JPWO2008056516A1 - ２−シアノアクリレート系生体用接着剤 - Google Patents

Abstract

【課題】所定の硬さを有し、適度に柔軟であり、且つ安全性が高く、十分な分解性を有する２−シアノアクリレート系生体用接着剤を提供する。【解決手段】本発明の２−シアノアクリレート系生体用接着剤は、硬化物のショアＡ硬度が１５〜９０であり、且つ加水分解試験におけるホルムアルデヒドの放出量が５００ｐｐｍ以下である。この２−シアノアクリレート系生体用接着剤は、１分子中にエーテル結合を少なくとも１個有するものを含有する。

Description

本発明は、２−シアノアクリレート系生体用接着剤に関する。更に詳しくは、本発明は、硬化物が所定の硬度を有し、適度に柔軟であり、且つ加水分解によるホルムアルデヒド放出量が適量であり、安全性が高く、併せて十分な分解性を有する、１分子中にエーテル結合を少なくとも１個有する２−シアノアクリレート系生体用接着剤に関する。また、更に所定の剛性パラメータを有し、特に生体血管同士又は生体血管と人工血管との接合、及び血管瘤充填剤、血管塞栓剤、骨補填剤等の用途において有用な２−シアノアクリレート系生体用接着剤に関する。

２−シアノアクリレート化合物としては各種のものが知られており、この２−シアノアクリレート化合物が医療用途などにおける接着剤として有用であることも知られている。例えば、エチル−２−シアノアクリレート、ブチル−２-シアノアクリレート、２−オクチル−２−シアノアクリレート等のアルキルシアノアクリレートが体外使用の皮膚用の接着剤として利用されている。しかし、体内用としては、硬化物が硬い、分解が遅い等の問題がある。例えば、エチル−２−シアノアクリレート及びブチル−２-シアノアクリレートを用いた場合は、硬化物が硬く、一方、２−オクチル−２−シアノアクリレートを用いたときは、硬化物が比較的柔らかいものの、分解は遅い。

上記のように硬化物が硬いという問題を有するシアノアクリレート系接着剤の硬化物に柔軟性を付与するため、可塑剤を配合する(例えば、特許文献１、特許文献２参照。)、特定の柔軟な重合体を配合する(例えば、特許文献３参照。）、多官能性化合物を配合する(例えば、特許文献４、特許文献５参照。)、及びアルコキシアルキルシアノアクリレートを配合する(例えば、特許文献６、特許文献７参照。）等の各種の方法が知られている。また、硬化物に柔軟性を付与し、且つ分解を促進するため、生分解性ポリマーを配合する（例えば、特許文献８参照）ことも知られている。

更に、エトキシエチルシアノアクリレート化合物を含有する接着剤を外科用途に用いることも知られている（例えば、非特許文献１参照。）、また、外科用途に用いられる接着剤に含有される多種類のアルコキシシアノアクリレート(例えば、特許文献２参照）、イソプロポキシエチルシアノアクリレート及びメトキシブチルシアノアクリレート（例えば、特許文献９参照）、アルキルエステルシアノアクリレート（例えば、特許文献１０参照）も知られており、特許文献１０には、２−シアノアクリレート化合物の併用による分解の促進についても記載されている。

特開平２−３４６７８号公報 国際公開ＷＯ２００２／０５３６６６号公報 ヨーロッパ特許公開第０５３０６２６号公報 国際公開ＷＯ１９９４／０１１４５４号公報 特開平６−１４５６０６号公報 米国特許第４３２１１８０号明細書 米国特許第４３６４８７６号明細書 米国特許第６１０３７７８号明細書 人工臓器、１９８９、１８、４０９−４１３ 国際公開ＷＯ２００２／００９７８５号公報 米国特許第３９９５６４１号明細書

しかし、上記のように可塑剤等を添加する方法では、硬化物に接着初期の柔軟性を付与することはできるものの、体内埋植後に可塑剤が徐々にブリードして硬くなってしまうことがあるという問題がある。また、起炎性を低下させるため、ホルムアルデヒド放出量が更に抑えられ、且つより十分な分解性を有する硬化物が得られる接着剤であることが必要とされている。
本発明は、上記の従来の状況に鑑みてなされたものであり、硬化物が所定の硬度を有し、適度に柔軟であり、且つ加水分解によるホルムアルデヒド放出量が適量であり、安全性が高く、併せて十分な分解性を有する２−シアノアクリレート系生体用接着剤を提供することを目的とする。また、更に所定の剛性パラメータを有し、特に生体血管同士又は生体血管と人工血管との接合、及び血管瘤充填剤、血管塞栓剤、骨補填剤等の体内使用において有用な２−シアノアクリレート系生体用接着剤を提供することを目的とする。

本発明は以下のとおりである。
１．１分子中にエーテル結合を少なくとも１個有する２−シアノアクリレート化合物を含有し、硬化物のショアＡ硬度が１５〜９０であり、且つ加水分解試験におけるホルムアルデヒド放出量が５００ｐｐｍ以下であることを特徴とする２−シアノアクリレート系生体用接着剤。
２．塗膜厚さが１００〜１５０μｍのとき、硬化物の剛性パラメータが１０〜６５である上記１．に記載の２−シアノアクリレート系生体用接着剤。
３．下記式（１）により表される化合物及び下記式（２）により表される化合物のうちの少なくとも一方を含有する上記１．又は２．に記載の２−シアノアクリレート系生体用接着剤。

［上記式（１）におけるＲ_１は炭素数２〜４のアルキレン基であり、該Ｒ_１の炭素数が２の場合、Ｒ_２は直鎖又は側鎖を有する炭素数５〜８のアルキル基であり、該Ｒ_１の炭素数が３又は４の場合、該Ｒ_２は直鎖又は側鎖を有する炭素数４〜８のアルキル基である。］

［上記式（２）におけるＲ_３及びＲ_４は炭素数２〜４のアルキレン基であり、該Ｒ_３及び該Ｒ_４の炭素数が２の場合、Ｒ_５は直鎖又は側鎖を有する炭素数４〜８のアルキル基であり、該Ｒ_３及び該Ｒ_４の炭素数が３又は４の場合、該Ｒ_５は直鎖又は側鎖を有する炭素数３〜８のアルキル基である。］
４．上記Ｒ_１、上記Ｒ_３及び上記Ｒ_４の炭素数が２又は３である上記３．に記載の２−シアノアクリレート系生体用接着剤。
５．上記式（１）により表される化合物を含有し、上記Ｒ_１の炭素数が２であり、上記Ｒ_２の炭素数が６〜８である上記３．又は４．に記載の２−シアノアクリレート系生体用接着剤。
６．上記式（１）により表される化合物を含有し、上記Ｒ_１の炭素数が３であり、上記Ｒ_２の炭素数が４〜８である上記３．又は４．に記載の２−シアノアクリレート系生体用接着剤。
７．上記式（２）により表される化合物を含有し、上記Ｒ_３及び上記Ｒ_４の炭素数が３であり、上記Ｒ_５の炭素数が３〜５である上記３．乃至６．のうちのいずれか１項に記載の２−シアノアクリレート系生体用接着剤。
８．下記式（１）により表される化合物及び下記式（２）により表される化合物を含有する上記１．又は２．に記載の２−シアノアクリレート系生体用接着剤。

［上記式（１）におけるＲ_１はエチレン基又はプロピレン基であり、Ｒ_２は直鎖又は側鎖を有する炭素数３〜８のアルキル基である。］

［上記式（２）におけるＲ_３及びＲ_４はプロピレン基であり、Ｒ_５は直鎖又は側鎖を有する炭素数３〜８のアルキル基である。］
９．上記Ｒ_１がプロピレン基であり、上記Ｒ_２及び上記Ｒ_５の炭素数が３〜５である上記８．に記載の２−シアノアクリレート系生体用接着剤。
１０．電子線滅菌法、γ線滅菌法、ろ過滅菌法、乾熱滅菌法のうちの少なくとも１種の滅菌処理を施された上記１．乃至９．のうちのいずれか１項に記載の２−シアノアクリレート系生体用接着剤。
１１．生体組織同士又は生体組織と人工補綴物との接合、若しくは接合補助に用いられる上記１．乃至１０．のうちのいずれか１項に記載の２−シアノアクリレート系生体用接着剤。
１２．上記生体組織が、皮膚、心筋、管腔臓器及び実質臓器のうちの少なくとも１種である上記１１．に記載の２−シアノアクリレート系生体用接着剤。
１３．上記人工補綴物が、人工血管、止血材、骨ピン及び縫合糸のうちの少なくとも１種である上記１１．又は１２．に記載の２−シアノアクリレート系生体用接着剤。
１４．血管瘤に充填されて用いられる上記１．乃至１３．のうちのいずれか１項に記載の２−シアノアクリレート系生体用接着剤。
１５．上記血管瘤が発生した血管が脳血管である上記１４．に記載の２−シアノアクリレート系生体用接着剤。
１６．血管の塞栓に用いられる上記１．乃至１３．のうちのいずれか１項に記載の２−シアノアクリレート系生体用接着剤。
１７．上記血管が肝血管である上記１６．に記載の２−シアノアクリレート系生体用接着剤。
１８．骨補填剤として用いられる上記１．乃至１３．のうちのいずれか１項に記載の２−シアノアクリレート系生体用接着剤。

