JPS63233963A - フエニルアラニン誘導体および蛋白分解酵素阻害剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は新規なフェニルアラニン誘導体に関し、更に詳
しくは蛋白分解酵素阻害活性を有するフェニルアラニン
誘導体又はその薬学的に許容し得る塩及びそれらを有効
成分とする蛋白分解酵素阻害剤に関する。

［従来の技術及び発明が解決しようとする問題点］生体
内には種々の蛋白分解酵素が存在していることは周知の
通りであり、例えばプラスミン、トリプシン、カリクレ
イン、ウロキナーゼなどが知られている。これらの蛋白
分解酵素は、何らかの理由により異常に活性化されると
種々の疾患をひきおこす事が知られている。例えば異常
に活性化されて生じた多量のプラスミンが血液中に存在
すると、出血性疾患を生ずる。またプラスミンは炎症に
も関与し、炎症性疾患を引き起すと考えられる。よって
これらの蛋白分解酵素に阻害活性を示す物質は何らかの
臨床治療薬として有用であり、従来からその開発が種々
検討されて来た。例えば抗プラスミン剤は止血剤、抗炎
症剤、抗アレルギー剤として有用であり、抗トリプシン
剤は膵炎の治療に有用であり、抗カリクレイン剤は炎症
治療剤等として有用であり、抗ウロキナーゼ剤はウロキ
ナーゼによる血栓溶解療法の際の出血症状を抑制するの
に有用である。従来からかかる作用を有する蛋白分解酵
素阻害剤の開発が進められており、その中で、フェニル
アラニンの誘導体としては、例えば表−３、陽３に示す
化合物が知られているが［Ｐｈａｒｍａｚｉｅ　３９１
１１．６８　（１９８４）　）　、その蛋白分解酵素阻
害活性は低く、医薬品として実用に供するには十分でな
い。また、医薬品として知られている蛋白分解酵素阻害
剤であるアプロチニンは、生柿からの抽出物であり、高
分子全蛋白のため、安定性、副作用などの点で問題があ
る。本発明はかかる従来技術の問題点を解決して実用上
十分な阻害活性を有し、しかもいくつかの蛋白分解酵素
に対しても十分な阻害活性を有する合成低分子量化合物
及びそれを有効成分とする蛋白分解酵素阻害剤の開発を
目的とする。

［前記問題点を解決するための手段］ 本発明に従えば一般式（Ｉ） （式中、Ｘは−ｃｏｙ　ｃ但し、Ｙは低級アルキル基（
アミノ基、カルボキシル基又は低級アルコキシカルボニ
ル基で置換されていても良い。）；低級アルケニル基（
フェニル基で置換されていても良い。）；低級アルコキ
シ基；アミノ基（低級アルキル基又はハロゲン原子で置
換されても良いフェニル基で置換されていても良い。）
；フェニル基（低級アルキル基、低級アルコキシ基、ハ
ロゲン原子、トリフルオロメチル基、ニトロ基、又は低
級アルコキシカルボニル基で置換されていても良い。）
又はピリジル基を示す。〕又は−５Ｏ２Ｚ〔但し、Ｚは
低級アルキル基又はフェニル基（低級アルキル基で置換
されていても良い。）を示す。〕を表わし、ＲおよびＲ
２はそれぞれ水素原子（但し、ＲおよびＲ２が同時に水
素原子となることはない。）；アルキル基（低級アルコ
キシ基、低級アルコキシカルボニル基又はピリジル基で
置換されていても良い。）；シクロアルキル基：フェニ
ル基（低級アルキルカルボニル基、フェニルカルボニル
基、カルボキシル基もしくは低級アルコキシカルボニル
基で置換された低級アルキル基、カルボキシル基又は低
級アルコキシカルボニル基で置換されていても良い。）
；ピリジル基（低級アルコキシ基で置換されていても良
い。）；又はＲ１とＲ２がそれらが結合する窒素原子と
共に環状となったピペリジル基（フェニルカルボニル基
、カルボキシル基又は低級アルコキシカルボニル基で置
換されていても良い。）を示す。また、ｎは４又は１０
を示す。）にて表わされるフェニルアラニン誘導体又は
その薬学的に　、許容し得る塩が提供される。

上記塩として例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水
素酸塩、硫酸塩、硝酸塩、燐酸塩等の無機酸塩、蓚酸塩
、コハク酸塩、グリコール酸塩、リンゴ酸塩、クエン酸
塩、マレイン酸塩、乳酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ト
ルエンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩等の有機酸塩
等をあげることができる。

本発明に従えば、更に前記一般式（Ｉ）のフェニルアラ
ニン誘導体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分と
する蛋白分解酵素阻害剤が提供される。

［発明の詳細な説明］ 本発明の前記一般式（Ｉ）にて表わされる化合物につい
て代表的なものを具体的に例示すれば表中の化合物には
番号が付しであるが以下の説明に於ては便宜上当該化合
物番号にて個々の化合物の表示に代える。

物性欄に於けるＮＭＲは核磁気共鳴スペクトルを意味し
、数字は通常、化学シフトを表示するのに用いられるδ
（デルタ）値であり、単位はｐｐｍである。媒体ＣＤＣ
ｊ２３　（重クロロホルム）、ＣＤ３０Ｄ（重メタノー
ル）、を単独あるいは組み合せて用いた。内部標準とし
てはＴ’ＭＳ（テトラメチルシラン）を用いた。なお、
δ値の次に表示したカッコ内の数字は水素原子の数であ
りそれに続く表示はＳが単一線、ｄが二重線、ｔは三重
線、ｑが四重線、ｍが多重線、ｂｒｏａｄが巾広い吸収
ピークを意味する。なお溶媒に由来する吸収ピークは省
略した。

ＩＲは赤外吸収スペクトルを意味し、特にことわらない
限り臭化カリウム錠剤として測定した。

なお数字は波数を示し、単位はｃｍ’である。又、吸収
ピークは主なもののみを示した。

ＭＳは質量スペクトルを意味し数字は陽イオンフラグメ
ントの質量を電荷で除したＭ／ｅを示す。

なおピークは主なもののみを示した。

本発明の化合物はいわゆるペプチド合成と呼ばれる種々
の方法の組合せによって合成され得る。

Ｌ）混合酸無水物法１”Ａｎｎ、　Ｃｈｅｗ、、　５７
２．１９０（１９５１）］ ２）酸塩化物法（Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、　４．２
２１９３）ホスファゾ法　（ＣｈｅＩｌｌ、　Ｂｅｒ、
、　９３．２３８７４）””　　　　　　：　　カルボ
ジイミド法［Ｊ、　Ａｍ、　Ｃｈｅｗ、　Ｓｏｃ、、　
　７７、１０８７　（１９５５）　）５）活性化エステ
ル法〔例えばＮ−ヒドロキシコハク酸イミドを用いる方
法〕 （Ｊ、　Ａｎｄ、　Ｃｈｅｗ、　Ｓｏｃ、、　　８５．
３０３９　（１９６３）　）但し本発明の化合物のすべ
てをここに記述した方法のいずれでも合成できるわけで
はない。各化合物に適した合成法の組み合わせが必要で
ある。

これらの方法のうち、代表的な例について一般的な反応
ルートを以下に示す。

（以下余白） ル　　−　　　ト　　　Ａ ３ｏｃ　：　ｔ−フ゛＋ｔｃオ杓７Ｊ／Ｉｔ＝ＩＬＹ′
：　−ＣＨ，９、ｈＪ　：　Ａｌ］ｔ−’ｚｌ、）ｍ ■から■の合成は■を適当な溶媒、例えばＴＨＦ、ジエ
チルエーテル、ジオキサンなどに溶解させ、適当な塩基
例えばトリエチルアミン、ピリジンなどを■に対して１
当量がら５当量、好ま用した溶媒に溶かし一度にあるい
は数回に分けて添加する。この時反応液の温度は一１０
℃〜３０℃、好ましくは５〜１０℃に保つ。反応時間は
、１時間から５０時間、好ましくは５時間〜２０時間で
ある。

