JPWO2004090152A1 - ２−アルキルシステインアミド又はその塩、並びに、それらの製造方法及び用途 - Google Patents
２−アルキルシステインアミド又はその塩、並びに、それらの製造方法及び用途 Download PDFInfo
- Publication number
- JPWO2004090152A1 JPWO2004090152A1 JP2005505297A JP2005505297A JPWO2004090152A1 JP WO2004090152 A1 JPWO2004090152 A1 JP WO2004090152A1 JP 2005505297 A JP2005505297 A JP 2005505297A JP 2005505297 A JP2005505297 A JP 2005505297A JP WO2004090152 A1 JPWO2004090152 A1 JP WO2004090152A1
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- general formula
- amide
- cysteine
- salt
- represented
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C323/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups
- C07C323/50—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
- C07C323/51—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
- C07C323/60—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton with the carbon atom of at least one of the carboxyl groups bound to nitrogen atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C319/00—Preparation of thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides
- C07C319/02—Preparation of thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides of thiols
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C319/00—Preparation of thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides
- C07C319/02—Preparation of thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides of thiols
- C07C319/06—Preparation of thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides of thiols from sulfides, hydropolysulfides or polysulfides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
- C12P13/04—Alpha- or beta- amino acids
- C12P13/12—Methionine; Cysteine; Cystine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P41/00—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture
- C12P41/006—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by reactions involving C-N bonds, e.g. nitriles, amides, hydantoins, carbamates, lactames, transamination reactions, or keto group formation from racemic mixtures
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
- C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
- C07B2200/07—Optical isomers
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/863—Mycobacterium
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/91—Xanthomonas
Abstract
一般式（２）で示される４−アルキルチアゾリジン−４−カルボン酸アミド又はその塩を加水分解して一般式（１）で示される２−アルキルシステインアミド又はその塩を得る、２−アルキルシステインアミド又はその塩の製造方法。（一般式（１）中、Ｒは、炭素数１〜４の低級アルキル基を示す。）（一般式（２）中、Ｒは、炭素数１〜４の低級アルキル基を示し、Ｒ１及びＲ２は、各々独立に、水素若しくは炭素数１〜４の低級アルキル基、又は互いに結合して炭素数４〜７の脂環式構造をとる。但し、Ｒ１及びＲ２は両者が同時に水素であることはない。）一般式（１）の化合物を２−アルキル−Ｌ−システインアミドを立体選択的に加水分解する活性を有する微生物の菌体又は菌体処理物を作用させて、２−アルキル−Ｌ−システインを生成せしめる。
Description
本発明は、下記一般式（１）で示される２−アルキルシステインアミド又はその塩（以下、単に「２−アルキルシステインアミド」と記すことがある）、並びに、それらの製造方法及び用途に関する。詳しくは、下記一般式（２）で示される４−アルキルチアゾリジン−４−カルボン酸アミド又はその塩（以下、単に「４−アルキルチアゾリジン−４−カルボン酸アミド」と記すことがある）を加水分解して、下記一般式（１）で示される２−アルキルシステインアミドを製造する方法に関する。また、２−アルキルシステインアミドの、光学活性２−アルキルシステインの製造用原料としての用途に関する。
従来、下記一般式（２）で示される４−アルキルチアゾリジン−４−カルボン酸アミドの製法を記載した文献はあるが（例えば、Ｊｕｓｔｕｓ Ｌｉｅｂｉｇｓ Ａｎｎ．Ｃｈｅｍ．（１９６６），６９７，１４０−１５７参照）、ここから下記一般式（１）で示される２−アルキルシステインアミドを得る方法については記載されていない。また同文献中には５，５−ジメチルチアゾリジンカルボン酸アミドを濃塩酸中で操作してシステインアミド誘導体であるペニシルアミンアミドを得る手法が記載されているが、同手法を下記一般式（２）に示す４−アルキルチアゾリジンカルボン酸アミドに適用すると、加水分解反応が過剰に進行した２−アルキルシステインが大量に副生してしまい、しかも目的とする下記一般式（１）で示される２−アルキルシステインアミドと性状が類似しているため分離精製が困難となり好ましくない。
