JPS62298573A - 酸化還元反応指示薬としてのトリアリ−ル−及びトリヘタリルメタン誘導体及びそれらの使用 - Google Patents

酸化還元反応指示薬としてのトリアリ−ル−及びトリヘタリルメタン誘導体及びそれらの使用

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JPS62298573A
JPS62298573A JP62142393A JP14239387A JPS62298573A JP S62298573 A JPS62298573 A JP S62298573A JP 62142393 A JP62142393 A JP 62142393A JP 14239387 A JP14239387 A JP 14239387A JP S62298573 A JPS62298573 A JP S62298573A
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ホルガー・ハイデンライヒ
ゲルハルト・ボルフルム
クラウス・ベーリング
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Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ３、発明の詳細な説明 本発明は、酸化還元反応指示薬としてトリアリール−及
びトリヘタリルメタン（ｔｒｉｈｅｔａｒｙｌｍｅｔｈ
ａｎｅ）誘導体を含む、酸化還元反応を検出するための
薬剤に関する。これらの酸化還元反応指示薬は、特に過
酸化酵素または過酸化活性物質の補助の下で、過酸化水
素の検出のために非常に効果的に使用することができる
。
さらに、これらの酸化還元反応指示薬は、他の過酸化物
も酸化剤として使用される場合に、過酸化酵素または過
酸化活性化合物の検出のために適している。
過酸化水素は、適当な酸化酵素、例えばグルコース酸化
酵素、コレステロール酸化酵素、ウリカーゼ、グリセロ
ール酸化酵素、リン酸グリセロール酸化酵素、ガラクト
ース酸化酵素、ピルビン酸エステル（ｐｙｒｕｖａｔｅ
　＞酸化酵素またはサルコシン（ｓａｒｃｏｓｉｎｅ）
酸化酵素によって、物質、例えばグルコース、コレステ
ロール、尿酸、グリセロール、リン酸グリ七ロール、ガ
ラクトース、ビルと・ン酸エステルまたはサルコシンを
、酵素で触媒酸化する間に生成する反応生成物である。
述べられた物質は、診断（ｃｌｉｎｉｃａｌ）　／化学
分析において役割を演じる分析物質のグループに属する
。酸化酵素反応の間に生成する過酸化水素は、ポーラロ
グラフイーによって、滴定によって、または電位差法に
よって検出することができる。過酸化水素の比色による
決定は、過酸ｒヒ酵素、カタラーゼまたはヘモグロビン
のような過酸化水素を転換する酵素の発見によってかな
り重要さを増してきた。
過酸化酵素、そしてまた過酸化活性物質（例えばヘモグ
ロビン及びメトヘモグロビン）は、グアヤコール、ジア
ニシジン塩酸塩またはＡＢＴＳのような指示薬の着色化
合物への過酸化水素依存酸化の触媒となる。過酸化水素
のための最も良く知られた検出反応の一つは、いわゆる
”トリンダ−（Ｔｒｉｎｄｅｒ）反応パである（トリン
ダー、ピー。
アン、タリン、バイオケム、　　［Ｔｒｉｎｄｅｒ、　
Ｐ　。
Ａｎｎ、　Ｃｌ１ｎ、　Ｂｉｏｃｈｅｍ、］　、６巻（
Ｉ９６９）、２４−２７頁）、４−アミノ−アンチピリ
ンは、過酸化酵素の存在下で過酸化水素によって酸化さ