−１０°Ｃ〜３０℃、好ましくは５〜２０℃で１時間〜
５０時間、好ましくは５時間〜２０時間反応させる。通
常の後処理後■が得られる。

■から■の反応は、４Ｎ−ＨＣΩ／ジオキサン溶液を■
に対して１〜１０当量、好ましくは３〜７当量加え室温
下反応させる。通常の後処理後■が得られる。■から■
の反応は■から■と同様に行なうことにより■が得られ
る。

■から■の反応は、■を適当な溶媒例えば、アルコール
、酢酸、ジオキサンなどに溶解させ、適当な触媒Ｐｄ−
Ｃ，ラネーニッケルなどを■に対させる。通常の後処理
後■が得られる。

■から■の合成は、適当な溶媒、例えばＴＨＦ、ＤＭＦ
、ジオキサン、などに溶解させ、適当な塩基例えばトリ
エチルアミン、ピリジンなどを■に溶媒に使用した溶媒
に溶かして添加する。室温下２〜５０時間、好ましくは
４〜６時間反応させる。

通常の後処理後■が得られる。■から■の合成は、■か
ら■の方法を用いればよい。

ル　　−　　　ト　　Ｂ ■　　　Ｒ２ ■　　　　　　　　　Ｒ２又はＮ２Ｈ４−ＰｄＤＣＣ：
　Ｎ、Ｎ”；’／フＵヘヘ”、４ｆＪ＃ｆ、’ジイミド
■　　　　　　Ｒ２ ■から■と■から■の合成は例えばＪ、　Ａｌｌ。

Ｃｈｅｗ、　Ｓｏｃ、、　７７１０８７　（１９５５）
に記載されている方法を用いればよい。■から■と■か
ら■はルートＡで述べた方法を用いればよい。

（以下余白） ル　　−　　　ト　　　Ｃ ■　　　　　Ｒ２又はＮ２Ｈ４−Ｐｄ ■　　　Ｒ２ ［相］　　　Ｒ２ ■から［相］の反応はルートＡの■から■の方法を用い
ればよい。■から■の反応は、ルートＡの■から■及び
■から■の方法を用いればよい。

［合　成　例］ 以下、本発明に係る代表的な化合物の製法について具体
的に例を示して説明する。

実施例　１ ４−二トローＬ−フェニルアラニン（８，６５ｇ）、ト
リエチルアミン（１３，５ｇ）を水−ジオキサン混合溶
液（２００ｍｌ）に溶かしたのちｔ−ブチルオキシカル
ボニルオキシイミノ−２−フェニルアセトニトリル（９
，４９ｇ）のジオキサン溶液（５０ｃａｌ）を加えて室
温で１２時間撹拌した。減圧濃縮したのち、水（ｌｏＯ
ｍｌ）を加え酢酸エチルで洗浄した。水層を１０％クエ
ン酸で酸性化し、酢酸エチルで抽出し、これを水洗した
のち硫酸ナトリウムで乾燥した。

消液を減圧濃縮し、クロロホルム−ヘキサンで再結晶し
て、淡黄色固体のＮ−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）
−４−ニトロ−Ｌ−フェニルアラニン（Ｉ　）　　（９
，０５ｇ　）を得た。

前記化合物（Ｉ　）　　（１，５０ｇ　）及びトリエチ
ルアミン（２Ｊｍｌ）を乾燥テトラヒドロフラン（３０
ｍｌ）に溶かし、水冷下にクロル炭酸エチル（０，６０
ｇ）を加え２０分間撹拌し、４−エトキシカルボニルメ
チルアニリン塩酸塩（０，９５ｇ）を加え室温で１０時
間撹拌した。溶媒留去したのち、酢酸エチルで抽出し、
水洗し硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濃縮し、Ｎ−（
ｔ−ブチルオキシカルボニル）−４−ニトロ−Ｌ−フェ
ニルアラニン　４−エトキシカルボニルメチルアニリド
（ｎ）の白色粉末（１，６０ｇ）を得た。ＮＭＲで確認
した後、前記化合物（ＩＩ）　　（１，５０ｇ）に４Ｎ
−塩化水素／ジオキサン溶液（２ｍｌ）を加えて室温で
３０分間撹拌した。

この溶液にｎ−ヘキサン（３０ｍｌ）を加えて析出した
結晶性物質を消散し、エチルエーテルで洗浄したのち、
乾燥し、４−ニトロ−し−フェニルアラニン　４−エト
キシカルボニルメチルアニリド塩酸塩Ｃｍ）を白色粉末
として、１．２０ｇ得た。

一方、トランス−４−アミノメチルシクロへキシルカル
ボン酸（１６，０ｇ）とｔ−ブチルオキシカルボニルイ
ミノ−２・フェニルアセトニトリル（２７，５ｇ）を水
−ジオキサン混合溶液（６５０ｍｌ）に溶かしたのち、
トリエチルアミン（２８，８ｇ）を加えて室温で１２時
間撹拌した。反応後、減圧濃縮したのち、水（２００ｍ
ｌ）を加え酢酸エチルで洗浄した。

水層を１０％クエン酸で酸性化し、酢酸エチルで抽出し
、水洗したのち、硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ液を減
圧濃縮し、クロロホルム−ヘキサンで再結晶して、白色
固体のトランス−４−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）
アミノメチルシクロへキシルカルボン酸（ＩＶ）　　（
２４，０ｇ）を得た。化合物（ＩＶ）　　（０，８５ｇ
）を乾燥テトラヒドロフラン（３０ｍｌ）に溶解し、ト
リエチルアミン（４ｍｌ　）を加え、水冷下にクロル炭
酸エチル（０，４０ｇ）を加え′２０分間撹拌した。こ
の溶液に先の化合物（ｍ）（１，２０ｇ）を加え室温下
４時間撹拌した。溶媒留去後、酢酸エチルで抽出し、水
洗し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ン戸液を減圧濃縮し、
ＮＭＲによって確認し、Ｎ−〔トランス−４−（ｔ−ブ
チルオキシカルボニル）アミノメチルシクロヘキシルカ
ルボニル〕　−４−ニトロ−し−フェニルアラニン４−
エトキシカルボニルメチルアニリド（Ｖ）（１，６０ｇ
）を褐色粉末として得た。

前記化合物（Ｖ）（０，８０ｇ）をエチルアルコールに
溶解し、１０％パラジウム炭素（３０ｍｇ）を加える。

反応液を４０〜ｂ 水和物（２，０ｍ１）を１５分間かけて滴下させた後、
加熱還流を１時間行なった。放冷したのち、パラジウム
炭素を炉別しン戸液を減圧濃縮してＮ−〔トランス−４
−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）アミノメチルシクロ
へキシルカルボニル〕　−４−アミノ−Ｌ−フェニルア
ラニン　４−エトキシカルボニルメチルアニリド（Ｖｌ
）　　（０，６０ｇ）を褐色粉末として得た。

前記化合物（ＶＩ）　　（０，３０ｇ）を乾燥ピリジン
（１０ｍｌ）に溶解し、水冷下塩化アセチル（０，５０
ｇ）を加え、室温下、３時間撹拌した。反応液を減圧濃
縮し、水を加え、クロロホルムで抽出したのち硫酸ナト
リウムで乾燥した。溶媒留去後、エチルアルコール−エ
チルエーテルで再結晶し、Ｎ−〔トランス−４−（ｔ−
ブチルオキシカルボニル）アミノメチルシクロへキシル
カルボニル〕　−４−アセチルアミノ−し−フェニルア
ラニン　４−エトキシカルボニルメチルアニリド（■）
（０，１２ｇ）を褐色粉末として得た。

