JPS62111692A - D−α−アミノ酸の製造方法 - Google Patents
D−α−アミノ酸の製造方法Info
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- JPS62111692A JPS62111692A JP24899085A JP24899085A JPS62111692A JP S62111692 A JPS62111692 A JP S62111692A JP 24899085 A JP24899085 A JP 24899085A JP 24899085 A JP24899085 A JP 24899085A JP S62111692 A JPS62111692 A JP S62111692A
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- substituted
- substituted hydantoin
- amino acids
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
(産業上の利用分野)
本発明は、5−置換ヒダントイン類をD−α−アミノ酸
に変換する能力を有するハンセニュラ(tlansen
ula )属知属する微生物を用(・ることにより、D
−α−アミノ酸を極めて有利に製造する方法に関するも
のである。
に変換する能力を有するハンセニュラ(tlansen
ula )属知属する微生物を用(・ることにより、D
−α−アミノ酸を極めて有利に製造する方法に関するも
のである。
(従来の技術とその問題点)
D−α−アミノ酸の製造方法の一つとして対応する5−
置換ヒダントインを化学的に水解して。
置換ヒダントインを化学的に水解して。
DL−α−アミノ酸を製造し、これを光学分割してD−
α−アミノ酸とする方法が知られている。
α−アミノ酸とする方法が知られている。
しかし、この方法は特に光学分割の工程が煩雑であり、
その収率も高くない。また更に、5−置換ヒダントイン
に微生物の培養液菌体、菌体処理物または菌体から抽出
した酵素を作用させて光学活性を有するN−カルバモイ
ル−D−α−アミノ酸を生成させた後、亜硝酸ソーダ液
処理によりD−α−アミノ酸とする方法がしられている
が、しかし、この方法も反応工程および精製工程が煩雑
である。
その収率も高くない。また更に、5−置換ヒダントイン
に微生物の培養液菌体、菌体処理物または菌体から抽出
した酵素を作用させて光学活性を有するN−カルバモイ
ル−D−α−アミノ酸を生成させた後、亜硝酸ソーダ液
処理によりD−α−アミノ酸とする方法がしられている
が、しかし、この方法も反応工程および精製工程が煩雑
である。
又、更に5−置換ヒダントインに、ある種の微生物・・
・例えばシュードモナス(Pseudomonas)。
・例えばシュードモナス(Pseudomonas)。
モラキセラ(Moraxella)、 バラコツカ
ス(Paracoccus”)、 アースロノ9クタ
ー(Arthrobacter )、 アルカリジェネ
ス(A Ical igenes ) 、 フラボバ
クテリウム(F Iavobacter ium )−
の培養液、菌体、菌体処理物を作用させて直接にD−α
−アミノ酸とする方法も知られているが収率は高くない
。
ス(Paracoccus”)、 アースロノ9クタ
ー(Arthrobacter )、 アルカリジェネ
ス(A Ical igenes ) 、 フラボバ
クテリウム(F Iavobacter ium )−
の培養液、菌体、菌体処理物を作用させて直接にD−α
−アミノ酸とする方法も知られているが収率は高くない
。
本発明者らは、この様な従来の製造方法に対し。
より効率のよい方法を見い出すべ(研究した結果。
させることを見い出しこれを先に提供した。
多価アルコールやポリエチレングリコールについては、
最近酵素法によってケイ皮酸からL−フェニルアラニン
を生成させる反応系に添加することによりその収率が向
上すると云う文献も見られる。
最近酵素法によってケイ皮酸からL−フェニルアラニン
を生成させる反応系に添加することによりその収率が向
上すると云う文献も見られる。
しかし、5−置換ヒダントインからD−アミノ酸への系
に添加してどうなるかについては何も知られていない。
に添加してどうなるかについては何も知られていない。
(問題点を解決するための手段)
本発明者らは、この様な従来の製造法に対しより効率の
よい方法を見いだすべく研究した結果。
よい方法を見いだすべく研究した結果。
ハンセニュラ属に属する微生物に5−置換ヒダントイン
を接触させD−α−アミノ酸に変換させる方法において
1反応溶液中に多価アルコール又はポリエチレングリコ
ールな添加することによりD−α−アミノ酸の収率が改
善されるこ−とを見いだした。
を接触させD−α−アミノ酸に変換させる方法において
1反応溶液中に多価アルコール又はポリエチレングリコ
ールな添加することによりD−α−アミノ酸の収率が改
善されるこ−とを見いだした。
この発明は、この知見に基づいて更に研究した結果、完
成されるに至ったものである。
成されるに至ったものである。
すなわち本発明は。
式中、Rはアルキル基、置換アルキル基、フェニル基ま
たは置換フェニル基を示す) で表わされる5−置換ヒダントイン類にハンセニュラ(