れる。酸化生成物は、フェノールまたはフェノール誘導
体とカップリング可能であり、通常赤いキノンイミン染
料が生成し、その濃度は光度測定によって決定される。
本発明は、一般式（Ｉ） 式中、 Ａ、Ｂ及びＤは、お互いに独立に、随時置換された芳香
族よた”は複素環式芳香族化合物のラジカルを表し、 Ｇは、Ｏ，ＣＨ２またはＳを表し、 ｍは、数Ｏまたは１を表し、そして、 Ｘは、０、 及び−ＮＲ’−ＮＲ２−を表し、 ここにおいて、 芳香族化合物は、アリールまたはナフチルラジカルであ
り、そして複素環式芳香族化合物は、ピリジル、イミダ
ゾリル、ピラジニル及びインドリルラジカルであり、こ
れらのラジカルは、それら自身、染料化学において一般
的である置換基を有していても良く、 Ｒ′及びＲ２は、お互いに独立に、水素、染料化学にお
いて一般的である置換基によって置換されていても良い
アルキル、シクロアルキル、アリールまたはアラルキル
を表し、あるいは、　Ｎ　Ｒ’　Ｒ２は、染料化学にお
いて一般的である置換基によって置換されていても良い
ピロリジン、ピラゾリン、ピペリジン、ピペラジンまた
はモルホリンラジカルを表す、 の化合物を酸化還元反応指示薬として含む、酸化還元反
応を検出するための薬剤に関する。
染料化学において一般的である置換基とは、例えばハロ
ゲン、ヒドロキシル、アルコキシ、アリールオキシ、ア
ラルコキシ、アリール、シクロアルキル、ヘタリル、ア
ルキルメルカプト、アリールメルカブト、アルキルスル
ホニル、シアノ、アルキルカルボニル、アルキルカルボ
ニルオキシ、ニトロ、アシルアミノ、アルキルスルホン
酸、アリールスルホン酸、アルキルカルボン酸、アラル
キルカルボン酸、それら自身が再びハロゲン、シアノ、
ヒドロキシル、スルホン酸、カルボン酸または置換され
たアミノまたはそれらの置換基が環化されたアミノ基に
よって置換されていてもよい１または２のアルキル、ア
リールまたはアラルキル基によって置換されていてもよ
いアミノである。
アルキルは、好ましくはＣｌ−Ｃ２２−アルキル、特に
Ｃ，−Ｃ，□−アルキル、そして特に好ましくはＣｌ−
Ｃｓ−アルキルを表し、そしてアルケニルは、好ましく
はＣ２−Ｃ５−アルケニルを表す。
ハロゲンは、特に、フッ素、塩素及び臭素を意味すると
される。
特に、シクロアルキルは、シクロペンチル及びシクロヘ
キシルを意味するとされ、アリールは、フェニル及びナ
フチルを意味するとされ、アラルキルは、ベンジル及び
フェネチルを意味するどされ、そしてベンジルは、ピリ
ジル、ピリミジル、ピラジニル、トリアジニル、イミダ
ゾリル、オキサシリルまたはチアゾリルを意味するとさ
れる。
アシルは、好ましくは、ＣｌないしＣ４−アルキルカル
ボニル及び−スルホニル及びベンゾイルである。
−ｍ式（Ｉ）の化合物は、例えばコピー紙または熱印刷
紙のための発色体（ｃｏｌｏｕｒ　ｆｏｒｍｅｒｓ）と
して広く知られている（ＥＰ−Ａ　　１０８，３８２、
ＥＰ−Ａ　　１４１，９６２）。コピー紙の場合には、
発色体は、カプセル化された形で存在する。書く間に、
カプセルは破れ、そして自由になった発色体による発色
が、酸で改変されたアルミナとの接触によって起きる。
驚くべきことに、一般式（Ｉ）の化合物はまた、酸化還
元反応指示薬としても非常に良く適していることがここ
に決定された。これらの化合物は、過酸化水素の定性的
または定量的検出のための、あるいはまた過酸化酵素ま
たは過酸化活性物質のため検出の指示薬として特に十分
に適している。
過酸化水素または他の過酸化物（例えばクメニルハイド
