JPS61502192A

JPS61502192A - 経口活性ヘパリン多重体

Info

Publication number: JPS61502192A
Application number: JP50210585A
Authority: JP
Inventors: ボ−ダ−，ニコラス・エス
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 1984-05-21
Filing date: 1985-05-08
Publication date: 1986-10-02
Also published as: CA1268456A; EP0189427B1; WO1985005362A1; DE3568169D1; EP0189427A1

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】経口活　ヘパリン　１生生皿生立江この発明は、ポリ　（多価）アニオン性のヘパリン酸と特定のポリカチオン性物質との新規な経口活性イオン性多重体（マルチブレット）を提供するものである。この多重体は、安定なリポイド性の「イオン対」すなわち塩であって、消化管壁から吸収され、徐々にヘパリン酸を放出して持続性の抗凝固作用を発揮することができる。

文里至！見ヘパリンならびにビスヒドロキシクマリンすなわちジクマロールについて最初の報告〔ヘバリンハＨｏｗｅｌｌ　ａｔ　ａｌ、　７／リカン・ジャーナル・オブ・フィジオロン−（Ａｌｌ、　Ｊ、Ｐｈ　ｓｉ。

１、）、４７．３２８　（１９１８）、ジクマロールはＬｉｎｋ、　ハーベイ・レフ、±」−二エシドヱ毀一旦胚匹、）、競、　１６２−２１６　（１９４４））がなされて以来、抗凝固剤は多くの生物学的研究の対象となってきた。ヘパリンは、経口での吸収が十分でなく、非経口経路で投与しなければならないにもかかわらず、現在でも多くの人が優れた薬剤であると考えている。毒性の副作用は稀であるが、非経口投与は、断続的な注射であろうと連続的な注入であろうと、その長期間の使用が妨げられる。他方で、現在臨床で使用されている経口抗凝固剤を用いた治療は、条件が異なるとその代謝速度がかなり変動することから、望ましい限度内への調節が困難である。投与後の作用開始に望ましくない遅れがあることに加えて、薬剤相互作用の問題と副作用のため、現在利用可能な経口抗凝固剤は、ヘパリン自体の代替薬として充分なものではない。

注射以外の経路でのヘパリンの投与により注射で得られるのと同等の結果を得る可能性を追求することが多くの研究者の興味を刺激してきた。たとえば、Ｗｔｎｄｓｏｒ　ａｔ　ａＬ　２４±＋　−（Ｎａｔｕｒｅ）　＋　ロンドン、　１９０．２６３　（１９６１）；　Ｔｅｏｗ　Ｙａｎ　Ｋｏｈの米国特許第３．４８２，０１４号、　３，５１０，５６１号および３，５４８，０５２号；ならびにＴｅｏｗ　Ｙａｎ　Ｋｏｈらの米国特許第３，５０６，６４２号および３，５７７．５３４号を参照、確かに、経口活性のヘパリン塩および錯体が特許文献に記載されており、たとえばアミンおよびアミド類は前述のＴｅｏｗ　Ｙａｎ　Ｋｏｈの米国特許に、またＮａ−Ｋ　＝Ｌｔ塩などの酸塩が前述のＴｅｏｌｌＹａｎ　Ｋｏｈらの米国特許に記載されている。さらに、スルホキシドおよびスルホンを利用して経口吸収性を高める試みも提案された。

しかし、ヘパリンの経口供給の改善については当該技術分野においてなお強く要請されている。

兄１」」口しＬｌ呵よって、本発明の主な目的は、経口経路によるヘパリンの改善された供給法を提供することである０本発明の別の目的は、ヘパリンを腸から容易に吸収されうる形態とすることである０本発明の別の目的は、安定性が高く、ヘパリンナトリウムに比べて抗凝固作用の持続時間が長い、経口活性な形態のヘパリンを提供することである。上記およびその他の目的は、本発明によるポリアニオン性のヘパリン酸と特定のポリカチオン性物質との新規な経口活性イオン性多重体の使用により達成される。この多重体は、安定なリポイド性の「イオン対」すなわち塩であって、消化管壁から吸収され、徐ｋに・ヘパリン酸を放出して持続性の抗凝固作用を発揮することができる。この新規なイオン性多重体すなわち塩は、多価カチオン単位と多価アニオン性のヘパリン部分との化合により生ずる。