Hansenula )属に属する微生物の培養液。
たは置換フェニル基を示す) で表わされる5−置換ヒダントイン類にハンセニュラ(
Hansenula )属に属する微生物の培養液。
菌体または菌体処理物を作用させてD−α−アミノ酸に
変換させる方法において1反応液中に多価アルコール又
はポリエチレングリコールの存在下に5−置換ヒダント
インをD−α−アミノ酸に変換させることを特徴とする 一般式 R−CH−COOH H2 (式中、Rは上記に同じ) で表わされるD−α−アミノ酸の製造方法に関するもの
である。
変換させる方法において1反応液中に多価アルコール又
はポリエチレングリコールの存在下に5−置換ヒダント
インをD−α−アミノ酸に変換させることを特徴とする 一般式 R−CH−COOH H2 (式中、Rは上記に同じ) で表わされるD−α−アミノ酸の製造方法に関するもの
である。
本発明の目的のために使用されうる微生物は。
例えば代表例としては、ノ・ンセニュラ シフェリ−(
I(ansenula ciferrii ) 、−”
ンセニュラ ヘアリッジ−(Hansenula he
nricii )、 ハンセニュラ ノフエルメンタス
(Hansenulanonfermentaus )
、 ハンセニュラ ポリモルファ(Hansenul
a po Iymorpha )などが挙げられ、これ
らは本発明の目的に使用されうるかぎり自然界に存在す
る野生株および公的な微生物保存機関に保存されている
微生物が用いられる。
I(ansenula ciferrii ) 、−”
ンセニュラ ヘアリッジ−(Hansenula he
nricii )、 ハンセニュラ ノフエルメンタス
(Hansenulanonfermentaus )
、 ハンセニュラ ポリモルファ(Hansenul
a po Iymorpha )などが挙げられ、これ
らは本発明の目的に使用されうるかぎり自然界に存在す
る野生株および公的な微生物保存機関に保存されている
微生物が用いられる。
本発明で用いられろ5−置換ヒダントイン類とは、ヒダ
ントインの5位の水素原子がアルキル基。
ントインの5位の水素原子がアルキル基。
フェニル基または、それらの置換誘導体であり。
アルキル基またはフェニル基に付随する置換基としては
1例えばハロゲン原子、アルキルメルカプト基、ヒドロ
キシル基、アルコキシ基、アミン基。
1例えばハロゲン原子、アルキルメルカプト基、ヒドロ
キシル基、アルコキシ基、アミン基。
インドリル基、アルコキシカルボニル基などがある。又
1本発明で用いられる多価アルコールとは分子内に水酸
基を3つ以上含む化合物を意味し。
1本発明で用いられる多価アルコールとは分子内に水酸
基を3つ以上含む化合物を意味し。
例エバ、クリセロ−ルアキシロース、マンニトール、ソ
ルビトール、アドニトール、グルコースなどである。更
にポリエチレングリコールは分子量が400〜2000
0の物でもよいが、望ましくは分子1400〜6000
のものがよい。
ルビトール、アドニトール、グルコースなどである。更
にポリエチレングリコールは分子量が400〜2000
0の物でもよいが、望ましくは分子1400〜6000
のものがよい。
本微生物の培養に用いられる培地は通常資化しウル炭素
源、窒素源および微生物の生育に必要な無機塩栄養素を
含有させる通常の培地である。培養条件は好気的条件下
にてpH=3〜9.温度25〜50℃の適当な範囲に制
御しつつ行なえばよい。
源、窒素源および微生物の生育に必要な無機塩栄養素を
含有させる通常の培地である。培養条件は好気的条件下
にてpH=3〜9.温度25〜50℃の適当な範囲に制
御しつつ行なえばよい。
5−[換ヒダントインのD−α−アミノ酸への反応には
、前記のようにして培養した微生物の培養液、菌体また
は菌体処理物の形態で使用できる。
、前記のようにして培養した微生物の培養液、菌体また
は菌体処理物の形態で使用できる。
微生物の培養液をそのまま使用してもよいが培養中の成
分が障害になる場合や菌体量を多く使用したい場合には
、培養液から分離した菌体を用いればよい。菌体は生菌
体のままで使用目的を達するが、菌体そのものでなく菌
体磨砕物や菌体抽出物のような菌体処理物の状態でも用
いろことが可能であり、更に上記の菌体または菌体処理
物を公知の方法で固定化したものも使用することができ
る。
分が障害になる場合や菌体量を多く使用したい場合には
、培養液から分離した菌体を用いればよい。菌体は生菌
体のままで使用目的を達するが、菌体そのものでなく菌
体磨砕物や菌体抽出物のような菌体処理物の状態でも用
いろことが可能であり、更に上記の菌体または菌体処理
物を公知の方法で固定化したものも使用することができ
る。
反応基質である5−置換ヒダントインに微生物の培養液
、菌体または菌体処理物を作用させるには通常水性媒体
中で行う方法が用いられ1反応基質の濃度は061〜1
0重量%の濃度まで用いることが出来る。又5反応にお
ける温度は使用する微生物のD−α−アミノ酸への変換
する能力を持つ酵素の至適温度が採用されるが1通常2
0〜60℃の範囲にあり、pHも使用する微生物のD−
α−アミノ酸への変換する能力を持つ酵素の至適pHが
採用され1通常pH=5〜9の範囲である。
、菌体または菌体処理物を作用させるには通常水性媒体
中で行う方法が用いられ1反応基質の濃度は061〜1