前記化合物（■）　　（０，１２ｇ）氷冷下４Ｎ−塩化
水素／ジオキサン溶液（１，５ｍ１）を加え、室温下３
０分間撹拌した。この溶液にｎ−へキサン（１０ｍｌ）
を加え、析出した結晶性物質をン戸取しエチルエーテル
で洗浄後、乾燥し、ＮＭＲで確認しＮ−（トランス−４
−アミノメチルシクロへキシルカルボニル）−４−アセ
チルアミノ−し−フェニルアラニン　４−エトキシカル
ボニルメチルアニリド塩酸塩（■）の淡褐色粉末（０，
１Ｏｆ）を得た。

実施例　２ 実施例１の化合物（■）　　（０，０８ｇ）をテトラヒ
ドロフラン−メチルアルコール混合溶液（７ｃａｌ）に
溶解し、０．ＩＮ水酸化ナトリウム水溶液（１ｍｌ）を
加えて４０℃で１時間撹拌した。溶媒留去後、１０％ク
エン酸で中性にし、析出した結晶を消散し、エチルエー
テルで洗浄し、乾燥しＮ−（トランス−４−アミノメチ
ルシクロへキシルカルボニル）−４−アセチルアミノ−
Ｌ−フェニルアラニン　４−ヒドロキシカルボニルメチ
ルアニリド（Ｉ　）　　（０，０７ｇ　）を淡褐色粉末
として得た。

実施例　３ Ｎ−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）−４−ニトロ−し
−フェニルアラニン（２，Ｏｇ）及びトリエチルアミン
（１，１ｍ１）を乾燥テトラヒドロフラン（３０ｍｌ）
に溶かし、水冷下にクロル炭酸エチル（０，７０ｇ）を
加え２０分間撹拌し、４−アセチルアニリン（０，８７
ｇ）を加え室温で１０時間撹拌した。

通常の後処理によりＮ−（ｔ−ブチルオキシカルボニル
）−４−ニトロ−し−フェニルアラニン４−アセチルア
ニリド（Ｉ　）　　（２，３０ｇ　）を淡黄色粉末とし
て得た。

前記化合物（Ｉ）（２ＪＯｇ）Ｅ４Ｎ−塩化水素／ジオ
キサン溶液（８，１ｍ１）を加えて室温で３０分間撹拌
した。この溶液エチルエーテル（２０ｍｌ）を加えて析
出した結晶性物質をン戸取し、乾燥し、４−二トローＬ
−フェニルアラニン　４−アセチルアニリド塩酸塩（ｎ
）を白色粉末として１．９０ｇ得た。トランス−４−（
ｔ−ブチルオキシカルボニル）アミノメチルシクロへキ
シルカルボン酸（１，３４ｇ）及びトリエチルアミン（
１，７０ｍ１）を乾燥テトラヒドロフラン（３０ｍｌ）
に溶かし、水冷下クロル炭酸エチル（０，５６ｇ）を加
え２０分間撹拌した。この溶液に前記化合物（ＩＩ　）
　　（１，９０ｇ　）を加え室温下１０時間撹拌した。

通常の後処理によりＮ−〔トランス−４−（ｔ−ブチル
オキシカルボニル）アミノメチルシクロへキシルカルボ
ニル〕　−４−ニトロ−し−フェニルアラニン　４−ア
セチルアニリド（ＩＩＩ）　　’（２，４０ｇ）を淡黄
色粉末として得た。

を加え、水素ガスを吹き込みながら撹拌し、７０℃で２
時間反応した。パラジウム炭素を炉別し、炉液を減圧濃
縮してＮ−〔トランス−４−（ｔ−ブチルオキシカルボ
ニル）アミノメチルシクロへキシルカルボニル〕　−４
−アミノ−Ｌ−フェニルアラニン　４−アセチルアニリ
ド（ＩＶ）　　（０，４８ｇ）を淡黄色粉末として得た
。Ｎ−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）グリシン（０，
０９ｇ）及びトリエチルアミン（０，２ｍ１）を乾燥テ
トラヒドロフラン（１０ｍｌ）に溶かし水冷下クロル炭
酸エチル（０，０６ｇ）を加え２０分間撹拌し、前記化
合物（ＩＶ）　　（０，３０ｇ）を加え室温で１０時間
撹拌した。通常の後処理をし、クロロホルム−エチルエ
ーテルで再結晶し、Ｎ−〔トランス−４−（ｔ−ブチル
オキシカルボニル）アミノメチルシクロへキシルカルボ
ニル〕　−４−４−アセチルアニリド（Ｖ）（０，１１
ｇ）を淡黄色粉末として得た。ＮＭＲで確認したのち化
合物（Ｖ）（０，１０ｇ）を４Ｎ−塩化水素／ジオキサ
ン溶液（０，２５ｍ１）に溶かし、室温下３０分間撹拌
しエチルエーテル（１０ｍｌ）を加え、析出した結晶性
物質を手取して、乾燥し、Ｎ−（トランス−４−アミノ
メチルシクロへキシルカルボニル）−４−アミノメチル
カルボニルアミノ−し−フェニルアラニン　４−アセチ
ルアニリド塩酸塩（０，０８ｇ）を黄色粉末として得た
。

実施例　４ の合成 実施例３の化合物（ＩＶ）　　（０，１８ｇ）を乾燥テ
トラヒドロフラン（１５ｍｌ）に溶解し、３−フルオロ
フェニルイソシアナート（０，０５ｇ）を加え、室温下
に２０時間撹拌した。反応液を減圧濃縮後、通常の後処
理をし、クロロホルムーエチルエ（チルで再結晶し、Ｎ
−［トランス−４−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）ア
ミノメチルシクロへキシルカルボニル］−４−（３−フ
ルオロフェニルカルバモイルアミノ）−Ｌ−フェニルア
ラニン　４−アセチルアニリド（Ｉ）（０，１８ｇ）を
黄色粉末として得た。ＮＭＲで確認したのち、前記化合
物（Ｉ）（０，１８ｇ）を４Ｎ−塩化水素／ジオキサン
溶液（０，４０ｍ１）に溶かし、室温下３０分間撹拌し
、エチルエーテル（１５ｍｌ）を加え、析出した結晶性
物質をン戸取して、乾燥し、Ｎ−（トランス−４−アミ
ノメチルシクロへキシルカルボニル）　　−４−（３−
フルオロフェニルカルバモイルアミノ）−Ｌ−フェニル
アラニン　４−アセチルアニリド塩酸塩（０，１１ｇ）
を黄色粉末として得た。

実施例　５ 合成 イソニベコチン酸（２０ｇ）を無水酢酸（７０ｍｌ）に
加え８０℃〜１００℃で６時間加熱した。反応後溶媒を
留去したのち残渣を塩化メチレンで再結晶し白色固体の
Ｎ−アセチルイソニペコチンＭ　（Ｉ）（２１，２ｇ）
を得た。水冷下塩化チオニル（１７ｇ）に前記化合物（
１）　　（１１，９ｇ）加えて３０分撹拌したのち５０
°Ｃ〜７０℃で４時間反応した。反応後溶媒を留去した
のち乾燥ベンゼン（１００ｍｌ）と塩化アルミ（１８，
２ｇ）を加えて１２時間加熱還流した。

反応液を氷水中に入れ、塩化メチレンで抽出したのち硫
酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を留去したのち残渣を２
０％塩酸水に加えて８時間加熱還流した。

溶媒を留去したのち残渣をエチルアルコールで再結晶し
白色結晶の４−ベンゾイルピペリジン塩酸塩（ＩＩ）　
　（ＬＬ、５ｇ）を得た。

ＩＲ及びＮＭＲで確認したのち化合物（ＩＩ）（０，５
ｇ）　、Ｎ　−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）−４−
ニトロ−し−フェニルアラニン（０，６５ｇ）およびト
リエチルアミン（１ｍｌ）を乾燥塩化メチレン（２０ｍ
ｌ）に溶かし縮合剤１−エチル−３−（３−ジメチルア
ミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（０，６２ｇ）を
加えて室温で８時間反応した。

