JPWO2006132348A1 - ユビキノン−10の精製方法 - Google Patents
ユビキノン−10の精製方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JPWO2006132348A1 JPWO2006132348A1 JP2007520176A JP2007520176A JPWO2006132348A1 JP WO2006132348 A1 JPWO2006132348 A1 JP WO2006132348A1 JP 2007520176 A JP2007520176 A JP 2007520176A JP 2007520176 A JP2007520176 A JP 2007520176A JP WO2006132348 A1 JPWO2006132348 A1 JP WO2006132348A1
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- ubiquinone
- raw material
- solution
- material liquid
- crosslinked polymer
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Abandoned
Links
Images
Classifications
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/22—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof comprising organic material
- B01J20/26—Synthetic macromolecular compounds
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
- B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
- B01D15/10—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features
- B01D15/18—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features relating to flow patterns
- B01D15/1814—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features relating to flow patterns recycling of the fraction to be distributed
- B01D15/1821—Simulated moving beds
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/22—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof comprising organic material
- B01J20/26—Synthetic macromolecular compounds
- B01J20/261—Synthetic macromolecular compounds obtained by reactions only involving carbon to carbon unsaturated bonds
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/22—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof comprising organic material
- B01J20/26—Synthetic macromolecular compounds
- B01J20/265—Synthetic macromolecular compounds modified or post-treated polymers
- B01J20/267—Cross-linked polymers
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C46/00—Preparation of quinones
- C07C46/10—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C50/00—Quinones
- C07C50/02—Quinones with monocyclic quinoid structure
- C07C50/06—Quinones with monocyclic quinoid structure with unsaturation outside the quinoid structure
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
- B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
- B01D15/10—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features
- B01D15/18—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features relating to flow patterns
- B01D15/1814—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features relating to flow patterns recycling of the fraction to be distributed
- B01D15/1821—Simulated moving beds
- B01D15/185—Simulated moving beds characterized by the components to be separated
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Addition Polymer Or Copolymer, Post-Treatments, Or Chemical Modifications (AREA)
Abstract
Description
ユビキノン−10の製造法としては、ユビキノン−10の含有率が高い微生物を培養して得られる培養物から抽出する方法、および合成法が知られている。
