RU2404804C2 - Инактивированная вакцина против вируса гепатита а - Google Patents

Abstract

Изобретение относится к средствам иммунопрофилактики инфекционных заболеваний, в частности к производству вакцинных препаратов против вируса гепатита А, и может быть использовано в медицинской и микробиологической промышленности и противоэпидемической практике. Антиген вируса гепатита А получен на основе штамма вируса гепатита А № ВБА-07 на перевиваемых клетках почек зеленой мартышки 4647 при следующем содержании компонентов вакцины в одной дозе: антиген ВГА не менее 80 ИФА ед. для взрослых или не менее 40 ИФА ед. для детей, формальдегид не более 0,15 мг/мл, алюминий гидроксид (AL⁺³) от 0,35 до 0,65 мг/мл. Заявляемая вакцина АЛЬГАВАК имеет более простую технологию и короткий цикл ее получения за счет использования быстрорастущего и высокопродуктивного штамма-продуцента антигена вируса гепатита А с сохранением высокой иммуногенной активности. 3 табл.

Description

Изобретение относится к средствам иммунопрофилактики инфекционных заболеваний, в частности к производству вакцинных препаратов против вируса гепатита А, и может быть использовано в медицинской и микробиологической промышленности и противоэпидемической практике.

Известно, что специфического лечения вирусного гепатита А не разработано. Гепатит А в 70-80% случаев протекает в легкой форме, но у людей старше 50 лет возможно развитие фульминантных форм заболевания, заканчивающихся в подавляющем большинстве случаев летальным исходом. Кроме того, в связи с большой продолжительностью острого периода болезни и периода реконвалесценции, массовые вспышки гепатита А приносят значительный экономический ущерб. Единственным эффективным способом по снижению заболеваемости гепатита А является массовая профилактическая вакцинация населения эндемичных территорий.

Из существующих вакцинных препаратов против гепатита А наибольшее распространение получили инактивированные вакцина как наиболее безопасные и обладающие слабой реактогенностью и достаточной иммуногенностью.

Единственной отечественной вакциной против гепатита А является препарат «ГЕП-А-ин-ВАК», выпускаемый ЗАО «Вектор-БиАльгам» (НСО, Кольцово) с 1997 года. Препарат по своим качествам соответствует требованиям ВОЗ и по основным характеристикам не уступает зарубежным аналогам.

Известна инактивированная вакцина АВАКСИМ (J. Graff et al., "Nucleotide Sequence of Wild-Type Hepatitis A Vims GBM in Comparison with Two Cell Culture-Adapted Variants", J. Virol., 68(1): 548-554 (Jan., 1994) для профилактики вируса гепатита А (владелец лицензии на производство и продажу препарата ПАСТЕР МЕРЬЕ Сэром & Ваксэн, Франция). В одной дозе (0,5 мл) вакцины содержится: - вирус гепатита А (штамм вируса GBM, культивированный на диплоидных клетках человека (MRC5), инактивированный формальдегидом 160 антигенных единиц (в условиях отсутствия международного референс-стандарта, содержание антигена выражено с использованием внутреннего референс-стандарта).

- Гидроокись алюминия (выраженная в Al) 0,3 мг

- 2-феноксиэтанол 2,5 мкл

- Формальдегид 12,5 мкг

- Среда Hanks 199 до 0,5 мл

- Соляная кислота или гидроокись натрия для доведения рН.

Среда Hanks 199 является комплексной смесью аминокислот, минеральных солей, витаминов и других ингредиентов, растворенных в воде для инъекций; доведение рН осуществляется путем добавления соляной кислоты или гидроокиси натрия.