図面の簡単な説明第１図は、化合物４〔ヘパリン・イノシトールヘキサ−（ニーメチル−３−ピリジニウムカルボキシレート）多重体〕、化合物５　〔ヘパリン・Ｎ、Ｎ’−ジメチル−Ｎ−ドデシル−Ｎ−（β−ヒドロキシ）エチルアンモニウム多重体〕およびヘパリンナトリウムについて、ラットへの経口投与からの経過時間（時間）に対する血液凝固に要した時間（分）をプロットしたグラフ；第２図は、化合物４°〔ヘパリン・イノシトールヘキサ−（１−メチル−３−ピリジニウムカルボ、キシレート）多重体〕およびヘパリンナトリウムについて、ラットへの空腸投与からの経過時間（時間）に対する血液凝固に要した時間（時間）をプロットしたグラフ；および第３図は、化合物４〔ヘパリン・イノシトールヘキサ−（１−メチル−３−ピリジニウムカルボキシレート）多重体〕およびヘパリンナトリウムについて、ウサギへの空腸投与からの経過時間（時間）に対する血液凝固に要した時間（分）をプロットしたグラフである。

発ｊ！１０１１礼肌本明細書で用いた「ヘパリン」、すなわちヘパリン酸とは、強い抗血液凝固作用を有する哺乳動物の組織に存在するムコ多糖の１種である。この多糖は、三糖あるいは対応する四糖の重合体混合物からなる、右旋性で、硫酸基を多く含み、負電荷を有し、強酸性の物質である。その正確な化学式、構造および分子量は未だに十分には解明されておらず、生体供給源によっても変動するようである。　ＧｏｏｄｍａｎおよびＧｉ１ｍａｎ著、治療学の薬　原　（Ｔｈｅ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏ　１ｃａｌ　Ｂａ５ｉｓ　ｏｆ　Ｔｈｅｒａｐｅｕ皿）、第６版、マクミラン出版社にニーヨーク）、第５８章。

ｐｐ、１３４８−１３５１は、ヘパリンが１５．０００ドルトンの平均分子量を有し、市販のヘパリンは２種類の反復する三糖単位、すなわちＤ−グルコサミン −し−イズロン酸単位とＤ−グルコサミンーＤ−グルクロン酸単位からなるポリマーから構成されることを指摘している。ＧｏｏｄｍａｎおよびＧｉｌｍａｎによれば、ヘパリンナトリウムの大部分の試料は各単位を８〜１５個含有しているが、両者は等しい割合でないこともある。　ＧｏｏｄｌｌａｎおよびＧｉｌｍａｎが説明したヘパリンナトリウムの構造を下に示す。

版＋　Ａｐｐｅｌｅｔｏｎ−Ｃｅｎｔｕｒｙ−Ｃｒｏｆｔｓ　（米国コネ千カフト州ノーウメーク）、　第２７章、　ｐｐ、　３１８−３１９　；メルク・インデックス。

第１０版＋　Ｍｅｒｃｋ　＆　Ｃｏ、（米国ニューシャーシー州う−ウエイ〉。

１９８３、　ｐｐ、　６７２−６７３　；およびＧｅ５ｓｎｅｒ　Ｇ、　Ｈａｗｌｅｙ改訂、工二コンデンスド・ケミカル・ディクシヲナリー（Ｔｈｅ　ＣｏｎｄｅｎｓｅｄＣｈｃｍｉｃａｋ　Ｄｉｃｔｉｏｎａｒ　）＋第８版＋　Ｖａｎ　Ｎｏ５ｔｒａｎｄ　Ｒｅｌｎｈｏｌｄ社にニーヨーク）、　ｐ、４３６も参照。