また、従来、光学活性２−アルキル−Ｌ−システインの製造方法として、例えば、光学活性なＬ−システインメチルエステルを出発原料として、ピバルアルデヒドで環化、ホルムアルデヒドで保護し、リチウム試薬とヨウ化メチルでメチル化した後、塩酸で開環、脱保護して２−メチル−Ｌ−システインを塩酸塩として得る方法がある（例えば、米国特許６，４０３，８３０号明細書参照）。しかしながら、この方法は光学活性体を出発原料とする必要があり、工程数が多く煩雑であり、しかも高価な試薬を必要とするため、工業的に優れた方法とは言いがたい。
下記一般式（１）で示される２−アルキルシステインアミドを微生物が有する酵素を利用して不斉加水分解し、下記一般式（２）で示される光学活性２−アルキル−Ｌ−システインを製造する方法は、報告されていない。
また、従来、光学活性２−アルキル−Ｌ−システインの製造方法として、例えば、光学活性なＬ−システインメチルエステルを出発原料として、ピバルアルデヒドで環化、ホルムアルデヒドで保護し、リチウム試薬とヨウ化メチルでメチル化した後、塩酸で開環、脱保護して２−メチル−Ｌ−システインを塩酸塩として得る方法がある（例えば、米国特許６，４０３，８３０号明細書参照）。しかしながら、この方法は光学活性体を出発原料とする必要があり、工程数が多く煩雑であり、しかも高価な試薬を必要とするため、工業的に優れた方法とは言いがたい。
下記一般式（１）で示される２−アルキルシステインアミドを微生物が有する酵素を利用して不斉加水分解し、下記一般式（２）で示される光学活性２−アルキル−Ｌ−システインを製造する方法は、報告されていない。
本発明の目的は、従来技術における上記のような課題を解決し、光学活性な医薬品、農薬、各種工業薬品の製造中間体として有用な、光学活性２−アルキル−Ｌ−システインを少ない工程数で安価に製造する方法を提供することにある。
本発明者らは上記問題を解決すべく鋭意研究を行い、下記一般式（１）で示される２−アルキルシステインアミド又はその塩を提供することにより、上記目的が解消されることを見出し、本発明を完成するに至った。
したがって、本発明の一局面によれば、下記一般式（１）で示される２−アルキルシステインアミド又はその塩が提供される。
（一般式（１）中、Ｒは、炭素数１〜４の低級アルキル基を示す。）
一般式（１）で示される２−アルキルシステインアミドは、分子内にメルカプト基、アミノ基及びカルボキシルアミド基を有し、医薬品、農薬、及び各種工業薬品の製造原料として広範な活用が期待される化合物であり、産業上、非常に有用で新規な化合物である。
また、一般式（１）で示される２−アルキルシステインアミドは、下記一般式（２）で示される４−アルキルチアゾリジン−４−カルボン酸アミドを用いると、チアゾリジン環のＣ−Ｎ結合が選択的に加水分解され、高い収率で製造できる。
したがって、本発明の他の局面によれば、下記一般式（２）で示される４−アルキルチアゾリジン−４−カルボン酸アミド又はその塩を加水分解して一般式（１）で示される２−アルキルシステインアミド又はその塩を得る、２−アルキルシステインアミド又はその塩の製造方法が提供される。なおその際に、Ｒがメチル基である４−メチルチアゾリジン−４−カルボン酸アミド又はその塩を用いれば、次の酵素反応において有利に使用できる２−メチルシステインアミド又はその塩を効率良く製造することができる。
（一般式（１）中、Ｒは、炭素数１〜４の低級アルキル基を示す。）
（一般式（２）中、Ｒは、炭素数１〜４の低級アルキル基を示し、Ｒ１及びＲ２は、各々独立に、水素若しくは炭素数１〜４の低級アルキル基、又は互いに結合して炭素数４〜７の脂環式構造をとる。但し、Ｒ１及びＲ２は両者が同時に水素であることはない。）
上記製造方法において、原料として使用される一般式（２）の４−アルキルチアゾリジン−４−カルボン酸アミド又はその塩として、その水溶液を用いることが好ましく、その無機酸塩水溶液を用いることがさらに好ましい。
また、一般式（１）で示される２−アルキルシステインアミドに２−アルキル−Ｌ−システインアミドを立体選択的に加水分解する活性を有する微生物の菌体又は菌体処理物を作用させて生化学的に不斉加水分解すれば、同様に医薬品、農薬、及び各種工業薬品の製造中間体として有用な光学活性２−アルキル−Ｌ−システインへ誘導することも可能である。
したがって、本発明のさらに他の局面によれば、一般式（１）で示される２−アルキルシステインアミドに、２−アルキル−Ｌ−システインアミドを立体選択的に加水分解する活性を有する微生物の菌体又は菌体処理物を作用させて、一般式（１−Ｌ）で示される２−アルキル−Ｌ−システインを生成せしめることを特徴とする、光学活性２−アルキル−Ｌ−システインの製造方法が提供される。
（一般式（１）中、Ｒは、炭素数１〜４の低級アルキル基を示す。）
（一般式（１−Ｌ）中、Ｒは、炭素数１〜４の低級アルキル基を示す。）
この製造方法によれば、少ない工程数で安価に光学活性２−アルキル−Ｌ−システインを製造できる。
この製造方法において、２−アルキル−Ｌ−システインアミドを立体選択的に加水分解する活性を有する微生物としては、プロタミノバクター属、ミコプラナ属又はキサントバクター属に属する細菌が好ましい。
また、この製造方法において、微生物の菌体又は菌体処理物を作用させて行なう立体選択的な加水分解は、不活性ガス気流下及び／又は還元物質の共存下で行なうことが好ましい。
この製造方法では、一般式（１）及び（１−Ｌ）の化合物として、Ｒがメチル基であるものを用いると有利である。
本発明者らは上記問題を解決すべく鋭意研究を行い、下記一般式（１）で示される２−アルキルシステインアミド又はその塩を提供することにより、上記目的が解消されることを見出し、本発明を完成するに至った。
したがって、本発明の一局面によれば、下記一般式（１）で示される２−アルキルシステインアミド又はその塩が提供される。
一般式（１）で示される２−アルキルシステインアミドは、分子内にメルカプト基、アミノ基及びカルボキシルアミド基を有し、医薬品、農薬、及び各種工業薬品の製造原料として広範な活用が期待される化合物であり、産業上、非常に有用で新規な化合物である。
また、一般式（１）で示される２−アルキルシステインアミドは、下記一般式（２）で示される４−アルキルチアゾリジン−４−カルボン酸アミドを用いると、チアゾリジン環のＣ−Ｎ結合が選択的に加水分解され、高い収率で製造できる。
したがって、本発明の他の局面によれば、下記一般式（２）で示される４−アルキルチアゾリジン−４−カルボン酸アミド又はその塩を加水分解して一般式（１）で示される２−アルキルシステインアミド又はその塩を得る、２−アルキルシステインアミド又はその塩の製造方法が提供される。なおその際に、Ｒがメチル基である４−メチルチアゾリジン−４−カルボン酸アミド又はその塩を用いれば、次の酵素反応において有利に使用できる２−メチルシステインアミド又はその塩を効率良く製造することができる。
上記製造方法において、原料として使用される一般式（２）の４−アルキルチアゾリジン−４−カルボン酸アミド又はその塩として、その水溶液を用いることが好ましく、その無機酸塩水溶液を用いることがさらに好ましい。
また、一般式（１）で示される２−アルキルシステインアミドに２−アルキル−Ｌ−システインアミドを立体選択的に加水分解する活性を有する微生物の菌体又は菌体処理物を作用させて生化学的に不斉加水分解すれば、同様に医薬品、農薬、及び各種工業薬品の製造中間体として有用な光学活性２−アルキル−Ｌ−システインへ誘導することも可能である。
