JPS6156970A - アミノ酸分析計 - Google Patents
アミノ酸分析計Info
- Publication number
- JPS6156970A JPS6156970A JP17834484A JP17834484A JPS6156970A JP S6156970 A JPS6156970 A JP S6156970A JP 17834484 A JP17834484 A JP 17834484A JP 17834484 A JP17834484 A JP 17834484A JP S6156970 A JPS6156970 A JP S6156970A
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- JP
- Japan
- Prior art keywords
- liquid
- column
- ninhydrin
- amino acid
- mixer
- Prior art date
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- Pending
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Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔発明の利用分野〕
本発明はアミノ酸分析計に関するものである。
液体クロマトグラフィーによるアミノ酸分析計は複数の
溶離液およびこの溶離液の最終段のカラム再生液が切換
バルブ、送液ポンプ、アンモニアフィルタカラム、サン
プリング装置および分離カラムを経由してミキサに達す
る第１の流路と、このミキサにニンヒドリン送液ポンプ
を介して連結され、かつニンヒドリン反応試薬を収納し
ているニンヒドリン容器を有する第２の流路と、上述の
ミキサに反応チューブを介して連結された検出器を有す
る第３の流路とから構成されている。
溶離液およびこの溶離液の最終段のカラム再生液が切換
バルブ、送液ポンプ、アンモニアフィルタカラム、サン
プリング装置および分離カラムを経由してミキサに達す
る第１の流路と、このミキサにニンヒドリン送液ポンプ
を介して連結され、かつニンヒドリン反応試薬を収納し
ているニンヒドリン容器を有する第２の流路と、上述の
ミキサに反応チューブを介して連結された検出器を有す
る第３の流路とから構成されている。
このように構成されたアミノ酸分析計でカラム再生液は
水酸化ナトリウムあるいは水酸化リチウムと界面活性剤
および防腐剤とからなっている。
水酸化ナトリウムあるいは水酸化リチウムと界面活性剤
および防腐剤とからなっている。
このためニンヒドリン反応試薬と反応する場合に、ＰＨ
は部分的Ｋ１０以上となシ、ニンヒドリン反応試薬に添
加されている金属の酸化物や共存する微量金属などが水
酸化物として沈殿物をつくり、この微粒子が反応チュー
ブ内に詰シを生じさせ、）析計の機能を阻害していた。
は部分的Ｋ１０以上となシ、ニンヒドリン反応試薬に添
加されている金属の酸化物や共存する微量金属などが水
酸化物として沈殿物をつくり、この微粒子が反応チュー
ブ内に詰シを生じさせ、）析計の機能を阻害していた。
：′、１
こ−工発明の目的〕
本発明は以上の点に鑑みなされたものであシ、反応チュ
ーブ内の詰りを防止することを可能としたアミノ酸分析
計を提′供□することを目的とするものである。
ーブ内の詰りを防止することを可能としたアミノ酸分析
計を提′供□することを目的とするものである。
すなわち本発明は複数の溶離液およびこの溶離液の最終
段のカラム再生液が切換バルブ、送液ポンプ、アンモニ
アフィルタカラム、サンプリング装置および分離カラム
を経由してミキサに達する第１０流路と、前記ミキサに
ニンヒドリン送液ポンプを介して連結され、かつニンヒ
ドリン反応試薬を収納しているニンヒドリン容器を有す
る第２の流路と、前記ミキサに反応チューブを介して連
結された検出器を有する第３の流路とを備え、前記カラ
ム再生液は水酸化ナトリウムまたは水酸化リチウムのア
ルカリ性溶液が使用されているアミノ酸分析計において
、前記カラム再生液にキレーリ ド剤を加えたことを特徴とするものであシ、これ）よっ
てカラム再生液にキレート剤が加えられるようになる。
段のカラム再生液が切換バルブ、送液ポンプ、アンモニ
アフィルタカラム、サンプリング装置および分離カラム
を経由してミキサに達する第１０流路と、前記ミキサに
ニンヒドリン送液ポンプを介して連結され、かつニンヒ
ドリン反応試薬を収納しているニンヒドリン容器を有す
