JPS62155078A - 細胞等の培養器 - Google Patents

細胞等の培養器

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JPS62155078A
JPS62155078A JP29304985A JP29304985A JPS62155078A JP S62155078 A JPS62155078 A JP S62155078A JP 29304985 A JP29304985 A JP 29304985A JP 29304985 A JP29304985 A JP 29304985A JP S62155078 A JPS62155078 A JP S62155078A
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cell
culture vessel
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Hideo Takahashi
高橋 日出生
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Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 (産業上の利用分′N) 本発明は、動植物細胞、微生物、ウィルス等の研究に有
用な培養器を提供するものである。
(従来の技術) 従来、動植物細胞を1nVitroの状態で培養し、あ
るいは微生物、ウィルス等を培養するために(ま合成樹
脂製のシャーレやガラス製培養器が多く使用されてきた
。しかし、細胞等はシャーレの底部に密着して培養され
るために、実験に使用する薬物等の環境物質は細胞等の
上部にのみ直接接触する状態にあった。これに反し、シ
ャーレに密着している細胞の下部には薬物等の環境物質
が充分接触しないので、細胞の状態はIn Vivoの
状態とは大変異なり、薬物反応の研究として十分なもの
とは云えなかった。
とくに、上皮細胞のように頂点側と基底部側でさまざま
な(次面上の差異(極性)を持つ細胞の研究においては
、従来のシャーレや培養容器を使用した培養方法では基
底部側に薬品、ウィルス等を反応させろことが困難であ
って、基底部側の作用を知ることが困難であり、このこ
とが研究上の支障となっていた。
このため、細胞層の上部のみならず下部からも細胞に薬
物を反応させ、代謝物をとり出しうる培養器の出現が待
望されていた。
(発明が解決しようとする問題点) 本発明は、従来の細胞等培養器が細胞上部(頂点側)の
薬物反応や代tAJtTif究ができたにとどまり、細
胞下部(基底部側)における薬物反応や代謝研究に適し
ていなかった欠点を解決し、細胞等を極めてIn Vi
voに近い状態で研究しうろ細胞等の培養器を提供する
ものである。
(問題を解決するための手段) 本発明は、合成樹脂製円筒と、その底部に固着したメン
ブランフィルタ−からなることを特徴とする、新たな培
養器の発明である。
本発明で1吏用する円筒は、ポリスチレン、ポリカーボ
ネイト等の樹脂によって製造され、実験、観察の便宜上
無色透明であることを望ましい。円筒の下部にはフラン
ジ部や有し、また任意の形状の脚部を有することが望ま
しい。
合成樹脂製円筒の寸法には特段の限定がないが、マルチ
ウェルプレート(多孔培養プレー1.)を使用する一般
の実験用には高さ10〜15mm、内径10〜30閤程
度が適当である。
本発明の培養器では円筒底部にメンブランフィルクーを
固着する。メンブランフィルタ−の固着位置は、培養プ
レート(例えば後述のマルチウェルブート)中において
、培地がフィルターに接触しうろ高さにあることが必要
であり、一般には脚下部より1〜数ml11隔てた位置
にフィルターが固着されることが望ましい。
本発明で使用するメンブランフィルタ−の例としては、
純粋で生物学的に不活性な酢酸セルロースと硝酸セルロ
ースの混合物からなるセルロースエステルフィルターが
あり、オートクレーブ滅菌が可能であるとともに希酸、
希アルカリ、炭化水素等にも安定であることが望ましい
。メンブランフィルタ−は、細胞は透過しないが培地成
分、イオン、薬物や分泌代謝物は透過することが必要で
あり、このための最適な例としては0.45μmのメジ
ブラシフィルターがある。
メンブランフィルターを円筒に固着する74としては、
例えばヒートシール方式(例丸ば150℃でンール)、
クロロホルム等を用いた溶剤方式などがあるが、その他
適宜方法によって固着することもできろ。円筒の材質と
してボリカードネイトを使用した場合はヒートシ−ル方
式が、ポリスチレンを使用した場合は溶剤方式が適して
いる。
厳密な培養実験に使用する目的上重要なことはメンブラ
ンフィルタ−の平面性を確保することである。そのため
には、例えば、予めメジプランフィルターをエタノール
と水の混合液にひたして湿温させたうえて円筒に固着す
れば、固着後も高度の平面性を維持することが可能とな
る。
本発明の培養器は滅菌が可能であるから、予めエチレン
オキサイドガス等により滅菌を行ったのち完全包装して
出荷すれば、実験者は培養に先立って滅菌処理を施す必
要がなく、また、−回使用毎に(吏いすてできるので、
能率的な実験を行うことができろ。
(実施例) 実施例 無色透明のポリスチレン樹脂を素材として、高さ13m
m、直径30mm、内径27間の円筒(1)を成形した
。円筒下部にはフラノン(2)と脚(3)を成形した。
純粋で生物学的に不活性な酢酸セルロースと硝酸セルロ
ースの混合物からなるセルロースエステルのメンブラン
フィルタ−(0,45μm)を予めエタノール(35%
)と水の混合液にひたしてBE、させたのち、クロロホ
ルムを溶剤として円筒に固着した。固着後のフィルター
(4)は高度に平面性が維持された。
実験例 本発明の培養器を用いて、イヌ腎臓上皮細胞を培養し、
その基底部側にウィルスを感染させる実験を行った。
本発明の培養器として高さ13mm、直径30m1内径
27mmの円筒底部に0.45μmのメンブランフィル
タ−を固着したものを使用し、上皮細胞(Madin−
Darby canine Kidney Ce1ls
:MDCK)を培養した。本発明の培養器を6穴培養プ
レート(マルチウェルプレー1− )の各孔に挿入した
。6穴培養プレート上の培地成分はメンブランフィルタ
−を透過し、フィルター上には上皮細胞層が形成された
次に、マルチウェルプレート内にウィルス(水泡性口内
炎ウィルス)を加えると、上皮細胞は基底部側からウィ
ルスに感染した。
これを、本発明の培養器内にウィルスを加えて頂点側か
ら感染させた場合と比較すると、上皮細胞に基底部側か
ら感染させた方が前記ウィルスの感染率が著しく高く、
頂点側からはほと/しど感染しない性質(極性)を有す
ることが確認された。
(本発明の作用効果) 本発明の細胞等培養器は従来のプラスチックシャーレや
ガラス製培養器と異なり、細胞の下部から培地成分、イ
オン、薬物、ウィルス等を供給できるので、In Vi
troでありながらIn Vivoに極めて近いエマ境
下で実験を行うことができる。また、細胞の代謝分泌物
も下部から容易に得ることができろ。
とくに、上皮細胞のように頂点側と基底部側とで著しく
性質の異なる細胞については、基底部側の性質、機能を
実験的に調べ、頂点側との差異(極性)を究明すること
が極めて容易になる。
さらに、基底部側からのみ細胞にウィルス感染を行った
り、細胞相互作用の研究に活用することもできる。
これらの実験は多孔培養プレート(マルチウェルプレー
1・)と組合わせることによって、一層容易に遂行され
る。
本発明の培養器は、平面性の点ですぐれているので、厳
密な実験に適しており、また予め滅菌、包装して出荷す
ることができるので、実験者は実験前に滅菌する必要が
なく、即ちに実験に取り掛かれるので、能率的に実験を
遂行することができる。また本発明の培養器は、−回使
用毎に使いすて゛ることができる。
【図面の簡単な説明】 第1図は本発明の細胞等培養器の一実施例を示す斜視図
、第2図は本発明の細菌等培養器の一実施例を示す断面
図、第3図ないし第5図は本発明の培養器を使用して上
皮細胞にウィルスを感染させろ実験例。各図において、
1は円筒部、2はフランジ部、3は脚部、4はメンブラ
ンフィルタ−15はマルチウェルプレー1・(多孔培養
プレート)のうちの一孔、6は上皮細胞、7はウィルス
を示す。 図面の浄容(内容に変更なし) 6     第38 ヰ JIA4−I513 丁 第5図 手続補正書(方式・指令) 昭和61年04月21日 特許庁長官  宇 賀  道 部  殿1 事件の表示 昭和60年特許願第293049号 2 発明の名称 細胞等の培養器 3 補正をする者 事件との関係  特許出願人 神奈川県伊勢原市岡崎6945 高橋日出生 4 代理人 東京都港区赤坂2丁目17番54号 バレロワイヤル赤坂1号館919号室 6 補正の対象 願書添付の図面 7 補正の内容 別紙添付図面のとおり 8 添付書類の目録