したがって、本発明のさらに他の局面によれば、一般式（１）で示される２−アルキルシステインアミドに、２−アルキル−Ｌ−システインアミドを立体選択的に加水分解する活性を有する微生物の菌体又は菌体処理物を作用させて、一般式（１−Ｌ）で示される２−アルキル−Ｌ−システインを生成せしめることを特徴とする、光学活性２−アルキル−Ｌ−システインの製造方法が提供される。
この製造方法によれば、少ない工程数で安価に光学活性２−アルキル−Ｌ−システインを製造できる。
この製造方法において、２−アルキル−Ｌ−システインアミドを立体選択的に加水分解する活性を有する微生物としては、プロタミノバクター属、ミコプラナ属又はキサントバクター属に属する細菌が好ましい。
また、この製造方法において、微生物の菌体又は菌体処理物を作用させて行なう立体選択的な加水分解は、不活性ガス気流下及び／又は還元物質の共存下で行なうことが好ましい。
この製造方法では、一般式（１）及び（１−Ｌ）の化合物として、Ｒがメチル基であるものを用いると有利である。
以下、本発明の実施の形態について詳しく説明する。
本発明の一般式（１）で示される２−アルキルシステインアミド又はその塩において、式中のＲは、メチル基を含む炭素数１〜４の低級アルキル基であればよく、特に制限はなく、例えば、メチル基の他、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチルなどの直鎖又は分枝した低級アルキル基が好適であり、メチル基が特に好適である。また、一般式（１）の化合物は遊離物の他、塩を形成することもできる。塩の種類は、実用上許容できる塩であれば特に制限はないが、例えば塩酸や硫酸等の無機酸、ギ酸や酢酸等の有機酸との塩が挙げられる。得られる２−アルキルシステインアミド又はその塩の安定性という意味で特に塩酸塩又は硫酸塩が好適である。
本発明の一般式（１）で示される化合物の製造原料である一般式（２）で示される４−アルキルチアゾリジン−４−カルボン酸アミド又はその塩は、論文Ｊｕｓｔｕｓ Ｌｉｅｂｉｇｓ Ａｎｎ．Ｃｈｅｍ．（１９６６），６９７，１４０−１５７に記載の方法等を用いることによって、以下のようにして製造することができる。
１）下記の式（３）で示されるハロゲン化メチルアルキルケトン（Ｘはハロゲン化メチル基を表す）と式（４）で示されるカルボニル化合物又はそのアセタール（ケタール）を水硫化ナトリウム及びアンモニアと反応させ、式（５）で示すチアゾリン化合物となす。
２）得られた式（５）で示されるチアゾリンにＨＣＮを付加して式（６）で示されるニトリルとなす。
３）式（６）で示されるニトリルを酸触媒を用いて加水分解して、一般式（２）の４−アルキルチアゾリジン−４−カルボン酸アミド又はその塩が得られる（式（２’）としてその塩を特に示した）。
一般式（１）で示される２−アルキルシステインアミド又はその塩は、一般式（２）で示される４−アルキルチアゾリジン−４−カルボン酸アミド又はその塩を部分的に加水分解することにより製造することができる。一般式（２）の４−アルキルチアゾリジン−４−カルボン酸アミド又はその塩を、純水又は当量以上の水を含む極性有機溶媒に溶かして加熱すると加水分解的開環反応が進行する。この加水分解反応は酸触媒で加速させることができるが、過剰の酸が存在した場合、一般式（１）で示される２−アルキルシステインアミドが更に加水分解された２−アルキルシステインが大量に副生してしまうことから好ましくない。そのため用いられる酸触媒の量は、好ましくは一般式（２）のチアゾリジンカルボン酸アミドの０．５から１．３倍当量、更に好ましくは０．８から１．１倍当量、最も好適には１倍当量である。また式（２’）で示されるチアゾリジンカルボン酸アミドと酸からなる中性塩を単離精製し、純水、又は当量以上の水を含む極性有機溶媒中で加熱還流することでも好適に目的とする一般式（１）の２−アルキルシステインアミドを得ることができる。
触媒に用いられる酸としては、一般的に用いられる酸であれば特に限定はされず、塩酸、硫酸、リン酸等の無機酸や、ギ酸、酢酸等の有機酸等を用いることができるが、反応速度や精製時の操作の便の良さから、塩酸、硫酸等の無機酸が好適に用いられる。この際、加水分解することによって式（４）に示すカルボニル化合物が脱離してくるが、留去等の操作を行うことによってこのカルボニル化合物を系外に抜き出しながら反応を行なうとさらに効率よく反応を進行させることができる。反応は定量的に進み、脱離した式（４）に示すカルボニル化合物と反応溶媒を除去するだけで、目的とする一般式（１）に示す２−アルキルシステインアミド又はその塩が高収率かつ高純度で得られる。
本発明の一般式（１）で示される２−アルキルシステインアミドの生化学的不斉加水分解に使用される微生物は、目的の２−アルキル−Ｌ−システインに対応する２−アルキル−Ｌ−システインアミドを立体選択的に加水分解する活性を有する微生物であればよく、このような微生物として、例えば、プロタミノバクター属、ミコプラナ属又はキサントバクター属等に属する微生物、具体的にはプロタミノバクター アルボフラバス（Ｐｒｏｔａｍｉｎｏｂａｃｔｅｒ ａｌｂｏｆｌａｖｕｓ）ＡＴＣＣ８４５８、ミコプラナ ラモサ（Ｍｙｃｏｐｌａｎａ ｒａｍｏｓｅ）ＮＣＩＢ９４４０、ミコプラナ ディモルファ（Ｍｙｃｏｐｌａｎａ ｄｉｍｏｒｐｈａ）ＡＴＣＣ４２７９、キサントバクター オートトロフィカス（Ｘａｎｔｈｏｂａｃｔｅｒ ａｕｔｏｔｒｏｐｈｉｃｕｓ）ＤＳＭ５９７、キサントバクター フラバス（Ｘａｎｔｈｏｂａｃｔｅｒ ｆｌａｖｕｓ）ＮＣＩＢ１００７１が挙げられるが、これらに限定されるものではない。また、これら微生物から人工的変異手段によって誘導される変異株、又は細胞融合若しくは遺伝子組換え法等の遺伝学的手法により誘導される組換え株等の何れの株であっても上記能力を有するものであれば、本発明に使用できる。
これらの微生物の培養は、通常資化し得る炭素源、窒素源、各微生物に必須の無機塩、栄養等を含有させた培地を用いて行われる。培養時のｐＨは４〜１０の範囲が好ましく、温度は２０〜５０℃が好ましい。培養は１日〜１週間程度好気的に行われる。このようにして培養した微生物は、生菌体又は該生菌体処理物、例えば培養液、分離菌体、菌体破砕物、さらには精製した酵素として反応に使用される。また、常法に従って菌体又は酵素を固定化して使用することもできる。
２−アルキルシステインアミドの生化学的不斉加水分解反応の条件は、２−アルキルシステインアミド濃度０．１〜４０ｗｔ％、２−アルキルシステインアミドに対する微生物の使用量は、乾燥菌体として重量比０．０００１〜３、反応温度１０〜７０℃、ｐＨ４〜１３の範囲が好ましい。
反応原料である２−アルキルシステインアミド、及び生成物である２−アルキルシステインは酸化を受けやすく、酸素存在下で放置すると２量化したジスルフィド（２，２’−ジアルキルシスチン）となる。これを防止するため、生化学的不斉加水分解反応は遊離の酸素や酸素供与体を排除した雰囲気下で行なうことが望ましく、例えば、窒素、アルゴン等の不活性ガス気流下、或いは反応系内に２−メルカプトエタノール等の酸素受容体となる還元性物質を共存させた条件下で行うことが好ましい。
２−アルキルシステインアミドの生化学的不斉加水分解反応で生成した光学活性２−アルキル−Ｌ−システインは、反応終了液から、例えば遠心分離或いは濾過膜などの通常の固液分離手段により微生物菌体を除いた母液をｐＨ４〜７に調整して濃縮した後、冷却して晶析する結晶を濾別することによって得ることができる。また必要に応じて、母液に活性炭等の吸着剤を加え処理した後に濃縮したり、母液の濃縮物に水溶性有機溶媒、例えばメタノール、エタノール、プロパノール等のアルコール類、アセトン等のケトン類、テトラヒドロフランやジオキサン等のエーテル類、又はこれらを組み合わせた混合溶媒、さらには水を含むこれらの混合溶媒等を加えて再溶解した後、冷却し晶析することによっても好適に２−アルキルシステインを得ることができる。
