JPS6322583A

JPS6322583A - Ｓｉ−４２２８系物質およびそれを有効成分とする殺菌剤

Info

Publication number: JPS6322583A
Application number: JP61164575A
Authority: JP
Inventors: Genshi Suzuki; 源士鈴木; Moriyuki Tsuzuki; 都築　司幸
Original assignee: Idemitsu Kosan Co Ltd
Current assignee: Idemitsu Kosan Co Ltd
Priority date: 1986-07-15
Filing date: 1986-07-15
Publication date: 1988-01-30

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】〔産業上の利用分野〕本発明はＳＩ　−４２２８系物質およびそれを有効成分
とする殺菌剤に関する。

〔従来の技術〕

本発明者らは既にストレプトミセス属に属する微生物、
ストレプトミセス・エスピーＳＳｌ−４２２８（ＦＥＲ
Ｐ−６１９８）が新規抗生物質を生産することおよび該
物質が農業用殺菌剤として有用であることを見出してい
る（特開昭５８−１１６６８６号）。

〔問題点を解決するための手段〕

本発明者らは、さらに研究を進めた結果、上記微生物は
上記物質の他に３種類の物質を生産することならびにこ
れら物質が殺菌剤として有用であることを見出し、本発
明を完成したのである。

すなわち本発明は、一般式（Ｉ）で表わされる５Ｉ−４
２２８系物質ならびに該物質を有効成分として含有する
殺菌剤に関するものである。

（ここで、Ｘｌは水素原子またはメトキシ基を、Ｘ２は
水素原子ｌたけ水酸基を、Ｘ３はメチル基またはインゾ
ロビル基を示す。）上記式（１）において、ＸｌとＸ２が水素原子であり、
Ｘ３がメチル基である物質、すなわち下記の式（１−ａ
）で表わされる物質を５Ｉ−４２２８Ｃ物質と称し、本
物質の化合物名は２−メチル−４−ヒドロキシ−６−［
：１−（２，４−ジヒドロキシ−３−ホルミル−５−（
２−メチルプロピル）ベンゾイル〕−ブチル〕１．５−
ジオキサスぎ口〔２゜５〕オクタンである。

１だ、前記式（１）において、Ｘｌがメトキシ基、Ｘ２
が水酸基であり、Ｘ３がインプロピル基である物質、す
なわち下記の式（１−ｂ）で表わされる物質を５ｌ−４
２２８Ｄ物質と称し、本物質の化合物名は２−プロぎル
ー４，８−ジヒドロキシ−６−（１−〔２，４−ジヒド
ロキシ−３−ホルミル−５−（１−メトキシ−２−メチ
ルプロピル）ベンゾイル〕−ブチル〕１，５−ジオキサ
スピロ［：２，５］オクタンである。

前記式（１）において、Ｘｌが水素原子、Ｘ２が水酸基
であり、Ｘ３がメチル基である物質、すなわち下記の式
（Ｉ−ｃ）で表わされる物質をＳＩ　−４２２８Ｅ物質
と称し、本物質の化合物名は２−メチル−４，８−ジヒ
ドロキシ−６−（１−（２，４−ジヒドロキシ−３−ホ
ルミル−５−（２−メチルプロピル）ベンゾイル〕−ブ
チル］１．５−ゾオキサスピロ［２，５］オクタンであ
る。

これらＳｌ　−４２２８系物質は、ストレプトミセス属
に属する微生物、たとえばストレプトミセス・エスピー
Ｓｌ　−４２２８株（ＦＥＲＭ　Ｐ−６１９８）を培養
し、培養物から該物質を採取することによって得ること
ができる。

培養は微生物が利用できる栄養物を含有する培地を用い
て行ない、たとえば炭素源としてグルコース、シューク
ロース、デンゾン、水アｙ’、５’キストリン、グリセ
リンなどを使用できる。また、窒素源としては硝酸アン
モニウム、硫酸アンモニウム、肉エキス、コーン・ステ
イープ・リカー。

ペプトン、乾燥酵母、コーン・グルテン、大豆粉その他
の有機または無機の窒素化合物などを使用することがで
きる。その他必要に応じて食塩、リン酸塩類、カルシウ
ム、亜鉛、マグネシウム、鉄などの無機塩類を添加した
り、微生物の生育を助けＳＩ　−４２２８系物質の生産
に有用な物質を適宜添加することができる。

培養は好気的条件下に行なわれ、通常は２５〜３４°Ｃ
１好ましくは２８〜３２℃の温度で３〜１０日間、好ま
しくは４〜６日間行なうことによってＳｌ　−４２２８
系物質の蓄積量が最高となる。５Ｉ−４２２８系物質は
培養濾液内に蓄積される他、菌体内にも蓄積される。