る第２の流路と、前記ミキサに反応チューブを介して連
結された検出器を有する第３の流路とを備え、前記カラ
ム再生液は水酸化ナトリウムまたは水酸化リチウムのア
ルカリ性溶液が使用されているアミノ酸分析計において
、前記カラム再生液にキレーリ ド剤を加えたことを特徴とするものであシ、これ）よっ
てカラム再生液にキレート剤が加えられるようになる。
以下、図示しだ実施例に基づいて本発明を説明“ す
不。第１図には本発明の一実施例が示されている。同図
に示されているように液体クロマトグラフィーによるア
ミノ酸分析計は複数の溶離液１ａ。
不。第１図には本発明の一実施例が示されている。同図
に示されているように液体クロマトグラフィーによるア
ミノ酸分析計は複数の溶離液１ａ。
ｌｂ、ｌｃ、ｌｄ、Ｉｅおよびカラム再生液１ｆが切換
バルブ２、送液ポンプ３ａ、アンモニアフィルタカラム
４、サンプリング装置５および分離カラム６を経由して
ミキサ７に達する第１の流路８ａを有している。そして
またミキサ７にニンヒドリン送液ポンプ３ｂを介して連
結され、かつニンヒドリン反応試薬９を収納しているニ
ンヒドリン容器９ａを有する第２の流路８〜ｂ１ ミキ
サ７に反応チューブ１０を介して連結された検出器１１
を有する第３の流路８Ｃを備えておシ、カラム再生液１
ｆには水酸化す） ＩＪウムまたは水酸化リチウムのア
ルカリ性溶液が使用されている。なお同図において、１
２はドレンである。このように構成とによりカラム再生
液１ｆにキレート剤が加えられるようになって、反応チ
ューブｌｏ内の詰シを防止することを可能としたアミノ
酸分析計を得ることができる。
バルブ２、送液ポンプ３ａ、アンモニアフィルタカラム
４、サンプリング装置５および分離カラム６を経由して
ミキサ７に達する第１の流路８ａを有している。そして
またミキサ７にニンヒドリン送液ポンプ３ｂを介して連
結され、かつニンヒドリン反応試薬９を収納しているニ
ンヒドリン容器９ａを有する第２の流路８〜ｂ１ ミキ
サ７に反応チューブ１０を介して連結された検出器１１
を有する第３の流路８Ｃを備えておシ、カラム再生液１
ｆには水酸化す） ＩＪウムまたは水酸化リチウムのア
ルカリ性溶液が使用されている。なお同図において、１
２はドレンである。このように構成とによりカラム再生
液１ｆにキレート剤が加えられるようになって、反応チ
ューブｌｏ内の詰シを防止することを可能としたアミノ
酸分析計を得ることができる。
すなわち溶離液である緩衝液１８〜１ｆは通常３種類以
上の緩衝液から々っておシ、これらは切換バルブ２によ
シ時間と共に組成を変えながら送液ポンプ３ａによシ送
液される。そして緩衝液１ａ〜ｌｆ中のアンモニア成分
を除去するためのアンモニアフィルタカラム４を通シ、
サンプリング装置５を経て分離カラム６に入る。分離カ
ラム６で分離されたアミノ酸成分と共に分離カラム６か
ら溶出した成分はミキサ７に送られる。一方ニンヒドリ
ン反応試薬９はニンヒドリン送液ポンプ３ｂによってミ
キサ７に送られる。このようにしてアミノ酸成分と共に
分離カラム６から溶出した成分とニンヒドリン反応試薬
９とはミキサ７で混合される。そしてアミ□ノ酸とニン
ヒドリン反応試薬９とを反応させるだめの加熱された反
”応チューブ１＝ｈｏで反応させられ・次“で検出器１
１でアミノ酸が検出され、その後に流通する液はドレン
１２から排出される。
上の緩衝液から々っておシ、これらは切換バルブ２によ
シ時間と共に組成を変えながら送液ポンプ３ａによシ送
液される。そして緩衝液１ａ〜ｌｆ中のアンモニア成分
を除去するためのアンモニアフィルタカラム４を通シ、
サンプリング装置５を経て分離カラム６に入る。分離カ
ラム６で分離されたアミノ酸成分と共に分離カラム６か
ら溶出した成分はミキサ７に送られる。一方ニンヒドリ
ン反応試薬９はニンヒドリン送液ポンプ３ｂによってミ
キサ７に送られる。このようにしてアミノ酸成分と共に
分離カラム６から溶出した成分とニンヒドリン反応試薬
９とはミキサ７で混合される。そしてアミ□ノ酸とニン
ヒドリン反応試薬９とを反応させるだめの加熱された反
”応チューブ１＝ｈｏで反応させられ・次“で検出器１
１でアミノ酸が検出され、その後に流通する液はドレン
１２から排出される。
ところでこの分離に用いられる緩衝液１ａ〜１ｅは通常
ＰＭが３から６の間に調整されたクエン酸緩衝液が用い
られ、最終段のカラム再生液１ｆのみ分離カラム６を洗
浄再生するために上述のように水酸化ナトリウムまたは
水酸化リチウムのアルカリ性溶液が用いられる。そして
ニンヒドリン反応試薬９は反応時のＰＨを６付近に保つ
ために酢酸緩衝液が用いられ、′またこのニンヒドリン
