JPS63107939A - 抗貧血剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は、下記一般式（Ｉ） Ｈ，ＮＣＨＣＨ，ＣＨ，Ｃ０ＮＨＣＨＣＯＮＨＣＨ，Ｃ
０ＯＲ（Ｉ）ＣＯＯＨＣＨ，ＳＨ （式中Ｒはアルキル基を意味する。）で示されるグルタ
チオンモノ　アルキルエステル又はその塩を有効成分と
する抗貧血剤に関する。

本発明の薬剤は殊にヒトの溶血性貧血に基く症状の予防
、治療剤として有用である。

（従来の技術） 貧血とは、単位体積の血液中の赤血球数及び血色素置が
正常値以下に減少した状態をいい。

この種類としては、失血性貧血、寄生虫性貧血。

悪性貧血、溶血性貧血、再生不良性貧血等積々の病態が
知られている。

このうち、溶血性貧血とは、溶血即ち、赤血球膜が破壊
されヘモグロビンが血球外に流出するという赤血球の崩
壊が光道した結果生ずる症状である。

この溶血性貧血に起因する臨床症状としては。

たとえば、貧血、血清間接ビリルビン上昇、赤血球寿命
短縮、血清ハプトグロビン低下、糞尿中ウロビン体増加
、牌腫等の赤血球崩壊先進に基く症状、あるいは、網状
赤血球増加、多染性赤血球症、骨髄赤芽球系過形成、骨
のＸ線上の変化等赤血球産生能増加に基く症状等がある
。

これ−までこれらの症状の予防あるいは治療法として摘
牌、ステロイドホルモン療法、輸血。

造血剤投与あるいは、ビタミン剤投与等が行われてきた
。しかしながらこれらの療法は、効果が十分でなかった
り血漿輸血による溶血の誘発等の問題があり、未だ満足
すべき療法は確立されていない。

（発明が解決しようとする問題点） 斯かる事情に鑑み２本発明者等は、赤血球膜を安定化し
赤血球の崩壊を防止することにより赤血球機能を高め、
ひいては、溶血性貧血の防止あるいは、赤血球機能低下
に基く種々の病態を改善するという点について鋭意研究
した結果。

グルタチオンモノ　アルキルエステルが、この溶血性貧
血の予防、治療に極めて顕著な効果を有することを見出
し本発明を完成した。グルタチオンモノ　アルキルエス
テルは、グルタチオンのグリシンカルボキシル基に関す
るアルキルエステルでちって、グルタチオンの活性吸収
体として、従来、医薬の解毒、酸素およびその新陳代謝
物（たとえば過酸化物）、フリーラジカル。

外的化合物などからの細胞の保護作用等が報告されてい
るものである。

（発明の詳細な説明） 前記一般式（Ｉ）で示されるグルタチオンモノアルキル
エステルに於て「アルキル基」とは。

炭素数１乃至１０個の直鎖又は分枝状の炭素鎖を意味す
る。

従って、具体的には１例えばメチル基、エチル基、プロ
ピル基、イソプロピル基、ブチル基。

イソブチル基、　ｔｅｒｔ−ブチル基、ペンチル基。

イソペンチル基ｓ　ｔａｒｔ−ペンチル基、１−メチル
ブチル基、ヘキシル基、イソヘキシル基。

２−メｆ−ルペンチル基、１−エチルブチル基。

ヘプチル基、オクチル基、ノニル基等である。

この化合物（Ｉ）またはその塩は、たとえば。

以下の方法により製造することができる。

Ｈ，ＮＣＨＣＨ，Ｃ）（、Ｃ０−ＮＨＣＨＣＯ−ＮＨＣ
Ｈ，Ｃ０ＯＨ（ＩＩ）すなわち９本製造法は、グルタチ
オン（ｎ）と。

アルコール（ｍ）を酸（たとえば硫酸）存在下で反応さ
せ、グルタチオンモノ　アルキルエステルの塩を得たの
ち、所望により更に脱塩あるいは造塩処理することによ
り行われる。

本発明の化合物（Ｉ）は、好ましくは、遊離の形で投与
される。また、塩酸塩、硝酸塩、硫酸塩等の無機酸との
塩、あるいは、シーウ酸塩。

ｐ−）ルエンスルホン酸塩、マレイン酸ｉ等。

有機酸との塩等の形で投与することもできる。

塩の形で投与するときは、必要により脱塩処理するか、
あるいは炭素水素ナトリウムの如き生体に害を及ぼさな
い塩基を添加したのち投与される。

本発明のグルタチオンモノ　アルキルエステル（Ｉ）又
はその塩は９通常用いられる製剤用担体、賦形剤その他
の添加剤を用いて９錠剤、散剤、細粒剤、顆粒剤、カプ
セル剤、乳剤、液剤。

