CS253138B1 - Diagnostické proužky ke stanovení součásti biologických kapalin - Google Patents
Diagnostické proužky ke stanovení součásti biologických kapalin Download PDFInfo
- Publication number
- CS253138B1 CS253138B1 CS858529A CS852985A CS253138B1 CS 253138 B1 CS253138 B1 CS 253138B1 CS 858529 A CS858529 A CS 858529A CS 852985 A CS852985 A CS 852985A CS 253138 B1 CS253138 B1 CS 253138B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- strips
- pyrazolone
- glucose
- hydrogen
- reaction
- Prior art date
Links
- 239000007788 liquid Substances 0.000 title description 3
- JEXVQSWXXUJEMA-UHFFFAOYSA-N pyrazol-3-one Chemical compound O=C1C=CN=N1 JEXVQSWXXUJEMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 17
- -1 nitro, sulfo Chemical group 0.000 claims abstract description 13
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 7
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims abstract description 7
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 4
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 3
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 claims abstract description 3
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 claims abstract description 3
- 125000000951 phenoxy group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(O*)C([H])=C1[H] 0.000 claims abstract description 3
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims abstract description 3
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 claims description 7
- 238000005691 oxidative coupling reaction Methods 0.000 claims description 6
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims description 4
- KJCVRFUGPWSIIH-UHFFFAOYSA-N 1-naphthol Chemical compound C1=CC=C2C(O)=CC=CC2=C1 KJCVRFUGPWSIIH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 30
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 abstract description 29
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 abstract description 8
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract description 5
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 abstract description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 28
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 28
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 19
- RLFWWDJHLFCNIJ-UHFFFAOYSA-N 4-aminoantipyrine Chemical compound CN1C(C)=C(N)C(=O)N1C1=CC=CC=C1 RLFWWDJHLFCNIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 9
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 9
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 9
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 8
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 8
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 8
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 8
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 4
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 4
- LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N Uric Acid Chemical compound N1C(=O)NC(=O)C2=C1NC(=O)N2 LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- TVWHNULVHGKJHS-UHFFFAOYSA-N Uric acid Natural products N1C(=O)NC(=O)C2NC(=O)NC21 TVWHNULVHGKJHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 4
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 4
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 4
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 4
- 238000005470 impregnation Methods 0.000 description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 description 4
- 229940116269 uric acid Drugs 0.000 description 4
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 3
- 239000004366 Glucose oxidase Substances 0.000 description 3
- 108010015776 Glucose oxidase Proteins 0.000 description 3
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 3
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 3
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- QELUYTUMUWHWMC-UHFFFAOYSA-N edaravone Chemical compound O=C1CC(C)=NN1C1=CC=CC=C1 QELUYTUMUWHWMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 3
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 3
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 3
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 3
- 229940116332 glucose oxidase Drugs 0.000 description 3
- 235000019420 glucose oxidase Nutrition 0.000 description 3
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 3
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- UJMBCXLDXJUMFB-GLCFPVLVSA-K tartrazine Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)C1=NN(C=2C=CC(=CC=2)S([O-])(=O)=O)C(=O)C1\N=N\C1=CC=C(S([O-])(=O)=O)C=C1 UJMBCXLDXJUMFB-GLCFPVLVSA-K 0.000 description 3
- 229960000943 tartrazine Drugs 0.000 description 3
- 235000012756 tartrazine Nutrition 0.000 description 3
- 239000004149 tartrazine Substances 0.000 description 3
