JPWO2011115040A1 - 糖液の製造方法およびその装置 - Google Patents
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Abstract
Description
[1]以下の工程(1)〜(3)を含む糖液製造プロセスを繰り返して糖液を製造する方法であって、工程(3)で得られた回収酵素を次回以降の糖液製造プロセスの工程(1)に使用することを特徴とする、糖液の製造方法。
(1)セルロースに糸状菌由来セルラーゼを添加し一次加水分解する工程、
(2)工程(1)の加水分解物に未使用の糸状菌由来セルラーゼを添加して二次加水分解する工程、および
(3)工程(2)の加水分解物を固液分離し、得られた糖液から回収酵素を得る工程。
[2]糖液製造プロセスでの前記工程(1)における糸状菌由来セルラーゼとして、糸状菌由来セルラーゼによるセルロース加水分解物からの回収酵素成分を使用することを特徴とする、[1]記載の糖液の製造方法。
[3]前記工程(1)または(2)における糸状菌由来セルラーゼがトリコデルマ属微生物の培養液由来成分を含むことを特徴とする、[1]または[2]に記載の糖液の製造方法。
[4]前記回収酵素がキシラナーゼおよび/またはキシロシダーゼを含むことを特徴とする、[1]から[3]いずれかに記載の糖液の製造方法。
[5]前記回収酵素が水不溶性の糸状菌由来セルラーゼを含むことを特徴とする、[1]から[4]いずれかに記載の糖液の製造方法。
[6]前記セルロースが、セルロース含有バイオマスをアルカリ処理、水熱処理または希硫酸処理して得られた処理物であることを特徴とする、[1]から[5]いずれかに記載の糖液の製造方法。
[7]一次加水分解および二次加水分解における酵素添加量が、工程(1)での回収酵素の添加量>工程(2)での未使用酵素量の添加量、の関係式を満たすことを特徴とする、[1]から[6]のいずれかに記載の糖液の製造方法。
[8]前記工程(3)における糸状菌由来セルラーゼの回収が、糖液を限外濾過膜に通じてろ過し、非透過側から回収することを特徴とする、[1]から[7]のいずれかに記載の糖液の製造方法。
[9]セルロースを加水分解する工程を含む糖液の製造方法のための装置であって、回収酵素投入配管および未使用酵素投入配管が連結した加水分解槽、加水分解物を固液分離する装置、限外濾過膜の洗浄および/または循環配管内に保持された回収酵素を除去するための水供給配管を有する糖液保持タンク、ならびに酵素と糖液を分離するための限外濾過膜装置、を構成として含む装置。
[10]セルロースを加水分解する工程を含む糖液の製造方法のための装置であって、回収酵素とセルロースを混合し一次加水分解を行うためのセルロース/回収酵素混合装置、セルロース/回収酵素混合物供給配管と未使用酵素投入口が連結した加水分解槽、加水分解物を固液分離する装置、限外濾過膜の洗浄および/または循環配管内に保持された回収酵素を除去するための水供給配管を有する糖液保持タンク、および酵素と糖液を分離するための限外濾過膜装置、を構成として含む装置。
[11][9]または[10]に記載の装置構成に加え、さらに糖液を濃縮する逆浸透膜および/またはナノろ過膜装置、を構成として含む装置。
トリコデルマ培養液由来酵素組成物は以下の方法で調整した。
コーンスティップリカー5%(w/vol)、グルコース2%(w/vol)、酒石酸アンモニウム0.37%(w/vol)、硫酸アンモニウム0.14(w/vol)、リン酸二水素カリウム0.2%(w/vol)、塩化カルシウム二水和物0.03%(w/vol)、硫酸マグネシウム七水和物0.03%(w/vol)、塩化亜鉛0.02%(w/vol)、塩化鉄(III)六水和物0.01%(w/vol)、硫酸銅(II)五水和物0.004%(w/vol)、塩化マンガン四水和物0.0008%(w/vol)、ホウ酸0.0006%(w/vol)、七モリブデン酸六アンモニウム四水和物0.0026%(w/vol)となるよう蒸留水に添加し、100mLを500mLバッフル付き三角フラスコに張り込み、121℃で15分間オートクレーブ滅菌した。放冷後、これとは別にそれぞれ121℃で15分間オートクレーブ滅菌したPE−MとTween80をそれぞれ0.01%(w/vol)添加した。この前培養培地にトリコデルマ・リーセイATCC68589を1×105個/mLになるように植菌し、28℃、72時間、180rpmで振とう培養し、前培養とした(振とう装置:TAITEC社製 BIO−SHAKER BR−40LF)。
