JPS63264563A - アミノ酸誘導体およびその製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野コ この発明はアミノ酸誘導体に関する。さらに詳細には、
この発明は抗腫瘍作用を有するアミノ酸誘導体およびそ
れらの医薬として許容される塩類、それらの製造法、な
らびにそれらを含有する医薬組成物に関する。

Ｅ問題点を解決するための手段］ この発明のアミノ酸誘導体は下記一般式で示すことがで
きる。

［式中、Ｒ１は７に素、低級アルキル基、ハロ（低級）
アルキル基またはアリール基、 Ｒ２は水素、ヒドロキン基または保護されたヒドロキシ
基、 Ｒ３は水素、 Ｒ４は低級アルキＪし基、カルボキシ（低級）アルキル
基、アミノカルボキシ（低級）アルキル基、保護された
アミン（低級）アルキル基または保護されたアミン−カ
ルボキシ（低級）アルキル基、Ｒ５は水素または低級ア
ルキル基を意味し、Ｒ２とＲ３とは結合してオキソ基を
形成してもよい　コ　。

この発明のアミノ酸誘導体（Ｉ）およびそれらの医薬と
して許容される塩類は下記製造法によって製造すること
ができる。

（１）化学的合成 製造法１ （ＩＦ　） （Ｉ） 製造法２ （Ｒ２） （Ｉ２） 製造法３ ［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は前と同じ
意味であり、 Ｒ１は保護きれたアミン（低級）アルキル基ま芝は保護
きれたアミノ−カルボキシ（低級）アルキル基、 Ｒ４′はアミン（低級）アルキル基またはアミ、ノカル
ポキシ（低級）アルキル基を意味する］。

この明細書の以上および以下の記載において、乙の発明
の範囲内に包含される種々の定義の例および説明を以下
詳細に述べる。

１低級」とは、特に指示がなければ、炭素原チェないし
６個を意味するものとする。

好適な１個級アルキル基」、または「ハロ（低級）アル
キル基１、「アミノ（低級）アルキル基１、「カルボキ
シ（低級）アルキル基」、′アミノカルボキシ（低級）
アルキル基」、「保護されたアミノ（低級）アルキル基
」または１保護きれたアミノ−カルボキシ（低級）アル
キル基」の好適な１低級アルキルｊ部分としては、直鎖
状または分岐状の低級アルキル基が挙げられそのような
例としてはメチル、エチノ呟プロピノ呟　イソプロピル
、ブチル、ペンチル、ヘキシル等が挙げられる。

「ハロ（低級）アルキル基」の好適な「ハロゲン」とし
てはフッ素等が挙げられる。

好適な１アリール基」としてはフェニル基、ナフチル基
、トリル基等が挙げられる。

好適な１保護されたヒドロキシ基」としては、例えば２
−テトラヒドロピラニルオキシ等のテトラヒドロピラニ
ルオキシ基、例えばアセトキシ、プロピオニルオキシ等
の低級アルカノイルオキシ基等のようなアシルオキシ基
、例えばベンジルオキシ等のモノ（またはジまたはトリ
）フェニル（低級）アルコキシ基等のようなアル（低級
）アルコキシ基、例えばメトキシ、エトキシ、プロポキ
シ等の低級アルコキシ基等が挙げられる。

「保護されたアミン（低級）アルキル基」または１保護
されたアミノ−カルボキシ（低級）アルキル基」の好適
な１保護きれたアミノ基、としては、アミノ酸およびペ
プチド化学の分野で使用される常用のアミン保護基によ
って保護されている保護されたアミン基が挙げられ、好
適な「アミノ保護基」としては、例えばホルミル、アセ
チル、プロピオニル等の低級アルカノイル基、例えばト
リフルオロアセチル等のハロ（低級）アルカノイル基、
例えばベンゾイル等のアロイル基、例えばメトキシカル
ボニル、エトキシ力ルポニルブロボキシ力ルボニル等の
低級アルコキシカルボニル基、例えばベンジルオキシカ
ルボニル等の例えばモノ（またはジまたはトリ）フェニ
ル（低級）アルコキシカルボニル基等のアル（低級）ア
ルコキシカルボニル基等のアシル基が挙げられる。

目的化合物（Ｉ）の医薬として許容される好適な塩類は
慣用の無毒性塩類であり、無機塩基との塩、その例とし
て、例えばナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属
塩、例えばカルシウム塩、マグネシウム塩等のアルカリ
土金属塩、アンモニウム塩；有機塩基との塩、その例と
して、例えばトリエチルアミン塩、ピリジン塩、ピコリ
ン塩、エタノールアミン塩、トリエタノールアミン塩、
ジシクロヘキシルアミン塩、ジベンジルアミン塩、Ｎ、
Ｎ−ジベンジルエチレンジアミン塩等の有機アミン塩等
；例えば塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、燐酸塩等の無
機酸付加塩；例えばギ酸塩、酢酸塩、トリフルオロ酢酸
塩、クロロ酢酸塩、トリクロロ酢酸塩、マレイン酸塩、
酒石酸塩、メタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸 塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩等の有機カルボン酸また
は有機スルホン酸付加塩；例えばアルギニン、アスパラ
ギン酸、グルタミン酸等の塩基性アミノ酸または酸性ア
ミノ酸との塩等のような塩基との塩または酸付加塩が挙
げられる。

この発明の目的化合物の製造法を以下詳細に説明する。

製造法１ 化合物（Ｉ）またはその塩は化合物（■１）またはその
塩を、例えば亜硝酸カリウム、亜硝酸ナトリウム等のア
ルカリ金属亜硝酸塩と反応させることにより製造するこ
とができる。

化合物（■１）の好適な塩類としては、化合物（Ｉ）に
ついて例示したものが挙げられる。

反応は通常、水等のような常用の溶媒中、冷却下ないし
加温下に行われる。

製造法２ 化合物（Ｉ２）またはその塩は化合物（■２）またはそ
の塩をｐ−トルエンスルホニルアジドと反応きせること
により製造することができる。

化合物（Ｉ　　）および（Ｒ２）の好適な塩類としては
、化合物（Ｉ）について例示したものが挙げられる。

反応は通常、例えばメタノーノ呟エタノール等のアルコ
ール、水等のような慣用の溶媒中、冷却下ないし加温下
に行われる。

製造法３ 化合物（Ｉ　　＞またはその塩は化合物（Ｒ３）または
その塩を、Ｒ４のアミン保護基の脱離反応に付すことに
より製造することができる。化合物（Ｉ３）および（Ｒ
３）の好適な塩類としては、化合物（Ｉ）について例示
したものが挙げられる。

この反応は加水分解、還元等のような化学的な常法また
は生化学的な常法に従って、好ましくはアシラーゼを使
用することにより製造することができる。

反応は通常、例えばメタノール、エタノール等のアルコ
ーノ呟水等のような常用の溶媒中、冷却下ないし加温下
に行うことができる。

原料化合物のある種のものは新規であり、そのような新
規原料化合物は製造例工ないし３２に記載した方法と同
様にして製造することができる。

アミノ酸誘導体（１）中、ＦＲ−９００８４０物質また
は、ストレプトマイセス・エスピー（７ｒｇｇ３２　ｓ
ｐ、　）　Ｎｏ、　８７２７等のようなストレプトマイ
セス属に属するＦＲ−９００８４０物質−産生菌株の栄
養培地中における醗酵によっても生産することができる
。

以下醗酵による製造法を詳細に説明する。

（１）菌 ＦＲ−９００８４０物質生産に使用する菌の特徴を以下
に説明する。

（ａ）　Ｎｏ、８７２７菌株の分類学的研究ＮＯ，８７
２７菌株は茨城県石岡市から得られた土壌試料から分離
きれた。

この分類学的研究にはシル−リング（Ｓｈｉｒｌｉｎｇ
）およびゴツトリーブ（Ｇｏｔｔｌｉｅｂ　）　”によ
って記載されている方法を使用した。形態の観察は、イ
ースト・マルトエキストラクト寒天培地、無機塩類−ス
ターチ寒天培地およびオートミール寒天培地、ならびに
グルコース−アスパラギン寒天培地上、３０℃で２１日
間に生育した培養物について顕微鏡および電子顕微鏡に
より実施した。胞子形成菌糸の分枝法は単純分枝であり
、成熟胞子形成菌糸の形態はらせん状であり、各胞子鎖
に２０ないし７０個の胞子を有する。胞子は電子顕微鏡
により卵形であると決定され、その太ききは０．６−０
．７Ｘ　Ｏ，９−１，ｈａであった。胞子表面構造はと
げの多い形状であった。基質菌糸体では菌糸の分断も胞
子形成も起らなかった。胞子量、菌核および鞭胞子は観
察されなかった。

培地上での特徴は、シャーリングおよびゴツトリーブ１
）ならびにワクスマン（Ｗａｋｓｍａｎ　）“２によっ
て記載されている培地上で観察した。３０℃で２１日間
培養した。この研究で使用した色名はメチューエン・ハ
ンドブック・才プ・カラー（Ｍｅｔｈｕｅｎ　Ｈａｎｄ
ｂｏｏｋ　ｏｆ　Ｃｏ１ｏｕｒ　）　＄３から取った。

気菌糸の色はイースト−マルトエキストラクト寒天培地
および無機塩類−スターチ寒天培地上で生育した場合に
は、青色系に属していた。可溶性色素は生産きれなかっ
た。結果を第１表に示す。

第１表、菌株第８７２７号の培地上での特徴ベラ力−等
（Ｂｅａｋｅｒ　ｅｔａｌ、　）　　　および山口”５
）＊４ の方法によって細胞壁分析を行った。全細胞加水分解物
の分析によってり、Ｌ−ジアミノピメリン酸の存在が示
された。すなわち、この菌株の細胞壁はＩ型に分類され
る。

菌株第８７２７号の生理学的性質は下記のとおりであっ
た。

イースト−マルトエキストラクト寒天培地上、温度勾配
インキュベーター（東洋化学産業社製）を用いて生育温
度範囲を測定した。菌株第８７２７号の生理学的性質を
一括して第２表に示す。生育温度範囲は１３℃ないし３
７℃であり、至適温度は３０℃から３２℃までであった
。ミルクのペプトン化およびゼラチンの液化は陽性であ
った。メラニン色素産生はチロシン寒天培地上陽性であ
った。

第２表、菌株第８７２７号の生理学的性質プリドハム（
Ｐｒｉｄｈａｍ　）およびゴツトリーフ′に６〉の方法
に従って炭素源の資化性を試験した。結果を３０℃１４
日間インキュベート後に測定した。この菌株は下記第３
表に示したように生育に試験した炭素源をすへて資化し
得た。

第３表、菌株第８７２７号の炭素ｆＡ資化＋：資化する 以上提示した分類学的研究結果についてバーシーズ・マ
ニュアル（Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ　Ｍａｎｕａｌ　）　１１
７）またはアイ・ニス・ビー・リポート（ＩＳＰ　ｒｅ
ｐｏｒｔ　）１８）”９）を参照して、この発明の発明
者等は菌株第８７２７号がワクスマンおよびヘンリシ（
Ｈｅｎｒｉｃｉ　）１９４３年、によるストレプトマイ
セス属に属すると結論する。従って発明者等はこの菌株
をストレプトマイセス属の一つの菌株と同定し、それを
ストレプトマイセス−ニス會ビー（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙ
ｃｅｓ　ｓｐ、）第８７２７号と命名した。

＊１）シル−リング・イー・ビーおよびディー・ゴット
リーブ：メソッズ・フォー争キャラクテリゼーション・
才ブ・ストレプトマイセス・スペシーズ：インターナシ
ョナル・ジャーナル・才ブ・システマチック・バクテリ
オロジー （Ｓｈｉｒｌｉｎｇ、　　Ｅ、　　Ｂ、　　ａｎｄ　Ｄ
、　　Ｇｏｔｔｌｉｅｂ　：　Ｍｅｔｈｏｄｓｆｏｒ　
ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　５ｔｒｅ　
ｔｏｍ　ｃｅｓ　５ｐｅｃｉａｓ：　Ｉｎｔａｒｎ、　
Ｊ、　５ｙｓｔ、　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ、　）第１６巻
、３１３−３４０頁、１９６６年 ＊２）ワスクマン・ニス・ニー：す・アクチノマイセッ
ツ、第２巻、タラシフィケーション◆アイデンティフィ
ケーション・アンド・デスクリブジョン・才プ・ゼネラ
・アンド・スペシーズ：ザ・ウィリアムス・アンド・ウ
ィルキンス・カンパニー、バルチモア、１９６１年 （Ｗａｋｓｍａｎ、　Ｓ、　Ａ、　：　Ｔｈｅ　ａｃｔ
ｉｎｏｍｙｃａｔｅｓ　Ｖｏｌ、　２Ｃ１ａｓｓｉｆｉ
ｃａｔｉｏｎ、　　１ｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　　
ａｎｄｄｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｏｆ　ｇｅｎｅｒａ　
ａｎｄ　５ｐｅｃｉｅｓ　　：　ＴｈｅＷｉｌｌｉａｍ
ｓ　ａｎｄ　Ｗｉｌｋｉｎｓ　Ｃｏ、、　　Ｂａｌｔｉ
ｍｏｒｅ、　　１９６１）＊３）コーネラップ・ニーお
よびディー・エイチ・ワンシャー：メチニーエン・ハン
ドブックφオブカラー：メチューエン、ロンドン、１９
７８年（Ｋｏｒｎｅｒｕｐ、　　Ａ、　　　ａｎｄ　　
Ｊ、　　Ｈ，Ｗａｎｓｃｈｅｒ　　二　Ｍｅｔｈｕｅｎ
Ｈａｎｄｂｏｏｋ　ｏｆ　Ｃｏ１ｏｕｒ　：　Ｍｅｔｈ
ｕｅｎ、　Ｌｏｎｄｏｎ、　１９７８）＊４）　ヘラカ
ー・ビー、エム・ビー・レジバリエル、アール・イー・
ゴートンおよびエイチ・ニー・レジバリエル：ラピッド
・ディファレンシェーション・ビトウィーン・ノカルデ
ィア・アンド・ストレプトマイセス・パイ・ペーパーク
ロマトクラフィー・才プ・ホールセル・ハイドロリゼー
ツ：アプライド・マイクロバイオロジー （Ｂｅａｋｅｒ、　Ｂ、、　Ｍ、　Ｐ、　Ｌｅｃｈｅｖ
ａｌｉａｒ、　Ｒ，Ｅ。