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZRHUHDUEXWHZMA-UHFFFAOYSA-N 1,4-dihydropyrazol-5-one Chemical class O=C1CC=NN1 ZRHUHDUEXWHZMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VFNOFXXKKALBEP-UHFFFAOYSA-N 4-(3,4-dimethyl-5-oxo-4h-pyrazol-1-yl)benzenesulfonic acid Chemical compound O=C1C(C)C(C)=NN1C1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 VFNOFXXKKALBEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RQKDTEZUUIDMAR-UHFFFAOYSA-N 4-butyl-5-methyl-2-phenyl-4h-pyrazol-3-one Chemical compound O=C1C(CCCC)C(C)=NN1C1=CC=CC=C1 RQKDTEZUUIDMAR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010018473 Glycosuria Diseases 0.000 description 2
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 2
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 2
- RNVCVTLRINQCPJ-UHFFFAOYSA-N o-toluidine Chemical compound CC1=CC=CC=C1N RNVCVTLRINQCPJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 2
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 2
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 2
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 2
- PHOLIFLKGONSGY-UHFFFAOYSA-N (3-methyl-1,3-benzothiazol-2-ylidene)hydrazine Chemical compound C1=CC=C2SC(=NN)N(C)C2=C1 PHOLIFLKGONSGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FHOSUHKLSWNJJZ-UHFFFAOYSA-N 2-(3-methyl-5-oxo-4h-pyrazol-1-yl)benzenesulfonic acid Chemical compound O=C1CC(C)=NN1C1=CC=CC=C1S(O)(=O)=O FHOSUHKLSWNJJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JRBJSXQPQWSCCF-UHFFFAOYSA-N 3,3'-Dimethoxybenzidine Chemical compound C1=C(N)C(OC)=CC(C=2C=C(OC)C(N)=CC=2)=C1 JRBJSXQPQWSCCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CWJQQASJVVAXKL-UHFFFAOYSA-N 4-(3-Methyl-5-oxo-4,5-dihydro-1H-pyrazol-1-yl)benzenesulfonic acid Chemical compound O=C1CC(C)=NN1C1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 CWJQQASJVVAXKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005725 8-Hydroxyquinoline Substances 0.000 description 1
- 150000004325 8-hydroxyquinolines Chemical class 0.000 description 1
- SNCJAJRILVFXAE-UHFFFAOYSA-N 9h-fluorene-2,7-diamine Chemical compound NC1=CC=C2C3=CC=C(N)C=C3CC2=C1 SNCJAJRILVFXAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N D-gluconic acid Natural products OCC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001856 Ethyl cellulose Substances 0.000 description 1
- ZZSNKZQZMQGXPY-UHFFFAOYSA-N Ethyl cellulose Chemical compound CCOCC1OC(OC)C(OCC)C(OCC)C1OC1C(O)C(O)C(OC)C(CO)O1 ZZSNKZQZMQGXPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N Gluconic acid Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N 0.000 description 1
- 229920002153 Hydroxypropyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 208000013016 Hypoglycemia Diseases 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-L Malonate Chemical compound [O-]C(=O)CC([O-])=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 1
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108010092464 Urate Oxidase Proteins 0.000 description 1
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000002390 adhesive tape Substances 0.000 description 1
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000003466 anti-cipated effect Effects 0.000 description 1
- 150000004982 aromatic amines Chemical class 0.000 description 1
- HFACYLZERDEVSX-UHFFFAOYSA-N benzidine Chemical compound C1=CC(N)=CC=C1C1=CC=C(N)C=C1 HFACYLZERDEVSX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009534 blood test Methods 0.000 description 1
- 235000010418 carrageenan Nutrition 0.000 description 1
- 239000000679 carrageenan Substances 0.000 description 1
- 229920001525 carrageenan Polymers 0.000 description 1
- 229940113118 carrageenan Drugs 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920003086 cellulose ether Polymers 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 235000019329 dioctyl sodium sulphosuccinate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001177 diphosphate Substances 0.000 description 1
- XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J diphosphate(4-) Chemical compound [O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 235000011180 diphosphates Nutrition 0.000 description 1
- YHAIUSTWZPMYGG-UHFFFAOYSA-L disodium;2,2-dioctyl-3-sulfobutanedioate Chemical compound [Na+].[Na+].CCCCCCCCC(C([O-])=O)(C(C([O-])=O)S(O)(=O)=O)CCCCCCCC YHAIUSTWZPMYGG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960000878 docusate sodium Drugs 0.000 description 1
- MOTZDAYCYVMXPC-UHFFFAOYSA-N dodecyl hydrogen sulfate Chemical compound CCCCCCCCCCCCOS(O)(=O)=O MOTZDAYCYVMXPC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940043264 dodecyl sulfate Drugs 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 235000019325 ethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920001249 ethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940014259 gelatin Drugs 0.000 description 1
- 239000000174 gluconic acid Substances 0.000 description 1
- 235000012208 gluconic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000001863 hydroxypropyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010977 hydroxypropyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 201000001421 hyperglycemia Diseases 0.000 description 1
