JPS63284199A - k−カゼイングリコマクロペプチドの製造法 - Google Patents

k−カゼイングリコマクロペプチドの製造法

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JPS63284199A JP62118611A JP11861187A JPS63284199A JP S63284199 A JPS63284199 A JP S63284199A JP 62118611 A JP62118611 A JP 62118611A JP 11861187 A JP11861187 A JP 11861187A JP S63284199 A JPS63284199 A JP S63284199A
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Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 崖U冴旧1土顆 本発明は、シアル酸測定用キットに使用されるシアル酸
結合型シアル酸標準組成物として、或は感染防御剤とし
て利用されるκ−カゼイングリコマクロペプチドの製造
法に関する。
従  ′ びその0 市 に−カゼイングリコマクロペプチド(以下に一カゼイン
GMPと略記する)は、牛乳のに一カゼインにレンネッ
ト又はペプシンを作用させた時に生成するシアル酸結合
ペプチドであって、チーズホエー中に含まれていること
が、従来から知られている。
従来、に−カゼインGMPの製造法としては、実験室的
には、牛乳より単離したに一カゼインを脱イオン水に溶
解したものにペプシンを作用させた後、トリクロル酢酸
を加えてバラ−に一カゼイン画分を沈澱させ、次いで得
られた上清を脱イオン水に対して透析して脱塩した後、
凍結乾燥することにより調製する方法〔スタン等「プル
テインオブエクスペリメンタルバイオロジーアンドメデ
イシンJ (Bulletin of Experim
ental Biologyand Medicine
) 96.889 (1983)) 、または、上記に
一カゼインを脱イオン水に溶解し、該溶液のpiを6.
7に調整した後レンネットを作用させ、次いで更にpH
を4.6に調整してバラ−に一カゼインを沈澱させて除
去し、得られた上滑を透析に付して脱塩した後、凍結乾
燥して調製する方法〔アカデミツクブレス社発行「ミル
クプロティン」(旧1kProLein) pp200
)等が行われていた。
しかし、これらの方法は、実験室的のものであるから、
当然大量生産には適さない。
一方、に−カゼインGMPの産業上の利用性が従来知ら
れていなったため、その大量生産のための方法について
も検討されていなかった。
ところが、最近になってに一カゼインGMPが犬の食欲
を低下させる作用を有すること〔スタン等、「プルテイ
ンオプエクスペリメンタルバイオロジーアンドメデイシ
ンJ (Bulletin of[!xperis+e
ntal Biology and Medicine
) 96+  889(1983) )が報告されたこ
とから、肥満防止用食品素材として利用し得ることが判
った。
さらに、に−カゼインGMPは、シアル酸測定用キット
の標準組成物としても極めて有効であることも判明し、
その他の生理的活性が期待し得ることから、その工業的
規模での生産が要望されるようになった。
日が ° しようと る諜 本発明は、畝上の状況に鑑みなされたものであって、に
−カゼインGMPを工業的規模で効率よく製造するため
の方法を提供することを課題とする。
以下本発明の詳細な説明する。
又皿曵盪底 本発明の特徴は、レンネットカゼインカードを調製する
際に得られる排液(ホエー)を原料として用い、該排液
のpHを酸性領域に調整し、生成する沈澱を除去し、次
いで得られる上澄を脱塩処理することにより、に−カゼ
インGMPを製造することにある。
蕾 を ”するための に−カゼインGMPを安価に大量生産するためには、原
料の選択が極めて重要であることから、本発明では種々
検討の結果、酸カゼイン又はソーダカゼイン或はカルシ
ウムカゼイン等をレンネット又はペプシン或は両者で凝
乳酵素処理してレンネットカゼインカードを形成する際
に得られる排液(ホエー)を原料として用い、該排液中
に含まれるに一カゼインGMPを回収することにより、
その大量生産を有利に行うことを可能とした。
従来からチーズホエー中にGMPが含まれることが知ら
れているため、このホエーを原料とすることが考えられ
るが、該ホエーにはGMPのほかに各種のホエータンパ
ク質が含まれているため高純度のGMPを採取すること
は実際上困難である。
また、一方、に−カゼインを牛乳より工業的に単離する
方法(特開昭59−91848号)が提案されているが
、この方法ではゲル濾過操作を必要とすることからコス
ト高が避けられず、したがって、に−カゼインを原料と