ロパーオキサイド、ストロンチウムパーオキサイド、２
．５−ジメチルヘキサン２，５−ジヒドロパーオキサイ
ドまたはジイソプロピルベンゾイルハイドロバーオキサ
イド）による指示薬の酸化は、過酸化酵素または過酸化
活性物質の触媒作用によって起こることができる。適当
な過酸化酵素は、セイヨウワサビ（ｈｏｒｓｅｒａｃｌ
ｉｓｈ　）またはジャガイモからのもの、あるいは、微
生物を源とするものである。過酸化活性物質は、過酸化
水素または他の過酸化物から指示薬への酸化還元反応当
量（ｅｑｕｉｖａｌｅｎｔｓ）の移行を促進するような
物質、例えばヘモグロビン、メトヘモグロビンまたはミ
オグロビンを意味するとされる。さらに、一般式（Ｉ）
の化合物は、酸化剤、例えば過硫酸塩、過酢酸塩、クロ
ラミン１゛、またはカリウムへキサシアノフェレートの
ようなシアノフェレート錯体を決定するために適してい
る。
一般式（Ｉ）の化合物は、適当な酸化酵素、例えばグル
コース酸化酵素、コレステロール酸化酵素、ウリカーゼ
、グリセロール酸化酵素、リン酸グリセロール酸化酵素
、ガラクトース酸化酵素、ピルビン酸エステル酸化酵素
またはサルコシン酸化酵素によって、酸素の存在下で過
酸化水素を生成して酸化される物質−１例えばグルコー
ス、コレステロール、尿酸、グリセロール、リン酸グリ
セロール、ガラクトース、ピルビン酸エステルまたはサ
ルコシンのための試験薬剤中で特にうまく用いることが
できる。生成される過酸化水素は、一般式（Ｉ）の化合
物を用いて検出される。
既に議論したように、−ｉ式＜１）の化合物は、過酸化
酵素または過酸化活性物質の検出にも適している。ここ
で述べられるべき試験システムは、肉眼では見えない血
液の検出または過酸化酵素−同位体置換された（ｐｅｒ
ｏｘｉｃｌａｓｅ−ｌａｂｅｌｌｅｄ）免疫試験である
。
本発明の文脈においては、試験薬剤または試験システム
は、例えば、セル（ｃｅｌｌ）中で測定可能なものを意
味するとされる。試験薬剤は、−ｉ式（Ｉ）の酸化還元
反応指示薬の外に、酵素、基質（５ｕｂｓｔｒａｔｅｓ
　）　、補酵素、エフェクター、抗原、抗体などのよう
な、特定のパラメーターの決定のために必要なすべての
試薬を含む。加えて、これらの試験薬剤は、非反応物質
、例えばバッファー、湿潤剤及び安定剤を含むこともで
きる。溶液として、粉末の混合物として、錠剤として、
または凍結乾燥物（Ｉｙｏｐｈｙｌｉｓａｔｅ　）とし
て存在する試薬配合物は、述べられた試薬及び物質から
調製される。
試薬配合物（もし既に溶液として存在していないならば
）を、水または他の適当な溶媒中に取り、そして試薬溶
液にする。もし試薬配合物が個々の成分からなるのであ
れば、これらをお互いに混合すべきである。サンプル（
例えば基質溶液、酵素溶液、血液、血清、血漿または尿
）を試薬混合物の一部と混合した後で、生成する色を光
度計で測定し、そして各々の濃度または基質の濃度を、
モル吸光係数及び加えられた試薬またはサンプルの量に
よって計算する。動的及び終点測定の両方が可能である
。
一般式（Ｉ）の化合物は、過酸化酵素または過酸化活性
物質、特定のパラメーターの決定のために必要な試薬ま
たは他の酵素、バッファー系、もし逍当ならば湿潤剤及
び活性剤、そしてまた他の助剤と一緒に、吸収性の試薬
支持体、例えば紙、シート（ｆｌｅｅｃｅｓ）などに浸
み込ませても良い。
この目的のために、−またはそれ以上の含浸溶液が、試
薬または助剤がいかに溶解するかに応じて、水または有
機または混合溶液の形で調製される。