しかしながら、上記抽出法で得られる抽出液は、ユビキノン−10以外にユビキノン−10構造類似物質を多く含み、該抽出液から晶析法により直接、高純度のユビキノン−10を精製することは困難である。
しかしながら、シリカゲルまたは活性アルミナを用いた方法では、ユビキノン−10構造類似物質を多く含む該抽出液を用いた場合、ユビキノン−10を効率よく分離精製することはできない。さらに、シリカゲルおよび活性アルミナは高価であり、工業規模での製造においては、コスト高につながるという問題がある。またメタノールに対するユビキノン−10の溶解度は、5g/L以下と低いため、大量のメタノールを必要とする上記のメタノール抽出法は、環境の面から望ましい方法ではない。
(1)アクリル系多孔質架橋重合体を用いて、ユビキノン−10を含有する原料液中に含まれるユビキノン−10構造類似物を分離し、除去することを特徴とするユビキノン−10の精製方法。
(2)アクリル系多孔質架橋重合体が充填されている充填床内を溶液が一方向に循環しえる擬似移動床形式のクロマトグラフィー装置に、ユビキノン−10を含有する原料液を供給し、充填床内の溶離液を一方向に移動させることにより、該原料液中に含まれるユビキノン−10構造類似物を分離し、除去することを特徴とするユビキノン−10の精製方法。
(3)アクリル系多孔質架橋重合体が平均粒径10〜500μmの球状重合粒子である、上記(1)または(2)の方法。
(4)アクリル系多孔質架橋重合体がメタクリル酸エステルとエチレングリコールジメタクリレートの重合体である、上記(1)〜(3)のいずれか1つの方法。
(5)ユビキノン−10を含有する原料液がユビキノン−10を生産する能力を有する微生物の培養物の抽出物、またはユビキノン−10の粗精製物である、上記(1)〜(4)のいずれか1つの方法。
(6)ユビキノン−10構造類似物質が5−デメトキシユビキノン−10である、上記(1)〜(5)のいずれか1つの方法。
F:原料液の供給管
L:5−デメトキシユビキノン−10溶液の抜出管
A:ユビキノン−10溶液の抜出管
W1〜W4:バルブ
F1〜F4:バルブ
L1〜L4:バルブ
A1〜A4:バルブ
R1〜R4:逆止弁
本発明の方法で用いられるアクリル系多孔質架橋重合体としては、ユビキノン−10とユビキノン−10構造類似物に対して親和性が異なるアクリル系多孔質架橋重合体であれば特に制限はないが、好ましくは平均粒径が10〜500μm、好ましくは10〜200μm、より好ましくは10〜100μmの重合体をあげることができる。
2.ユビキノン−10を含有する原料液
ユビキノン−10を含有する原料液としては、ユビキノン−10とユビキノン−10構造類似物とを含む溶液であれば特に制限されないが、高速液体クロマトグラフィー(HPLC)で分析したとき、ユビキノン−10に対するユビキノン−10構造類似物の重量比が10%以下、好ましくは5%以下、より好ましくは3%以下、さらに好ましくは2%以下であるユビキノン−10を含有する原料液をあげることができる。HPLCの分析条件としては、以下の4に記載の条件をあげることができる。
ユビキノン−10を生産する能力を有する微生物の培養物は、ユビキノン−10を生産する能力を有する微生物を常法により培養することによって取得することができる。
上記の微生物を培養するための培地としては、該微生物が資化し得る炭素源、窒素源、無機塩類等を含有し、該微生物の培養を効率的に行える培地であれば天然培地、合成培地のいずれを用いてもよい。
窒素源としては、アンモニア、塩化アンモニウム、硫酸アンモニウム、酢酸アンモニウム、リン酸アンモニウム等の無機酸もしくは有機酸のアンモニウム塩、その他の含窒素化合物、ならびに、ペプトン、肉エキス、酵母エキス、コーンスチープリカー、カゼイン加水分解物、大豆粕および大豆粕加水分解物、各種発酵菌体およびその消化物等を用いることができる。
培養は、振盪培養または深部通気攪拌培養などの好気的条件下で行う。培養温度は15〜40℃がよく、培養時間は、通常16時間〜14日間である。培養中のpHは3.0〜9.0に保持することが好ましい。pHの調整は、無機または有機の酸、アルカリ溶液、尿素、炭酸カルシウム、アンモニアなどを用いて行う。
3.本発明のユビキノン−10の精製方法
(1)単塔式分離法
分離剤としてアクリル系多孔質架橋重合体を充填した充填床の上端からユビキノン−10を含有する原料液を供給し、次いで同じく上端から溶離液を供給して、原料液の各成分を相互に分離させると、充填床下部より、まず、分離剤に対して親和力の弱いユビキノン−10画分を取得でき、次に、ユビキノン−10よりも分離剤に対して親和力の強い5−デメトキシユビキノン−10等のユビキノン−10構造類似物の画分を取得することができる。
(2)擬似移動床式分離法
擬似移動床式分離法には、市販の擬似移床動式分離装置、および充填床の前端と後端とが溶液流路で連結されていて、装置内を溶液が循環し得るようになっている擬似移床動式分離装置であれば、いずれも用いることができる。
溶離液としては、ユビキノン−10とユビキノン−10構造類似物とを分離できる溶離液であればいかなるものであってもよく、親油性溶媒、親水性溶媒またはそれらの混合物をあげることができる。親油性溶媒としては、ヘキサン、ヘプタンなど、親水性溶媒としては、メタノール、エタノール、アセトンなど、親油性溶媒と親水性溶媒の混合物としては、上記した親油性溶媒と親水性溶媒の任意の組み合わせからなる混合物をあげることができる。
親油性溶媒と親水性溶媒の混合物における両者の混合比は、ユビキノン−10とユビキノン−10構造類似物を効率よく分離できる混合比であれば、いかなる比率であってもよいが、親油性溶媒と親水性溶媒の混合体積比としては、好ましくは1000:1〜1:1、より好ましくは500:1〜1:1、さらに好ましくは200:1〜2:1、特に好ましくは100:1〜2:1、最も好ましくは50:1〜10:1の比率をあげることができる。
溶離液の線速度としては、上記分離液を用いてユビキノン−10とユビキノン−10構造類似物を効率よく分離できる線速度であれば、いかなる速度であってもよいが、好ましくは0.5〜10.0m/h、より好ましくは0.7〜5.0m/h、さらに好ましくは1.0〜2.0m/hの速度をあげることができる。
4.本発明の方法で得られるユビキノン−10
本発明の方法で得られるユビキノン−10としては、以下のHPLC条件でユビキノン−10含有試料を分析したとき、該試料中に含まれる不純物としてのユビキノン−10構造類似物の重量%が、0.05%以下、好ましくは0.03%以下、より好ましくは0.02%以下であるユビキノン−10をあげることができる。
HPLC分析条件:
カラム:ZORBAX SIL 4.6mm I.D.×250mm(GL Science社製)