以上のようにして、例えば２−メチル−Ｌ−システイン、２−エチル−Ｌ−システイン等の光学活性２−アルキル−Ｌ−システインを製造することができる。
本発明の一般式（１）で示される２−アルキルシステインアミド又はその塩において、式中のＲは、メチル基を含む炭素数１〜４の低級アルキル基であればよく、特に制限はなく、例えば、メチル基の他、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチルなどの直鎖又は分枝した低級アルキル基が好適であり、メチル基が特に好適である。また、一般式（１）の化合物は遊離物の他、塩を形成することもできる。塩の種類は、実用上許容できる塩であれば特に制限はないが、例えば塩酸や硫酸等の無機酸、ギ酸や酢酸等の有機酸との塩が挙げられる。得られる２−アルキルシステインアミド又はその塩の安定性という意味で特に塩酸塩又は硫酸塩が好適である。
本発明の一般式（１）で示される化合物の製造原料である一般式（２）で示される４−アルキルチアゾリジン−４−カルボン酸アミド又はその塩は、論文Ｊｕｓｔｕｓ Ｌｉｅｂｉｇｓ Ａｎｎ．Ｃｈｅｍ．（１９６６），６９７，１４０−１５７に記載の方法等を用いることによって、以下のようにして製造することができる。
１）下記の式（３）で示されるハロゲン化メチルアルキルケトン（Ｘはハロゲン化メチル基を表す）と式（４）で示されるカルボニル化合物又はそのアセタール（ケタール）を水硫化ナトリウム及びアンモニアと反応させ、式（５）で示すチアゾリン化合物となす。
２）得られた式（５）で示されるチアゾリンにＨＣＮを付加して式（６）で示されるニトリルとなす。
３）式（６）で示されるニトリルを酸触媒を用いて加水分解して、一般式（２）の４−アルキルチアゾリジン−４−カルボン酸アミド又はその塩が得られる（式（２’）としてその塩を特に示した）。
触媒に用いられる酸としては、一般的に用いられる酸であれば特に限定はされず、塩酸、硫酸、リン酸等の無機酸や、ギ酸、酢酸等の有機酸等を用いることができるが、反応速度や精製時の操作の便の良さから、塩酸、硫酸等の無機酸が好適に用いられる。この際、加水分解することによって式（４）に示すカルボニル化合物が脱離してくるが、留去等の操作を行うことによってこのカルボニル化合物を系外に抜き出しながら反応を行なうとさらに効率よく反応を進行させることができる。反応は定量的に進み、脱離した式（４）に示すカルボニル化合物と反応溶媒を除去するだけで、目的とする一般式（１）に示す２−アルキルシステインアミド又はその塩が高収率かつ高純度で得られる。
本発明の一般式（１）で示される２−アルキルシステインアミドの生化学的不斉加水分解に使用される微生物は、目的の２−アルキル−Ｌ−システインに対応する２−アルキル−Ｌ−システインアミドを立体選択的に加水分解する活性を有する微生物であればよく、このような微生物として、例えば、プロタミノバクター属、ミコプラナ属又はキサントバクター属等に属する微生物、具体的にはプロタミノバクター アルボフラバス（Ｐｒｏｔａｍｉｎｏｂａｃｔｅｒ ａｌｂｏｆｌａｖｕｓ）ＡＴＣＣ８４５８、ミコプラナ ラモサ（Ｍｙｃｏｐｌａｎａ ｒａｍｏｓｅ）ＮＣＩＢ９４４０、ミコプラナ ディモルファ（Ｍｙｃｏｐｌａｎａ ｄｉｍｏｒｐｈａ）ＡＴＣＣ４２７９、キサントバクター オートトロフィカス（Ｘａｎｔｈｏｂａｃｔｅｒ ａｕｔｏｔｒｏｐｈｉｃｕｓ）ＤＳＭ５９７、キサントバクター フラバス（Ｘａｎｔｈｏｂａｃｔｅｒ ｆｌａｖｕｓ）ＮＣＩＢ１００７１が挙げられるが、これらに限定されるものではない。また、これら微生物から人工的変異手段によって誘導される変異株、又は細胞融合若しくは遺伝子組換え法等の遺伝学的手法により誘導される組換え株等の何れの株であっても上記能力を有するものであれば、本発明に使用できる。
これらの微生物の培養は、通常資化し得る炭素源、窒素源、各微生物に必須の無機塩、栄養等を含有させた培地を用いて行われる。培養時のｐＨは４〜１０の範囲が好ましく、温度は２０〜５０℃が好ましい。培養は１日〜１週間程度好気的に行われる。このようにして培養した微生物は、生菌体又は該生菌体処理物、例えば培養液、分離菌体、菌体破砕物、さらには精製した酵素として反応に使用される。また、常法に従って菌体又は酵素を固定化して使用することもできる。
２−アルキルシステインアミドの生化学的不斉加水分解反応の条件は、２−アルキルシステインアミド濃度０．１〜４０ｗｔ％、２−アルキルシステインアミドに対する微生物の使用量は、乾燥菌体として重量比０．０００１〜３、反応温度１０〜７０℃、ｐＨ４〜１３の範囲が好ましい。
反応原料である２−アルキルシステインアミド、及び生成物である２−アルキルシステインは酸化を受けやすく、酸素存在下で放置すると２量化したジスルフィド（２，２’−ジアルキルシスチン）となる。これを防止するため、生化学的不斉加水分解反応は遊離の酸素や酸素供与体を排除した雰囲気下で行なうことが望ましく、例えば、窒素、アルゴン等の不活性ガス気流下、或いは反応系内に２−メルカプトエタノール等の酸素受容体となる還元性物質を共存させた条件下で行うことが好ましい。
２−アルキルシステインアミドの生化学的不斉加水分解反応で生成した光学活性２−アルキル−Ｌ−システインは、反応終了液から、例えば遠心分離或いは濾過膜などの通常の固液分離手段により微生物菌体を除いた母液をｐＨ４〜７に調整して濃縮した後、冷却して晶析する結晶を濾別することによって得ることができる。また必要に応じて、母液に活性炭等の吸着剤を加え処理した後に濃縮したり、母液の濃縮物に水溶性有機溶媒、例えばメタノール、エタノール、プロパノール等のアルコール類、アセトン等のケトン類、テトラヒドロフランやジオキサン等のエーテル類、又はこれらを組み合わせた混合溶媒、さらには水を含むこれらの混合溶媒等を加えて再溶解した後、冷却し晶析することによっても好適に２−アルキルシステインを得ることができる。
以上のようにして、例えば２−メチル−Ｌ−システイン、２−エチル−Ｌ−システイン等の光学活性２−アルキル−Ｌ−システインを製造することができる。
以下、実施例を挙げて本発明について更に詳細に説明するが、本発明はこれらの例よって限定されるものではない。
１）２，２，４−トリメチルチアゾリンの調製
水硫化ナトリウム（純度７０％）２５０ｇを５００ｍＬの水に溶かし、これを攪拌しながら氷浴にて５℃に冷却し、ここにクロロアセトン２７８ｇをゆっくりと滴下した。滴下終了後、水浴にて室温に戻し、アセトン２６１ｇを添加し、続いて塩化メチレン８００ｍＬを添加した。内温が３０℃を越えないように水浴で調節しながら、２５％アンモニア水６１６ｇをゆっくりと滴下した。滴下終了後４時間攪拌した後、反応液を分液して有機層を飽和食塩水で１回、純水で２回洗浄した後、無水硫酸ナトリウムを加えて３時間攪拌して脱水乾燥させた。固形物を濾別した後、濾液を減圧蒸留して２，２，４−トリメチルチアゾリン ２９０ｇ（７４．８ｍｏｌ％）を得た。
２）２，２，４−トリメチル−４−シアノチアゾリジンの調製
２，２，４−トリメチルチアゾリン３１７ｇをジエチルエーテル ５００ｍＬに溶解し、これを１５℃に調節した。この溶液を攪拌しながら、２０℃を越えないように調節しながら青酸ガス１３２．７ｇをゆっくりとバブリングした。青酸ガス吹込み後３時間、２０℃に調節しながら攪拌を継続した。反応液をアスピレータで減圧にしてジエチルエーテルを留去し、白色固体を得た。得られた白色固体を、ジエチルエーテル／ヘキサン＝８００／３５０ｍＬの混合溶媒に溶解し、この溶液を−５０℃に冷却して析出した結晶を濾別し、更に濾液を濃縮して析出した結晶を濾別し、併せて３８４ｇ（８３ｍｏｌ％）の２，２，４−トリメチル−４−シアノチアゾリジンを得た。