吸収性または膨張性支持体、好ましくはｒ紙または吸収
性ガラスまたはプラスチックシートにこれらの溶液を含
浸させまたはスプレーする。引き続いて、支持体を乾燥
する。このようにして調製された試薬支持体は、液体の
く例えば、血液、尿または唾液のような体液中の、ある
いは、フルーツジュース、ミルクまたはその他のものな
どのような食物中の）内容を直接決定するための速い診
断薬剤として使用できる。この間、液体を直接試薬支持
体に付けるか、または後者を液体中に短時間浸ける。生
成する色を比較色に割り当てることによって、半定量的
決定が可能である。定量的な評価は、レミッション（ｒ
ｅｍｉｓｓｉｏｎ）光度測定によって実施することがで
きる。この際、吸収最大値をスペクトルの長波長領域に
有する染料が、通常、式（Ｉ）の化合物から発現される
という事実は、有利な効果を有する。そこで、このよう
な染料の測定のための光源として光ダイオード（ｌｉｇ
ｈｔｄｉｏｄｅｓ）を使用することができる。
−１ｆｆ１式（Ｉ）の化合物を、キャスティング（ｃａ
ｓｔｉｎｇ）溶液から調製された支持体の母体中に導入
することも可能である。ここで述べられるべき例は、セ
ルロース、セルロース誘導体、ゼラチン、ゼラチン誘導
体、あるいはまたポリウレタン及びアクリルアミドのよ
うなプラスチックである。ここで、一般式（Ｉ）の化合
物及び、もし適当ならば、他の必要な試薬を直接キャス
ティング溶液に添加することが有利であり、かくして支
持体と試薬からなる試験手段を一段で製造することが可
能になる。
光度計でセル中で上述の基質または酵素がそれによって
決定できる試薬溶液は、水またはバッファーまたは血清
を用いて吸収性の支持体から上述の試薬を抽出すること
によって調製される。
述べられた試験薬剤のための適当なバッファーは、アル
カリ金属またはアンモニウム対イオンを持つリン酸塩、
クエン酸塩、ホウ酸塩またはＧＯＯＤバッファーである
。しかしながら、他のシステムも同様に実用的である。
６ないし１０、特に６．５ないし７．５のｐＨを目標と
すべきである。
湿潤剤は、特に、本発明による両性イオン化合物とイオ
ン的に干渉する陰イオン及び陽イオン湿潤剤である。し
かしながら、酵素を活性化する非イオン性の湿潤剤も同
様に実用的である。ナトリウムラウリルスルフェート、
ジ−オクチルナトリウムスルホサクシネート及びアルキ
ルアリールポリエーテルアルコールが好ましい。
特定の酵素反応のための公知のエフェクターがエフェク
ターとして使用されるべきである。
他の色原体（ｃｈｒｏｍｏｇｅｎｓ　）での対応する試
験において公知である一般的な濃厚剤（ｔｔｌｉｃｋｎ
ｅｒｓ　）、可溶剤、乳化剤、光学的光輝剤（ｏｐｔｉ
ｃａｌ　ｂｒｉｇｈｔｎｅｒｓ）、対照剤（ｃｏｎｔｒ
ａｓｔｉｎｇ　ａｇｅｎｔｓ）などが、他の助剤として
適当である。
式（Ｉ）の化合物の中で、式（ＩＩ） 式中、 Ａは、随時置換されたフェニル、ピリジルまたはイミダ
ゾリルを表し、 Ｔは、水素、ヒドロキシル、アルキル、アリール、アル
コキシ、フェノキシ、５Ｏ３Ｈ１−ＣＯＯＨまたは Ｎ を表し、 ここにおいて、Ｒ１及びＲ２は、上述の意味を有し、そ
して、 Ｘ、Ｇ、Ｄ及びｍは、上述の意味を有する、の化合物が
好ましい。
式（ＩＩＩ） 式中、 Ｗは、水素、−Ｎ　　＝アルキル、アルコキシまたはハ
ロゲンを表し、 Ｔは、水素、アルキル、アルコキシまたはＩ Ｎ を表し、 χは、 を表し、 Ｄは、フェニル、ナフチルまたはインドリルラジカルを
表し、そして、 Ｇ、Ｒ’、Ｒ”及びｍは、上述の意味を有する、の化合