反応後通常の後処理をして淡黄色固体のＮ−（ｔ−ブチ
ルオキシカルボニル）−４−ニトロ−し−フェニルアラ
ニン　４−ベンゾイルピペリジノアミド（ＩＩＩ）　（
０，５ｇ）得た。

前記化合物（ｍ）（０，５ｇ）を４Ｎ−塩化水素／ジオ
キサン溶液（５ｍｌ）に加えて、室温で３０分撹拌した
。反応後エチルエーテルを加えて析出させエチルエーテ
ルで数回洗浄して白色固体の４−ニトロ−し−フェニル
アラニン　４−ベンゾイルピペリジノアミド塩酸塩（Ｉ
Ｖ）　　（０，４１ｇ）を得た。

前記化合物（ＩＶ）　　（０，１６ｇ）　、対−一トラ
ンス−４−（ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル
）シクロヘキサンカルボン酸（０，１ｇ）およびトリエ
チルアミン（１ｍｌ）を乾燥塩化メチレン（２０ｍｌ）
に溶かし縮合剤１−エチル−３−（３−ジメチルアミノ
プロピル）カルボジイミド塩酸塩（０，２ｇ）を加えて
室温で８時間反応した。反応後反応液を水、アルカリ水
および酸性の水で洗浄したのち硫酸ナトリウムで乾燥し
た。溶媒留去後塩化メチレンーエチルエーテルの混合溶
媒で再結晶して淡黄色固体のＮ−（トランス−４−（ｔ
−プチルオキシ力ルポニルアミノメチノＱシクロへキシ
ル力ルポニノｂ）−４−ニトロ−し−フェニルアラニン
４−ベンゾイルピペリジノアミド（Ｖ）（０，２１ｇ）
を得た。ＩＲおよびＮＭＲで確認したのち前記化合物（
Ｖ）（０，１ｇ）をアルコール（２５ｍｌ）に溶かし１
０％パラジウム炭素を加え水素ガスを吹き込みながら７
０℃で５時間反応した。反応液を？濾過し、溶媒を留去
した。残渣を乾燥塩化メチレンに溶かし、２−クロロベ
ンゾイルクロリド（０，０４ｇ）とトリエチルアミン（
０，５ｍ１）を加えて室温で５時間撹拌した。

反応液を水、アルカリ水および酸性の水で洗浄したのち
硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を留去したのち残渣を
塩化メチレン−エチルエーテルで再結晶して白色固体の
Ｎ−（トランス−４−ｔ−ブチルオキシカルボニルアミ
ノメチルシクロへキシルカルボニル）−４−（２−クロ
ロベンゾイルアミノ）−Ｌ−フェニルアラニン　４−ベ
ンゾイルピペリジノアミド（ＶＩ）　　（０，０８ｇ）
を得た。

前記化合物（ＶＩ）　　（０，０８ｇ）を、４Ｎ−塩化
水素／ジオキサン溶液（５ｍｌ）に加え室温で３０分撹
拌した。反応後エチルエーテルを加えて析出させエチル
エーテルで数回洗浄して白色固体のＮ−（トランス−４
−アミノメチルシクロへキシルカルボニル）−４−（２
−クロロベンゾイルアミノ）−Ｌ−フェニルアラニン　
４−ベンゾイルピペリジノアミド塩酸塩（■）　　（０
，０５ｇ）を得た。

実施例　６ ４−アミノメチル安息香酸（１０ｇ）とｔ−ブチルオキ
シカルボニルオキシイミノ−２−フェニルアセトニトリ
ル（１９ｇ）を水−ジオキサン混合溶液（２００ｍｌ）
に溶かしたのちトリエチルアミン（１４ｇ）を加えて室
温で１２時間撹拌した。反応後、溶出し、硫酸ナトリウ
ムで乾燥した。溶媒を留去したのち残渣をクロロホルム
で再結晶して白色固体のＮ−（ｔ−ブチルオキシカルボ
ニル）アミノメチル安息香酸（Ｉ）（１４ｇ）を得た。

実施例５の化合物（ＩＶ）　　（０，２５ｇ）　、前記
化合物（１）　　（０，１５ｇ　）及び、トリエチルア
ミン（１ｍｌ）を乾燥塩化メチレン（２０ｍｌ）に溶か
し縮合剤１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピ
ル）ｆ−一一一一一一） カルボジイミド（０，２１ｇ）塩酸塩を加えて室温で８
時間反応した。反応後反応液を水、アルカリ水混合溶媒
で再結晶して淡黄色固体のＮ−（４−ｔ−ブチルオキシ
カルボニルアミノメチルベンゾイル）−４−ニトロ−し
−フェニルアラニン４−ベンゾイルピペリジノアミド（
ＩＩ）　（０，３ｇ）を得た。ＩＲおよびＮＭＲで確認
したのち化合物（ＩＩ　）　　（０，１５ｇ　）をアル
コール（２５ｍｌ）に溶かし１０％パラジウム炭素を加
え水素ガスを吹き込みながら７０℃で５時間反応した。

反応液をン濾過し、溶媒を留去した。残渣を乾燥塩化メ
チレンに溶かし４−メトキシカルボニルベンゾイルクロ
リド（０，０７ｇ）とトリエチルアミン（０，５ｍ１）
を加えて室温で５時間撹拌した。

反応液を水、アルカリ水および酸性の水で洗浄したのち
硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を留去したのち残渣を
塩化メチレン４埜とチルで再結晶して白色固体のＮ−（
４−ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチルベンゾイ
ル）−４−（４−メトキシカルボニルベンゾイルアミノ
）−Ｌ−フェニルアラニン　４−ベンゾイルピペリジノ
アミド（ＩＩＩ）　（０，１ｇ）を得た。

前記化合物（ＩＩＩ）　（０，１ｇ）を４Ｎ−塩化水素
ジオキサン溶液（５ｍｌ）に加え室温で３０分撹拌した
。

反応後エーテルを加えて析出させエーテルで数回洗浄し
て白色固体のＮ−（４−アミノメチルベンゾイル）−４
−（４−メトキシカルボニルベンゾイルアミノ）−Ｌ−
フェニルアラニン　４−ベンゾイルピペリジノアミド塩
酸塩（ＩＶ）　　（０，０６ｇ）を得た。

（以下余白） 実施例　７ １８）の合成 Ｎ−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）−４−ニトロ−し
−フェニルアラニン（１，５ｇ）を乾燥テトラヒドロフ
ラン（３０ｍｌ）に溶解し、トリエチルアミン（２，３
ｍ１）を加え、水冷下にクロロ炭酸エチル（０，６ｇ）
を加え、３０分撹拌した。この溶液に２−メトキシエチ
ルアミン塩酸塩（０，３０ｇ）を加え、室温下１０時間
撹拌した。溶媒留去後、酢酸エチルで抽出し、水洗し、
乾燥し、Ｎ−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）−４−ニ
トロ−し−フェニルアラニン　２−メトキシエチルアミ
ド（Ｉ）の白色粉末（１，８０ｇ）を得た。ＮＭＲで確
認した。