３）２，２，４−トリメチルチアゾリジン−４−カルボン酸アミド及びその塩酸塩の調 製
濃塩酸（３６％）１９２４ｇを２０℃以下に調節しながら攪拌し、ここに２，２，４−トリメチル−４−シアノチアゾリジン２５８ｇをゆっくりと加え、２５℃に上げて１３時間攪拌した。析出した結晶を濾別し、ジエチルエーテルで洗浄、減圧乾燥して２，２，４−トリメチルチアゾリジン−４−カルボン酸アミド塩酸塩９７ｇ（４６ｍｏｌ％）を得た。さらに結晶濾別後の濾液を氷浴で冷却し、これを攪拌しながら、２５％アンモニア水１２２８ｇをゆっくりと滴下し、析出した結晶を濾別後、純水８００ｍＬで洗浄し、２，２，４−トリメチルチアゾリジン−４−カルボン酸アミド ６７ｇ（３８ｍｏｌ％）を得た。
４）２−メチルシステインアミド塩酸塩の調製
上記のようにして得られた２，２，４−トリメチルチアゾリジン−４−カルボン酸アミド塩酸塩９０ｇを純水１Ｌに溶解し、蒸留塔を設けた容器にて１０５℃のオイルバスで加熱し、ゆっくりと蒸留塔上部より留出分を除去しながら３時間反応させた後、反応液を濃縮、減圧乾燥して、２−メチルシステインアミド塩酸塩７７ｇ（９６ｍｏｌ％）を無色のガラス状固体として得た。
５）２−メチルシステインアミド塩酸塩の分析結果
得られた２−メチルシステインアミド塩酸塩の性状に関する分析結果を以下に示す。
２−メチルシステインアミド塩酸塩；無色ガラス状固体（潮解性）
１Ｈ−ＮＭＲ（９０ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ［ｐｐｍ］３．１９（１Ｈ，ｄ，Ｊ１５．３Ｈｚ），２．９５（１Ｈ，ｄ，Ｊ１５．３Ｈｚ），１．６４（３Ｈ，ｓ）
１３Ｃ−ＮＭＲ（２２．６ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ［ｐｐｍ］１７３．７８（ｓ），６２．３１（ｓ），３１．７３（ｔ），２２．２１（ｑ）
ＩＲ［ｃｍ−１］（ＫＢｒ）１７０３，１６２４，１５７４，１５０６，１３７７，１２７９，１２３０，１１２４
元素分析（測定値）Ｃ；２８．０１，Ｈ；６．６０，Ｎ；１６．３３，Ｓ；；１８．７２，Ｃｌ；２０．７５，（計算値）Ｃ；２８．１５，Ｈ；６．５０，Ｎ；１６．４１，Ｏ；９．３７，Ｓ；１８．７９，Ｃｌ；２０．７７
水硫化ナトリウム（純度７０％）２５０ｇを５００ｍＬの水に溶かし、これを攪拌しながら氷浴にて５℃に冷却し、ここにクロロアセトン２７８ｇをゆっくりと滴下した。滴下終了後、水浴にて室温に戻し、アセトン２６１ｇを添加し、続いて塩化メチレン８００ｍＬを添加した。内温が３０℃を越えないように水浴で調節しながら、２５％アンモニア水６１６ｇをゆっくりと滴下した。滴下終了後４時間攪拌した後、反応液を分液して有機層を飽和食塩水で１回、純水で２回洗浄した後、無水硫酸ナトリウムを加えて３時間攪拌して脱水乾燥させた。固形物を濾別した後、濾液を減圧蒸留して２，２，４−トリメチルチアゾリン ２９０ｇ（７４．８ｍｏｌ％）を得た。
２）２，２，４−トリメチル−４−シアノチアゾリジンの調製
２，２，４−トリメチルチアゾリン３１７ｇをジエチルエーテル ５００ｍＬに溶解し、これを１５℃に調節した。この溶液を攪拌しながら、２０℃を越えないように調節しながら青酸ガス１３２．７ｇをゆっくりとバブリングした。青酸ガス吹込み後３時間、２０℃に調節しながら攪拌を継続した。反応液をアスピレータで減圧にしてジエチルエーテルを留去し、白色固体を得た。得られた白色固体を、ジエチルエーテル／ヘキサン＝８００／３５０ｍＬの混合溶媒に溶解し、この溶液を−５０℃に冷却して析出した結晶を濾別し、更に濾液を濃縮して析出した結晶を濾別し、併せて３８４ｇ（８３ｍｏｌ％）の２，２，４−トリメチル−４−シアノチアゾリジンを得た。
３）２，２，４−トリメチルチアゾリジン−４−カルボン酸アミド及びその塩酸塩の調 製
濃塩酸（３６％）１９２４ｇを２０℃以下に調節しながら攪拌し、ここに２，２，４−トリメチル−４−シアノチアゾリジン２５８ｇをゆっくりと加え、２５℃に上げて１３時間攪拌した。析出した結晶を濾別し、ジエチルエーテルで洗浄、減圧乾燥して２，２，４−トリメチルチアゾリジン−４−カルボン酸アミド塩酸塩９７ｇ（４６ｍｏｌ％）を得た。さらに結晶濾別後の濾液を氷浴で冷却し、これを攪拌しながら、２５％アンモニア水１２２８ｇをゆっくりと滴下し、析出した結晶を濾別後、純水８００ｍＬで洗浄し、２，２，４−トリメチルチアゾリジン−４−カルボン酸アミド ６７ｇ（３８ｍｏｌ％）を得た。
４）２−メチルシステインアミド塩酸塩の調製
上記のようにして得られた２，２，４−トリメチルチアゾリジン−４−カルボン酸アミド塩酸塩９０ｇを純水１Ｌに溶解し、蒸留塔を設けた容器にて１０５℃のオイルバスで加熱し、ゆっくりと蒸留塔上部より留出分を除去しながら３時間反応させた後、反応液を濃縮、減圧乾燥して、２−メチルシステインアミド塩酸塩７７ｇ（９６ｍｏｌ％）を無色のガラス状固体として得た。
５）２−メチルシステインアミド塩酸塩の分析結果
得られた２−メチルシステインアミド塩酸塩の性状に関する分析結果を以下に示す。
２−メチルシステインアミド塩酸塩；無色ガラス状固体（潮解性）
１Ｈ−ＮＭＲ（９０ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ［ｐｐｍ］３．１９（１Ｈ，ｄ，Ｊ１５．３Ｈｚ），２．９５（１Ｈ，ｄ，Ｊ１５．３Ｈｚ），１．６４（３Ｈ，ｓ）
１３Ｃ−ＮＭＲ（２２．６ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ［ｐｐｍ］１７３．７８（ｓ），６２．３１（ｓ），３１．７３（ｔ），２２．２１（ｑ）
ＩＲ［ｃｍ−１］（ＫＢｒ）１７０３，１６２４，１５７４，１５０６，１３７７，１２７９，１２３０，１１２４
元素分析（測定値）Ｃ；２８．０１，Ｈ；６．６０，Ｎ；１６．３３，Ｓ；；１８．７２，Ｃｌ；２０．７５，（計算値）Ｃ；２８．１５，Ｈ；６．５０，Ｎ；１６．４１，Ｏ；９．３７，Ｓ；１８．７９，Ｃｌ；２０．７７
次の組成を有する培地を調製し、この培地２００ｍＬを１Ｌの三角フラスコに入れ、滅菌後、キサントバクター フラバス（Ｘａｎｔｈｏｂａｃｔｅｒ ｆｌａｖｕｓ）ＮＣＩＢ１００７１を接種し、３０℃で４８時間振とう培養を行った。
培地組成（ｐＨ７．０）
グルコース １０ｇ
ポリペプトン ５ｇ
酵母エキス ５ｇ
ＫＨ２ＰＯ４ １ｇ
ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ ０．４ｇ
ＦｅＳＯ４・７Ｈ２Ｏ ０．０１ｇ
ＭｎＣｌ２・４Ｈ２Ｏ ０．０１ｇ
水 １Ｌ
次いで培養液から、遠心分離により、乾燥菌体１．０ｇに相当する生菌体を得た。実施例１で製造した２−メチルシステインアミド塩酸塩１０．０ｇ（０．０６ｍｏｌ）を５０ｍＭリン酸バッファー３００ｍＬに溶かした後、５００ｍＬフラスコに入れ、乾燥菌体１．０ｇに相当する生菌体を加えて、窒素気流下、３０℃で２４時間攪拌して加水分解反応を行った。