本発明の２−シアノアクリレート系生体用接着剤は、硬化物が特定のショアＡ硬度を有し、且つホルムアルデヒド放出量が少ないため、適度に柔軟であり、安全性が高く、併せて硬化物の分解による生体への吸収も十分になされ、生体用接着剤として有用である。
また、塗膜厚さが１００〜１５０μｍのとき、硬化物の剛性パラメータが１０〜６５である場合は、生体血管同士又は生体血管と人工血管との接合等において特に有用な生体用接着剤とすることができる。
更に、式（１）により表される化合物及び式（２）により表される化合物のうちの少なくとも一方を含有する場合は、容易に、適度に柔軟であり、安全性が高く、十分に分解して生体に吸収され、且つ所定の剛性パラメータを有する硬化物が形成される生体用接着剤とすることができる。
また、Ｒ_１、Ｒ_３及びＲ_４の炭素数が２又は３である場合は、より容易に、硬化物が柔軟であり、安全性が高く、且つ十分に分解して吸収される生体用接着剤とすることができる。
更に、式（１）により表される化合物を含有し、Ｒ_１の炭素数が２であり、Ｒ_２の炭素数が６〜８である場合、及び式（１）により表される化合物を含有し、Ｒ_１の炭素数が３であり、Ｒ_２の炭素数が４〜８である場合は、ホルムアルデヒド放出量がより少なく、より安全性が高く、且つ十分に分解して生体に吸収される硬化物が形成される生体用接着剤とすることができる。
また、式（２）により表される化合物を含有し、Ｒ_３及びＲ_４の炭素数が３であり、Ｒ_５の炭素数が３〜５である場合は、ショアＡ硬度がより低く、より柔軟な硬化物が形成される生体用接着剤とすることができる。
本発明の他の態様の２−シアノアクリレート系生体用接着剤は、硬化物のショアＡ硬度、ホルムアルデヒド放出量及び剛性パラメータを容易に調整することができ、所定の柔軟性と安全性とを併せて有し、且つ十分に分解して生体に吸収される硬化物が形成される生体用接着剤とすることができる。
また、電子線滅菌法、γ線滅菌法、ろ過滅菌法、乾熱滅菌法のうちの少なくとも１種の滅菌処理を施された場合は、より安全性の高い生体用接着剤とすることができる。
更に、生体組織同士又は生体組織と人工補綴物との接合、若しくは接合補助に用いられる場合は、これらを十分な柔軟性を有する硬化物により接合することができ、且つ安全性も高い。
また、生体組織が、皮膚、心筋、管腔臓器及び実質臓器のうちの少なくとも１種である場合、及び人工補綴物が、人工血管、止血材、骨ピン及び縫合糸のうちの少なくとも１種である場合は、これらの生体組織及び人工補綴物を十分な柔軟性を有する硬化物により接合することができ、且つ安全性も高い。
また、２−シアノアクリレート系生体用接着剤が、血管瘤、特に脳血管に発生した血管瘤に充填されて用いられる場合は、血管瘤充填剤として十分に機能し、且つ安全性も高い。
更に、２−シアノアクリレート系生体用接着剤が、血管、特に肝血管の塞栓に用いられる場合は、血管塞栓剤として十分に機能し、且つ安全性も高い。
また、２−シアノアクリレート系生体用接着剤が、骨補填剤として用いられる場合は、この用途において十分に機能し、且つ安全性も高い。

以下、本発明を詳しく説明する。
本発明の２−シアノアクリレート系生体用接着剤は、硬化物のショアＡ硬度が１５〜９０であり、且つ加水分解試験におけるホルムアルデヒドの放出量が５００ｐｐｍ以下であることを特徴とする。
この生体用接着剤は、硬化物の硬度が低いため優れた柔軟性を有し、且つ硬化物を加水分解させたときのホルムアルデヒド放出量が適量であるため、優れた安全性を有するとともに十分に分解して生体に吸収される。

硬化物のショアＡ硬度は、１５〜９０、特に５０〜９０、更に５０〜７０とすることができる。また、ショアＡ硬度が１５〜９０であり、且つショアＤ硬度が４０以下、特に３０以下であることが好ましい。更に、ホルムアルデヒド放出量は、５００ｐｐｍ以下、特に３００ｐｐｍ以下、更に２００ｐｐｍ以下とすることができ、１５０ｐｐｍ以下、特に１００ｐｐｍ以下、更に５０ｐｐｍ以下（通常、４０ｐｐｍ以上）とすることもできる。即ち、ホルムアルデヒド放出量は、４０〜５００ｐｐｍとすることができ、４０ｐｐｍから上記の各々の上限値までとすることもできる。
ホルムアルデヒドは硬化物が分解して放出され、この放出量が多量であると、起炎性が陽性になる等、安全面で問題となるが、硬化物は分解して生体に吸収されるため、体内使用の接着剤としては有利である。従って、ホルムアルデヒド放出量は少ないほどよいというものではなく、硬化物が分解し生体に吸収されるという面では、生体に無毒、又は少なくとも毒性が極めて低い範囲でホルムアルデヒドが放出される、即ち、硬化物が分解することが好ましい。この意味での下限値が上記の４０ｐｐｍである。
尚、ショアＡ硬度、ショアＤ硬度及びホルムアルデヒド放出量は、それぞれ後記の実施例において詳述した方法により測定することができる。

また、本発明の生体用接着剤は、所定のショアＡ硬度及びホルムアルデヒド放出量を有し、且つ塗膜厚さが１００〜１５０μｍのときの硬化物の剛性パラメータが１０〜６５であることが好ましい。この剛性パラメータは１０〜６０、特に１０〜４０、更に１０〜３０であることがより好ましく、１０〜２０、特に１０〜１５とすることもできる。この剛性パラメータが１０〜６５であれば、優れた柔軟性と安全性とを併せて有し、特に血管等の心臓の拍動により寸法が変化する組織に用いられた場合に、硬化物が寸法変化に十分に追従することができ、接着箇所の端部等における硬化物の破壊（亀裂の発生等）などを防止、又は少なくとも抑えることができる。
尚、剛性パラメータは、後記の実施例において詳述した方法により測定することができる。

上記のように特定のショアＡ硬度とホルムアルデヒド放出量とを有する硬化物、及び更に特定の剛性パラメータを有する硬化物が得られる２−シアノアクリレート系生体用接着剤は特に限定されないが、前記式（１）により表される化合物［以下、「前記式（１）の化合物」という。］及び前記式（２）により表される化合物［以下、「前記式（２）の化合物」という。］のうちの少なくとも一方を含有する２−シアノアクリレート系生体用接着剤が挙げられる。この生体用接着剤には、前記式（１）の化合物及び前記式（２）の化合物が、各々１種のみ含有されていてもよく、それぞれ２種以上含有されていてもよい。