Ｇｏｒｄｏｎ　ａｎｄ　Ｈ，Ａ、　Ｌｅｃｈｅｖａｌｉ
ｅｒ　：　Ｒａｐｉｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ
　ｂｅｔｗｅｅｎ　Ｎｏｃａｒｄｉａ　ａｎｄＳｔｒｅ
　ｔｏｍ　ｃｅｓ　ｂｙ　ｐａｐｅｒ　ｃｈｒｏｍａｔ
ｏｇｒａｐｈｙ　ｏｆｗｈｏｌｅ−ｃｅｌｌ　ｈｙｄｒ
ｏｌｙｓａｔｅｓ　：　Ａｐｐｌ、　Ｍｉｃｒｏｂｉｏ
ｌ、　）第１２巻、４２１−４２３頁　１９６４年車５
）山口・Ｔ　：コンバリジン・才プ・ザ・セル−ウオー
ル カリー・ディスティンクト・アクチノマイセッツ：ジＮ
ーナル・オブ・バクテリオロジー（　Ｙａｍａｇｕｃｈ
ｉ，　Ｔ．　：　Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ
　ｃｅｌｌ−ｗａｌｌ　ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ　ｏｆ
　ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌｌｙ　ｄｉｓｔｉｎｃｔ
ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ　：　Ｊ．　Ｂａｃｔｅｒ
ｉｏｌ．　）第８９巻、４４４−４５３頁、１９６５年 本６）プリドハム・ティー・ジーおよびディー・コット
リープ：ザ・ユーティライゼーション・才プ・カーボン
・フンパウンズ・パイ・サム・アクチノマイセッテール
ズ・アズ・アン・ニード・フォー・スペシーズ・デター
ミネーション：ジャーナル・才ブ・バクテリオロジー （　Ｐｒｉｄｈａｍ．　Ｔ．　Ｇ．　ａｎｄ　Ｄ．　Ｇ
ｏｔｔｌｉｅｂ　：　Ｉｈｅｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ　
ｏｆ　ｃａｒｂｏｎ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｂｙ　ｓｏ
ｍｅＡｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔａｌｅｓ　ａｓ　ａｎ　ａ
ｉｄ　ｆｏｒ　ｓｐｅｃｉｅｓｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉ
ｏｎ　：　Ｊ．　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ．　）第５６巻、
１０７−１１４頁、１９４８年 ７本）ブチャナン・アール・イーおよびエヌ・イー・ギ
ボンス：バージース・マニュアル・才ブ・デターミネチ
プ・バクテリオロジー、第８版：ザ・ウィリアムスおよ
びウイルキンス畢カンパニー、バルチモア （　Ｂｕｃｈａｎａｎ，　Ｒ．　Ｅ．　ａｎｄ　Ｎ．　
Ｅ．　Ｇｉｂｂｏｎｓ　：Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ　ｍａｎｕ
ａｌ　ｏｆ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｖｅｂａｃｔｅｒ
ｉｏｌｏｇｙ，　ｅｉｇｈｔ　ｅｄｉｔｉｏｎ　：　Ｉ
ｈｅ　Ｗｉｌｌｉａｍｓａｎｄ　Ｗｉｌｋｉｎｓ　Ｃｏ
。Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ．　）　１９７４年＊８）ジャー
リング・イー・ビーおよびディー・ゴットリーブ：コオ
ペレーチブ・デスクリブジョン・才プ・タイプ・カルチ
ャー・才ブ・ストレプトマイセス：２．スペシーズ・デ
スクリブジョン９フロム・ファースト・スタディー：イ
ンターナショナル・ジャーナル・才ブ・システマチック
・バクテリオロジー （　Ｓｈｉｒｌｉｎｇ，　Ｅ．　Ｂ．　ａｎｄ　Ｄ．　
Ｇｏｔｔｌｉａｂ　：Ｃｏｏｐｅｒａｔｉｖｅ　ｄｅｓ
ｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｙｐｅ　ｃｕｌｔｕｒｅ　
ｏｆＳｅｒｅ　ｔｏｍ　ｃｅｓ　：　２．Ｓｐｅｃｉｅ
ｓ　ｄｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎｓ　ｆｒｏｍｆｉｒｓｔ−
　ｓｔｕｄｙ　：　Ｉｎｔｅｒｎ．　Ｊ．　Ｓｙｓｔ．
　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ．　）第１８巻、６９−１８９頁
１９６８年 ＊９）ジャーリング・イー・ビーおよびディー・ゴット
リーブ：コオベレーテブ・デスクリブジョン・才プ・タ
イプ・カルチャー・才ブ・ストレプトマイセス＝３．ア
ディショナル・スペシーズ・デスクリブジョンズ・フロ
ム・ファースト・アンド・セカンド・スタディーズ：イ
ンターナショナルジャーナル・才ブ・システマチック・
バタテリオロジー （Ｓｈｉｒｌｉｎｇ、　　Ｅ、　　Ｂ、　　ａｎｄ　Ｄ
、　　Ｇｏｔｔｌｉｅｂ　：Ｃｏｏｐｅｒａｔｉｖｅ　
ｄｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｙｐａ　ｃｕｌｔｕ
ｒｅ　ｏｆＳｔｒｅ　ｔｏｍ　ｃｅｓ　：　３．　Ａｄ
ｄｉｔｉｏｎａｌ　５ｐｅｃｉｅｓｄｅｓｃｒｉｐｔｉ
ｏｎｓ　ｆｒｏｍ　ｆｉｒｓｔ　ａｎｄ　５ｅｃｏｎｄ
　５ｔｕｄｉｅｓ　：Ｉｎｔｅｒｎ、　Ｊ、　５ｙｓｔ
、　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ、　）第１８巻、２７９−３９
２頁、１９６８年 ＊１０）シャーリング・イー・ビーおよびディー・コツ
トリープ：コオペレーティブ・デスクリブジョン・才プ
・タイプ・カルチャー・才プ・ストレプトマイセス：４
．スペシーズ・デスクリブジョン・フロム・ザ・セカン
ド・サード・アンド・フォース拳スタディーズ：インタ
ーナショナル・ジャーナル・才プ・システマチック・バ
クテリオロジー （Ｓｈｉｒｌｉｎｇ、　Ｅ、　　Ｂ、　　ａｎｄ　Ｄ、
　Ｇｏｔｔｌｉｅｂ　：Ｃｏｏｐｅｒａｔｉｖｅ　ｄｅ
ｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｙｐａ　ｃｕｌｔ＋ｕｒ
ｅ　ｏｆＳｔｒｅ　ｔｏｍ　ｃｅｓ　：　４．５ｐｅｃ
ｉｅｓ　ｄｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎｓ　ｆｒｏｍｔｈｅ　
５ｅｃｏｎｄ、　ｔｈｉｒｄ　ａｎｄ　ｆｏｒｔｈ　５
ｔｕｄｉｅｓ　：Ｉｎｔｅｒｎ、　Ｊ、　５ｙｓｔ、　
Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ、　）第１９巻、３９１−５１２頁
、１９６９年 ストレプトマイセス・エスピー第８７２７号の培養物は
、日本茨城県筑波郡矢田部町東１丁目１−３工業技術院
微生物工業技術研究所に微工研菌寄Ｐ−９２９６号とし
て１９８７年３月１９日に寄託されており、次いでその
培養物は同所のブダペスト条約ルートに微工研条寄第１
８０４号の新寄託番号のもとに１９８８年３月１８日に
移管された。

ｉ　）　ＦＲ−９００８４０物質の生産この発明のＦＲ
−９００８４０物質は、例えばストレプトマイセス・エ
スピー第８７２７号のようなストレプトマイセス属に属
するＦＲ−９００８４０物質−産生菌株を、同化し得る
炭素源および窒素源を含む栄養培地中１例えば振とう培
養、深部培養等の好気条件下に生育せしめる場合に生産
される。

栄養培地中の好ましい炭素源はキシロース、グルコース
、シュークロース、フラクトース、でんぷん等のような
炭水化物である。

好ましい窒素源はイースト・エキストラクト、ペプトン
、グルテン・ミール、綿実粉、大豆粉、コーンステイー
プ・リカー、乾燥イースト、小麦胚芽等、ならびに例え
ば硝酸アンモニウム、硫酸アンモニウム、燐酸アンモニ
ウム等のアンモニウム塩類、尿素、アミノ酸等のような
無機窒素化合物および有機窒素化合物である。

炭素源および窒素源は組合わせて使用すると有利である
が、痕跡程度の生育因子およびかなりのほの無機栄養素
を含有するより低純度の物質も使用に適しているので、
それらを純粋な形で使用する必要はない。

所望の場合には、炭酸ナトリウムまたは炭酸カルシウム
、燐酸ナトリウムまたは燐酸カリウム、塩化ナトリウム
または塩化カリウム、沃化ナトリウムまたは沃化カリウ
ム、マグネシウム塩類、銅塩類、コバルト塩類等のよう
な無機塩類が培地に添加されていてもよい。

必要に応して、とりわけ培養培地が激しく発泡する場合
には、液状パラフィン、脂肪油、植物油、鉱油またはシ
リコーンを添加してもよい。

他の生物学的作用物質の大量生産に使用される好ましい
方法の場合のように、深部好気培養条件がＦＲ−９００
８４０物質の大量生産には好ましい。

少量生産にはフラスコ中またはびん中振とう培養または
表面培養が行われる。

さらに、生育を大型タンク内で行う場合にはＲ−９００
８４０物質の生産工程における生育遅延を回避するため
に、生産タンク中に接種するのに菌を増殖形として使用
するのが好ましい。すなわち、まＣ比較的少量の培養培
地に菌の胞子または菌糸体を接種してその接種培地を培
養することにより増殖接種体を生産し、次いで培養増殖
接種体を大型タンクに移すのが望ましい。増殖接種体を
生産する培地は実質的にＦＲ−９００８４０物質の生産
に利用される培地と同じである場合もあり異なることも
ある。

培養混合物の攪拌および通気は種々の方法で行えばよい
。攪拌はプロペラまたはそれに類似の機械攪拌装置、醗
酵器の回転または振とう、種々のポンプ装置または培地
中の滅菌空気の通過によって行えばよい。通気は醗酵混
合物中を滅菌空気を通過させることによって行えばよい
。

醗酵は通常、約２０℃と４０°Ｃとの間の温度、好まし
くは２０°Ｃないし３０’Ｃの間の温度で約５０時間な
いし１００時間行われるが、これらは醗酵条件と規模と
によって変化させればよい。

醗酵完結後培養ブロスは、例えば適切な溶媒または数種
の溶媒の混合物による溶媒抽出、クロマトグラフィー、
または適切な溶媒あるいは数種の溶媒の混合物からの再
結晶のような、生物学的活性物質の回収および精製に常
用される種々の操作法によるＦＲ−９００８４０物質の
回収操作に付される。

この発明によれば、一般的にはＦＲ−９００８４０物質
は主として培養菌糸体外に見出される。すなわち、培養
ブロスを濾過または遠心操作により分離して菌糸体を除
去し、次いでアセトン、酢酸エチル等のような適切な有
機溶媒またはこれらの溶媒の混合物を用いて抽出により
ＦＲ−９００８４０物質を濾液かも回収する。

抽出液を常法によって処理すればＦＲ−９００８４０物
質が得られる。すなわち、例えば抽出液を少量になるま
で溶媒の留去または蒸留により濃縮し、作用物質すなわ
ちＦＲ−９００８４０物質を含む残渣を、例えばクロマ
トグラフィーまたは適切な溶媒あるいは数種の溶媒の混
合物からの再結晶のような慣用の精製操作により精製す
る。

ｉ　）　ＦＲ−９００８４０物質の物理化学的性質前記
醗酵法により得られたＦＲ−９００８４０物質は下記物
理的性質および化学的性質を有する。

形状および色調：淡黄色プリズム 分子式：Ｃ７Ｈ１、Ｎ５ｏ５ 分子量：　２１７　［ＦＡＢ−ＭＳ　２１８　（Ｍ＋Ｈ
ピコ元素分析：実施値：　Ｃ，３５，９９；　Ｈ，５，
５８；Ｎ、　　１７．６５　　（％） Ｃ７Ｈ１１Ｎ３ｏ５・Ｈ２Ｏとしテノ 計算値：Ｃ，３５，７４；　Ｈ，５，５７；Ｎ、　　１
７．８７　（Ｘ） 呈色反応：硫酸セリウム反応、硫酸反応、ニンヒドリン
反応、塩化第二鉄反応、ヨード 反応に陽性 エールリッヒ反応、ドラーゲンドルフ 反応、モーリッシュ反応に陰性 溶解性二本に可溶 メタノール、エタノールに微溶 アセトン、クロロホルム、酢酸エチル、ジエチルエーテ
ル、ベンゼンに不溶 融点：　１２３−１２５℃（分解） 比旋光度：［αコ２３　、　＋ｔ、ｓ°（ｃ＝１．　ｏ
、　）１２ｏ）紫外部吸収スペクトル： 薄層クロマトグラフィー： Ｒｆ値（シリカ板）： ０、２４　（クロロホルム：メタノール：水性ＮＨ４０
Ｈ＝５　：　３　：　１　） ０．４４（ｎ−ブタノール：エタノール：クロロホルム
：水性ＮＨ４０Ｈ＝２　：　２　：　１　：　２　）赤
外吸収スペクトル： スジ１−ル λ　　　　　＝　　３４３０．　３２７０．　３１００
．　２９２０．　２２６０゜ａｘ ２１００、　１６６０．　１６１０．　１５６０．　１
５２５゜１４６０、　１４１０．　１３８０．　１３５
０．　１２９５゜１２３５．１１６０．１１４０，１０
９０，１０７０゜１０１０、　９６５．　９００．　８
４５．　８２０．　７９０゜７４０、７０５　ｃｍ” ＩＨ核磁気共鳴スペクトル： （２００，１３ＭＨ２，Ｉ）２ｏ、　ジオキサンを内部
標準として使用） １；　　：　４．８７　（ＬＨ，ｑ、Ｊ＝６．６Ｈｚ＞
、　４．６２　（２Ｈ，ｄ。

Ｊ＝３．８Ｈｚ）、　４．１０　（ＬＨ，ｔ、Ｊ＝３．
８Ｈｚ）、　１．４２（３Ｈ，ｄ、Ｊ＝６．６Ｈｚ） １３０核磁気共鳴スペクトル： （５０，２３ＭＨｚ、　Ｄ２０．　　’ｉミオキサン内
部標準として使用） δ　：　１７３．５５　（ｓ）、　１６９．９９　（ｓ
）、　６６．１５　（ｔ）。

６４．７４　（ｄ）、　５６．６７　（ｄ）、　２２．
１５　（ｑ）アミノ酸誘導体（Ｉ）は常法により医薬と
して許容きれる適当なその塩類に変化させることができ
る。

［発明の効果］ アミノ酸誘導体（Ｉ）の生物学的性質 アミノ酸誘導体（Ｉ）の薬理作用を示すための例として
、アミノ酸誘導体（Ｉ）の数種の化合物の薬理試験結果
を以下に説明する。