溶離液組成:シクロヘキサン:ジエチルエーテル=4:1
流速:0.5ml/min
温度:25℃
検出:UV275nm
以下、実施例により本発明を具体的に説明するが、本発明は実施例に限定されるものではない。
以下の表1記載の組成を有する培地をpH9.0に調整し、炭酸カルシウムを1%添加した後、121℃で10分間滅菌した1.8Lの培地を入れた3Lの発酵槽にユビキノン−10生産菌であるRhodobacter sphaeroides ATCC21286を植菌し、8日間、28℃、撹拌回転数450rpmで培養した。表中、トレースエレメントとは、88mg/lのテトラホウ酸ナトリウム(ホウ砂、Na2B4O7・10H2O)、37mg/lのモリブデン酸アンモニウム[(NH4)6Mo7O24・4H2O]、8.8mg/lの硫酸亜鉛(ZnSO4)、270mg/lの硫酸銅(CuSO4・5H2O)、7.2mg/lの塩化マンガン(MnCl2・4H2O)および970mg/lの塩化第2鉄(FeCl3・6H2O)からなる溶液を示す。
HPLC分析条件:
カラム:ZORBAX SIL 4.6mm I.D.×250mm(GL Science)
溶離液組成:シクロヘキサン:ジエチルエーテル=4:1
流速:0.5ml/min
温度:25℃
検出:UV275nm
擬似移動床分離装置には、内径20mm、充填層高250mmの4個の単位充填床から成っており、図1に示す配置に原料液の供給管F、溶離液の供給管W、ユビキノン−10溶液の抜出し管A、およびユビキノン−10構造類似物である5−デメトキシユビキノン−10溶液の抜出管Lを備えている小型クロマト分離装置Labo fine(日本錬水社製)を用いた。
上記した擬似移動床分離装置に、実施例1で得られたユビキノン−10を含有する原料液、およびヘキサン:エタノール=25:1の混合液である溶離液を25℃で供給し、ユビキノン−10溶液と5−デメトキシユビキノン−10溶液を抜出す11分間の供給−抜出しステップと、供給−抜出しを行わずに内部の溶液を循環的に移動させる15分間の循環ステップとからなる工程を、供給口及び抜出口を順次直下の単位充填床の対応する供給口及び抜出口に切替えつつ反復することにより行った。従って、工程を4回反復すると、元の状態に復帰する。供給−抜出しステップにおける原料液および溶離液の供給速度、並びに溶液の抜出し速度と、循環ステップにおける循環液の流速(循環ポンプの送液流速)はいずれも360ml/h(線速度1.15m/h)で行った。
Claims (6)
- アクリル系多孔質架橋重合体を用いて、ユビキノン−10を含有する原料液中に含まれるユビキノン−10構造類似物を分離し、除去することを特徴とするユビキノン−10の精製方法。
- アクリル系多孔質架橋重合体が充填されている充填床内を溶液が一方向に循環しえる擬似移動床形式のクロマトグラフィー装置に、ユビキノン−10を含有する原料液を供給し、充填床内の溶離液を一方向に移動させることにより、該原料液中に含まれるユビキノン−10構造類似物を分離し、除去することを特徴とするユビキノン−10の精製方法。
- アクリル系多孔質架橋重合体が平均粒径10〜500μmの球状重合粒子である、請求項1または2記載の方法。
- アクリル系多孔質架橋重合体がメタクリル酸エステルとエチレングリコールジメタクリレートの重合体である、請求項1〜3のいずれか1項に記載の方法。
- ユビキノン−10を含有する原料液がユビキノン−10を生産する能力を有する微生物の培養物の抽出物、またはユビキノン−10の粗精製物である、請求項1〜4のいずれか1項に記載の方法。
- ユビキノン−10構造類似物質が5−デメトキシユビキノン−10である、請求項1〜5のいずれか1項に記載の方法。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2005170939 | 2005-06-10 | ||
JP2005170939 | 2005-06-10 | ||
PCT/JP2006/311595 WO2006132348A1 (ja) | 2005-06-10 | 2006-06-09 | ユビキノン-10の精製方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPWO2006132348A1 true JPWO2006132348A1 (ja) | 2009-01-08 |
Family
ID=37498542
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2007520176A Abandoned JPWO2006132348A1 (ja) | 2005-06-10 | 2006-06-09 | ユビキノン−10の精製方法 |
Country Status (7)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20090036693A1 (ja) |
EP (1) | EP1918270A4 (ja) |
JP (1) | JPWO2006132348A1 (ja) |
KR (1) | KR20080017463A (ja) |
CN (1) | CN101233095A (ja) |
TW (1) | TW200722414A (ja) |
WO (1) | WO2006132348A1 (ja) |
Families Citing this family (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR101048032B1 (ko) * | 2009-10-15 | 2011-07-13 | 성신여자대학교 산학협력단 | 천연 Statin과 CoQ10 화합물이 강화된 약제학적 조성물 |
CN101987815B (zh) * | 2010-09-28 | 2013-06-12 | 华东理工大学 | 一种制备高纯度辅酶q10的纯化工艺 |
CN108017530B (zh) * | 2017-12-12 | 2020-10-13 | 浙江大学 | 一种从菌渣中连续分离辅酶q10的方法 |
CN108084007B (zh) * | 2017-12-12 | 2020-05-08 | 浙江大学 | 一种模拟移动床色谱分离辅酶q10和辅酶q11的方法 |
CN110465114B (zh) * | 2019-08-23 | 2021-08-20 | 内蒙古金达威药业有限公司 | 一种模拟移动床连续层析色谱系统及其应用以及纯化辅酶q10的方法 |
KR200496709Y1 (ko) | 2021-02-09 | 2023-04-06 | 조성찬 | 헤어롯드 |