Известна цельновирионная инактивированная вакцина ВАКТА (производитель компания MERCK & CO., Inc., США) против вирусного гепатита A (Hennessey Jr., et al., Evaluation of the Purity of a Purified, Inactivated Hepatitis A Vaccine (VAQTA.TM.), Vaccine, vol. 17, p.2830-2835 (1999); патент США №4164566, МПК А61K 39/29, опубл. 14.08.1979.), полученная путем культивирования вируса (штамм вируса CR326) в диплоидных клетках фибробластов человека MRS-5 (с последующей его очисткой, инактивацией формалином и адсорбцией на алюминия гидроксиде). Состав вакцины:

- инактивированные, очищенные вирионы вируса гепатита А на основе (инактивированный вирус гепатита А 50 ед. для взрослых и 25 ед. для детей);

- формальдегид: <0,8 мкг/мл;

- суммарный белок: <0,1 мкг/мл;

- клеточная ДНК: <4 пкг/мл;

- бычий сывороточный альбумин: <0,1 нг/мл;

- алюминия гидроксида: 0,45 мг/мл;

- борат Na (рН-стабилизатор): 70 мкг/мл;

- остальные компоненты: <10 pph.

Курс иммунизации состоит из 2 прививок - вакцинации и ревакцинации.

Известна инактивированная вакцина («Хаврикс 720» и «Хаврикс 1440», производитель СмитКляйн Бичем, Бельгия) для профилактики вируса гепатита А (Andre, et al., "Inactivated Candidate Vaccines for Hepatitis A", Progress in Medical Virology, 37: 72-95, (1990), cited by other), патент США №6991929, МПК C12N 7/02, опубл. 31.02.2006; Product Insert, "HA:L3A Prescribing Information, Hepatitis A Vaccine, Inactivated Havrix", Distributed by SmithKline Beecham Pharmaceuticals (Feb., 1995). Вакцина имеет следующий состав:

- инактивированные, очищенные вирионы вируса гепатита А (на основе штамма НМ-175 в диплоидных клетках фибробластов человека MRS-5);

- формальдегид 100 мкг;

- алюминия гидроксида: 0,5 мг;

- 2-феноксиэтанол (консервант): 0,5% в отношении веса к объему;

- полисорбат 20 (стабилизатор): 0,3% в отношении веса к объему;

- сульфат неомицина (антибиотик): следовые количества.

Наиболее близким аналогом (прототипом) является инактивированная вакцина (Инструкция по применению вакцины Геп-А-ин-ВАК, производитель ЗАО «Вектор-БиАльгам», Российская Федерация, www.bialgam.ru) для профилактики вируса гепатита А. Состав вакцины (консерванты отсутствуют):

- инактивированные, очищенные вирионы вируса гепатита А, полученные на основе штамма HAS-15 (ЛБА-86) в культуре перевиваемых клеток почек зеленой мартышки 4647;

- формальдегид: <150 мкг/мл;

- алюминия гидроксида: от 0,35 до 0,65 мг/мл;

- суммарный белок: <9 мкг/мл;

- клеточная ДНК: <100 пкг/мл;

- бычий сывороточный альбумин: <50 нг/мл.

Выше приведенные вакцины-аналоги зарегистрированы и используются в Российской Федерации. Сравнительные клинические испытания показали, что все указанные вакцины создают длительный, устойчивый иммунитет к последующему, возможному, заражению вирусом гепатита А. Профилактические свойства и схемы применения данных вакцин практически не отличаются между собой; уровень сероконверсии после полного курса вакцинации всех указанных вакцин до 100%; в отличие от западных аналогов, в составе отечественной вакцины «ГЕП-А-ин-ВАК» не содержится дополнительных консервантов, стабилизаторов и антибиотиков, что делает препарат менее реактогенным и более безопасным для широкого использования, особенно среди лиц, страдающих различными видами аллергий. Вакцины предназначены для иммунизации как взрослых, так и детей. Курс вакцинации состоит из двух внутримышечных инъекций с интервалом 6-12 («ГЕП-А-ин_ВАК», «Хаврикс 720» и «Хаврикс 1440») или 6-18 месяцев («Аваксим», «ВАКТА»). Вакцину «ГЕП-А-ин-ВАК» применяют у детей, начиная с 3 лет, вакцины «Аваксим» и «ВАКТА» - с 2 лет, «Хаврикс 720» - с 1 года. Вакцины против гепатита А обладают слабыми реактогенными свойствами.