0重量%の濃度まで用いることが出来る。又5反応にお
ける温度は使用する微生物のD−α−アミノ酸への変換
する能力を持つ酵素の至適温度が採用されるが1通常2
0〜60℃の範囲にあり、pHも使用する微生物のD−
α−アミノ酸への変換する能力を持つ酵素の至適pHが
採用され1通常pH=5〜9の範囲である。
本発明において、酵素反応溶液への多価アルコールおよ
びポリエチレングリコールの添加量は添加する物質によ
って異なるが、一般的には 1〜100”?/−であり
1例えば、ポリエチレングリコール(400)の場合は
50η/−が、又グリセロール、キシロースおよびマン
ニトールの場合は1〜2■/−が望ましい。
びポリエチレングリコールの添加量は添加する物質によ
って異なるが、一般的には 1〜100”?/−であり
1例えば、ポリエチレングリコール(400)の場合は
50η/−が、又グリセロール、キシロースおよびマン
ニトールの場合は1〜2■/−が望ましい。
前述したような5−置換ヒダントインを変換して生成す
るD−α−アミノ酸類の単離は濃縮、中和更にイオン交
換樹脂処理などの公知の方法を利用することにより目的
物であるD−α−アミノ酸を取得出来る。
るD−α−アミノ酸類の単離は濃縮、中和更にイオン交
換樹脂処理などの公知の方法を利用することにより目的
物であるD−α−アミノ酸を取得出来る。
(発明の作用および効果)
本発明によれば、微生物を用いることにより5−置換ヒ
ダントインから容易に高収率でD−α−アミノ酸を取得
できる。即ち本発明においては。
ダントインから容易に高収率でD−α−アミノ酸を取得
できる。即ち本発明においては。
ハンセニュラ属に属する微生物を用いて5−置換ヒダン
トインをD−α−アミノ酸に変換する反応溶液中に、多
価アルコールまたはポリエチレングリコールな添加させ
ることにより、5−置換ヒダントインのD−σ−アミノ
酸への変換率を高めることができ、D−α−アミノ酸の
製造方法としては極めて有利な方法である。
トインをD−α−アミノ酸に変換する反応溶液中に、多
価アルコールまたはポリエチレングリコールな添加させ
ることにより、5−置換ヒダントインのD−σ−アミノ
酸への変換率を高めることができ、D−α−アミノ酸の
製造方法としては極めて有利な方法である。
(実施例)
以下の例により本発明を具体的に説明するが。
本発明はこれらの例のみに限定されるものではな−(゛
。
。
実施例−1
グリコース209/l、DL−5−フェニルヒダントイ
ン59/1.マルツエキス1y/e、酵母! キス39
/l! 、 KH□PO4,1,5f/l、 MfS
O4−7H200,5f/l−CaC1!2−2H□0
0.33f/l!(pH=6.0) の培地を25
0−三角フラスコに20ff+7入れ120℃、15分
間殺菌した。
ン59/1.マルツエキス1y/e、酵母! キス39
/l! 、 KH□PO4,1,5f/l、 MfS
O4−7H200,5f/l−CaC1!2−2H□0
0.33f/l!(pH=6.0) の培地を25
0−三角フラスコに20ff+7入れ120℃、15分
間殺菌した。
これに酵母YM培地で28℃、40時間培養したハンセ
ニュラ ポリモルファ(NrtRL Y−2423)
を−白金耳接種し28℃で24時間培養した。この培養
液より遠心分離により菌体を採取し、培養液と同量の殺
菌した生理食塩水にて1回洗浄し菌体な集めた。この菌
体をDL−5−フェニルヒダントイン109/eを含む
0.1〜1リン酸カリウムバツフア(PH=7.5)に
30り/lになるように添加し、更に表−1に示す各種
の添加物を入れた溶95−を32℃、20時間反応した
。
ニュラ ポリモルファ(NrtRL Y−2423)
を−白金耳接種し28℃で24時間培養した。この培養
液より遠心分離により菌体を採取し、培養液と同量の殺
菌した生理食塩水にて1回洗浄し菌体な集めた。この菌
体をDL−5−フェニルヒダントイン109/eを含む
0.1〜1リン酸カリウムバツフア(PH=7.5)に
30り/lになるように添加し、更に表−1に示す各種
の添加物を入れた溶95−を32℃、20時間反応した
。
反応終了後、反応a4..tに12%トリクロロ酢酸溶
g1.zを加え全量を5−とする。その後、遠心分離(
15000rpm、 10m1n、)にて不溶解物を除
去した後、上澄液をアミノ酸アナライザー(日立製)に
て生成したアミノ酸を測定した。又。
g1.zを加え全量を5−とする。その後、遠心分離(
15000rpm、 10m1n、)にて不溶解物を除
去した後、上澄液をアミノ酸アナライザー(日立製)に
て生成したアミノ酸を測定した。又。
生成したアミノ酸を分離、精製し旋光度の測定を行なっ
た結果、生成するアミノ酸は全ての場合D体であること
を確認した。結果は表−1に示す。
た結果、生成するアミノ酸は全ての場合D体であること
を確認した。結果は表−1に示す。
表−1
実施例−2
実施例−1と同様に調整した菌体を表−2に示す各種5
−置換ヒダントイン101/lおよびポリエチレングリ
コール(400)50■/ ml ヲ含む0.1Mリン
酸カリウムバッファ(pH=7.5)に309/lにな
るように添加し、その溶液5−を32℃、20時間反応
した。生成するアミノ酸は前記の方法にて測定した。ま
た、これらのアミノ酸を分離、精製し旋光度の測定した
結果、生成するアミノ酸は全ての場合り体であることを