注射剤等に調製され、経口的または、非経口的に投与さ
れる。投与量は、投与ルート、患者の体重１年令、症状
等により適宜調整されるが。

通常成人１日当り、数１０乃至１１００ｆＯが適当であ
る。

尚１本発明の化合物（Ｉ）またはその塩の急性毒性（Ｌ
Ｄ、。）は、たとえばインプロピルエステルの場合、マ
ウス腹腔内注射で、５．３ｇ／ｋｇ程度である。

（発明の効果） 本発明の一般式（Ｉ）で示される化合物又は。

その塩を盲動成分とする製剤は、赤血球膜を安定化する
ことにより、遺伝性溶血性貧血、赤血球異常症、赤血球
酵素異常症、ヘモグロビン異常症、自己免疫性溶血性貧
血、ポルフィリン症。

物理化学的溶血性貧血、その他、赤血球の機能低下に基
く種々の病態の治療改善に有効である。

（実施例） 以上１本発明を説明したが、以下実施例により。

本発明を更に具体的に説明する。尚、参考例として実施
例で使用するグルタチオンモノ　インプロピルエステル
及ヒ、　　モノ　エチルエステルの製造例を示した。

参考例１．　グルタチオンモノ　イソプロピルエステル
の製造例 （１）　　イソプロピルアルコール８００ｍＺにグルタ
チオン１２４ｇを加え、攪拌下９５％硫酸４２ｍ１を滴
下する。発熱するが特に冷却の必要はない。

約１時間後に均一な溶液となり、はぼ２４時間後にグル
タチオンモノ　イソプロピルエステル（イソプロピルγ
−Ｌ−グルタミル−Ｌ−システイニルグリシネート）の
硫酸塩の結晶が析出し始めるが、さらに−夜攪拌を続け
る。結晶をＦ’取り、　インプロピルアルコール２００
ｍ１で洗滌し、減圧乾燥すると、硫酸塩８８．５ｇを得
る。

このものの一部を水−イソプロビルアルコール混液（混
合比１：５）で再結晶して精製し。

分析用試料とした。

融点　１４５〜１５０℃ 元素分析値（Ｃ＋５ＨｘｓＮｘＯａＳ−刑、　ＳＯ，−
）＜ＨｌＯとして）ＣＨＮ　　　　Ｓ 計算値（％）　　３８．３２　６．１８　１０．３１　
１１．８０実測値（％）３８．１１　６．３４　１０．
３２　１２．１０（２）　　（１）で得た未精製の硫酸
塩５０．０ｇを水１．２Ｌに溶解し、　ＨＰ−２０１，
５Ｚにチャージし、水で流出し１次いでメタノール−水
混液（混合比１：１）で流出し、目的物質を含むフラク
ション２．５乙を得る。このフラクションを濃縮後、凍
結乾ｍを行いグルタチオンモノ　イソプロピルエステル
３３．８ｇを得る。

（１）融点　１８４〜１８６℃ （１１）　　赤外吸収スペクトル（ＫＢｒ、　ｍ−’）
１７３０．１６３５，１５２５，１４００，１３７０゜
１２０５．１１００ （ｉｉｉＪ　　比旋光度（［αコ！ｉ）一３１．０　（
ｃ　＝　１．０．水） Ｇｖ）　　核磁気共鳴スペクトル（ＤＭＳＯ−ｄａ−δ
Ｐｐｍ）１．２０　（６Ｈ，ｄ、　Ｊ　＝６Ｈｚ　）１
．７２〜２．１６　　（２Ｈ，ｍ） ２．２０〜２．４０　　（２Ｈ，ｍ） ２．６４〜２．８６　　（２Ｈ，ｍ） ３．２０〜３．５６　　（１鴇ｍ） ３．８０　　　　　（２Ｈ，＠） ４．２０〜４．６０　　（ＩＨ，ｍ） ４．６８〜５．０８　　（１）Ｌ　ｍ）参考例２．　グ
ルタチオンモノ　エチルエステルの製造例 参考例１と同様にしてグルタチオンモノ　エチルエステ
ル（エチルγ−Ｌ−グルタミル−し一システイニルグリ
シネート）を得た。

（１）　　赤外線吸収スペクトル（Ｋ１３ｒ、　ｃｍ−
’　）１７３５．１６３５．１５２０，１４００．１２
００（１１）比旋光度（［αコＨ） −２７，２（ｃ　＝　１．０．水） （ｉｒＯ核磁気共鳴スペクトル（ＤＭＳＯ−ｄ、、６９
９ｍ　）１．１６　　　　　（３鴇ｔ、Ｊ＝７）１．７
０〜２．０４　　（２Ｈ，ｍ） ２．１６〜２．４０　　（２Ｈ，ｍ） ２．６０〜２．８２　　（２Ｈ，ｍ） ３．１６〜３．４０　　（ＩＨ，ｍ） ３．８０　　　　　（２乳Ｓ） ４．０４　　　　　（２氏’ｂ　Ｊ＝７）４．２０〜４
．４８　　（１ルｍ） 実施例１゜ （注射剤の処方例） グルタチオンモノ　イソプロピルエステル硫酸塩を４５
　ｍｇ　／　ｍｌの濃度で精製水に懸濁させ、５℃以下
に冷却する。エステル硫酸塩に対し、約２倍モルの炭酸
水素ナトリウムを加えて、エステル硫酸塩を溶解し、溶
液をｐＨ４に調整したのち、濃度を４０■／　ｍＡとし
、無菌ｆ遇する。バイアル瓶に各２５　ｒｎｌの溶液を
入れ凍結乾燥する。