コーンスティップリカー5%(w/vol)、グルコース2%(w/vol)、セルロース(アビセル)10%(w/vol)、酒石酸アンモニウム0.37%(w/vol)、硫酸アンモニウム0.14%(w/vol)、リン酸二水素カリウム 0.2%(w/vol)、塩化カルシウム二水和物0.03%(w/vol)、硫酸マグネシウム七水和物0.03%(w/vol)、塩化亜鉛0.02%(w/vol)、塩化鉄(III)六水和物0.01%(w/vol)、硫酸銅(II)五水和物0.004%(w/vol)、塩化マンガン四水和物0.0008%(w/vol)、ホウ酸0.0006%(w/vol)、七モリブデン酸六アンモニウム四水和物0.0026%(w/vol)となるよう蒸留水に添加し、2.5Lを5L容撹拌ジャー(ABLE社製 DPC−2A)容器に張り込み、121℃で15分間オートクレーブ滅菌した。放冷後、これとは別にそれぞれ121℃で15分間オートクレーブ滅菌したPE−MとTween80をそれぞれ0.1%添加し、あらかじめ前記の方法にて液体培地で前培養したトリコデルマ・リーセイATCC68589を250mL接種した。その後、28℃、87時間、300rpm、通気量1vvmにて培養を行い、遠心分離後、上清を膜濾過(ミリポア社製 ステリカップ−GV 材質:PVDF)した。この前述条件で調整した培養液に対し、βグルコシダーゼ(Novozyme188)をタンパク質重量比として、1/100量添加し、これをトリコデルマ由来セルラーゼとして、以下実施例に使用した。
[セルロース前処理物1の調整]
市販のアビセル(メルク社製)を、特段の処理を行うことなくセルロース前処理物1として以下の実施例に使用した。
セルロース含有バイオマスとして、稲藁を使用した。セルロース含有バイオマスを硫酸1%水溶液に浸し、150℃で30分オートクレーブ処理(日東高圧製)した。処理後、固液分離を行い、硫酸水溶液(以下、希硫酸処理液)と硫酸処理セルロースに分離した。次に硫酸処理セルロースと固形分濃度が10重量%となるように希硫酸処理液と攪拌混合した後、水酸化ナトリウムによって、pHを5付近に調整した。これをセルロース前処理物2として以下の実施例に使用した。
セルロースとして、稲藁を使用した。前記セルロース含有バイオマスを小型反応器(耐圧硝子工業製、TVS−N2 30ml)に投入し、液体窒素で冷却した。この反応器にアンモニアガスを流入し、試料を完全に液体アンモニアに浸漬させた。リアクターの蓋を閉め、室温で15分ほど放置した。次いで、150℃のオイルバス中にて1時間処理した。処理後、反応器をオイルバスから取り出し、ドラフト中で直ちにアンモニアガスをリーク後、さらに真空ポンプで反応器内を10Paまで真空引きし乾燥させた。これをセルロース前処理物3として以下実施例に使用した。
セルロース含有バイオマスとして、稲藁を使用した。セルロース含有バイオマスを水に浸し、撹拌しながら180℃で20分間オートクレーブ処理(日東高圧株式会社製)した。その際の圧力は10MPaであった。処理後は溶液成分(以下、水熱処理液)と処理バイオマス成分に遠心分離(3000G)を用いて固液分離した。これをセルロース前処理物4として以下の実施例に使用した。
糖水溶液に含まれるグルコースおよびキシロース濃度は、下記に示すHPLC条件で、標品との比較により定量した。
移動相:ミリQ:アセトニトリル=25:75(流速0.6mL/min)
反応液:なし
検出方法:RI(示差屈折率)
温度:30℃。
トリコデルマ由来セルラーゼの酵素活性は以下手順で測定した。
1)結晶セルロース分解活性
酵素液(所定条件で調整)に対し、アビセル(メルク社製・・要確認)を1g/L、酢酸ナトリウム緩衝液(pH 5.0)を100mMとなるよう添加し、50℃で24時間反応させた。反応液は1mLチューブで調整し、前記条件にて回転混和しながら反応を行った。反応後、チューブを遠心分離し、その上清成分のグルコース濃度を測定した。グルコース濃度は、参考例3に記載の方法に準じて測定した。アビセル分解活性は、生成したグルコース濃度(g/L)をそのまま活性値とした。
酵素液に対し、セロビオース(和光純薬)500mg/L、酢酸ナトリウム緩衝液(pH 5.0)を100mMとなるよう添加し、50℃で0.5時間反応させた。反応液は1mLチューブで調整し、前記条件にて回転混和しながら反応を行った。反応後、チューブを遠心分離し、その上清成分のグルコース濃度を測定した。グルコース濃度は、参考例3に記載の方法に準じて測定した。セロビオース分解活性は、生成したグルコース濃度(g/L)をそのまま活性値とした。
3)キシラン分解活性