本発明のＳＩ　−４２２８系物質は後記する理化学的性
質を有するので、該性質を考慮して抽出、精製を行なう
。すなわち、培養物に■酢酸エチル等の有機溶剤を加え
て抽出を行ない、得られた抽出液を適当な手段によって
濃縮後、ベンゼンを用いて転溶する。次いで、ゲルｒ過
を行ない、シリカゲルカラムで分離、精製する■培養物
の濾液をイオン交換樹脂または活性炭吸着に付し、次い
で溶出を行なった後、前述の如くシリカゲルカラムで分
離精製し、さらにゲル１、・ト過を行なってから結晶化
せしめる等の方法によって精製された５Ｉ−４２２８系
物質を得ることができる。

このようにして得られたＳＩ　−４２２８系物質は、前
記の如＜５Ｉ−４２２８Ｃ物質、同り物質および同Ｅ物
質の３種であり、それぞれ前記した式で表わされるもの
である。これら３１−４２２８系物質は以下のような物
理・化学的性質を有している。

物色の色・形状　　　　白色粉末　白色粉末　白色粉末
元素分析値（％）　　Ｃ：　　　　　６６．０　　６２
．９　　６３．５Ｈ：　　　　　　　　　７．５　　　
　　７．６　　　　　７．３Ｎ：　　　　　　　　　　
ＯＯＯ分子量（マススペクトル）　　　　４２０　　　４９４
　　　４３６分子弐　　　　　　　Ｃ２３Ｈ：ｌ。ｏ、
　Ｃ２６Ｈ３８ｏ９Ｃ２３Ｈ３□０８赤外線吸収スペク
トル　　　第１図　　第２図　　第３図紫外線吸収スペ
クトル　　　第４図　　第５図　　第６図’Ｈ−ＮＭＲ
スペクトル　　第７図　第８図　第９図１３Ｃ−ＮＭＲ
スペクトル　　　第１０図　　第１１図　　第１２図Ｓ
Ｉ　−４２２８物質中性、酸性、塩基性の区別　　中　性　　中　性　　中
　性溶解性：水　　　不溶　不溶　不溶ｎ−ヘキサン　　　　　〃〃〃メタノール　　可溶　可溶　可溶アセトン　　　　　〃〃〃酢酸エチル　　　　〃〃〃ベンゼン　　　　〃〃〃クロロホルム　　　　〃〃〃四塩化炭素　　　　　〃〃〃呈色反応：ＦｅＣｅ３　　　陽性　陽性　陽性ニンヒド
リン　　陰　性　陰　性　陰　性これうＳＩ　−４２２
８系物質についてポテト・グルコース寒天培地を用い倍
数希釈法により求めた各種微生物に対する最小発育阻止
濃度は次のとおりである。

第　　　１　　　表第　１　表（続き）〔発明の効果〕本発明のＳＩ　−４２２８系物質は農園芸用殺菌剤。

工業用殺菌剤などとして有用であるほか、医薬としての
利用も期待される。農園芸用殺菌剤としては、特に灰色
カビ病、炭痘病、紋枯病、イモチ病などに対して有効で
あり、しかも既存の殺菌剤よりも低薬量で十分な防除効
果を示す。なお、これら物質または製薬上許容される酸
付加塩は適当な賦形剤などを配合して水和剤、乳剤、粉
剤１粒剤等の剤型に製剤して用いる。

〔実施例〕

次に、本発明を実施例などにより詳しく説明する。

製造例ｌＰＨ６，８に調整したグルコース３％、ポリペプトン０
．２％、マルトエキストラクト０．８％、　ＮａＣｌ３
０．０８％、　ＫＨ２ＰＯ４０，１２％を含む培地３０
２を容量６０看のジャーファーメンタ−に注入し、滅菌
後、マイヤーフラスコで培養した種培養液（ストレプト
ミセス・エスピー４２２８株、ＦＥＲＭ　Ｐ−６１９８
）２００ｍｌを接種した。接種後、３２°Ｃで毎分３０
ノの無菌空気を通気し、６００ｒｐｍで９６時間攪拌培
養した。

培養物を連続遠心機（５０００Ｇ）にかけ菌体とＰ液に
分離し、ｒ液中に２０４の酢酸エチルを加えて１時間攪
拌し、酢酸エチル層を集めた。−方、遠心分離により集
めた菌体にＩＯＡのアセトンを加え、１００　ｒｐｍで
１０時間攪拌し、その後ブフナーロートを用いて濾過し
、アセトン層を集めた。

