JPWO2018008175A1 - オフフレーバーを抑制した発酵ビール様発泡性飲料の製造方法 - Google Patents
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Abstract
Description
本願は、2016年7月6日に日本に出願された特願2016−134534号に基づき優先権を主張し、その内容をここに援用する。
[1] 発酵原料液に酵母を接種して発酵させる発酵工程を有し、
酵母を接種する前の発酵原料液又は前記発酵工程中の発酵液中の2,3−エポキシ−3−メチルブタナールの含有量を制御することを特徴とする、発酵ビール様発泡性飲料の製造方法。
[2] 2,3−エポキシ−3−メチルブタナールの含有量の制御を、前記発酵原料液又は前記発酵液への酸素混入量を制御することによって行う、前記[1]の発酵ビール様発泡性飲料の製造方法。
[3] 前記発酵原料液又は前記発酵液中の2,3−エポキシ−3−メチルブタナール濃度が17ppb以下となるように制御する、前記[1]又は[2]の発酵ビール様発泡性飲料の製造方法。
[4] 前記発酵原料液又は前記発酵液中のイソα酸の含有量が90ppm以下である、前記[1]〜[3]のいずれかの発酵ビール様発泡性飲料の製造方法。
[5] 前記発酵原料液又は前記発酵液の液温が5〜100℃である、前記[1]〜[4]のいずれかの発酵ビール様発泡性飲料の製造方法。
[6] 前記発酵原料液又は前記発酵液中の2,3−エポキシ−3−メチルブタナール濃度を測定する工程を有する、前記[1]〜[5]のいずれかの発酵ビール様発泡性飲料の製造方法。
[7] 発酵原料液に酵母を接種して発酵させる発酵工程と、
酵母を接種する前の前記発酵原料液又は前記発酵工程中の発酵液中の2,3−エポキシ−3−メチルブタナールの含有量を測定する工程と、
を有することを特徴とする、発酵ビール様発泡性飲料の製造方法。
[8] 2,3−エポキシ−3−メチルブタナール濃度が、17ppb以下である、発酵原料液。
また、本発明に係る発酵原料液により、タマネギ様臭が抑制された発酵ビール様発泡性飲料を製造することができる。
以降の実験において、EMBalの含有量は次のようにして測定した。
まず、内部標準物質としてEMBalの安定同位体(D6-2,3-epoxy-3-methylbutanal)を100ppbとなるように添加した試料20gを、メタノール及び水でコンディショニングした固相抽出カラム(陰イオン交換カラム「InertSep MA−1」(ジーエルサイエンス株式会社製))へと負荷した。当該固相抽出カラムの素通り液を採取し、ジクロロメタン3mLを加えて抽出し、溶媒層を回収した。この溶媒抽出操作を3回繰り返し、回収した溶媒層を全て混合したものに無水硫酸ナトリウムを5g加え、30分間以上脱水した。その後、窒素パージにて約500μLまで濃縮した後、下記の条件でGC/MSにて測定した。
ガスクロマトグラフ:「Agilent 6890 ガスクロマトグラフ 」(Agilent Technologies社製)
検出器:「MSD5975」(Agilent Technologies社製)
カラム:「DB−WAX capillary column」(長さ:60m、内径:0.25mm、膜厚:0.25μm、Agilent Technologies社製)
注入口温度:250℃
注入モード:パルス化スプリットレスインジェクションモード(pulsed splitless injection mode)
注入量:1μL
キャリアガス:ヘリウム(1mL/min)
カラム温度設定:40℃(5分間保持)−(5℃/min)−160℃(5分間)
イオン化条件:70eV
測定モード:シングルイオン−モニタリングモード(single ion-monitoring(SIM) mode)
定量:それぞれの香気成分のピークエリア面積と内部標準品のピークエリア面積との比較にて実施。
下面発酵酵母を、EMBalの化学合成品を添加した合成培地で培養し、2M3MBの生成を確認した。
酵母の培養には、アミノ酸を含有していない完全合成培地であるYNB(Yeast Nitrogen Base)培地(ベクトン・ディッキンソン社製、表1参照。)に、最終濃度2質量%のグルコースと表2に記載のアミノ酸を配合したアミノ酸添加YNB培地を用いた。なお、添加するアミノ酸の組成は、Cogheらによる麦芽100%ビールに含まれているとの報告(非特許文献2)に準じて決定した。
異性化処理前のホップと異性化処理後のホップについてEMBalの含有量を測定し、EMBalが異性化処理済のホップに由来する成分であることを調べた。ホップはナゲット品種を用いた。
麦芽60g、副原料20g、及び320mLの水を混合し、得られた混合物を50℃、30分間保持してタンパク質分解処理を行った後、当該混合物を65℃、70分間保持することにより、麦芽由来成分を糖化させた。得られた麦汁を濾過し、得られた濾過液にホップ(アメリカナゲット種)を添加して90分間煮沸した。煮沸処理後、濃度調整湯を添加し、ホップ粕などを分離し、5℃に冷却することにより、麦汁(300mL)を得た。使用する麦芽のロット、添加するホップ量、副原料の種類等を適宜変更し、13種の麦汁(サンプル1〜13)を製造した。これらの麦汁中のEMBal濃度を測定した。測定結果を表4に示す。