ヘパリンナトリウム単一ヘパリンの各種試料の鎖長および効力は広範囲にわたって変動する。そのため、ヘパリンは単位基準で規定される。ヘパリンの米国薬局方（ＵＳＰ）単位は、１：１００塩化カルシウム溶液０．２　ｍ）添加後に、クエン酸塩添加しッジ血請１．０　ｍｌの凝固を１時間防止するのに必要な量である。　ＩＪｓＰ（米国薬局方）ヘパリンナトリウムは、少なくとも１２０　ｔｌｓＰ単位／■を含有しなければならない。

本発明のヘパリン多重体すなわち複合体は、次の構造式で表される。

オールからすべてのヒドロキシル置換基を取り除いた後に残る該ポリオールの部分を意味し；ｎは該ポリオール中のヒドロキシル基の総数を表す３〜約２４の数値であり；ｐは≧３かつ≦ｎの数値であり；ｒはヘパリン単位の有効原子価であって、≧３かつ≦７であり；Ｓは、これにｒを乗じたときにｐＶに等しくなる数値であり：Ｖは、これにｐを乗じたときにｒｓに等しくなる数値であり；Ｒｏは（ａｌ　ｔｂ）　（Ｃ）であり、ココチーＣＯＯ−、−ＣＨｚＣＯＯ−、−ＣＨｚＯＣＯＯ−およびＲｖの各環置換基は、いずれもピリジニウム環の２−１３−もしくは４−位に結合でき；Ｒｏ９はＣ３〜Ｃ，アルキル基を意味し；ＲｏおよびＲ３は同一でも異別でもよく、それぞれが０１〜Ｃ，アルキル基を意味するか、またはＲｏとＲ”が隣接の窒１原子と一緒でもよ＜；Ｒ”″は天然アミノ酸の対応部分と同一の基を意味し；「アルキレン」基は炭素数１〜３で、直鎖でも分岐鎖でもよく；そしＴＲ ’は、Ｈ，−ＣＯＮＨｚもしくは−Ｃｏｏ（Ｃ＋〜Ｃｔアルキル）基を意味する。

本明細書で用いた「〔ヘパリン単位〕」なる表現は、ヘパリンナトリウム自体を構成する基本の四糖単位を意味するが、ただしこれに含まれる３〜７個のナトリウムイオンを取り除いた後に残る、３〜７の利用可能または有効な原子価を有するポリアニオンの形態のものを意味する。このポリアニオンはその後に所望のポリカチオンとイオン対を形成することができ、それにより上記一般式（１）で示される本発明の多重体が形成される。典型的なヘパリンナトリウム四糖単位は、Ｄ−グルコサミン−し−イズロン酸三糖単位とＤ−グルコサミン−Ｄ−グルクロン酸三糖単位とをそれぞれ１個ずつ含有するようであるが、ある試料におけるその四糖単位の厳密な構造は既に述べたように供給源により違っており、また各三糖単位の反復数も同様である（典型的にはそれぞれ８〜１５個であるが、必ずしも両者が同じ数とはならない）、たとえば、・ヘパリンナトリウム四糖単位は２個のＤ−グルコサミン−Ｌ−イズロン酸二塘単位もしくは２個のＤ−グルコサミン−〇−グルクロン酸三糖単位から（この二種類の単位を各１個ずつからではなく）構成されることも十分に可能であり、また別のヘパリン試料が上記の３種類の四糖単位をいずれも含有することも十分にありうる０本明細書で用いた「〔ヘパリン単位〕」なる表現は、上で説明したようにナトリウムカチオンの一部もしくは全部が当然に存在しないことを別にすれば、このような各種の単位のすべてを包含する意味である。本発明の任意のヘパリン多重体において、ヘパリン単位は、その多重体を誘導するのに使用したヘパリンナトリウム試料中に存在していた単位と、ナトリウム含有量の違いを除いて全く同じものとなろう。

本明細書で用いた「ポリオール」なる用語は、単糖、オリゴ塘、Ｃ６〜Ｃ１，脂環式ポリヒドロキシ化合物またはＣ２〜Ｃ＋ｉ脂肪族ポリヒドロキシ化合物、すな沙ち下記一般式で示される化合物である。

において、ヒドロキシ基は通常はポリオール主鎖もしくは骨格中の炭素原子上に位置しているが、場合により、特に単糖もしくはオリゴ糖の場合には側鎖メチル基に位置することもある。

