JPS6344533A - 豚下痢症ワクチン - Google Patents
豚下痢症ワクチンInfo
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- JPS6344533A JPS6344533A JP19097786A JP19097786A JPS6344533A JP S6344533 A JPS6344533 A JP S6344533A JP 19097786 A JP19097786 A JP 19097786A JP 19097786 A JP19097786 A JP 19097786A JP S6344533 A JPS6344533 A JP S6344533A
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Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
この発明は豚下痢症ワクチンに関するものである。
１９８５年にこの発明の発明者等が大阪府下の養豚場で
発生した豚の下痢症例の下痢便から分離したウィルスを
パルボウイルス様因子と呼ぶが、この因子は豚甲状腺（
ＰＴ）と豚腎臓（ＳＫ）の各初代培養細胞で細胞変性効
果を伴って良く増殖し、また培養液にトリプシンを０．
５γ／ ｍ １ −加えることによってその増殖に増強
効果が見られる。
発生した豚の下痢症例の下痢便から分離したウィルスを
パルボウイルス様因子と呼ぶが、この因子は豚甲状腺（
ＰＴ）と豚腎臓（ＳＫ）の各初代培養細胞で細胞変性効
果を伴って良く増殖し、また培養液にトリプシンを０．
５γ／ ｍ １ −加えることによってその増殖に増強
効果が見られる。
そしてこの因子は詳細に同定され、つぎに示す性状が確
認された。
認された。
すなわち、この因子は５−ヨード−２′−デオキシウリ
ジン（ＩυＤＲ）を５０γ／ ｍ ］含む培養液中で増
殖が抑制されることから核酸型はＤＮＡであり、２０％
エーテルおよびｐＨ３，０の酸によって不活化されるこ
となく、５６℃、３０分の加熱に対してもウィルス価の
低下は見られず、５ Ｑ ｎｍの孔径のフィルターも通
過する。そしてさらにこの因子を勾配濃度超遠心分離精
製法によって精製し、得られたウィルス粒子の形態を電
子顕微鏡で観察したところパルボウイルスの形態にきわ
めて類似したものであることが認められた。このように
この因子はパルボウイルス類似の性状を有する一方で、
既知のパルボウイルスである豚パルボウイルス、犬パル
ボウイルス、猫バルボウイルスおよび牛パルボウイルス
とは血清学的性状および赤血球凝集性状において容易に
区別され、その存在はこの発明の発明者等によって初め
て明らかにされたのである。
ジン（ＩυＤＲ）を５０γ／ ｍ ］含む培養液中で増
殖が抑制されることから核酸型はＤＮＡであり、２０％
エーテルおよびｐＨ３，０の酸によって不活化されるこ
となく、５６℃、３０分の加熱に対してもウィルス価の
低下は見られず、５ Ｑ ｎｍの孔径のフィルターも通
過する。そしてさらにこの因子を勾配濃度超遠心分離精
製法によって精製し、得られたウィルス粒子の形態を電
子顕微鏡で観察したところパルボウイルスの形態にきわ
めて類似したものであることが認められた。このように
この因子はパルボウイルス類似の性状を有する一方で、
既知のパルボウイルスである豚パルボウイルス、犬パル
ボウイルス、猫バルボウイルスおよび牛パルボウイルス
とは血清学的性状および赤血球凝集性状において容易に
区別され、その存在はこの発明の発明者等によって初め
て明らかにされたのである。
この因子の病原性は初乳未摂取初生豚を用いて調べた結
果によると、１０６′。ＴＣＩＤ５ｏのウィルスを経口
もしくは経鼻接種した初生豚はいずれも下痢を呈し、接
種後２〜６日目に死亡し、下痢便および死亡豚の臓器か
ら接種ウィルスの回収を試みたところ下痢便および小腸
のほか呼吸気道からもウィルスが検出され、また病理学
的検査により小腸の充出血および上皮細胞の剥離が顕著
に認められた。
果によると、１０６′。ＴＣＩＤ５ｏのウィルスを経口
もしくは経鼻接種した初生豚はいずれも下痢を呈し、接
種後２〜６日目に死亡し、下痢便および死亡豚の臓器か
ら接種ウィルスの回収を試みたところ下痢便および小腸
のほか呼吸気道からもウィルスが検出され、また病理学
的検査により小腸の充出血および上皮細胞の剥離が顕著
に認められた。
この発明の発明者等による１９８３年以降に得られた豚
血清の抗体調査によれば５〜６力月齢豚では８０％以上
に中和抗体の保有が確認されており、わが国のいずれの
地区においても同様に高率な抗体が検出される状況にあ
る。
血清の抗体調査によれば５〜６力月齢豚では８０％以上
に中和抗体の保有が確認されており、わが国のいずれの
地区においても同様に高率な抗体が検出される状況にあ
る。
このように、従来の技術においては、パルボウイルス様
因子に起因する豚の下痢症を予防するための有効かつ安
全なワクチンはなく、養豚場経営に大きい不安があると
いう問題点があった。
因子に起因する豚の下痢症を予防するための有効かつ安
全なワクチンはなく、養豚場経営に大きい不安があると