前記式（１）におけるＲ_１は炭素数２〜４のアルキレン基であり、Ｒ_１の炭素数が２の場合、Ｒ_２は直鎖又は側鎖を有する炭素数５〜８のアルキル基であり、Ｒ_１の炭素数が３又は４の場合、Ｒ_２は直鎖又は側鎖を有する炭素数４〜８のアルキル基であることが好ましい。Ｒ_１、Ｒ_２が上記の範囲内にあれば、硬度（ショアＡ硬度及びショアＤ硬度の意味であり、以下、同様である。）が低く、ホルムアルデヒド放出量が少なく、且つ所定の剛性パラメータを有する硬化物が形成され、柔軟性と安全性及び十分な分解性とを併せて有する生体用接着剤とすることができる。また、前記式（２）におけるＲ_３及びＲ_４は炭素数２〜４のアルキレン基であり、Ｒ_３及びＲ_４の炭素数が２の場合、Ｒ_５は直鎖又は側鎖を有する炭素数４〜８のアルキル基であり、Ｒ_３及びＲ_４の炭素数が３又は４の場合、Ｒ_５は直鎖又は側鎖を有する炭素数３〜８のアルキル基であることが好ましい。Ｒ_３、Ｒ_４、Ｒ_５が上記の範囲内にあれば、硬度が低く、ホルムアルデヒド放出量が適量であり、且つ所定の剛性パラメータを有する硬化物が形成され、柔軟性と安全性及び十分な分解性とを併せて有する生体用接着剤とすることができる。
更に、前記式（１）におけるＲ_１及び前記式（２）におけるＲ_３、Ｒ_４が、いずれも２又は３であることがより好ましい。アルキレン基の炭素数がいずれも２又は３であれば、より優れた柔軟性と安全性及び十分な分解性とを併せて有する生体用接着剤とすることができる。

本発明の生体用接着剤は、前記式（１）の化合物を含有し、Ｒ_１の炭素数が２であり、Ｒ_２の炭素数が６〜８、特に７〜８であることがより好ましい。このようにＲ_１、Ｒ_２が特定の炭素数であるときは、ホルムアルデヒド放出量が適量であり、優れた安全性及び十分な分解性を有する生体用接着剤とすることができる。この場合のホルムアルデヒド放出量は、５００ｐｐｍ以下、特に３００ｐｐｍ以下、更に１５０ｐｐｍ以下（通常、４０ｐｐｍ以上）とすることができる。

また、本発明の生体用接着剤は、前記式（１）の化合物を含有し、Ｒ_１の炭素数が３であり、Ｒ_２の炭素数が４〜８であることがより好ましい。このようにＲ_１、Ｒ_２が特定の炭素数であるときは、ホルムアルデヒド放出量が適量であり、優れた安全性及び十分な分解性を有する生体用接着剤とすることができる。この場合のホルムアルデヒド放出量は、５００ｐｐｍ以下、特に３００ｐｐｍ以下、更に２５０ｐｐｍ以下（通常、４０ｐｐｍ以上）とすることができる。

更に、本発明の生体用接着剤は、前記式（２）の化合物を含有し、Ｒ_３、Ｒ_４の炭素数が３であり、Ｒ_５の炭素数が３〜５であることがより好ましい。このようにＲ_３、Ｒ_４、Ｒ_５が特定の炭素数であるときは、硬度がより低く、且つ剛性パラメータがより小さく、特に優れた柔軟性を有する生体用接着剤とすることができる。この場合のショアＡ硬度は、２０〜７０、特に３０〜７０、更に４０〜７０とすることができる。更に、剛性パラメータは１５以下とすることができる。

この生体用接着剤では、前記式（１）の化合物と、前記式（２）の化合物とを併せて含有させることができる。このように、前記式（１）の化合物と、前記式（２）の化合物とを含有させれば、各々の質量割合を変化させることにより、硬化物の硬度とホルムアルデヒド放出量とを所定範囲に調整することができる。更に、剛性パラメータを容易に小さくすることもできる。この前記式（１）の化合物と、前記式（２）の化合物とを併せて含有する生体用接着剤では、前記式（１）の化合物と前記式（２）の化合物のそれぞれの種類は特に限定されず、どのような組み合わせであってもよい。

また、前記式（１）の化合物と前記式（２）の化合物とを含有する場合、Ｒ_１、Ｒ_３及びＲ_４の各々の炭素数が同数であることが好ましい。更に、Ｒ_２及びＲ_５のそれぞれの炭素数も同数であることがより好ましい。このように、前記式（１）の化合物と、前記式（２）の化合物の各々のアルキレン基の炭素数、更にはアルキレン基及びアルキル基のそれぞれの炭素数が同数であれば、混合し易く、より均質な生体用接着剤とすることができ、且つ硬化物の硬度及びホルムアルデヒド放出量の調整も容易であり、剛性パラメータを調整することもできる。

更に、前記式（１）の化合物と前記式（２）の化合物とを含有する場合、Ｒ_１がエチレン基又はプロピレン基、Ｒ_３及びＲ_４がプロピレン基であり、且つＲ_２及びＲ_５のそれぞれの炭素数が３〜８であることがより好ましい。また、この場合、Ｒ_１がプロピレン基であり、且つＲ_２及びＲ_５の炭素数が３〜５であることが特に好ましい。このように、前記式（１）の化合物と前記式（２）の化合物とが特定の炭素数を有するときは、硬化物の硬度及びホルムアルデヒド放出量を容易に所定範囲とすることができ、剛性パラメータを所定範囲とすることもできる。そのため、優れた柔軟性と安全性及び十分な分解性を併せて有する生体用接着剤とすることができる。この場合のショアＡ硬度は、３０〜７０、特に４０〜７０、ホルムアルデヒド放出量は４０〜３５０ｐｐｍ、特に１００〜２５０ｐｐｍ、剛性パラメータは１２〜１６とすることができる。

生体用接着剤が、前記式（１）の化合物と前記式（２）の化合物とを含有する場合、各々の化合物の含有量は特に限定されず、任意の質量割合とすることができる。両化合物が含有されることによる作用、効果を十分に得るためには、合計含有量を１００質量％とした場合に、それぞれの化合物の含有量が各々５〜９５質量％であることが好ましい。この質量割合は、それぞれ１０〜９０質量％、特に１５〜８５質量％、更に２０〜８０質量％であることがより好ましい。前記式（１）の化合物と、前記式（２）の化合物との質量割合は、各々の化合物のみが含有されるときの、硬化物の硬度、ホルムアルデヒド放出量及び剛性パラメータを勘案して設定することが好ましい。

この生体用接着剤には、所定性能が損なわれない範囲で、前記式（１）の化合物及び前記式（２）の化合物を除く他の成分が含有されていてもよい。生体用接着剤に、前記式（１）の化合物及び前記式（２）の化合物を除く他の成分が含有される場合、この他の成分としては、貯蔵安定性を向上させるための安定剤、医療的有用性を向上させるための増粘剤、硬化を促進するための硬化促進剤等が挙げられる。また、必要に応じて可塑剤、チクソトロピィ性付与剤、染料等を配合することもできる。この他の成分が含有されるとき、他の成分の合計含有量は、生体用接着剤を１００質量％とした場合に、２０質量％以下であることが好ましく、１０質量％以下、更に５質量％以下とすることもできる。

安定剤としては、二酸化硫黄、パラトルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、プロパンサルトン、三フッ化ホウ素錯体等のアニオン重合禁止剤、及びハイドロキノン、カテコール、ピロガロール、ブチル化ヒドロキシアニソール、２，２−メチレンビス−（４−メチル−６−ｔ−ブチルフェノール）等のラジカル重合禁止剤を用いることができる。安定剤は、前記式（１）の化合物及び前記式（２）の化合物の各々の含有量、又は両化合物が含有されるときは合計含有量を１００質量部とした場合に、アニオン重合禁止剤の場合は、１〜２００質量ｐｐｍ、特に１０〜１００質量ｐｐｍ配合して用いることができる。また、ラジカル重合禁止剤の場合は、１００〜１００００質量ｐｐｍ、特に５００〜５０００質量ｐｐｍ配合して用いることができる。これらの安定剤は１種のみ用いてもよいし、２種以上を併用してもよい。

増粘剤としては、ポリ（メタ）アクリレート等のアクリル系重合体又は共重合体、アセチルセルロース等のセルロース誘導体、及びアクリルゴムなどが挙げられる。増粘剤は、前記式（１）の化合物及び前記式（２）の化合物の各々の含有量、又は両化合物が含有されるときは合計含有量を１００質量部とした場合に、１〜２０質量部、特に２〜１０質量部配合して用いることができる。これらの増粘剤は１種のみ用いてもよいし、２種以上を併用してもよい。

硬化促進剤としては、ポリエチレングリコール誘導体、クラウンエーテル誘導体、及びカリックスアレン等が挙げられる。これらの硬化促進剤は貯蔵安定性に影響を与えない範囲の質量割合で配合して用いることができる。これらの硬化促進剤は１種のみ用いてもよいし、２種以上を併用してもよい。

