実施形態の細胞保存容器１Ｃは、係止部７０を更に備える点で第１実施形態と異なる。
係止部７０は、一対のチューブ保護部４０Ｃが細胞導入チューブ２０を挟んだ状態を保持させる。第５実施形態では、係止部７０は、延出方向の長さの短い第１チューブ保護部４１Ｃの先端部に配置され細胞導入チューブ２０の延びる方向に延出する一対の係止片７１と、延出方向の長さの長い第２チューブ保護部４２Ｃに形成され、一対の係止片７１が挿入可能な一対の係止スリット７２と、により構成される。
以上の係止部７０によれば、細胞導入チューブ２０を溶断した後又は、細胞保存容器１Ｃの使用前に、一対の係止片７１を一対の係止スリット７２に挿入することで、一対のチューブ保護部４０Ｃにより細胞導入チューブ２０を挟んだ状態を再開封しないように好適に保持させられる。
第５実施形態の細胞保存容器１Ｃは、係止部７０を更に備える点で第１実施形態と異なる。
係止部７０は、一対のチューブ保護部４０Ｃが細胞導入チューブ２０を挟んだ状態を保持させる。第５実施形態では、係止部７０は、延出方向の長さの短い第１チューブ保護部４１Ｃの先端部に配置され細胞導入チューブ２０の延びる方向に延出する一対の係止片７１と、延出方向の長さの長い第２チューブ保護部４２Ｃに形成され、一対の係止片７１が挿入可能な一対の係止スリット７２と、により構成される。
以上の係止部７０によれば、細胞導入チューブ２０を溶断した後又は、細胞保存容器１Ｃの使用前に、一対の係止片７１を一対の係止スリット７２に挿入することで、一対のチューブ保護部４０Ｃにより細胞導入チューブ２０を挟んだ状態を再開封しないように好適に保持させられる。
以上説明した第５実施形態の細胞保存容器１Ｃによれば、上述した（１）〜（６）の効果を奏する他、以下のような効果を奏する。
（１３）細胞保存容器１Ｃを、チューブ保護部４０Ｃが細胞導入チューブ２０を挟んだ状態を保持させる係止部７０を含んで構成した。これにより、細胞導入チューブ２０を溶断した後、一対のチューブ保護部４０により細胞導入チューブ２０を挟んだ状態を再開封しないように保持させられる。よって、チューブ保護部４０による細胞導入チューブ２０（溶断部分２１）の保護性能を更に向上させられる。
次に、第６実施形態の細胞保存容器１Ｄにつき、図１３を参照しながら説明する。
第６実施形態の細胞保存容器１Ｄは、一対のチューブ保護部４０Ｄが開く方向において第１実施形態と異なる。
第６実施形態では、一対のチューブ保護部４０Ｄは、細胞導入チューブ２０の延びる方向に沿う一方の側縁において互いに接合されており、その他の部分では接合されていない。また、一対のチューブ保護部４０Ｄと容器本体１０Ｄとは、一対のチューブ保護部４０が接合されている部分においてつながっているが、その他の部分では、分離している。これにより、図１３に示すように、一対のチューブ保護部４０を幅方向（横）に開いてめくることで細胞導入チューブ２０と容器本体１０Ｄとの接続部まで細胞導入チューブ２０を露出できるので、溶断機を溶断箇所に位置させやすくなり、その結果、溶断処置が容易となる。よって、細胞導入チューブ２０をより容器本体１０Ｄ側において溶断できるので、溶断後に残存する細胞導入チューブ２０の長さを短くできる。
第６実施形態の細胞保存容器１Ｄは、一対のチューブ保護部４０Ｄが開く方向において第１実施形態と異なる。
第６実施形態では、一対のチューブ保護部４０Ｄは、細胞導入チューブ２０の延びる方向に沿う一方の側縁において互いに接合されており、その他の部分では接合されていない。また、一対のチューブ保護部４０Ｄと容器本体１０Ｄとは、一対のチューブ保護部４０が接合されている部分においてつながっているが、その他の部分では、分離している。これにより、図１３に示すように、一対のチューブ保護部４０を幅方向（横）に開いてめくることで細胞導入チューブ２０と容器本体１０Ｄとの接続部まで細胞導入チューブ２０を露出できるので、溶断機を溶断箇所に位置させやすくなり、その結果、溶断処置が容易となる。よって、細胞導入チューブ２０をより容器本体１０Ｄ側において溶断できるので、溶断後に残存する細胞導入チューブ２０の長さを短くできる。
第６実施形態の細胞保存容器１Ｄによれば、上述した（１）〜（６）の効果を奏する他、以下のような効果を奏する。
