JPWO2004045679A1 - 腹膜透析法 - Google Patents

Abstract

アデノシン三リン酸又はその塩を含有する腹膜透析液及びこれを用いる腹膜透析法。長期間施行しても腹膜障害を生じることのない安全な腹膜透析液である。

Description

本発明は腹膜透析時における腹膜障害の予防治療剤、腹膜障害等を生じない安全な腹膜透析液、及び当該透析法を用いた腹膜透析法に関する。

腎不全が進行すると、体内の老廃物が十分排泄できなくなり、尿素窒素（ＢＵＮ）、クレアチニン（Ｃｒ）、リン（Ｐ）、カリウム（Ｋ）等の尿毒症性物質の血中濃度が高くなり、種々の症状がおこる。この症状は、疲れ易い、息切れがする、尿量が減る、浮腫、食欲低下などの他、高血圧、高カリウム血症、貧血などである。このまま放置すると死に至るため、尿毒症の治療には血液透析、腹膜透析又は腎移植が行われる。
このうち、腹膜透析は、血液透析に比べて、機械や人の手を必要とせず、病院に行かなくてもできる；ゆっくり透析が行われるため体調が安定し、低血圧や透析後の不快な疲労感がない；血液透析のような時間的拘束がない等の利点があることから近年広く採用されつつある。
しかしながら、腹膜透析は、半透膜である腹膜を利用した透析であり、腹腔内にカテーテルを植え込みその中に高濃度のブドウ糖を含有する透析液を注入し、５〜６時間貯めておいた後排液する手段であることから、長期間施行すると、高濃度のブドウ糖による腹膜硬化、腹膜炎等により腹膜機能障害を生じるという問題がある。

従って、本発明は腹膜障害を生じず、長期間連用できる腹膜透析液、及びこれを用いた腹膜透析法を提供することにある。
そこで本発明者は、腹膜の表皮を覆っている腹膜中皮細胞に着目し、高濃度の糖存在下で生じる腹膜中皮細胞の障害を防止できる成分を探索してきたところ、アデノシン三リン酸（ＡＴＰ）又はその塩に、腹膜中皮細胞の障害を防止する作用があることを見出し、従ってＡＴＰ又はその塩は腹膜障害予防治療剤として有用であり、さらにＡＴＰ又はその塩を配合すれば長期間施行可能な腹膜透析液が得られることを見出し、本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明は、ＡＴＰ又はその塩を含有する腹膜透析液を提供するものである。
また、本発明は、ＡＴＰ又はその塩を有効成分とする腹膜障害予防治療剤を提供するものである。
さらに、本発明は、ＡＴＰ又はその塩を有効成分とする糖による細胞障害の治療剤を提供するものである。
また、本発明は、ＡＴＰ又はその塩の、腹膜透析液製造のための使用を提供するものである。
また、本発明は、ＡＴＰ又はその塩の、腹膜障害予防治療剤製造のための使用を提供するものである。
さらに、本発明は、ＡＴＰ又はその塩の、糖による細胞障害の治療剤製造のための使用を提供するものである。
さらに、本発明はＡＴＰ又はその塩の有効量を含有する透析液を用いることを特徴とする腹膜透析法を提供するものである。
さらに、本発明はＡＴＰ又はその塩の有効量を投与することを特徴とする腹膜障害の処置方法を提供するものである。
さらにまた、本発明はＡＴＰ又はその塩の有効量を投与することを特徴とする糖による細胞障害の処置方法を提供するものである。
本発明によれば、長期間施行しても腹膜障害を生じることのない安全な腹膜透析液が得られる。

