JPS6357425B2

JPS6357425B2 -

Info

Publication number: JPS6357425B2
Application number: JP58062372A
Authority: JP
Inventors: Junichi Oshida; Kenji Ishimaru; Hideki Tsuruta; Seiichi Ishizuka
Original assignee: Teijin Ltd
Current assignee: Teijin Ltd
Priority date: 1983-04-11
Filing date: 1983-04-11
Publication date: 1988-11-11
Also published as: JPS59190962A

Description

【発明の詳細な説明】

産業上の利用分野本発明は新規な活性型ビタミンD₃アナログで
ある24―オキソ―25―デヒドロビタミンD₃類、
その製造法及びそれを有効成分とするカルシウム
調節剤に関する。更に詳細には、本発明は、優れ
た薬理作用、すなわち腸管からのカルシウム吸収
能を促進し血中のカルシウム濃度を高める作用及
び骨塩溶解作用を有し、カルシウム代謝異常によ
り起る種々の疾患、例えば骨粗鬆症、骨軟化症な
どの骨病変等の治療もしくは予防薬として有効な
24―オキソ―25―デヒドロビタミンD₃類、その
製造法、及びそれを有効成分とするカルシウム調
節剤に関する。従来技術活性型ビタミンD₃として、1α，25―ジヒドロ
キシビタミンD₃，1α，24―ジヒドロキシビタミ
ンD₃などが知られている。かかる化合物は腸管
からのカルシウム吸収能促進作用等を有し骨病変
等の治療薬として有効なものである。しかしながら24位にオキソ基、25位と26位の間
に二重結合する24―オキソ―25―デヒドロビタミ
ンD₃類は、文献未載の新規化合物であり、その
製造法、薬理活性等については従来全く知られて
いない。発明の目的本発明の目的は、新規化合物であつて、優れた
薬理作用を有する24―オキソ―25―デヒドロビタ
ミンD₃類、その製造法及びそれを有効成分とす
るカルシウム調節剤を提供することにある。発明の構成及び効果本発明で提供される24―オキソ―25―デヒドロ
ビタミンD₃類は下記式［］［式中、Ｒは水素原子又は水酸基を表わす］で表わされる。上記式［］の24―オキソ―25―デヒドロビタ
ミンD₃類は、24位にオキソ基、25位と26位の間
に二重結合を有するものであり、従来全く知られ
ていない構造を持つている。上記式［］においてＲは水素原子又は水酸基
を表わす。上記式［］で表わされる化合物の具
体例としては、 24―オキソ―25―デヒドロビタミンD₃、 24―オキソ―25―デヒドロ―1α―ヒドロキシ
ビタミンD₃ を挙げることができる。 24―オキソ―25―デヒドロビタミンD₃類は、下記式［］［式中、R¹は水素原子、水酸基又は保護され
た水酸基を表わし、R²は水素原子又は保護基を
表わす］で表わされる24―オキソ―3β―ヒドロキシコレ
スタ―５，７，25―トリエン類に紫外線を照射
し、生成する24―オキソ―25―デヒドロプレビタ
ミンD₃類を熱エネルギーにより異性化せしめ、
次いで必要に応じて脱保護反応に付すことによつ
て製造される。原料化合物である上記式［］において、R¹
は水素原子、水酸基又は保護された水酸基を表わ
す。ここで保護された水酸基の保護基として下記
の基を挙げることができる。 (1) アシル基例えばアセチル基、プロパノイル基、ブタノイ
ル基、ペンタノイル基、カプロイル基、シクロヘ
キサノイル基、クロロアセチル基、ブロモアセチ
ル基、ベンゾイル基、ｐ―ブロモベンゾイル基、
ｐ―ニトロベンゾイル基、エチルベンゾイル基、
トルイル基等のC₁〜C₁₂の脂肪族又は芳香族カル
ボン酸残基又はそれらのニトロ、ハロゲン、アル
コキン置換誘導体等が好ましく用いられる。それらの内、特に好ましくはアセチル基、ベン
ゾイル基、プロパノイル基等である。 (2) ヒドロキシル基とエーテル結合を形成する基例えば、トリメチルシリル基、ジメチル―ｔ―
ブチル―シリル基等のトリアルキルシリル基、２
―テトラヒドロピラニル基、２―テトラヒドロフ
ラニル基等の２―環状エーテル基を挙げることが
できる。 (3) カルコキシカルボニル基例えば、メトキシカルボニル基、エトキシカル
ボニル基、プロポキシカルボニル基、ブトキシカ
ルボニル基、ペントキシカルボニル基等を挙げる
ことができる。上記保護基のうち特に好ましくはアシル基、ア
ルコキシカルボニル基であるが、これらに限定さ
れるものではない。上記式［］において、R²は水素原子又は保
護基を表わす。かかる保護基としては上述したも
のと同様の保護基が挙げられる。このような原料化合物は例えば以下に示す反応
式によつて合成される。この反応式において化合物３の合成は特開昭54
−41856号公報等が参考とされる。本発明の製造法は、上述した如き式［］の24
―オキソ―3β―ヒドロキシコレスタ―５，７，
25―トリエン類に紫外線を照射せしめることによ
り行われる。ここで紫外線とは約200〜360nmの
波長範囲のものとして知られているものであり、
本発明方法では特に260〜310nmの範囲の波長も
のが好ましく用いられる。紫外線照射するに際しては、不活性有機溶媒中
で行うのが好ましい。不活性有機溶媒としては、例えば、ヘキサン、
ヘプタン、シクロヘキサン、リグロイン、ベンゼ
ン、トルエン、キシレン、ブロムベンゼン、クロ
ルベンゼン、ニトロベンゼン、四塩化炭素、１，
２―ジクロルエタン、１，２―ジブロモエタン等
の炭化水素もしくはハロゲン化炭化水素；エーテ
ル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、メチルセ
ロゾルブ、フエニルセロゾルブ等のエーテル系溶