（１４）一対のチューブ保護部４０Ｄを、細胞導入チューブ２０の延びる方向に沿う一方の側縁において互いに接合して構成した。これにより、図１３に示すように、一対のチューブ保護部４０を幅方向（横）に開いてめくることで細胞導入チューブ２０と容器本体１０Ｄとの接続部まで細胞導入チューブ２０を好適に露出させられる。よって、細胞導入チューブ２０をより容器本体１０Ｄ側において溶断できるので、溶断後に残存する細胞導入チューブ２０の長さを短くできる。
以上、本発明の細胞保存容器の好ましい各実施形態につき説明したが、本発明は、上述の実施形態に制限されるものではなく、適宜変更が可能である。
上述した各実施形態では、一対のチューブ保護部４０の延出方向の長さを互いに異ならせたが、これに限らない。即ち、一対のチューブ保護部の幅方向の長さを互いに異ならせてもよい。
上述した各実施形態では、一対のチューブ保護部４０の延出方向の長さを互いに異ならせたが、これに限らない。即ち、一対のチューブ保護部の幅方向の長さを互いに異ならせてもよい。
また、第２実施形態では、細胞収容部１１Ａを平面視で楕円形状に形成したがこれに限らない。例えば、細胞収容部を平面視で円形に形成してもよい。
また、第２実施形態では、細胞収容部１１Ａを平面視で楕円形状に形成し、長軸側の端部に細胞導入チューブ２０を接続したが、これに限らない。即ち、細胞収容部を、細胞導入チューブが接続される側半分を半楕円形状に形成し、ポート部材が配置される側を他の形状（例えば、半円形状や円筒形状）に形成してもよい。即ち、細胞収容部は、細胞導入チューブが接続される側を上に位置させた状態で、気泡の上昇を妨げるような角部を有しない内面形状に形成すればよい。
また、第２実施形態では、シール部１２Ａを、平面視において矩形形状に形成したが、これに限らない。即ち、シール部１２Ａの一部（例えば、ポート部材３０側半分位）を、細胞収容部１１Ａ及び凹部５２Ａ，６２Ａの形状に沿うような形状に形成してもよい。
また、第５実施形態では、係止部７０を、一対の係止片７１及び一対の係止スリット７２により構成したが、これに限らない。即ち、例えば、一対のチューブ保護部それぞれの一対の側縁に、幅方向に延びるスリットを形成し、これらのスリットを組み合わせることにより一対のチューブ保護部を係止させてもよい。
また、第６実施形態では、一対のチューブ保護部４０Ｄを、細胞導入チューブ２０の延びる方向に沿う一方の側縁において互いに接合し、また、一対のチューブ保護部４０Ｄと容器本体１０Ｄとを、一対のチューブ保護部４０が接合されている部分以外の部分において分離して構成したが、これに限らない。即ち、図１４に示すように、一対のチューブ保護部４０のうちの一方（例えば、第１チューブ保護部４１Ｅ）のみを容器本体１０Ｅと分離させて構成してもよい。
また、チューブ保護部４０の形状は、上述した実施形態の形状に限らない。即ち、例えば、図１５に示すように、第１シート状部材及び第２シート状部材の細胞導入チューブ２０及びポート部材３０が配置される側を同程度延出させると共に、これら第１シート状部材及び第２シート状部材を接合するときにチューブ保護部４０Ｆに対応する部分を接合しないことでチューブ保護部４０Ｆを構成し、その後、チューブ保護部４０Ｆと接合部分との境界に切れ目を入れて細胞保存容器１Ｆを構成してもよい。
また、上述した各実施形態では、一対のチューブ保護部を、互いに異なる大きさに形成したが、これに限らない。例えば、第２実施形態のような小容量の細胞を保存する細胞保存容器において、図１６に示すように、一対のチューブ保護部４０Ｇを、互いに同一形状に形成し、かつ、重ならない部分を有するように構成してもよい。
図１６に示す変形例の細胞保存容器１Ｇを製造する場合、まず、２枚のシート状部材を、長手方向の一方の端縁が斜辺となった同形同大の矩形に切断する。次いで、切断された２枚のシート状部材に立体形状を形成する。ここで、立体形状は、２枚のシート状部材を、斜辺が交差するように重ね合わせた場合に内面となる側から凹んだ形状となるように形成される。