本発明の生体用接着剤は、各種の方法により滅菌処理し、その後、各種の用途に供される。この滅菌処理の方法は特に限定されず、例えば、電子線滅菌法、γ線滅菌法、ろ過滅菌法、乾熱滅菌法等が挙げられる。滅菌処理は、これらの各種の方法のうちの１種により施されてもよく、必要に応じて２種以上の方法により滅菌処理してもよい。例えば、この生体用接着剤の容器がガラスアンプルである場合は、ガラスアンプルに封入した接着剤を乾熱滅菌する、又はろ過滅菌して無菌充填する。この生体用接着剤の容器がポリオレフィン製である場合は、ろ過無菌して無菌充填する。これらの容器の外側はエチレンオキサイドガス滅菌を施して滅菌することができる。また、このエチレンオキサイドガス滅菌のところを、電子線滅菌、或いはγ線滅菌に代えても滅菌を施すことができる。

この生体用接着剤は、生体組織同士又は生体組織と人工補綴物との接合、若しくは接合補助に用いられる。この接合補助とは、針糸を用いた縫合部のシール性を高める、又は吻合補強するという意味である。

生体組織は特に限定されず、例えば、皮膚、心筋、管腔臓器及び実質臓器等が挙げられる。管腔臓器としては、血管、呼吸器［上気道（鼻腔、副鼻腔、咽頭、喉頭）から下気道（気管、気管支）までの空気の通り道］、消化管（口腔から肛門に至る一連の器官等）、尿路系（腎盂、尿管、膀胱、尿道）等が挙げられる。実質臓器としては、骨、腎臓、消化器（肝臓、脾臓）、免疫器官（胸腺、リンパ節）等が挙げられる。
また、人工補綴物も特に限定されず、例えば、人工血管、止血材、骨ピン及び縫合糸等が挙げられる。
尚、本発明の所定の剛性パラメータを有する生体用接着剤は、生体血管同士、又は生体血管と人工血管との吻合補助、更に心臓切開部の吻合補助等、繰り返し運動している部位の接合、若しくは接合補助において特に有用である。

この生体用接着剤は、安全性が高く、血管瘤充填用２−シアノアクリレート系生体用接着剤として有用であり、２−シアノアクリレート系生体用接着剤を、血管瘤が発生した血管に充填する使用方法により血管瘤充填剤として用いることができる。この血管は特に限定されないが、血管瘤の発生が多くみられる脳血管が代表的なものである。また、この生体用接着剤は、血管塞栓用２−シアノアクリレート系生体用接着剤としても有用であり、２−シアノアクリレート系生体用接着剤を、血管内の疾患部に留置し、塞栓する使用方法により血管塞栓剤として用いることができる。この血管は特に限定されないが、肝血管等が代表的なものである。更に、この生体用接着剤は、骨補填用２−シアノアクリレート系生体用接着剤としても有用であり、２−シアノアクリレート系生体用接着剤を、疾患部に埋入し、新生骨を形成させる使用方法により骨補填剤として用いることができる。

本発明の２−シアノアクリレート系生体用接着剤の製造方法は特に限定されない。例えば、前記の特定の２−シアノアクリレート化合物を含有する生体用接着剤の場合、先ず、シアノ酢酸とアルコールとのエステル化反応等により生成したシアノ酢酸エステルを、溶媒中、触媒の存在下に反応させて縮合させる。触媒としてはアミン又は塩基を用いることができ、アミンとしては、ピペリジン、ジエチルアミン、ジブチルアミン、モルホリン等が挙げられ、塩基としては、水酸化カリウム、水酸化ナトリウム、ナトリウムアルコキシド、二級アミンの塩等が挙げられる。触媒は、シアノ酢酸エステルに対して０．００１〜１０モル、好ましくは０．０１〜１モルの範囲で用いられる。溶媒としては、トルエン、酢酸エチル等が用いられる。反応温度は溶媒を還流させることができる温度とすることができる。

その後、縮合液から溶媒を留去し、次いで、五酸化リン、リン酸、縮合リン酸等を、溶媒を留去した縮合物に対して０．０１〜１０質量％、特に０．５〜３質量％添加し、１４０〜２５０℃に加温して解重合させる。この解重合で生成した粗２−シアノアクリレート化合物を蒸留し、純度を高め、生体用接着剤に用いる２−シアノアクリレート化合物を得ることができる。
このようにして得られる２−シアノアクリレート化合物に前記の安定剤等を配合し、２−シアノアクリレート系生体用接着剤とすることができる。

以下、実施例により本発明を具体的に説明する。
［１］シアノアクリレートに安定剤を配合した生体用接着剤の製造
（１）実施例１〜８
実施例１
シアノ酢酸（立山化成社製）３モルに、エチレングリコールモノヘキシルエーテル（日本乳化剤社製 ヘキシルグリコール、ＨｅＧ）３．１５モル、トルエン２．４モル、及び硫酸０．１２モルを添加し、還流させ、共沸脱水させながら１２時間反応させてエステル化した。その後、未反応のシアノ酢酸及び硫酸を苛性ソーダにより中和し、有機層を硫酸マグネシウムにより脱水し、次いで、脱溶媒し、蒸留して、沸点１１４℃／０．１８ｍｍＨｇの２−ヘキトキシエチル−２−シアノアセテートを得た。収率は８０％であった。

その後、上記のようにして得られた２−ヘキトキシエチル−２−シアノアセテート０．８モルに、パラホルムアルデヒド０．８４モル、トルエン２００ｍＬ、及びピペリジン０．３ｍＬを添加し、還流させ、共沸脱水させながら１２時間反応させて縮合させた。次いで、縮合液を１質量％濃度のパラトルエンスルホン酸水溶液及び飽和食塩水により洗浄し、有機層を硫酸マグネシウムにより脱水し、その後、溶媒を留去した。次いで、五酸化二リン及びハイドロキノンを各々１質量％添加し、圧力０．１〜３．０ｍｍＨｇ、温度１５０〜１９０℃で解重合させ、蒸留して、沸点１１５℃／０．５３ｍｍＨｇの２−ヘキトキシエチル−２−シアノアクリレート（表１では「ＥＧＨ」と略記する。）を得た。収率は１７％であった。その後、安定剤として二酸化硫黄２０質量ｐｐｍ及びハイドロキノン１０００質量ｐｐｍを添加し、この生体用接着剤を性能評価試験に供した。

実施例２
エチレングリコールモノヘキシルエーテルに代えてエチレングリコールモノ−２−エチルヘキシルエーテル（日本乳化剤社製 ２エチルヘキシルグリコール、ＥＨＧ）を用いた他は、実施例１と同様にしてエステル化反応等をさせ、沸点１１１℃／０．１１ｍｍＨｇの２−（２−エチルヘキトキシ）エチル−２−シアノアセテートを得た。収率は８０％であった。その後、実施例１と同様にして縮合及び解重合等をさせ、沸点１１４℃／０．１９ｍｍＨｇの２−（２−エチルヘキトキシ）エチル−２−シアノアクリレート（表１、表５では「ＥＧＥＨ」と略記する。）を得た。収率は２８％であった。次いで、安定剤として二酸化硫黄２０質量ｐｐｍ及びハイドロキノン１０００質量ｐｐｍを添加し、この生体用接着剤を性能評価試験に供した。

実施例３
エチレングリコールモノヘキシルエーテルに代えてジエチレングリコールモノブチルエーテル（日本乳化剤社製 ブチルジグリコール、ＢＤＧ）を用いた他は、実施例１と同様にしてエステル化反応等をさせ、沸点１３６℃／１．８８ｍｍＨｇの２−（２−ブトキシエトキシ）エチル−２−シアノアセテートを得た。収率は８０％であった。その後、実施例１と同様にして縮合及び解重合等をさせ、沸点１３３℃／０．３８ｍｍＨｇの２−（２−ブトキシエトキシ）エチル−２−シアノアクリレート（表１では「ＤＥＧＢ」と略記する。）を得た。収率は２０％であった。次いで、安定剤として二酸化硫黄２０質量ｐｐｍ及びハイドロキノン１０００質量ｐｐｍを添加し、この生体用接着剤を性能評価試験に供した。