CN112755589B (zh) * | 2021-02-23 | 2022-04-15 | 山东泰和水处理科技股份有限公司 | 精制辅酶q10的萃取方法及装置 |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS5251305A (en) * | 1975-10-20 | 1977-04-25 | Nisshin Flour Milling Co Ltd | Proces for purification of isoprene |
JPS62240643A (ja) * | 1986-04-11 | 1987-10-21 | Mitsubishi Gas Chem Co Inc | 補酵素qの精製方法 |
-
2006
- 2006-06-07 TW TW095120119A patent/TW200722414A/zh unknown
- 2006-06-09 KR KR1020087000651A patent/KR20080017463A/ko not_active Application Discontinuation
- 2006-06-09 JP JP2007520176A patent/JPWO2006132348A1/ja not_active Abandoned
- 2006-06-09 CN CNA2006800204854A patent/CN101233095A/zh active Pending
- 2006-06-09 EP EP06757218A patent/EP1918270A4/en not_active Withdrawn
- 2006-06-09 WO PCT/JP2006/311595 patent/WO2006132348A1/ja active Application Filing
- 2006-06-09 US US11/916,839 patent/US20090036693A1/en not_active Abandoned
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
TW200722414A (en) | 2007-06-16 |
CN101233095A (zh) | 2008-07-30 |
EP1918270A4 (en) | 2009-04-22 |
WO2006132348A1 (ja) | 2006-12-14 |
EP1918270A1 (en) | 2008-05-07 |
US20090036693A1 (en) | 2009-02-05 |
KR20080017463A (ko) | 2008-02-26 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JPWO2006132348A1 (ja) | ユビキノン−10の精製方法 | |
Freeman et al. | In situ product removal as a tool for bioprocessing | |
JP7101125B2 (ja) | ウロリチン類の製造方法 | |
WO2021036386A1 (zh) | 一种模拟移动床连续层析色谱系统及其应用以及纯化辅酶q10的方法 | |
CN109438220A (zh) | 一种从鱼油中纯化epa的方法 | |
Anic et al. | Foam adsorption as an ex situ capture step for surfactants produced by fermentation | |
Ke et al. | Separation and purification of pyrroloquinoline quinone from fermentation broth by pretreatment coupled with macroporous resin adsorption | |
JPWO2019130681A1 (ja) | ウロリチン類の製造方法 | |
WO2018155485A1 (ja) | 新規微生物、およびそれを用いたウロリチン類の製造方法 | |
JP4275621B2 (ja) | ユビキノン−10含有溶液の製造方法 | |
CN101012151B (zh) | 一种从发酵液中分离1,3-丙二醇的双水相萃取方法 | |
JP2024056920A (ja) | 6-ヒドロキシダイゼインの製造方法 | |
JP7389031B2 (ja) | 8-プレニルナリンゲニンの製造方法 | |
RU2583053C2 (ru) | Способ отделения триптофана | |
CN101638401B (zh) | 一种高纯度丹酚酸b的制备方法 | |
CN102690333B (zh) | 一种高纯度替考拉宁的制备方法 | |
JP2008017736A (ja) | カロテノイドの精製方法 | |
JP7211721B2 (ja) | 新規微生物及び該微生物を用いたウロリチン類の製造方法 | |
JP3911282B2 (ja) | ビタミンk2の回収方法 | |
JP7454958B2 (ja) | フラボノイド類の製造方法 | |
CN108315375A (zh) | 一种氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸的生产方法 | |
KR20040016338A (ko) | 케롭시럽으로부터 피니톨을 고수율로 회수하는 방법 | |
JPH05276962A (ja) | 抗生物質r106−iの製造法 | |
CN112358478A (zh) | 一种利用超分子溶剂萃取法分离纯化吡咯喹啉醌的方法 | |
JP2019180283A (ja) | ウロリチン類の製造方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A712 Effective date: 20081017 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20090521 |
|
RD02 | Notification of acceptance of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7422 Effective date: 20090615 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20090615 |
|
A762 | Written abandonment of application |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A762 Effective date: 20120203 |