JPS63185395A - L−アスパルチル−l−フエニルアラニンメチルエステルの製法 - Google Patents
L−アスパルチル−l−フエニルアラニンメチルエステルの製法Info
- Publication number
- JPS63185395A JPS63185395A JP1591387A JP1591387A JPS63185395A JP S63185395 A JPS63185395 A JP S63185395A JP 1591387 A JP1591387 A JP 1591387A JP 1591387 A JP1591387 A JP 1591387A JP S63185395 A JPS63185395 A JP S63185395A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- genus
- methyl ester
- phenylalanine methyl
- ammonia
- fpm
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N aspartame Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)OC)CC1=CC=CC=C1 IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N 0.000 title claims abstract description 23
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 6
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 35
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 claims abstract description 17
- 241000589565 Flavobacterium Species 0.000 claims abstract description 5
- 241000192041 Micrococcus Species 0.000 claims abstract description 5
- 241000589634 Xanthomonas Species 0.000 claims abstract description 5
- 241000590020 Achromobacter Species 0.000 claims abstract description 4
- 241000588986 Alcaligenes Species 0.000 claims abstract description 4
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 claims abstract description 4
- 241000186063 Arthrobacter Species 0.000 claims abstract description 3
- 241000186216 Corynebacterium Species 0.000 claims abstract description 3
- 241000588722 Escherichia Species 0.000 claims abstract description 3
- 241000607720 Serratia Species 0.000 claims abstract description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 14
- YZQCXOFQZKCETR-UWVGGRQHSA-N Asp-Phe Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 YZQCXOFQZKCETR-UWVGGRQHSA-N 0.000 claims 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims 1
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 9
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 abstract description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 3
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 abstract description 2
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 abstract description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 abstract 3
- 238000007259 addition reaction Methods 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 11
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 10
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 7
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 4
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 4
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 4
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 3
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 241000588813 Alcaligenes faecalis Species 0.000 description 2
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000186249 Corynebacterium sp. Species 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 2
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 2
- 229940005347 alcaligenes faecalis Drugs 0.000 description 2
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 2
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 2
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N (S)-malic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 208000035404 Autolysis Diseases 0.000 description 1
- 206010057248 Cell death Diseases 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 101100286168 Hordeum vulgare IAM1 gene Proteins 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- -1 N-protected L-aspartic acid anhydride Chemical class 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 241000203720 Pimelobacter simplex Species 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 241000607715 Serratia marcescens Species 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N alpha-hydroxysuccinic acid Natural products OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 229960005261 aspartic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 150000001879 copper Chemical class 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 1