- 230000002218 hypoglycaemic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N methanol;hydrate Chemical compound O.OC GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XJRBAMWJDBPFIM-UHFFFAOYSA-N methyl vinyl ether Chemical compound COC=C XJRBAMWJDBPFIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001570 methylene group Chemical group [H]C([H])([*:1])[*:2] 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 150000004780 naphthols Chemical class 0.000 description 1
- 230000000269 nucleophilic effect Effects 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000006395 oxidase reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 229960003540 oxyquinoline Drugs 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- OXNIZHLAWKMVMX-UHFFFAOYSA-N picric acid Chemical compound OC1=C([N+]([O-])=O)C=C([N+]([O-])=O)C=C1[N+]([O-])=O OXNIZHLAWKMVMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 1
- 229920002037 poly(vinyl butyral) polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 1
- 235000019422 polyvinyl alcohol Nutrition 0.000 description 1
- 229920006316 polyvinylpyrrolidine Polymers 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 150000004060 quinone imines Chemical class 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 230000003584 silencer Effects 0.000 description 1
- APSBXTVYXVQYAB-UHFFFAOYSA-M sodium docusate Chemical compound [Na+].CCCCC(CC)COC(=O)CC(S([O-])(=O)=O)C(=O)OCC(CC)CCCC APSBXTVYXVQYAB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000019333 sodium laurylsulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000012209 synthetic fiber Substances 0.000 description 1
- 229920002994 synthetic fiber Polymers 0.000 description 1
- 239000010409 thin film Substances 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 239000001043 yellow dye Substances 0.000 description 1
- UHVMMEOXYDMDKI-JKYCWFKZSA-L zinc;1-(5-cyanopyridin-2-yl)-3-[(1s,2s)-2-(6-fluoro-2-hydroxy-3-propanoylphenyl)cyclopropyl]urea;diacetate Chemical compound [Zn+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O.CCC(=O)C1=CC=C(F)C([C@H]2[C@H](C2)NC(=O)NC=2N=CC(=CC=2)C#N)=C1O UHVMMEOXYDMDKI-JKYCWFKZSA-L 0.000 description 1
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Předmětem jsou diagnostické proužky pro
stanovení množství peroxidu vodíku v moči,
určené pro využití v lékařství. Podle vynálezu
proužky navíc proti známému stavu obsahují
pyrazolon obecného vzorce I
s pěti radikály, z nichž první dva jsou
alkyly o počtu uhlíků 1 až 6 nebo vodík a
zbývající tři jsou stejné nebo rozdílné
substítuenty jako vodík, halogen, nitroskupina,
sulfoskupina nebo fenoxyskupina.
Při zachování barevných vlastností tak
dochází ke snížení citlivosti reakce tak,
že proužky reaguji na množství peroxidu
vodíku až do určité hranice koncentrací.
Description
Předmětem vynálezu jsou diagnostické proužky ke stanovení diagnosticky významných součástí biologických kapalin, které pomocí vhodných pomocných reakcí generují peroxid vodíku.
V klinicko-biochemické laboratorní diagnostice je velmi často potřeba stanovit peroxid vodíku vzniklý in sítu při některých enzymových reakcích. Je tomu tak například při stanovení glukosy nebo kyseliny močové v biologických kapalinách, jako například v moči nebo krvi; glukosa nebo kyselina močová se při tomto stanovení převádějí pomoci specifických enzymů, oxidoreduktas, na své oxidační produkty, kyselinu glukonovou, případně allatonin, za současného vzniku ekvivalentního množství peroxidu vodíku. Pomocí další specifické reakce se takto vzniklý peroxid vodíku stanoví tak, že za přítomnosti vhodného katalyzátoru nejčastěji enzymu peroxidasy, oxiduje bezbarvý chromogen na barvivo, jehož množství - úměrné množství peroxidu vodíku - se pak zjistí podle intenzity vzniklého zbarvení. Obdobným způsobem, i když s použitím poněkud složitějších pomocných reakcí, lze stanovit např. i cholesterol nebo triglyceridy.
Druh a vlastnosti chromogenu, používaného pro tato stanovení jsou obzvláště důležité u tzv. diagnostických proužků, u nichž veškerá činidla potřebná pro průběh uvedených pomocných enzymových reakcí i koncové barevné reakce jsou obsažena v pevné fázi ní. vhodném nasákavém nosiči.
V minulosti byly pro tento účel užívány prakticky výlučně chromogeny benzidinového typu, jako o-toluidin, 2,7-diaminofluoren nebo 3,31,5,5'-tetrametylbenzidin. V poslední době jsou však tyto chromogeny nahrazovány vhodnějším chromogenním systémem, založeným na tzv. Trinderově reakci, tj. na oxidační kopulaci vhodné nukleofilní organické sloučeniny jako aktivní barvotvorné komponenty s vhodnou pasivní barvotvornou komponentou za vzniku intenzívně zbarveného chinoniminového nebo diazaraerocyartinového barviva.
Jako aktivní komponenty jsou pro tento účel používány vesměs aminosloučeniny, z nichž se nejlépe osvědčily aromatické nebo heterocyklické aminy se šestičlenným kruhem (viz DOS 3 032 421 a NDR patent 135 243) nebo 4-aminoantipyrin a/nebo heterocyklické hydrazony, jako například 3-methyl-2-benzthiazolinon-hydrazon (viz US patent 4 427 770; 4 119 405 nebo čs.