ス錬↓ アミノ酸誘導体（Ｉ）に含まれる数種の化合物によるヒ
ト肺腺癌Ａ３４９細胞生育の抑制（試験管内試験） 細胞毒性試験を各ウェルにダルベツコ （Ｄｕｌｂｅｃｃｏ＞最小必須培地１００票中Ａｓ４９
細胞３×１０３個を含む＠量適定板中で１０％胎児仔牛
血清、５０単位／賊ペニシリンおよび５０５ｇ／ｚＱス
トレプトマイシンを補充して行った。細胞を３７℃で７
日間インキュベートし、モスマン（Ｍｏｓｍａｎｎ　）
によって記載きれている方法［ジャーナル・オブ・イン
ムノロジカル・メソッズ（Ｊ、　Ｉｍｍｕｎｏｌ、　Ｍ
ｅｔｈｏｄｓ　）第６５巻、５５−６３頁、１９８３年
］に従ってＭＴＴ（テトラゾリウム）比色定量を実施し
た。ＭＴＴ［３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−
イル−２，５−ジフェニルテトラゾリウム・臭化物、シ
グマ社製コをＰＢＳに５　ｍｇ／ｍΩの割合で溶解し、
濾過して滅菌し、少量の不溶残渣を除去した。Ａ３４９
細胞培養終了後、このＭＴＴ溶液（培地１００μ戒当り
１０鴻）を定量すべき各ウェルすべてに加え、滴定板を
さらに３７℃で４時間インキュベートした。イソプロパ
ツール中０．０４Ｎ　ＨＣＩ　１００縛の酸−イツブロ
バノールを各ウェルのすべてに加え、全体を十分に混合
して暗青色の結晶を溶解せしめた。すべての結晶が溶解
した後、滴定板を６６０ｎｍの波長を標準として５５０
ｎｍで２−波長微量滴定板光度計（ＭＴＰ−２２型、日
本、勝田、コロナ電機社製）で読み取った。この発明の
目的化合物をダルベツコ最小必須培地に溶解、希釈し、
培養物に加えて３０ｘ／ｍＡまたはそれ未満の終ａ度と
した。結果を第４表に示す。

第４表、アミノ酸誘導体（Ｉ）の数種の化合物のヒト腺
癌Ａ３４９細胞生育に対する効果 実施例１の化合物　　　　　　１．２　Ｘ　１０−５実
施例２の化合物　　　　　　１．０５Ｘ　１０−５実ａ
　例４　（７）　化合’ＪＩＪ　　　　　　　１．８　
Ｘ　１０−５実施例５の化合物　　　　　　１．４　Ｘ
　１０’実施例６の化合物　　　　　１．８　Ｘ　１０
−６にと１ アミル誘導体（ｒ）の数種の化合物によるヒト乳腺癌江
Ｆ−７細胞生育の抑制（試験管内試験）細胞毒性試験を
各ウェルにイーグル（Ｅａｇｌｅ　）最小必須培地１０
０縛中ＭＣＦ−７細胞３Ｘ１０”個を含む微量滴定板中
、１０％胎児仔牛血清、ピルビン酸ナトリウム、非必須
アミノ酸、５０単位／　ｍＱペニシリンおよび５０■／
ｍＱストレプトマイシンを補充して行った。細胞を二酸
化炭素５％および空気９５％の加湿雰囲気中、３７℃で
７日間インキュベートし、試験１に記載したようにして
ＭＴＴ比色定量を行った。

試験化合物をイーグルの最小必須培地に溶解して希釈し
、培養物に加えて３０　處／　ｍＱまたはそれ未満の終
濃度とした。

結果を第５表に示す。

第５表、アミノ酸誘導体（１）の数種の化合物のヒト乳
腺癌ＭＣＦ−７細胞生育に対する効果実施例１の化合物
　　　　　　１゜８　Ｘ　１０＝実施例２の化合物　　
　　　　６．８　Ｘ　１０−６実施例４の化合物　　　
　　　８．２　Ｘ　１０−７実施例５の化合物　　　　
　　７．６　Ｘ　１０−５実施例６の化合物　　　　　
　１．７　Ｘ　ＬＯ−６試験３ ＦＲ−９００８４０物質の急性毒性 静脈内注射によるＢＤＦ　１系マウスに対するＦＲ−９
００８４０物質の急性毒性は１８０ｍｇ／　ｋｇである
。

試験結果から、アミノ酸誘導体（１）が抗腫瘍作用を有
することは明らかである。

この発明の医薬組成物は、例えば、外用、内用または非
経口適用に適した有機もしくは無機担体もしくは賦形剤
と混合して、アミノ酸誘導体（Ｉ）または医薬として許
容されるその塩を有効成分として含有する固体、半固体
または液体の形で医薬製剤の形として使用することがで
きる。有効成分は、例えば、通常の無毒性の医薬として
許容される担体と、錠剤、ペレット、カプセル、生薬、
溶液、エマルジョン、懸濁液およびその他の使用に適し
たあらゆる形状に混合して製剤化すればよい。また必要
に応じてさらに、助剤、安定剤、濃厚化剤および着色剤
ならびに芳香剤を使用してもよい。、アミノ酸誘導体（
Ｉ）または医薬として許容されるその塩は医薬組成物中
に、疾患の過程または条件に合わせた所望の抗腫瘍効果
を発揮するのに十分な量含有されていればよい。

組成物を人に適用するには静脈内注射、筋肉的注射また
は経口投与によって適用するのが好ましい。アミノ酸誘
導体（Ｉ）または医薬として許容きれるその塩の治療の
だめの有効投与量は、治療ずへき各個ダの患者の年齢お
よび条件によって変化するが、一般的には静脈内投与の
場合にはアミ・′酸誘導体（Ｉ）または医薬として許容
されるその塩を１日当りに人の体重―当り０．１〜１０
０ｍｇ、筋肉内投与の場合にはアミノ酸誘導体（Ｉ）ま
たは医薬として許容されるその塩を１日当りに人の体重
驕当り０．１　１００ｍｇ、経口投与の場合にはアミノ
酸誘導体（Ｉ）または医薬として許容されるその塩を１
日当りに人の体重聴当り０．１−１００ｍｇ投与する。

［実施例コ 以下この発明を実施例に従ってきらに詳細に説明する。

製造例１ Ｏ−（Ｎ−ベンジルオキ・ンカルポニルー〇−ベンジル
−Ｌ−１−レオニル）−Ｎ−（１−リフルオロアセチル
）−Ｌ−セリン　ベンジルエステル Ｎ−メチルモルホリ”ｙ　（１，０９ミリ、１０ミリモ
ル）を含むＮ−ベンジルオキシカルボニル−〇−ベンン
ルーし一トレオニン（３，４ｇ、１０ミリモル）の無水
酢酸エチル（１０ミリ　）溶液に、塩化ピバロイル（１
，２２１１１１，１０ミリモル）の無水酢酸エチル（５
ｍＱ　）　溶液を攪拌下−１５°Ｃで５分間かけて加え
る。

混合物をさらに同温で３０分間攪拌し、次いで一７８°
Ｃに冷却する。Ｎ−（トリフルオロアセチル）−Ｌ−セ
リン　ヘンシルエステル（２，９ｇ、１０ミリモル）と
４　　Ｎ、Ｎ−ジメチルアミノピリジン（０，１２ｇ、
１ミリモル）との無水酢酸エチル（１０ミリ　）溶液を
攪拌下５分間かけて加える。添加終了後、冷却浴を取除
いて混合物を室温で一夜攪拌する。反応混合物を順次２
Ｎ塩酸、水、１０％炭酸水素ナトリウム溶液、水および
食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥する。溶媒を
留去して得る油状物（６ｇ）をシリカゲルカラム（ＣＩ
（Ｃ１３）により精製して、０−（Ｎ−ベンジルオキシ
カルボニル−〇−ベンジルーＬ−トレ才二ル）−Ｎ−（
トリフルオロアセチル）−Ｌ−セリン　ペンシルエステ
ル（４，Ｏｇ）を油状純物質として得る。

ＩＲ（Ｃ）ＩｃＩ３）　：　３４００．３０００．１７
４０．１７２０．１５００゜１１７０　ｃｍ−１ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ２）　Ｓ　：　７．６５　（ＬＨ，ｄ
、Ｊ＝８Ｈｚ）、　７．４０−７．２０（１５）１．ｍ
＞、　　５．４３　　（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝８Ｈｚ）、　　
５．２ｆｆ　　＜２Ｈ。

ｓ）、　５．１７　（ＬＨ，ｄ、Ｊ４２Ｈｚ＞、　５．
０８　（ＬＨ，ｄ。

Ｊ＝１２）（ｚ）、　４．８８　（１）１．ｄｔ、Ｊ＝
８．３）１ｚ）、　４．６８（ＬＨ，ｄｄ、Ｊ＝１１．
５．３Ｈｚ＞、　４．５０　（ＬＨ，ｄ。

Ｊ＝Ｌ１．５Ｈｚ）、　４．４７　＜ＩＨ，ｄｄ、Ｊ＝
１１．５．３Ｈｚ）。

−４，３６（ＬＨ，ｄ、Ｊ＝１１．５Ｈｚ）、　４．２
４　（ＩＨ，ｄｄＪ＝８゜３）ｔｚ＞、　４．０３　（
１１（、ｄｑ、Ｊ＝３．７）１ｚ＞、　１．２０　（３
Ｌｄ、Ｊ＝７Ｈｚ）； ＦＡＢ−ＭＳ　ｍ／ｚ　６１７　（Ｍ＋Ｈ）［α］２３
−ｔｓ°（ｃＪ、０．　　メタノール）製造例２ Ｏ−（Ｌ−トリオニル）−Ｎ−（トリフルオロアセチル
）−Ｌ−セリン ０−（Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−ジル−し−トレ
才ニル）−Ｎ−（トリフルオロアセチル）−Ｌ−セリン
　ベンジルエステル（５００ｍｇ）を酢酸（　１０ｍｌ
Ｌ）に溶解し、この溶液を１０％パラジウム炭素（　５
００ｍｇ　）で４０ｐｓｉで室温下１時間水素添加する
。混合物を濾過し、濾液を蒸発乾固する。

残渣を少量のメタノールに溶解し、溶液をジエチルエー
テルで希釈して白色沈殿を得る。沈殿をメタノール水溶
液から結晶化きせて、Ｏ−（Ｌ−トリオニル）−Ｎ−（
トリフルオロアセチル）−Ｌ−セリン（２３０ｍｇ）を
白色粉末純物質として得る。

ＩＲ　　（スジ３−ル）　　：　　３６００−２４００
．　　１７４０．　　１７００．　　１４５０。

１４００　ａｍ−１ ＮＭＲ　　（Ｃ２０）６７　　：　　４．７２　　（Ｌ
Ｈ，ｄｄ．Ｊ＝１３。

５Ｈｚ）、　４．５２−４．４８　（２Ｈ，ｍ）、　４
．２３　（１１（、ｄｐ。

Ｊ＝４．　　７Ｈｚ）、　　３．７７　（ＬＨ，ｄ．Ｊ
＝４Ｈｚ＞、　１．２６（３Ｈ．　ｄ，　Ｊ＝７Ｈｚ） ＦＡＢ−ＭＳ　ｍ／ｚ　３０３　（Ｍ＋Ｈ）［αコ乙３
　＋７°　（Ｃ：１．０．　　Ｈ２Ｏ）製造例３ ０−（０−ベンジル−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−
Ｒ−１しオニル）−Ｎ−トリフルオロアセチル−し−セ
リン　ベンジルエステル ０−ベンジル−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−チル−
Ｌ−セリン　ベンジルエステル（　８４４ｍｇ　）およ
び４−Ｎ．Ｎ−ジメチルアミノピリジン（３５．４ｍｇ
）の塩化メチレン（　２０ｆｆＬＱ　）溶液に、Ｎ，Ｎ
−ジエチルアミノプロピル−Ｎ′−エチルカルボジイミ
ド・塩酸塩（５５４ｍｇ）を０℃で加える。反応混合物
の温度を室温まで上昇せしめ、室温で１時間攪拌する。

反応混合物を酢ｉ９エチルで希釈し、順次０．ＩＮ塩酸
、水、１０％炭酸水素ナトリウム水溶液、水および食塩
水で洗浄する．硫酸ナトリウムで乾燥後、酢酸エチル抽
出液を濾過して濃縮する。残渣をシリカゲルクロマトグ
ラフィーに付し、塩化メチレンとヘキサンとの混合物（
１：１）、塩化メチレン、次いで塩化メチレンとアセト
ンとの混合物（５０：１）で順次溶出して、〇−（０−
ベンジル−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｒ−トレ才
二ル）−Ｎ−トリフルオロアセデル−Ｌ−セリン　ベン
ジルエステル（１．７１ｇ）ヲ得る。

ＮＭＲ　（ｃｃ＋ｃｔ３＞８’　１．２５　（３Ｈ．ｄ
．Ｊ＝６Ｈｚ）、　３．９−４−１（ＩＨ．ｍ）、　４
．２−４．４　（２Ｈ．ｍ）、　４．４−４．７　（３
Ｈ，ｍ）。

４、７−４．９　（ＬＨ．ｍ）、　５．０−５．３　（
４Ｈ．ｍ）、　５．５２（１１（、ｄ．Ｊ：９Ｈｚ）、
　７．１−７．５　（１６Ｈ．ｍ）製造例４ ０−（Ｒ−トリオニル）−Ｎ−トリフルオロアセチル−
Ｌ−セリン ０−（０−ベンジル−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル− セチル−Ｌ−セリン　ベンジルエステル（Ｉｇ）および
１０％パラジウム炭素（１ｇ）の酢酸（３０ｍＱ）中部
合物を、水素雰囲気中’４０ｐｓｉのもとに室温で６時
間水素添加する。反応混合物をシーライト（濾過助剤、
商標、牛丼化学製）で濾過して溶媒を留去する。残渣を
水で希釈し、凍結乾燥して、０−（Ｒ−トリオニル）−
Ｎ−トリフルオロアセチル−Ｌ−セリン（４２５ｍｇ）
を得る。

ＮＭＲ　（Ｃ２０）ε　：　１．３５　（３Ｈ．ｄ，、
Ｃ６Ｈｚ）、　４．１１　（ＬＨ。

ｄ，、Ｃ４）１ｚ）、　４．３０−４．４５　（１８，
ｍ）、　４．５０−４．７５＜３Ｈ．ｍ） 製造例５ ０−（Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−３−フェニル−
０−テトラヒドロピラニル−Ｄ。

Ｌ−セリニル）−Ｎ−トリフルオロアセチル−Ｌ−セリ
ン　ベンジルエステル Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−３−フェニル−０−テ
トラヒドロピラニル−Ｄ．Ｌ−セリン（１ｇ）およびＮ
−メチルモルホリン（　２５２ｍｇ　）のｉｆエチル（
　１０ｍＱ　）溶液に、塩化ピバロイル（３０８ρ）を
−１５°Ｃで力Ｕえる。−１５℃で２０分間攪拌後、反
応混合物を一７８℃に冷却する。反応混合物にＮ−トリ
フルオロアセチルセリン　ベンジルエステル（８４０ｍ
ｇ）および４−Ｎ、Ｎ−ジメチルアミノピリジン（３１
ｍｇ）を−７８°Ｃで加える。混合物の温度を室温よで
昇温せしめ、室温で１時間攪拌する。反応混合物を酢酸
エチルで希釈し、順次２Ｎ塩酸、水、１０％炭酸水素ナ
トリウム水溶液、水および食塩水で洗浄する。硫酸マグ
ネシウムで乾燥後、酢酸エチル抽出液を濾過し、濃縮し
て、０−（Ｎ−ペンシルオキンカルボニルー３−フェニ
ル−０−テトラヒドロピラニル）−Ｄ、Ｌ−セリニル）
−Ｎ−トリフルオロアセチル−Ｌ−セリン　ベンジルエ
ステル（１，６ｇ）を得る。