ポリオールが脂肪族ポリオールである場合、これは好ましくはグリセロール、エリスリトール（テトラヒドロキシブタン）もしくは１．２．６−　）リヒドロキシヘキサンのようなＣ３〜Ｃ＋アルキルポリオールである。

ポリオールが脂環式ポリオールである場合、これは好ましくはＣ２〜Ｃ３゜シクロアルキルもしくは縮合環完全水素化芳香族ポリオール（例、シクロヘキサンもしくはデカヒドロナフタレン系ポリオール）である、特に好ましいシクロアルキルポリオールは、植物および微生物中に広く存在する無毒物質であるイノシトールである。分子式ＣｂＨＩｚＯｈを有するイノシトールには可能な立体異性体が廣数ある。次に示すのは、天然で最も普通の形態であるｃｔｓ−１，２，３，５ −ｔｒａｎｓ−４，６−シクロヘキサンヘキツールの構造である。

ポリオールが単糖である場合、これはベント−・ス、ヘキソースもしくはヘプトースであるのが好ましい。かかる単純なＷ類の好適な例には、リボース、アラビノース、キシロースおよびリキソースなどのアルドペントース類；リブロースおよびキシルロースなどのケトペントース類；グルコース、ガラクトースおよびマンノースなどのアルドヘキソース類；フルクトース、ソルボースおよびタガトースなどのケトヘキソース類；ならびにマンノヘプツロースおよびセドヘプツロースなどのケトヘプトース類がある０本発明で使用可能な代表的ないくつかの単糖の構造を次に示す。

β−Ｌ−アラビノース　α−Ｄ−リボフラノース　α−Ｄ−キシロースα−Ｄ− リキソース　Ｄ−リブロース　し−キシルロースα−ローグルコース　α−Ｄ− ガラクトース　α−Ｄ−マンノースβ−Ｄ−フルクトース　し−ソルボース　Ｄ −タガトースポリオールがオリゴ糖、すなわち酸加水分解により２〜８個の単糖単位を生ずる炭水化物である場合、これは三糖、三糖もしくはシクロデキストリンであるのが好ましい０代表的な三糖類はスクロース、ラクトースおよびマルトースである。

代表的な三糖類はラフィノースである。シクロデキストリン、すなわちシクロアミロースは、均質な環状のα−（１−４）結合Ｄ−グルコビラノース単位である。α−シクロデキストリンは６単位を含有し、β−シクロデキストリンは７単位を含有し、Ｔ−シクロデキストリンは８単位を含有する０本発明で使用可能な代表的なオリゴ糖の構造を次に示す。

スクロース　ラクトースマルトース　ラフィノース α−シクロデキストリン本明細書で使用した「０１〜Ｃ，アルキル」および「０１〜Ｃ？アルキル」なる用語は、表示範囲内の炭素数を存する直鎖もしくは分岐鎖の基を意味し、たとえばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ならびに炭素数が４以上のアルキル基の場合にはより高級の類似の基、たとえばブチル、ペンチル、ヘキシルおよびヘプチル基、ならびに対応する分岐鎖異性体、たとえばイソブチルおよびｔｅｒｔ−ブチル基である。

ｒＲ”’　は天然アミノ酸の対応部分と同一の基を意味する」という記載は自明であろう、たとえば、Ｒ＋　＋　＋　は、水素（グリシンの場合）、メチル（アラニンの場合）　、−ＣＨ（ＣＨ３）２（バリンの場合）　、−ＣＨｚ−ＣＩ（ＣＨｓ）　ｔ　（ロイシンの場合）。

の場合）、−Ｃ）ｌｔＯＨ（セリフの場合）、−Ｃ）ｌＱｔｌ−Ｃ）Ｉ３（スレオニンの場合”）　１１．（ＣＦＩ山−５ＣＨｉ　（メチオニンの場合）１、ＣＨ２−Ｃ０Ｎ１１ｔ　（アスパラギンの場合）、、　−ＣＨｔＣＨｌ−ＣＯＮＦＩＲ（り′ル−（：ｌ、ＳＨ（システィンの場合）　、−（：［ＩｔＣＯＯｌ（（アスノぐラギン酸の場合）、および、ＣＨｚＣＨ＊Ｃ０ＯＨ（グルタミン酸の場合）である。