- 159000000014 iron salts Chemical class 0.000 description 1
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 239000001630 malic acid Substances 0.000 description 1
- 235000011090 malic acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000002696 manganese Chemical class 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- VSDUZFOSJDMAFZ-VIFPVBQESA-N methyl L-phenylalaninate Chemical compound COC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 VSDUZFOSJDMAFZ-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 229910017464 nitrogen compound Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002830 nitrogen compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 125000001477 organic nitrogen group Chemical group 0.000 description 1
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000001 potassium salts Chemical class 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000028043 self proteolysis Effects 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 150000003751 zinc Chemical class 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
(産業上の利用分野)
この発明はL−アスパルチル−L−フェニルアラニンメ
チルエステル(以下APMと略す)の製造法に関する。
チルエステル(以下APMと略す)の製造法に関する。
(従来技術と問題点)
APMは甘味剤として近年注目されているペプチドであ
る。APMの合成法としてはN−保護のL−アスパラギ
ン酸無水物とL−フェニルアラニンメチルエステル(以
下PMと略す)を縮合させてN−保護のAPMとし、そ
の後、保護基を除去する方法があり、また、酵素を利用
した合成法としてはN保護のし一アスパラギン酸とPM
に蛋白分解酵素を作用させてN−保護のAPMとし、そ
の後保護基を除去してAPMにする方法が知られている
が、両方法とも保護基の導入働脱離が必要で工程が複雑
となる。
る。APMの合成法としてはN−保護のL−アスパラギ
ン酸無水物とL−フェニルアラニンメチルエステル(以
下PMと略す)を縮合させてN−保護のAPMとし、そ
の後、保護基を除去する方法があり、また、酵素を利用
した合成法としてはN保護のし一アスパラギン酸とPM
に蛋白分解酵素を作用させてN−保護のAPMとし、そ
の後保護基を除去してAPMにする方法が知られている
が、両方法とも保護基の導入働脱離が必要で工程が複雑
となる。
一方、保護基を使用しないAPMの製造方法として、微
生物を利用した方法も知られているが、従来公知の方法
では収率が非常に低く、工業的なAPMの生産には必ず
しも適していない。
生物を利用した方法も知られているが、従来公知の方法
では収率が非常に低く、工業的なAPMの生産には必ず
しも適していない。
(問題点の解決)
本発明者らは、この様な従来のAPMの製造法に対し、
より効率の良い方法を見い出すべく研究した結果、N−
フマリル−L−フェニルアラニンメチルエステル(以下
FPMと略す)に成る種の微生物を作用させる事により
APMを効率よく生成することを見出した。尚、FPM
はフマル酸とPMから容易に合成しうる化合物である(
特願昭E10−187180等参照)。即ち本発明は、
アルカリゲネス属、アクロモバクタ−属、コリネバクテ
リウム属、エシェリヒア属、フラボバクテリウム属、ミ
クロコツカス属、キサントモナス属、シュードモナス属
、アースロバクター属、セラチア属に属し、FPMにア
ンモニアを付加してAPMを生成する能力を有する微生
物をFPMとアンモニンもしくはアンモニア供与体に作
用せしめてL−アスパルチル−L−フェニルアラニンメ
チルエステルを生成する事を特徴とするAPMの製造方
法である。
より効率の良い方法を見い出すべく研究した結果、N−
フマリル−L−フェニルアラニンメチルエステル(以下
FPMと略す)に成る種の微生物を作用させる事により
APMを効率よく生成することを見出した。尚、FPM
はフマル酸とPMから容易に合成しうる化合物である(
特願昭E10−187180等参照)。即ち本発明は、
アルカリゲネス属、アクロモバクタ−属、コリネバクテ
リウム属、エシェリヒア属、フラボバクテリウム属、ミ
クロコツカス属、キサントモナス属、シュードモナス属
、アースロバクター属、セラチア属に属し、FPMにア
ンモニアを付加してAPMを生成する能力を有する微生
物をFPMとアンモニンもしくはアンモニア供与体に作
用せしめてL−アスパルチル−L−フェニルアラニンメ
チルエステルを生成する事を特徴とするAPMの製造方
法である。
FPMにアンモニアを付加してAPMを生成する能力を
有する微生物の作用により、水性媒体中にてFPMにア
ンモニアを付加してAPMに変換せしめる方法は水性媒
体中にてFPMとアンモニアもしくはアンモニア供与体
と上記微生物の菌体、培養液あるいは菌体処理物とを接
触せしめれハ良い。本発明において用いるFPMにアン
モニアを付加してAPMに変換せしめる能力を有する微
生物としては、例えば、アルカリゲネスフェカリスAT
CC8?50、アクロモバクタ−プリカッラスIAM1
433 、コリネバクテリウムエスピーATCC212
51、エシェリヒアコリATCC11303、フラボバ
クテリウムニステロアロマティカムATCC:8091
、ミクロコツカスルテウスATC04698、キサント
モナスマルトフィラATC:C13637、シュードモ
ナスエルキノーサATCC7700、アースロバクター
シンプレックスATC0694B、セラチアマルセッセ
ンスATCC13880等が挙げられる。
有する微生物の作用により、水性媒体中にてFPMにア
ンモニアを付加してAPMに変換せしめる方法は水性媒
体中にてFPMとアンモニアもしくはアンモニア供与体
と上記微生物の菌体、培養液あるいは菌体処理物とを接
触せしめれハ良い。本発明において用いるFPMにアン
モニアを付加してAPMに変換せしめる能力を有する微
生物としては、例えば、アルカリゲネスフェカリスAT
CC8?50、アクロモバクタ−プリカッラスIAM1
433 、コリネバクテリウムエスピーATCC212
51、エシェリヒアコリATCC11303、フラボバ
クテリウムニステロアロマティカムATCC:8091
、ミクロコツカスルテウスATC04698、キサント
モナスマルトフィラATC:C13637、シュードモ
ナスエルキノーサATCC7700、アースロバクター
シンプレックスATC0694B、セラチアマルセッセ
ンスATCC13880等が挙げられる。
これら微生物を培養するための培地としては炭素源、窒
素源、有機栄養源、無機栄養源などを含む通常の栄養培
地が使用できる。炭素源としてはグルコース、シューク
ロース等の炭水化物ならびに酒石酸、フマル酸、マレイ
ン酸、リンゴ酸等の有機酸及びその塩類を、窒素源とし
ては通常の発酵に用いられる硫酸アンモニウム、塩化ア
ンモニウム、アンモニア等の無機窒素化合物及び尿素、
C,S、L、ペプトン、酵母エキス、肉エキスなどの有
機窒素源を用いることができる。培地濃度については特
に制限はないが、例えば、炭素源としては0.2〜10
賢t%、好ましくは0.5〜5 wt%、また、窒素源
としては0.1〜5 wt%、好ましくは0.2〜1.