製造例６ Ｏ−（Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−３−°フェニル
ーＤ、Ｌ−セリニル）−Ｎ−トリフルオロアセチル−Ｌ
−セリン　ベンジルエステル ０−　（Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−３−フェニル
−○−ケトラヒドロピラニルーＤ、Ｌ−セ’Ｊ＝ル）−
Ｎ−トリフルオロアセチル−Ｌ−セリン　ベンジルエス
テル（０，８ｇ）のメタノール（ｌＱｍＱ）溶液に、ｐ
−トルエンスルホン酸（４５，６ｍｇ）を室温で加える
。室温で１時間攪拌後、反応混合物を濃縮し、残渣を薄
層クロマトグラフィーに１寸して、０−（Ｎ−ベンジル
オキシカルボニル−３−フェニル−Ｄ、Ｌ−セリニル）
−Ｎ−トリフルオロアセチル−Ｌ−セリン　ベンジルエ
ステル（４０４ｍｇ）を得る。

ＮＭＲ（ＣＤＣｌ２）δ　：　４．４−４．７　（３Ｈ
，ｍ＞、　４．８−５．３（５Ｈ，ｍ）、　　５．４−
５．７　　（ＬＨ，ｍ）、　　７．１−７．５　　（１
５Ｈ。

ｍ）、　７．５−７．８　（ＩＨ，ｍ）製造例７ Ｏ−（３−フェニル−Ｄ、Ｌ−セリニル）−Ｎ−トリフ
ルオロアセチル−Ｌ−セリン０−（Ｎ−ベンジルオキシ
カルボニル−３−フェニル−Ｄ、Ｌ−セリニル）−Ｎ−
トリフルオロアセチル−Ｌ−セリン　ベンジルエステル
（３２４ｇ）および１０％パラジウム炭素（４００ｍｇ
）の酢酸（５ｍ１１）中温合物を、水素雰囲気中４０ｐ
ｓｉのもとに室温で２時間水素添加する６反応混合物を
シーライト（′ａ過助剤、商標、牛丼化学製）で濾過し
、濃縮、凍結乾燥して、０−（３−−ｙエニルーＤ、Ｌ
−セリニル）−Ｎ−トリフルオロアセチルＬ−セリン（
１５０＋ｎｇ）を得る。

ＮＭＲ（Ｄ２０）８：４．２５−４．３５　（ＬＨ，ｍ
）、　４．５−４．７（３Ｈ，ｍ）、　５．３−５．４
　（ＩＨ，ｍ）、　７．３−７．６　（５Ｈ，ｍ）製造
例８ Ｏ−（０−ヘンシル−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−
し−セリニル）−Ｎ−１リフルオロアセチル−Ｌ−セリ
ン　ベンジルエステルＯ−ヘンシル−Ｎ−ベンジルオキ
シカルボニル−し−セリン（Ｉｇ）およびＮ−トリフル
オロアセチル−Ｌ−セリン　ベンジルエステル（８７３
ｍｇ）の塩化メチレン（ｚｏｍＱ）溶液に、Ｎ、Ｎ−ジ
エチルアミノプロビル−Ｎ′−エチルカルボジイミド・
塩酸塩（５７３ｍｇ　）および４−Ｎ、Ｎ−ジメチルア
ミノピリジン（３７ｍｇ）を０℃で加える。反応混合物
を室温まで昇温せしめ、室温で１時間攪拌する。

反応混合物を酢酸エチル（２ｏｏｍｕ　）で希釈して順
次０．２Ｎ塩酸、水、１０％炭酸水素ナトリウム水溶液
、水および食塩水で洗浄する。硫酸ナトリウムで乾燥後
、酢酸エチル抽出液を濾過して濃縮する。残渣をシリカ
ゲルを使用するクロマトグラフィーに付し、塩化メチレ
ンとヘキサンとの混合物（１：１）、塩化メチレン、次
いで塩化メチレンとアセトンとの混合物（５０：１）で
順次溶出して、０−（０−ベンジル−Ｎ−ベンジルオキ
シカルボニル−し−セリニル）−Ｎ−トリフルオロアセ
チル−し−セリン　ベンジル（１，５ｇ）を得る。

ＮＭＲ（ＣＤＣ１３）８’　３．５５−３．８　（２）
１９ｍ）、４．２−４．６（４Ｈ，ｍ）、　４．３−５
．３　（６Ｈ，ｍ）、　５．５　（ＩＨ，ｍ）。

７．１−７．５　（１５１，ｍ＞、　７．５５−７．８
　（ＩＨ，ｍ）製造例９ Ｏ−（Ｌ−セリニル）−Ｎ−トリフルオロアセチル−Ｌ
−°セリン ０−（○−ベンジル−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル− チル−し−セリン　ペンシルエステル（Ｉｇ）および１
０％パラジウム炭素（１ｇ）の酢酸（　３０ｍＱ　）中
温合物を、水素雰囲気中４０ｐｓｉのもとに室温で６時
間水素添加する。反応混合物をシーライト（濾過助剤、
商標、牛丼化学製）を用いて濾過し、濾液を減圧濃縮し
て残渣を水（５０ｍｍ　）で希釈し、凍結乾燥して、０
−（Ｌ−セリニル）−Ｎ−トリフルオロアセチル−し−
セリン（４３０１１１２）を得る。

ＮＭＲ（Ｃ２０）　８　；３　、９−４．２　（２ｇ１
ｍ　）　、４　、３　（ＩＨ、ｔ−９Ｊ＝４Ｈｚ＞、　
４．５−４．８　（３Ｈ，ｍ＞製造例１０ ０−アセトアセチル−Ｎ−トリフルオロアセチル−Ｌ−
セリン　ベンジルエステル トリフルオロアセチル−し−セリン　ベンジルエステル
（５００ｍｇ　）およびジケテン（０，１ｍＱ）のテト
ラヒドロフラン（１ｏｍＱ）溶液を一夜加熱還流する。

溶媒を留去して残渣を酢酸エチルで希釈し、水および食
塩水で順次洗浄する。硫酸ナトリウムで乾燥後、酢酸エ
チル抽出液を濾過して濃縮する。

残渣をシリカゲルを使用するクロマトグラフィーに付し
、塩化メチレン、塩化メチレンとアセトンとの混合物（
４，１）で順次溶出して、０−アセトアセチル−Ｎ−１
リフルオロアセチル−Ｌ−セリン　ベンジルエステル（
３２０ｍｇ　）　ヲ得ル。

製造例１１ ０−アセトアセチル−Ｎ−トリフルオロアセチル−Ｌ−
セリン ０−アセトアセチル−Ｎ−トリフルオロアセチル−Ｌ−
セリン　ベンジルエステル（３２ｏｍｇ）と１０％パラ
ジウム炭素（４０ｍｇ）とのエタノール（１０ｍｍ　）
中温合物を、水素雰囲気中１気圧下２０分間水素添加す
る。混合物をシーライト（濾過助剤、商標、牛丼化学製
）を用いて濾過し、濾液を濃縮して、０−アセトアセチ
ル−Ｎ−トリフルオロアセチル−Ｌ−セリン（２３２ｍ
ｇ）を得る。

ＮＭＲ（ＣＤＣｌ２）δ　　：　　２．３０　　（３Ｈ
，ｓ）、　　３．６　　（２Ｈ，ｓ）。

４．５５　（ＩＨ，ｄｄ、Ｊ＝２および６Ｈｚ）、　４
．８２　（ＬＨ。

ｄｄ、Ｊ＝２および４）１ｚ）、　４．９４　（ＩＨ，
ｄｄ、Ｊ＝４および　６）１ｚ）、　　７．８２　　（
ＩＨ，ブロード　ｄ、Ｊ＝４Ｈｚ）梨Ｊピ」罠 ０−ベンジル−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−ト
レオニン　２−ベンジルオキシカルボニルエチルエステ
ル Ｏ−ベンジル−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−ト
レオニン（１，１５ｇ）、３−ヒドロキシプロピオン酸
ベンジルエステル（６０４ｍｇ　）　オヨヒ４Ｎ、Ｎ−
ジメチルアミノピリジン（４１ｍｇ）の塩化メチレン（
２０１１１１）溶液に、Ｎ、Ｎ−ジエチルアミノプロビ
ル−Ｎ′　−二チルカルボジイミド・塩酸塩（６４１ｍ
ｇ）を０°Ｃで加える。反応混合物の温度を室温まで上
昇せしめ、室温で１時間攪拌する。反応混合物を濃縮し
て残渣を酢酸エチルで希釈し、０．ＩＮ塩酸、水、１０
％炭酸水素ナトリウム水溶液、水および食塩水で順次洗
浄する。硫酸ナトリウムで乾燥後、酢酸エチル抽出液を
濾過して濃縮する。残渣をシリカゲルを使用するクロマ
トグラフィーに付し、塩化メチレンとヘキサンとの混合
物（１：１）、塩化メチレンおよび塩化メチレンとアセ
トンとの混合物（５０：１）で順次溶出して、０−ベン
ジル−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−トレオニン
　２−ベンジルオキシカルボニルエチルエステル（１，
１ｇ　）　ｆｉ得ル。

ＮＭＲ（ＣＤＣ１３）Ｓ　　：　１．２５　　（３Ｈ１
ｄ、Ｊ＝７Ｈｚ）９２．６０（２Ｈ，ｔ、Ｊ＝７．５Ｈ
ｚ＞、　４．０７　（ＬＨ，ｄｑ、、Ｃ２，５および７
Ｈｚ）、　４．２０−４．５５　（５Ｈ，ｍ＞、　５．
１１　（２）１゜ｓ）、　５．１２　（２８，ｓ）、　
５．５　（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝１０Ｈｚ）。

７．１−７．４　（１５Ｈ，ｍ） 製造例１３ Ｌ−トレオニン　２−カルボキシエチルエステル Ｏ−ベンジル−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−し−ト
レオニン　２−ベンジルオキシカルボニルエチルエステ
ル（１．１ｇ）および１０％パラジウム炭素（７００ｍ
ｇ）の酢酸（　３０ｍ１１　）中温合物を水素雰囲気中
４０ｐｓｉのもとに室温で５時間水素添加する。反応混
合物をシーライト（濾過助剤、商標、牛丼化学製）を用
いて濾過して濃縮する。残渣を水で希釈し、凍結乾燥し
て、Ｌ−トレオニン　２ーカルボキシエチルエステル（
４００ｍｇ）を得る。

ＮＭＲ（ｏ２ｏ）Ｓ：　Ｌ、３５　（３Ｈ，ｄ、Ｊ＝７
Ｈｚ）、　２．６１　（２８゜ｔ、Ｊ：６．５Ｈｚ＞、
　　４．１９　　（ＬＨ，ｄ、、Ｃ４，４Ｈｚ＞、　　
４．３−４．６　　（３Ｈ，ｍ） 製造例１４ Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）トリフルオロアセトアミ
ド トリフルオロ酢酸メチルエステル（６，６７ｍｍ　）お
よびトリエチルアミン（ｓ、　ｓａｍＱ）のメタノール
（７０１１１９）溶液に、２−アミンエタノール（２匹
）を室温で加える。室温で１時間攪拌後、反応混合物を
濃縮して残渣を酢酸エチル（ｚｏｏｍｉ　）で希釈し、
塩化水素水溶液、水、１０％炭酸水素ナトリウム水溶液
および食塩水で順次洗浄する。硫酸ナトリウムで乾燥後
、酢酸エチル抽出液を濾過し、濃縮して、Ｎ−（２−ヒ
ドロキシエチル）トリフルオロアセトアミド（３，８４
ｇ）を得る。

ＮＭＲ（ＣＤＣｌ２）Ｓ：　３．５２　（２Ｈ，ｄｔ、
Ｊ＝３および４Ｈｚ）、　３．８０　（２Ｈ，ｔ、Ｊ：
４Ｈｚ＞、　７．００　（ＬＨ。

ブロード　Ｓ） 製造例１５ ０−ベンジル−Ｎ−ベンジルオキシカルボニルトアミド
エチルエステル ０−ベンジル−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−キシエ
チル）トリフルオロアセトアミド（１ｇ）との塩化メチ
レン（　４４ｍｍ　）溶液に、Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ
プロピル−Ｎ′−二チルカルボジイミド・塩酸塩（１．
２２ｇ）とＮ．Ｎ−ジメチルアミノピリジン（　７７、
　８ｍｇ　）とを室温で加える。室温で１時間攪拌後、
反応混合物を酢酸エチル（　ａｏｏｍＱ）で希釈し、塩
化水素水溶液、水、１０％炭酸水素す２トリウム水溶液
および食塩水で順次洗浄する。硫酸ナトリウムで乾燥後
、酢酸エチル抽出液を濾過して濃縮する。残渣をシリカ
ゲル（６０ｇ）を使用するクロマトグラフィーに付し、
塩化メチレン−ヘキサン混液（１：１ないし３：１）、
塩化メチレン、次いで塩化メチレン−アセトン混液（２
４０：１）で順次溶出して、０−ベンジル−Ｎ−ベンジ
ルオキシカルボニル−Ｌ−トレオニン　２−トリフルオ
ロアセトアミドエチルエステル（２．５４ｇ）を得る。

ＮＭＲ　（ＣＤＣｌ２）δ　：Ｃ２８　（３Ｈ，ｄ，Ｊ
：３Ｈｚ）、　３．３−３．６（２Ｈ．ｍ）、　４．０
５−４．２２　（２）１，ｍ＞、　４．２５−４．４０
（２Ｈ．ｍ＞、　４．５０　（２Ｈ．ＡＢｑ．Ｊ：６お
よび２２Ｈｚ）。

５、１２　　（２Ｈ．ｓ＞、　　５．５６　　（ＬＨ．
ブロード　ｄ）、　　７．２−７．４（ＩＯＨ，ｍ） 製造例１６ Ｌ−）し才二ン　２−トリフルオロアセトアミドエチル
エステル ０−ベンジル−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−し−ト
レオニン　２−トリフルオロアセトアミドエチルエステ
ル（１００ｍｇ）および１０％パラジウム炭素（５０ｍ
ｇ）の酢酸（　１０１１１１　）中温合物を、水素雰囲
気中４気圧下に亀温で３時間水素添加する。

混合物をシーライト（濾過助剤、商標、牛丼化学製）を
用いて濾過し、濾液を濃縮する。残渣を薄層クロマトグ
ラフィーに付し、クロロホルム、メタノールおよび水の
混液（６５：２５：４）で溶出して、Ｌ−トレオニン　
２−トリフルオロアセトアミドエチルエステル（５８ｍ
ｇ）を得る。