前記化合物（Ｉ　）　　（１，８０ｇ　）に水冷下４Ｎ
−塩化水索／ジオキサン溶液（１８ｍｌ）を加え、室温
下３０分撹拌した。この溶液にヘキサン（３０ｍｌ）を
加え析出した結晶性物質を消散し、エーテルで洗浄後ｇ
）を得た。一方、トランス４−　（ｔ−ブチルオキシカ
ルボニル）アミノメチルシクロへキシルカルボ、ン酸（
０，９７ｇ）を乾燥テトラヒドロフラン（３０ｍｌ）に
溶解しトリエチルアミン（５ｍｌ　）を加え、水冷下に
クロル炭酸エチル（０，４５ｇ）を加え３０分撹拌した
６、この溶液に前記化合物（ｎ）　（１，０ｇ）を加え
、室温下３時間撹拌した。溶媒留去後酢酸エチルで抽出
し、水洗し、乾燥してＮ−〔トランス−４−’Ｇｔ−ブ
チルオキシカルボニル本アミノメチルシクロへキシルカ
ルボニル〕　−４−ニトロ−し−フェニルアラニン　２
−メトキシエチルアミド（ＩＩＩ）の淡褐色粉末（１，
３０ｇ）を得た。

ＮＭＲで確認した。

前記化合物（ＩＩ［）　　（１，３０ｇ）をエチルアル
コールに溶解し、１０％パラジウム炭素（５０ｍＯを加
える。反応液を４０〜５０℃に加熱し、ヒドラジン−水
和物（２，５ｍ１）を２０分間かけて滴下させた後、１
時間加熱還流をした。放冷したのち、パラジウム炭素を
？戸別し、ン戸液を減圧濃縮して、Ｎ−〔トランス−４
−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）アミノメチルシクロ
へキシルカルボニル〕　−４−アミノ−し−フェニルア
ラニン　２−メトキシエチルアミド（ＩＶ）の淡褐色粉
末（０，６０ｇ）を得た。前記化合物（ＩＶ）　　（０
，６０ｇ）を乾燥ピリジン（Ｊ、５ｍ１）に溶解し、水
冷下２−トリフルオロメチルベンゾイルクロライド（０
，３０ｇ）を加え、室温下３時間撹拌した。ｐｉｆを中
性にし、クロロホルムで抽出し、乾燥・減圧留去してＮ
−〔トランス−４−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）ア
ミノメチルシクロへキシルカルボニル］−４−（２−ト
リフルオロメチルベンゾイルアミノ）−Ｌ〜フェニルア
ラニン２−メトキシエチルアミド（Ｖ）の淡褐色粉末（
０，５０ｇ）を得た。

前記化合物（Ｖ）　　（０，５０ｇ）　ｉ：氷冷下４Ｎ
塩化水素／ジオキサン溶液（１，５ｍ１）を加え、室温
下３０分撹拌した。この溶液にヘキサン（１０ｍｌ）を
加え、析出した結晶性物質を？戸数し、エーテルで洗浄
後減圧留去し、Ｎ−（トランス−４−アミノメチルシク
ロへキシルカルボニル）−４−（２−トリフルオロメチ
ルベンゾイルアミノ）−Ｌ−フェニルアラニン　２−メ
トキシエチルアミド塩酸塩（Ｖｌ）の淡褐色粉末（０，
５０ｇ）を得た。

実施例　８ の合成 Ｎ−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）−４−ニトロ−Ｌ
−フェニルアラニン（０，４９ｇ）とエキソ−２−アミ
ノノルボルナン（０，１８ｇ）を乾燥塩化メチレン（２
０ｍｌ）に溶かし縮合剤Ｎ、Ｎ’　　−ジシクロへキシ
ルカルボジイミド（０，４２ｇ）を加えて室温で８時間
反応した。反応後通常の後処理後、淡黄色のＮ−（ｔ−
ブチルオキシカルボニル）−４−ニトロ−し−フェニル
アラニン　エキソ−２−ノルボルニルアミド（Ｉ）（０
，５１ｇ）を得た。

前記化合物（Ｉ）（０，５ｇ）を４Ｎ−塩化木犀ジオキ
サン溶液（５ｍｌ）に加えて室温で３０分撹拌した。

反応後エーテルを加えて析出させエーテルで数回洗浄し
て白色固体の４−ニトロ−し−フェニルアラニン　エキ
ソ−２−ノルボルニルアミド塩酸塩（ＩＩ）　　（０，
３９ｇ）を得た。

前記化合物（ＩＩ）　　（０，２１ｇ）　、　Ｎ〜　（
４−ｔ　−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）安息
香酸（０，１８ｇ）及び、トリエチルアミン（ｌｔｏｌ
）を乾燥塩化メチレン（２０ｍｌ）に溶かし縮合剤１−
エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジ
イミド塩酸塩（０，１７ｇ）を加えて室温で８時間反応
した。反応後反応液を水、アルカリ水および酸性の水で
洗浄したのち硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒留去後塩
化メチレンーエチルエーテルの混合溶媒で再結晶して淡
黄色固体のＮ−（４−ｔ−ブチルオキシカルボニル　ア
ミノメチルベンゾイル）−４−二トローＬ−フェニルア
ラニンエキソ−２−ノルボルニルアミド（ｍ）（０，２
ｇ）を得た。ＩＲおよびＮＭＲで確認したのち前記化合
物（ＩＩＩ）　　（０，１６ｇ　）をアルコール（２５
ｍｌ）に溶かし１０％パラジウム炭素を加え水素ガスを
吹き込みながら７０℃で５時間反応した。反応液を？濾
過し、溶媒を留去した。残渣を乾燥塩化メチレンに溶か
し、アクリル酸クロリド（０，０４ｇ）とトリエチルア
ミン（０，５ｍ１）を加えて室温で５時間撹拌した。

反応液を水、アルカリ水および酸性の水で洗浄したのち
硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を留去したのち残渣を
塩化メチレン−エチルエーテルで再結晶して白色固体の
Ｎ−（４−ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチルベ
ンゾイル）−４−アクリルアミノ−し−フェニルアラニ
ン　エキソ−２−ノルボルニルアミド（ＩＶ）　　（０
，１４ｇ）を得た。

前記化合物（ＩＶ）　　（０，１４ｇ）を、４Ｎ−塩化
水素ジオキサン溶液（５ｍｌ）に加え室温で３０分撹拌
した。反応後、エチルエーテルを加えて析出させエチル
エーテルで数回洗浄して白色固体のＮ−（４−アミノメ
チルベンゾイル）−４−アクリルアミノ−し−フェニル
アラニン　エキソ−２−ノルボルニルアミド塩酸塩（０
，０９ｇ）（Ｖ）を得た。

実施例　９ の合成 Ｎ−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）−４−ニトロ−し
−フェニルアラニン（１，３０ｇ）及びトリエチルアミ
ン（３，０ｍ１）を乾燥テトラヒドロフラン（３０ｍｌ
）に溶かし、水冷下にクロル炭酸エチル（０，６０ｇ）
を加え２０分間撹拌し、４−ベンゾイルアニリン（０，
８０ｇ）を加え室温で１０時間撹拌した。

溶媒留去したのち、酢酸エチルで抽出し水洗し硫酸ナト
リウムで乾燥した。減圧濃縮し、Ｎ−（ｔ−ブチルオキ
シカルボニル）−４−ニトロ−し−フェニルアラニン　
４−ベンゾイルアニリド（ＩＩ）の白色粉末（１，００
ｒ）を得た。ＮＭＲで確認した後、前記化合物（ＩＩ）
　　（１，００ｇ）に４Ｎ−塩化水素／ジオキサン溶液
（４ｍｌ）を加えて室温で３０分間撹拌した。この溶液
にｎ−ヘキサン（３０ｍｌ）を加えて析出した結晶性物
質を消散し、エチルエーテルで洗浄したのち、乾燥し、
４−ニトロ−Ｌ−フェニルアラニン　４−ベンゾイルア
ニリド塩酸塩（ｍ）を白色粉末として０．８０ｇ得た。