する方法も実用性に乏しい。
本発明では、上述のように、酸カゼイン又はソーダカゼ
イン或はカルシウムカゼインをレンネット又はペプシン
或は両者を用い、必要に応じて2価金属イオンを適当量
を添加して凝乳処理してレンネットカゼインカードを形
成し、その際生成する排液を原料とする。この排液はホ
エータンパク質を含んでいないこと、及び乳糖を含んで
いないという利点がある反面、チーズホエーと同様にリ
ン酸カルシウムを大量に含んでいて、このリン酸カルシ
ウムは殆んど溶けないため、後の工程に相当の負荷をか
けるという問題がある。
したがって、本発明では、上記排液からリン酸カルシウ
ムを除去するための手段を検討した結果、該排液のpt
iを酸性領域、特に4〜5′に調整することにより、リ
ン酸カルシウムを効果的に沈澱させて除去することを可
能にした。
このリン酸カルシウムの沈澱生成は、該排液に共存して
いるに一カゼインGMP以外の少量のカゼインやカゼイ
ン分解物が等電点沈澱する際にリン酸カルシウムを包含
して沈澱することに因るものと考えられる。
すなわち、リン酸カルシウムの溶解度自体は、上記pH
の調整には殆ど依存しないが、上述した共存するカゼイ
ンフラグメントが酸性領域のpHで沈澱する際にリン酸
カルシウムを巻き込んで沈澱させるものと言える。
排液における上記沈澱を促進させるには40〜50℃程
度の温度に加温するとよく、また、生成した沈澱の除去
には遠心分離又はフィルター濾過を用いるとよい、遠心
分離は通常のタラリファイヤーを用いるとよく、フィル
ター濾過はフィルタープレスもしくはマイクローザ或は
これらを組合わせて行うとよい。
排液から上記沈澱を除去して得られる上澄は、好ましく
はpHを中性に戻した後、濃縮し脱塩する。すなわち、
上述のようにして得られる上澄はそのままではに一カゼ
インGMPの濃度が低く、また灰分含量が高いため、乾
燥効率が悪く、食品に添加して用いる場合、ミネラルバ
ランスの調整が困難となる。
上記濃縮には真空濃縮、加熱濃縮、逆浸透膜(RO膜)
による濃縮等を用いて行い、また、脱塩にはイオン交換
樹脂、電気透析或はRO膜を用いて行うとよい、特に、
RO膜を用いると濃縮と脱塩を同時に行い得るので効率
的である。
これらの濃縮、脱塩処理を行った上澄は、必要に応じ殺
菌処理を行った後、噴霧乾燥或は凍結乾燥等により乾燥
する。
このようにして得られたに一カゼインGMPは、純度8
0%以上、シアル酸含量5%以上及び灰分含量10%以
下であって、高品質のものが得られる。
以上述べたごとく、本発明によると、レンネットカゼイ
ンの調製時に生ずる安価な排液を原料として用い、該排
液から高純度のに一カゼインGMPを得ることができる
ので、に−カゼインGMPを工業的規模で大量生産する
ことが可能となり、したがって、に−カゼインGMPの
利用上有益である。
以下に実施例を示して本発明を具体的に説明する。
実施例1 レンネットカゼインカード排液3001をフォードラタ
ンクで75℃30分間加熱殺菌した後に、40℃まで冷
却し、濃塩酸でpl+を4.6に調整した。約30分間
静置し沈澱を生成すさせた液をタラリファイヤーに通し
、pHを7に戻した後、清澄液をRO膜で濃縮・脱塩し
た。RO膜のモジュールはDt!5ALG−20(De
saltnation System Inc、)を用
い運転圧10kg/cdで10倍まで濃縮した。濃縮液
に加水し、再度10倍まで濃縮した。得られた液を、さ
らに真空濃縮機を用いて75℃にて51にまで濃縮し、
凍結乾燥して約1.3kgの粉末を得た。
この粉末を電気泳動で分析した結果、に−カゼインGM
P純度82%であり、灰分含量は9.8wt%、また粉
末当りのシアル酸含量は5.2wt%であった。
実施例2 レンネットカゼイン排液1001を用い、実施例1に記
載したと同様の手順によりに一カゼインGMPを製造し
、約450gの粉末を得た。
本品の組成は実施例1とほぼ同じであった。

Claims (4)

    【特許請求の範囲】
  1. (1)レンネットカゼインカードを調製する際に得られ
    る排液を原料として用い、該排液(ホエー)のpHを酸
    性領域に調整し、生成する沈澱を除去し、次いで得られ
    る上澄を脱塩処理することを特徴とするκ−カゼイング
    リコマクロペプチドの製造法。
  2. (2)レンネットカゼインカードは、酸カゼイン又はソ
    ーダカゼイン或はカルシウムカゼインを凝乳酵素で処理
    することにより調製する特許請求の範囲第(1)項記載
    の製造法。
  3. (3)pHを4乃至5の範囲に調整する特許請求の範囲
    第(1)項記載の製造法。
  4. (4)上記上澄を濃縮し、脱塩した後、乾燥する特許請
    求の範囲第(1)項記載の製造法。
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