Jako pasivní barvotvorné kopulační komponenty byly pak použity různé aromatické aminy (viz Clin. Chem. 17, 1 154 (1971), Clin. Chem. 18, 943 (1972) nebo DOS 3 124 594), substituované fenoly popřípadě naftoly (Ann. Clin. Biochem. 6, 24 (1969); US patent 4 119 504; US patent 4 427 770; DOS 2 744 812; DOS 3 000 380; DOS 2 838 877; NDR patent 135 243), substituovaný 8-hydroxychinolin, obecně známý pod názvem primachin-difosfát (DOS 2 855 433) nebo substituované 5-pyrazolony (DOS 3 032 421).
Diagnostické proužky, jejichž barevná odezva na peroxid vodíku, popřípadě na látky, které tento peroxid vodíku v průběhu vhodné pomocné enzymové reakce generují, je založena na tomto chromogenním systému, vynikají výbornými vlastnostmi: např. glukosu v moči lze pomocí těchto proužků stanovit v extrémně širokém rozmezí od mírně zvýšených glykosurií od 0,35 až 0,50 g/1 glukosy až po neobyčejně vysoké patologické hodnoty, přesahující 30 až 50 g/1. Obdobně se tyto proužky osvědčují i pro vyšetřování séra nebo krve, kde je možné pomocí nich stanovit s poměrně vysokou přesností obsah glukosy od hypoglykémií v rozsahu 0,20 až 0,40 g/1 glukosy až po, poměrně těžké hyperglykémie, při nichž koncentrace glukosy v séru dosahuje až 8,0 g/1 a více.
V některých případech je však žádoucí, aby tyto proužky indikovaly pouze koncentrace glukosy, zvýšené nad určitou hranici. Je to zejména u proužků, obsahujících dvě indikační zóny, z nichž pomocí prvé je možno stanovit nižší koncentraci glukosy např. do 1,1 g/1 (což je horní hranice tzv. normální hodnoty), pomocí druhé pak koncentrace ležící nad touto hodnotou. Při tom je výhodné použít pro nižší koncentrační rozsah zónu s chromogenem benzidino3 pis takovýchto dvouzónových pružků a výhody jejich použití jsou uvedeny například v již čito váném US patentu 4 427 770.
Chromogenní systémy na bázi oxidační kopulace uvedené výše však pro tento účel nejsou zcela vhodné, nebot dik své poměrně vysoké citlivosti indikují přítomnost a množství glukosy již od jejích velmi nízkých koncentrací, což ovšem při použití na těchto dvouzónových proužcích není žádoucí. Obdobně však i např. u proužků pro stanovení glukosy v moči indikují proužky s tímto chromogenním systémem i nejnižší nadfyziologické vylučování glukosy nadměrně intenzívní pozitivní reakci, což někdy znesnadňuje přesnější diferenciaci pozitivních nálezů v oblasti 0,35 až 1,0 g/1 glukosy, která je ovšem z hlediska diagnostického velmi důležitá. Bylo proto třeba vyvinout diagnostické proužky, u nichž by při zachování vynikajících barevných vlastností uvedeného chromogenního systému byla citlivost reakce snížena tak, aby prouž ky reagovaly první zřetelně pozitivní reakcí na množství peroxidu vodíku - a tím tedy na množství látky tento peroxid generující - teprve od určité hranice koncentrací.
Tento úkol se podařilo vyřešit předloženým vynálezem, jehož předmětem jsou diagnostické proužky ke stanovení součástí biologických kapalin obsahující chromogenní systém na bázi oxidační kopulace aromatického nebo heterocyklického aminu s fenolem, naftolem nebo 1,3-disubstituovaným 5-pyrazolonem, vyznačené tím, že obsahují pyrazolon obecného vzorce I
v němž R^ je alkyl o počtu uhlíků 1 až 6, R^ je vodík nebo alkyl o počtu uhlíků 1 až 6 a R^ až Rj jsou stejné nebo rozdílné substituenty jako vodík, halogen, nitroskupina, sulfoskupina nebo fenoxyskupina.
Tento nový chromogenní systém vyniká proti dosud známým systémům tím, že pomocí pyrazolonu I je možné libovolně regulovat spodní hranici citlivosti proužků vzhledem k množství původního analytu, při jehož enzymové transformaci vzniká peroxid vodíku. Tato skutečnost je dána pravděpodobně tím, že v tomto novém systému dochází přednostně k oxidační kopulaci aktivní kopulačni komponenty s pyrazolonem I za vzniku bezbarvého produktu. Teprve po spotře bování veškerého pyrazolonu I, což odpovídá spotřebování ekvivalentní části peroxidu vodíku, dojde k reakci aktivní kopulačni komponenty s vlastní barvotvornou komponentou, tj. aromatickým nebo heterocyklickým aminem, fenolem, naftolem nebo 5-pyrazolonem, majícím však - na rozdíl od pyrazolonu I - volnou, nesubstituovanou methylenovou skupinu v poloze 4.
