JPS63201195A - 抗生物質ｔｍ−６１１ｂ - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は抗生物質に関する。

（従来の技術） 本発明の抗生物質は新規の物質であって、これと同一の
理化学的性質を有する物質の存在は、現在まで報告され
ていない。

（発明が解決しようとする問題点） 本発明の目的は、ダラム陽性菌に対し増殖抑制作用を示
す新規の抗生物質を提供することにある。

（問題点を解決するための手段） 本発明の目的物質を生産する菌株は、本発明者らが宮城
県仙台市の土壌よシ新たに分離した菌株であり、微生物
の名称「ストレプトパーティシリウム・オリポレチクリ
（Ｓｔｒｅｐｔｏｖｅｒｔ尺１１ｕｍ　ｏｌｉｖｏｒｅ
ｔｉｃｕｌｉ）ＴＭ−６１１Ｊおよび微生物寄託番号「
微工研菌寄第８９７２号（ＦＥＢＭ　Ｐ−８９７２）Ｊ
として工業技術院微生物工業技術研究所に寄託されてお
り、この菌株を培養して得られる本発明の抗生物質を抗
生物質ＴＭ−６１１Ｂと命名した。

この菌株の菌学的性状を以下に示す。

１）形態 栄養菌糸は合成寒天培地および天然寒天培地においてよ
く発達し、不規則に分岐する。また隔壁は認められない
。胞子はシュウクロース・硝酸塩寒天培地、スターチ寒
天培地およびイースト・麦芽寒天培地などで中程度に形
成される。

顕微鏡で観察すると、胞子形成菌糸の分岐方法は１次ま
たは２次の車軸分岐で胞子は直鎖状に形成される。胞子
は通常１０個以上の連鎖が認められ表面は平滑である。

胞子の形状は楕円形で、その大きさは０．５７−０．５
３　ｘ　ｏ、　５８−　ｏ、　９８μである。菌核、胞
子のう、べん毛胞子は観察されない。

２）培地上での生育状態 各種培地上に３０℃で１４日間培養した時の肉眼的観察
結果を１表に示す。

第１表　生育状態 ３）生理的性質 （１）生育温度範囲 オートミール寒天培地上において２５−３７℃の範囲で
良好に生育する。１０℃以下、４５℃以上の温度範囲で
は生育しない。

（２）生化学的性質 ａ）好気性、嫌気性の区別：　好気性 ｂ）ゼラチンの液化：　　　　陽性 Ｃ）脱脂乳の凝固：　　　　　陽性 ｄ）脱脂乳のペプトン化：　　陽性 ｅ）スターチの加水分解：　　陽性 ｆ）メラニン様色素生成：　　陽性 （３）炭素源の利用 （グリドハム・ゴドリープ寒天培地上）利用する：Ｄ−
グルコース、Ｄ−７ラクトース、イノシトール、ガラク
トース。

スターチ。

わずかに利用する：シュウクロース、Ｌ−ラムノース、
Ｄ−マンニット。

利用しない、Ｌ−アラビノース、Ｄ−キシロース、ラフ
ィノース。

以上の性状から本菌株が放線菌に属することは明らかで
あり、上記諸性状を工、　ｓ、　ｐ、　「ジ・インター
ナショナル・ストレプトミセス・プロジェクト」。

バージ−著「マニュアル・オプ・ディターミナティプ・
バクテリオロジー」第８版（１９７４年）およびワック
スマン著「ジ・アクチノミセテス」第２巻（１９６１年
）に報告されている多くの既知菌種と比較した結果、本
菌株はストレプトパーティシリウム・オリボレチクリ（
Ｓｔｒｅｐｔｏｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍｏ１ｉｖｏｒ
θｔｉｃｕｌｉ　）　　に最も近い性状を示していた。

以上の結果より本菌株はストレプトパーティシリウム・
オリボレチクリと種を同じくするものと判断し、本菌株
をストレプトパーティシリウム・オリボレチクリＴＭ−
６１１と命名した。

抗生物質ＴＭ−６１１Ｂの生産は大略一般の発酵生産物
を生産する場合に準じ、各種の栄養物質を含む培地でＴ
Ｍ−６１１株を好気的条件下で培養することによシ行う
。

培地は主として液体培地を用い炭素源としてはグルコー
ス、廃糖蜜、スターチなどを単独か、または混合して用
いる。窒素源としては肉エキス。

酵母エキス、大豆粉、ポリペプトンなどを単独か、また
は混合し用いる。

その信奉菌株の生育を助は抗生物質ＴＭ−６＋　ＩＢの
生産を促進する有機物および無機塩を適当に添加するこ
とができる。消泡剤としては、アデカノール、／リコン
など常用の消泡剤を用いることができる。

培養方法は振とう培養１通気かくはん培養などの好気培
養が適しておシｐｉ−１４−８，２５−３５℃で３−６
日間、望ましくはｐＨ６−７，２８−３０℃で４日間培
養する。