媒；メタノール、エタノール、プロパノール、ヘ
キサノール、シクロヘキサノール等のアルコール
系溶媒等が好適なものとしてよく用いられる。紫外線照射の際の温度は−20〜80℃特に−10〜
20℃の範囲が好適である。また、アルゴンあるい
は窒素雰囲気等の酸素の存在しない不活性雰囲気
で行うのが好ましい。かくして紫外線照射によれば出発原料である24
―オキソ―3β―ヒドロキシコレスタ―５，７，
25―トリエン類の９，10位が開裂して24―オキソ
―25―デヒドロプレビタミンD₃類が生成する。
このプレビタミンD₃類を熱エネルギーにより異
性化せしめることにより、24―オキソ―25―デヒ
ドロビタミンD₃類又はそのヒドロキン保護ビタ
ミンD₃類が得られる。異性化反応は20℃〜120
℃、好ましくは40℃〜100℃で行われる。この異
性化反応は、上記紫外線照射で用いられた不活性
有機溶媒中でそのまま行うことができる。それ
故、例えば上記プレビタミンD₃類を得る紫外線
照射を、例えば40℃で実施した場合等において
は、プレビタミンD₃類の生成と同時に、生成し
たプレビタミンD₃類が反応系中において徐々に
ビタミンD₃類に異性化する反応が起ることにな
る。本発明方法における熱エネルギーによる異性化
反応とは、上記したところから明らかな通り、必
ずしも反応系の加熱を意味するものではない。かくして得られる生成物は、その水酸基が保護
されている場合には脱保護反応に付される。かか
る脱保護反応は生成物を単離精製した後に行つて
もよく、上記異性化反応に引きつづいて行つても
よい。水酸基の脱保護反応はそれ自体公知の反応であ
り例えば次のようにして行うことができる。保護基がアシル基またはアルコキシカルボニル
基の場合にはメタノール、エタノールの如き低級
脂肪族アルコールのアルカリ性溶液中で処理する
かあるいはエーテル中LiAlH₄等の水素化金属で
処理すればよい。温度としては−10℃〜50℃でよ
い。保護基が水酸基の酸素原子と結合してエーテ
ル基を形成している場合は、還元的にあるいは酸
又はアルカリと接触せしめることにより、容易に
除去することができる。かくして本発明の製造法により上記式［］で
表わされる24―オキソ―25―デヒドロビタミン
D₃類が得られる。 24―オキソ―25―デヒドロビタミンD₃類は、
血清中のカルシウムレベルを調節する作用を有す
る。すなわち、腸管からのカルシウム吸収能を促
し、血中のカルシウム濃度を高める作用を持ち、
また骨塩溶解作用を有する。従つて本発明の24―
オキソ―25―デヒドロビタミンD₃類は、カルシ
ウム代謝異常によつて起こる種々の疾患、例えば
骨粗鬆症、骨軟化症、腎不全患者の骨病変等の疾
患の治療もしくは予防に極めて有用なものであ
る。しかして本発明によれば、上記式［］で表わ
される24―オキソ―25―デヒドロビタミンD₃類
を有効成分とするカルシウム調節剤が提供され
る。 24―オキソ―25―デヒドロビタミンD₃類の投
与は経口、非経口のいずれでもよく、非経口投与
の場合は筋肉内、皮下、静脈内、直腸投与があ
る。なかでも経口投与が好ましい。本化合物を活
性成分とするカルシウム調節剤は錠剤、散剤、顆
粒剤、坐剤、カプセル剤、アルコール溶液剤、油
性溶液剤、水性懸濁剤などの投与形態で用いられ
る。錠剤の形態に成形するに際しては、例えば乳
糖、デンプン、炭酸カルシウム、結晶セルロー
ス、ケイ酸などの賦形剤；カルボキシメチルセル
ロース、メチルセルロース、リン酸カリウム、ポ
リビニルピロリドンなどの結合剤；アルギン酸ナ
トリウム、炭酸水素ナトリウム、ラウリル硫酸ナ
トリウム、ステアリン酸モノグリセライドなどの
崩壊剤；グリセリンなどの保湿剤；カオリン、コ
ロイド状ケイ酸などの吸着剤；精製タルク、ホウ
酸末などの滑沢剤等を用いて通常の方法により成
形することができる。散剤、顆粒剤も、同様に上
記の賦形剤等を用いて通常の方法によつて成形す
ることができる。坐剤の形態に成形するに際して
は、例えばポリエチレングリコール、カカオ脂、
高級アルコール、ゼラチンなどを用いて従来公知
の方法により成形することができる。カプセル剤は本化合物の油性溶液を用いて軟カ
プセル剤等にすることによつて得られる。油性溶
液の溶媒としては植物油、たとえばトウモロコシ
油、棉実油、ココナツツ油、アーモンド油、落下
生油、魚肝油、油状エステルなどを使用すること
ができる。アルコール溶液剤、油性溶液剤、水性懸濁剤な
どは公知の方法によつて得ることができる。本化合物の保存寿命を延長するために、製剤中
に、抗酸化剤、例えばアスコルビン酸、ブチル化
ヒドロキシアニソール、ヒドロキノンなどを混入
することもできる。本発明の24―オキソ―25―デヒドロビタミン
D₃類の投与量は、患者の年令、性別、疾患の程
度などにより適宜選択されるが、通常２〜200n
ｇ／Kg／日、より好ましくは５〜40nｇ／Kg／日
である。かかる投与量より、単位投与形態にある
製剤に含有せしめる24―オキソ―25―デヒドロビ
タミンD₃類の量が決定される。以下本発明を実施例により更に詳細に説明す
る。参考例１ 24―オキソ―5α，8α―（４―フエニル―１，
２―ウラゾロ）コレスト―６―エン―1α，3β
―ジオール(4)の合成 24―オキソコレスタ―５，７―ジエン―1α，
3β―ジオール6.0ｇをテトラヒドロフラン―塩化
メチレン（１：１）200mlに溶解し、４―フエニ
ル―１，２，４―トリアゾリン―３，５―ジオン
のアセトン溶液を反応液の赤色が消えなくなるま
で滴下した。１時間撹拌した後、減圧下溶媒を濃
縮し、得られた粗生成物をシリカゲルカラム（溶
媒：ベンゼン―アセトン系）に付すことにより、
24―オキソ―5α，8α―（４―フエニル―１，２
―ウラゾロ）コレスト―６―エン―1α，3β―ジ
オール7.7ｇを得た。このものの物性値は次の通
りであつた。 MS（ｍ／ｅ）：