Z uvedeného nástinu předpokládaných pochodů, které probíhají při pozitivní reakci v chromogenním systému proužků podle vynálezu, vyplývají i potřebné vzájemné poměry jednotlivých složek. Poměr aktivní a pasivní barvotvorné komponenty není kritický a může se pohybovat v poměrně širokých mezích od přebytku komponenty aktivní až po poměrně vysoký přebytek komponenty pasivní. U většiny proužků se však z hlediska výtěžku oxidační kopulace a z toho vyplývajících barevných vlastností proužků ukázal výhodným stechiometrický poměr obou těchto složek až do zhruba trojnásobného molárniho přebytku pasivní kopulačni komponenty. Možnost použití aktivní a pasivní kopulačni komponenty v prakticky zcela libovolných molárních poměrech vyplývá konečně i z popisu výše citovaných vynálezů, jako například z amerických patent· nich spisů 4 119 405 a 4 427 770 nebo DOS 3 032 421.
Množství pyrazolonu I (který lze z hlediska předpokládaného mechanismu jeho účinku označit za bezbarvou pasivní kopulačni komponentu) použitého na proužcích podle vynálezu se řídí hranicí koncentrace peroxidu vodíku (případně látky, která tento peroxid v průběhu pří253138 slušné pomocné reakce generuje), při níž mají proužky poskytovat první pozitivní reakci.
Toto množství pyrazolonu I, případně jeho molární poměr například k barvotvorné pasivní komponentě je závislý jak na substituentech Rg až Rg v pyrazolonu I, tak i na použité kombinaci aktivní a pasivní barvotvorné komponenty a hlavně na biologické kapalině, k jejímuž vyšetřování jsou proužky určeny.
Tak například u proužků pro stanovení glukosy v moči, které jako chromogenní systém obsahují kombinaci 4-aminoantipyrinu s l-fenyl-3-methyl-5-pyrazolon a jako pyrazolon X l-(4-sulfofenyl)-3,4-dimethyl-5-pyrazolon, a u nichž je nutné potlačit pozitivní reakci do koncentrace glukosy 0,20 g/1 a zeslabit pozitivní reakci pro koncentrace glukosy 0,30 až 0,50 g/1, je nutné použít poměrně vysoké množství pyrazolonu I, vyjádřené molárním poměrem k 1-fenyl-3-methyl-5-pyrazolonu 1 ku 5.
U proužků pro stanovení glukosy v kapilární karvi, obsahujících chromogenní systém 4-aminoantipyrin s 1-(sulfofenyl)-3-methyl-5-pyrazolonem a jako pyrazolon I 1-(4-sulfofenyl)-3-methyl-4-butyl-5-pyrazolon, u nichž je třeba potlačit pozitivní reakci až do koncentrace glukosy 1,0 až 1,1 g/1, však postačuje molární poměr obou složek pouze 1 ku 100 až 1 ku 140. Obecně se tudíž pyrazolon I používá v diagnostických proužcích podle vynálezu v množství definovaném poměrem k pasivní barvotvorné komponentě 1 ku 2,5 až 1 ku 250, přičemž u proužků pro stanovení glukosy v moči činí tento poměr s výhodou 1 ku 2,5 až 1 ku 25, u proužků pro stanovení glukosy v krvni nebo séru s výhodou 1 ku 50 až 1 ku 150.
Je samozřejmé, že vedle uvedeného ohromogennlho systému a pyrazolonu X obsahuji proužky podle (vynálezu řadu dalších látek a činidel, potřebných pro žádoucí průběh celé indikační reakce. U proužků pro stanovení glukosy, kyseliny močové, cholesterolu nebo triglyoeridů jsou to v prvé řadě specifické enzymy, za jejichž přítomnosti jsou tyto součásti biologických kapalin transformovány za současného vzniku peroxidu vodíku. Při stanovení glukosy a kyseliny močové jsou to pouze příslušné oxidoreduktasy - glukosaoxidasa nebo urikasa. Pro stanoveni cholesterolu nebo triglyceridů však proužky obsahují - vedle příslušné oxidoreduktásy ještě i dalši enzymy, potřebné pro transformaci stanovované látky na produkt, přístupný konečné oxidasové reakci. Tyto enzymy jsou obecně známé a již poměrně dlouhou dobu používané v klinicko-biochemioké analytice. Popis takovýchto složitějších enzymových systémů lze nalézt například v americkém patentním spise 3 983 005 nebo v DOS 2 512 586 a 2 737 286.