物は、特に興味あるものである。
非常に特に好ましい化合物は、式（ＩＶ）式中、 Ｘは、 を表し、 Ｗは、水素または Ｎ を表し、 Ｔは、水素、ＣＩ−Ｃ４−アルキル、Ｃｌ−Ｃ４−アル
コキシまたは Ｒ’ Ｎ を表し、 Ｇは、Ｏを表し、 ｍは、０または１を表し、そして、 Ｙ及びＺは、水素または融合したベンゾ環を表し、そし
て、 Ｒ１及びＲ２は、お互いに独立に、水素を表すか、ハロ
ゲン、ヒドロキシル、シアノ、Ｃ，−Ｃ５−アルコキシ
カルボニル、−３ｏ、Ｈまたは−ＣＯＯＨによって置換
されていても良いＣ，−Ｃ，−アルキルを表すか、ある
いは、アリールまたはアラルキルを表し、あるいは、Ｎ
Ｒ’Ｒ２は、ピロリジン、ピペリジンまたはモルポリン
ラジカルを表す、 の化合物である。
非常に特に好ましい化合物は、式（Ｖ）式中、 Ｗ、Ｒ１，Ｒ２、Ｙ、Ｚ及びｍは、上述の意味を有する
、 の化合物である。
述べられた化合物の製造方法は、ＥＰ−Ａ　　１４１．
９６２及びＥＰ−Ａ　　１ｏｓ、３８２中に記述されて
いる。
以下の実施例によって本発明をさらに詳杷に述べ、そし
て説明する。
夫１隨−二 ４．１５ｇの３．３−ビス−（４−ジメチルアミノフェ
ニル）−６−シメチルアミノーフタリドを、１０ｍ１の
ヒドラジン水和物とともに２０ｍ１のエタノール中で還
流する。３時間後に、反応物を１００ｍ１の氷水中に注
ぎ、そして吸引濾過する。下記の構造の粗生成物は２６
３℃で溶ける。
ＣＨｌ Ｋ１隨−１ ４，１５ｇの３，３−ビス−（４−ジメチルアミノフェ
ニル）−６−シメチルアミノーフタリドを、２０ｍ１の
ジェタノールアミンとともに１５０℃で２時間加熱する
。溶液を冷却しそして氷水中に注ぎ、そして黄色がかっ
た沈澱物を吸引炉別する。エタノールから再結晶後、下
記の構造の物質は２５２℃で溶ける。
ＣＨ３ＣＨｆｆ ＣＨ） 酸化生成物の色：黄色−オレンジ色 丸Ｉ鮭−１ ３１，８ｇの３．３−ビス−（４−ヒドロキシフェニル
）−１（３Ｈ）−イソベンゾフラノンを、３０ｍ１のヒ
ドラジン水和物とともに１５０ｍ１のエタノール中で還
流する。５時間後、混合物を氷上に注ぎそして酢酸を用
いて酸性にする。沈澱物を、吸引ｒ別後、エタノールか
ら再結晶する。物質は２７９℃で溶け、下式を有する。
酸化生成物の色ニオレンジ色 Ｊ拒例　４ １５．７ｇの２−（２−しドロキシ−４−ジエチルアミ
ノ）ベンゾイル安息香酸を、８ないし１２℃の温度で６
２ｍ１の硫酸−水和物中に導入する。
引き続いて、９．９５ｇの４−メトキシ−ジフェニルア
ミンを添加し、そして混合物を室温で２日間撹拌する。
次に、反応溶液を氷上に注ぎそして水酸化ナトリウム溶
液を用いてｐＨ１１に調節し、３ＱＯｍｌのトルエンの
層を添加し、そして混合物を３時間還流する。引き続い
て、トルエン相を分離しそして蒸発によって濃縮する。
活性炭で処理後、融点１９４℃を有する下記の物質がト
ルエンから結晶する。
酸化生成物の色：灰色−スミレ色 え１昨−１ ４，６２ｇの３−ジエチルアミノ−７−アニリツフルオ
ランを、６ｍｌのヒドラジン水和物とともに２５ｍ１の
エチルグリコール中で１時間還流する。
冷却後、氷水を部層し、そして沈澱物を吸引炉別する。
下記の構造の化合物は１４６℃で溶ける。
Ｃ２Ｈｓ 以下に述べる化合物が、同様にして製造される。
実施例　６　＊　オレンジ色 実施例　７　＊　オレンジ色 実施例　８　＊黄　色 ＣＨ，ＣＨ。
実施例　９　＊黄色−オレンジ色 実施例　１０　＊黄色−オレンジ色 ＣＨｘ　　　　ＣＨｚ 実施例　１１　＊赤−オレンジ色 実施例　１２　＊　オレンジ色 実施例　１３　＊赤−オレンジ色 Ｈ 実施例　１５　　＊黄色 ／＼　　　Ｏ ＣＨ３ＣＨ。