実施例４
エチレングリコールモノヘキシルエーテルに代えてプロピレングリコールモノブチルエーテル（日本乳化剤社製 ブチルプロピレングリコール、ＢＦＧ）を用いた他は、実施例１と同様にしてエステル化反応等をさせ、沸点１０３℃／０．３８ｍｍＨｇの２−ブトキシイソプロピル−２−シアノアセテートを得た。収率は７６％であった。その後、実施例１と同様にして縮合及び解重合等をさせ、沸点９５℃／０．０５３ｍｍＨｇの２−ブトキシイソプロピル−２−シアノアクリレート（表１、表５では「ＰＧＢ」と略記する。）を得た。収率は３８％であった。次いで、安定剤として二酸化硫黄２０質量ｐｐｍ及びハイドロキノン１０００質量ｐｐｍを添加し、この生体用接着剤を性能評価試験に供した。

実施例５
エチレングリコールモノヘキシルエーテルに代えてプロピレングリコールモノヘキシルエーテル（日本乳化剤社製 ヘキシルプロピレングリコール、ＨｅＦＧ）を用いた他は、実施例１と同様にしてエステル化反応等をさせ、沸点１２５℃／０．９０ｍｍＨｇの２−ヘキトキシイソプロピル−２−シアノアセテートを得た。収率は７８％であった。その後、実施例１と同様にして縮合及び解重合等をさせ、沸点１１４℃／０．２２ｍｍＨｇの２−ヘキトキシイソプロピル−２−シアノアクリレート（表１では「ＰＧＨ」と略記する。）を得た。収率は１９％であった。次いで、安定剤として二酸化硫黄２０質量ｐｐｍ及びハイドロキノン１０００質量ｐｐｍを添加し、この生体用接着剤を性能評価試験に供した。

実施例６
エチレングリコールモノヘキシルエーテルに代えてプロピレングリコールモノ２−エチルヘキシルエーテル（日本乳化剤社製 ２エチルヘキシルプロピレングリコール、ＥＨＦＧ）を用いた他は、実施例１と同様にしてエステル化反応等をさせ、沸点１２４℃／０．５３ｍｍＨｇの２−（２−エチルヘキトキシ）イソプロピル−２−シアノアセテートを得た。収率は７６％であった。その後、実施例１と同様にして縮合及び解重合等をさせ、沸点１２０℃／０．２２ｍｍＨｇの２−（２−エチルヘキトキシ）イソプロピル−２−シアノアクリレート（表１では「ＰＧＥＨ」と略記する。）を得た。収率は１３％であった。次いで、安定剤として二酸化硫黄２０質量ｐｐｍ及びハイドロキノン１０００質量ｐｐｍを添加し、この生体用接着剤を性能評価試験に供した。

実施例７
エチレングリコールモノヘキシルエーテルに代えてジプロピレングリコールモノプロピルエーテル（日本乳化剤社製 プロピルプロピレンジグリコール、ＰＦＤＧ）を用いた他は、実施例１と同様にしてエステル化反応等をさせ、沸点１４３℃／３．００ｍｍＨｇの２−（２−プロポキシイソプロポキシ）イソプロピル−２−シアノアセテートを得た。収率は７２％であった。その後、実施例１と同様にして縮合及び解重合等をさせ、沸点１２５℃／０．２２ｍｍＨｇの２−（２−プロポキシイソプロポキシ）イソプロピル−２−シアノアクリレート（表１、表５では「ＤＰＧＰ」と略記する。）を得た。収率は２４％であった。次いで、安定剤として二酸化硫黄２０質量ｐｐｍ及びハイドロキノン１０００質量ｐｐｍを添加し、この生体用接着剤を性能評価試験に供した。

実施例８
エチレングリコールモノヘキシルエーテルに代えてジプロピレングリコールモノブチルエーテル（日本乳化剤社製 ブチルプロピレンジグリコール、ＢＦＤＧ）を用いた他は、実施例１と同様にしてエステル化反応等をさせ、沸点１３２℃／２．２５ｍｍＨｇの２−（２−ブトキシイソプロポキシ）イソプロピル−２−シアノアセテートを得た。収率は７５％であった。その後、実施例１と同様にして縮合及び解重合等をさせ、沸点１２４℃／０．２２ｍｍＨｇの２−（２−ブトキシイソプロポキシ）イソプロピル−２−シアノアクリレート（表１では「ＤＰＧＢ」と略記する。）を得た。収率は２０％であった。次いで、安定剤として二酸化硫黄２０質量ｐｐｍ及びハイドロキノン１０００質量ｐｐｍを添加し、この生体用接着剤を性能評価試験に供した。

実施例９〜１３
後記の比較例９で得られた２−プロポキシイソプロピル−２−シアノアクリレート（ＰＧＰ）と、実施例７で得られた２−（２−プロポキシイソプロポキシ）イソプロピル−２−シアノアクリレート（ＤＰＧＰ）とを、表１に記載の質量割合で混合した混合物からなる生体用接着剤を性能評価試験に供した（実施例９）。また、実施例４で得られた２−ブトキシイソプロピル−２−シアノアクリレート（ＰＧＢ）と、実施例７で得られたＤＰＧＰとを、表１に記載の質量割合で混合した混合物からなる生体用接着剤を性能評価試験に供した（実施例１０）。更に、実施例４で得られたＰＧＢと、実施例８で得られた２−（２−ブトキシイソプロポキシ）イソプロピル−２−シアノアクリレート（ＤＰＧＢ）とを、表１に記載の質量割合で混合した混合物からなる生体用接着剤を性能評価試験に供した（実施例１１〜１３）。

以上、実施例１〜８における各々の２−シアノアクリレート化合物のアルキレン基及びアルキル基の炭素数、及び実施例９〜１３の前記式（１）の化合物と、前記式（２）の化合物とを併せて含有するときの、それぞれの２−シアノアクリレート化合物の種類と質量割合を表１に記載する。

（２）比較例１〜１３
比較例１
２−エトキシエチル−２−シアノアセテートを用いた他は、実施例１と同様にして縮合及び解重合等をさせ、沸点１０２℃／３．０ｍｍＨｇの２−エトキシエチル−２−シアノアクリレート（表２では「ＥＧＥ」と略記する。）を得た。収率は７０％であった。次いで、安定剤として二酸化硫黄２０質量ｐｐｍ及びハイドロキノン１０００質量ｐｐｍを添加し、この生体用接着剤を性能評価試験に供した。

比較例２
エチレングリコールモノヘキシルエーテルに代えてエチレングリコールモノイソプロピルエーテル（日本乳化剤社製 イソプロピルグリコール、ｉＰＧ）を用いた他は、実施例１と同様にしてエステル化反応等をさせ、沸点１０９℃／２．２５ｍｍＨｇの２−イソプロポキシエチル−２−シアノアセテートを得た。収率は９２％であった。その後、実施例１と同様にして縮合及び解重合等をさせ、沸点９２℃／０．０７５ｍｍＨｇの２−イソプロポキシエチル−２−シアノアクリレート（表２では「ＥＧｉＰ」と略記する。）を得た。収率は３６％であった。次いで、安定剤として二酸化硫黄２０質量ｐｐｍ及びハイドロキノン１０００質量ｐｐｍを添加し、この生体用接着剤を性能評価試験に供した。

比較例３
エチレングリコールモノヘキシルエーテルに代えてエチレングリコールモノブチルエーテル（日本乳化剤社製 ブチルグリコール、ＢＧ）を用いた他は、実施例１と同様にしてエステル化反応等をさせ、沸点１０６℃／２．２５ｍｍＨｇの２−ブトキシエチル−２−シアノアセテートを得た。収率は８９％であった。その後、実施例１と同様にして縮合及び解重合等をさせ、沸点９５℃／０．０７５ｍｍＨｇの２−ブトキシエチル−２−シアノアクリレート（表２では「ＥＧＢ」と略記する。）を得た。収率は３２％であった。次いで、安定剤として二酸化硫黄２０質量ｐｐｍ及びハイドロキノン１０００質量ｐｐｍを添加し、この生体用接着剤を性能評価試験に供した。

比較例４
エチレングリコールモノヘキシルエーテルに代えてジエチレングリコールモノメチルエーテル（日本乳化剤社製 メチルジグリコール、ＭＤＧ）を用いた他は、実施例１と同様にしてエステル化反応等をさせ、沸点１４６℃／２．７８ｍｍＨｇの２−（２−メトキシ）エトキシエチル−２−シアノアセテートを得た。収率は８３％であった。その後、実施例１と同様にして縮合及び解重合等をさせ、沸点９３℃／０．０７５ｍｍＨｇの２−（２−メトキシ）エトキシエチル−２−シアノアクリレート（表２では「ＤＥＧＭ」と略記する。）を得た。収率は４６％であった。次いで、安定剤として二酸化硫黄２０質量ｐｐｍ及びハイドロキノン１０００質量ｐｐｍを添加し、この生体用接着剤を性能評価試験に供した。