いう問題点があった。
上記の問題点を解決するために、この発明は豚の下痢便
から分離したパルボウイルス様因子を組織培養で増殖さ
せ、それを不活化した抗原を豚下痢症ワクチンの有効成
分とする手段を採用したものである。以下その詳細を述
べる◇ まず、この発明のパルボウイルス様因子は豚腎臓（ＳＫ
）培養細胞、豚甲状腺（ＰＴ）培養細胞および豚腎株化
（ＥＳＫ）継代培養細胞のいずれの培養細胞においても
増殖するので、既知の方法によりこれらの単層細胞を調
製し、これにパルボウイルス様因子を接種し、たとえば
３７℃で約６０分設着させた後、１０％トリプトース・
フォスフエイト・ブロス、Ｌ−グルタミンを含有するイ
ーグルＭ Ｅ Ｍ培地を加え、６〜１４日間３７°Ｃて
培養する。この際０．５〜１．０γ／ ｍ １のトリプ
シンを培地に加えてもよい。このような操作を経て得ら
れたウィルス含有培養液にホルマリンを０．２容量％添
加し、３０℃で７日量感作して不活化し、不活化された
ウィルス液をそのまま豚下痢症ワクチンとするか、また
は抗原性の促進のためにアルミニウムゲルアジュバント
を２０容量％以下、または鉱油、有機物油もしくは親水
性油性のアジュバントを１０〜７０容量％を加えてアジ
ュバント添加不活化ワクチンとすることができる。
から分離したパルボウイルス様因子を組織培養で増殖さ
せ、それを不活化した抗原を豚下痢症ワクチンの有効成
分とする手段を採用したものである。以下その詳細を述
べる◇ まず、この発明のパルボウイルス様因子は豚腎臓（ＳＫ
）培養細胞、豚甲状腺（ＰＴ）培養細胞および豚腎株化
（ＥＳＫ）継代培養細胞のいずれの培養細胞においても
増殖するので、既知の方法によりこれらの単層細胞を調
製し、これにパルボウイルス様因子を接種し、たとえば
３７℃で約６０分設着させた後、１０％トリプトース・
フォスフエイト・ブロス、Ｌ−グルタミンを含有するイ
ーグルＭ Ｅ Ｍ培地を加え、６〜１４日間３７°Ｃて
培養する。この際０．５〜１．０γ／ ｍ １のトリプ
シンを培地に加えてもよい。このような操作を経て得ら
れたウィルス含有培養液にホルマリンを０．２容量％添
加し、３０℃で７日量感作して不活化し、不活化された
ウィルス液をそのまま豚下痢症ワクチンとするか、また
は抗原性の促進のためにアルミニウムゲルアジュバント
を２０容量％以下、または鉱油、有機物油もしくは親水
性油性のアジュバントを１０〜７０容量％を加えてアジ
ュバント添加不活化ワクチンとすることができる。
パルボウイルス様因子Ｈ−４５株を初代ＰＴ培養細胞に
接種後トリプシン（Ｔｙｐｅｌｌ［）を０．５γ／ｍｌ
添加したイーグルＭＥＭ培地（トリプトース・フォスフ
エイト・ブロス、Ｌ−グルタミン含有）を加え、３７℃
で６日間培養して、ＨＡ力価２０４８倍のウィルス含有
培養液を得た。これにホルマリンを０．２容量％加えて
３０℃で７日間放置し、ウィルスを不活化し、さらにり
ん酸アルミニウムゲルアジュバントを２０容量％、親水
性油性アジュバントを７０容量％それぞれ添加した二種
類の不活化ワクチンを調製した。これらワクチンを１力
月齢の豚に２ｍｌ ずつ３週間隔で２回皮下に注射し
て免疫の産生を調べた。その結果は第１表に示したが、
りん酸アルミニウムゲル−（Ａ Ｐ Ｇ ） ｆＡ 加
ワクチンで約３カ月以上、親水性油性アジュバン）（Ｏ
ＩＷ）添加ワクチンで約５カ月以上それぞれの免疫が持
続されることがわかった。また、親水性油性アジュバン
ト添加ワクチンを初乳未摂取初生豚８頭のうち６頭に生
後２４時間と１６日齢第１表 備考：注射量２ｍｌずつ、３週間隔で２回皮下時の２回
に２ｍｌ ずつを皮下に注射し、その後３０日齢時にパ
ルボウイルス様因子を１０４°５ＴＣＩＤ５゜／ｍｌ含
む培養液３ｍｌでほかの対照用の２頭と共１こ経鼻攻撃
し、下痢症状の発現と糞便からのウィルスの排泄を攻撃
後７日間について調査した。その結果は第２表に示した
が、豚番号２０〜２５の免疫群の６頭全例には下痢症状
を示したものはなく、また攻撃後１日目に糞便からウィ
ルスが検出第２表 された豚番号２３の豚を除いて免疫群の糞便からのウィ
ルス排泄は認められなかった。一方、豚番号２６および
２７の攻撃対照群の２頭の豚のうち１頭は攻撃２日目か
ら下痢症状が認められ、その下痢は４日間続いた。他の
１頭は下痢症状は現われなかった。しかしこれら２頭の
糞便からは攻撃ウィルス様因子感染症に対する免疫が付
与されることが明らかとなった。
接種後トリプシン（Ｔｙｐｅｌｌ［）を０．５γ／ｍｌ
添加したイーグルＭＥＭ培地（トリプトース・フォスフ
エイト・ブロス、Ｌ−グルタミン含有）を加え、３７℃
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培養液を得た。これにホルマリンを０．２容量％加えて
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性油性アジュバントを７０容量％それぞれ添加した二種
類の不活化ワクチンを調製した。これらワクチンを１力
月齢の豚に２ｍｌ ずつ３週間隔で２回皮下に注射し
て免疫の産生を調べた。その結果は第１表に示したが、