実施例　１６　　＊　オレンジ色 実施例　１７　　＊　オレンジ色 ＣＨ３ ＣＨ）　　ＣＨａ 実施例　１８　　＊　黄色 実施例　１９　　＊　オレンジ色 実施例　２０　　＊　赤 実施例　２１　　＊　赤−茶色 実施例　２３　　＊　青−緑 実施例　２５　　＊　赤 Ｃ、Ｈｓ 実施例　２６　　＊　灰色−緑 実施例　２７　　＊　灰色−青 実施例　２８　　＊　灰色−スミレ色 実施例　２９　　＊　青−灰色 実施例　３１　　＊　灰色−緑 実施例　３３　　＊　赤 実施例　３５　　＊　スミレ色−赤 実施例　３６　　＊　灰色−青 実施例　３７　　＊　赤 実施例　３９　　＊　ピンク 実施例１の化合物をＨ２Ｏ２／過酸化酵素試験システム
中で指示薬として試験するために、この化合物をＤＭＦ
中に溶かして５ｍＭの濃度とした。
次に、この溶液をバッファー（クエン酸塩０．１Ｍ／１
、ｐＨ４，５５、ＴＨＡＭ　　Ｏ，ＩＭ／１．ｐ）（６
，５７及びｐＨ７，８）と１＋１で混合し、そして５μ
ｌの過酸化酵素（５００ｋＵ／ｌ）を、この溶液０．５
ｍｌに添加した。
１０μｌのＨ２Ｏ２（３，４ｍＭ／１４Ｅ２．。＝０．
１６８）の添加及び５分間の培養（Ｉｎｃｕｂａｔｉｏ
ｎ＞時間の後で、吸光度を測定した。図１に示すように
、吸収の最大値はｐＨに依存して移動する。
曲線１はｐＨ６，５７での吸収スペクトルを示し、そし
て曲線２はｐＨ４，６での吸引スペクトルを示す。
表１は、様々の波長及びｐＨで測定された吸光度を示す
。
表１ ４．５５　　黄色　　　　　　　　４１５　　　１．７
０７６．５７　　黄色−オレンジ色　４９０　　　１．
３５１７．８０　　黄色−オレンジ色　４９０　　　１
．８０３機能（ｆｕｎｃｔ　ｉｏｎ　）と直線性を試験
するために、５μｌの過酸化酵素（５００ｋＵ／ｌ）及
び５μｌの様々な濃度のＨ２０２を、ＴＨＡＭバッファ
ーｐＨ７，８での上記溶液０．５ｍｌに添加した。
表２は、′トリンダー（Ｔｒｉｎｄｅｒ）カラーシステ
ム”４−アミノアンチピリン／ジクロロ−２−ヒドロキ
シベンゼンスルホン酸と比較した結果を示す。
表３は、アスコルビン酸による干渉のための試験の結果
を示す、この試験のために、５μｌの８２０２溶液（サ
ンプル中のＨ２０２濃度−Ｅ２４゜−〇、２４２）及び
さらに５μｍの１ｍＭ／ｌのアスコルビン酸溶液を上記
のバッチ（ｂａｔｃｈ　）に添加し、そして結果として
得られる吸光度を測定する。
ベト アスコルビン酸の存在下で測定された値は、アスコルビ
ン酸の非存在下で測定された値よりも平均で約１．１％
上である。従ってこの試験は、アスコルビン酸によって
影響されない。
実】ぼｌ 実施例５からの化合物からの試験 バッチ： １．０００μｌのバッファー（クエン酸塩０．１Ｍ／ｌ
　　ｐＨ５、ＴＨＡＭ　　Ｏ，ＩＭ　／　ｌ　　ｐ　Ｈ
７及びｐＨ９） ９００μｌのＤＭＦ １００μｌのＤＭＦ中２．０２　ｍ　Ｍの実施例５の化
合物 ２０μｌの過酸化酵素（Ｉ，０ＯＯｋＵ／１）２０μｍ
の１（２０□溶液 測定された′吸収最大値は７２０ｎｍにある。様々なｐ
　Ｈ値での吸光度の差を表４に表示する。サンプルの濃
度は、Ｈ２０２に関して５　ｍ　Ｍ　／　Ｉであった。
表４ ５分後のΔＥ７２゜ ｐＨ５０，１１０ ｐ）（７０，１，８５ ｐＨ９０，０４０ ２０分以内の吸収度の減少（色の安定性）番よ０．８％
である。アスコルビン酸Ｇこよる干渉を実施例４０と同
様にして試験した。その結果を表５に示す。