発酵中の発酵液のEMBal濃度に対する、発酵液への酸素供給量の影響を調べた。
具体的には、実施例1と同様にして、麦汁(300mL)を得た。得られた麦汁の苦味価(BU)を測定した。苦味価の測定は、EBC(European Brewery Convention)のAnalytica−EBC標準法に準じて行った。
麦汁中のEMBal濃度に対する、温度の影響を調べた。
具体的には、まず、実施例1と同様にして、麦汁(300mL)を得、苦味価を測定した。次いで、得られた麦汁に対して、液温を0、20、50、70、又は90℃にし、5分間、酸素の巻き込み処理(2L/分で空気をバブリングする処理)を行った後、EMBal濃度を測定した。麦汁の液温を室温より上げる場合は、麦汁をホットプレートにて加熱し、室温より下げる場合は、恒温水槽を用いた。酸素の巻き込み処理後の麦汁200mLに対して、20×106個/mLとなるように酵母を添加し、15℃で6日間発酵させた。発酵終了後の発酵液について、実施例1と同様にして2M3MB濃度を測定した。
麦汁中のEMBal濃度に対する、高温時の酸素接触量の影響を調べた。
具体的には、まず、実施例1と同様にして、麦汁(300mL)を得、苦味価を測定した。次いで、得られた麦汁に対して、液温を90℃にし、0、1、5、又は20分間、実施例3と同様にして酸素の巻き込み処理を行った後、EMBal濃度を測定した。酸素の巻き込み処理後の麦汁200mLに対して、20×106個/mLとなるように酵母を添加し、15℃で6日間発酵させた。発酵終了後の発酵液について、実施例1と同様にして2M3MB濃度を測定した。
麦汁中のEMBal濃度に対する、イソα酸量の影響を調べた。
具体的には、まず、ホップの添加量をイソα酸量が0.1〜2gとなるように調節した以外は実施例1と同様にして、麦汁(300mL)を得、苦味価を測定した。
次いで、得られた麦汁200mLに対して、液温を90℃にし、520分間、実施例3と同様にして酸素の巻き込み処理を行った後、EMBal濃度を測定した。酸素の巻き込み処理後の麦汁200mLに対して、20×106個/mLとなるように酵母を添加し、15℃で6日間発酵させた。発酵終了後の発酵液について、実施例1と同様にして2M3MB濃度を測定した。
また、対照として、麦汁200mLに対して、酸素の巻き込み処理を行わずにそのまま実施例1と同様にして発酵させた後、発酵後の発酵液中の2M3MB濃度を測定した。
EMBalが異性化処理後のホップのいずれの成分に由来するかを調べるため、異性化処理後のホップに対して分取HPLCを行った。ホップはナゲット品種を用いた。
カラム:C18カラム「XBridge C18 Prep Column」(長さ:250mm、内径:10mm、Waters社製)
移動相A:1% ギ酸水
移動相B:1% ギ酸含有メタノール溶液
流速:15mL/分
グラジエント条件: 移動相B濃度68%(0分)→移動相B濃度72%(1分)→移動相B濃度72%(18分)→移動相B濃度100%(18.01分)→移動相B濃度100%(23分)→移動相B濃度68%(23.01分)→移動相B濃度68%(30分)
検出波長:275nm
Claims (8)
- 発酵原料液に酵母を接種して発酵させる発酵工程を有し、
酵母を接種する前の発酵原料液又は前記発酵工程中の発酵液中の2,3−エポキシ−3−メチルブタナールの含有量を制御することを特徴とする、発酵ビール様発泡性飲料の製造方法。 - 2,3−エポキシ−3−メチルブタナールの含有量の制御を、前記発酵原料液又は前記発酵液への酸素混入量を制御することによって行う、請求項1に記載の発酵ビール様発泡性飲料の製造方法。
- 前記発酵原料液又は前記発酵液中の2,3−エポキシ−3−メチルブタナール濃度が17ppb以下となるように制御する、請求項1又は2に記載の発酵ビール様発泡性飲料の製造方法。
- 前記発酵原料液又は前記発酵液中のイソα酸の含有量が90ppm以下である、請求項1〜3のいずれか一項に記載の発酵ビール様発泡性飲料の製造方法。
- 前記発酵原料液又は前記発酵液の液温が5〜100℃である、請求項1〜4のいずれか一項に記載の発酵ビール様発泡性飲料の製造方法。
- 前記発酵原料液又は前記発酵液中の2,3−エポキシ−3−メチルブタナール濃度を測定する工程を有する、請求項1〜5のいずれか一項に記載の発酵ビール様発泡性飲料の製造方法。
- 発酵原料液に酵母を接種して発酵させる発酵工程と、
酵母を接種する前の前記発酵原料液又は前記発酵工程中の発酵液中の2,3−エポキシ−3−メチルブタナールの含有量を測定する工程と、
を有することを特徴とする、発酵ビール様発泡性飲料の製造方法。 - 2,3−エポキシ−3−メチルブタナール濃度が、17ppb以下である、発酵原料液。
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