この培養によシ生産された抗生物質ＴＭ−６１１Ｂを単
離するには、発酵生産物を採取する一般的な方法に準じ
て行えばよい。抗生物質ＴＭ−６１１Ｂは主に菌体内に
蓄積されるので、たとえば次の方法が効果的である。す
なわち、培養終了後遠心分離または、濾過により分離し
た菌体から抗生物質ＴＭ−６１１Ｂを低９アルコール、
アセトンなどの有機溶媒で抽出し、この抽出液を濃縮後
　酢酸エチル、ベンゼン、クロロホルムなどの非水溶性
有機溶媒に転溶し、これを濃縮してシロップ状とする。

このシロップを再度ベンゼン、酢酸エチル。

アセトン、エタノールなどの有機溶媒に溶解し、シリカ
ゲル〔ワコーゲル０−２００（商品名、和光紬薬製）〕
を用いたカラムクロマトグラフィーおよびセファデック
スＬＨ−２０（商品名、ファルマシア社製）を用いたゲ
ル濾過に付し、活性区分を集めることにより抗生物質Ｔ
Ｍ−６１１Ｂを精製、単離することができる。

以上の精製方法で単離された抗生物質ＴＭ−６１１Ｂは
下記の理化学的性質を有している。

理化学的性質 ａ）外観　　　　　白色プリズム状結晶ｂ）ｍ、ｐ、　
　　　　１５３−１５５℃Ｃ）元素分析値　Ｃ二６１．
７９％　Ｈ：ａ４９％Ｎａ　：　５．１８％ ｄ）分子量　　　ＦＡＢＭＢ：ｍ／ｚ　　６９１（Ｍ＋
Ｈ）＋θ）分子式　　　ａ３６Ｈ５９Ｏ１１　Ｎａｆ）
比旋光度　　（ａ　〕’ｐ　＋　２２−４　（ｃ　＝Ｉ
：Ｌ５　、ＣＨｃＺ３）ｇ）紫外線吸収スペクトル 末端吸収 ｈ）赤外線吸収スペクトル ＫＢｒ錠中で測定した結果を第１図に示す１ｉ）１Ｈ−
ＮＭＲｎ−クトル ＣＤＣｔ３中４００　ＭＨｚで測定した結果を第２図に
示す。

ｊ）１３ｃｍＮＭＲスペクトル ＣＤＣｔ３中１００　ＭＨ２で測定した結果を第３図に
示す。

ｋ）溶媒に対する溶解性 水に不溶、 メタノール、エタノール、アセトン、酢酸エチル、ベン
ゼン、クロロホルム、ｎ−へキサンに可溶。

１）呈色反応 ニンヒドリン、塩化第二鉄反応：陰性。

バニリン−硫酸、ヨード反応：陽性。

ｍ）塩基性、酸性、中性の区別：遊離体では弱酸性をし
めす。

以上の理化学的性質と一致する性質を有する抗生物質は
報告されておらず、抗生物質ＴＭ−６１１Ｂは新規の抗
生物質であると考えられる。

なお、抗生物質ＴＭ−６１１Ｂに比較的類似した物質と
してレイドロマイシン、アルボリキ７ン。

ｘ２０６およびＴＭ−６１１などのポリエーテル系抗生
物質を挙げることができるが、これらは融点、比旋光度
１元素分析値、１Ｈ−ＮＭＲスペクトル、および分子量
が抗生物質ＴＭ−６１１Ｂのそれと明らかに相違する。

（作　用） 抗生物質ＴＭ−６１１Ｂは、ダラム陽性菌に対し増殖抑
制作用を有する。以下、試験例を挙げ抗生物質ＴＭ−６
１１Ｂの作用を具体的に説明する。

試験例 、　日本化学療法学会法に準じ、細菌には抗生物質ＴＭ
−６１１Ｂを加えた感受性ディスク寒天培地を用いカビ
、酵母には同様に処理したサブロー寒天培地を用いＭＩ
Ｃ（最小発育阻止濃度）を測定した。

その結果を第２表に示す。

第２表　抗菌作用 （発明の効果） 本発明の目的物質である抗生物質ＴＭ−６＋１Ｂは、以
上の諸性状を有しダラム陽性菌に対し増殖抑制作用を有
する新規なポリエーテル抗生物質であシ医薬、農薬およ
び飼料添加剤として有用である。なお、必要に応じて遊
離体、カリウム塩、アンモニウム塩、カルシウム塩など
として用いることができる。