Vlastní oxidační kopulace obou barvotvorných komponent i kopulace aktivní komponenty s pyrazolonem I působením peroxidu vodíku probíhá značně pomalu. Urychleni této reakce lze dosáhnout celou řadou vhodných katalyzátorů, z nichž se však v praxi nejlépe osvědčil enzym peroxidasa, která tvoři také nezbytnou součást proužků podle vynálezu.
Vedle těchto hlavních složek mohou však proužky podle vynálezu s výhodou obsahovat ještě řadu dalších pomocných látek vytvářejících vhodné podmínky pro průběh všech reakcí, které při stanovení příslušné součásti biologických kapalin na proužku probíhají. V prvé řadě je to tlumič, jehož úkolem je nejen vytvářet optimální pH pro všechny výše popsané enzymové reakce, ale i pro vlastní koncovou barevnou reakci, tj. oxidační kopulaci barvotvorných složek chromogenního systému. Pro tento účel může být použit jakýkoliv z obecně známých a pro tento účel běžně užívaných neinterferujících tlumičů o pH 4,0 až 9,0, jako jsou například tlumiče oitrátové, malonátové, fosfátové, tlumiče na bázi tris(hydroxymethyl)-aminomethanu a podobně.
Dalši účinnou složkou proužků podle vynálezu mohou být s výhodou tzv. zahuštovadla, což jsou přirozené nebo syntetické polymerní látky, jako například želatina, karagenan, alginát, polyvinylpyrrolidon, polyvinylalkohol, kopolymer maleinanhydridu s methylvinyléterem, étery nebo estery celulózy nebo jejich směsi. Tato zahuštovadla celý reakční systém proužků stabilizují a vedle toho mají i pozitivní vliv na zvýraznění barevné reakce proužků při pozitivní reakci.
Dále je výhodné, jestliže proužky obsahují i vhodná smáčedla, jako například laurylsulfát, dioktylsulfojantaran nebo polyethylenglykol, které zvyšují smáčivost proužků a usnadňují tak proniknuti vyšetřované kapaliny k činidlům a tím urychlují průbSh reakce proužků. Navíc přispívají tyto látky i ke zvýšení čistoty odstínu a brilance zabarvení vzniklého při pozitivní reakci proužků.
V některých případech je výhodné, jestliže proužky obsahují ještě také vhodné indiferentní barvivo, které koriguje výsledný barevný odstín proužků při pozitivní reakci a zvýrazňuje rozdíl v intenzitě zabarvení při reakci proužků s rozdílnými kocentracemi peroxidu vodíku, případně výchozího analytu, z něhož tento peroxid vznikl. I když zásadně lze pro tento účel použít nejrůznější barviva, ve většině případů se nejlépe osvědčují barviva žlutá, jako například tartrazin, fluorescein nebo kyselina pikrová.
Diagnostické proužky podle tohoto vynálezu se připravuji o sobě známým a pro přípravu diagnostických proužků obecně používaným způsobem spočívajícím v tom, že se všechny výše ií uvedené složky rozpustí ve vhodných rozpouštědlech jako například ve vodě, alkoholu, acetonu a tento tzv. impregnační roztok se nanese na nasákavou podložku, jako je filtrační papír nebo rouno ze syntetických vláken a vysuší.
V některých případech je pak výhodné část uvedených součástí rozpustit v jednom roztoku a část pak odděleně na druhý impregnační roztok a tyto roztoky nanést na nasákavý nosič postupně, přičemž po každé této impregnaci se nosič důkladně vysuší, například proudem horkého vzduchu. Tento způsob přípravy diagnostických proužků je blíže popsán v níže uvedených příkladech provedení vynálezu. Je však možné také všechny výše uvedené složky inkorporovat do vhodné polymerni vrstvy, která se pak ve formě tenkého filmu nanese na podložku z plastické hmoty, jak popisuje například americký patent 3 630 957. Tuto polymerni vrstvu a chromogennlm systémem podle vynálezu lze vedle toho použít i jako reakční vrstvu v tzv. Integrálním analytickém elementu popsaném podrobně například v americkém patentu 3 992 158.
Proti dříve známým řešením jsou proužky podle tohoto vynálezu charakteristické tím, že použitím vhodného množství pyrazolonu I v jejich reakčním systému je možné podle potřeby měnit hranici jejich citlivosti vůči peroxidu vodíku a tím vůči stanovované součásti vyšetřované biologické kapaliny. Tato přednost proužků podle vynálezu se uplatňuje ve všech případech, kdy je třeba zachytit stanovovanou ·součást biologické kapaliny teprve od jisté koncentrace, jako je například horní hranice tzv. normální hodnoty.