ＮＭＲ　（ＤｌｚＯ＞８’　１．３５　（３Ｈ，ｄ，Ｊ
＝３Ｈｚ）、　３．６５−３．７５（２Ｈ．ｍ）、　４
．１２　（ＬＨ，ｄ，に２Ｈｚ）、　４．３５−４．５
０（３Ｈ．ｍ） 製造例１７ Ｎ−トリフルオロアセチル−Ｌ−ホモセリンベンジルエ
ステル Ｌ−ホモセリン（１０ｇ）およびトリエチルアミ”／　
（　１１．７ｍｍ　）　（７）メタ／　−　ル（　５０
ｍｍ　）溶液に、トリフルオロ酢酸メチル（　１２．　
７ｍｍ　）を室温で加え、混合物を室温で一夜攪拌する
。混合物の溶媒を留去して残渣をＮ．Ｎ−ジメチルホル
ムアミド（５０１１１１１　）に溶解してトリエチルア
ミン（　ｕ．　７ｍｍ）を加える。混合物に臭化ペンシ
ル（　２９．　９ｍｍ　）を室温で加え、混合物を室温
で一夜攪拌する。混合物の溶媒を留去して酢酸エチルで
希釈し、０．２Ｎ塩酸、水、、１０％炭酸水素ナトリウ
ム水溶液および食塩水で順次洗浄する。硫酸ナトリウム
で乾燥後、酢酸ニゲル抽出液を′ａ遇し、濃縮して、Ｎ
−トリフルオロアセチルーＬ−ホモセリン　ベンジルエ
ステル（１８，４ｇ）を得る。

ＮＭＲ（ＣＤＣ１３）＆　：２．１−２．４　（２Ｈ，
ｍ）、３．５−３．８（２Ｈ，ｍ）、　４．７−４．９
　（ＩＨ，ｍ）、　５．１−５．３　（２Ｈ，ｍ）。

７．１−７．５　（５）１．ｍ＞ 製造例１８ ０−（０−ベンジル−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−
Ｌ−トリ才二ル）−Ｎ−１−リフルオロアセチル−Ｌ−
ホモセリン　ベンジルエステル ０−ベンジル−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−アセチ
ル−Ｌ−ホモセリン　ベンジルエステル（１．３４ｇ）
および４−Ｎ．Ｎ−ジメチルアミノピリジン（　４８．
　８ｍｇ　）の塩化メチレン（　３０ｍ　）溶液に、Ｎ
．Ｎ−ジメチルアミノプロピル−Ｎ′−エチルカルボジ
イミド・塩酸塩（８４０ｍｇ）を０℃で加える。室温で
１時間攪拌後、反応混合物を濃縮する。残渣を酢酸エチ
ルに溶解し、ｉｆ［次０．ＩＮ塩酸、水、１０％次酸水
素ナトリウム水溶液、水および食塩水で洗浄する。硫酸
ナトリウムで乾燥後、酢酸エチル抽出液を濾過して濃縮
する．残渣をシリカゲルを使用するクロマトグラフィー
に付し、順次塩化メチレンとヘキサンとの混液（１：１
）、塩化メチレン、次いで塩化メチレンとアセトンとの
混液（５０：１）で溶出して、〇−（０−ペンシル−Ｎ
−ベンジルオキシカルボニル− ニル）−Ｎ−トリフルオロアセチル−Ｌ−ホモセリン　
ヘンシルエステル（　１．６ｇ　）　ヲ得ル。

ＮＭＲ　（ＣＤＣ１ａ）＆　　：１．２５　（３Ｈ．ｄ
．Ｊ＝７Ｈｚ）、　２．０−２．３＜２Ｈ．ＩＴｌ）、
　３．９−４．４　（５Ｈ．ｍ＞、　４．５−４．７　
（２Ｈ，ｍ）。

５、１０　（２）１．ｓ）、　５．１７　（２）１．ｓ
）、　５．５４　（１１（、ｄ。

Ｊ＝８Ｈｚ）、　７．１−７．５　（１５Ｈ．ｍ）製造
例１９ ０−Ｌ−トレイニル−Ｎ−トリフルオロアセチル−Ｌ−
ホモセリン ０−（０−ベンジル−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−
Ｌ−トリ才二ル）−Ｎ−トリフルオロアセチル−Ｌ−ホ
モセリン　ベンジルエステル（　１．８ｇ　）および１
０％パラジウム炭素（０．９ｇ）の酢酸（　３Ｑｍｌｌ
　）中温合物を、水素４０ｐｓｉのもとに室温で６時間
水素添加する。反応混合物をシーライト（濾過助剤、商
標、牛丼化学製）で濾過し、濾液を濃縮する。残渣を水
で希釈し、凍結乾燥して，Ｏ−Ｌ−１−レオニル−Ｎ−
トリフルオロアセチル−Ｌ−ホモセリン（８００ｍｇ）
を得る。

ＮＭＲ　（　Ｃ２０）　８　：Ｌ　、３７　（　３Ｈ．
ｄ．Ｊ＝７Ｈｚ＞、２．　１−２−　６（２Ｈ，ｍ）、
　４．１３　（ＩＨ，ｄ．に３）１ｚ）、　４．３−４
．６（４）１．ｍ） 製造例２０ ０−アセチル−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−し−ト
レオニン Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−トレオニン（５ｇ
）の酢酸（　５０ｍＱ）溶液に臭化アセチル（　１．７
５ｍＱ　）を室温で加える。室温で１時間攪拌後、反応
混合物をａ縮して残渣を酢酸エチルで希釈し、水で２回
次いで食塩水で順次洗浄する。硫酸ナトリウムで乾燥し
、酢酸エチル抽出液を濾過、濃縮して、Ｏ−アセチル−
Ｎ−ヘンシルオキシカルボニル−Ｌ−トレオニン（　３
．６４ｇ　）　ヲ得ＮＭＲ　（ＣＤＣ１ａ）　６　；１
−３３　（３Ｈ．ｄ．Ｊ＝３Ｈｚ）、２．００＜３Ｈ，
ｓ）、　　５．１５　（２Ｈ，ｓ＞、　　５．４−５．
６　（２Ｈ，ｍ＞。

７、３−７．５　（５Ｈ，ｍ） Ｍａｓｓ　（Ｍ＋１）　２９６ 製造例２１ ０−［３（Ｒ）−アセトキシ−２（Ｓ）−ベンジルオキ
シカルボニルアミノ−１−オキツブチル］−Ｎ−）−リ
フルオロアセチル−Ｌ−セリン　ベンジルエステル ０−アセチル−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−し−ト
レオニン（Ｉｇ）およびＮ−トリフルオロアセチル−Ｌ
−セリン　ベンジルエステル（９８７ｍｇ）の塩化メチ
レン（　２０ｍＱ　）　溶液に、Ｎ，Ｎ−ジエチルアミ
ノプロピル＝Ｎ′ーエチルカルボジイミド・塩酸塩（１
２２ｇ）および４−Ｎ．Ｎ−ジメチルアミノピリジン（
７７、　８ｍｇ　）を室温で加える。室温で１時間攪拌
後、反応混合物を塩化水素水溶液、水、１０％炭酸水素
ナトリウム水溶液および食塩水で順次洗浄する。硫酸ナ
トリウムで乾燥後、塩化メチレン抽出液を濾過して濃縮
する。残渣をシリカゲル（２０ｇ）を使用するクロマト
グラフィーに付し、順次ヘキサンと塩化メチレンとの混
液（１：１）、塩化メチレン、次いで塩化メチレンとア
セトンとの混液（１２５：１）で溶出して、Ｏ−［３（
Ｒ）−アセトキシ−２（ｓ）−ベンジルオキシカルボニ
ルアミノ−１−オキツブチル］−Ｎ−トリフルオロアセ
チル−Ｌ−セリンヘンシルエステル（１，４２ｇ　）　
ヲ得６゜ＮＭＲ（ＣＤＣ１３）Ｓ’　１．２５　（３Ｈ
，ｄ、Ｊ＝３Ｈｚ）、　２．００（３Ｈ，ｓ）、　４．
２０−４．６０　（４Ｈ，ｍ＞、　５．１０−５．４０
（５Ｈ，ｍ）、　　７．３−７．４　　（１０）１．ｍ
）、　　７．９５　　（ＬＨ，ブロードｓ、Ｊ＝３Ｈｚ
＞ Ｍａｓｓ　　（Ｍａｌ）　　５６９ １１斑召 ０−Ｃ３（Ｒ）−アセトキシ−２（ｓ）−アミノ−１−
オキソプチルコーＮ−トリフルオロアセチル−Ｌ−セリ
ン ０−［３（Ｒ）−アセトキシ−２（ｓ）−ベンジルオキ
シカルボニルアミノ−１−オキソブチル］−Ｎ−トリフ
ルオロアセチル−Ｌ−セリンベンジルエステル（１，４
２ｇ）および１０％パラジウム炭素（３００ｍｇ）の酢
酸（５０躯）中温合物を、水素雰囲気中室温で２時間水
素添加する。混合物をシーライト（濾過助剤、商標、牛
丼化学製）を用いて濾過し、濾液を濃縮する。残渣を水
で希釈し、凍結乾燥して、Ｏ−［３（Ｒ）−アセトキシ
−２（Ｓ）−アミノ−１−オキツブチル］−Ｎ−トリフ
ルオロアセチル−Ｌ−セリンを得る。

ＮＭＲ（ｏｚｏ）８　　’　　１４２　　（３Ｈ，ｄ、
Ｊ＝３Ｈｚ＞、　　２．０７　　（３Ｈ１ｓ）、　３．
９５　（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝２Ｈｚ）、　４．４１　（１）
１．ｄ。

Ｊ＝ＩＨｚ＞、　４．４５−４．７５　（２Ｈ，ｍ）、
、　５．４８　（１）！、ｄｑ。

Ｊ＝１および３Ｈｚ） １１倒避 Ｎ−トリフルオロアセチル−Ｉ、−トレオニンベンジル
エステル Ｌ−トレオニン　ベンジルエステル・塩酸塩（１０ｇ）
およびトリエチルアミン（１２，４８ｍＱ　）のメタノ
ール（１００ｍ１１　）溶液に、トリフルオロ酢酸メチ
ル（８，２１１１Ｍ）を室温で加える。室温で１時間攪
拌後、反応混合物を濃縮する。残渣を酢酸エチルで希釈
し、順次塩化水素水溶液、水、１０％炭酸水素ナトリウ
ム水溶液および食塩水で洗浄する。

硫酸ナトリウムで乾燥後、酢酸エチル抽出液を濃縮する
。残渣の結晶をヘキサンで洗浄して、Ｎ−トリフルオロ
アセチル−Ｌ−トレオニン　ベンジルエステル（１０，
６８ｇ　）を得る。

ＮＭＲ（ＣＤＣ１３）Ｓ：１．２３　（３Ｈ，ｄ、Ｊ＝
３Ｈｚ＞、　４．４８（ＬＨ，ｄｑ、Ｊ−１および３Ｈ
ｚ）、　４．６４　（ＩＨ，ｄｄ。

Ｊ＝１　および４Ｈｚ）、　５．２３　（２Ｈ，ＡＢｑ
、Ｊ＝５および７Ｈｚ）、　７．３−７．５　（５１，
ｍ）１直±塁 ０−（０−ベンジル−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−
Ｌ−トリオニル）−Ｎ−トリフルオロアセチル−Ｌ−ト
レオニン　ベンジルエステル ０−ペンシル−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−し−ト
レオニン（８８８ｍｇ　）とＮ−トリフルオロアセチル
−Ｌ−トレオニン　ヘンシルエステル（１ｇ）との塩化
メチレン（２０ｍＱ）溶液に、Ｎ。

Ｎ−ジエチルアミノプロピノし−Ｎ′−エチルカルボジ
イミド・塩酸塩（５５８ｍｇ）および４−Ｎ、Ｎ−ンメ
チルアミノビリジン（３６ｍｇ）を室温で力日える。室
温で２時間攪拌後、反応混合物を塩化メチレン（ｓｏｍ
ｕ　）で希釈し、塩化水素水溶液、水、１０％炭酸水素
ナトリウム水溶液および食塩水で洗浄する。硫酸ナトリ
ウムで乾燥後、塩化メチレン抽出液を濾過して濃縮する
。残渣をシリカゲル（２０＆）を使用するクロマトグラ
フィーに付し、塩化メチレンとヘキサンとの混液（１：
１）および塩化メチレンで溶出して、０−（０−ベンジ
ル−Ｎ−ペンジルオキシ力ルボニルーＬ−トリオニル）
−Ｎ−トリフルオロアセチル−Ｌ−トレオニンベンジル
エステル（１，２５ｇ）を得る。

ＮＭＲ（ＣＤＣＩｓ）Ｓ：１．２０　（３Ｈ，ｄ、Ｊ：
３Ｈｚ）、１．２７（３Ｈ，ｄＪ＝３Ｈｚ＞、　４．０
４　（ＬＨ，ｄｑ、Ｊ：１および３Ｈｚ）、　４．２５
　（ＬＨ，ｄｄ、Ｊ：１および４Ｈｚ）、　４．４６（
２Ｈ，ＡＢｑ、Ｊ＝６および２０Ｈｚ）、　４．８０　
（ＬＨ，ｄｄ。

Ｊ＝１および４Ｈｚ）、　５．０−５．６　（５Ｈ，ｍ
）、　７．２−７．４　（１５Ｈ，ｍ） 製造例２５ ４−メトキシカルボニル−５−トリフルオロメチル−２
−オキサシリン イソシアノ酢酸メチルエステル（４，ｓｓｍｕ　）およ
びトリエチルアミン（７，０１１ＬＩｌ）のベンゼン（
４５戚）溶液に、トリフルオロアセトアルデヒドエチル
へミアセタール（１３＋ｎＱ）を０℃で加える。混合物
を室温で１時間攪拌し、次いで２時間加熱還流する。こ
の混合物を酢酸で中和して溶媒を留去し、酢酸エチルで
希釈して順次水で２回、１０％炭酸水素ナトリウム水溶
液および食塩水で洗浄する。硫酸ナトリウムで乾燥後、
酢酸エチル抽出液を濾過して濃縮する。残渣を６０°Ｃ
１４ｍｍＨｇで蒸留して、４−メトキシカルボニル−５
−トリフルオロメチル−２−オキサシリン（５ｇ）を得
る。

ＮＭＲ（ＣＤＣ１３）８’　３．８５　（３Ｈ，ｓ）、
４．８３　（ＩＨ，ｄｄ。

Ｊ＝１および２）１ｚ）、　５．１２　（ＩＨ，ｄｑ、
に２および３Ｈｚ）、　６．９６　（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝Ｉ
Ｈｚ）製造例２６ ２−（Ｎ−第三級ブチルオキシカルボニルアミノ）−３
−ヒドロキシ−４，４，４−トリフルオロ酪酸 ４−メトキシカルボニル−５−トリフルオロメチル−２
−オキサゾリン（１０ｇ）の６Ｎ塩化水素水溶液（１０
０誰）溶液を４時間加熱還流する。溶媒を留去し、残渣
を水で希釈して留去する操作を２回繰返す。残渣を水（
１００ｍＱ　）および４Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（ｚ
ｓｓｎ＋Ｑ）および重炭酸ジ第三級ブチル（１２ｍＱ　
）を加えて室温で溶解し、室温で２時間攪拌する。反応
混合物を酢酸エチルで洗浄し、クエン酸で酸性にしてｐ
Ｈ４とし、酢酸エチルで２回抽出する。酢酸エチル抽出
液を合わせて食塩水で洗浄する。硫酸ナトリウムで乾燥
後、酢酸エチル抽出液を濾過し、濃縮して、２−（Ｎ−
第三級ブトキシカルボニルアミノ）−３−ヒドロキシ−
４，４，４−トリフルオロ酪酸（５ｇ）を得る。゛ ＮＭＲ（ＣＤａＯＤ）Ｓ：１．４５　（９Ｈ１ｓ）、４
．４８　（ＩＨ９ｄ。

