JPS63191801A - 多糖類の制御された解重合方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は、天然の線状多糖類、さらに詳しくは、グリコ
ースアミノグリカンス（ｇｌｙｃｏｓａｍｉｎｏ−ｇｌ
ｙｃａｎｓ、ＧＡＧ）を制御して化学的に解重合する新
規な方法に関する。

本発明は、上記方法によって得られた解重合化ヘパリン
および該解重合化ヘパリンを含有する薬学的組成物を包
含する。

Ｋ米ム旦菫 ヘパリン、ヘパランサルフェート（ｈｅｐａｒａｎｓｕ
ｌｐｈａｔｅ、Ｈ９）、デルマタンサルフェート（ｄｅ
ｒ−ｍａｔａｎｓｕ　Ｉｐｂａｔｅ　、Ｏ９）等の幾つ
かの天然ＧＡＧを制御して解重合させることは魅力的で
はあるが、実際上困難な作業である。

しかし、幾つかの実験所見から興味が生じてｌ／する。

即ち、これによれば、幾つかのＧＡＧの７＜イオアベイ
ラビリテイ及び生理学的効果は、これ力≦実験モデル又
は人間に経口又は非経口投与された時には、その平均分
子量（ＭＷ）に依存するであろうとされる０例えば、市
販のへノくリンは、その活性ゆえに、強力なプロテアー
ゼ阻害剤、アンチ−トロンビン（ａｎｔｉ−ｔｈｒｏｍ
ｂｉｎ　ｍ　（Ａｔ−ｍ）のコファクター等の抗凝血剤
（ａｎｔｉｃｌｏｔｔｉｎｇ　ａｇｅｎｔ）として良く
知られている。ヘパリンはＮＷ＝１２．０００　０の硫
酸塩化ＧＡＧであり、約２０の二糖類単位に相当し、こ
れはヘム凝集（ｈａａｍｏｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎ）に
おいて５フアクター、即ち、ＦＸ［、ＦＸ［、ＦＩＸ、
ＦＸ、ＦＩＩを阻害する。

最近、Ｎ　Ｗ　＝　４．０００−６．００００のヘパリ
ンフラクション（低分子量ヘパリン、ＬＭＷＨ）は幾つ
かのファクターの阻害に影響を及ぼすが、その他のファ
クタＬ、特にＦＸ等の静脈血栓症におけるキーファクタ
ーには影響を及ぼさないことがわかった。従って、ＬＭ
ＷＨは市販のヘパリンよりも出血の危険が少ない効果的
な抗血栓剤になりうると考えられる。

又、血流中のＬＭＷＨの半減期が通常のヘパリンよりも
長いことわかっている。従って１点滴や反発現象を回避
しつつ長期間の治療を行うことができる。

ＬＭＷＨのもう一つの利点は、血小板凝集の妨害、即ち
、過去に成るヘパリン投与中の患者に激しい血小板減少
症を引き起こしていた望ましくない作用が存在しないと
いうことである。

発明が　　しようと　る問題点 ”［には、ヘパリン及び幾つかの他のＧＡＧを制御して
解重合することは多くの理由から困難な作業である。即
ち。

ａ）現在使用されている化学剤、（亜硝酸（ｎｉｔｒｏ
ｕｓａ　ａｃｉｄ）、ベータ脱離（β−ｅｌｉｍｉｎａ
−ｔ　１ｏｎ）　、酸化、酸性又はアルカリ性加水分解
　）によると、影響された結合の周りの又は反応と無関
係の他の領域の分子構造を変性してしまい、加工物（ａ
ｒｔｅｆａｃｔｓ）を生成してしまう。

ｂ）酵素分割（ｅｎｚｙ■ａｔｉｃ　ｃｌｅａｖａｇｅ
）は、解重合が予め選択された場所に適用されなければ
ならない時には、取扱が難しい、しかも、ヘパリン、Ｈ
５，ＤＳは現在入手できる酵素によっては容易に影響さ
れない。

Ｃ）分子ふるい法、限外濾過法１選択沈殿法（ｓｅｌｅ
ｃｔｉｖｅ　ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎ）等の物理的
又は化学−物理的方法で分割することは大規模な経済的
生部ち、本発明が目的とする化学的方法は、配糖体結合
の脱離剤として原子状酸素を使用することによって得ら
れるヘパリン及び他の線状多糖類を制御して解重合する
方法である。原子状酸素を得るに最も容易な方法は、実
施例において引用したように、次亜塩素酸ＨＣｌ０を使
用して行う方法である。

本発明の方法の利点は、例えば、予め選択された分子量
において反応が容易に停止されること、収率が高いこと
、副反応がないこと、無機触媒（重金属）が存在しない
こと等である。又、反応が進行する限りは黒ずむことが
ない点も利点である。したがって、白色の澄んだ生成物
が得られ、面倒な漂白手順が回避される。