酵素液に対し、キシラン(Birch wood xylan、和光純薬)10g/L、酢酸ナトリウム緩衝液(pH 5.0)を100mMとなるよう添加し、50℃で4時間反応させた。反応液は1mLチューブで調整し、前記条件にて回転混和しながら反応を行った。反応後、チューブを遠心分離し、その上清成分のキシロース濃度を測定した。キシロース濃度は、参考例3に記載の方法に準じて測定した。キシロース分解活性は、生成したキシロース濃度(g/L)をそのまま活性値とした。
以下比較例として、一次加水分解および二次加水分解を実施せずにセルロースから糖液を製造した。
セルロース前処理物1〜4(各1g)に、参考例1記載の未使用酵素(タンパク質濃度50mg/mL)を0.2mL(タンパク質量10mg)、さらに後述、工程2の手順で回収した回収酵素溶液を混合し添加した。添加した溶液の重量が10gとなるようさらに蒸留水を添加した。本組成物を枝付反応容器に移し(東京理化社製 φ30 NS14/23)、50℃にて19時間保温および攪拌し加水分解を行った(東京理化社製:小型メカニカルスターラー CPS−1000、変換アダプター、三方コック付添加口、保温装置 MG−2200)。
工程1の加水分解物を遠心分離(4500G、10分)にて固液分離し、糖液と残さに分離した。糖液のグルコースおよびキシロース濃度は、参考例3記載の方法で測定し、生成糖として算出した。
セルロース前処理物1〜4(各1g)に、未使用酵素(タンパク質濃度50mg/mL)を0.3mL(タンパク質量15mg)添加した(0回目なので回収酵素は添加しない)。添加した溶液の重量が10gとなるようさらに蒸留水を添加した。本組成物を枝付反応容器に移し(東京理化社製 φ30 NS14/23)、50℃にて19時間保温および攪拌し加水分解を行った(東京理化社製:小型メカニカルスターラー CPS−1000、変換アダプター、三方コック付添加口、保温装置 MG−2200)。得られた加水分解物は前述、工程2記載の方法で分離し、回収酵素を得た。またこのときの糖液のグルコースおよびキシロース濃度の測定を行った。
以下実施例として、セルロースの一次加水分解および二次加水分解を行うことにより糖液を製造した。
セルロース前処理物1〜4(各1g)に蒸留水を加え、後述、工程3の手順で回収した回収酵素を添加し、総重量が10gとなるようさらに蒸留水を添加した。本組成物を枝付試験管に移し(東京理化社製 φ30 NS14/23)、本組成物を枝付反応容器に移し(東京理化社製 φ30 NS14/23)、50℃にて1時間保温および攪拌し加水分解を行った(東京理化社製:小型メカニカルスターラー CPS−1000、変換アダプター、三方コック付添加口、保温装置 MG−2200)。
工程1の一次加水分解物に、参考例1記載の未使用酵素(タンパク質濃度50mg/mL)を0.2mL(タンパク質量10mg)を添加し、50℃にて18時間反応した。
工程3の二次加水分解物を遠心分離(4500G、10分)にて固液分離し、糖液と残さに分離した。糖液のグルコースおよびキシロース濃度は、参考例3記載の方法で測定し、N回目の生成糖として算出した。さらに糖液を膜濾過(ミリポア社製 ステリフリップ−GP、材質:PES)し、得られた上清は、分画分子量10000の限外濾過膜(Sartorius stedim biotech社製 VIVASPIN 20、材質:PES)を利用し、膜画分が1mLになるまで4500Gにて遠心した。蒸留水10mLを膜画分に添加し、再度膜画分が1mLになるまで4500Gにて遠心した。この後、膜画分から酵素を回収し、これを回収酵素とした。回収酵素は前述、工程1の加水分解に再利用した。
セルロース前処理物1〜4(各1g)に、未使用酵素(タンパク質濃度50mg/mL)を0.3mL(タンパク質量15mg)添加した(0回目なので回収酵素は添加しない)。添加した溶液の重量が10gとなるようさらに蒸留水を添加した。本組成物を枝付反応容器に移し(東京理化社製 φ30 NS14/23)、50℃にて19時間保温および攪拌し加水分解を行った(東京理化社製:小型メカニカルスターラー CPS−1000、変換アダプター、三方コック付添加口、保温装置 MG−2200)。得られた加水分解物は前述、工程3記載の方法で分離し、回収酵素を得た。またこのときの糖液のグルコースおよびキシロース濃度の測定を行った。
実施例1において、一次加水分解に添加される回収酵素のタンパク質濃度をBCA測定キット(BCA Protein Assay Regent Kit、ピアス社)を使用して行い、牛アルブミン(2mg/mL)を標品として、562nmの吸光度を測定し、比色定量を行うことにより測定した。セルロース前処理物2に関して、回収再利用を行い回収回数N回目の回収酵素の添加量と、未使用酵素の添加量の関係を表3にまとめた。実施例1表2のグルコース生成量と比較すると、回収再利用回収4回目以降、すなわち、一次加水分解での酵素添加量>二次加水分解での酵素添加量、さらには一次加水分解に再利用する回収酵素添加量>二次加水分解での未使用酵素添加量の関係性が成り立つとき、さらにグルコース生成量がさらに向上することが本実施例で確認できた。