次いで、酢酸エチル層とアセトン層を混合し、４０°Ｃ
で減圧濃縮乾固した。濃縮物にｎ−ヘキサン２−ｅを加
え１時間攪拌後、静置し、生じたｎ−へキサン層を除い
て沈でん物を集めた。次に、この沈でん物に１４のベン
ゼンを加えたのち濾過して沈でん物を除いた。その後、
ベンゼン溶解液を４０°Ｃで減圧濃縮乾固して４１３２
ｒｎ９の濃縮物を得た。

セファデックスＬＨ−２０をクロロホルムに分散せしめ
た後、径７０間のガラスカラムに高さ６〇−充填した。

次いで、前記濃縮物を１４ｍ１のクロロホルムに溶解し
、カラムの上端にのせクロロホルムで展開した。溶出液
をフラクションコレクターで２０ｍ１ずつ分取し、フラ
クション３２〜６４を集めて濃縮乾固した。

次に、セファデックスＬＨ−２０をメタノールに分散せ
しめた後、径１８１１ｔｌｌのガラスカラムに高さ１０
０ｃｒｎ充填した。次いで、前記濃縮物を少量のメタノ
ールに溶解し、カラムの上端にのせメタノールで展開し
た。溶出液をフラクションコレクターで５　ｍｌずつ分
取し、フラクション１５〜４２を集めて濃縮乾固した。

次に、シリカゲル（メルク社製）にベンゼンを加え、径
１２間のガラスカラムに高さ１０ｃｍ充填し、濃縮物を
少量のベンゼンに溶解し、カラムの上端にのせて吸着さ
せた。

しかる後、ベンゼン：酢酸エチル（１０：１）混合物で
展開した。溶出液をフラクションコレクターで５　ｍｌ
ずつ分取し、フラクション４６〜１１８を集めた。この
画分を減圧濃縮して油状の５ｌ−４２２８Ｄ物質６６■
を得だ。この物質は前記理化学的性質を有していた。

さらに、Ｓｌ　−４２２８Ｄ物質溶出後、フラクション
１３２〜１６８を集め、この両分を減圧濃縮して油状の
５Ｉ−４２２８Ｃ物質３２ｍ９を得た。この物質は前記
理化学的性質を有していた。

製造例２製造例１において、培養物からの酢酸エチルおよびアセ
トン抽出物をｎ−ヘキサンおよびベンゼンで洗浄し、濃
縮乾固して得た４１３２ｍｇの濃縮物を、セファデック
スＬＨ２０を用いてクロロホルムで展開したフラクショ
７１２１〜１６８を集めて濃縮乾固した。

次いで、シリカゲル（メルク社製）にベンゼンを加え、
径１２間のガラスカラムに高さ１０Ｃｒｎ充填し、濃縮
物の少量のベンゼンに溶解し、カラムの上端にのせて吸
着せしめた。しかる後、ベンゼン：酢酸エチル（１２：
１）混合物で展開した。

溶出液をフラクションコレクターで５　ｍｌずつ分取し
、フラクション１３２〜１６８を集めた。この両分を減
圧濃縮し、油状のＳＩ　−４２２８Ｅ物質６８ｍ９を得
た。この物質は前記理化学的性質を有していた。

実施例１（乳剤）ＳＩ−４２２８ＣｆたはＤまたはＥ物質４０部。

キシレン４５部、ツルポール３００５Ｘ（東邦化学工業
社製）１５部を混合溶解させる。本則を水で２．０００
〜４０，０００倍に希釈して散布する。

実施例２（水利剤）ＳＩ　−４２２８ＣまたはＤまたはＥ物質１０部。

デタージエント６０（ライオン社製）０．９部、ツルポ
ール８ＱＯＡ（東邦化学工業社製）１．８部。

ジ−クライト（ジ−クライト工業社製’）　８７．３部
を混合粉砕する。本則を水で５００−１０，０００倍に
希釈して散布する。

試験例１播種後３０日口のインゲン（品種：キースト／。

鉢植）５株に所定濃度の供試化合物を含む薬剤を散布し
、散布２４時間後にＢｏｔｒｙｔｉｓ　ｃｉｎｅｒｅａ
の胞子懸濁液（ＩＸＩＯ６個／　ｍｌ　）を直径８調の
ペーパーディスクにつけたものをインゲン１株につき２
枚の葉の表面にのせた。比叔のために薬剤を散布しない
株にも同一の方法で菌を接種した。