図１は、ブドウ糖（５．８ｍＭ、７５ｍＭ、１４０ｍＭ）によるＨＰＭＣの細胞生存率（吸光度）の低下に対するＡＴＰの効果を示す図である。
図２は、ブドウ糖（５．８ｍＭ、７５ｍＭ、１４０ｍＭ）によるＨＰＭＣの細胞生存率（吸光度）の低下に対するアデノシンの効果を示す図である。
図３は、ブドウ糖（５．８ｍＭ、７５ｍＭ、１４０ｍＭ）によるＨＰＭＣの細胞生存率（吸光度）の低下に対するＡＴＰの効果に及ぼすＡＴＰ受容体拮抗薬（スラミン，１０μＭ）の効果を示す図である。
図４は、ブドウ糖（５．８ｍＭ、７５ｍＭ、１４０ｍＭ）によるＨＰＭＣの細胞生存率（吸光度）の低下に対するＡＴＰの効果に及ぼすＡＴＰ受容体拮抗薬（Ｒｅａｃｔｉｖｅ Ｂｌｕｅ ２，３０μＭ）の効果を示す図である。
図５は、ブドウ糖（５．８ｍＭ、７５ｍＭ、１４０ｍＭ）によるＨＰＭＣの細胞生存率（吸光度）の低下に対するＡＴＰの効果に及ぼすＡＴＰ受容体拮抗薬（ＰＰＡＤＳ，１０μＭ）の効果を示す図である。

本発明に用いられるアデノシン三リン酸（ＡＴＰ）は、細胞機能のエネルギー源として知られているが、細胞、特に腹膜中皮細胞が高濃度の糖、特にブドウ糖により受ける障害に対して防止作用があることは全く知られていない。また、後記実施例に示すように、腹膜中皮細胞をＡＴＰ受容体拮抗体の前処理後に、ＡＴＰを作用させると、腹膜中皮細胞障害改善作用は認められなかった。このことから、ＡＴＰによる細胞障害治療作用は、ＡＴＰが細胞内部に取り込まれてエネルギー源として作用することによるのではなく、ＡＴＰ受容体を介して作用しているものである。
ＡＴＰの塩としては、ナトリウム塩等のアルカリ金属塩、マグネシウム塩、カルシウム塩等のアルカリ土類金属塩等が好ましい。
本発明の腹膜透析液は、ＡＴＰ又はその塩を有効量含有する。腹膜透析液中のＡＴＰ又はその塩の濃度は、１０〜５０００μＭ、さらには５０〜３０００μＭ、特に５０〜２０００μＭが好ましい。
本発明腹膜透析液には、ＡＴＰ又はその塩以外に、ブドウ糖及び電解質を含有するのが望ましい。ブドウ糖濃度は、１０００〜４０００ｍｇ／ｄｌ、特に１２００〜３６００ｍｇ／ｄｌが好ましい。また、電解質としてはＮａ^＋、Ｃａ^２＋、Ｍｇ^２＋及びＣｌ⁻が用いられる。Ｎａ^＋は１００〜２００ｍＥｑ／ｌが、Ｃａ^２＋は４〜５ｍＥｑ／ｌが、Ｍｇ^２＋は１〜２ｍＥｑ／ｌが、Ｃｌ⁻は８０〜１２０ｍＥｑ／ｌが好ましい。また、さらに乳酸等の有機酸を３０〜５０ｍＥｑ／ｌ配合するのが好ましい。さらに、腹膜透析液の浸透圧は３００〜７００ｍＯｓｍ／ｌに調整するのが望ましい。なお、残余は水である。
本発明のＡＴＰ又はその塩を含有する腹膜透析液を用いれば、腹膜障害が防止でき、高濃度の糖による細胞障害、特に腹膜中皮細胞障害が防止できる。ここで腹膜障害としては、腹膜炎、硬化性被嚢性腹膜炎、難治性遷延性腹膜炎、汎発性腹膜炎等が挙げられる。しかし、本発明の腹膜障害予防治療剤及び細胞障害治療剤は、腹膜透析液の形態によらず、経口投与、静脈内投与、筋肉内投与、局所投与等の形態によっても用いることができる。これらの投与形態は、薬学的に許容される担体を配合し、当業者に公知慣用の製剤方法により製造できる。
経口用固形製剤を調製する場合は、ＡＴＰ又はその塩に賦形剤、必要に応じて結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味剤、矯臭剤等を加えた後、常法により錠剤、被覆錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤等を製造することができる。そのような添加剤としては、当該分野で一般的に使用されているものでよく、例えば、賦形剤としては、乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、微結晶セルロース、珪酸等を、結合剤としては水、エタノール、プロパノール、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン液、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルスターチ、メチルセルロース、エチルセルロース、シェラック、リン酸カルシウム、ポリビニルピロリドン等を、崩壊剤としては乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、乳糖等を、滑沢剤としては精製タルク、ステアリン酸塩、ホウ砂、ポリエチレングリコール等を、矯味剤としては白糖、橙皮、クエン酸、酒石酸等を例示できる。
経口用液体製剤を調製する場合は、ＡＴＰ又はその塩に矯味剤、緩衝剤、安定化剤、矯臭剤等を加えて常法により内服液剤、シロップ剤、エリキシル剤等を製造することができる。この場合矯味剤としてはバニリン等が、緩衝剤としてはクエン酸ナトリウム等が、安定化剤としてはトラガント、アラビアゴム、ゼラチン等が挙げられる。
注射剤を調製する場合は、ＡＴＰ又はその塩にｐＨ調整剤、緩衝剤、安定化剤、等張化剤、局所麻酔剤等を添加し、常法により皮下、筋肉及び静脈内注射剤を製造することができる。この場合のｐＨ調整剤及び緩衝剤としてはクエン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、リン酸ナトリウム等が挙げられる。安定化剤としてはピロ亜硫酸ナトリウム、ＥＤＴＡ、チオグリコール酸、チオ乳酸等が挙げられる。局所麻酔剤としては塩酸プロカイン、塩酸リドカイン等が挙げられる。等張剤としては、塩化ナトリウム、ブドウ糖等が例示できる。
本発明の前記医薬（腹膜透析液を除く）の投与量は年齢、体重、症状、投与形態及び投与回数などによって異なるが、通常は成人に対して、ＡＴＰとして１日１〜１０００ｍｇを１回又は数回に分けて経口投与又は静脈内投与するのが好ましい。
腹膜透析液の場合には、通常の腹膜透析法に従えばよい。すなわち、腹腔にカテーテルを植え込んだ腎疾患患者の腹膜中に、当該カテーテルを介してその中にＡＴＰ含有透析液（通常１．５〜２．０Ｌ）を注入する方法、又はＡＴＰ含有生理的ブドウ糖濃度液を注入後従来の透析液（例えば、前記高濃度のブドウ糖液）を注入する方法で行い、約５〜６時間貯めておいた後排液する。通常この操作を１日に３〜５回繰り返す。ここでブドウ糖の生理的濃度とは、０．０８〜０．１６％（ｗ／ｖ）である。