比較例５
エチレングリコールモノヘキシルエーテルに代えてジエチレングリコールモノエチルエーテル（東京化成社製）を用いた他は、実施例１と同様にしてエステル化反応等をさせ、沸点１２８℃／２．７８ｍｍＨｇの２−（２−エトキシエトキシ）エチル−２−シアノアセテートを得た。収率は８０％であった。その後、実施例１と同様にして縮合及び解重合等をさせ、沸点９３℃／０．０６８ｍｍＨｇの２−（２−エトキシエトキシ）エチル−２−シアノアクリレート（表２では「ＤＥＧＥ」と略記する。）を得た。収率は５４％であった。次いで、安定剤として二酸化硫黄２０質量ｐｐｍ及びハイドロキノン１０００質量ｐｐｍを添加し、この生体用接着剤を性能評価試験に供した。

比較例６
エチレングリコールモノヘキシルエーテルに代えてジエチレングリコールモノイソプロピルエーテル（日本乳化剤社製 イソプロピルジグリコール、ｉＰＤＧ）を用いた他は、実施例１と同様にしてエステル化反応等をさせ、沸点１４０℃／２．０３ｍｍＨｇの２−（２−イソプロポキシエトキシ）エチル−２−シアノアセテートを得た。収率は７２％であった。その後、実施例１と同様にして縮合及び解重合等をさせ、沸点１１３℃／０．４５ｍｍＨｇの２−（２−イソプロポキシエトキシ）エチル−２−シアノアクリレート（表２では「ＤＥＧｉＰ」と略記する。）を得た。収率は２３％であった。次いで、安定剤として二酸化硫黄２０質量ｐｐｍ及びハイドロキノン１０００質量ｐｐｍを添加し、この生体用接着剤を性能評価試験に供した。

比較例７
エチレングリコールモノヘキシルエーテルに代えてプロピレングリコールモノメチルエーテル（日本乳化剤社製 メチルプロピレングリコール、ＭＦＧ）を用いた他は、実施例１と同様にしてエステル化反応等をさせ、沸点９０℃／２．３３ｍｍＨｇの２−メトキシイソプロピル−２−シアノアセテートを得た。収率は８５％であった。その後、実施例１と同様にして縮合及び解重合等をさせ、沸点７３℃／０．６８ｍｍＨｇの２−メトキシイソプロピル−２−シアノアクリレート（表２では「ＰＧＭ」と略記する。）を得た。収率は３１％であった。次いで、安定剤として二酸化硫黄２０質量ｐｐｍ及びハイドロキノン１０００質量ｐｐｍを添加し、この生体用接着剤を性能評価試験に供した。

比較例８
エチレングリコールモノヘキシルエーテルに代えてプロピレングリコールモノエチルエーテル（和光純薬工業社製）を用いた他は、実施例１と同様にしてエステル化反応等をさせ、沸点９４℃／２．１０ｍｍＨｇの２−エトキシイソプロピル−２−シアノアセテートを得た。収率は８９％であった。その後、実施例１と同様にして縮合及び解重合等をさせ、沸点７４℃／０．０６４ｍｍＨｇの２−エトキシイソプロピル−２−シアノアクリレート（表２では「ＰＧＥ」と略記する。）を得た。収率は２７％であった。次いで、安定剤として二酸化硫黄２０質量ｐｐｍ及びハイドロキノン１０００質量ｐｐｍを添加し、この生体用接着剤を性能評価試験に供した。

比較例９
エチレングリコールモノヘキシルエーテルに代えてプロピレングリコールモノプロピルエーテル（日本乳化剤社製 プロピルプロピレングリコール、ＰＦＧ）を用いた他は、実施例１と同様にしてエステル化反応等をさせ、沸点１０７℃／２．３３ｍｍＨｇの２−プロポキシイソプロピル−２−シアノアセテートを得た。収率は８５％であった。その後、実施例１と同様にして縮合及び解重合等をさせ、沸点８７℃／０．０３８ｍｍＨｇの２−プロポキシイソプロピル−２−シアノアクリレート（表１、表２では「ＰＧＰ」と略記する。）を得た。収率は１１％であった。次いで、安定剤として二酸化硫黄２０質量ｐｐｍ及びハイドロキノン１０００質量ｐｐｍを添加し、この生体用接着剤を性能評価試験に供した。

比較例１０
エチレングリコールモノヘキシルエーテルに代えてジプロピレングリコールモノメチルエーテル（日本乳化剤社製 メチルプロピレンジグリコール、ＭＦＤＧ）を用いた他は、実施例１と同様にしてエステル化反応等をさせ、沸点１１６℃／２．１８ｍｍＨｇの２−（２−メトキシイソプロポキシ）イソプロピル−２−シアノアセテートを得た。収率は７６％であった。その後、実施例１と同様にして縮合及び解重合等をさせ、沸点８４℃／０．０３８ｍｍＨｇの２−（２−メトキシプロポキシ）イソプロピル−２−シアノアクリレート（表２では「ＤＰＧＭ」と略記する。）を得た。収率は４４％であった。次いで、安定剤として二酸化硫黄２０質量ｐｐｍ及びハイドロキノン１０００質量ｐｐｍを添加し、この生体用接着剤を性能評価試験に供した。

比較例１１
エチレングリコールモノヘキシルエーテルに代えて３−メトキシ−１−ブタノール（和光純薬工業社製）を用いた他は、実施例１と同様にしてエステル化反応等をさせ、沸点９０℃／０．６ｍｍＨｇの３−メトキシ−３−メチルプロピル−２−シアノアセテートを得た。収率は８３％であった。その後、実施例１と同様にして縮合及び解重合等をさせ、沸点７０℃／０．１５ｍｍＨｇの３−メトキシ−３−メチルプロピル−２−シアノアクリレート（表２では「ＢＧＭ」と略記する。）を得た。収率は３６％であった。次いで、安定剤として二酸化硫黄２０質量ｐｐｍ及びハイドロキノン１０００質量ｐｐｍを添加し、この生体用接着剤を性能評価試験に供した。

比較例１２
市販の工業用瞬間接着剤（エチル−２−シアノアクリレート、東亞合成株式会社製、商品名「アロンアルファ２０１」）（表２では「Ｅ−２−ＣＡ」と略記する。）

比較例１３
エチレングリコールモノ２−エチルヘキシルエーテルに代えて２−オクタノールを用いた他は、実施例１と同様にしてエステル化反応等をさせ、沸点８８℃／０．１５ｍｍＨｇの２−オクチル−２−シアノアセテートを得た。収率は８０％であった。その後、実施例１と同様にして縮合及び解重合等をさせ、沸点７５℃／０．０７５ｍｍＨｇの２−オクチル−２−シアノアクリレート（表２、５では「２−Ｏ−２−ＣＡ」と略記する。）を得た。収率は３９％であった。次いで、安定剤として二酸化硫黄２０質量ｐｐｍ及びハイドロキノン１０００質量ｐｐｍを添加し、この生体用接着剤を性能評価試験に供した。

以上、比較例１〜１３における各々の２−シアノアクリレート化合物のアルキレン基及びアルキル基の炭素数を表２に記載する。

［２］性能評価
上記［１］で製造した生体用接着剤を用いて性能を評価した。
（１）硬度
（ａ）試料作製
内径３０ｍｍのテトラフルオロエチレン製のシャーレに、上記［１］で製造した生体用接着剤を約３ｇ流し込み、Ｎ，Ｎ’−ジメチルアニリン雰囲気下に１時間静置して硬化させた。このシアノアクリレートの流し込みと硬化とを、硬化物の厚さが７ｍｍになるまで繰り返し、硬化物の厚さが７ｍｍになったときから更にＮ，Ｎ’−ジメチルアニリン雰囲気下に２４時間静置し、その後、シャーレから円盤状の硬化物を取り出し、これを硬度の測定に用いた。
（ｂ）測定方法
ＪＩＳ Ｋ ６２５１に従い、Ａ型硬度計及びＤ型硬度計（高分子計器社製）を用いて、ショアＡ硬度及びショアＤ硬度を測定した。