ｊ　　　　　　　　　　　　　　　　　　ｐアスコルビ
ン酸の存在下では、測定値は、平均で約５，７％高い。
表５は、直線性及び機能試験を示す。様々な濃度の）（
２０□溶液を上記の試験バッチに添加し、そして５分後
に吸光度を測定した。
０ＯＣｆ＋　　　トー い　　ＯＸ　　　［Ｆ］　　ω 囚ｎＣト Ｓ　　へ　　（’２　　　Ｃ’１ ０い■− ト　　Ｏト　　ト ◇１マ［Ｆ］さ くト）へへＮ 国　　囚　　−〇 Ｏｎへ寸 ０ＧＧＯ ＮへＧの ０ＯＯ ００へＯの −ｎ　　マ　　リ 守りぐぐ ｏＯＯ ＯＯＣＬ　００　Ｃ１ ωｎ寸ｎ −　　■　　０　　（ト） ト　　−　　［Ｆ］　　− ｎ寸すい ０ｏ０
【図面の簡単な説明】
第１図は、本発明の実施例１の化合物の吸光度曲線を示
している、曲線１はｐＨ６，５７での吸収スペクトルで
あり、そして曲線２はｐＨ４，６での吸収スペクトルで
ある。

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 １、一般式（ I ） ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） 式中、 環Ａ、Ｂ及びＤは、互いに独立に、随時 置換されていてもよい芳香族または複素環 式芳香族の基を表し、 Ｇは、Ｏ、ＣＨ＿２またはＳを表し、 ｍは、数Ｏまたは１を表し、そして、 Ｘは、Ｏ、 ▲数式、化学式、表等があります▼ 及び−ＮＲ＾１−ＮＲ＾２−を表し、 ここにおいて、 芳香族は、アリールまたはナフチル基で あり、複素環式芳香族は、ピリジル、イミ ダゾリル、ピラジニル及びインドリル基で あり、これらの基は、それら自身、染料化 学において一般的である置換基を有してい てもよく、 Ｒ＾１及びＲ＾２は、互いに独立に、水素であるか、又
    は染料化学において一般的である 置換基によって置換されていてもよいアル キル、シクロアルキル、アリールまたはア ラルキルを表し、あるいは、−ＮＲ＾１Ｒ＾２は、共同
    して、染料化学において一般的である 置換基によって置換されていても良いピロ リジン、ピラゾリン、ピペリジン、ピペラ ジンまたはモルホリン基を表す、 の化合物を酸化還元反応指示薬（ｒｅｄｏｘ　ｉｎｄｉ
    ｃａｔｏｒｓ）として含む、酸化還元反応を検出するた
    めの薬剤。 ２、一般式（II） ▲数式、化学式、表等があります▼（II） 式中、 Ａは、随時置換されていてもよいフェニル、ピリジルま
    たはイミダゾリルを表し、 Ｔは、水素、ヒドロキシル、アルキル、ア リール、アルコキシ、フェノキシ、ＳＯ＿３Ｈ、−ＣＯ
    ＯＨまたは ▲数式、化学式、表等があります▼ を表し、 ここにおいて、Ｒ＾１及びＲ＾２は、上述の意味を有し
    、そして、 Ｘ、Ｇ、Ｄ及びｍは、上述の意味を有する、の化合物を
    酸化還元反応指示薬として含む特許請求の範囲第１項記
    載の薬剤。 ３、一般式（III） ▲数式、化学式、表等があります▼（III） 式中、 Ｗは、水素、▲数式、化学式、表等があります▼、アル
    キル、アルコキ シまたはハロゲンを表し、 Ｔは、水素、アルキル、アルコキシまたは ▲数式、化学式、表等があります▼ を表し、 Ｘは、 ▲数式、化学式、表等があります▼または▲数式、化学
    式、表等があります▼ を表し、 Ｄは、フェニル、ナフチルまたはインドリ ル基を表し、そして、 Ｇ及びｍは、上述の意味を有する、 の化合物を含む特許請求の範囲第１項又は第２項記載の