Owt%程度が適当である。
素源、有機栄養源、無機栄養源などを含む通常の栄養培
地が使用できる。炭素源としてはグルコース、シューク
ロース等の炭水化物ならびに酒石酸、フマル酸、マレイ
ン酸、リンゴ酸等の有機酸及びその塩類を、窒素源とし
ては通常の発酵に用いられる硫酸アンモニウム、塩化ア
ンモニウム、アンモニア等の無機窒素化合物及び尿素、
C,S、L、ペプトン、酵母エキス、肉エキスなどの有
機窒素源を用いることができる。培地濃度については特
に制限はないが、例えば、炭素源としては0.2〜10
賢t%、好ましくは0.5〜5 wt%、また、窒素源
としては0.1〜5 wt%、好ましくは0.2〜1.
Owt%程度が適当である。
その他無機栄養源としては、例えば、カルシウム塩、マ
グネシウム塩、カリウム塩、リン酸塩、鉄塩、マンガン
塩、亜鉛塩、銅塩などが用いられる。
グネシウム塩、カリウム塩、リン酸塩、鉄塩、マンガン
塩、亜鉛塩、銅塩などが用いられる。
前記微生物の培養は好気的条件下にpH4ないし8、好
ましくは6〜8、温度25ないし40°Cの適当な範囲
に制御しつつ1ないし10日培養を行なえば望ましい結
果が得られる。菌体としては、培養終了後の培養液その
まま、培養液より分離された菌体、洗浄された菌体など
いずれも使用可能である。菌体処理物としては、乾燥菌
体、菌体破砕物、自己消化等による菌体消化物、菌体の
超音波処理物、その他の溶菌生成物又はこれらを固定化
したものなどを言う。
ましくは6〜8、温度25ないし40°Cの適当な範囲
に制御しつつ1ないし10日培養を行なえば望ましい結
果が得られる。菌体としては、培養終了後の培養液その
まま、培養液より分離された菌体、洗浄された菌体など
いずれも使用可能である。菌体処理物としては、乾燥菌
体、菌体破砕物、自己消化等による菌体消化物、菌体の
超音波処理物、その他の溶菌生成物又はこれらを固定化
したものなどを言う。
本発明は、上記微生物の菌体又はその処理物を水性媒体
中にてFPM、アンモニアと接触させることにより行う
ものであるがFPMの濃度としては0.05〜1.0モ
ル/立、好ましくは0.1〜0.5モル/見、またアン
モニアの濃度としては一般にFPMと等モル−4倍程度
、好ましくは、 0.1〜1.0モル/文程度が適当で
ある。尚、本発明は用いる微生物の培養途中で培地中に
FPM、アンモニアを添加して培養を継続し、両者と本
発明の微生物とを接触させることによっても実施できる
。
中にてFPM、アンモニアと接触させることにより行う
ものであるがFPMの濃度としては0.05〜1.0モ
ル/立、好ましくは0.1〜0.5モル/見、またアン
モニアの濃度としては一般にFPMと等モル−4倍程度
、好ましくは、 0.1〜1.0モル/文程度が適当で
ある。尚、本発明は用いる微生物の培養途中で培地中に
FPM、アンモニアを添加して培養を継続し、両者と本
発明の微生物とを接触させることによっても実施できる
。
実施例1)
フマル酸2%、KH2PO40,2%、MgSO40,
05%、MnSO40,001%、FeSO40,00
1%、Ca1l 20.05%、酵母エキス 1%、ペ
プトン1%をアンモニア水でpHを7.0に合わせた培
地を500 mJ1容フラスコに50 mJl入れ12
0°Cで15分間殺菌した。これにブイヨン寒天培地で
30°Cにて24時間培養した表2の微生物を1白金耳
液種し、30℃で20時間培養した。
05%、MnSO40,001%、FeSO40,00
1%、Ca1l 20.05%、酵母エキス 1%、ペ
プトン1%をアンモニア水でpHを7.0に合わせた培
地を500 mJ1容フラスコに50 mJl入れ12
0°Cで15分間殺菌した。これにブイヨン寒天培地で
30°Cにて24時間培養した表2の微生物を1白金耳
液種し、30℃で20時間培養した。
この培養液より菌体を遠心分離により採取し、培養液と
同量の生理食塩水で1回洗浄し、菌体を集めた。
同量の生理食塩水で1回洗浄し、菌体を集めた。
これら菌体な表1に示す反応液10 mfLに添加し、
37℃で20時間保持反応した。この時に生成したAP
Mをアミノ酸アナライザーで測定し、その結果を表2に
示した。
37℃で20時間保持反応した。この時に生成したAP
Mをアミノ酸アナライザーで測定し、その結果を表2に
示した。
表1
F P M O,25N
MgS04 10mM
NH4SO40,5M
O0IMリン酸バッファー pH7,5表2
アルカリゲネスフェカリスATCG8750 2.
3アクロモバクタ−プリカッラスIAM1433 1
.4コリネバクテリウムエスピーATCC212510
,8エシエリヒアコリATCC113034,3フラボ
バクテリウム ニステロアロマティカムATCC80913,1ミクロ
コツカスルテウスATCC48981、3キサントモナ
スマルトフイラATCC13fi37 3.8シユー