（２）ホルムアルデヒド放出量
（ａ）試料作製
内径３０ｍｍのテトラフルオロエチレン製のシャーレに、上記［１］で製造した生体用接着剤を約１ｇ流し込み、Ｎ，Ｎ’−ジメチルアニリン雰囲気下に２４時間静置して硬化させ、直径約３０ｍｍ、厚さ約１ｍｍの円盤状の硬化物を得た。
（ｂ）加水分解
シャーレから硬化物を取り出し、この硬化物を密閉可能なガラス容器に入れ、４０ｍＬの生理食塩水を投入し、密閉した。その後、５０℃に調温された恒温槽に入れ、７日間静置し、加水分解させた。
（ｃ）検体等の調製
７日間経過後、恒温槽から取り出し、室温（２０〜３０℃）で約１時間静置して室温付近にまで冷却し、開栓して生理食塩水を２ｍＬ取り出し、ホルムアルデヒドテストワコー（和光純薬工業株式会社製）の取扱説明書に従って検体（呈色液）を調製した。また、ホルムアルデヒド標準液及び盲検（ブランク液）も同様にして調製した。尚、ホルムアルデヒド標準液の調製に用いたホルムアルデヒド希釈原液のホルムアルデヒド含量は、上記の取扱説明書に従って定量しておいた。また、盲検の調製に際しては、蒸留水に代えて生理食塩水を用いた。
（ｄ）測定方法
ホルムアルデヒドは、分光光度計（島津製作所製、型式「ＵＶ−２４００ＰＣ」）を用いて定量した。具体的には、盲検を対照として検体及びホルムアルデヒド標準液の波長５５０ｎｍにおける吸光度を測定し、一方、ホルムアルデヒド標準液の吸光度を用いて検量線を作成し、この検量線を用いて検体の測定値に基づいて硬化物から放出されたホルムアルデヒドを算出した。
表１、２のホルムアルデヒド生成量は測定値を硬化物の重量で除した値、即ち、硬化物１ｇ当たりのホルムアルデヒド生成量である。

（３）起炎性
（ａ）試料作製
内径１０ｍｍのテトラフルオロエチレン製のシャーレに、上記［１］で製造した生体用接着剤を約０．４ｇ流し込み、Ｎ，Ｎ’−ジメチルアニリン雰囲気下に２４時間静置して硬化させ、直径約１０ｍｍ、厚さ約１ｍｍの円盤状の硬化物を得た。
（ｂ）測定方法
シャーレから硬化物を取り出し、この硬化物及び陰性対象である高密度ポリエチレン［（財）食品医薬品安全センター製］をウサギの皮下に埋植し、１４日経過後、埋植部位を摘出し、直ちに１０質量％濃度の緩衝ホルマリン水溶液により固定した。次いで、常法に従って厚さ３μｍのパラフィン切片を作製し、ヘマトキシリン・エオジン染色を施し、光学顕微鏡を用いて鏡検した。この鏡検による病理組織観察の結果、陰性対象と比べて優位に強い炎症反応をおこしているものを起炎性が陽性であるとし、明らかな組織の壊死又は変性がみられないものを起炎性が陰性であるとした。

（４）貯蔵弾性率
（ａ）貯蔵弾性率の意味
前記の「硬度」とは別に、硬化物の硬さの指標として貯蔵弾性率（Ｇ’）が挙げられる。硬化物のずり粘弾性測定を行い、Ｇ’の温度分散カーブを得ることができ、Ｇ’の温度依存性が確認できる。所定温度におけるＧ’を比較したとき、この所定温度でＧ’が高いほど硬化物は硬く、Ｇ’が低いほど柔らかい。室温（２５℃）で測定している前記の「硬度」の大（硬い）／小（柔らかい）の値と、２５℃のＧ’の大（硬い）／小（柔らかい）にはよい相関がある。また、硬化物の体内での状態を想定する場合、３７℃のＧ’の値の大／小を比較検討すればよい。２５℃のときの柔軟性では、２５℃のＧ’が０．０１〜５０ＭＰａであることが好ましく、０．０５〜４５ＭＰａであることがより好ましい。３７℃のときの柔軟性では、３７℃のＧ’が０．０１〜２０ＭＰａであることが好ましく、０．０５〜１５ＭＰａであることがより好ましい。
（ｂ）試料作製
レオメータ（Ｒｅｏｌｏｇｉｃａ社製、型式「ＶＡＲ−５０」）のジオメトリ、ステージにアミン（ジメチルアニリン）を塗布し、その後、ジオメトリを所定のギャップ（０．３ｍｍ）に調整し、そのギャップに上記［１］で製造した生体用接着剤を注入し、Ｇ’、Ｇ"及びｔａｎδが一定になるまで硬化させた。
（ｃ）測定方法
上記のレオメータ及び６ｍｍφのパラレルプレートを用いて周波数１Ｈｚ、歪み０．１％で２℃／分の速度で昇温させながらずり粘弾性を測定し、２５℃及び３７℃における貯蔵弾性率Ｇ’を求めた。

（５）剛性パラメータ
（ａ）剛性パラメータの意味
生体用接着剤を生体組織、特に血管に用いる場合、組織の外寸変化、特に心臓の拍動による血管の外径変化に硬化物が追従することができれば、この生体用接着剤の接着性の信頼性は高い。この信頼性を評価するための指標が剛性パラメータである（Matsuda T, et al: A novel elastomeric surgical adhesive : design, properties and in vivo performances. Trans Am Soc Artif Intern Organs 33: 151-156, 1986.参照）。
（ｂ）試料作製
剛性パラメータが約１０である疑似血管（ラテックススリーブ、イマムラ社製、外径６ｍｍ、壁厚２０μｍ）の全周に生体用接着剤を塗布し、幅５ｍｍ、厚さ約１００μｍの塗膜を形成し、Ｎ，Ｎ’−ジメチルアニリン雰囲気下に２４時間静置して硬化させた。
（ｃ）測定方法
上記（ｂ）で作製した試料血管を３７℃の温水に浸漬し、一端を封止し、他端から３７℃の温水を注入し、更に試料の内圧が６０ｍｍＨｇになるように加圧した。この加圧時の試料血管の外経をレーザー外径測定装置（キーエンス社製、型式「ＬＳ−５０４０Ｔ」）により測定した。その後、試料内圧を段階的に１６０ｍｍＨｇにまで加圧していき、各内圧における試料血管の外径を測定した。そして、基準内圧を１００ｍｍＨｇとし、下記式（１）によって導かれる値をグラフの縦軸に、下記式（２）によって導かれる値をグラフの横軸にとり、６０ｍｍＨｇから１６０ｍｍＨｇの範囲で測定した各測定ポイントの結果をグラフにプロットし、直線で近似したときの傾きを剛性パラメーター（β値）とした。
式（１） ＬｎＰ／Ｐｓ［Ｐ：各測定ポイントでの内圧、Ｐｓ：基準内圧（１００ｍｍＨｇ）］
式（２） Ｒ／Ｒｓ−１（Ｒ：各測定ポイントでの外径、Ｒｓ：内圧１００ｍｍＨｇ時の外径）

（６）拍動試験
（ａ）試料作製
上記（５）、（ｂ）と同様にして試料を作製した。
（ｂ）測定方法
上記（ａ）で作製した試料血管を３７℃の温水に浸漬し、一端を封止し、他端を、エアーによる加圧と常圧への復帰とを０．２秒間隔で繰り返すことができる拍動試験装置に繋ぎ、加圧時の内圧が１６０ｍｍＨｇとなるように試料血管の内部に拍動圧力をかけた。このようにして拍動試験を１週間継続した後、試料血管を取り外し、拡大鏡下で接着の状態を観察した。

（７）変化重量
（ａ）試料作製
内径１０ｍｍのテトラフルオロエチレン製のシャーレに生体用接着剤を約０．２ｇ流し込み、Ｎ，Ｎ’−ジメチルアニリン雰囲気下に２４時間静置して硬化させ、直径約１０ｍｍ、厚さ約０．５ｍｍの円盤状の硬化物を得た。
（ｂ）加水分解
上記のようにして作製した試料を抽出シンブル中に置き、その後、滅菌ガラスバイアル中に静置し、抗生物質及び抗黴剤を配合したダルベッコのリン酸緩衝生理食塩水を２１ミリリットル注ぎ入れ、次いで、滅菌ガラスバイアルを３９℃に調温された水浴中に投入した。リン酸緩衝生理食塩水は７日経過後に交換した。
（ｃ）測定方法
滅菌ガラスバイアルを水浴中に投入した時点から７日間経過後、及び１４日間経過後に、滅菌ガラスバイアルから試料を取り出し、滅菌水により３回洗浄し、その後、２４時間真空乾燥させ、試料の重量を秤量し、下記の式に従って変化重量（重量減少）を算出し、分解性の評価の指標とした。
変化重量（％）＝［（加水分解前の試料重量−加水分解後の試料の重）／加水分解前の試料重量］×１００