（ＬＨ，ｄ、Ｊ＝ＩＨｚ）、　４．５６　（ｄｑ、１）
！、Ｊ＝１および４Ｈｚ） 製造例２７ ０−［２−（Ｎ−第三級ブトキシカルボニルアミノ）−
４，４，４−トリフルオロ−１−オキソ−２−ブテニル
］−Ｎ−トリフルオロアセチル−Ｌ−セリン　ベンジル
エステル２−　（Ｎ−第三級ブトキシカルボニルアミノ
）−３−ヒドロキシ−４，４，４−トリフルオロ酪酸（
５ｇ）、Ｎ−トリフルオロアセチル−Ｌ−セリンベンジ
ルエステル（５，３３ｇ）および４−Ｎ、Ｎ−ジメチル
アミノピリジン（２２４ｍｇ　）の塩化メチ＋、　ン（
３０ｍＱ　）　ｍ液に、Ｎ、Ｎ−ジメチルアミノプロピ
ル−Ｎ′　−エチルカルボジイミド・塩酸塩（７，０２
ｇ）を室温で加える。室温で一夜攪拌後、反応混合物を
順次クエン酸水溶液および食塩水で洗浄する。硫酸ナト
リウムで乾燥後、塩化メチレン抽出液を濾過して濃縮す
る。残渣をシリカゲル（１００ｇ）を使用するクロマト
グラフィーに付し、塩化メチレン、次いで塩化メチレン
とアセトンとの混液（４：１）で順次溶出して、Ｏ−［
２−（Ｎ−第三級ブトキシカルボニルアミノ）−４゜４
．４−トリフルオロ−１−才キソー２−ブテニル］−Ｎ
−トリフルオロアセチル−Ｌ−セリンベンジルエステル
（２，８７ｇ　）　１４Ｊル。

ＮＭＲ（ＣＤＣＩｓ）Ｓ　　’　　１．４８　　（９Ｈ
９ｓ）、　　４．５２　　（ＩＨｌｄｄ。

Ｊ＝１および３Ｈｚ）、　５．００　＜２Ｈ，ｍ）、　
５．２５　（２Ｈ。

ＡＢｑ、Ｊ＝３および８Ｈｚ）、　５．４６　（１Ｂ、
ｑ、Ｊ＝３）１ｚ）。

７．３−７．５　（５Ｈ，ｍ） 製造例２８ ｏ−（２−アミノ−４，４，４−トリフルオロ−１−オ
キツブチル）−Ｎ−トリフルオロアセチル−Ｌ−セリン
・トリフルオロ酢酸塩０−［２−（Ｎ−第三級ブトキシ
カルボニルアミノ）−４，４，４−トリフルオロ−１−
オキソ−２−ブテニル］−Ｎ−１リフルオロアセチル−
し−セリン　ベンジルエステル（２，６７ｇ）オよヒエ
０％パラジウム炭素（１，３ｇ）の酢酸（１３ｏｍＱ）
中温合物を、水素雰囲気中室温で１時間水素添加する。

反応混合物をシーライト（ａ過動剤、商標、牛丼化学製
）を用いて濾過し、濃縮して残渣を凍結乾燥する。残渣
をトリフルオロ酢酸（ｔｏｍｘ　）に室温で溶解し、こ
の溶液を３０分間攪拌する。溶媒を留去し、残渣を凍結
乾燥して、０−（２−アミノ−４，４，４−トリフルオ
ロ−１−オキツブチル）−Ｎ−トリフルオロアセチル−
Ｌ−セリン（１，８２ｇ　）を得る。

ＮＭＲ（Ｃ２０）Ｓ：　２．８−３．２　（２Ｈ，ｍ＞
、　４．５−４．８（４Ｈ，ｍ） Ｍａｓｓ　ｍ／ｅ　Ｍ＋１３４１ 製造例２９ ２−（Ｎ−ベンジルオキシカルボニルアミノ）−３−ヒ
ドロキシ−４，４，４−トリフルオロ酪酸メチルエステ
ル ４−メトキシカルボニル−５−トリフルオロメチル−２
−オキサゾリン（５ｇ）のメタノール（４ｏｍＱ）およ
び濃塩酸（ｌｏｍＱ）溶液を５０°Ｃに４時間加熱する
。反応混合物の溶媒を減圧下に留去し、残渣を水（１３
ＱｍＱ　）および酢酸−１−チル（１３０ｍＱ　）で希
釈する。混合物に炭酸水素ナトリウム（１２，８ｇ　）
　、次いで塩化ベンジルオキシカルボニル（３，９８ｍ
２　）を室温で加える。混合物を室温で２時間攪拌する
。酢酸エチル層を分離し、６Ｎ塩酸で酸性にしてｐＨ２
とする。酢酸エチル抽出液を１０％炭酸水素ナトリウム
水溶液および食塩水で順次洗浄する。硫酸ナトリウムで
乾燥後、濾過して濃縮する。沈殿をジイソプロピルエー
テルおよびヘキサンの混液で洗浄して、２−（Ｎ−ベン
ジルオキシカルボニルアミノ ４、４−トリフルオロ酪酸メチルエステル（３．　３　
ｇ　）を得る。

ＮＭＲ　（ＣＤＣｌ２）δ　：　３．８２　（３Ｈ，ｓ
＞、　４．５８　（ＬＨ．ｄｑ。

Ｊ＝１および３Ｈｚ）、　４．７８　（ＩＨ．ｄｄＪ＝
１および３Ｈｚ＞、　　５．１５　　（２Ｈ．ｓ）、　
　５．５５　　（ＬＨ，ブロード　ｄ。

Ｊ＝３Ｈｚ）、　７．３−７．５　（５Ｈ．ｍ）製造例
３０ ２−（Ｎ−ベンジルオキシカルボニルアミノ）−３−（
　２−テトラヒドロピラニルオキシ）−４．４．４−ト
リフルオロ酪酸 ２−（Ｎ−ベンジルオキシカルボニルアミノ）−３−ヒ
ドロキシ−４．４．４−）リフルオロ酪酸メチル（、３
．３ｇ　）の塩化メチレン（３３ｍＱ　）溶液に、ジヒ
ドロピラン（１．１ｍｌｌ）およびｐ−トルエンスルホ
ン酸ピリジニウム（　２５１ｍｇ）を室温で加える。室
温で２時間攪拌後、溶媒を留去して残渣を酢酸エチルで
希釈し、炭酸水素ナトリウム水溶液および食塩水で順次
洗浄する。硫酸ナトリウムで屹燥後、酢酸エチルを留去
して残渣をメタノール（　ｚｏｍＱ）で希釈する。メタ
ノール溶液にＩＮ水酸化ナトリウム（　１ｏｍａ　）を
加えて混合物を室温で２時間攪拌する．溶媒を留去して
残渣を酢酸エチルで洗浄する。水層をクエン酸で酸性に
してｐＨ４にし、酢酸エチルで２回抽出する．酢酸エチ
ル抽出液を合わせて食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで
乾燥し、濾過して濃縮する。残渣をジイソプロピルエー
テルとヘキサンとの混液で結晶化させて、２−（Ｎ−ベ
ンジルオキシカルボニルアミノ３−（２−テトラヒドロ
ピラニルオキシ）−４。

４、４−トリフルオロ酪酸（１ｇ）を得る。

ＮＭＲ　（ＣＤＣ１３）＆　　’　１．３−１．９　（
６Ｈ，ｍ）、３．４−３．９（２Ｈ．ｍ）、　４．６−
４．９　（２Ｈ．ｍ＞、　　５、１８　（２Ｈｌ）。

５、６２　（ＬＨ．ｄｄ，Ｊ＝４および７Ｈｚ＞、　７
．２５−７．４５（５Ｈ．ｍ） 製造例３１ Ｎ−トリフルオロアセチル−〇−［２−ベンジルオキシ
カルボニルアミノ−３−（２−テトラヒドロピラニルオ
キシ）−４．４．４−トリフルオロ−１−オキツブチル
］−Ｌ−セリン　ベンジルエステル ２−（Ｎ−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−（２
−テトラヒドロピラニルオキシ）−４、４．４−トリフ
ルオロ酪酸（１ｇ）、Ｎ−トリフルオロアセチル−し−
セリン　ベンジルエステル（７４６ｍｇ）および４　−
　Ｎ．　Ｎ−ジメチルアミノピリジン（　３１．　３ｍ
ｇ　）の塩化メチレン（　ｌＱｍｌｉ　）溶液に、Ｎ．
Ｎ−’，；エチルアミノプロピルーＮ′−エチルカルボ
ジイミド・塩酸塩（４９１ｍｇ）を０℃で加える。反応
混合物を室温まで昇温せしめ、室温で２時間攪拌する。

反応混合物をクエン酸、１０％炭酸水素ナトリウム水溶
液および食塩水で順次洗浄する。硫酸ナトリウムで乾燥
後、酢酸エチル抽出液を濾過して濃縮する。残渣をシリ
カゲルを使用するクロマトグラフィーに付し、塩化メチ
レンとヘキサンとの混液（１：１）および塩化メチレン
で溶出して、Ｎ−トリフルオロアセチル−〇−［２−ヘ
ンシルオキシカルボニルアミノ−３−（２−テトラヒド
ロピラニルオキシ）−４，４，４−トリフルオロ−１−
オキソブチルコート−セリン　ベンジルエステル（１，
３６ｇ　）　ｌ’４ル。

ＮＭＲ（ＣＤＣ１３）８　　’　　１．４−１．８　　
（６Ｈ９ｍ）、　　３．３−３．９（２Ｈ，ｍ）、　４
．３−５．０　（５Ｈ，ｍ）、　５．１５　（２Ｈ，ｓ
）。

５．２−５．３　（２）１．ｍ）、　５．５０　（ＩＨ
，ｄｄ、Ｊ＝４および７Ｈｚ）、　　７．２−７．５　
　（１０Ｈ，ｍ）、　　７．７　　（ＬＨ，ブロード　
ｄ。

Ｊ＝４Ｈｚ）、　　８．２２　　（ＩＨ，ブロード　ｄ
、Ｊ＝４Ｈｚ）製造例３２ ｏ−（２−アミノ−３−ヒドロキシ−４，４゜４−トリ
フルオロ−１−オキツブチル）−Ｎ−トリフルオロアセ
チル−Ｌ−セリン Ｎ−トリフルオロアセチル−０−［２−ベンジルオキシ
カルボニルアミノ− ドロピラニルオキシ）−４．４．４−　トリフルオロ−
１−オキツブチル］−Ｌ−セリン　ベンジルエステル（
１．３６ｇ）およヒｐ−）ルエンスルホン酸・−水化物
（３９ｍｇ）のメタノール（１４ｍｌ溶液を一夜攪拌す
る。溶媒を留去して残渣を酢酸エチルで希釈し、１０％
炭酸水素ナトリウム水溶液および食塩水で洗浄する。硫
酸ナトリウムで乾燥後、酢酸エチル抽出液を濾過して濃
縮する。残渣を酢酸（　ｓｏｍｕ　）に溶解し、パラジ
ウム炭素（５００ｍｇ）を加える．混合物を水素圧４０
ｐｓｉのもとに室温で１時間水素添加する。溶媒を留去
し、残渣を凍結乾燥して、Ｏ−（２−アミノ−３−ヒド
ロキシ−４、４．４−　トリフルオロ−１−オキソブチ
ル）−Ｎ−１−リフルオロアセチル−Ｌ−セリン（６８
５ｍｇ）を得る。

ＮＭＲ　（Ｃ２０）Ｓ：　４．６−４．８　（４Ｈ，ｍ
＞、　４、９１　（ＬＨ．ｄｑ。

Ｊ＝１および４）ＩＺ　） Ｍａｓｓ　　ｍ／ｅ　　Ｍ十１　　３５７衷直■ユ ＦＲ−９００８４０物質 発酵 コーンスターチ（１％）、グリセリン（１％）、グルコ
ース（０，５％）、綿実粉（０．５％）、乾燥酵母（０
．５％）、コーンステイープ・リカー（０．５％）およ
び炭酸カルシウム（０。２％）を含む培地（ｐ）１６．
５に調整）　（　１ｏｏｍＱ）を５００ｍ１１エルレン
マイヤーフラスコそれぞれに注ぎ、１２０℃で３０分間
滅菌する。

ストレプトマイセスψニス・ピーＮｏ．　８７２７の斜
面培養物１白金耳を各培地に接種して回転振とう培養器
上３０℃で３日間培養する。この培養物を、あらかじめ
１２０℃で３０分間滅菌した２００　Ｎのジャーファー
メンタ−中の可溶性でんぷん（２％）、コーンスターチ
（１％）、　綿実粉（　１％）、コーンステイープ・リ
カー（０．５％）、乾燥酵母（０．１％）、ＮａＣｌ　
（　Ｑ．　１％）、ＭｇＳＯ４−　７　Ｒ２０（　０．
　０５％）、ＣａＣＯ３　（　０　、２％）、アデカノ
ール（消泡剤、商標、旭電化工業株式会社製）（０．１
％）　（　１５ＯＮ　）を含む培地に接種し１００ｊ２
／分で通気しなから２００ｒｐｍの攪拌下、３０℃で４
日間培養する。

単離および精製 このようにして得られる培養ブロスをケイ藻土（　５ｋ
ｇ）を用いて濾過する。濾液（ｕ（Ｒ１）をｐＨ７に調
整し、活性炭のカラム（１０２、２０　Ｘ　３２ｃｍ　
）を通過させ、水（３０４２）洗後、アセトン水溶液（
５％、３０り）で溶出する。溶出液の溶媒を減圧下に留
去して油状残渣を得る。油状残渣をシリカゲル（キーゼ
ルゲル６０、７０−２３０メツシユ、メルク社製）（５
００ｇ）と混合し、この混合物をメタノール中でスラリ
ー化する。溶媒を留去後、残渣の乾燥粉末をクロロホル
ム、メタノールおよび水（１０：６：１、ｖ／ｖ　）を
充填した同じシリカゲル（１、５Ｎ　、１１Ｘ１６ｃｍ
）のカラムクロマトグラフィーに付す。カラムを同じ溶
媒系で溶出する。目的化合物を含む両分を集め、減圧濃
縮してＦＲ−　９００８４０物質を淡黄色油状物の形と
して得る。この油状物をエタノールに溶解し、減圧濃縮
する。この濃縮物を室温で放置して純粋なＦＲ　−　９
００８４０物質（１５ｇ）を淡黄色結晶として得る。