Ｎ−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）アミノメチル安息
香酸（０，４８ｇ）及びトリエチルアミン（５ｍｌ）を
乾燥テトラヒドロフラン（３０ｔｏｌ）に溶かし、水冷
下クロル炭酸エチル（０，２０ｇ）を加え２０分間撹拌
した。この溶液に前記化合物（ＩＶ）（０，８０ｇ＞を
加え室温下１０時間撹拌した。

通常の後処理により、Ｎ−（４−ｔ−ブチルオキシカル
ボニル　アミノメチルベンゾイル）−４−ニトロ−し−
フェニルアラニン　４−ベンゾイルアニリド（ｍ）（０
，９５ｇ）を黄色粉末として得た。

前記化合物（ＩＩＩ）　　（０，５０ｇ）をエチルアル
コール（３０ｍｌ）に溶かし、１０％パラジウム炭素（
３５ｍｇ）を加え、水素ガスを吹き込みながら撹拌し６
０℃で１時間反応した。パラジウム炭素をン戸別し、ン
戸液を減圧濃縮して、Ｎ−（４−ｔ−ブチルオキシカル
ボニル　アミノメチルベンゾイル）−４−アミノ−Ｌ−
フェニルアラニン　４−ベンゾイルアニリド（ＩＶ）　
　（０，４０ｇ：）を淡黄色粉末として得た。

前記化合物（ＩＶ）　　（０，１５ｇ　）にエチルエー
テル（１０ｍｌ）と水（１０ｍｌ）を入れ寒剤で５℃以
下に冷却する。溶液を撹拌しながら、クロロギ酸エチル
（０，０４ｇ）を加え、ついで水酸化ナトリウム（０，
０１ｇ）水溶液２ｍｌを加える。２時間撹拌した後、エ
チルエーテル層を分離、水層をエチルエーテル１０ｍ１
で抽出し、合わせたエーテル溶液を無水炭酸カリウムで
すみやかに乾燥する。減圧濃縮し、Ｎ−（４−ｔ−ブチ
ルオキシカルボニル　アミノメチルベンゾイル）−４−
エトキシカルボニルアミノ−Ｌ−フェニルアラニン　４
−ベンゾイルアニリド（Ｖ）（０，ＬＯｇ）を得た。Ｎ
ＭＲで確認シタノチ、前記化合物（Ｖ）　　（０，ｌＯ
ｇ）を４Ｎ−塩化水素／ジオキチン溶液（０，２０ｍ１
）に溶かし、室温下２０分間撹拌し、エチルエーテル（
１５ｍｌ）を加え、析出した結晶性物質を炉底して、乾
燥し、Ｎ−（４−アミノメチルベンゾイル）−４−エト
キシカルボニルアミノ−し−フェニルアラニン４−ベン
ゾイルアニリド塩酸塩（０，０７ｇ）を淡黄色粉末とし
て得た。

実施例　１Ｏ Ｎ−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）−４−ニトロ−し
−フェニルアラニン（２，Ｏｇ）及びトリエチルアミン
（２，０ｍ１）を乾燥テトラヒドロフラン（３０ｍｌ）
に溶かし、水冷下にクロル炭酸エチル（０，７０ｇ）を
加え２０分間攪拌し、２−ピコリルアミン（０，６９ｇ
）を加え、室温で１０時間攪拌した。

通常の後処理によりＮ−（ｔ−ブチルオキシカルボニル
）−４−ニトロ−し−フェニルアラニン２−ピコリルア
ミド（Ｉ）　（２，１０ｇ）を得た。前記化合物（Ｉ　
）　（２，００ｇ）をエチルアルコール（４０ｍｌ）に
溶かし１０％パラジウム炭素（５０ｍｇ）を加え、水素
ガスを吹き込みながら攪拌し、７０℃で３時間反応した
。触媒を炉別し、２戸液を減圧濃縮してＮ−（ｔ−ブチ
ルオキシカルボニル）−４−アミノ−し−フェニルアラ
ニン　２−ピコリルアミド（ＩＩ）　（１，７２ｇ＞を
白色粉末として得た。前記化合物（ＩＩ）　（１，５０
ｇ＞及びトリエチルアミン（１，３０ｍｌ）を乾燥テト
ラヒドロフラン−ジメチルホルムアミド混合溶媒に溶か
し、水冷下にメタンスルホニルクロリド（０，５１ｇ）
を加え１０分間攪拌し、さらに室温下で２時間攪拌した
。通常の後処理により、Ｎ−（ｔ−ブチルオキシカルボ
ニル）−４−メタンスルホニルアミノ−し−フェニルア
ラニン２−ピコリルアミド（ＩＩＩ）　（１，１０ｇ＞
を淡黄色粉末として得た。前記化合物（ＩＩＩ）　（１
，１０ｇ）に４Ｎ−塩化水素／ジオキサン溶液（３，７
０ｍｌ）を加えて室温で１時間攪拌した。この反応液に
エチルエーテル（３０ｍｌ）を加えて不溶物を枦取し、
十分にエチルエーテルで洗浄し、乾燥し、４−メタンス
ルホニルアミノ−し−フェニルアラニン　２−ピコリル
アミド　ニ塩酸塩（ＩＶ）　（０，９０ｒ）を黄色粉末
として得た。トランス−４−（ｔ−ブチルオキシカルボ
ニル）アミノメチルシクロヘキシルカルボン酸（０，４
９ｇ＞及びトリエチルアミン（２，０ｍ１）を乾燥テト
ラヒドロフラン（２０ｍｌ）に溶かし水冷下クロル炭酸
エチル（０，２１ｇ＞を加え２０分間攪拌した。この溶
液に前記化合物（ＩＶ）（０，８０ｇ）を加え室温下１
０時間攪拌した。通常の後処理により、Ｎ−〔トランス
−４−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）アミノメチルシ
クロへキシルカルボニル〕　−４−メタンスルホニルア
ミノ−し−フェニルアラニン　２−ピコリルアミド（Ｖ
）（０，５１ｇ＞を淡黄色粉末として得た。ＮＭＲで確
認したのち、化合物（Ｖ）　（０，３０ｇ）　ニ４Ｎ　
−塩化水素／ジオキサン溶液（０，８０ｍｌ）を加え、
室温下１時間攪拌し、エチルエーテル（２５ｍｌ）を加
え、不溶物を枦取して、乾燥し、Ｎ−（トランス−４−
アミノメチルシクロへキシルカルボニル）＝４−メタン
スルホニルアミノ−Ｌ−フェニルアラニン　２−ピコリ
ルアミドニ塩酸塩（０，２１ｇ）を黄色粉末として得た
。

（以下余白） 実施例　１１ 物２１）の合成 ３−ニトロ−Ｄ、Ｌ−フェニルアラニンＣＪ、　Ａｍ　
。

Ｃｈｅｍ　、　Ｓｏｃ　、、　８１．３１０３（１９５
９）により合成〕（２，８８ｇ）　、　　トリエチルア
ミン（４，５０ｍｌ）を水−ジオキサン混合溶液（２０
０ｍｌ）に溶かしたのちｔ−ブチルオキシカルボニルオ
キシイミノ−２−フェニルアセトニトリル（３，１６ｇ
）のジオキサン溶液（５０ｍｌ）を加えて室温で１２時
間攪拌した。

減圧濃縮したのち、水（１００ｍｌ）を加え酢酸エチル
で洗浄した。水層を、１０％クエン酸で酸性化し、酢酸
エチルで抽出し、これを水洗したのち硫酸ナトリウムで
乾燥した。ン戸液を減圧濃縮し、クロロホルム−ヘキサ
ンで再結晶して、淡黄色固体のＮ−（１−ブチルオキシ
カルボニル）−３−ニトロ−Ｄ、Ｌ−フェニルアラニン
（Ｉ）（３，ＯＬｉを得た。