溶液中には還元剤として塩化第一スズや三塩化チタンな
ど金属塩が添加されている。
ＰＭが３から６の間に調整されたクエン酸緩衝液が用い
られ、最終段のカラム再生液１ｆのみ分離カラム６を洗
浄再生するために上述のように水酸化ナトリウムまたは
水酸化リチウムのアルカリ性溶液が用いられる。そして
ニンヒドリン反応試薬９は反応時のＰＨを６付近に保つ
ために酢酸緩衝液が用いられ、′またこのニンヒドリン
溶液中には還元剤として塩化第一スズや三塩化チタンな
ど金属塩が添加されている。
このように溶離液１ａ〜１ｆの最終段であるカラム再生
液１ｆにアルカリ性溶液を用い、反応チューブ１０とし
て拡散防止の上から内径が０．２ｍｍから０．３ ｍ
ｍのチヱ」ブを用いているので、ニンヒドリン溶液中の
金属イオンが上述のように水酸化物などの微小な沈殿物
を生成し、・反応チューブ１０を詰らせ液の流通を妨害
する。特に反応オユープ１０の内径がＱ、 ２ｍ ｍ以
下になると詰りが早くなる。
液１ｆにアルカリ性溶液を用い、反応チューブ１０とし
て拡散防止の上から内径が０．２ｍｍから０．３ ｍ
ｍのチヱ」ブを用いているので、ニンヒドリン溶液中の
金属イオンが上述のように水酸化物などの微小な沈殿物
を生成し、・反応チューブ１０を詰らせ液の流通を妨害
する。特に反応オユープ１０の内径がＱ、 ２ｍ ｍ以
下になると詰りが早くなる。
そこで本発明ではカラム再生液１ｆにキレート剤例えば
０．２優のＥＤＴＡ−２Ｎ、（エチレンジアミン四酢酸
２ナトリウム）を加えた。このようにすることにより反
応時には既に必要の々くなったニンヒドリン溶液中の金
属イオンがＥＤＴＡ−２Ｎ、で不活性化（マスク）され
て、沈殿を生じないようになシ、反応チューブ１０内の
液の詰シが防止できる。このように反応チューブ１０内
の詰シが防止できるので、分離カラム６の洗浄効果を上
げることができ、アミノ酸の検出感度を向上させること
ができる。
０．２優のＥＤＴＡ−２Ｎ、（エチレンジアミン四酢酸
２ナトリウム）を加えた。このようにすることにより反
応時には既に必要の々くなったニンヒドリン溶液中の金
属イオンがＥＤＴＡ−２Ｎ、で不活性化（マスク）され
て、沈殿を生じないようになシ、反応チューブ１０内の
液の詰シが防止できる。このように反応チューブ１０内
の詰シが防止できるので、分離カラム６の洗浄効果を上
げることができ、アミノ酸の検出感度を向上させること
ができる。
なお、本実施例では溶離液１ａ〜１ｅおよびカラム再生
液１ｆの切換えに切換バルブ２を使用した場合について
説明したが、切換バルブ２の代りにグラジェント装置を
使用するようにしてもよい。
液１ｆの切換えに切換バルブ２を使用した場合について
説明したが、切換バルブ２の代りにグラジェント装置を
使用するようにしてもよい。
： 土述のように本発明は反応チー−プ内の
詰シが防止できるようになって、反応チューブ内の詰シ
を防止することを可能としたアミノ酸分析計を得ること
かできる。
詰シが防止できるようになって、反応チューブ内の詰シ
を防止することを可能としたアミノ酸分析計を得ること
かできる。
第１図は本発明のアミノ酸分析計の一実施例の流路系統
図である。 １、ａ、ｌｂ、ｌｃ、ｌｄ、 １ｅ−・−溶１１ｉｆｌ
液（緩衝液）、１ｆ・・・カラム再生液、２・・・切換
バルブ、３ａ・・・送液ポンプ、３ｈ・・・ニンヒドリ
ン送液ポンプ、４・・・アンモニアフィルタカラム、５
・・・サンプリング装置、６・・・分離カラム、７・・
ベキサ、８ａ・・・第１の流路、８ｂ・・・第２の流路
、８Ｃ・・・第３の流路、９・・・ニンヒドリン反応試
薬、９ａ・・・ニンヒドリン容器、１０・・・反応チュ
ーブ、１１・・・検出器、１２・・・ドレン。
図である。 １、ａ、ｌｂ、ｌｃ、ｌｄ、 １ｅ−・−溶１１ｉｆｌ
液（緩衝液）、１ｆ・・・カラム再生液、２・・・切換
バルブ、３ａ・・・送液ポンプ、３ｈ・・・ニンヒドリ
ン送液ポンプ、４・・・アンモニアフィルタカラム、５
・・・サンプリング装置、６・・・分離カラム、７・・
ベキサ、８ａ・・・第１の流路、８ｂ・・・第２の流路
、８Ｃ・・・第３の流路、９・・・ニンヒドリン反応試
薬、９ａ・・・ニンヒドリン容器、１０・・・反応チュ
ーブ、１１・・・検出器、１２・・・ドレン。
Claims (1)
- １、複数の溶離液およびこの溶離液の最終段のカラム再
生液が切換バルブ、送液ポンプ、アンモニアフィルタカ
ラム、サンプリング装置および分離カラムを経由してミ
キサに達する第１の流路と、前記ミキサにニンヒドリン
送液ポンプを介して連結され、かつニンヒドリン反応試
薬を収納しているニンヒドリン容器を有する第２の流路