次に実施例を挙げて本発明をさらに説明するが、本発明はこれに何ら限定されるものではない。

腹膜中皮細胞（ＨＰＭＣ）をＡＴＰ含有（０、１０、１００及び１０００μＭ）培養液（Ｍ１９９）で、３時間プレインキュベーションした。ＨＰＭＣ培養液（生理食塩水バッファー）で洗浄した後に、３種類の濃度（５．８ｍＭ、７５ｍＭ、１４０ｍＭ）のブドウ糖を含有する培養液（Ｍ１９９）で８時間培養し、ＨＰＭＣの細胞生存率をセルカウンティング法（ＷＳＴ−１）にて測定した。
その結果、図１に示すように、ＡＴＰを含有しない培養液でＨＰＭＣをプレインキュベーションした場合にはブドウ糖濃度が高くなるに従い細胞生存率が低下したのに対し、ＡＴＰを含有する培養液でＨＰＭＣをプレインキュベーションすると、高濃度のブドウ糖による細胞生存率の低下が有意に改善された。

ＡＴＰの代わりに、その代謝物質であるアデノシンを用いて、高濃度のブドウ糖下におけるＨＰＭＣの細胞生存率の低下に対する作用を検討した。
その結果、図２に示すように、アデノシンではＡＴＰのようなＨＰＭＣの細胞生存率低下の改善作用は認められなかった。