和単環式第ニアミンの残基を表している場合、かかる単環【よ５〜７員環のものであって、場合により表示の窒素原子のほかに別のへテロ環原子（−〇−１−８ −もしくは−Ｎ−）を含有していてもよく、またメチルのような１もしくは２以上単環式第ニアミンの残基の例は、モルホリへ、１−ピロリジニル、ベルヒドロ −１，２，４−オキサチアジン−４−・イル、１−もしくは４−ピペラジニル、４−メチル−１−ピペラジニル、ピペリジノ、ヘキ号メチレンイミノ、２−メチル−１−ピラゾリジニル、１−もしくは２−ピラゾリジニル、３−メチル−１− イミダゾリジニル、なら、びに１−もしくは３−イミダゾリジニル基である。

−ａ式（Ｉ）のＲｏが構造（ａｌである場合、Ｒ＝ｗは好ましくはメチル基であり、−〇〇〇−基は好ましくは３位に位置する。一般式（１）のＲｏが構造（ｂｌである場合、Ｒｔｖは好ましくはメチル基であり、−Ｃ）１２ｃＯｏ−基は好ましくは３位に位置する。一般式（１）のＲｏが構造（Ｃ１である場合、Ｒｉｙは好ましくはメチル基であり、−ＣＨｚＯＣＯＯ−基は好ましくは３位に位置する。一般式（１）のＲ“が構造＋ｄ）である場合、好ましくはＲｏおよびＲｏは共にメチル基もしくは共に二チル基のいずれであるか、またはＲ’Ｒ″Ｎ−基がモルホリノ、ピペリジノ、１−ピロリジニルもしくはｌ−ピペラジニル基を表し、Ｒ１１ｌは好ましくはメチル基でありｔ「アルキレン」は好ましくは一？トであり、そしてＲ゛パ好ましくはＨ，−ＣＨ，、−ＣＢ（ＣＨｓ）ｚ、くは−Ｃ）１．ｃＨ！−であり；Ｒｖは好ましくはＨもしくは−ＣＯＮＨ１である。特に、構造中の１もしくは２以上の各構造記号の意味がこの節で上述した好ましいものであれば、構造ｆａｔ、ｆｄ）および［ｅ）が特に好ましい。

一般式（１）において、ｐがｎに等しく、（ｎ　−ｐ）がゼロとなることもまた好ましい、その場合、本発明のヘパリン多重体は次の一般式で表すことができる。

式中、各構造記号の意味は前記に一般的に説明したとおりである。特に好ましい一般式（Ｉａ）の多重体は、１もしくは２以上の構造記号が、前節で説明した好ましい種類のものから選ばれたものである。

一般式（１）および（Ｉａ）の多重体に少なくとも４個のＲｏ基が存在することもまた好ましい、さらに、一般式（１）および（Ｉａ）のｒは５．６または７であることが好ましい。

○がイノシトールの骨格であり、ｎは６、ｐは６、■は５、ｒは５、そしてＳは６である。

ヘパリン酸アニオンと第四アンモニウムカチオンとのこの相互作用により生成した「イオン対」複合体すなわち多重体は、疎水性であり、腸から吸収可能であることが予想される。

この強力なイオン性相互作用により、生成したイオン対には高度の安定性が付与されると思われる。生成物の複雑性と高い疎水性から、吸収前、吸収後または吸収中のいずれであろうと、解離は緩慢となることが予想され、したがって、ヘパリン酸の緩慢な放出と作用持続時間の長期化とが得られよう。

一般式（■）、の多重体は多様な慣用の合成法により製造できる。１つの一般的な方法は、選択した上記一般式（ＩＩ）のポリオールを次式で示される第四級酸塩と結合させることを利用する。