衷】Ｕ１至 ０−［２−ジアゾ−３（Ｒ）−ヒドロキシ−１−オキツ
ブチル］−Ｎ−トリフルオロアセチル−Ｌ−セリン ０−（Ｌ−トリオニル）−Ｎ−（トリフルオロアセチル
）−Ｌ−セリン（１０９ｍｇ）の溶液に、４Ｍクロロ酢
酸水溶液（２０４）および６Ｍ亜硝酸カリウム水溶液（
１２０ｍ　）を加え、溶液を室温で１５分間攪拌するし
、０−［２−ジアゾ−３（Ｒ）−ヒドロキシ−１−オキ
ソブチルコーＮ−トリフルオロアセチル−Ｌ−セリンを
含む混合物を得る。

夾直透ユ ＦＲ−９００８４０物質［０−［２−ジアゾ−３（Ｒ）
−ヒドロキシ−１−オキソブチルコーし一セリン アシラーゼＩ（アシラーゼ、シグマＡ　−７２６４、シ
グマ・ケミカルズ製）　（２０ｒｎｇ）を実施例２で得
た混合物に加え、ｐＨ８の２　Ｍ　トリス緩衝液を加え
て混合物のｐＨを７．０と７．３との間に保つ。室温で
１２０分間攪拌後、混合物を凍結乾燥し、残渣を活性炭
のカラムに吸着せしめる。カラムを水洗し、次いでアセ
トン−Ｈ２Ｏ（５：　９５）で溶出し、溶出液を蒸発乾
固する。得られる残渣をＣＨｃ１３−メタノール−Ｈ２
Ｏ（５：　３　：　１　）を溶出液としてシリカゲルカ
ラムを使用するクロマトグラフィーにより精製して、０
−［２−ジアゾ−（３Ｒ）−ヒドロキシ−１−オキソブ
チル−し−セリン（２０ｍｇ＞を得る。これは醗酵法に
よって製造したＦＲ−９００８４０物質とすべての観点
から一致する。

ＩＲ（Ｘジ１−４）　　：　　３４２０．　３２７０．
　３１００．　２９２０．　２２５０゜２１００、１６
６０．１６１０．１５６０．１５２０゜１４６０、１４
１０．１３８０．１３５０．１２９０゜１２３０、１１
６０．１１４０．１０９０．１０７０゜１０１０、９６
０．９００．８４０．８２０．７９０゜７４０、７０５
　ａｍ−１； ＮＭＲ（Ｄ２０）Ｓ：　４．８６　（ＩＨ，（１゜Ｊ＝
６．６Ｈｚ＞、　４．６２　（２Ｈ，ｄ、Ｊ＝３．８Ｈ
ｚ）、　４．１０（ＬＨ，ｔ、Ｊ＝３．８Ｈｚ＞、　１
．４２　（３Ｈ，ｄＪ＝６．６Ｈｚ）ｉＦＡＢ−ＭＳ　
ｍ／ｚ　２１８　（Ｍ＋Ｈ）実施例４ ０−［２−ジアゾ−３−（Ｓ）−ヒドロキシ−１−オキ
ソプチルコーし一セリン ○−（Ｒ−トリ才二ル）−Ｎ−１リフルオロアヒテルー
し一セリン（４００ｍｇ　）と４Ｍクロロ酢酸水溶液（
ａｏｍｕ　）との水溶液に、亜硝酸ナトリウム（１８３
ｍｇ）を室温で加える。室温で１５分間攪拌後、反応混
合物を２Ｍトリス緩衝溶液で中和してｐＨ７，０ないし
７．３とし、アシラーゼＩ（アシラーゼ、シグマＡ　−
７２６４、シグマ・ケミカルズ製）（４０ｍｇ）を室温
で加える。室温で５時間攪拌後、反応混合物を活性炭を
使用するクロマトグラフィーに付して水、水とアセトン
との混液（９：１）で順次溶出し、次いでシリカゲルを
使用するクロマトグラフィーに付し、続いてクロロホル
ム、メタノールおよび水の混液（１０：　６　：　１）
で溶出し、凍結乾燥して、Ｏ−［２−ジアゾ−３（Ｓ）
−ヒドロキシ−１−オキツブチル］−Ｌ−セリンを得る
。

ＮＭＲ（Ｄ’ｚＯ）Ｓ’　１．４２　（３Ｈ−ｄ、Ｊ＝
６Ｈｚ＞、４．１　（ＬＨｌｔ。

Ｊ＝５Ｈｚ）、　４．５−４．７　（２Ｈ，ｍ＞、　４
．９　（ＩＨ，ｑ。

Ｊ＝６Ｈｚ） ｔＲ（ＫＢｒ）　’　３３００．２１００．１６２０．
１２９０　ｃｍ−’宜ｎ旦 ０−（２−ジアゾ−３−ヒドロキシ−３−フェニル−１
−オキツブチル）−Ｌ−セリン０−（Ｄ、Ｌ−フェニル
セリニル）−Ｎ−トリフルオロアセチル−Ｌ−セリン（
１５０ｍｇ）と４Ｍクロロ・酢酸水溶液（４０４）との
水（５ｍ１ｌ）溶液に、亜硝酸ナトリウム（６０ｍｇ）
を室温で加える。

室温で３０分間攪拌後、反応混合物を２Ｍトリス緩衝溶
液で中和してｐＨ７，０ないし７．３とし、アシラーゼ
！（アシラーゼ、シグマＡ　−７２６４，シグマ・ケミ
カルズ製）　（４５ｍｇ）を加える。室温で６時間攪拌
後、反応混合物を活性炭を使用するクロマトグラフィー
に付して水とアセトンとの混液（９５：１）で溶出し、
次いでシリカゲルを使用するクロマトグラフィーに付し
てクロロホルム、メタノールおよび水の混液（１０：６
：１）で溶出し、次いで凍結乾燥して、０−（２−ジア
ゾ−３−ヒドロキシ−３−フェニル−１−オキツブデル
）−Ｌ−セリン（１５ｍｇ）を得る。

ＮＭＲ（Ｃ２０）δ　：　４．５−４．８　（３）１．
ｍ）、　５．８−５．９　（ＬＨ。

ｍ）、　　７．３−８．０　　（５）１．ｍ）哀厘■１ Ｏ−（２−ジアゾ−３−ヒドロキシ−１−オキソプロピ
ル）−Ｌ−セリン ０−（Ｌ−セリニル）−Ｎ−トリフルオロアセチル−Ｌ
−セリン（４００ｍｇ）および４Ｍクロロ酢酸水溶液（
５０４）の水（４１１ＬＱ）溶液に、亜硝酸ナトリウム
（１９３ｍｇ）を室温で加える。室温で１５分間攪拌後
、反応混合物を２Ｍトリス緩衝溶液で中和してｐＨ７，
０ないし７．３とし、次いでアシラーゼＩ（アシラーゼ
、シグマＡ　−７２６４、シグマ・ケミカル社製）（６
０ｍｇ）をカロえる。混合物を室温で５時間攪拌し、活
性炭（５０ｍ１ｌ　）を使用するクロマトグラフィーに
付し、水および水とアセトンとの混液（９：１）で順次
溶出して得る粗生成物をシリカゲルを使用するクロマト
グラフィーに付し、塩化メチレン、メタノールおよび水
の混合物（１０：６：１ないし５：３：１）で溶出し、
きらに同様にシリカゲルを使用するクロマトグラフィー
に付し、塩化メチレン、メタノールおよび水の混液（５
：３：１）で溶出して得る純物質を凍結乾燥して、ｏ−
（２−ジアゾ−３−ヒドロキシ−１−オキソプロピル）
−Ｌ−セリン（３３ｍｇ　）を得る。

ＮＭＲ（Ｃ２０）δ　：　４．０５　（ＩＨ，ｔ、Ｊ＝
３．６Ｈｚ＞、　４．４５（２Ｈ，ｓ）、　４．６０　
（２Ｈ，ｍ）哀直±ユ ２−ジアゾ−３（Ｒ）−ヒドロキシ酪酸エテルエステル Ｌ−トレオニンエチルエステル（５０ｍｇ　）　オよび
４Ｍクロロ酢酸水溶液（６０ｍ　）の水（１ｍｕ）溶液
に、亜硝酸ナトリウム（４６，９ｍｇ）を室温で加える
。室温で５分間攪拌後、反応混合物を酢酸エチルで抽出
する。硫酸ナトリウムで乾燥後、酢酸エチル抽出液を濾
過して濃縮する。残渣を薄層クロマトグラフィーに付し
て、２−ジアゾ−３（Ｒ）−ヒドロキシ酪酸エテルエス
テル（８ｍｇ）を得る。

ＮＭＲ（ＣＤＣ１３）＆　＝１．２９　（３Ｈ，ｔ、Ｊ
＝８Ｈｚ＞、　１．４０（３Ｈ，ｄ、Ｊ＝６）１ｚ）、
　　４．２６　（２）１．ｑ、Ｊ＝８Ｈｚ）、　　４．
９５（ＩＨ，ｑ、に６Ｈｚ＞ ＩＲ（ニー））　　　：　　３４５０．　　３０００．
　　２１２５．　　１７５０．　　１６９５゜１３００
　ｃｍ−１ 夫農］１ Ｏ−（２−ジアゾ−１，３−ジオキソブチル）−Ｎ−１
−リフルオロアセチル−し−セリン０−アセトアセチル
−Ｎ−トリフルオロアセチル−Ｌ−セリン（２３２ｍｇ
）およびトリエチルアミン（０，４１ｍ　）のエタ／−
ル（７ｍＪｌ）溶液に、ｐ−トルエンスルホニルアジＩ
：　（１９３ｍｇ）　ヲ０℃で加える。混合物を０℃で
１時間、次いで室温で４時間攪拌する。溶媒を減圧下に
留去し、残渣をクロロホルムで希釈して酢酸水溶液、水
および食塩水で順次洗浄する。硫酸ナトリウムで乾燥後
、クロロホルム抽出液を濾過して濃縮する。残渣をシリ
カゲル（１０ｇ）を使用するフラッシュクロマトグラフ
ィーに付し、クロロホルムならびにメタノールとクロロ
ホルムとの混液（１：９）で順次溶出して、ｏ−（２−
ジアゾ−１，３−ジオキソブチル）−Ｎ−トリフルオロ
アセチル−Ｌ−セリン（１９３ｍｇ）を得る。

ＮＭＲ（Ｃ２０）δ　：　２．３３　（３）１．ｓ）、
　４．３１　＜ＬＨ，ｄｄ、Ｊ＝３および４Ｈｚ）、　
４．５１　（ＩＨ，ｄｄ、、Ｃ２および３Ｈｚ＞、　４
．７０　＜ＩＨ，ｄｄ、Ｊ＝２および４Ｈｚ　）衷厘堡
上 ｏ−（２−ジアゾ−１，３−ジオキソブチル）−Ｌ−セ
リン ０−（２−ジアゾ−１，３−ジオキソブチル）−Ｎ−ト
リフルオロアセチル−Ｌ−セリン（１９３ｍｇ）および
アシラーゼ■（アシラーゼ、シグマＡ−７２６４、シグ
マーケミカルズ製）（６０ｍｇ）の水（６ｍ１１）溶液
を２Ｍトリス緩衝溶液で中和してｐＨ７、０−７，３と
し、混合物を４０℃で４時間攪拌する。

反応混合物を活性炭（２０ｍＱ　）を使用するクロマト
グラフィーに付し、水、アセトンと水との混液（１：１
）ならびにアセトンで順次溶出して粗製固体（１００ｍ
ｇ　）を得る。上記固体（５０ｍｇ　）をシリカゲル（
２，５ｇ）を使用するクロマトグラフィーに付し、クロ
ロホルムとメタノールとの混液（９：１）およびクロロ
ホルム、メタノールおよび水の混液（６５：２５：４）
で順次溶出して、〇−（２−ジアゾ−１，３−ジオキソ
ブチル）−Ｌ−セリン（２２ｍｇ）を得る。

ＮＭＲくＤｚＯ）δ　　：　　２．４５　　（３Ｈ，ｓ
）、　　４．１３　　（ＬＨ，ｔ。

Ｊ＝２Ｈｚ）、　４．６８　（２Ｈ，ｄ、Ｊ＝２Ｈｚ）
ＩＲ（スジ暑−ル）　　：　　２１４０　　ａｎｄ　　
１７２０　　ａｍ−１Ｍａｓｓ　（Ｍ＋１＞　２１６ 実施例１０ ２−ジアゾ−３（Ｒ）−ヒドロキシ酪酸　２−カルボキ
シエチルエステルし Ｌ−トレオニン　２−カルボキシエチルエステル（２２
０ｍｇ）および４Ｍクロロ酢酸水溶液（２５縛）の水（
５ｍＱ）溶液に、亜硝酸ナトリウム（１５９ｍｇ）を室
温で加える。室温で１０分間撹拌後、反応混合物を２Ｍ
トリス緩衝溶液で中和してｐＨ７，０とし、活性炭（２
５１１１１）を使用するクロマトグラフィーに付し、水
および水とアセトンとの混液（９：１）で順次溶出して
得る粗生成物を、シリカゲルを使用するクロマトグラフ
ィーに付し、クロロホルム、メタノールおよび水の混液
（５：３：１）で溶出し、凍結乾燥して、２−ジアゾ−
３（Ｒ）−ヒドロキシ酪酸　２−カルボキシエチルエス
テル（６０ｍｇ）を得る。

ＮＭＲ（ＤｚＯ）Ｓ：１．３９　（３Ｈ，ｄ、Ｊ＝６）
１ｚ）、２．６５　（２１（。

ｔ、Ｊ＝７Ｈｚ）、　４．４０　（２Ｈ，ｔ、Ｊ＝５Ｈ
ｚ）、　４．８５　＜ＬＨ。

ｑ、Ｊ＝６）１ｚ） ＩＲに−ト）　　：　　３３５０．　２９７０．　２１
００．　１６８０　　ｃｍ−１罠友±旦 ２−ジアゾ−３（Ｒ）−ヒドロキシ酪＃　２−トリフル
オロアセトアミドエチルエステルＬ−トレオニン　２−
トリフルオロアセトアミドエチルエステル（１ｇ）およ
び４Ｍクロロ酢酸水溶液（０，１１Ｉ１１１）の水（２
０戚）溶液に、亜硝酸ナトリウム（５３４ｍｇ　）を室
温で加える１反応混合物を室温で３０分間攪拌し、これ
に１０％炭酸水素ナトリウム水溶液を加える。この混合
物を酢酸エチルで２回抽出し、酢酸エチル抽出液を合わ
せて、食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥して濾過
する。溶媒を留去して残渣をシリカゲル（２０ｇ）を使
用するクロマトグラフィーに付し、塩化メチレンおよび
塩化メチレンとアセトンとの混液（２４：１）で順次溶
出して、２−ジアゾ−３（Ｒ）−ヒドロキシ酪酸　２−
トリフルオロアセトアミドエテルエステル（２００ｍｇ
）を得る。