【式】参考例２ 1α，3β―ジ（メトキシメトキシ）―24―オキ
ソ―5α，8α―（４―フエニル―１，２―ウラ
ゾロ）コレスト―６―エン(5)の合成 24―オキソ―5α，8α―（４―フエニル１，２
―ウラゾロ）コレスト―６―エン―1α，3β―ジ
オール7.5ｇを乾燥塩化メチレン50mlに懸濁させ、
Ｎ，Ｎ―ジイソプロピルエチルアミン6.7ｇを加
えた。０℃に冷却し窒素気流下クロルメチルメチ
ルエーテル4.15ｇをゆつくりと滴下した。1hr後
室温に戻し、TLCで原料が消失するまで反応を
続けた。反応終了後IN塩酸を加え酢酸エチルよ
り抽出した。炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食
塩水で順次洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し
た。減圧下溶媒を濃縮し、得られた粗生成物をシ
リカゲルカラム（溶媒：ベンゼン―アセトン系）
で精製し、1α，3β―ジ（メトキシメトキシ）―
24―オキシ―5α，8α―（４―フエニル―１，２
―ウラゾロ）コレスト―６―エンを5.8ｇ得た。
このものの物性値は次の通りであつた。 NMR（CDCl₃；δ，ppm） 0.85（3H，Ｓ），1.00（3H，Ｓ）， 1.09（6H，ｄ，Ｊ＝７，２Hz）， 3.37（6H，Ｓ），4.3〜5.0（4H，ｍ）， 6.35（2H，ABq），7.37（5H，Ｓ） MS（ｍ／ｅ）；