（ａ’）　（ｂ”）　（ｅ″）式中、各構造記号の意味はそれぞれ構造（ａｌ、偽）、（Ｃ１、（ｄｌおよびｆ８＋に関して前に説明したのと同じ意味であり、Ｘ−は薬剤用に許容される有機もしくは無機酸のアニオンである。結合、すなわちエステル化は、ポリオール中のヒドロキシル基がなるべく多くエステル化されるように過剰の酸反応物質を使用して、適宜の有機溶媒中において、ジシクロへキシルカルボジイミドのような適当な結合剤の存在下で一般に実施される。

他のエステル化法、たとえば混合酸無水物の使用なども有機化学の分野の当業者には当然明らかであろう。得られた新規な中間体は次の構造式で示すことができる。

説明したとおりの意味であり；Ｘ−は薬剤用に許容される酸（例、塩酸、硫酸もしくは臭化水素酸などの無８１酸、または酢酸、シュウ酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、マロン酸、メタンスルホン酸もしくは安息香酸などの有機酸）のアニオンを意味し：ｔはこの酸アニオンの原子価であり；ｑは、これにｔを乗じたときにｐに等しくなる数である。すなわち、Ｘ ′−が１価のアニオンである場合、ｑはｐに等しく；このアニオンが２価の場合には、ｑはｐ／２に等しく；またこのアニオンが３価の場合には、ｑはｐ／３に等しくなる。また、ｎ−ｐがＯになるようにｐがｎに等しいことも好ましく、その場合の第四級中間体は次式で示されることになる。

式中、各構造記号の意味は上に説明したとおりである。好ましいポリカチオン性第四級中間体は、既に上で説明した好ましい一般式（１）のイオン対を生ずるようなものである。特に好ましい一般式（Ｉ）の中間体は、無毒な天然物質から誘導され、それ自体も無毒であって、しかも代謝により無毒成分になるものである。現在の時点で好ましい第四級中間体は、ポリオールとしてイノシトールと、第四級化された酸部分としてトリゴネリン（多くの植物の種子に存在し、ニコチン酸を摂取した後に尿中に排泄される物質）およびベタイン（植物および動物に広（分布する物質）とから誘導されたものと考えることができる。トリゴネリンとベタインの構造は次のとおりである。

トリゴネリン　ベタイン −ａ式（Ｉ［［）の新規な第四級エステル中間体は、次いで好都合にはヘパリンナトリウムと水性媒質中で反応させて、目的とする一般式（Ｉ）の多重体を形成する。典型的には、この工程では両者の反応物質を当量づつ使用する。この工程においては、可及的に多く、すなわち少なくとも３個、より一般的には５〜７個のナトリウムイオンを第四級エステル基で置換するようにする１次の説明に拘束されることは望まないが、ヘパリンナトリウムがこの明細書の最初の方で示した構造を有する場合、１つの四糖単位につき７個あるナトリウムカチオンのうち、Ｃｏ１−基に結合しているＮａ”はＳＯ３−基に結合しているＮａ”より強く保持されているので、本発明で用いるカチオン部分との置換がより容易であり、一般に少なくとも５個ある５０２−アニオンはこの新たなカチオンと結合するようになると考えられる。