Claims (7)

    【特許請求の範囲】
  1. (1)合成樹脂製円筒と、その底部に固着したメンブラ
    ンフィルターからなることを特徴とする細胞等の培養器
  2. (2)メンブランフィルターがセルロースエステルより
    なる特許請求の範囲第1項の細胞等の培養器
  3. (3)メンブランフィルターが0.45mμフィルター
    である特許請求の範囲第1項および第2項の細胞等の培
    養器
  4. (4)メンブランフィルターを合成樹脂製円筒に溶剤に
    よって固着する特許請求の範囲第1項ないし第3項の細
    胞等の培養器。
  5. (5)メンブランフィルターを合成樹脂製円筒にヒート
    シールによって固着する特許請求の範囲第1項ないし第
    4項の細胞等の培養器。
  6. (6)メンブランフィルターをエタノール、水混合溶剤
    で湿濡処理をした後に合成樹脂製円筒に固着する特許請
    求の範囲第1項ないし第5項の細胞等の培養器。
  7. (7)底部に脚を有する特許請求の範囲第1項ないし第
    6項の細胞等の培養器。
JP29304985A 1985-12-27 1985-12-27 細胞等の培養器 Granted JPS62155078A (ja)

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US6706520B2 (en) * 2001-06-13 2004-03-16 Kehan Han Assessment of invasive potential of tumor cells
JP2016093149A (ja) * 2014-11-14 2016-05-26 真志 池内 細胞培養装置および細胞培養方法

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THE JOURNAL OF CELL BIOLOGY=1984 *

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