Příklad 1
Proužky ke stanovení glukosy v moči
Impregnační roztok A
| oitrátový tlumič o pH 5,3 želatina, 1,5% vodný roztok glukosaoxidasa, 24 U/mg peroxidasa, 100 U/mg, 1,8% vodný roztok | 62,00 ml 33,00 ml 1,65 g 4,85 ml |
| Impregnační roztok B | |
| metanol | 27,00 ml |
| voda destilovaná | 20,30 ml |
| l-fenyl-3-methyl-5-pyrazolon | 1,45 g |
| 1-(4-sulfofenyl)-3,4-dimethyl-5-pyrazolon | 0,41 g |
| 4-aminoantipyrin | 0,62 g |
| o-dianisidin | 0,62 g |
| polyvinylpyrrolidon K 90, 5% vodný roztok | 20,30 ml |
| laurylsulfát sodný | 0,41 g |
hydroxypropylcelulóza, 2% vodný roztok ve směsi metanol-voda 1 ku 1 30,00 ml tartrazin, 1% vodný roztok 2,40 ml
Oba impregnační roztoky se připraví odděleně smícháním, popřípadě rozpuštěním všech 2 složek v uvedeném pořadí. Na filtrační papír o plošné hmotnosti 180 g/m se nanese impregnační roztok A a papír se dokonale vysuší proudem teplého vzduchu. Na tento papír se pak nanese impregnační roztok B a vysuší stejným způsobem. Vysušený papír se poté rozřeže na čtverečky o rozměru 6x6 mm a nalepí - například pomocí oboustranné samolepící pásky - na podložku z bílé plastické hmoty. Ve srovnání s proužky připravenými stejným způsobem, avšak bez 1-(4-sulfofenyl)-3,4—dimethyl-5-pyrazolonu, poskytují proužky podle tohoto vynálezu vizuálně podstatně lépe rozlišitelné zbarvení v oblasti nejnižších patologických koncentrací glukosy v moči (0,35 až 1,0 g/1), i silnějších glykosurií (10 až 30 g/1). Vedle toho jsou tyto proužky i stabilnější vůči vzdušné vlhkosti.
Příklad 2
Proužky ke stanovení glukosy v kapilární krvi
Impregnační roztok A
| citrátový tlumič o pH 5,3 želatina, 1,5% vodný roztok glukosaoxidasa, 20 U/mg peroxidasa, 100 U/mg, 1,8% vodný roztok | 58,20 ml 38,80 ml 4.20 g 3.20 ml |
| Impregnační roztok B | |
| metanol | 65,00 ml |
| voda destilovaná | 32,60 ml |
| 1-(4-sulfofenyl)-3-methyl-5-pyrazolon | 2,90 g |
| l-fenyl-3-methyl-4-butyl-5-pyrazolon | 0,15 g |
| 4-aminoantipyrin | 0,80 g |
| tartrazin, 1% vodný roztok | 2,30 ml |
| dioktylsulfojantaran sodný, 3% roztok v etanolu | 14,00 ml |
| Impregnační roztok C | |
| etanol | 33,00 ml |
| toluen | 29,00 ml |
| diohlormetan | 19,00 ml |
| metanol | 19,00 ml |
| methylhydroxypropylcelulóza | 2,30 g |
| ethylcelulóza | 1,20 g |
| polyvinylbutyral B 20 H | 1,70 g |
Jednotlivé impregnační roztoky se nanesou postupně na filtrační papír o plošné hmotnosti o
180 g/m tak, aby papír byl roztokem právě nasycen. Po nanesení každého roztoku se papír důkladně vysuší proudem horkého vzduchu. Poslední impregnace, provedená pomoci impregnačního roztoku C, slouží k vytvoření semipermeabilní membrány, která zadrží na svém povrchu krevní elementy a propustí k reakčnímu systému proužků pouze krevní plasmu, případně sérum.
Takto naimpregnovaný papír se zpracuje na konečné proužky způsobem popsaným v příkladu 1 . Po nakápnutí kapky krve na čtvereček naimpregnovaného papíru (reakční zónu proužků) se po 60 s odstraní krevní elementy otřením ovlhčenou buničitou vatou a vzniklé červené zbarvení reakční zóny. které je úměrné koncentraci glukosy ve vyšetřované krvi, se vyhodnotí bud vizuálně srovnáním se zkusmo zhotoVěneu barevnou srovnávací stupnicí, nebo změřením reflektance při vlnové délce 495 nm na vhodném reflexním fotometru. Tyto proužky slouží ke stáno7 vení glukosy v kapilární krvi v rozmezí koncentrací od 1,20 g do 8,0 g/1; reakčni zónu připravenou popsaným způsobem je vhodné použít na dvouzónovém proužku v kombinaci se zónou určenou pro stanovení glukosy v rozmezí 0,20 až 1,2 g/1, jak popisuje americký patent 4 427 770.