セルロース前処理物3に関して、回収酵素活性(比較例1:回収酵素と新規酵素を同時投入した場合、実施例1:回収酵素を添加し、一次加水分解を行った後、新規酵素を投入した場合)を測定した。酵素活性は、参考例3に準じて、1)結晶セルロース分解活性、2)セロビオース分解活性、3)キシラン分解活性、の3種の分解活性に分けて測定した。各分解活性に関しては、未使用酵素(10mg)における酵素活性を100(%)として、回収酵素における酵素活性を相対値(%)として示した。回収回数2回目と4回目の回収酵素活性に関して、表4(実施例1)、表5(比較例1)に示す。
(実施例4)回収酵素に含まれる凝集したトリコデルマ由来セルラーゼ成分
回収回数4回目以降において、限外濾過膜の非透過液として回収される回収酵素成分に水不溶性の成分が生成することが判明した。この水不溶性のトリコデルマ由来セルラーゼ成分を以下の手順で分析を行った。
(実施例5)水不溶性のトリコデルマ由来セルラーゼ成分の回収酵素成分としての効果
実施例1(セルロース前処理物3)の工程3において、膜画分から酵素を回収し、回収酵素を得たのち、さらに回収酵素を15000rpmで5分遠心した。得られた上済み液のみを回収酵素として、再利用した場合の糖生成量を実施例1の結果と比較した。すなわち、実施例5においては、回収酵素に含まれる水不溶性のトリコデルマ由来セルラーゼ成分を除去した場合における回収酵素の再利用である。
2 保温設備
3 攪拌翼
4 回収酵素投入配管
5 回収酵素保持タンク
6 未使用酵素投入配管
7 セルロース投入口
8 未使用酵素保持タンク
9 プレスろ過装置
10 コンプレッサー
11 水供給配管
12 糖液保持タンク
13 循環ポンプ
14 限外濾過膜装置
15 循環配管
16 回収酵素配管
17 セルロース/回収酵素混合物供給配管
18 セルロース/回収酵素混合装置
19 固液分離装置
20 固形物排出配管
21 三方バルブ
22 精密ろ過膜装置
23 固液分離ろ液タンク
24 ポンプ
25 精密ろ過膜
26 圧空供給装置
27 逆洗浄ポンプ
28 糖液濃縮タンク
29 高圧ポンプ
30 逆浸透膜および/またはナノろ過膜装置
31 三方バルブ
Claims (11)
- 以下の工程(1)〜(3)を含む糖液製造プロセスを繰り返して糖液を製造する方法であって、工程(3)で得られた回収酵素を次回以降の糖液製造プロセスの工程(1)に使用することを特徴とする、糖液の製造方法。
(1)セルロースに糸状菌由来セルラーゼを添加し一次加水分解する工程、
(2)工程(1)の加水分解物に未使用の糸状菌由来セルラーゼを添加して二次加水分解する工程、および
(3)工程(2)の加水分解物を固液分離し、得られた糖液から回収酵素を得る工程。 - 糖液製造プロセスでの前記工程(1)における糸状菌由来セルラーゼとして、糸状菌由来セルラーゼによるセルロース加水分解物からの回収酵素成分を使用することを特徴とする、請求項1記載の糖液の製造方法。
- 前記工程(1)または(2)における糸状菌由来セルラーゼがトリコデルマ属微生物の培養液由来成分を含むことを特徴とする、請求項1または2に記載の糖液の製造方法。
- 前記回収酵素がキシラナーゼおよび/またはキシロシダーゼを含むことを特徴とする、請求項1から3いずれかに記載の糖液の製造方法。
- 前記回収酵素が水不溶性の糸状菌由来セルラーゼを含むことを特徴とする、請求項1から4いずれかに記載の糖液の製造方法。
- 前記セルロースが、セルロース含有バイオマスをアルカリ処理、水熱処理または希硫酸処理して得られた処理物であることを特徴とする、請求項1から5いずれかに記載の糖液の製造方法。
- 一次加水分解および二次加水分解における酵素添加量が、工程(1)での回収酵素の添加量>工程(2)での未使用酵素量の添加量、の関係式を満たすことを特徴とする、請求項1から6のいずれかに記載の糖液の製造方法。
- 前記工程(3)における糸状菌由来セルラーゼの回収が、糖液を限外濾過膜に通じてろ過し、非透過側から回収することを特徴とする、請求項1から7のいずれかに記載の糖液の製造方法。