確認した。結果は表−2に示す。
−置換ヒダントイン101/lおよびポリエチレングリ
コール(400)50■/ ml ヲ含む0.1Mリン
酸カリウムバッファ(pH=7.5)に309/lにな
るように添加し、その溶液5−を32℃、20時間反応
した。生成するアミノ酸は前記の方法にて測定した。ま
た、これらのアミノ酸を分離、精製し旋光度の測定した
結果、生成するアミノ酸は全ての場合り体であることを
確認した。結果は表−2に示す。
10rと
実施例−3
表−3に示す各種微生物を実施例−1同様に調整して得
られた菌体な、DL−5−フェニルヒダントイン10’
!/lおよびポリエチレングリコール(400)50v
/−を含む0,1Mリン酸カリウムバッファ(pH=7
.5)に30 f/lになるように添加し、その溶液5
−を32℃、20時間反応した。生成するアミノ酸は前
記の方法にて測定した。また生成するアミノ酸を分離、
精製し旋光度の測定した結果、生成するアミノ酸は全て
の場合り体であることを確認した。結果を表−3に示す
。
られた菌体な、DL−5−フェニルヒダントイン10’
!/lおよびポリエチレングリコール(400)50v
/−を含む0,1Mリン酸カリウムバッファ(pH=7
.5)に30 f/lになるように添加し、その溶液5
−を32℃、20時間反応した。生成するアミノ酸は前
記の方法にて測定した。また生成するアミノ酸を分離、
精製し旋光度の測定した結果、生成するアミノ酸は全て
の場合り体であることを確認した。結果を表−3に示す
。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼・・・( I ) (式中、Rはアルキル基、置換アルキル基、フェニル基
または置換フェニル基を示す) で表わされる5−置換ヒダントイン類に、ハンセニュラ
(Hansenula)属に属する微生物の培養液、菌
体又は菌体処理物を作用させてD−α−アミノ酸に変換
させる方法において、反応液中に多価アルコール又はポ
リエチレングリコールの存在下で、5−置換ヒダントイ
ンをD−α−アミノ酸に変換させることを特徴とする一
般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ (式中、Rは上記に同じ) で表わされるD−α−アミノ酸の製造方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP24899085A JPH0659227B2 (ja) | 1985-11-08 | 1985-11-08 | D−α−アミノ酸の製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP24899085A JPH0659227B2 (ja) | 1985-11-08 | 1985-11-08 | D−α−アミノ酸の製造方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS62111692A true JPS62111692A (ja) | 1987-05-22 |
JPH0659227B2 JPH0659227B2 (ja) | 1994-08-10 |
Family
ID=17186381
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP24899085A Expired - Lifetime JPH0659227B2 (ja) | 1985-11-08 | 1985-11-08 | D−α−アミノ酸の製造方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPH0659227B2 (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5071752A (en) * | 1987-01-23 | 1991-12-10 | Schering Aktiengesellschaft | Process for the production of l-amino acids |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
SG11201704764PA (en) | 2014-12-11 | 2017-07-28 | Harvard College | Inhibitors of cellular necrosis and related methods |
-
1985
- 1985-11-08 JP JP24899085A patent/JPH0659227B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5071752A (en) * | 1987-01-23 | 1991-12-10 | Schering Aktiengesellschaft | Process for the production of l-amino acids |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPH0659227B2 (ja) | 1994-08-10 |
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