その後、温度２０°Ｃ１湿度１００％の恒温、恒湿槽内
にインゲンを保持し、５日後に葉面にできた壊死長径を
葉の裏面よシ測定し、下記の方法により罹病度を算出し
た。

第２表に試験結果を示した。

ｎ：試験集の病斑の長径（醪）Ｎ：無散布葉　　〃第　　　２　　　表５Ｉ−４２２８Ｃ物質（乳剤）　　　　　２００　　　
　　０〃１００　１１．２〃５０　２３．３ＳＩ−４２２８Ｄ物声（乳剤）　　　　　２　Ｑ　Ｏ２
，６”　　　１００　１４．７ ”　　　５０　２５．２ＳＩ−４２２８Ｅ物質（乳剤）　　　　　２００　　　
　　３．２／／　　　１００　２６．５／／　　　５０　３６．８ポリオキシン　　　　　　　２００　　　　２７．６０
ブラール　　　　　　　　５００　　　　　３．４試験
例２，３果試験播種後６０日口のレタス（品種：グレートレークス３６
６、鉢植）および播種後４０日口のピーマン（品種二ニ
ューエース、鉢植）各５株に所定濃度の薬剤を散布し、
予め寒天培地上に生育せしめたＢｏｔｒｉｔｉｓ　ｃｉ
ｎｅｒｅａの菌糸を径４ｒｒｒｍのコルクポーラ−で打
ち抜いたものを１株につき２枚の葉にのせた。その後、
試験例１と同様の方法で試験を行なった。結果を第３表
および第４表に示した。

第３表　レタス灰色カビ病に対する試験５ｌ−４２２８
Ｃ物質（水和剤）　　　　　２００　　　　　　０１／
　　　　　　　　　　１００　　　　　１２．６〃５０
　　　　　２０．０３Ｉ−４２２８Ｄ物質（水和剤）　　　　２００　　　
　　　１．１／／　　　　　　　　　　１００　　　　
　１４．０／／　　　　　　　　　　　５０　　　　　
２７．４Ｓｌ−４２２８Ｅ物質（水和剤）　　　　２０
０　　　　　　１．６〃１００　　　　　１３．１／／　　　　　　　　　　　５０　　　　　２２．０ロ
プラール　　　　　　　　５００　　　　１２．７ＳＩ
−４２２８Ｃ物質（水利剤）　　　　２００　　　　　
　２．２＃　　　　　　　　　　１００　　　　　１８
．３／／　　　　　　　　　　５０　　　　　３１．９
Ｓ！−４２２８Ｄ物質（水和剤）　　　　２００　　　
　　　３．６／／　　　　　　　　　　１００　　　　
　１４．７Ｉ１５０　　　　　３０．６Ｓｌ−４２２８Ｅ物質（水和剤）　　　　２００　　　
　　　２．８／／　　　　　　　　　　１００　　　　
　１７．６／／　　　　　　　　　　５０　　　　　２
４．８０ブラール　　　　　　　　５００　　　　　６
．８試験例４実施例２において製造した水利剤を種々の濃度になるよ
うに殺菌した溶解状態のサブロー寒天培地に加えて均一
分散したのち、シャーレ−に分注し、放冷固化せしめた
。

一方、予めＳＩ　−４２２８Ｃ物質、　５ｌ−４２２Ｂ
Ｄ物質、５Ｉ−４２２８Ｅ物質のいずれも加えていない
サブロー寒天培地に第５表に示す白廚菌を接種し、６日
間培養した。この白軒菌の培養された寒天を円径５順の
殺菌したコルクポーラ−で寒天ごと打ち抜き、上記の各
濃度に調製した５Ｉ−４２２８ＣまだはＤ″またはＥ物
質を含む寒天培地の中心に置き、ＳＩ　−４２２８Ｃま
たはＤまたはＥ物質の白Δ菌に対する最小発育阻止濃度
を調べた。結果を第５表に示しだ。

参考例製造例１．２と同様の方法で得たＳＩ　−４２２８Ｃ，
Ｄ、Ｅ物質各２０１ｎｑを１　ｍｌのエタ／−／ｌ／に
溶解せしめた。

一方サリチルスルホニルヒドラジドを５ｉ４２２８Ｃ，
Ｄ、Ｅ物質に対しそれぞれ１．５倍モルになるように加
えて１時間攪拌し、その後２４時間放置して生成したヒ
ドラゾンの結晶を集め、実施例２と同様の方法で水和剤
を製造し、この薬剤を用いて試験例１と同様の方法でイ
ンデノ灰色カビ病に対する予防効果試験を行なった。結
果を第６表に示した。