と、前記ミキサに反応チューブを介して連結された検出
器を有する第３の流路とを備え、前記カラム再生液は水
酸化ナトリウムまたは水酸化リチウムのアルカリ性溶液
が使用されているアミノ酸分析計において、前記カラム
再生液にキレート剤を加えたことを特徴とするアミノ酸
分析計。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP17834484A JPS6156970A (ja) | 1984-08-29 | 1984-08-29 | アミノ酸分析計 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP17834484A JPS6156970A (ja) | 1984-08-29 | 1984-08-29 | アミノ酸分析計 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6156970A true JPS6156970A (ja) | 1986-03-22 |
Family
ID=16046851
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP17834484A Pending JPS6156970A (ja) | 1984-08-29 | 1984-08-29 | アミノ酸分析計 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6156970A (ja) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH01104925U (ja) * | 1987-12-29 | 1989-07-14 | ||
| JPH0428508Y2 (ja) * | 1987-10-28 | 1992-07-10 | ||
| WO2009005936A1 (en) * | 2007-06-29 | 2009-01-08 | 3M Innovative Properties Company | Accelerating a ninhydrin reaction |
| GB2465956B (en) * | 2007-10-02 | 2012-05-09 | Shimadzu Corp | Preparative separation/ purification system |
| CN111208225A (zh) * | 2020-01-16 | 2020-05-29 | 威莱(广州)日用品有限公司 | 一种洗洁精中edta含量的测定方法 |
-
1984
- 1984-08-29 JP JP17834484A patent/JPS6156970A/ja active Pending
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0428508Y2 (ja) * | 1987-10-28 | 1992-07-10 | ||
| JPH01104925U (ja) * | 1987-12-29 | 1989-07-14 | ||
| JPH0443177Y2 (ja) * | 1987-12-29 | 1992-10-13 | ||
| WO2009005936A1 (en) * | 2007-06-29 | 2009-01-08 | 3M Innovative Properties Company | Accelerating a ninhydrin reaction |
| GB2465956B (en) * | 2007-10-02 | 2012-05-09 | Shimadzu Corp | Preparative separation/ purification system |
| US8968561B2 (en) | 2007-10-02 | 2015-03-03 | Shimadzu Corporation | Preparative separation/purification system |
| CN111208225A (zh) * | 2020-01-16 | 2020-05-29 | 威莱(广州)日用品有限公司 | 一种洗洁精中edta含量的测定方法 |
| CN111208225B (zh) * | 2020-01-16 | 2020-12-29 | 威莱(广州)日用品有限公司 | 一种洗洁精中edta含量的测定方法 |
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