前記化合物（Ｉ）　（１，２４ｇ）及びトリエチルアミ
ン（１，５ｍ１）を乾燥テトラヒドロフラン（３０ｍｌ
）に溶かし、水冷下にクロル炭酸エチル（０，４４ｇ）
を加え２０分間攪拌し、４−ベンゾイルアニリン（０，
７９ｇ）を加え室温で１０時間攪拌した。溶媒留去した
のち、酢酸エチルで抽出し、水洗し硫酸ナトリウムで乾
燥した。減圧濃縮し、Ｎ−（ｔ−ブチルオキシカルボニ
ル）−３−二トロー肌し−フェニルアラニン　４−ベン
ゾイルアニリド（Ｕ）の白色粉末（ｔ、ｏｏ　ｇ＞を得
た。ＮＭＲで確認した後、前記化合物（Ｉｆ）　（１０
０ｇ）に４Ｎ−塩化水素／ジオキサン溶液（３ｍｌ）を
加えて室温で３０分間攪拌した。この溶液にｎ−へキサ
ン（３０ｍｌ）を加えて析出した結晶性物質を？戸数し
、エチルエーテルで洗浄したのち、乾燥し、３−ニトロ
−ＬＬ−フェニルアラニン　４−ベンゾイルアニリド塩
酸塩（ＩＩＩ）を白色粉末として、０．９７ｇ得た。ト
ランス−４−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）アミノメ
チルシクロへキシルカルボン酸（０，５９ｇ）を乾燥テ
トラヒドロフラン（３０ｍｌ）に溶解し、トリエチルア
ミン（４ｍｌ　）を加え、水冷下にクロル炭酸エチル（
０，２５ｇ＞を加え２０分間攪拌した。この溶液に先の
化合物（ＩＩＩ）　（０，９７ｇ）を加え室温下４時間
攪拌した。溶媒留去後、酢酸エチルで抽出し、水洗し、
硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ液を減圧濃縮し、ＮＭＲに
よって確認し、Ｎ−〔トランス−４−（ｔ−ブチルオキ
シカルボニル）アミノメチルシクロへキシルカルボニル
〕　−３−二トロ＝Ｄ、Ｌ　−フェニルアラニン　４−
ベンゾイルアニリド（ＩＶ）　（１，３０ｇ＞を淡黄色
粉末として得た。

前記化合物（ＩＶ）　（０，６０ｇ＞をエチルアルコー
ルに溶解し、１０％パラジウム炭素（３０ａ＋ｇ）を加
える。

反応液を４０〜５０℃に加熱し、ヒドラジン−水和物（
１，４ｍ１）を１５分間かけて滴下させた後、加熱還流
を１時間行なった。放冷したのち、パラジウム炭素をン
戸別しン戸液を、減圧濃縮してＮ−（）ランス−４−（
ｔ−ブチルオキシカルボニル）アミノメチルシクロへキ
シルカルボニル〕−３→弗−ア゛九ニルアラニン　４−
ベンゾイルアニリド（Ｖ）　（０，５６ｇ）を淡黄色粉
末として得た。前記化合物（Ｖ）　（０，２０ｆ）を乾
燥ピリジン（ＬＯｍｌ）に溶解し、水冷下エチルスクシ
ニルクロリド（０，０７ｇ）を加え、室温下、３時間攪
拌した。反応液を減圧濃縮し、水を加え、クロロホルム
で抽出したのち硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒留去後
、クロロホルム−エチルエーテルで再結晶し、Ｎ−〔ト
ランス−４−（ｔ〜ブチルオキシカルボニル）アミノメ
チルシクロへキシルカルボニル〕−３−（２−エトキシ
カルボニル）プロパノイルアミ／）−Ｄ、Ｌ　−フェニ
ルアラニン　４−ベンゾイルアニリド（Ｖｌ）　（０，
１０ｇ）を淡黄色粉末として得た。前記化合物（Ｖｌ）
　（０，１０ｇ）水冷下４Ｎ−塩化水素／ジオキサン溶
液（０，５０ｍｌ）を加え、室温下３０分間攪拌した。

この溶液にｎ−ヘキサン（１０！！１１）を加え、析出
した結晶性物質を消取しエチルエーテルで洗浄後乾燥し
、Ｎ−（トランス−４−アミノメチルシクロへキシルカ
ルボニル）−３−（２−エトキシカルボニル象プロパノ
イルアミノ）−Ｄ、Ｌ　−フェニルアラニン　４−ベン
ゾイルアニリド塩酸塩（■）の黄色粉末（０，０８ｇ＞
を得た。

［発明の効果］ 本発明の蛋白分解酵素阻害剤の有効成分である前記一般
式（Ｉ）のフェニルアラニン誘導体又はその塩は以下の
実験結果から明らかなようにプラスミン、カリクレイン
、トリプシン及びウロキナーゼに対し、非常に強い阻害
活性を有する。本発明化合物の作用は従来公知の薬剤、
例えばトラネキサム酸やε−アミノカプロン酸のような
蛋白分解酵素のうちプラスミンのみを選択的に阻害する
ものとは異なる。例えば本発明に係る蛋白分解酵素阻害
剤の有効成分のあるものはウロキナーゼに対する阻害活
性を示すが、ウロキナーゼは周知の如くプラスミノーゲ
ン活性化酵素であるから、これを阻害することは止血剤
として好ましい薬剤となる。また本発明に係る蛋白分解
酵素阻害剤のあるものは、抗カリクレイン作用及び抗ト
リプシン作用を示すが、これらの作用を呈することは前
記抗プラスミン作用と併せてより強力な抗炎症剤として
有効であることを意味するものである。ま、た、抗トリ
プシン作用は、膵炎の治療に有効である。また、本発明
の化合物は、医薬品として知られている蛋白分解酵素阻
害剤であるアプロチニンに比べ、低分子量で供給しやす
い。さらに、本発明の化合物と構造上比較的類似した既
知のフェニルアラニン誘導体と比べても、本発明化合物
は著しく高い活性を示す。

以下に本発明化合物の抗プラスミン活性、抗カリクレイ
ン活性、抗トリプシン活性、抗ウロキナーゼ活性及び抗
トロンビン活性について代表的な試験例を示し、具体的
に説明する。

なお、以下の試験例に於いて使用した測定法は次のとお
りである。また試験結果は、本発明の化合物については
前記表−１の化合物番号にて表−２に示し、比較例とし
て市販の抗プラスミン剤及び構造上類似の既知化合物に
ついては表−３に化合物の構造を示し、試験結果を表−
４に示した。

１）　抗プラスミン活性の測定 阻害剤を０．１８　Ｍホウ酸生理食塩緩衝液（ｐＨ７，
４）に溶かし、全体をｅｏｏμｇとし、３７°Ｃ恒温槽
中、これに同緩衝液に溶解した牛のフィブリノーゲンの
０．２％溶液を２００μｇ、人のプラスミン０．３カゼ
インユニツト１０１１１溶液を１００μｇ１牛のトロン
ビン５０ユニツト／ｍｌ溶液を１００μｇ加えた後生成
したフィブリン塊の溶解時間を測定し、阻害剤を入れな
い場合の溶解時間（本実験条件では約５分）を２倍に延
長する阻害剤の濃度Ｉ５゜（５０％阻害剤濃度、単位μ
ｒｓｏｌ　）を求める。

（ｉｉ）　　Ｓ−２２５１分解抑制の測定法阻害剤を０
．０５　Ｍ　トリス塩酸緩衝液（ｐｔ（７，４）に溶か
し、全体を４００μｇとし、ここへＳ−２２５１の３ｍ
Ｍ溶液を５０μｇを加え３７℃の恒温槽中で５分間イン
キュベーションし、人のプラスミン０．２力ゼインユニ
ツト／ｍｌを５０μｇ添加、３７℃で４分間インキュベ
ーションした後５０％酢酸５０μｇを加え反応を止める
。