Основными недостатками выше приведенных вакцин-аналогов, в том числе и прототипа, является длительный цикл приготовления вакцины, в частности из-за продолжительного времени культивирования штамма вируса гепатита А с целью получения антигена. Время культивирования при 37°С штаммов HAS -15/4647 (ЛБА-86) на перевиваемой культуре клеток почек зеленой мартышки 4647, GBM на диплоидных клетках фибробластов человека (MRC5), CR326 в диплоидных клетках фибробластов человека MRS-5 и НМ-175 в культуре клеток африканской зеленой мартышки AGMK или в диплоидных клетках фибробластов человека MRS-5 составляет не менее 16-18 суток.

Техническим результатом предлагаемого изобретения является создание такой вакцины, которая имела бы более простую технологию и короткий цикл ее получения за счет использования быстрорастущего и высокопродуктивного штамма-продуцента антигена вируса гепатита А с сохранением высокой иммуногенной активности.

Указанный технический результат достигается тем, что в инактивированной вакцине против вируса гепатита А, включающей антиген вируса гепатита А с содержанием в одной дозе формальдегида не более 0,15 мг/мл и алюминия гидроксида (AL⁺³) от 0,35 до 0,65 мг/мл, согласно изобретению, антиген вируса гепатита А получен на основе штамма вируса гепатита А № ВБА-07 на перевиваемых клетках почек зеленой мартышки 4647 при следующем содержании компонентов вакцины в одной дозе:

антиген ВГА не менее 80 ИФА ед. для взрослых,

или не менее 40 ИФА ед. для детей,

формальдегид не более 0,15 мг/мл,

алюминий гидроксид (AL⁺³) от 0,35 до 0,65 мг/мл.

Штамм ВГА № ВБА-07 обладает высокой продуктивностью антигена ВГА и короткими сроками (6-8 суток) культивирования ВГА, нарабатываемого на перевиваемой культуре клеток почки зеленой мартышки 4647. Штамм вируса гепатита А № ВБА-07 для приготовления вакцинных препаратов депонирован в коллекции культур микроорганизмов ЗАО «Вектор-БиАльгам», зарегистрирован под № VB-17 17 июля 2007 г. и в государственной коллекции вирусов РФ ГУНИИ Вирусологии им. Д.И.Ивановского зарегистрирован под №2438 22 апреля 2008 г. Полная структура штамма депонирована в коллекции Genebank, как VBA-07 № EU 251188.

Характеристика клеточной культуры 4647:

Клетки 4647 (перевиваемые клетки почек зеленой мартышки) получены путем серийных пассажей из клеток посевного банка, хранящегося в ИПВЭ РАМН и аттестованы во ФГУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора и ГИСК им. Л.А.Тарасевича для производства вакцинных препаратов. Линия клеток 4647 адаптирована к среде Игла MEM с добавлением 10% сыворотки крупного рогатого скота и представляет собой монослойную культуру, состоящую в основном из эпителиоподобных с небольшим количеством фибробластоподобных клеток. После сформирования монослоя на 3-4 сутки клетки перевиваются 1:3-1:4. Сохраняется культура обычным замораживанием, после восстановления жизнеспособность определяется на уровне 82-85%. Рабочий банк клеток 4647 приготовлен на уровне 101 пассажа в количестве 150 ампул по 4 млн клеток в каждой ампуле. Видовая принадлежность клеток (клетки зеленой мартышки) подтверждена кариологической характеристикой, присутствием маркерных хромосом и изучением изоферментов, электрофоретическая подвижность которых в полиакриламидном геле относится к «быстрому» типу, характерному для клеток приматов. Исследование клеток 4647 проведено в контрольной международной лаборатории Великобритании (Лондон) микробиологическим методом и с помощью генной пробы и получено заключение об отсутствии в них микоплазм. На основании проведенных исследований установлено, что рабочий банк клеток 4647, приготовленный на уровне 101 пассажа из посевных клеток ИПВЭ РАМН может быть использован для производства вакцины против гепатита А, учитывая, что препарат в процессе производства проходит очистку и подвергается инактивации.