上述の利点を可能とする本発明の方法は、以下に要約す
るような特定の反応条件下において実施される： ｌ）全反応中ｐＨを一定に保持するために、水溶液をｐ
Ｈ４乃至７に緩衝する。ｐＨが４よりも低いか又はｐＨ
を４よりも下げた場合は、次亜塩素酸から塩素が遊離し
て望ましくない副反応が生じる。望ましい反応（ｐＨ４
乃至７）は、ＨＣ見０→ＨＣ１＋０ である、他方、塩素化を生じる望ましくない反応（ｐＨ
４より小）は、 ＨＣＲＯ＋ＨＣ見→Ｃ皇２＋Ｈ２ である。

２）この反応はモル比（ＨＣＩ　Ｏ／多糖類）１０：１
又はそれ以上において行われる。

ＨＣＭＯ溶液の全見込み量を多糖類の溶液に添加する。

３）反応は、過剰のＨＣＪＩＯを分解するために重硫酸
ナトリウムＮａＨ３Ｏ３等の還元剤を添加することによ
り予め選択したレベルにて瞬時に停止することができる
。

４）エタノール、メタノール又はアセトン等の水混和性
溶媒を２容量添加することにより、解重合された多糖類
を沈殿させ、その後、回収して純粋の溶媒で洗浄し真空
下で乾燥する。

５）操作温度の範囲は、２５℃から混合物の沸点までの
間である０反応を促進し逆流を防止するために５０℃乃
至８０℃の温度範囲が通常使用される。多糖類の溶液に
添加する前のＨＣｌ０溶液の温度は＋５℃以下に保持し
なければならない。

６）平均分子量ＭＷの一部及び最終の測定は、Ｅ、　Ａ
、　Ｊｏｈｎｓｏｎ及びＢ、　Ｍｕｌｌｏｙ　−Ｃａｒ
ｂｏ　ｈｙｄｒ。

Ｒｅ、　５１．１１９　（１９７Ｇ）に従った精度法に
よって行うことができる。

実施例 以下の実施例は、本発明の方法を限定するものではなく
、方法の一態様を記述するものである。

ＭＷ＝１２．０００ダルトン（粘度法で測定）のヘパリ
ンナトリウム（ｓｏｄｉｕｍ　ｈｅｐａｒｉｎ）ＵＳＰ
　　１５グラムをｐｉ（＝　６　、０の０．１　Ｍのシ
トラード／ホスファート緩衝液８０１に溶解した。ＩＭ
の次亜塩素酸ナトリウム２０１を別に調製し、ＨＣｌで
ｐＨ６に安定させ、０℃に保った。この溶液に上記ヘパ
リン溶液を添加した。このようにして、最終的な溶液は
０．０１モルのヘパリンと０．２モルのＨＣｌ０とから
なるものであった。これを８０℃に加熱し、１０分毎に
１０ｍ１の試料を単離した。即座に、各試料に２Ｍ　　
ＮａＨ３Ｏ３溶液を１１添加した後、エタノールを２０
１添加した。沈殿物を回収し、各々５１のエタノールで
３回洗浄し、真空下で乾燥させた。

各試料について粘度法でｉを測定した。

第１図にその結果を報告する。

【図面の簡単な説明】

第１図は、本発明の実施例における反応時間と粘度との
関係を示す図である。 代理人　三　宅　正　夫　他１名 図面の浄書（内容に変更なＬ］ 手続補正書（自発） 昭和６３午１月１１日

Claims (8)

【特許請求の範囲】
1. （１）線状多糖類に原子状酸素の作用を及ぼすことを特
   徴とする線状多糖類の化学的解重合方法。
2. （２）原子状酸素が次亜塩素酸から発生して得られたも
   のであることを特徴とする特許請求の範囲第１項に記載
   の方法。
3. （３）多糖類がヘパリンであることを特徴とする特許請
   求の範囲第１項に記載の方法。
4. （４）水溶液中のｐＨの範囲が４乃至７であり、温度が
   ２５℃乃至１００℃であることを特徴とする特許請求の
   範囲第２項に記載の方法。
5. （５）反応が、還元剤の添加によって何時でも停止され
   ることを特徴とする特許請求の範囲第１項に記載の方法
   。
6. （６）反応生成物を水混和性溶媒で沈殿させることを特
   徴とする特許請求の範囲第１項に記載の方法。
7. （７）特許請求の範囲第１乃至６項に従って得られ、治
   療上有用な性質を備えた解重合化ヘパリン。
8. （８）特許請求の範囲第１乃至６項に記載の方法によっ
   て得られた解重合化ヘパリンを含有する薬学的組成物。