    薬剤。 ４、一般式（IV） ▲数式、化学式、表等があります▼（IV） 式中、 Ｘは、 ▲数式、化学式、表等があります▼または▲数式、化学
    式、表等があります▼ を表し、 Ｗは、水素または ▲数式、化学式、表等があります▼ を表し、 Ｔは、水素、Ｃ＿１−Ｃ＿４−アルキル、Ｃ＿１−Ｃ＿
    ４−アルコキシまたは ▲数式、化学式、表等があります▼ を表し、 Ｇは、０を表し、 ｍは、０または１を表し、そして、 Ｙ及びＺは、水素または融合したベンゾ環 を表し、そして、 Ｒ＾１及びＲ＾２は、互いに独立に、水素を表すか、又
    はハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、Ｃ＿１−Ｃ＿５−
    アルコキシカルボニル、−ＳＯ＿３Ｈもしくは−ＣＯＯ
    Ｈによって置換されていてもよいＣ＿１−Ｃ＿４−アル
    キルを表すか、あるいは、アリールまたはアラルキルを
    表し、あるいは、ＮＲ＾１Ｒ＾２は、ピロリジン、ピペ
    リジンまたはモルホリン基を表す、 の化合物を酸化還元反応指示薬として含む特許請求の範
    囲第１項ないし第３項のいずれかに記載の薬剤。 ５、一般式（Ｖ） ▲数式、化学式、表等があります▼（Ｖ） 式中、 Ｗは、水素または ▲数式、化学式、表等があります▼ を表し、 Ｒ＾１及びＲ＾２は、互いに独立に、水素を表すか、又
    はハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、Ｃ＿１−Ｃ＿５−
    アルコキシカルボニル、−ＳＯ＿３Ｈもしくは−ＣＯＯ
    Ｈによって置換されていてもよいＣ＿１−Ｃ＿４−アル
    キルを表すか、あるいは、アリールまたはアラルキルを
    表し、そして、Ｙ、Ｚ及びｍは、上述の意味を有する、 の化合物を酸化還元反応指示薬として含む特許請求の範
    囲第１項ないし第４項のいずれかに記載の薬剤。 ６、過酸化酵素（ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ）または過酸化
    活性物質（ｐｅｒｏｘｉｄａｔｉｖｅｌｙ−ａｃｔｉｖ
    ｅ　ｓｕｂｓｔａｎｃｅ）を付加的に含む特許請求の範
    囲第１項ないし第５項のいずれかに記載の薬剤。 ７、バッファー、エフェクター（ｅｆｆｅｃｔｏｒｓ）
    、湿潤剤及び／または安定剤を付加的に含む特許請求の
    範囲第１項ないし第６項のいずれかに記載の薬剤。 ８、特許請求の範囲第１項ないし第７項記載の薬剤及び
    酸化酵素（ｏｘｉｄａｓｅ）を含む、分析物質を検出す
    るための試薬。 ９、特許請求の範囲第１項ないし第７項記載の薬剤を含
    む支持体を含有してなる、酸化還元反応を検出するため
    の試験装置（ｄｅｖｉｃｅ）。 １０、特許請求の範囲第８項記載の試薬を含む支持体を
    含有してなる、分析物質を検出するための試験装置。 １１、サンプルを、特許請求の範囲第１項ないし第７項
    記載の薬剤または特許請求の範囲第９項記載の試験手段
    と接触させ、そして、結果として生ずる反応を起こさせ
    ることを特徴とする酸化還元反応の検出のための方法。 １２、サンプルを、特許請求の範囲第８項記載の試薬ま
    たは特許請求の範囲第１０項記載の試験手段と接触させ
    、そして、結果として生ずる反応を起こさせることを特
    徴とする分析物質の検出のための方法。
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