Иммунобиологические свойства штамма ВБА-07

Для сравнительного исследования продуктивности штаммов ВБА-07 и «HAS - 15/4647» инфицировали клетки 4647. Множественность заражения соответствовала 0,01-0,1 ТкИД_{50/клетку}. Клетки отбирали на 4, 6, 8, 10 и 12 сутки культивирования. Для определения оптический плотности и титров антигена использовали тест-системы «Вектогеп А-антиген» (производство ЗАО "Вектор-БиАльгам"). Результаты представлены в таблице 1.

Таблица 1
Кинетика накопления антигена ВГА в клетках 4647 инфицированных штаммами «HAS - 15/4647» и ВБА-07
Штамм	Срок культивирования, сутки
	0	4	6	8	10	12
Оптическая плотность
«HAS-15/4647»	0.008	0.010	0.025	0.080	0.210	0.590
ВБА-07	0.005	0.155	0.850	1.145	0.920	0.755
Титры инфекционности (ИД50/мл)
«HAS-15/4647»	н.о.*	н.о.	н.о.	2×102	6×103	4×104
ВБА-07	н.о.	н.о.	1×107	5×107	2×107	0,5×106
Титры антигена ВГА
«HAS-15/4647»	н.о.	н.о.	н.о.	н.о.	1:20	1:40
ВБА-07	н.о.	н.о.	1:320	1:640	1:320	1:40
Примечание: * - не определялись; оптическая плотность клеток в контрольных флаконах (без вируса) демонстрировали фоновые показатели.

Как видно из данных таблицы 1, титры антигена ВГА (шт. ВБА-07) составили 1:320 и 1:640 на 6-8 сутки, относительно шт. «HAS - 15/4647» - титры только на 12 сутки (срок наблюдения) достигали значения 1:40. Инфекционные титры на те же сроки составляли 1×10⁷ ИД₅₀/мл и 5×10⁷ ИД₅₀/мл (шт. ВБА-07) и 4×10⁴ («HAS - 15/4647»). Таким образом, шт. ВБА-07, прошедший адаптационные пассажи на клетках 4647, при культивировании на культуре клеток 4647, показывает значительно лучшие результаты, чем используемый в настоящее время для производства вакцины гепатита А («ГЕП-А-ин-ВАК») «HAS - 15/4647» (ЛБА-86), как по продуктивности, так и по срокам максимального накопления.

Таким образом, штамм ВБА-07, имеет высокую продуктивность и низкие сроки максимального накопления.

Описание технологии получения инактивированной вакцины против гепатита А. Для получения вакцины вируса гепатита А (ВГА) имеется банк с производственным штаммом ВБА-07 (ПШ), из которого в дальнейшем создается банк с посевным вирусом (ПВ) первого и второго пассажа. Производственный штамм хранят при температуре от минус 18 до 20°С. Посевной вирус 1-го пассажа получают путем заряжения культуры продуцента перевиваемых клеток 4647 посевным штаммом ВГА. Для культивирования используют среду MEM Игла с добавлением 2% сыворотки плода коров и 1% сыворотки новорожденных телят. Инкубацию осуществляют при 37°С. Срок культивирования составляет 7 суток. Посевной вирус 1-го пассажа представляет собой обломки клеток, содержащие ВГА, образовавшиеся в результате пятикратного оттаивания-замораживания вируссодержащих клеток. В полученном вируссодержащем материале методом ИФА определяют содержание вирусного антигена и инфекционный титр.

Для получения вируссодержащей жидкости для вакцины используют посевной вирус второго пассажа. Посевной вирус второго пассажа представляет собой разрушенные замораживанием-оттаиванием клетки с вирусом в культуральной жидкости. Посевной вирус 2-го пассажа получают путем заражения культуры продуцента посевным вирусом 1-го пассажа. Для культивирования используют среду MEM Игла с добавлением 2% сыворотки плода коров и 1% сыворотки новорожденных телят. Срок культивирования составляет 7 суток. Посевной вирус второго пассажа хранят при температуре от минус 18 до минус 20°С.