反応後、反応液から遠心分離によって菌体を除去して上清を得た。この上清液に脱気後に不活性ガス置換した活性炭２ｇを加えて２時間攪拌した後、活性炭を濾別してからエバポレーターで減圧にて水を留去し、白色ペースト状固体を得た。このペースト状濃縮物にイソプロパノール２０ｍＬを加えて加熱攪拌後、５℃にて一夜静置して析出した結晶を濾取した。濾取した結晶をエタノールより再結晶して２−メチル−Ｌ−システイン ２．６ｇ（０．０２ｍｏｌ）を得た。反応に仕込んだラセミ混合物中の２−メチル−Ｌ−システインアミドからの単離収率は７６ｍｏｌ％、２−メチル−Ｌ−システインアミドのラセミ混合物からの単離収率は３８ｍｏｌ％であった。また、この固体を光学異性体分離カラムを用いた液体クロマトグラフィーによって分析した結果、光学純度は９８％ｅ．ｅ．以上であった。
培地組成（ｐＨ７．０）
グルコース １０ｇ
ポリペプトン ５ｇ
酵母エキス ５ｇ
ＫＨ２ＰＯ４ １ｇ
ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ ０．４ｇ
ＦｅＳＯ４・７Ｈ２Ｏ ０．０１ｇ
ＭｎＣｌ２・４Ｈ２Ｏ ０．０１ｇ
水 １Ｌ
次いで培養液から、遠心分離により、乾燥菌体１．０ｇに相当する生菌体を得た。実施例１で製造した２−メチルシステインアミド塩酸塩１０．０ｇ（０．０６ｍｏｌ）を５０ｍＭリン酸バッファー３００ｍＬに溶かした後、５００ｍＬフラスコに入れ、乾燥菌体１．０ｇに相当する生菌体を加えて、窒素気流下、３０℃で２４時間攪拌して加水分解反応を行った。
反応後、反応液から遠心分離によって菌体を除去して上清を得た。この上清液に脱気後に不活性ガス置換した活性炭２ｇを加えて２時間攪拌した後、活性炭を濾別してからエバポレーターで減圧にて水を留去し、白色ペースト状固体を得た。このペースト状濃縮物にイソプロパノール２０ｍＬを加えて加熱攪拌後、５℃にて一夜静置して析出した結晶を濾取した。濾取した結晶をエタノールより再結晶して２−メチル−Ｌ−システイン ２．６ｇ（０．０２ｍｏｌ）を得た。反応に仕込んだラセミ混合物中の２−メチル−Ｌ−システインアミドからの単離収率は７６ｍｏｌ％、２−メチル−Ｌ−システインアミドのラセミ混合物からの単離収率は３８ｍｏｌ％であった。また、この固体を光学異性体分離カラムを用いた液体クロマトグラフィーによって分析した結果、光学純度は９８％ｅ．ｅ．以上であった。
実施例２と同様にして各種微生物を培養し、生菌体を得た。実施例２と同様の方法で、２−メチルシステインアミド１０ｇ（０．０６ｍｏｌ）を基質とし、各種微生物の生菌体を用いて酵素反応を行い、除菌した上清液を液体クロマトグラフィーで分析した。結果を表１に示す。なお、該上清液を光学異性体分離カラムを用いた液体クロマトグラフィーによって分析した結果、光学純度はいずれも９０％ｅ．ｅ．以上であった。
なお、表１に示した略号の詳細は以下の通りである。
収率▲１▼；ラセミ混合物の２−メチルシステインアミドを基準とした２−メチル−Ｌ−システインの収率（ｍｏｌ％）
収率▲２▼；ラセミ混合物中の２−メチル−Ｌ−システインアミドを基準とした２−メチル−Ｌ−システインの収率（ｍｏｌ％）
菌体１；プロタミノバクター アルボフラバス（Ｐｒｏｔａｍｉｎｏｂａｃｔｅｒ ａｌｂｏｆｌａｖｕｓ）ＡＴＣＣ８４５８
菌体２；ミコプラナ ラモサ（Ｍｙｃｏｐｌａｎａ ｒａｍｏｓｅ）ＮＣＩＢ９４４０、
菌体３；ミコプラナ ディモルファ（Ｍｙｃｏｐｌａｎａ ｄｉｍｏｒｐｈａ）ＡＴＣＣ４２７９
菌体４；キサントバクター オートトロフィカス（Ｘａｎｔｈｏｂａｃｔｅｒ ａｕｔｏｔｒｏｐｈｉｃｕｓ）ＤＳＭ５９７
なお、表１に示した略号の詳細は以下の通りである。
収率▲１▼；ラセミ混合物の２−メチルシステインアミドを基準とした２−メチル−Ｌ−システインの収率（ｍｏｌ％）
収率▲２▼；ラセミ混合物中の２−メチル−Ｌ−システインアミドを基準とした２−メチル−Ｌ−システインの収率（ｍｏｌ％）
菌体１；プロタミノバクター アルボフラバス（Ｐｒｏｔａｍｉｎｏｂａｃｔｅｒ ａｌｂｏｆｌａｖｕｓ）ＡＴＣＣ８４５８
菌体２；ミコプラナ ラモサ（Ｍｙｃｏｐｌａｎａ ｒａｍｏｓｅ）ＮＣＩＢ９４４０、
菌体３；ミコプラナ ディモルファ（Ｍｙｃｏｐｌａｎａ ｄｉｍｏｒｐｈａ）ＡＴＣＣ４２７９
菌体４；キサントバクター オートトロフィカス（Ｘａｎｔｈｏｂａｃｔｅｒ ａｕｔｏｔｒｏｐｈｉｃｕｓ）ＤＳＭ５９７
本発明によって製造される一般式（１）で示される２−アルキルシステインアミドは、医薬品、農薬、各種工業薬品の製造原料として広範な活用が期待され産業発展に大いに役立つ。また、一般式（１−Ｌ）で示される光学活性２−アルキル−Ｌ−システインの原料としても有用である。
ラセミ混合物である一般式（１）で示される２−メチルシステインアミドに２−アルキル−Ｌ−システインアミドを立体選択的な加水分解する活性を有する微生物の菌体又は菌体処理物を作用させて２−メチル−Ｌ−システインを製造する本発明の方法は、医薬品、農薬、各種工業薬品の製造中間体として非常に重要な光学活性２−アルキル−Ｌ−システインを少ない工程数で安価に製造することを可能とし、産業発展に大いに貢献する。
ラセミ混合物である一般式（１）で示される２−メチルシステインアミドに２−アルキル−Ｌ−システインアミドを立体選択的な加水分解する活性を有する微生物の菌体又は菌体処理物を作用させて２−メチル−Ｌ−システインを製造する本発明の方法は、医薬品、農薬、各種工業薬品の製造中間体として非常に重要な光学活性２−アルキル−Ｌ−システインを少ない工程数で安価に製造することを可能とし、産業発展に大いに貢献する。
Claims (7)
- 一般式（１）で示される２−アルキルシステインアミド又はその塩。
（一般式（１）中、Ｒは、炭素数１〜４の低級アルキル基を示す。） - 一般式（２）で示される４−アルキルチアゾリジン−４−カルボン酸アミド又はその塩を加水分解して一般式（１）で示される２−アルキルシステインアミド又はその塩を得る、２−アルキルシステインアミド又はその塩の製造方法。
（一般式（１）中、Ｒは、炭素数１〜４の低級アルキル基を示す。）
（一般式（２）中、Ｒは、炭素数１〜４の低級アルキル基を示し、Ｒ１及びＲ２は、各々独立に、水素若しくは炭素数１〜４の低級アルキル基、又は互いに結合して炭素数４〜７の脂環式構造をとる。但し、Ｒ１及びＲ２は両者が同時に水素であることはない。） - 一般式（２）で示される４−アルキルチアゾリジン−４−カルボン酸アミド又はその塩として、４−アルキルチアゾリジン−４−カルボン酸アミド又はその塩の水溶液を用いる、請求項２記載の２−アルキルシステインアミド又はその塩の製造方法。
- 一般式（１）で示される２−アルキルシステインアミドに、２−アルキル−Ｌ−システインアミドを立体選択的に加水分解する活性を有する微生物の菌体又は菌体処理物を作用させて、一般式（１−Ｌ）で示される２−アルキル−Ｌ−システインを生成せしめることを特徴とする、光学活性２−アルキル−Ｌ−システインの製造方法。
（一般式（１）中、Ｒは、炭素数１〜４の低級アルキル基を示す。）
（一般式（１−Ｌ）中、Ｒは、炭素数１〜４の低級アルキル基を示す。） - ２−アルキル−Ｌ−システインアミドを立体選択的に加水分解する活性を有する微生物が、プロタミノバクター属、ミコプラナ属又はキサントバクター属に属する細菌である、請求項４記載の光学活性２−アルキル−Ｌ−システインの製造方法。
- 微生物の菌体又は菌体処理物を作用させて行なう立体選択的な加水分解を、不活性ガス気流下及び／又は還元物質の共存下で行なう、請求項４又は５に記載の光学活性２−アルキル−Ｌ−システインの製造方法。
- 一般式（１）及び（１−Ｌ）において、Ｒがメチル基である、請求項４から６の何れか１項に記載の光学活性２−アルキル−Ｌ−システインの製造方法。
Applications Claiming Priority (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2003103898 | 2003-04-08 | ||