【式】参考例３ 1α，3α―ジ（メトキシメトキシ）―24―オキ
ソ―5α，8α―（４―フエニル―１，２―ウラ
ゾロ）コレスト―６―エン―25―オール 1α，3β―ジ（メトキシメトキシ）―24―オキ
ソ―5α，8α―（４―フエニル―１，２―ウラゾ
ロ）コレスト―６―エン3.0ｇをジグライム―ｔ
―ブタノール（１：１）90mlに溶解し、ｔ―ブト
キシカリ4.95ｇを加えて、酸素雰囲気下−20℃で
酸素の吸収が止むまで攪拌した。1.16ｇのトリフ
エニルホスフインを加えしばらく攪拌した後IN
―塩酸，酢酸エチルを加えて介液した。有機層を
IN―塩酸、炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食
塩水で順次洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し
た。減圧下溶媒を濃縮して得られる粗生成物をシ
リカゲルカラム（溶媒：ベンゼン―アセトン系）
で精製し、1.91ｇの1α，3β―ジ（メトキシメトキ
シ）―24―オキソ―5α，8α―（４―フエニル―
１，２―ウラゾロ）コレスト―６―エン―25―オ
ールを得た。このものの特性値は以下の通りであ
つた。 NMR（CDcl₃；δ，ppm） 0.85（3H，Ｓ），1.00（3H，Ｓ）， 1.35（6H，Ｓ），4.3〜5.0（4H，ｍ）， 6.37（2H，ABq），7.3〜7.9（5H，ｍ） MS（ｍ／ｅ）；