Для получения вируссодержащей суспензии используют посевной вирус 2-го пассажа, инфекционный титр которого должен быть не ниже 10^5,5 ТкИД₅₀/см³. Посевной вирус разводят средой Игла MEM до концентрации, обеспечивающей множественность заражения 0,01-0,1 ТкИД₅₀/□л. Инкубацию осуществляют в течение 6-7 суток. По окончании инкубации культуральную жидкость удаляют, клетки, содержащие вирус, диспергируют 0,02% раствором Версена с добавлением 0,01% химопсина.

Клетки собирают в минимальном объеме раствора Версена с добавлением 5% сыворотки крови плода коров и передают для очистки и концентрирования ВГА. Далее суспензию клеток центрифугируют при 3000 об/мин при 4°С и к осадку клеток добавляют пять объемов (по отношения к объему осадка) лизирующего раствора (1%-ный раствор неионного детергента Твин-80 в 0,01 М фосфатно-солевом буфере (ФСБ), рН 7,6), подогретого до 37°С. Лизис клеток проводят при 37°С в термостатированном шейкере в течение 1 часа. Клеточный лизат освобождают от ядер центрифугированием при 1700×g, в течение 10 мин при температуре 4°С. Надосадочную жидкость осветляют центрифугированием при 13000×g в течение 15 мин при температуре 4°С. Осадок отбрасывают, а надосадочную жидкость подвергают доочистке от балластных высокомолекулярных клеточных компонентов в режиме ультрацентрифугирования, пропуская его через трехслойную сахарозную подушку, состоящую из 10, 20 и 30% пятимиллилитровых слоев сахарозы, используя ротор SW-28 на ультрацентрифуге «Beckman» в течение 12 часов при 80000×g. К полученному первичному концентрату вируссодержащей жидкости приливают раствор 25%-ного сульфата стрептомицина до конечной концентрации 0,5% при перемешивании и выдерживают 15 мин при температуре 4°С. Осветляют концентрат центрифугированием при 13000×g, в течение 15 мин и 4°С на роторе SA-20. Осадок отбрасывают.

Для сбора очищенного ВГА из буферного раствора, содержащего 1% Твин 80, супернатант наслаивают на 8 мл 20%-ной сахарозы и центрифугируют при 80000×g в течение 12 часов и 4°С. Осадок перерастворяют в 0,01М ФСБ. Осветляют концентрат центрифугированием при 13000×g, в течение 15 мин и 4°С, затем концентрат фильтруют через стерилизующий фильтр с диаметром пор 0,2 мкм. Полученный вирусный концентрат инактивируют в присутствии 0,1%-ного формальдегида в течение 14 суток при 37°С. После проверки препарата на полноту инактивации (специфическую безвредность) полуфабрикат вакцины сорбируют на геле алюминия гидроксида, доводят до конечного объема и разливают по ампулам, шприцам или флаконам.

Ниже приведены примеры составов вакцины «АЛЬГАВАК».

Пример 1. Состав вакцины «АЛЬГАВАК» против вируса гепатита А для взрослых, в одной дозе (1 мл):

антиген ВГА не менее 80 ИФА ед.

формальдегид не более 0,15 мг/мл

алюминий гидроксид (AL⁺³) от 0,35 до 0,65 мг/мл

Пример 2. Состав вакцины «АЛЬГАВАК» против вируса гепатита А для детей, в одной дозе (0,5 мл):

антиген ВГА не менее 40 ИФА ед.

формальдегид не более 0,15 мг/мл

алюминий гидроксид (AL⁺³) от 0,35 до 0,65 мг/мл

В вакцине (примеры 1 и 2) содержится:

- общего белка менее 0,2 мкг/мл;

- бычьего сывороточного альбумина менее 50 нг/мл;

- остаточная клеточная ДНК не более 100 пкг/мл.