| JP2003103898 | 2003-04-08 | ||
| JP2003325057 | 2003-09-17 | ||
| JP2003325057 | 2003-09-17 | ||
| PCT/JP2004/004988 WO2004090152A1 (ja) | 2003-04-08 | 2004-04-07 | ２－アルキルシステインアミド又はその塩、並びに、それらの製造方法及び用途 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPWO2004090152A1 true JPWO2004090152A1 (ja) | 2006-07-06 |
| JP4577513B2 JP4577513B2 (ja) | 2010-11-10 |
Family
ID=33161529
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2005505297A Expired - Fee Related JP4577513B2 (ja) | 2003-04-08 | 2004-04-07 | ２−アルキルシステインアミド又はその塩、並びに、それらの製造方法及び用途 |
Country Status (5)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US7208631B2 (ja) |
| EP (1) | EP1634957B1 (ja) |
| JP (1) | JP4577513B2 (ja) |
| DE (1) | DE602004016994D1 (ja) |
| WO (1) | WO2004090152A1 (ja) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7470525B2 (en) | 2003-11-18 | 2008-12-30 | Mitsubishi Gas Chemical Company, Inc. | Process for producing optically active 2-alkycysteine, derivative thereof, and processes for production |
| EP1692120A1 (de) * | 2003-12-09 | 2006-08-23 | DSM Fine Chemicals Austria Nfg GmbH & Co KG | Verfahren zur herstellung von chiralen mercaptoaminos uren |
| US7432086B2 (en) | 2004-07-22 | 2008-10-07 | Mitsubishi Gas Chemical Company, Inc. | L-amino acid amide asymmetric hydrolase and DNA encoding the same |
| CN103596924A (zh) * | 2011-05-31 | 2014-02-19 | 株式会社Api | 光学活性的α-取代的脯氨酸的制造方法 |
| CN106432014B (zh) * | 2016-09-05 | 2019-08-16 | 中国医学科学院放射医学研究所 | 胺基硫醇类化合物及其制备方法和其在辐射防护中的应用 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5786335A (en) * | 1995-11-06 | 1998-07-28 | Warner-Lambert Company | Sulfhydryl containing peptides for treating vascular disease |
| WO2000021925A1 (fr) * | 1998-10-09 | 2000-04-20 | Ajinomoto Co., Inc. | Derives de la cysteine |
| JP2000169388A (ja) * | 1998-10-02 | 2000-06-20 | Santen Pharmaceut Co Ltd | 血管新生阻害剤 |
| JP2001525800A (ja) * | 1997-05-07 | 2001-12-11 | マックス−プランク ゲゼルシャフト ツァー フェルデルンク デア ビッセンシャフテン エー．ファウ．ベルリン | 新規のシステイン誘導体、その製造のための方法及びそれを含む医薬品 |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5714573A (en) * | 1980-06-27 | 1982-01-25 | Mitsubishi Chem Ind Ltd | S-ethylcysteinamide, its salt and their preparation |
| US4440788A (en) | 1980-05-13 | 1984-04-03 | Mitsubishi Chemical Industries, Limited | Cysteine derivatives |
| DE3334855A1 (de) * | 1983-09-27 | 1985-04-11 | Degussa Ag, 6000 Frankfurt | Verfahren zur enantioselektiven herstellung von (alpha)-alkylierten, acyclischen (alpha)-aminocarbonsaeuren |
| NZ542734A (en) * | 2000-03-24 | 2007-06-29 | Pharmacia Corp | Use of amidino compounds as nitric oxide synthase inhibitors for treating arthritis |
| EP1300392B1 (en) | 2000-05-18 | 2012-09-05 | Mitsubishi Rayon Co., Ltd. | Process for producing optically active alpha-amino acid and optically active alpha-amino acid amide |
| JP2001328970A (ja) * | 2000-05-18 | 2001-11-27 | Mitsubishi Rayon Co Ltd | 光学活性α−アミノ酸及び光学活性α−アミノ酸アミドの製造方法 |
| JP2002315597A (ja) * | 2001-04-24 | 2002-10-29 | Mitsubishi Gas Chem Co Inc | 光学活性α−アミノ酸類の製造方法 |
-
2004
- 2004-04-07 WO PCT/JP2004/004988 patent/WO2004090152A1/ja active Application Filing