第　　　６　　　表薬　　　　剤　　−憑Ｊ■」止凹ｌ　罹病度５Ｉ−４２
２８Ｃ物質のヒドラゾ７　　　２００　　　　　　０”
　　　　　　　　　　　　１００　　　　　　４．５〃
５０　　　　　１３．２Ｓｒ−４２２８Ｄ物質のヒドラゾ７　　　２００　　　
　　　　Ｑ”　　　　　　　　　　　１００　　　　　
　１．３”　　　　　　　　　　　　５０　　　　　１
０．３ＳＩ−４２２８Ｅ物質のヒドラゾ７　　　２００
　　　　　　１．３”　　　　　　　　　　　　　　　
１００　　　　　　　　６．７１１　　　　　　　　　
　　　　　　５０　　　　　　　１５．６ポリオキシン
　　　　　　　２　Ｑ　Ｏ２０，５０ブラール　　　　
　　　　　５００　　　　　１．３

【図面の簡単な説明】

第１図、第２図６第３図は、それぞれ５Ｉ−４２２８Ｃ
物質、５ｌ−４２２８Ｄ物質、　５Ｉ−４２２８Ｅ物質
の赤外線吸収スペクトル（ＫＢｒ法）である。第４図、第５図、第６図は、それぞれＳＩ−４２２８０
物質、５ｌ−４２２８Ｄ物質、５Ｉ−４２２８Ｅ物質の
紫外線吸収スペクトル（メタノール溶液中で測定）であ
る。第７図、第８図、第９図はそれぞれ５ｌ−４２２８
Ｃ物質、５Ｉ−４２２８Ｄ物質。５ｌ−４２２８Ｅ物質の’Ｈ−ＮＭＲスペクトル（重ク
ロロホルム溶液中、ＴＭＳを基準物質として測定）であ
る。第１０図、第１１図、第１２図はそれぞれＳＩ　−
４２２８Ｃ物質、５ｌ−４２２８Ｄ物質。ＳＩ　−４２２８Ｅ物質の　Ｃ−ＮＭＲスペクトル（重
クロロホルム溶液中、　ＴＭＳを基準物質として測定）
である。第４図１％５１ｃｍ第５図１％１ｃｍ

Claims

【特許請求の範囲】

（１）一般式（ I ）で表わされるＳＩ−４２２８系物
質。 ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ）（ここで、Ｘ＿１、は水素原子またはメトキシ基を、Ｘ
＿２は水素原子または水酸基を、Ｘ＿３はメチル基また
はイソプロピル基を示す。）
（２）ＳＩ−４２２８系物質が、下記の式（ I −ａ）
で表わされるＳｉ−４２２８Ｃ物質である特許請求の範
囲第１項記載のＳＩ−４２２８系物質。 ▲数式、化学式、表等があります▼（ I −ａ）
（３）ＳＩ−４２２８系物質が、下記の式（ I −ｂ）
で表わされるＳＩ−４２２８Ｄ物質である特許請求の範
囲第１項記載のＳＩ−４２２８系物質。 ▲数式、化学式、表等があります▼（ I −ｂ）
（４）ＳＩ−４２２８系物質が、下記の式（ I −ｃ）
で表わされるＳＩ−４２２８Ｅ物質である特許請求の範
囲第１項記載のＳＩ−４２２８系物質。 ▲数式、化学式、表等があります▼（ I −ｃ）
（５）一般式（ I ）で表わされるＳＩ−４２２８系物
質を有効成分として含有する殺菌剤。 ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ）（ここで、Ｘ＿１は水素原子またはメトキシ基を、Ｘ＿
２は水素原子または水酸基を、Ｘ＿３はメチル基または
イソプロピル基を示す。）
（６）ＳＩ−４２２８系物質が、下記の式（ I −ａ）
で表わされるＳＩ−４２２８物質である特許請求の範囲
第５項記載の殺菌剤。 ▲数式、化学式、表等があります▼（ I −ａ）
（７）ＳＩ−４２２８系物質が、下記の式（ I −ｂ）
で表わされるＳＩ−４２２８Ｄ物質である特許請求の範
囲第５項記載の殺菌剤。 ▲数式、化学式、表等があります▼（ I −ｂ）
（８）ＳＩ−４２２８系物質が、下記の式（ I −ｃ）
で表わされるＳＩ−４２２８Ｅ物質である特許請求の範
囲第５項記載の殺菌剤。 ▲数式、化学式、表等があります▼（ I −ｃ）