Доклинические исследования показали, что вакцина гепатита А - «Альгавак» (культуральная, очищенная, концентрированная, инактивированная, жидкая, адсорбированная на алюминии гидрооксиде), достоверно вызывает формирование специфического клеточного и гуморального иммунитета у лабораторных животных при двукратном введении. В ответ на введение вакцины экспериментальным животным не происходит необратимых изменений со стороны иммунной системы, т.е. препарат не оказывает иммуносупрессирующего действия. Вакцина не обладает токсичным для исследованных видов лабораторных животных действием, не вызывает сдвигов гематологических показателей, апирогенна, не оказывает патологического влияния на ЦНС, не приводит к аллергизации организма.

В процессе клинических исследования проводили сравнение реактогенности нового вакцинного препарата «Альгавак» и зарегистрированной вакцины «ГЕП-А-ин-ВАК» проводили на добровольцах на основании регистрации местных и общих реакций в течение 5 суток после иммунизации. Результаты наблюдения приведены в таблице 2.

Таблица 2
Характер и частота местных реакций у привитых вакцинами против вируса гепатита А - «Альгавак» и «ГЕП-А-ин-ВАК»
«Альгавак»						«ГЕП-А-ин-ВАК»
Болезненность		Гиперемия		Инфильтрат		Болезненность		Гиперемия		Инфильтрат
Абс.	%	Абс	%	Абс.	%	Абс.	%	Абс.	%	Абс.	%
6	20	4	13,3	1	3,3	2	6,7	1	3,3	-	-

Как видно из представленных данных, использование препарата «Альгавак» характеризовалось более частым развитием реакций в месте введения, что, вероятно, было обусловлено большим содержанием специфического антигена в исследуемом препарате. Однако частота болезненности при инъекциях «Альгавака» достоверно не превышала данную реакцию при введении препарата «ГЕП-А-ин-ВАК» (критерий Фишера, р=0,254). Несмотря на то, что в контрольной группе развитие гиперемии отмечалось реже (1 случай), но данные различия статистически не достоверны (критерий Фишера, р=0,353). Следует отметить, что местные реакции в обеих группах имели слабовыраженный характер и непродолжительность действия. Болезненность в месте инъекции была незначительна и самостоятельно проходила через 1-2 дня. Очаги гиперемии имели округлую форму и в диаметре не превышали 4 см. Данные изменения исчезали на вторые - третьи сутки после прививки. Лишь у единственного добровольца, привитого вакциной «Альгавак» отмечено появление местной реакции в виде инфильтрата диаметром до 1 см, сопровождавшегося гиперемией в области инъекции. Данные изменения самопроизвольно разрешились к 5-м суткам наблюдения.

Таким образом, частота развития общих и местных реакций, за исключением болезненности в месте инъекции, у иммунизированных вакцинами гепатита А «Альгавак» и «ГЕП-А-ин-ВАК» не отличается. Полученные данные свидетельствуют о слабых реактогенных свойствах исследуемого препарата «Альгавак».

Сравнительный анализ иммуногенных свойств препаратов «Альгавак» и «ГЕП-А-ин-ВАК» проводили на основании изучения индукции специфического гуморального ответа. При исследовании сывороток привитых на 10-е сутки после иммунизации только у одного из добровольцев, вакцинированного «Альгавак», выявили наличие специфических IgM. Через 14 и 30 суток после введения исследуемой и контрольной вакцины продукция иммуноглобулинов класса М были ниже порога чувствительности используемых иммуноферментных тест-систем.

Динамика развития специфического IgG-ответа в обеих группах представлена в таблице 3.

Результаты исследования показывают, что при использовании вакцины «Альгавак» сероконверсия наблюдается у 50% привитых уже через 14 суток после вакцинации, в то время как специфический IgG-ответ зарегистрирован только у 20% добровольцев контрольной группы, что достоверно ниже (χ2=5.93, р=0,0304). Более того, титр антител у привитых «Альгавак» был статистически выше, чем в контрольной группе (р=0,036).

Через 30 суток после введения препаратов «Альгавак» и «ГЕП-А-ин-ВАК» процент сероконверсии достигал 96,7% и 93,3% соответственно, что статистически не различается. Однако при сравнении титра специфических антител между группами найдены статистически достоверные отличия (р=0,018).