ＮＭＲ（ＤｚＯ）ε　：Ｌ４３　（ｄ、３Ｈ，に３Ｈｚ
）、　３．６０−３．７２（２Ｈ，ｍ＞、　４．２５−
４．５５　（２Ｈ，ｎ＋）、　４．９３　（ＬＨ，ｑ。

、Ｃ３Ｈｚ） ＩＲ（スジａ−Ｌ＞　　’　　２１００．　１７１０　
　ａｍ−１実施例１２ ０−（２−ジアゾ−３（Ｒ）−ヒドロキシ−１−オキツ
ブチル）−Ｌ−ホモセリン ○−Ｌ−トリオニルーＮ−トリプルオロアセチル−Ｌ−
ホモセリン（８００ｍｇ）および４Ｍクロロ酢酸水溶液
（１００ｓｊｌ　）の水（１０或）溶液に、亜硝酸ナト
リウム（３４５ｍｇ）を室温で加える。室温で１５分間
攪拌後、反応混合物を２Ｍトリス緩衝液で中和してｐＨ
７，０−７，３とし、次いでアシラーゼＩ（アシラーゼ
、シグマＡ　−７２６４、シグマやケミカルス類）　（
１００ｍｇ　）を加える。混合物を３５℃で５時間攪拌
し、活性炭（５０１１１ｍ　）を使用するクロマトグラ
フィーに付し、水および水とアセトンとの混液（９：１
）で順次溶出して、ｏ−（２−ジアゾ−３（Ｒ）−ヒド
ロキシ−１−オキツブチル）−Ｌ−ホモセリン（２８ｍ
ｇ　）を得る。

ＮＭＲ（ＤｚＯ）δ　：　１．４５　（３Ｈ，ｄ、Ｊニ
アＨｚ）、　３．８２　（ＩＨ。

ｔ、Ｊ＝５．５Ｈｚ）、　４．３８　（２Ｈ，ｍ）、　
４．９０　（ＩＨ，ｑ。

Ｊ＝７Ｈｚ） ＬＲ（ＫＢｒ）　　　：　　３３００．　２０Ｂ０．　
　１６００．　１２８０　　ａｍ−’寒直±旦 ０−［３（Ｒ）−アセトキシ−２−ジアゾ−１−オキソ
ブチル）−Ｎ−トリフルオロアセチル−Ｌ−セリン ０−（３（Ｒ）−アセトキシ−２（Ｓ）−アミノ−１−
オキツブチル）−Ｎ−トリフルオロアセチル−Ｌ−セリ
ン（２ＱＯｍｇ）およびクロロ酢酸（０，０１５１１１
１１）の水（２ｍＱ）中部合物に、亜硝酸＋トリウム（
８０ｍｇ）を室温で加える。室温で０．５時間攪拌後、
酢酸を加えて混合物を酢酸エチルで３回抽出し、酢酸エ
チル抽出液を合わせて食塩水で洗浄する。硫酸ナトリウ
ムで乾燥後、酢酸エチル抽出液を濾過して濃縮する。残
渣を薄層クロマトグラフィーに付して、Ｏ−［３（Ｒ）
−アセトキシ−２−ジアゾ−１−オキツブチル］−Ｎ−
トリプル才ロアセチル−Ｌ−セリン（８ｍｇ）Ｈ＊る。

ト薯ＭＲ（Ｃ２０）δ　　：　　１．５２　　（３１１
，ｄ、Ｊ＝３Ｈｚ＞、　　２．４６　　（３８゜ｓ）、
　４．４−４．８　（３Ｈ，ｍ）、　４．９０　（ＩＨ
，ｑ、Ｊ＝３Ｈｚ）実施例１４ ０−（２−ジアゾ−３（Ｒ）−ヒドロキシ−１−オキツ
ブチル）−Ｎ−）リフルオロアセチル−Ｌ−トレオニン ０−（０−ベンジル−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル− アセチル−Ｌ−トレオニン　ベンジルエステル（１．２
５ｇ）および１０％パラジウム炭素（　６００ｍｇ　）
の酢酸（　６００ｍＱ　）中温合物を、水素雰囲気中室
温で４時間水素添加する。溶媒を留去後、残渣を水で希
釈して凍結乾燥し、白色固体（６０５ｍｇ）を得る。白
色固体（６０５ｍｇ）を水（５ｍλ）に溶解し、これに
亜硝酸ナトリウム（２７３ｍｇ）を室温で加える。室温
で半時間攪拌後、反応混合物を活性炭（　８０＋ｎＱ　
）を使用するクロマトグラフィーに付し、水およびアセ
トンと水との混液（１：９）で順次溶出して得る粗生成
物を薄着クロマトグラフィーに付し、クロロホルム、メ
タノールおよび水の混液（６５：２５：４）で溶出して
、Ｏ−（２−ジアゾ−３（Ｒ）−ヒドロキシ−１−オキ
ツブチル）−Ｎ−ト１）フルオロアセチル−Ｌ−トレオ
ニン（１２０ｍｇ）を得る。

ＮＭＲ　（ＤｚＯ）Ｓ：１．３７　（３Ｈ．ｄ，Ｊ＝３
Ｈｚ）、　１．４２　（３Ｈ。

ｄＪ＝３Ｈｚ＞、　４．５０　（ＬＨ，ｄ．Ｊ＝２Ｈｚ
）、　４．８５　（ＩＨ。

ｑ．Ｊ−３Ｈｚ＞、　５．４９　（ＩＨ．ｄｑ．、Ｃ２
および３Ｈｚ　＞東直孤長 ０−（２−ジアゾ−４．４．４−トリフルオロ−１−オ
キツブチル）−Ｎ−トリフルオロアセチル−Ｌ−セリン ｏ−（２−アミノ−４．４．４−トリフルオロ−１−オ
キツブチル）−Ｎ−１−リフルオロアセチル−Ｌ−セリ
ン（８８ｍｇ）の水（３戚）溶液に、亜硝酸ナトリウム
（２５．　３ｍｇ　）を室温で加える．室温で３０分間
攪拌後、反応混合物を２Ｍトリス緩衝溶液で中和してｐ
Ｈ７．　０　−　７．　３にする．混合物を活性炭（１
０１ｄ）を使用するクロマトグラフィーに付し、水およ
び水とアセトンとの混液（９：１）で溶出して得る粗生
成物を、さらにまた薄層クロマトグラフィーに付して、
０−（２−ジアゾ−４．４．４−トリフルオロ−１−オ
キツブチル）−Ｎ−トリフルオロアセチル−Ｌ−セリン
（１５ｍｇ）を得る。

ＮＭＲ　（ｏ２ｏ）ｇ　：　３．２６　（２Ｈ，ｑ，Ｊ
＝１１Ｈｚ）、　４．４−４．５５（ＩＨ．ｍ）、　４
．６−４．７５　（２Ｈ．ｍ）ＩＲ　　（スジタール）
　　：　　２１１０．　　１７００　　ｃｒｎ−’衷凰
仇廷 ０−（２−ジアゾ−４．４．４−トリフルオロ−１−オ
キソブチル）−Ｌ−セリン 〇−（２−アミノ−４．４．４−トリフルオロ−１−オ
キツブチル）−Ｎ−トリフルオロアセチル−Ｌーセリン
　トリフルオロ酢酸塩（　５００ｍｇ　）の水（　５１
１１Ｑ）溶液に、亜硝酸ナトリウム（　１４６ｍｇ＞を
室温で加える。

室温で３０分間攪拌後、反応混合物を２Ｍトリス緩衝溶
液で中和してｐＨ７．　０−　７．　３にし、アシラー
ゼＩ（アシラーゼ、シグマＡ　−　７２６４、シグマ・
ケミカルズ製）（７０ｍｇ）を加える．室温で６時間攪
拌後、混合物をＳＰ（商標、三菱化成株式会社製）　（
　５０ｍＱ　）を使用するクロマトグラフィーに付し、
水および水とアセトンとの混液（９：１）で順次溶出し
て得る粗生成物を、薄層クロマトグラフィーに付し、ク
ロロホルム、メタノールおよび水の混液（６５：２５：
４）で溶出して、ｏ−（２−ジアゾ−４、４．４−トリ
フルオロ−１−オキツブチル）−Ｌ−セリン（　２８ｍ
ｇ）を得る。

ＮＭＲ（Ｃ２０〉δ：　４．０８　（ＩＨ．ｔ，Ｊ＝２
Ｈｚ）、　４．６４　（２）１。

ｄ，Ｊ：２Ｈｚ）、　５．１８　（ＩＨ．ｑ，Ｊ＝４Ｈ
ｚ＞ＩＲ　　（Ｘジｉ−４）　　：　　２１６０．　　
１７００　　ｃｍ−’に簾久且 ｏ−（２−ジアゾ−３−ヒドロキシ−４．４。

４−トリフルオロ−１−オキツブチル）−Ｌ−七リン ０−（２−アミノ−３−ヒドロキシ−４．４．４−トリ
フルオロ−１−オキツブチル）−Ｎ−トリフルオロアセ
チル−Ｌ−セリン（６８５ｍｇ）およびりｏｏ酢酸（０
，Ｑ４ｍＱ　）の水（７ｍＱ）溶液に、亜硝酸ナトリウ
ム（２２７ｍｇ　）を室温で加える。室温で３０分間攪
拌後、反応混合物を２Ｍトリス緩衝溶液で中和してｐＨ
７，０ないし７．３にし、次いでアシラーゼ（アシラー
ゼ、シグマＡ　−７２６４、シグマ・ケミカルズ製）　
（１４０ｍｇ）を加える。混合物を室温で６時間攪拌し
、活性炭（６０ｍＱ）を使用するクロマトグラフィーに
付し、水および水とアセトンとの混液（９：　１）で溶
出して得る粗生成物を、薄層クロマトグラフィーに付し
、クロロホルム、メタノールおよび水の混液（６５：３
５：４）で溶出し、凍結乾燥して、０−（２−ジアゾ−
３−ヒドロキン−４，４，４−トリフルオロ−１−オキ
ツブチル）−Ｌ−セリン（１１３ｍｇ）を得る。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）一般式： ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、Ｒ＾１は水素、低級アルキル基、ハロ（低級）
   アルキル基またはアリール基、 Ｒ＾２は水素、ヒドロキシ基または保護されたヒドロキ
   シ基、 Ｒ＾３は水素、 Ｒ＾４は低級アルキル基、アミノ（低級）アルキル、カ
   ルボキシ（低級）アルキル基、アミノカルボキシ（低級
   ）アルキル基、保護されたアミノ（低級）アルキル基ま
   たは保護されたアミノ−カルボキシ（低級）アルキル基
   、 Ｒ＾５は水素または低級アルキル基を意味し、Ｒ＾２と
   Ｒ＾３とは結合してオキソ基を形成してもよい］で示さ
   れるアミノ酸誘導体および医薬として許容されるその塩
   。 ２）Ｏ−［２−ジアゾ−３（Ｒ）−ヒドロキシ−１−オ
   キソブチル］−Ｌ−セリンである特許請求の範囲第１項
   に記載の化合物。 ３）Ｏ−［２−ジアゾ−３（Ｓ）−ヒドロキシ−１−オ
   キソブチル］−Ｌ−セリンである特許請求の範囲第１項
   に記載の化合物。 ４）Ｏ−（２−ジアゾ−３−ヒドロキシ−１−オキソプ
   ロピル）−Ｌ−セリンである特許請求の範囲第１項に記
   載の化合物。 ５）（１）一般式： ▲数式、化学式、表等があります▼ で示される化合物またはその塩をアルカリ金属亜硝酸塩
   と反応させて、一般式： ▲数式、化学式、表等があります▼ で示される化合物またはその塩を得るか、または（２）
   一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ で示される化合物またはその塩をｐ−トルエンスルホニ
   ルアジドと反応させて、一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ で示される化合物またはその塩を得るか、または（３）
   一般式： ▲数式、化学式、表等があります▼ で示される化合物またはその塩をＲ＾４＿３のアミノ保
   護基の脱離反応に付して、一般式： ▲数式、化学式、表等があります▼ で示される化合物またはその塩を得ることを特徴とする
   、一般式： ▲数式、化学式、表等があります▼ ［上記式中、Ｒ＾１は水素、低級アルキル基、ハロ（低
   級）アルキル基またはアリール基、 Ｒ＾２は水素、ヒドロキシ基または保護されたヒドロキ
   シ基、 Ｒ＾３は水素、 Ｒ＾４は低級アルキル基、アミノ（低級）アルキル基、
   カルボキシ（低級）アルキル基、アミノカルボキシ（低
   級）アルキル基、保護されたアミノ（低級）アルキル基
   または保護されたアミノ−カルボキシ（低級）アルキル
   基、 Ｒ＾５は水素または低級アルキル基を意味し、Ｒ＾２と
   Ｒ＾３とは結合してオキソ基を形成してもよく、 Ｒ＾４＿３は保護されたアミノ（低級）アルキル基また
   は保護されたアミノカルボキシ（低級）アルキル基、 Ｒ＾４′＿３はアミノ（低級）アルキル基またアミノカ
   ルボキシ（低級）アルキル基を意味する］で示されるア
   ミノ酸誘導体またはその医薬として許容される塩の製造
   法。 ６）Ｏ−［２−ジアゾ−３（Ｒ）−ヒドロキシ−１−オ
   キソブチル］−Ｌ−セリン（以下ＦＲ−９００８４０物
   質と略称）を産生しうるストレプトマイセス（￥Ｓｔｒ
   ｅｐｔｏｍｙｃｅｓ￥）属に属する菌株を水性栄養培地
   に好気条件下に培養し、ＦＲ−９００８４０物質を回収
   することを特徴とするＦＲ−９００８４０物質の製造法
   。 ７）ストレプトマイセス（￥Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ
   ￥）属に属する菌株が、ストレプトマイセス・エスピー
   （￥Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ￥　ｓｐ．）Ｎｏ．８７
   ２７（微工研条寄第１８０４号）である特許請求の範囲
   第６項に記載の製造法。 ８）ストレプトマイセス・エスピー（￥Ｓｔｒｅｐｔｏ
   −ｍｙｃｅｓ￥　ｓｐ．）第８７２７号（微工研条寄第
   １８０４号）の純粋培養物。 ９）有効成分として、一般式： ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、Ｒ＾１は水素、低級アルキル基、ハロ（低級）
   アルキル基またはアリール基、 Ｒ＾２は水素、ヒドロキシ基または保護されたヒドロキ
   シ基、 Ｒ＾３は水素、 Ｒ＾４は低級アルキル基、アミノ（低級）アルキル、カ
   ルボキシ（低級）アルキル基、アミノカルボキシ（低級
   ）アルキル基、保護されたアミノ（低級）アルキル基ま
   たは保護されたアミノ−カルボキシ（低級）アルキル基
   、 Ｒ＾５は水素または低級アルキル基を意味し、Ｒ＾２と
   Ｒ＾３とは結合してオキソ基を形成してもよい］で示さ
   れるアミノ酸誘導体または医薬として許容されるその塩
   、ならびに無毒性の医薬として許容される担体を含有す
   ることを特徴とする医薬組成物。