上記の評価結果（変化重量は除く。）のうちの実施例の結果を表３に、比較例の結果を表４にそれぞれ記載する。また、変化重量の評価結果を表５に記載する。
尚、表３及び表４で、「貯蔵弾性率」は「Ｇ’」、剛性パラメータは「β値」、「ホルムアルデヒド放出量」は「ＦＡ放出量」と略記する。

表３の結果によれば、Ｒ_１、Ｒ_２が特定の炭素数を有する式（１）の２−シアノアクリレート化合物を含有する実施例１、２及び４〜６の生体用接着剤、並びに式（２）の２−シアノアクリレート化合物を含有する実施例３、７、８の生体用接着剤は、いずれも所定の物性等を有し、十分な柔軟性と高い安全性及び十分な分解性とを併せて有していることが分かる。特に実施例２、５、６の生体用接着剤は、ホルムアルデヒド放出量が極めて少なく、より優れた安全性を有し、且つ分解性も十分である。更に、Ｒ_３、Ｒ_４及びＲ_５が特定の炭素数を有する式（２）の２−シアノアクリレート化合物を含有する実施例７、８の生体用接着剤は、硬度が極めて低く、より優れた柔軟性を有している。

また、比較例９と実施例７の各々の生体用接着剤を等量混合してなる実施例９の生体用接着剤、実施例４と実施例７の各々の生体用接着剤を等量混合してなる実施例１０の生体用接着剤、及び実施例４と実施例８の各々の生体用接着剤を等量混合してなる実施例１２の生体用接着剤では、ホルムアルデヒド放出量が適量であり、硬度が低く、優れた安全性及び十分な分解性と柔軟性とを併せて有していることが分かる。また、実施例４と実施例８の各々の生体用接着剤の質量割合を変化させた実施例１１〜１３によれば、硬度とホルムアルデヒド放出量とを容易に調整し得ることが分かる。
更に、各々の実施例の生体用接着剤では、硬度及び貯蔵弾性率が低く、且つ剛性パラメータが小さく、柔軟であるため、拍動試験における拍動圧による変形に十分に追従し、試験後の硬化物に何ら異常は観察されなかった。

一方、表４の結果によれば、比較例１〜３、７〜９及び１１の、式（１）の化学構造を有する２−シアノアクリレート化合物を含有しない生体用接着剤では、安全性及び分解性は高いものの、柔軟性は劣っている。特に比較例１〜３、７〜９及び１１では、拍動試験後、接着箇所の端部を中心に硬化物に亀裂等の破壊もみられた。また、比較例４〜６及び１０の、式（２）の化学構造を有する２−シアノアクリレート化合物を含有しない生体用接着剤では、十分な柔軟性を有するものの、ホルムアルデヒド放出量が極めて多く、安全性は劣っている。また、従来から用いられている比較例１２、１３の２−シアノアクリレート化合物を含有する生体用接着剤では、安全性は高いものの、柔軟性に劣ることが分かる。特に、硬度、貯蔵弾性率が高く、且つ剛性パラメータがより大きい比較例１２では、拍動試験後、接着箇所の端部を中心に硬化物に亀裂等の破壊がみられた。

更に、表５の結果によれば、実施例２、４、７の生体用接着剤、特にジプロピレングリコール系のエーテルを用いた２−シアノアクリレート化合物を含有する実施例７の生体用接着剤では、十分な分解性を有していることが分かる。一方、比較例１３の生体用接着剤では、１４日経過後でも変化重量は１％未満であり、分解性に劣っている。

Claims (18)

1. １分子中にエーテル結合を少なくとも１個有する２−シアノアクリレート化合物を含有し、硬化物のショアＡ硬度が１５〜９０であり、且つ加水分解試験におけるホルムアルデヒド放出量が５００ｐｐｍ以下であることを特徴とする２−シアノアクリレート系生体用接着剤。
2. 塗膜厚さが１００〜１５０μｍのとき、硬化物の剛性パラメータが１０〜６５である請求項１に記載の２−シアノアクリレート系生体用接着剤。
3. 下記式（１）により表される化合物及び下記式（２）により表される化合物のうちの少なくとも一方を含有する請求項１又は２に記載の２−シアノアクリレート系生体用接着剤。
   

   

   ［上記式（１）におけるＲ_１は炭素数２〜４のアルキレン基であり、該Ｒ_１の炭素数が２の場合、Ｒ_２は直鎖又は側鎖を有する炭素数５〜８のアルキル基であり、該Ｒ_１の炭素数が３又は４の場合、該Ｒ_２は直鎖又は側鎖を有する炭素数４〜８のアルキル基である。］
   

   

   ［上記式（２）におけるＲ_３及びＲ_４は炭素数２〜４のアルキレン基であり、該Ｒ_３及び該Ｒ_４の炭素数が２の場合、Ｒ_５は直鎖又は側鎖を有する炭素数４〜８のアルキル基であり、該Ｒ_３及び該Ｒ_４の炭素数が３又は４の場合、該Ｒ_５は直鎖又は側鎖を有する炭素数３〜８のアルキル基である。］
4. 上記Ｒ_１、上記Ｒ_３及び上記Ｒ_４の炭素数が２又は３である請求項３に記載の２−シアノアクリレート系生体用接着剤。
5. 上記式（１）により表される化合物を含有し、上記Ｒ_１の炭素数が２であり、上記Ｒ_２の炭素数が６〜８である請求項３又は４に記載の２−シアノアクリレート系生体用接着剤。
6. 上記式（１）により表される化合物を含有し、上記Ｒ_１の炭素数が３であり、上記Ｒ_２の炭素数が４〜８である請求項３又は４に記載の２−シアノアクリレート系生体用接着剤。
7. 上記式（２）により表される化合物を含有し、上記Ｒ_３及び上記Ｒ_４の炭素数が３であり、上記Ｒ_５の炭素数が３〜５である請求項３乃至６のうちのいずれか１項に記載の２−シアノアクリレート系生体用接着剤。
8. 下記式（１）により表される化合物及び下記式（２）により表される化合物を含有する請求項１又は２に記載の２−シアノアクリレート系生体用接着剤。
   

   

   ［上記式（１）におけるＲ_１はエチレン基又はプロピレン基であり、Ｒ_２は直鎖又は側鎖を有する炭素数３〜８のアルキル基である。］
   

   

   ［上記式（２）におけるＲ_３及びＲ_４はプロピレン基であり、Ｒ_５は直鎖又は側鎖を有する炭素数３〜８のアルキル基である。］
9. 上記Ｒ_１がプロピレン基であり、上記Ｒ_２及び上記Ｒ_５の炭素数が３〜５である請求項８に記載の２−シアノアクリレート系生体用接着剤。
10. 電子線滅菌法、γ線滅菌法、ろ過滅菌法、乾熱滅菌法のうちの少なくとも１種の滅菌処理を施された請求項１乃至９のうちのいずれか１項に記載の２−シアノアクリレート系生体用接着剤。
11. 生体組織同士又は生体組織と人工補綴物との接合、若しくは接合補助に用いられる請求項１乃至１０のうちのいずれか１項に記載の２−シアノアクリレート系生体用接着剤。
12. 上記生体組織が、皮膚、心筋、管腔臓器及び実質臓器のうちの少なくとも１種である請求項１１に記載の２−シアノアクリレート系生体用接着剤。
13. 上記人工補綴物が、人工血管、止血材、骨ピン及び縫合糸のうちの少なくとも１種である請求項１１又は１２に記載の２−シアノアクリレート系生体用接着剤。
14. 血管瘤に充填されて用いられる請求項１乃至１３のうちのいずれか１項に記載の２−シアノアクリレート系生体用接着剤。
15. 上記血管瘤が発生した血管が脳血管である請求項１４に記載の２−シアノアクリレート系生体用接着剤。
16. 血管の塞栓に用いられる請求項１乃至１３のうちのいずれか１項に記載の２−シアノアクリレート系生体用接着剤。
17. 上記血管が肝血管である請求項１６に記載の２−シアノアクリレート系生体用接着剤。
18. 骨補填剤として用いられる請求項１乃至１３のうちのいずれか１項に記載の２−シアノアクリレート系生体用接着剤。