- セルロースを加水分解する工程を含む糖液の製造方法のための装置であって、回収酵素投入配管および未使用酵素投入配管が連結した加水分解槽、加水分解物を固液分離する装置、限外濾過膜の洗浄および/または循環配管内に保持された回収酵素を除去するための水供給配管を有する糖液保持タンク、ならびに酵素と糖液を分離するための限外濾過膜装置、を構成として含む装置。
- セルロースを加水分解する工程を含む糖液の製造方法のための装置であって、回収酵素とセルロースを混合し一次加水分解を行うためのセルロース/回収酵素混合装置、セルロース/回収酵素混合物供給配管と未使用酵素投入配管が連結した加水分解槽、加水分解物を固液分離する装置、限外濾過膜の洗浄および/または循環配管内に保持された回収酵素を除去するための水供給配管を有する糖液保持タンク、および酵素と糖液を分離するための限外濾過膜装置、を構成として含む装置。
- 請求項9または10に記載の装置構成に加え、さらに糖液を濃縮する逆浸透膜および/またはナノろ過膜装置、を構成として含む装置。
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JPS6387994A (ja) | 1986-10-02 | 1988-04-19 | Res Assoc Petroleum Alternat Dev<Rapad> | 糖化液から糖液および酵素を得る方法 |
US5508183A (en) * | 1992-05-15 | 1996-04-16 | Martin Marietta Energy Systems, Inc. | Enhanced attrition bioreactor for enzyme hydrolysis or cellulosic materials |
JPH07231776A (ja) * | 1994-02-24 | 1995-09-05 | Kirin Eng Kk | 発酵糖の製造装置 |
EP0832276B1 (en) | 1995-06-07 | 2005-03-02 | Arkenol, Inc. | Method of strong acid hydrolysis |
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JP2001095597A (ja) | 1999-07-27 | 2001-04-10 | Shiseido Co Ltd | ステロイド5α−リダクターゼの阻害活性の検出方法 |
JP4330839B2 (ja) | 2002-01-18 | 2009-09-16 | 旭化成ケミカルズ株式会社 | グルコース及び/又は水溶性セロオリゴ糖の製造方法 |
JP2005229821A (ja) | 2004-02-17 | 2005-09-02 | Jgc Corp | バイオマスから単糖を製造する方法及び単糖製造装置 |
AU2004322928A1 (en) * | 2004-08-31 | 2006-03-09 | Biotech Progress, A.S. | Method and devices for the continuous processing of renewable raw materials |
JP4554314B2 (ja) * | 2004-09-22 | 2010-09-29 | 財団法人地球環境産業技術研究機構 | リグノセルロースの連続糖化法 |
CN101160409B (zh) | 2005-04-12 | 2013-04-24 | 纳幕尔杜邦公司 | 获得可发酵糖的生物质处理方法 |
BRPI0713506A2 (pt) * | 2006-06-22 | 2012-03-13 | Iogen Energy Corporation | composiçõpes de enzima para a hidrólise enzimática aperfeiçoada de celulose e método de uso das mesmas |
US8571689B2 (en) * | 2006-10-31 | 2013-10-29 | Rockwell Automation Technologies, Inc. | Model predictive control of fermentation in biofuel production |
JP5109121B2 (ja) | 2006-12-28 | 2012-12-26 | 国立大学法人 東京大学 | 糖の製造方法、エタノールの製造方法、及び乳酸の製造方法、並びにこれらに用いられる酵素糖化用セルロース及びその製造方法 |
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