次いで、立体形状が形成された２枚のシート状部材を、斜辺が交差するように重ね合わせた状態で接合する。具体的には、２枚のシート状部材において容器本体（図示せず）を構成する部分の立体形状が形成されていない部分を接合する（２枚のシート状部材におけるチューブ保護部４０Ｇを構成する部分は接合しない）。これにより、一対のチューブ保護部４０Ｇの延出端側に、シート状部材が重ならない部分Ｐが形成された細胞保存容器１Ｇが製造される。
次いで、立体形状が形成された２枚のシート状部材を、斜辺が交差するように重ね合わせた状態で接合する。具体的には、２枚のシート状部材において容器本体（図示せず）を構成する部分の立体形状が形成されていない部分を接合する（２枚のシート状部材におけるチューブ保護部４０Ｇを構成する部分は接合しない）。これにより、一対のチューブ保護部４０Ｇの延出端側に、シート状部材が重ならない部分Ｐが形成された細胞保存容器１Ｇが製造される。
以上の変形例によれば、同形状に切断した１種類のシート状部材により、互いに重ならない部分Ｐを有するチューブ保護部４０Ｇを備える細胞保存容器１Ｇを製造できる。よって、細胞保存容器１Ｇの製造に係る部品点数を削減しつつ、重ならない部分Ｐにより操作性を向上させた細胞保存容器１Ｇを実現できる。
１，１Ａ，１Ｂ，１Ｃ，１Ｄ，１Ｅ，１Ｆ，１Ｇ 細胞収容容器
１０，１０Ａ，１０Ｂ，１０Ｃ，１０Ｄ，１０Ｅ 容器本体
１１ 細胞収容部
２０ 細胞導入チューブ
４０，４０Ａ，４０Ｂ，４０Ｃ，４０Ｄ，４０Ｅ，４０Ｆ，４０Ｇ チューブ保護部
５０ 第１シート状部材（シート状部材）
５１，５１Ａ 凹溝
６１，６１Ａ 凹溝
６０ 第２シート状部材（シート状部材）
７０ 係止部
１０，１０Ａ，１０Ｂ，１０Ｃ，１０Ｄ，１０Ｅ 容器本体
１１ 細胞収容部
２０ 細胞導入チューブ
４０，４０Ａ，４０Ｂ，４０Ｃ，４０Ｄ，４０Ｅ，４０Ｆ，４０Ｇ チューブ保護部
５０ 第１シート状部材（シート状部材）
５１，５１Ａ 凹溝
６１，６１Ａ 凹溝
６０ 第２シート状部材（シート状部材）
７０ 係止部
Claims (13)
- 可撓性を有する樹脂部材により構成され細胞収容部を有する容器本体と、
前記容器本体に接続され前記細胞収容部に細胞を導入する細胞導入チューブと、
前記細胞導入チューブを挟むように配置され、該細胞導入チューブにおける前記容器本体との接続部の近傍を保護する一対のチューブ保護部と、を備える細胞保存容器。 - 前記容器本体は、
シート状部材が重ね合わせられると共に周縁部が接合されて形成され、
前記チューブ保護部は、前記容器本体の周縁部から延出している請求項１に記載の細胞保存容器。 - 前記チューブ保護部は、前記容器本体を構成するシート状部材により構成される請求項２に記載の細胞保存容器。
- 前記チューブ保護部には、前記細胞導入チューブの外形に対応した凹溝が形成されている請求項１〜３のいずれかに記載の細胞保存容器。
- 前記凹溝は、前記細胞導入チューブの外形よりも大きく形成される請求項４に記載の細胞保存容器。
- 前記チューブ保護部が前記細胞導入チューブを挟んだ状態を保持させる係止部を更に備える請求項１〜５のいずれかに記載の細胞保存容器。
- 前記一対のチューブ保護部は、互いに異なる大きさに形成される請求項１〜６のいずれかに記載の細胞保存容器。
- 前記一対のチューブ保護部は、互いに同一形状に形成され、かつ、重ならない部分を有する請求項１〜６のいずれかに記載の細胞保存容器。
- 前記容器本体は、シート状部材が重ね合わせられると共に周縁部が接合されて形成されると共に、前記細胞収容部から外方に延出するシール部を有し、
前記細胞収容部は、該細胞収容部の断面の内壁側が曲線形状となるように前記シート状部材が立体成形されて構成されている請求項１〜８のいずれかに記載の細胞保存容器。 - 前記細胞収容部は、平面方向の断面形状及び厚さ方向の断面形状が楕円形状に形成される請求項９に記載の細胞保存容器。
- 前記細胞導入チューブは、前記細胞収容部における長径側の端部に接続される請求項９又は１０に記載の細胞保存容器。
- 前記細胞収容部における前記細胞導入チューブが接続される側と反対側の端部に配置される細胞導出部を更に備える請求項１１に記載の細胞保存容器。
- 前記シール部は、平面視において矩形形状に形成される請求項９〜１２のいずれかに記載の細胞保存容器。
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