ドモナスエルギノーザATCC77002,6アースロ
バクター シンプレックスATCC8848G 、 8セラチアマ
ルセツセンスATCC138802,7実施例2) 実施例1と同様に培養し、洗浄したエシェリヒアコリA
TC011303を表1の反応液100 m文に投与し
、37°Cで24時間反応した。反応液をTLCに帯状
に5pot1.、nブタノール:酢酸:水=2:1:1
の展開溶媒で展開し生成APMの部分をかきとり、蒸留
水で抽出後の反応生成分を結晶化させ160mgの結晶
を得た。この結晶の赤外スペクトル、融点、比施光度を
測定した結果、生成物はAPM標品と完全に一致した。
3アクロモバクタ−プリカッラスIAM1433 1
.4コリネバクテリウムエスピーATCC212510
,8エシエリヒアコリATCC113034,3フラボ
バクテリウム ニステロアロマティカムATCC80913,1ミクロ
コツカスルテウスATCC48981、3キサントモナ
スマルトフイラATCC13fi37 3.8シユー
ドモナスエルギノーザATCC77002,6アースロ
バクター シンプレックスATCC8848G 、 8セラチアマ
ルセツセンスATCC138802,7実施例2) 実施例1と同様に培養し、洗浄したエシェリヒアコリA
TC011303を表1の反応液100 m文に投与し
、37°Cで24時間反応した。反応液をTLCに帯状
に5pot1.、nブタノール:酢酸:水=2:1:1
の展開溶媒で展開し生成APMの部分をかきとり、蒸留
水で抽出後の反応生成分を結晶化させ160mgの結晶
を得た。この結晶の赤外スペクトル、融点、比施光度を
測定した結果、生成物はAPM標品と完全に一致した。
実施例3)
実施例1と同様の培地を用いて30°Cで12時間培養
したキサントモナスマルトフィラATCC13837の
培養液中にFPMを100 mg / nuになるよう
無菌的に投入し、無菌的に培養液のpHを7.5にアン
モニア水で調整後、更に14時間培養を行なった。
したキサントモナスマルトフィラATCC13837の
培養液中にFPMを100 mg / nuになるよう
無菌的に投入し、無菌的に培養液のpHを7.5にアン
モニア水で調整後、更に14時間培養を行なった。
培養中は2時間おきにpHを7.5になるように無菌的
に調整した。この培養液中の生成物をアミノ酸アナライ
ザーで測定した結果、APMが3.2 mg/m文生成
していた。
に調整した。この培養液中の生成物をアミノ酸アナライ
ザーで測定した結果、APMが3.2 mg/m文生成
していた。
Claims (1)
- アルカリゲネス属、アクロモバクター属、コリネバクテ
リウム属、エシェリヒア属、フラボバクテリウム属、ミ
クロコッカス属、キサントモナス属、シュードモナス属
、アースロバクター属、セラチア属に属し、N−フマリ
ル−L−フェニルアラニンメチルエステルにアンモニア
を付加してL−アスパルチル−L−フェニルアラニンメ
チルエステルに変換する能力を有する微生物をN−フマ
リル−L−フェニルアラニンメチルエステルとアンモニ
アもしくはアンモニア供与体に作用せしめ、L−アスパ
ルチル−L−フェニルアラニンメチルエステルを生成さ
せることを特徴とするL−アスパルチル−L−フェニル
アラニンメチルエステルの製造方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP1591387A JPS63185395A (ja) | 1987-01-28 | 1987-01-28 | L−アスパルチル−l−フエニルアラニンメチルエステルの製法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP1591387A JPS63185395A (ja) | 1987-01-28 | 1987-01-28 | L−アスパルチル−l−フエニルアラニンメチルエステルの製法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS63185395A true JPS63185395A (ja) | 1988-07-30 |
Family
ID=11902019
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP1591387A Pending JPS63185395A (ja) | 1987-01-28 | 1987-01-28 | L−アスパルチル−l−フエニルアラニンメチルエステルの製法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPS63185395A (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1998020149A1 (fr) * | 1996-11-07 | 1998-05-14 | Ajinomoto Co., Inc. | PROCEDE DE PRODUCTION DE α-L-ASPARTYL-L-PHENYLALANINE OU DE α-L-ASPARTYL-L-PHENYLALANINATE METHYLIQUE |