（実　施　例） 以下、実施例を挙げて本発明を具体的に説明する。

実施例 （１）　１００−当シグルコ〜ス　２ノ、オートミール
　２２．肉エキス　０．３ｉ２食塩　ｏ３２゜炭酸カル
シウム　α２５２．硫酸第二鉄　０．０４ｆ。

塩化マンガン　０．０４　ｆからなるｐＨ７の無菌液体
培地にＴＭ−６１１株を接種し、３０℃、４８時間振と
う培養し種培養液とした。

次に内容量５０ｔのジャー７アーメンターを用いて、種
培養と同じ組成の無菌培地３０　ｔＫ前記種培養液３０
０　ｒｎｔを接種し、３０’Ｃ，７２時間がくはん通気
培養した。培養終了後、２基分６０ｔを遠心分離機で上
澄液と菌体に分けた。得られた菌体４Ｋｇをアセトン７
ｔで２回抽出し、この抽出液を合わせ濃縮してアセトン
を除去した。得られた水溶液を等量のベンゼンで２回抽
出し、このベンゼン抽出区分を合わせ、無水硫酸ナトリ
ウムで脱水後濃縮し、得られたシロップ区分を更にｎ−
ヘキサン５００−で２回抽出した。このｎ−ヘキサン抽
出区分を合わせ濃縮乾固し黄褐色粉末２５りを得た。こ
の黄褐色粉末をベンゼン２００ゴに溶解しベンゼンで調
製したシリカゲル〔ワコーゲルＣ−２００（商品名、和
光紬薬社製）〕の１ｔカラムに吸着させた。ベンゼン１
ｔで洗浄後、ベンゼン−アセトン（９０：　１０）およ
び（８０：２０）の混合溶媒で順次溶出し、この区分を
除去した。次いで１００％アセトン１ｔで溶出し、この
区分を集めて濃縮乾固し粗粉末６３０■を得た。

（２）前項１で得た粗粉末をベンゼン１０−に溶解した
後ｎ−ヘキサン−アセトン（９０：１０）の混合溶媒で
調”製したシリカゲル〔キーゼルゲル（商品名、メルク
社製）〕の〕１００−カラに吸着させた。カラム調製時
と同じ混合溶媒１００づで洗浄後、ｎ−ヘキサン−アセ
トン（８０：２０）の混合溶媒で溶出を行いフラクノヨ
ンコレクターを用い１フラクシヨン１０２づつ区分し、
Ｎ１１６０−１２０までの区分を集めた。集めた区分を
濃縮乾固後、常法通ジナトリウム塩とした後、更にアセ
トンに溶解し、セファデックスＬＨ−２０（商品名、フ
ァルマシア社製）を用いてアセトンでゲルろ過を行い、
得られた活性区分を集め濃縮乾固した。これをｎ−ヘキ
サンに溶解し、結晶化を行い抗生物質ＴＭ−６１１Ｂの
白色プリズム結晶を５０１１１ｉ得た。

ｍ、ｐ、　　１５３−１５５℃

【図面の簡単な説明】

第１図はＫＢｒ錠で測定した抗生物質ＴＭ−６１１Ｂの
赤外線吸収スペクトル、第２図はＣＤＣｌ３中、４００
　ＭＨｚで測定した抗生物質ＴＭ−６１１Ｂの１Ｈ−Ｎ
　Ｍ　Ｒスペクトル、第３図はＣＤＣ４３中、１００Ｍ
Ｈｚで測定した抗生物質ＴＭ−６１１ＢのＬ３Ｃ−ＮＭ
Ｒスペクトルを示す。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 　ナトリウム塩として下記の理化学的性質を有する抗生
   物質ＴＭ−６１１Ｂ。 ａ）外観　白色プリズム状結晶 ｂ）ｍ．ｐ．１５３−１５５℃ ｃ）元素分析値　Ｃ：６１．７９％Ｈ：８．４９％Ｎａ
   ：３．１８％ ｄ）分子量　ＦＡＢＭＳ：ｍ／ｚ　６９１（Ｍ＋Ｈ）＾
   ＋ｅ）分子式　Ｃ＿３＿６Ｈ＿５＿９Ｏ＿１＿１Ｎａｆ
   ）比旋光度〔α〕＾２＾４＿Ｄ＝＋２２．４゜（ｃ＝０
   ．５、ＣＨＣｌ＿３）ｇ）紫外線吸収スペクトル 末端吸収 ｈ）赤外線吸収スペクトル ＫＢｒ錠中で測定した結果を第１図に示す。 ｉ）＾１Ｈ−ＮＭＲスペクトル ＣＤＣｌ＿３中、４００ＭＨｚで測定した結果を第２図
   に示す。 ｊ）＾１＾３Ｃ−ＮＭＲスペクトル ＣＤＣｌ＿３中、１００ＭＨｚで測定した結果を第３図
   に示す。 ｋ）溶媒に対する溶解性 水に不溶、 メタノール、エタノール、アセトン、酢 酸エチル、ベンゼン、クロロホルム、 ｎ−ヘキサンに可溶。 ｌ）呈色反応 ニンヒドリン、塩化第二鉄反応：陰性 バニリン−硫酸、ヨード反応：陽性 ｍ）塩基性、酸性、中性の区別：遊離体では弱酸性をし
   めす。