系内で生成したパラニトロアニリンの吸光度を４０５　
ｎｍで測定し、阻害剤なしの場合の１／２の吸光度を示
す阻害剤濃度（μｍｏΩ）を■５０として求めた。

（以下余白） 阻害剤を０．１８　Ｍホウ酸生理食塩緩衝液（ｐＨ７，
４）に溶かし、全体を５００μｇとし、３７℃恒温槽中
、これに同緩衝液に溶解した牛のフィブリノーゲン０．
２％溶液を４００μｇ１牛のトロンビン４ユニツト／　
ｍｌ溶液を１００μｇ加え凝固時間を測定し、阻害剤を
入れない場合の凝固時間を２倍に延長する阻害剤の濃度
（μｍｏΩ）を■５０として求めた。

（Ｈ）　　Ｓ　−２２３８ 分解抑制の測定法 阻害剤を０．０５　Ｍ　トリス塩酸緩衝液（ｐＨ８りに
溶かし、全体を４００μｇとし、ここへＳ−２２３８の
０．２　ｍＭ温溶液５０μｇ加え３７℃恒温槽中で５分
間インキュベーションし、牛のトロンビン０．２ユニツ
ト／　ｍｌ溶液を５０μｇ添加、３７℃で初速度法によ
り１分間あたりに生成したパラニトロアニリンの吸光度
を４０５　ｎｍで測定し、阻害剤を入れない場合の１／
２の吸光度を示す阻害剤濃度（μｍｏ（１）を■５０と
して求めた。

阻害剤を０．０５　Ｍ　）リスイミダゾール緩衝液（ｐ
Ｈ８，１）に溶かし、Ｓ−２２３８の１ｍＭ溶液を１２
５　μＮ加え、全体を１．２０　ｍｌとし、３７℃恒温
槽中で５分間インキュベーションする。ここへウシのト
リプシン０．０５　ｍｌを添加、３７℃で初速度法によ
り１分間あたりに生成したパラニトロアニリンの吸光度
を４０５　ｎｍで測定し、阻害剤を入れない場合の１／
２の吸光度を示す阻害剤濃度（μｍｏｌ　）を’５０と
して求めた。

阻害剤を０．０５　Ｍ　トリス塩酸緩衝液（ｐＨ７，８
）に溶かし、全体を４００μｇとし、ここへＳ　−２３
０２の２ｍＭ溶液を５０μｇ加え３７℃恒温槽中で５分
間インキュベーションし、人の血漿カリクレイン０．１
２ユニット／ｍｌ溶液を５０μｇ添加、３７℃で５分間
インキュベーションした後５０％酢酸５０μｇを加え反
応を止める。

系内で生成したパラニトロアニリンの吸光度を４０５　
ｎｍで測定し、阻害剤を入れない場合の１／２の吸光度
を示す阻害剤濃度（μｆｆ１ｏΩ）を１５０として求め
た。

阻害剤を０．０５　Ｍ　トリス塩酸緩衝液（ｐｌｉ　８
．８）に溶かし、全体を４００μｇとし、ここへＳ　−
２４４４の１ｍＭ溶液を５０μｇ加え３７℃恒温槽中で
５分間インキュベーションし、人のウロキナーゼ５００
ユニツト／ｍｌ溶液を５０μｇ添加、３７℃で５分間イ
ンキュベーションした後５０％酢酸５０μｇを加え反応
を止める。

系内で生成したバラニトロアニリンの吸光度を４０５正
で測定し、阻害剤を入れない場合の１／２の吸光度を示
す阻害剤濃度（μ［ｌｌＯｇ）をＩ５０として求めた。

尚、本発明化合物を医薬として用いる場合、投与方法に
ついては必ずしも制限はなく、薬学上慣される。又、そ
の用量は１日、１人当りＩＩ〜１０００ｍｇが適当であ
る。但し、必要に応じて適宜増減し得ることは言うまで
もない。

（以下余白） 手　続　補　正　書（方式） 昭和６２年６月す日

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ ｛式中、Ｘは−ＣＯＹ〔但し、Ｙは低級アルキル基（ア
   ミノ基、カルボキシル基又は低級アルコキシカルボニル
   基で置換されていても良い。）低級アルケニル基（フェ
   ニル基で置換されていても良い。）；低級アルコキシ基
   ；アミノ基（低級アルキル基又はハロゲン原子で置換さ
   れても良いフェニル基で置換されていても良い。）；フ
   ェニル基（低級アルキル基、低級アルコキシ基、ハロゲ
   ン原子、トリフルオロメチル基、ニトロ基、又は低級ア
   ルコキシカルボニル基で置換されていても良い。）又は
   ピリジル基を示す。〕又は−ＳＯ＿２Ｚ〔但し、Ｚは低
   級アルキル基又はフェニル基（低級アルキル基で置換さ
   れていても良い。）を示す。〕を表わし、Ｒ＿１および
   Ｒ＿２はそれぞれ水素原子（但し、Ｒ＿１およびＲ＿２
   が同時に水素原子となることはない。）；アルキル基（
   低級アルコキシ基、低級アルコキシカルボニル基又はピ
   リジル基で置換されていても良い。）；シクロアルキル
   基；フェニル基（低級アルキルカルボニル基、フェニル
   カルボニル基、カルボキシル基もしくは低級アルコキシ
   カルボニル基で置換された低級アルキル基、カルボキシ
   ル基又は低級アルコキシカルボニル基で置換されていて
   も良い。）；ピリジル基（低級アルコキシ基で置換され
   ていても良い。）；又はＲ＿１とＲ＿２がそれらが結合
   する窒素原子と共に環状となったピペリジル基（フェニ
   ルカルボニル基、カルボキシル基又は低級アルコキシカ
   ルボニル基で置換されていても良い。）を示す。また、
   ｎは４又は１０を示す。｝にて表わされるフェニルアラ
   ニン誘導体又はその薬学的に許容し得る塩。 ２）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ ｛式中、Ｘは−ＣＯＹ〔但し、Ｙは低級アルキル基（ア
   ミノ基、カルボキシル基又は低級アルコキシカルボニル
   基で置換されていても良い。）。 低級アルケニル基（フェニル基で置換されていても良い
   。）；低級アルコキシ基；アミノ基（低級アルキル基又
   はハロゲン原子で置換されても良いフェニル基で置換さ
   れていても良い。）；フェニル基（低級アルキル基、低
   級アルコキシ基、ハロゲン原子、トリフルオロメチル基
   、ニトロ基、又は低級アルコキシカルボニル基で置換さ
   れていても良い。）又はピリジル基を示す。〕又は−Ｓ
   Ｏ＿２Ｚ〔但し、Ｚは低級アルキル基又はフェニル基（
   低級アルキル基で置換されていても良い。）を示す。〕
   を表わし、Ｒ＿１およびＲ＿２はそれぞれ水素原子（但
   し、Ｒ＿１およびＲ＿２が同時に水素原子となることは
   ない。）；アルキル基（低級アルコキシ基、低級アルコ
   キシカルボニル基又はピリジル基で置換されていても良
   い。）；シクロアルキル基；フェニル基（低級アルキル
   カルボニル基、フェニルカルボニル基、カルボキシル基
   もしくは低級アルコキシカルボニル基で置換された低級
   アルキル基、カルボキシル基又は低級アルコキシカルボ
   ニル基で置換されていても良い。）；ピリジル基（低級
   アルコキシ基で置換されていても良い。）；又はＲ＿１
   とＲ＿２がそれらが結合する窒素原子と共に環状となっ
   たピペリジル基（フェニルカルボニル基、カルボキシル
   基又は低級アルコキシカルボニル基で置換されていても
   良い。）を示す。また、ｎは４又は１０を示す。）にて
   表わされるフェニルアラニン誘導体又はその薬学的に許
   容し得る塩を有効成分として含有する蛋白分解酵素阻害
   剤。