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ＩＷ）添加ワクチンで約５カ月以上それぞれの免疫が持
続されることがわかった。また、親水性油性アジュバン
ト添加ワクチンを初乳未摂取初生豚８頭のうち６頭に生
後２４時間と１６日齢第１表 備考：注射量２ｍｌずつ、３週間隔で２回皮下時の２回
に２ｍｌ ずつを皮下に注射し、その後３０日齢時にパ
ルボウイルス様因子を１０４°５ＴＣＩＤ５゜／ｍｌ含
む培養液３ｍｌでほかの対照用の２頭と共１こ経鼻攻撃
し、下痢症状の発現と糞便からのウィルスの排泄を攻撃
後７日間について調査した。その結果は第２表に示した
が、豚番号２０〜２５の免疫群の６頭全例には下痢症状
を示したものはなく、また攻撃後１日目に糞便からウィ
ルスが検出第２表 された豚番号２３の豚を除いて免疫群の糞便からのウィ
ルス排泄は認められなかった。一方、豚番号２６および
２７の攻撃対照群の２頭の豚のうち１頭は攻撃２日目か
ら下痢症状が認められ、その下痢は４日間続いた。他の
１頭は下痢症状は現われなかった。しかしこれら２頭の
糞便からは攻撃ウィルス様因子感染症に対する免疫が付
与されることが明らかとなった。
以上述べたことからこの発明のワクチンはつぎのような
効果を現わす。すなわち、パルボウイルス様因子に対す
る抗体を保有しない１〜３力月齢の豚に２ｍｌ ずつ２
〜４週間隔で皮下もしくは筋肉内に２回注射すれば豚は
何等の異常を示さず、２回注射後１週目にはＨＩ抗体価
１２８〜４０９６倍の抗体を産生じ、このようにワクチ
ン注射を受けた豚はパルボウイルス様因子の経鼻接種に
よる下痢の発病を充分な有効性と安全性のもとに阻止す
るのである。したがって、パルボウイルス様因子に起因
する豚の下痢症を有効かつ安全に予防し、従来の養豚場
経営の不安をも充分に解消することができるので、この
発明の意義はきわめて大きいということができる。
効果を現わす。すなわち、パルボウイルス様因子に対す
る抗体を保有しない１〜３力月齢の豚に２ｍｌ ずつ２
〜４週間隔で皮下もしくは筋肉内に２回注射すれば豚は
何等の異常を示さず、２回注射後１週目にはＨＩ抗体価
１２８〜４０９６倍の抗体を産生じ、このようにワクチ
ン注射を受けた豚はパルボウイルス様因子の経鼻接種に
よる下痢の発病を充分な有効性と安全性のもとに阻止す
るのである。したがって、パルボウイルス様因子に起因
する豚の下痢症を有効かつ安全に予防し、従来の養豚場
経営の不安をも充分に解消することができるので、この
発明の意義はきわめて大きいということができる。
Claims (1)
- 豚の下痢便から分離したパルボウイルス様因子を組織培
養して増殖し不活化して得られる抗原を有効成分とした
ことを特徴とする豚下痢症ワクチン。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP19097786A JPH07116054B2 (ja) | 1986-08-12 | 1986-08-12 | 豚下痢症ワクチン |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP19097786A JPH07116054B2 (ja) | 1986-08-12 | 1986-08-12 | 豚下痢症ワクチン |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6344533A true JPS6344533A (ja) | 1988-02-25 |
| JPH07116054B2 JPH07116054B2 (ja) | 1995-12-13 |
Family
ID=16266816
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP19097786A Expired - Fee Related JPH07116054B2 (ja) | 1986-08-12 | 1986-08-12 | 豚下痢症ワクチン |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH07116054B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH02255319A (ja) * | 1989-03-30 | 1990-10-16 | Kyoraku Co Ltd | 輸液用プラスチック容器の製造方法 |
-
1986
- 1986-08-12 JP JP19097786A patent/JPH07116054B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH02255319A (ja) * | 1989-03-30 | 1990-10-16 | Kyoraku Co Ltd | 輸液用プラスチック容器の製造方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH07116054B2 (ja) | 1995-12-13 |
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