実施例１において、ＡＴＰ含有培養液でプレインキュベーションする前に、選択的ＡＴＰ受容体拮抗薬である（１）スラミン（Ｓｕｒａｍｉｎ）（Ｐ２Ｘ、Ｐ２Ｙ受容体拮抗薬；１０μＭ）、（２）Ｒｅａｃｔｉｖｅ Ｂｌｕｅ ２（Ｐ２Ｙ受容体拮抗薬；３０μＭ）又は（３）ＰＰＡＤＳ（Ｐ２Ｘ受容体拮抗薬；１０μＭ）を用いてＨＰＭＣを３０分プレインキュベーションした。その後実施例１と同様に実験を行った。
その結果、図３、４及び５に示すように、ＡＴＰ受容体拮抗薬を作用させると、ＡＴＰによるＨＰＭＣの細胞生存率低下の改善作用は認められなかった。
実施例１の結果から、ＡＴＰは、高濃度のブドウ糖による腹膜中皮細胞の障害を有意に防止する作用を有することが判明した。そして、ＡＴＰのかかる作用は、実施例２及び３の結果から、ＡＴＰが細胞内に入ってエネルギー源として作用することによって生じる効果ではなく、Ｐ２受容体を介した直接作用であることがわかる。

腹膜透析液の処方
（１）ＡＴＰ含有透析液
３種のブドウ糖含有透析液（１．３６、２．２７、３．８６％）に塩化ナトリウム、乳酸ナトリウム、塩化カルシウム、塩化マグネシウムなど従来通りの濃度とし、ＡＴＰを５０〜２０００μＭとなるよう添加する。
（２）ＡＴＰ含有生理的ブドウ糖濃度液
生理的ブドウ糖濃度液（０．１％）に塩化ナトリウム、乳酸ナトリウム、塩化カルシウム、塩化マグネシウムなど従来通りの濃度とし、ＡＴＰを５０〜２０００μＭとなるよう添加する。

Claims (20)

1. アデノシン三リン酸又はその塩を含有する腹膜透析液。
2. さらにブドウ糖及び電解質を含有するものである請求項１記載の腹膜透析液。
3. アデノシン三リン酸又はその塩を有効成分とする腹膜障害予防治療剤。
4. アデノシン三リン酸又はその塩を有効成分とする糖による細胞障害の治療剤。
5. 糖による細胞障害が、ブドウ糖による腹膜中皮細胞の障害である請求項４記載の治療剤。
6. アデノシン三リン酸又はその塩の、腹膜透析液製造のための使用。
7. さらにブドウ糖及び電解質を含有するものである請求項６記載の使用。
8. アデノシン三リン酸又はその塩の、腹膜障害予防治療剤製造のための使用。
9. アデノシン三リン酸又はその塩の、糖による細胞障害の治療剤製造のための使用。
10. 糖による細胞障害が、ブドウ糖による腹膜中皮細胞の障害である請求項９記載の使用。
11. アデノシン三リン酸又はその塩の有効量を含有する透析液を用いることを特徴とする腹膜透析法。
12. 腹腔内にカテーテルを植え込んだ腎疾患患者の腹膜中に当該カテーテルを介してアデノシン三リン酸又はその塩の有効量を含有する透析液を注入するものである請求項１１記載の腹膜透析法。
13. 透析液中のアデノシン三リン酸又はその塩の濃度が、１０〜５０００μＭである請求項１１又は１２記載の腹膜透析法。
14. 透析液中に、さらにブドウ糖及び電解質が含まれている請求項１１又１２記載の腹膜透析法。
15. ブドウ糖濃度が１０００〜４０００ｍｇ／ｄｌである請求項１４記載の腹膜透析法。
16. 腹腔内にカテーテルを植え込んだ腎疾患患者の腹膜中に当該カテーテルを介してアデノシン三リン酸又はその塩の有効量及び生理的濃度のブドウ糖を含有する透析液を注入し、次いで高濃度のブドウ糖を含有する透析液を注入するものである請求項１１記載の腹膜透析法。
17. ブドウ糖の生理的濃度が０．０８〜０．１６％（ｗ／ｖ）であり、ブドウ糖の高濃度が１０００〜４０００ｍｇ／ｄｌである請求項１６記載の腹膜透析法。
18. アデノシン三リン酸又はその塩の有効量を投与することを特徴とする腹膜障害の処置方法。
19. アデノシン三リン酸又はその塩の有効量を投与することを特徴とする糖による細胞障害の処置方法。
20. 糖による細胞障害が、ブドウ糖による腹膜中皮細胞の障害である請求項１９記載の処置方法。

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