- 2004-04-07 DE DE602004016994T patent/DE602004016994D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2004-04-07 JP JP2005505297A patent/JP4577513B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2004-04-07 US US10/552,634 patent/US7208631B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2004-04-07 EP EP04726263A patent/EP1634957B1/en not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5786335A (en) * | 1995-11-06 | 1998-07-28 | Warner-Lambert Company | Sulfhydryl containing peptides for treating vascular disease |
| JP2001525800A (ja) * | 1997-05-07 | 2001-12-11 | マックス−プランク ゲゼルシャフト ツァー フェルデルンク デア ビッセンシャフテン エー．ファウ．ベルリン | 新規のシステイン誘導体、その製造のための方法及びそれを含む医薬品 |
| JP2000169388A (ja) * | 1998-10-02 | 2000-06-20 | Santen Pharmaceut Co Ltd | 血管新生阻害剤 |
| WO2000021925A1 (fr) * | 1998-10-09 | 2000-04-20 | Ajinomoto Co., Inc. | Derives de la cysteine |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP1634957B1 (en) | 2008-10-08 |
| JP4577513B2 (ja) | 2010-11-10 |
| US7208631B2 (en) | 2007-04-24 |
| US20060287398A1 (en) | 2006-12-21 |
| DE602004016994D1 (de) | 2008-11-20 |
| EP1634957A4 (en) | 2007-08-08 |
| EP1634957A1 (en) | 2006-03-15 |
| WO2004090152A1 (ja) | 2004-10-21 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| AU2005233371B2 (en) | Stereoselective bioconversion of aliphatic dinitriles into cyano carboxylic acids | |
| JP5096435B2 (ja) | 光学活性α−メチルシステイン誘導体の製造方法 | |
| US20090030210A1 (en) | Process for Producing Optically Active 2-Alkylcysteine, Derivative Thereof, and Processes for Production | |
| JP4577513B2 (ja) | ２−アルキルシステインアミド又はその塩、並びに、それらの製造方法及び用途 | |
| JPWO2007026860A1 (ja) | 光学活性α−ヒドロキシカルボン酸の製造方法 | |
| US8178325B2 (en) | Process for producing sulfur-containing hydroxycarboxylic acid | |
| JP4484027B2 (ja) | 光学活性２―アルキル−ｄ−システインアミド又はその塩、及びこれらの化合物の製造方法。 | |
| JP2696127B2 (ja) | 光学活性な２―ヒドロキシカルボン酸の製造法 | |
| EP0972845B1 (en) | Method for producing L-Allysine acetal | |
| JPS61274690A (ja) | Ｄ−α−アミノ酸の製造方法 | |
| KR100433134B1 (ko) | 신규한 호열성 미생물 및 이를 이용한 방향족ｌ-아미노산의 제조 방법 | |
| JP4492765B2 (ja) | Ｌ−アリシンアセタールの製造法 | |
| JP2007117034A (ja) | 光学活性ニペコチン酸化合物の製造方法 | |
| JP2674078B2 (ja) | Ｄ−α−アミノ酸の製造法 | |
| JPWO2004063385A1 (ja) | 光学活性α−メチルシステイン誘導体の製造方法 | |
| JPH07303491A (ja) | 光学活性な酸アミドの製造法 | |
| JP2006000005A (ja) | 光学活性２−アルキル−ｄ−システイン又はその塩の製造方法 | |
| JP2009278914A (ja) | 光学活性芳香族アミノ酸および光学活性芳香族アミノ酸アミドの製造方法 | |
| JP2007074942A (ja) | 光学活性ペニシラミンの製造方法 | |
| JP2006000006A (ja) | 光学活性２−アルキル−ｄ−システインエステルの製造方法 | |
| JP2002523107A (ja) | （２ｒ）−ピペリジン誘導体の製造方法 | |
| JP2011072303A (ja) | ４−ハロ−３−ヒドロキシブチルアミドの製造方法 | |
| JP2002262897A (ja) | Ｌ−α−オキシ酸の製造方法 | |
| JPH0984592A (ja) | Ｓ−フェニル−ｌ−システインの製造方法 | |
| JP2011045361A (ja) | ４−ハロ−３−ヒドロキシブチルアミドの製造方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20050926 |
|
| RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20070209 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20070228 |
|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20070330 |
|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20070330 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20100526 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20100611 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20100728 |
|
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20100810 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130903 Year of fee payment: 3 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130903 Year of fee payment: 3 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |