JPS6165162A - モノクロ−ナル抗体を用いた免疫学的測定方法における非特異反応吸収剤 - Google Patents
モノクロ−ナル抗体を用いた免疫学的測定方法における非特異反応吸収剤Info
- Publication number
- JPS6165162A JPS6165162A JP59187170A JP18717084A JPS6165162A JP S6165162 A JPS6165162 A JP S6165162A JP 59187170 A JP59187170 A JP 59187170A JP 18717084 A JP18717084 A JP 18717084A JP S6165162 A JPS6165162 A JP S6165162A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- mouse
- ascites
- serum
- rat
- absorbent
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/577—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor involving monoclonal antibodies binding reaction mechanisms characterised by the use of monoclonal antibodies; monoclonal antibodies per se are classified with their corresponding antigens
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/5306—Improving reaction conditions, e.g. reduction of non-specific binding, promotion of specific binding
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明はモノクローナル抗体を用い友免疫学的測定方法
における非特異反応吸収剤に関する。
における非特異反応吸収剤に関する。
ＰＨＡ法、ＲＰＨＰＨ１１ＩＡ法、Ｅ工人法その池種々
の免疫学的測定において、モノクローナル抗体（以下、
ＭＯＡと略ｆ）の使用は、その由来する抗゛原に対する
高特異性のｍめ最近盛んに試みられ良好な結果が報告さ
れている。例えば、主としてＨＢＢ抗原の測定を目的と
して面画抗体及び標識抗体共にＭＯＡを用い之イムノア
ッセイ全開示している特公表昭５８−５００３００号、
あるいけ標識抗原結合固定化ＭＯＡｉ眉いたイムノアッ
セイｔ−１１ｉｆｌ示している特開昭５８−７１４６１
号のｔｘＪきである。
の免疫学的測定において、モノクローナル抗体（以下、
ＭＯＡと略ｆ）の使用は、その由来する抗゛原に対する
高特異性のｍめ最近盛んに試みられ良好な結果が報告さ
れている。例えば、主としてＨＢＢ抗原の測定を目的と
して面画抗体及び標識抗体共にＭＯＡを用い之イムノア
ッセイ全開示している特公表昭５８−５００３００号、
あるいけ標識抗原結合固定化ＭＯＡｉ眉いたイムノアッ
セイｔ−１１ｉｆｌ示している特開昭５８−７１４６１
号のｔｘＪきである。
さらＫ ’０ＬＩＮＩＯＡＬ ＯＨＩＣＭＩ３ＴＲＹ、
Ｖｏｌ、２８、＆９、ＰＰ、１８６２−１８６６．１
９８２’けＴＳＨその能類似ホルモンのＥ工Ａ測定にお
りてＭＯＡの使用全報告している。その池、多くの文献
、特許において免疫学的測定方法におけるＭＯＡの使用
が報告されている。
Ｖｏｌ、２８、＆９、ＰＰ、１８６２−１８６６．１
９８２’けＴＳＨその能類似ホルモンのＥ工Ａ測定にお
りてＭＯＡの使用全報告している。その池、多くの文献
、特許において免疫学的測定方法におけるＭＯＡの使用
が報告されている。
一役に、これら従来のＭＯＡ全用いた免疫学的測定方法
においては、その人手し易さ、または調製のし易さから
、マウス由来のＭＯＡ％特に測定すべき抗原で免疫しに
マウス膵臓細胞とマウスミエローマ細胞と全融合させて
作製したハイブリドーマより得られるＭＯＡを使用して
いる。
においては、その人手し易さ、または調製のし易さから
、マウス由来のＭＯＡ％特に測定すべき抗原で免疫しに
マウス膵臓細胞とマウスミエローマ細胞と全融合させて
作製したハイブリドーマより得られるＭＯＡを使用して
いる。
例えば、従来の免疫学約定ｍ測定方法の中で感度の点で
最もすぐれているといわれるＲ工人法あるいけＥＩＡ法
、特にこれらの固相法におけるＭＯＡの使用は、例えば
、ホリスチレンビーズ等の固相担体にＭ Ｇ Ａ＋吸；
ｉｔ避せ、これに測定すべき抗原？反応させ、さらにラ
ジオアイソトープまたは酵素で標識しｋＭＧＡ全反応さ
せ之（あるいは標識したＭＯＡと測定すべき抗原と全光
に反応させ後、ＭＯＡ吸着固相と反応させる）後、ラジ
オアイトーフの放射能を測定するか、または酵素活性を
測定するいわゆるツーステップ法（Ｔｗ。
最もすぐれているといわれるＲ工人法あるいけＥＩＡ法
、特にこれらの固相法におけるＭＯＡの使用は、例えば
、ホリスチレンビーズ等の固相担体にＭ Ｇ Ａ＋吸；
ｉｔ避せ、これに測定すべき抗原？反応させ、さらにラ
ジオアイソトープまたは酵素で標識しｋＭＧＡ全反応さ
せ之（あるいは標識したＭＯＡと測定すべき抗原と全光
に反応させ後、ＭＯＡ吸着固相と反応させる）後、ラジ
オアイトーフの放射能を測定するか、または酵素活性を
測定するいわゆるツーステップ法（Ｔｗ。
８ｔｅｐ法）、あるいけ測定すべき抗原、ＭＯＡ吸着固
相および標識したＭＯＡとを同時に反応にさせたのち、
放射活性またけ酵素活性全測定するいわゆるワンステッ
プ法（Ｏｎｅ Ｂｔｍｐ法）からなる。あるいけ、これ
らのか法において、固相抗体ま友は標識抗体のいずれか
一方にＭＯＡ全使用し・残り一方は従来のポリクローナ
ル抗体？使用してもよい。
相および標識したＭＯＡとを同時に反応にさせたのち、
放射活性またけ酵素活性全測定するいわゆるワンステッ
プ法（Ｏｎｅ Ｂｔｍｐ法）からなる。あるいけ、これ
らのか法において、固相抗体ま友は標識抗体のいずれか
一方にＭＯＡ全使用し・残り一方は従来のポリクローナ
ル抗体？使用してもよい。
ところが、固相および／または標識抗体（コンジュゲー
ト）にマウス由来のＭＯＡ（工ｇＧまたはＩｇｅｌを使
用しに場合、検体中に抗−マウス免疫グロブリン例えば
抗−マウスエｇＧまｋは工ｇＭが存在すると、これが固
相および／まｋはフンジュゲー）１２）ＭＯＡと反応し
一抗原陰性の検体でもあ之かも陽性の様な結果？示す。
ト）にマウス由来のＭＯＡ（工ｇＧまたはＩｇｅｌを使
用しに場合、検体中に抗−マウス免疫グロブリン例えば
抗−マウスエｇＧまｋは工ｇＭが存在すると、これが固
相および／まｋはフンジュゲー）１２）ＭＯＡと反応し
一抗原陰性の検体でもあ之かも陽性の様な結果？示す。
即ち、正確なデータ金得るためにはこの抗−マウス免疫
グロブリンによる非特異反応吸収剤 本発明者等は、かかる従来のマウス由来ＭＯＡ）使用す
る免疫学的測定方法の欠点全改良すべく検討した結果、
マウス血清、マウス腹水、ラット血清、ま７２：けラッ
ト腹水が非特異反応吸収剤として極めて有効であること
を見い出しに０ 即ち、本発明者等が一実験としてＨＢａ抗原に対するＭ
ＯＡｉ用いて、ＨＥａＯＥＩＡＩＣよる測定全行ってい
る際、確認試験（Ｒ工人法ま友け ｌ’；（ＰＨＡ法）
で１ｉｎｓ抗原陰性とした検体において、後述する実験
列１に示す如くＨＢｓ抗原陽性と同等の発色をするもの
が見受けられた。この発色？非特異反応によるものと考
え、実験例２の如く、櫨°々の添加剤、例えば各種動物
血清等を添加して検討した結果、マウス血清、マウス腹
水、ラット血清およびラット腹水が有効であり、約１０
％からは寸完全に非特異反応全吸収できること全見い出
したのである。これはマウス血清、マウス腹水、ラット
血清ま７？：けラット腹水中に含まれる免疫クロプリン
が検体中の抗−マウス免疫グロブリンとｙ応Ｌ１これ全
吸収してしまうことによるものと考えられる。
グロブリンによる非特異反応吸収剤 本発明者等は、かかる従来のマウス由来ＭＯＡ）使用す
る免疫学的測定方法の欠点全改良すべく検討した結果、
マウス血清、マウス腹水、ラット血清、ま７２：けラッ
ト腹水が非特異反応吸収剤として極めて有効であること
を見い出しに０ 即ち、本発明者等が一実験としてＨＢａ抗原に対するＭ
ＯＡｉ用いて、ＨＥａＯＥＩＡＩＣよる測定全行ってい
る際、確認試験（Ｒ工人法ま友け ｌ’；（ＰＨＡ法）
で１ｉｎｓ抗原陰性とした検体において、後述する実験
列１に示す如くＨＢｓ抗原陽性と同等の発色をするもの
が見受けられた。この発色？非特異反応によるものと考
え、実験例２の如く、櫨°々の添加剤、例えば各種動物
血清等を添加して検討した結果、マウス血清、マウス腹
水、ラット血清およびラット腹水が有効であり、約１０
％からは寸完全に非特異反応全吸収できること全見い出
したのである。これはマウス血清、マウス腹水、ラット
血清ま７？：けラット腹水中に含まれる免疫クロプリン
が検体中の抗−マウス免疫グロブリンとｙ応Ｌ１これ全
吸収してしまうことによるものと考えられる。
本発明で用いるマウス由来ＭＧＡとけ、各種抗原で免疫
したマウス膵臓側胞とマウスミエローマ細胞とを常法に
より融合させて得られたハイブリドーマ全クローニング
して得られるモノクローナル抗体である。
したマウス膵臓側胞とマウスミエローマ細胞とを常法に
より融合させて得られたハイブリドーマ全クローニング
して得られるモノクローナル抗体である。
以下、実験列、実施例により本発明を具体的に説明する
。
。
実験例Ｉ
ＨＢａで免疫したＢＡＬＢ／Ｃマウス（φ〜５週令・卒
）の膵臓細胞とマウスミエローマ細胞（Ｐ３−Ｘ６３−
Ａｇ８’−１７１１と全常法により融合させ、クローニ
ングして得られ７ｊＨＢａ抗原に対するＭＧＡ’ｉｉい
て次Ｏ≠種の試料についてＥ工Ａ測定を行った〇 測定はツーステップ法、即ち、各試料２００μＪと、常
法によりＥ記ＭＯＡを固定きせたポリスチレンビーズと
全試験管に入れ３７°０．２２Ｏ−ＰＢＳで３回洗浄後
、ホースラディツシュパーオキシダーゼで標識したＬ記
ＭＯＡ２００μＬ？入れて３７°０．２時間反応させ、
ビーズ全０、を 賽％Ｔｗｅｅｎ ２０− Ｐ Ｂ Ｓで３回洗浄した後
、別の試験管に移し換えた。
）の膵臓細胞とマウスミエローマ細胞（Ｐ３−Ｘ６３−
Ａｇ８’−１７１１と全常法により融合させ、クローニ
ングして得られ７ｊＨＢａ抗原に対するＭＧＡ’ｉｉい
て次Ｏ≠種の試料についてＥ工Ａ測定を行った〇 測定はツーステップ法、即ち、各試料２００μＪと、常
法によりＥ記ＭＯＡを固定きせたポリスチレンビーズと
全試験管に入れ３７°０．２２Ｏ−ＰＢＳで３回洗浄後
、ホースラディツシュパーオキシダーゼで標識したＬ記
ＭＯＡ２００μＬ？入れて３７°０．２時間反応させ、
ビーズ全０、を 賽％Ｔｗｅｅｎ ２０− Ｐ Ｂ Ｓで３回洗浄した後
、別の試験管に移し換えた。
さらに、０．１Ｍクエン酸と０．２Ｍリン酸ナトリウム
を含むＰ１１４．８の液２５ｍ１．５％Ｈ２Ｏ２２５μ
Ｌおよび０−フェニレンジアミン・２ ＨＱｉ１ｓｙ’
ｒｔｇとからなる液１．０７ＦＬＪｉ添加し、暗所で３
７°０，１時間反応させ、さらに２Ｎｌｉ、８０４１．
０−？加え反応ｔ−停止し、λ＝ ４１１２ ｎｍで測
定した吸光度を求め、第１表の結果？得た。
を含むＰ１１４．８の液２５ｍ１．５％Ｈ２Ｏ２２５μ
Ｌおよび０−フェニレンジアミン・２ ＨＱｉ１ｓｙ’
ｒｔｇとからなる液１．０７ＦＬＪｉ添加し、暗所で３
７°０，１時間反応させ、さらに２Ｎｌｉ、８０４１．
０−？加え反応ｔ−停止し、λ＝ ４１１２ ｎｍで測
定した吸光度を求め、第１表の結果？得た。
ｌ ＨＢａ抗原、ＨＢｍ抗体陰性 ０．Ｑ ３
０２ＨＢａ抗原陰性 ０．５８１３
ｋｌＢａムｇ ｌ Ｑ ｎｇ／ｍＡ Ｏ，
５８６４１ｉＢａＡｇ １００１００ｑ己２．５３７注
：試料ｌおよび２はあらかじめ確認試験（Ｒ工Ａまｔは
ＲＰＨＡ法）で陰性であること全確認したものこの結果
より、ＨＪ原陰性の試料２においてＨＢｓ Ａｇ １０
ｎｇ／／ｒＬＪ−に相応する発色が見られ非特異反応が
生じていることが明らかである。
０２ＨＢａ抗原陰性 ０．５８１３
ｋｌＢａムｇ ｌ Ｑ ｎｇ／ｍＡ Ｏ，
５８６４１ｉＢａＡｇ １００１００ｑ己２．５３７注
：試料ｌおよび２はあらかじめ確認試験（Ｒ工Ａまｔは
ＲＰＨＡ法）で陰性であること全確認したものこの結果
より、ＨＪ原陰性の試料２においてＨＢｓ Ａｇ １０
ｎｇ／／ｒＬＪ−に相応する発色が見られ非特異反応が
生じていることが明らかである。
実験例２
実験例１で非特異反応の見られた試料２について、これ
に各種の添加剤ｔ−１／ｖ％ まえは、１ｗ／ｖ％添加
し、その非特異吸収効果全検討した。測定は実験例１と
同様のツーステップ］［ｉｘＡに加え、ワンステップに
工Ａでの測定結果も比較した。ワンステップＥエムは、
試料ＭＯム固定ポリスチレンビーズおよび標識ＭＯ人と
を同時に混合して反応７１回で終了させる以外は実験例
１記載の集注と同じであった口 それぞれ異った添加剤を入れるため別Ａｔ″付した。
に各種の添加剤ｔ−１／ｖ％ まえは、１ｗ／ｖ％添加
し、その非特異吸収効果全検討した。測定は実験例１と
同様のツーステップ］［ｉｘＡに加え、ワンステップに
工Ａでの測定結果も比較した。ワンステップＥエムは、
試料ＭＯム固定ポリスチレンビーズおよび標識ＭＯ人と
を同時に混合して反応７１回で終了させる以外は実験例
１記載の集注と同じであった口 それぞれ異った添加剤を入れるため別Ａｔ″付した。
第２表の結果から、マウス血清とマウス腹水（ＭＯＡを
含む、含まないにかかわらず）とが顕著な吸収効果を示
し、ラット血清、ラット腹水（墓１３．１４）も良好な
＠収効果（８０％以ｈｌｖ−示しており、非特異ｒＩｋ
収剤としてｆ分備用できることが判る。能の添加剤では
各種動物血清において幾分の吸収効果はあるもののｆ分
ではない。
含む、含まないにかかわらず）とが顕著な吸収効果を示
し、ラット血清、ラット腹水（墓１３．１４）も良好な
＠収効果（８０％以ｈｌｖ−示しており、非特異ｒＩｋ
収剤としてｆ分備用できることが判る。能の添加剤では
各種動物血清において幾分の吸収効果はあるもののｆ分
ではない。
実施９１１
次に、Ｒ認試験においてＨＢｓ抗原陰性と判定され７２
：Ｍ々の無作為検体試料（血清）について、マウス血清
、マウス腹水およびラット血清の吸収効果をさらに検討
しｔｏこれら吸収剤金各試料ＫＩＶ／Ｖ％添加後、実験
河２と同様のワンステップＥエムで行い、比較のため無
添加、生理食塩水添加も測定した。結果は第３表に示す
とおりである。
：Ｍ々の無作為検体試料（血清）について、マウス血清
、マウス腹水およびラット血清の吸収効果をさらに検討
しｔｏこれら吸収剤金各試料ＫＩＶ／Ｖ％添加後、実験
河２と同様のワンステップＥエムで行い、比較のため無
添加、生理食塩水添加も測定した。結果は第３表に示す
とおりである。
第３表
陰性血清での吸収効果（吸光度λ＝４９２１試鮎 無添
加 生理食塩水 マウス血清 マウス腹水 ラット血
清３０ ０．１４５ ０．１３５ ０．０２９
Ｑ、Ｑ３） ０．Ｑ３２３） ０．０２
９ ０．０３Ｇ （ＬＯ３００，０３００，０３
）３２０，５３５Ｇ、５２９ ０．０３） ０．０
３） ０．０８３３３ ０．６２８ ０．６
３５ ０．０２９ ０．０３０ ０．０９１
３４ ０．１３９ ０．１４３ ０．０２８
０．０３０ ０．０３０３５ Ｑ、０２９
０．０２９ ０．０３Ｇ Ｏ，０２８０，０３
）３６０，０３Ｇ ０．０３） （ＬＯ２８０
，Ｑ２９ ０．０２９３７ ０．１９ｇ
０．２０５ ０．０３０ ０．Ｑ２８
０．０３０３８ ０．２４’９ Ｇ、２４５
０．０３０ ０．０３） Ｑ、０３２注：試料
１は、実験列１の試料１に同じ試料４０は、比較のｔめ
のＨＢｇ抗原陽性（ＨＢｇ抗原１０ｎｇ／−含有）試料 第３表の結果は本発明の非特異吸収剤について次のこと
全明らかに示している。
加 生理食塩水 マウス血清 マウス腹水 ラット血
清３０ ０．１４５ ０．１３５ ０．０２９
Ｑ、Ｑ３） ０．Ｑ３２３） ０．０２
９ ０．０３Ｇ （ＬＯ３００，０３００，０３
）３２０，５３５Ｇ、５２９ ０．０３） ０．０
３） ０．０８３３３ ０．６２８ ０．６
３５ ０．０２９ ０．０３０ ０．０９１
３４ ０．１３９ ０．１４３ ０．０２８
０．０３０ ０．０３０３５ Ｑ、０２９
０．０２９ ０．０３Ｇ Ｏ，０２８０，０３
）３６０，０３Ｇ ０．０３） （ＬＯ２８０
，Ｑ２９ ０．０２９３７ ０．１９ｇ
０．２０５ ０．０３０ ０．Ｑ２８
０．０３０３８ ０．２４’９ Ｇ、２４５
０．０３０ ０．０３） Ｑ、０３２注：試料
１は、実験列１の試料１に同じ試料４０は、比較のｔめ
のＨＢｇ抗原陽性（ＨＢｇ抗原１０ｎｇ／−含有）試料 第３表の結果は本発明の非特異吸収剤について次のこと
全明らかに示している。
１、本発明の吸収剤は、非特異反応を示す検体に対して
、その強弱にかかわらず、いずれの場合も非特異反応？
十分に吸収している（マウス血清、マウス腹水にあって
はほり完全な吸収効果を示す）０ ２、非特異反応を示さない検体に対して本発明の吸収剤
を加えても測定に何らの影響も与えないことが明らかで
ある。
、その強弱にかかわらず、いずれの場合も非特異反応？
十分に吸収している（マウス血清、マウス腹水にあって
はほり完全な吸収効果を示す）０ ２、非特異反応を示さない検体に対して本発明の吸収剤
を加えても測定に何らの影響も与えないことが明らかで
ある。
３、陽性血清（４４０１においてもこれら添加は陽性の
判定に何ら影響していない。添加による吸光度の低下は
、むしろ非特異反応の吸収と見るべきである。
判定に何ら影響していない。添加による吸光度の低下は
、むしろ非特異反応の吸収と見るべきである。
次に本発明の非特異反応吸収剤の添加量について検討し
ｔ０実験例１の試料２を用い、これに種々の割合でマウ
ス血清およびマウス腹水？添加し、ワンステップＥ工Ａ
でのλ＝４９２ｍｍでの吸光度全測定した。結果は第４
表のとおりである。
ｔ０実験例１の試料２を用い、これに種々の割合でマウ
ス血清およびマウス腹水？添加し、ワンステップＥ工Ａ
でのλ＝４９２ｍｍでの吸光度全測定した。結果は第４
表のとおりである。
第 ４ 表
この結果から１本発明の非特異反応吸収剤は０．１ｖ／
￥％ｏｔｋ加でも十分な効果を示すが、好ましいのはＱ
−５ＶＡＩ％〜１刀≦である。それ以との添加は吸収効
果に変化はなく、あまり意味がない。
￥％ｏｔｋ加でも十分な効果を示すが、好ましいのはＱ
−５ＶＡＩ％〜１刀≦である。それ以との添加は吸収効
果に変化はなく、あまり意味がない。
実施例２
次にＴＳＨで免疫したＢＡＬＢ／（マウスリ 牌ｉａａ
＋胞トマウスミエローマ細胞（Ｐ３−Ｘ６３−Ａｇ８−
Ｕｌ）と全常法により融合させ、クローニングすること
によりＴｉ３）ｉに対するＭＯＡを調製し、これ音用い
て実験例１．２と同様のＥｌＡ法による非特異反応吸収
試験を行つ７’ｔ。
＋胞トマウスミエローマ細胞（Ｐ３−Ｘ６３−Ａｇ８−
Ｕｌ）と全常法により融合させ、クローニングすること
によりＴｉ３）ｉに対するＭＯＡを調製し、これ音用い
て実験例１．２と同様のＥｌＡ法による非特異反応吸収
試験を行つ７’ｔ。
ＴＳＭ陰性の血清は、抗−ＴＳＥＩ抗体（ウテイクロマ
トグラフにより調製しＲＩＡキットにより確認したもＯ
音用１／１ｆｉ０結果は第５表、第６表のとおりである
。
トグラフにより調製しＲＩＡキットにより確認したもＯ
音用１／１ｆｉ０結果は第５表、第６表のとおりである
。
第 ６ 表
注：試料厘４５〜５１は、試料自体は試料轟４２と同じ
であるが、それぞれ異なる吸収剤全添加するため別屋と
じ之。
であるが、それぞれ異なる吸収剤全添加するため別屋と
じ之。
第５表、第６表の結果から、本発明の非特異反応吸収剤
はＴＳＨのＭＧＡ使用による測定においても十分な吸収
効果？示していることが判る。
はＴＳＨのＭＧＡ使用による測定においても十分な吸収
効果？示していることが判る。
以、［：、ＨＥ８、ＴＳＨについて本発明の非特異反応
吸収剤の効果全述べて来たが、これら吸収剤はその池の
桟々の抗原のＭＯＡ使用による測定において十分適用で
きることは本発明の原理走らして四らかである。
吸収剤の効果全述べて来たが、これら吸収剤はその池の
桟々の抗原のＭＯＡ使用による測定において十分適用で
きることは本発明の原理走らして四らかである。
本発明の非特異反応吸収剤は、通常１次のような形で使
用、あるいは供給できるが、本発明の原理に基づく限り
、色々の変形も可能である。
用、あるいは供給できるが、本発明の原理に基づく限り
、色々の変形も可能である。
（１） 測定前または測定中に測定系に添加する。
（２） あらかじめ検体中に添加してまず非特異物質
全吸収しておき、その後所定の測定を行う。
全吸収しておき、その後所定の測定を行う。
（３） 固相法の場合、あらかじめフンシュゲート（
液状）中に添加しておき、必要なら使用まで凍結乾燥し
ておく。
液状）中に添加しておき、必要なら使用まで凍結乾燥し
ておく。
（４） フンシュゲート希釈液または溶解液（凍結乾
燥品の場合）に添加しておく。
燥品の場合）に添加しておく。
Claims (4)
- （１）マウス血清、マウス腹水、ラット血清、またはラ
ット腹水を含む、マウス由来モノクローナル抗体を用い
た免疫学的測定方法における非特異反応吸収剤。 - （２）マウス由来モノクローナル抗体が各種抗原で免疫
されたマウス膵臓細胞とマウスミエローマ細胞との融合
より得られる特許請求の範囲第（１）項記載の非特異反
応吸収剤。 - （３）検体試料に対して０．１〜１．０Ｖ／Ｖ％の量で
存在する特許請求の範囲第（１）または第（２）項記載
の非特異反応吸収剤。 - （４）マウス由来モノクローナル抗体を用いた免疫学的
測定方法において、 非特異反応吸収剤として、マウス血清、マ ウス腹水、ラット血清またはラット腹水を存在させるこ
とを特徴とする上記測定方法。
Priority Applications (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59187170A JPS6165162A (ja) | 1984-09-05 | 1984-09-05 | モノクロ−ナル抗体を用いた免疫学的測定方法における非特異反応吸収剤 |
| CA000490011A CA1264661A (en) | 1984-09-05 | 1985-09-04 | Nonspecific-reaction inhibitor in an immunological assay with monoclonal antibody |
| EP85111223A EP0174026B1 (en) | 1984-09-05 | 1985-09-05 | Nonspecific-reaction inhibitor in an immunological assay with monoclonal antibody |
| AT85111223T ATE72706T1 (de) | 1984-09-05 | 1985-09-05 | Nichtspezifischer reaktionshemmstoff in einer immunologischen pruefung unter verwendung eines monoklonalen antikoerpers. |
| DE8585111223T DE3585398D1 (de) | 1984-09-05 | 1985-09-05 | Nichtspezifischer reaktionshemmstoff in einer immunologischen pruefung unter verwendung eines monoklonalen antikoerpers. |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59187170A JPS6165162A (ja) | 1984-09-05 | 1984-09-05 | モノクロ−ナル抗体を用いた免疫学的測定方法における非特異反応吸収剤 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6165162A true JPS6165162A (ja) | 1986-04-03 |
Family
ID=16201337
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP59187170A Pending JPS6165162A (ja) | 1984-09-05 | 1984-09-05 | モノクロ−ナル抗体を用いた免疫学的測定方法における非特異反応吸収剤 |
Country Status (5)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0174026B1 (ja) |
| JP (1) | JPS6165162A (ja) |
| AT (1) | ATE72706T1 (ja) |
| CA (1) | CA1264661A (ja) |
| DE (1) | DE3585398D1 (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0354465A (ja) * | 1989-07-21 | 1991-03-08 | Sekisui Chem Co Ltd | 免疫学的測定用希釈液 |
| JPH0354466A (ja) * | 1989-07-21 | 1991-03-08 | Sekisui Chem Co Ltd | 免疫学的測定試薬及び測定方法 |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4914040A (en) * | 1988-03-03 | 1990-04-03 | Boehringer Mannheim Gmbh | Reagent and method for determination of a polyvalent substance using an immunoaggregate |
| EP0460094A1 (en) * | 1989-02-21 | 1991-12-11 | Pitman-Moore, Inc. | Preventing false-positive results in elisa-assay methods |
| DE19828466A1 (de) | 1998-06-26 | 1999-12-30 | Roche Diagnostics Gmbh | Entstörung von Immunoassays durch Substanzen, die aus den Framework-Regionen von Antikörpern abgeleitet sind |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4307190A (en) * | 1978-10-30 | 1981-12-22 | Technicon Instruments Corporation | Immunoassay using ascitic fluid |
| DE3071942D1 (en) * | 1980-11-05 | 1987-05-07 | Home Office Reference Lab Inc | Method for the determination of antigens and antibodies using site-deactivating media |
| GB2098730B (en) * | 1981-04-21 | 1985-02-06 | Welsh Nat School Med | Immunolocalisation |
| JPS5990051A (ja) * | 1982-04-26 | 1984-05-24 | Konishiroku Photo Ind Co Ltd | 免疫分析用材料 |
-
1984
- 1984-09-05 JP JP59187170A patent/JPS6165162A/ja active Pending
-
1985
- 1985-09-04 CA CA000490011A patent/CA1264661A/en not_active Expired - Fee Related
- 1985-09-05 DE DE8585111223T patent/DE3585398D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1985-09-05 AT AT85111223T patent/ATE72706T1/de not_active IP Right Cessation
- 1985-09-05 EP EP85111223A patent/EP0174026B1/en not_active Expired - Lifetime
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0354465A (ja) * | 1989-07-21 | 1991-03-08 | Sekisui Chem Co Ltd | 免疫学的測定用希釈液 |
| JPH0354466A (ja) * | 1989-07-21 | 1991-03-08 | Sekisui Chem Co Ltd | 免疫学的測定試薬及び測定方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0174026B1 (en) | 1992-02-19 |
| DE3585398D1 (de) | 1992-03-26 |
| EP0174026A3 (en) | 1988-10-26 |
| EP0174026A2 (en) | 1986-03-12 |
| CA1264661A (en) | 1990-01-23 |
| ATE72706T1 (de) | 1992-03-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0365685B1 (en) | Freeze-dried composition comprising a horseradish peroxidase-labelled Fab' fragment of an anti-human interferon-beta monclonal antibody and trehalose; EIA kit containing the composition | |
| CA1171780A (en) | Method for the determination of an antigen in solution | |
| JPH02503059A (ja) | 抗グリコシルアルブミンモノクロナル抗体とそれらの抗体を産生するハイブリッド細胞株、およびその使用 | |
| JPH0731195B2 (ja) | 血清中の免疫複合体を検出する方法 | |
| US4910133A (en) | Diagnostic test drug comprising monoclonal antibody to human copper.zinc-superoxide dismutase and diagnostic test method using the same | |
| EP0741144A1 (en) | Antiannexin-v monoclonal antibody, process for producing the same, and use therof | |
| JP3602135B2 (ja) | 抗体クラス特異的干渉除去剤 | |
| JPS6038654A (ja) | ヨードチロニンの測定用免疫試験法並びにそれに用いるための試薬系、試験キツト及び試験具 | |
| JP6016789B2 (ja) | Ｐｉｖｋａ−ｉｉ測定試薬における非特異反応の抑制方法 | |
| JPS6165162A (ja) | モノクロ−ナル抗体を用いた免疫学的測定方法における非特異反応吸収剤 | |
| JPS6179164A (ja) | 抗原抗体反応の短縮方法 | |
| JPH0198968A (ja) | ヒス・インスリンの測定方法 | |
| JPH02152999A (ja) | 免疫学的測定法における非特異的反応の除去・抑制に用いるモノクローナル抗体由来物質、その製造方法及びその使用法 | |
| JPS62168052A (ja) | Ｈｔｌｖ−３対する抗体の免疫試験法 | |
| JPH0313864A (ja) | ＴＮＦ―αの測定方法，キット及び診断方法 | |
| JP3841364B2 (ja) | 抗ヒトビトロネクチン・トロンビン・アンチトロンビンｉｉｉ 複合体モノクローナル抗体、ハイブリドーマ及び免疫学的測定方法 | |
| SU1158029A3 (ru) | Способ количественного определени трийодтиронина | |
| JP2878317B2 (ja) | ラミニン測定試薬 | |
| JP2868808B2 (ja) | 活性化血小板抗原測定試薬 | |
| JPH11344493A (ja) | 免疫的測定法 | |
| JPS6080768A (ja) | 塩基性胎児蛋白の測定方法および試薬 | |
| JPH058678B2 (ja) | ||
| JPH06113830A (ja) | ヒトヘモグロビンの特異的検出法 | |
| JP2024119083A (ja) | Ｈｍｇｂ１の免疫学的測定時にｈｍｇｂ２の測りこみを抑制する方法及びｈｍｇｂ１を特異的に測定する免疫学的測定方法及びｈｍｇｂ１を特異的に測定する免疫学的測定試薬 | |
| JPS5942262B2 (ja) | 酵素免疫測定法用不溶化抗体及び不溶化抗原 |