Jestliže se v impregnačním roztoku B nahradí l-fenyl-3-methyl-4-butyl-5-pyrazolon stejným množstvím 1-(2-chlor-4-sulfofenyl)-3,4-diethyl-5-pyrazolonu, získají se proužky prakticky stejných vlastností.
Claims (1)
- PŘEDMĚT VYNÁLEZUDiagnostické proužky ke stanovení součástí biologických kapalin obsahující chromogenní systém na bázi oxidační kopulace aromatického nebo heterocyklického aminu s fenolem, naftolem nebo 1,3-disubstituovaným 5-pyrazolonem, vyznačené tím, že obsahují pyrazolon I obecného vzorce «5 *4 v němž je alkyl o počtu uhlíků 1 až 6, Rj je vodík nebo alkyl o počtu uhlíků 1 až 6, a R^ až Rj. jsou stejně nebo rozdílné substituenty jako vodík, halogen, nitroskupina, sulfoskupina nebo fenoxyskupina.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS858529A CS253138B1 (cs) | 1985-11-26 | 1985-11-26 | Diagnostické proužky ke stanovení součásti biologických kapalin |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS858529A CS253138B1 (cs) | 1985-11-26 | 1985-11-26 | Diagnostické proužky ke stanovení součásti biologických kapalin |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS852985A1 CS852985A1 (en) | 1987-03-12 |
| CS253138B1 true CS253138B1 (cs) | 1987-10-15 |
Family
ID=5435934
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS858529A CS253138B1 (cs) | 1985-11-26 | 1985-11-26 | Diagnostické proužky ke stanovení součásti biologických kapalin |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS253138B1 (cs) |
-
1985
- 1985-11-26 CS CS858529A patent/CS253138B1/cs not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS852985A1 (en) | 1987-03-12 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4828983A (en) | Use of phenols and anilines to increase the rate of peroxidase catalyzed oxidation of leuco dyes | |
| EP0122641B1 (en) | Analytical reagent, analytical method, and multilayer chemical-analytical element | |
| JPS5948099A (ja) | アスコルビン酸塩耐性広濃度域用グルコ−ス試験組成物、試験具および試験方法 | |
| US3558435A (en) | Diagnostic agents for use in the determination of hydroperoxides and of peroxidate-active substances and methods for manufacturing and using the same | |
| EP0071934A1 (en) | Method for preparing a color stable chromogenic analytical element | |
| US3630847A (en) | Diagnostic agent for use in the determination of hydroperoxides and of peroxidate-active substances | |
| US4721670A (en) | Analytical reagent, analytical method, and multilayer chemical-analytical element | |
| EP0243066B1 (en) | Element and method for the determination of creatinine or creatine | |
| JPS60256056A (ja) | 過酸化水素定量用組成物および分析要素 | |
| EP0797774B1 (en) | Multilayer analytical element | |
| EP0239242B1 (en) | Analytical composition, element and method for the determination of hydrogen peroxide | |
| JPS59162899A (ja) | β‐ヒドロキシ酪酸の定量用組成物 | |
| US5710012A (en) | Salt of 6-carboxy-3-methylbenzothiazolone hydrazone hydrate in colorimetric determination of hydrogen peroxide | |
| US4971918A (en) | Reducible indicator compositions containing pyrogallol derivatives | |
| US4885240A (en) | Use of organic buffers to reduce dehydroascorbic acid interference in analytical methods | |
| JPH05213944A (ja) | ナフトトリアゾリウム塩 | |
| JPS5845557A (ja) | 過酸化水素定量用試薬 | |
| CS253138B1 (cs) | Diagnostické proužky ke stanovení součásti biologických kapalin | |
| JPS6259782B2 (cs) | ||
| CA1289443C (en) | Test aids and method for the preparation thereof | |
| US4894472A (en) | Dicyanoethylaryl derivatives and process for their preparation | |
| US5084395A (en) | Reducible indicator compositions containing pyrogallol derivatives | |
| EP0247845A1 (en) | Use of methine dyes for the determination of hydrogen peroxide or analytes producing same | |
| JPH04252197A (ja) | カテコール、カテコール生成物質、またはカテコールの生成を触媒する酵素をアッセイするための分析要素 | |
| AU595993B2 (en) | Dicyanoethylaryl derivatives and process for their preparation |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 19991126 |