Анализ серологических данных показывает, что препарат «Альгавак» обладает высокой иммуногенной активностью, не уступающей используемому вакцинному препарату «ГЕП-А-ин-ВАК». В то же время на фоне введения исследуемой вакцины специфический гуморальный иммунитет развивается достоверно раньше по сравнению с контрольной группой.

Таким образом, результаты клинических испытаний гепатита А культуральной очищенной концентрированной адсорбированной инактивированной жидкой «Альгавак» свидетельствуют о ее слабой реактогенности при однократном введении в дозе 1 мл, содержащей 160 ИФА единиц антигена вируса гепатита А. Несмотря на то, что препарат «Альгавак» содержит большее количество специфического антигена, чем препарат «ГЕП-А-ин-ВАК», частота и относительный риск развития местных реакций у добровольцев обеих групп достоверно не различаются. Следует подчеркнуть, что эти реакции отличались слабой выраженностью и продолжительностью (1-2 дня).

В целом, показатели реактогенности «Альгавак» сопоставимы с частотой развития общих реакций на фоне введения вакцин гепатита А, выпускаемых зарубежными производителями, - «Хаврикс», «ВАКТА», «Аваксим» [1-4].

Применение препарата «Альгавак» безопасно, что подтверждено изучением биохимического профиля привитых и динамики специфического гуморального ответа. Исследование биохимических показателей у лиц, иммунизированных вакциной «Альгавак», доказало отсутствие значимого влияния препарата на белково-синтетическую функцию печени, билирубиновый обмен и уровень трансаминаз. Дополнительно показано, что при использовании исследуемого препарата на 14 и 30-е сутки после иммунизации не определяются специфические IgM.

Выявлено, что введение препарата «Альгавак» вызывает сероконверсию уже на 14-е сутки у 50% привитых, а к 30-м суткам процент сероконверсии достигал 96,7%. Наблюдавшийся уровень сероконверсии сопоставим с литературными данными по оценки иммуногенности однократного введения вакцин «Хаврикс» и «ВАКТА» [5]. При сравнении серологических показателей в исследуемой и контрольной группах, доказано, что вакцина «Альгавак» обладает большей иммуногенной активностью, чем препарат «ГЕП-А-ин-ВАК».

Преимуществом заявляемой вакцины АЛЬГАВАК перед известными аналогами является более простая технология и более короткий цикл (на 10-12 суток) ее получения за счет использования быстрорастущего и высокопродуктивного штамма-продуцента (ВБА-07) антигена вируса гепатита А с сохранением высокой иммуногенной активности. По иммуногенности, чистоте препарата, т.е. содержанию остаточных примесей (общего белка, БСА и клеточной ДНК) и отсутствию консервантов заявляемая вакцина АЛЬГАВАК не уступает инактивированной вакцине ВАКТА (производитель компания MERCK & CO., Inc., США)

Источники информации

1. Lee SD, Chan CY, Yu MY et al., Am J Gastroenterol 1996; 97: 1360-2.

2. Werzberger A, Menseh В, Kuter В et al. New Engi J Med 1992; 327 (7): 453-7.

3. Икоев В.К., Елыпина Г.А., Горбунов М.А. и др. Биопрепараты, 2001; 2: 18-21.

4. Castillo de Febres O, Chacon de Petrola M, Laddy Casanova de Escalona et al., Vaccine 18. 2000; 656-64.

5. Ashur Y, Adier R, Rowe M, Shouval D. Vaccine 17. 1999; 2290-6.

Claims (1)

1. Инактивированная вакцина против вируса гепатита А, включающая антиген вируса гепатита А, формальдегид и алюминия гидроксид (AL⁺³) с содержанием в одной дозе формальдегида не более 0,15 мг/мл и алюминия гидроксида (AL⁺³) от 0,35 до 0,65 мг/мл, отличающаяся тем, что антиген вируса гепатита А получен на основе штамма вируса гепатита А №ВБА-07 на перевиваемых клетках почек зеленой мартышки 4647 при содержании антигена ВГА не менее 80 ИФА ед. для взрослых или не менее 40 ИФА ед. для детей в одной дозе вакцины.