【式】参考例４ 1α，3β―ジ（メトキシメトキシ）―24―オキ
ソ―5α，8α―（４―フエニル―１，２―ウラ
ゾロ）コレスタ―６，25―ジエン(7)の合成 110mgの1α，3β―ジ（メトキシメトキシ）―24
―オキソ―5α，8α―（４―フエニル―１，２―
ウラゾロ）コレスト―６―エン―25―オールをベ
ンゼン10mlに溶解し、メチル（カルボキシスルフ
アモイル）トリエチルアンモニウムハイドロオキ
シサイド110mgを加え、窒素雰囲気下１時間半加
熱還流した。水を加えて酢酸エチルより抽出し、飽和食塩水
で洗浄した。無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧
下溶媒を濃縮し、シリカゲルカラム（溶媒：ベン
ゼン―酢酸エチル系）で精製した。34mgの1α，
3β―ジ（メトキシメトキシ）―24―オキソ―5α，
8α―（４―フエニル―１，２―ウラゾロ）コレ
スタ―６，25―ジエンを得た。このものの物性値
は以下の通りであつた。 NMR（CDcl₃；８，ppm） 0.83（3H，Ｓ），0.98（3H，Ｓ）， 1.87（3H，Ｓ），3.33（6H，Ｓ）， 4.35〜5.0（4H，ｍ），5.73（1H，br，ｓ） 5.93（1H，br，ｓ），6.35（2H，ABq） 7.3〜7.9（5H，ｍ） MS（ｍ／ｅ）：

【式】参考例５ 24―オキソ―1α3β―ジヒドロキシコレスター
５，７，25―トリエン(8)の合成 1α，3β―ジ（メトキシメトキシ）―24―オキ
ソ―5α，8α―（４―フエニル―１，２―ウラゾ
ロ）コレスタ―６，25―ジエン180mgをテトラヒ
ドロフランメタノール（１：１）18mlに溶解し、
触媒量の濃塩酸を加えて、50℃で加熱攪拌した。
15時間反応させた後、減圧下溶媒を除去し、得ら
れた残渣をｓ―コリジン18mlに溶解し15分間加熱
還流した。反応終了後6N―塩酸を加え酢酸エチ
ルより抽出した。1N―塩酸、炭酸水素ナトリウ
ム水溶液、飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸ナ
トリウムで乾燥した。減圧下で溶媒を濃縮し、得
られた粗生成物をイリカゲル薄層クロマトグラフ
イーで２回生成（溶媒系：ベンゼン―アセトン系
及びｎ―ヘキサン―２―プロパノール系）するこ
とにより、22mgの24―オキソ―1α，3β―ジヒド
ロキシコレスター５，7.25―トリエンを得た。こ
のものの物性値は次の通りであつた。 UV（λmax，nm）：294，282，271，262（sh），217.5 MS（ｍ／ｅ）：412（M⁺）実施例１ 24―オキソ―25―デヒドロ―1α―ヒドロキシ
ビタミンD₃(9)の合成 24―オキソ―1α3β―ジヒドロキシコレスタ―
５，７，25―トリエン22mgを脱酸素化した600ml
のベンゼン―エタノール（５：１）に溶解した。
得られた溶液を５℃にコントロールしながら攪拌
下３分間、バイコールフイルターにより囲まれた
200Wのハノビアランプを使つて照射した。次に
この溶液を３時間半加熱還流した。反応終了後、
反応液を30℃以下で減圧下濃縮した。得られた粗
生成物をシリカゲル薄層クロマトグラフイーで２
回精製（溶媒系：ベンゼン―アセトン系及びｎ―
ヘキサン―２―プロパノール系）した。次いで得
られた精製物をZorbax―Silカラムを用いた高速
液体クロマトグラフイーで、溶出液として1.6％
メタノール／ジクロルメタンを用いて更に精製し
保持時間17.2分で溶出される画分を分取して24―
オキソ―25―デヒドロ―1α―ヒドロキシビタミ
ンD₃を得た。このものの物性値は次の通りであ
つた。 UV＝（Eton，nm）：λmax264，λmib237 MS（ｍ／ｅ）：412（M⁺），394，376，361，269，251，152，
134 NMR（CDcl₃，8ppm） 0.54（3H，Ｓ）， 0.94（3H，ｄ，Ｊ＝6.4Hz）， 1.87（3H，Ｓ），4.23（1H，ｍ）， 4.43（1H，ｍ），5.00（1H，Ｓ）， 5.33（1H，Ｓ），5.76（1H，Ｓ）， 5.95（1H，Ｓ）， 6.01（1H，ｄ，Ｊ＝11.3Hz）， 6.38（1H，ｄ，Ｊ＝11.3Hz）実施例２腸管からのカルシウム吸収活性及び骨塩溶解活