-
1987
- 1987-01-28 JP JP1591387A patent/JPS63185395A/ja active Pending
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1998020149A1 (fr) * | 1996-11-07 | 1998-05-14 | Ajinomoto Co., Inc. | PROCEDE DE PRODUCTION DE α-L-ASPARTYL-L-PHENYLALANINE OU DE α-L-ASPARTYL-L-PHENYLALANINATE METHYLIQUE |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US4080259A (en) | Process of preparing L and D α-amino acids by enzyme treatment of DL-α-amino acid amide | |
EP0124313B1 (en) | Process for the production of l-aspartyl-l-phenylalanine methyl ester or l-aspartyl-l-phenylalanine | |
US3871963A (en) | Microbial protease and preparation thereof | |
EP0395124B1 (en) | Process for producing L-phenylalanine | |
US4506011A (en) | Process for preparation of aspartylphenylalanine alkyl esters | |
US5120652A (en) | Substantially purified n-acyl-l-proline acylase from comamonas testosteroni dsm 5416 and alcaligenes denitrificans dsm 5417 | |
US4006057A (en) | Method of producing L-cysteine and L-cystine | |
US3458400A (en) | Process for producing l-alanine | |
EP0154472B1 (en) | Process for the production of l-aspartyl-l-phenylalanine ester | |
US5219741A (en) | Method of making L-proline using an N-acyl-L-protine acylase | |
JPS63185395A (ja) | L−アスパルチル−l−フエニルアラニンメチルエステルの製法 | |
EP0455170B1 (en) | Process for culturing microorganisms of the genus Pseudomonas and process for producing L-alanine using said microorganisms | |
JPH05123178A (ja) | L−フエニルアラニンの製造法 | |
EP0102529B1 (en) | Process for preparation of aspartylphenylalanine alkyl esters | |
JPH0215196B2 (ja) | ||
KR950005424B1 (ko) | L-아스파르틸-l-페닐알라닌 및 그의 디케토피페라진의 제조 방법 | |
JPS60184392A (ja) | D−α−アミノ酸の製造方法 | |
JPS60156394A (ja) | L−2−アミノ−4−フエニル酪酸の製法 | |
JPS6135797A (ja) | L−アスパルチル−l−フエニルアラニン又はそのメチルエステルの製造法 | |
JPS60168395A (ja) | L−アスパラギン酸の製造法 | |
JPS6128398A (ja) | L−バリンの製造法 | |
JPS63146796A (ja) | L−ヒスチジンの製造法 | |
JPH0215195B2 (ja) | ||
JPH052314B2 (ja) | ||
JPH0378999B2 (ja) |