実施例２．（溶血抑制作用） （測定方法） 雄のスプラッグードウーリーラット（７−８週令）をエ
ーテルで麻酔しヘパリン処理した注射筒で工大静脈より
採血する。常法に従って赤血球を単離しリン酸緩衝生理
食塩水で洗浄後実験に用いる。

単離赤血球を最終３．３　Ｘ　１０’　ｃｅｌｌ　／ｌ
ｎｌの濃度になるようリン酸緩衝生理食塩水に懸濁し、
溶血起因物質（水またはりゾレシチン）を添加して２５
℃。

１５分間インキュベートする。被験物質（グルタチオン
類）の効果を検討する場合は１反応に先立ち各濃度のグ
ルタチオン類と赤血球を２５℃、３０分間プレインキー
ベートする。溶血の程度は２反応後３、ＯＯＯＸｇ、　
５分間遠心して赤血球を除いた上清の４１２ｎｍの吸光
度を測定することにより赤血球からのヘモグロビンの遊
離を算出する。

（結果） １）水を添加したときの溶血を抑制する効果赤血球のリ
ン酸緩衝生理食塩水に水を加えて４０％（ｖ／ｖ　）　
　としたときの溶血を抑制する作用を、グルタチオン、
グルタチオンモノ　エチルエステルおよびグルタチオン
モノ　イソプロピルエステルについて、各種の濃度で測
定した結果を第１図に示す。

２）　リゾレシチンを添加したときの溶血を抑制する効
果 赤血球のリン酸緩衝生理食塩水に２．６μｇ　／ｒｎｌ
のリゾレシチンを添加したときの溶血を抑制する作用を
グルタチオンおよび、グルタチオン　・モノイソプロピ
ルエステルについて各種濃度で測定した結果を第２図に
示す。

実施例３（ヒト赤血球溶血抑制作用） （測定方法） 男性の健常人よりクエン酸ナトリウム処理した注射筒で
採血し、常法に従って赤血球を単離する。単離した赤血
球はリン酸緩衝生理食塩水で洗浄後、実験に用いる。

各人の単離赤血球を最終１０８ｅｅｌ　ｌ／ｍｌの濃度
になるようリン酸緩衝生理食塩水に懸濁し、溶血起因物
質である水（４６−５０％（ｖ／ｖ））またはリゾレシ
チン（３１ｇ／ｍｌ）を添加して２５℃、１５分間イン
キュベートするか、直径約１１１のガラスピーズと共に
１時間振盪する（１６０回／分）ことにより溶血を惹起
する。被験物質（グルタチオン類）の効果を検討する場
合は、反応に先立ち各濃度のグルタチオン類と赤血球を
２５℃、３０分間ブレインキュベートする。溶血の程度
は、反応後３０００　Ｘｇｓ　Ｓ分間遠心して赤血球を
除いた上清の４１２ｎｍの吸光度を測定することにより
赤血球からのヘモグロビンの遊離を算出する。

グルタチオン類の効果は、濃度−ヘモグロビン遊離抑制
曲線より赤血球からのヘモグロビンの遊離を・５０％抑
制する濃度（ＩＣｓｏ）を求めて比較する。

（結果） 第１表に、グルタチオン、グルタチオン　モノ　エチル
エステルおよびグルタチオン　モノ　イソプロピルエス
テルの、水およびリゾレシチンを添加した時の溶血、お
よびガラスピーズでの機械的な溶血に対するＩＣ５０値
を示す。

第１表　ヒト赤血球の溶血に対する保護作用グルタチオ
ン類　　　　　　　　溶血の種類（ＩＣ６ｏ；ｍＭ）　
　　　　水（低張）　リゾレシチン　機械的グルタチオ
ン　　　　　＞１　　　　　＞１　　　　　＞１モノ　
エチルエステル　　１ モノ　イソプロピルエ　　０．０１　　０．０３　　０
．１ステル

【図面の簡単な説明】

第１図及び第２図は、赤血球のリン酸緩衝生理食塩水に
夫々水（第１図）およびリゾレシチン（第２図）を添加
したときに生ずる溶血を抑制する効果を、グルタチオン
およびグルタチオンモノアルキルエステルについて測定
した結果を示す。各図縦軸の値は、被験物質の抑制効果
を対照（未添加）に対する百分率で表わしたものである
。

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. （１）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中Ｒはアルキル基を意味する。） で示されるグルタチオン　モノ　アルキルエステル又は
   その塩を有効成分とする抗貧血剤
2. （２）Ｒが低級アルキル基である特許請求の範囲第（１
   ）項記載の抗貧血剤
3. （３）Ｒがイソプロピル基である特許請求の範囲第（２
   ）項記載の抗貧血剤
4. （４）貧血が溶血性貧血である特許請求の範囲第（１）
   項乃至第（３）項のいずれか１項記載の抗貧血剤