性離乳直後のmale Wistar ratを８週間ビタミン
Ｄ欠乏低カルシウム飼料（Ca，0.0036％；Ｐ，
0.3％）で飼育した。このラツトに250nｇの24―
オキソ―25―デヒドロ―1α―ヒドロキシビタミ
ンD₃を0.2％Triton Ｘ―100溶液0.2mlに溶解し静
脈内投与し各時間後の小腸からのカルシウム吸収
を腸管反転法（Martin，Ｄ，Ｌ，and De Luca，
H.F.Am.J・Physiol.216，1351―1359（1969）で
測定し、血清中カルシウム量の上昇より骨塩溶解
活性を測定した。血清中カルシウム量はOCPC法
（Connety，H.V.and Briggs，A.R.Am.J.Clim，
Pathol.45，290―296（19661）で測定した。結果
は第１図及び第２図に示したとおりである。実施例３リセプターと24―オキソ―25―デヒドロ―1α
ヒドロキシビタミンD₃の結合親和性リセプターと24―オキソ―25―デヒドロ―1α
―ヒドロキシビタミンD₃の結合親和性は
Eisman3の方法［Eisman，J.A.，Hamstra，A.
J.，Kream，B.E.and De Luca，H.F.Arch.
Biochem.Biophys.176，235―243（1976）の変法
［Ishizu ka，S.，Bannai，K.，Naruchi，T.and
Hashimoto.Y.Steroids，37，33―43（1981））に
従つて行なつた。即ちリセプターを含むサイトゾ
ール画分（0.3mg protein／ml）１mlに
10000dpmの［³H］1α，25―（OH）₂D₃（Ｓ，
A163Ci／mmol）を加え、更に種々の濃度の24―
オキソ―25―デヒドロ―1α―ヒドロキシビタミ
ンD₃を加えて25℃で60分間インキユベートした。
反応後40％（ｗ／ｖ）のポリエチレングリコール
6000を１ml加えてよく攪拌し、2260×ｇ60分間遠
心分離して得た沈澱部分の放射能を測定しリセプ
ターに結合した［³H］1α，25―（OH）₂D₃量を
測定した。この測定値より1α，25―（OH）₂D₃の
リセプターに対する親和性を１としたときの、24
―オキソ―25―デヒドロ―1α―ヒドロキシビタ
ミンD₃の親和性は1.74であり、高い親和性を示し
た。実施例４ 24―オキソ―25―デヒドロ―1α―ヒドロキシ
ビタミンD₃をココナツツ油に溶解して7μｇ／
mlの濃度の油性溶液を得た。ゼラチン、グリセリン、パラオキン安息香酸エ
チル、精製水を加温溶解して被覆剤とし、上記油
性溶液を用いて、１カプセルにつき24―オキソ―
25―デヒドロ―1α―ヒドロキシビタミンD₃が1μ
ｇ含有するように連続式軟カプセル製造機を用い
て軟カプセルを製造した。

【図面の簡単な説明】

第１図は、24―オキソ―25―デヒドロ―1α―
ヒドロキシビタミンD₃の腸管からのカルシウム
吸収活性を示したものであり、第２図は骨塩溶解
活性（bone calcium mobilization）を示したも
のである。

Claims

【特許請求の範囲】１下記式［］［式中、Ｒは水素原子又は水酸基を表わす］で表わされる24―オキソ―25―デヒドロビタミン
D₃類。２下記式［］［式中、R¹は水素原子、水酸基又は保護され
た水酸基を表わし、R²は水素原子又は保護基を
表わす］で表わされる24―オキソ―3β―ヒドロキシコレ
スタ―５，７，25―トリエン類に紫外線を照射
し、生成する24―オキソ―25―デヒドロプレビタ
ミンD₃類を熱エネルギーにより異性化せしめ、
次いで必要に応じて脱保護反応に付すことを特徴
とする。下記式［］［式中、Ｒは水素原子又は水酸基を表わす］で表わされる24―オキソ―25―デヒドロビタミン
D₃類の製造法。３上記式［］で表わされる24―オキソ―25―
デヒドロビタミンD₃類を有効成分とするカルシ
ウム調節剤。