なお、本発明の多重体のその他の合成経路にも現時点で好ましいものがある。たとえば、Ｒ゛が構造（ａ）、山）、ｆｅ）もしくはｆｄｌである一般式（Ｉ）の多重体に対して現時点で好ましい製造方法は、まず選択した一般式（ＩＩ）のポリオールを、構造式で示される第三級カルボン酸または相当する酸ハロゲン化物（例、塩化物）もしくは無水物と結合させることである。上記式中、各構造記号の意味は、それぞれ構造（ａｌ、中）、ｆｅ）およびｆｄｌに関して既に説明したのと同じ意味である。エステル化剤が酸である場合、この方法は典型的には、ピリジン、アセトニトリルもしくはジクロロメタンなどの適宜の有機溶媒中でジシクロへキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）などの適当な結合剤の存在下に行われ、溶媒は使用する反応物質め種類に応じて適当に選択する。エステル化剤が酸無水物（たとえば、相当する酸とホスゲンとの反応により製造）である場合、ピリジンのような有機溶媒が使用できる。エステル化剤が酸塩化物（たとえば、相当する酸を、塩化チオニルもしくはオキシ塩化リンのような塩素化剤と反応させて製造）である場合、溶媒の選択は、使用する反応物質の種類のみならず、酸塩化物をエステル化工程の前に単離するか否かによっても異なってくる。たとえば、酸塩化物を塩酸塩として単離する場合、この塩はクロロホルム中でポリオールと反応させるのが好都合である。また、酸をまずＰＯＣＩｓと反応させ、次いでこの反応混合物にポリオールを添加する場合には、この両工程ともピリジン中で好都合に実施できる。エステル化剤が何であろうと、これを過剰に使用し、ポリオール中のヒドロキシル基をなるべく多くエステル化するようにする。たとえば、ポリオールとしてイノシトールを使用する場合、６倍もしくはそれ以上過剰のモノカルボン酸もしくは酸塩化物を使用する（すなわち、ポリオール１モルに対して６モル以上の酸もしくは酸塩化物を使用）、構造（ｄ２）の酸または相当する酸塩化物もしくは無水物から出発する場合、この構造中のＲｌ　ｌ”基は、ポリオール構造との結合を妨害する恐れのある遊離のヒドロキシル、チオールもしくはカルボキシル官能基を含有していないことが好ましい。ただし、かかる官能基は、所望により、アシル化に先立ってエステル基（例、Ｃ０〜Ｃ１低級アルキルエステル）により好都合に保護し、アシル化後に保護基を離脱させることも可能である。また、Ｒ゛′°′°基中するカルボキシル官能基は、使用するポリオールが充分な量のヒドロキシル基を含有するものである場合には保護する必要はない；たとえば、Ｒ°°°基が−ＣＨｚＣＨｚＣＯＯＨである場合、各アミノ酸は２個のヒドロキシル基と結合するから、充分なＲ基（すなわち、少なくとも３個）を含有する゛アシル化誘導体を与えるためには少なくとも６個のヒドロキシル基がポリオール中に存在している必要があろう。

上述したようなＲ゛が構造＋ａ＋、山）、（ｃｌもしくはｆｄｌである一般式（Ｉ）の多重体に対して現時点で好ましい製造方法の上記第１工程の生成物は、次の一般式で示すことができる。

式中、○、ｎおよびｐは一般式（１）に関して上に説明したのと同じ意味であり、Ｒは前述した酸（ａ”）ないしくｄ”）の１つの残基である。すなわち、Ｒは次のいずれかである。

式中、各構造記号の意味は、それぞれ上記構造（ａｌ、（′ｂ）、（Ｃ１およびｆｄｌに関して説明したのと同じ意味である。一般式（ＩＶ）において、ｎ−ｐ −Ｑになるようにｐがｎに等しいことが好ましく、その場合のアシル化生成物は次式で示されるものとなる。

式中、Ｒおよびｎは上に説明したのと同じ意味である。

一般式（ｍのアシル化生成物（アシレート）は次いで第四級化される。この反応は、ジメチルホルムアミドのような適宜の溶媒中で、Ｃ，−Ｃ，アルキルハロゲン化物（Ｒ”−Ｈａｌ）、好ましくはヨウ化メチルで処理することにより一般に行われる。一般式（ｍのアシレートを、ジメチルホルムアミド中で過剰のアルキル化剤とともに少なくとも４８時間加熱（例、約５０℃で）することが好ましい、アニオンが！−もしくはその他のハロゲンイオンである得られた第四級化アシレートを、この得られたものとは別のアニオンにしたい場合には、次いでアニオン交換処理を施すことができる。かかるアニオン交換は、アニオン交換樹脂により、あるいはより好都合には、Ｋａｍｉｎｓｋｉ　ｅｔ　ａｌ、テトラヘドロン（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ）、　３４＋　ｌ）Ｐ。

２８５７−２８５９　（１９７８）に記載の方法を使用して実施することができる。　Ｋａｍｉｏｓｋｉらの方法によると、薬剤用に許容される有機もしくは無機酸ＨＸのメタノール溶液を第四級アンモニウムハロゲン化物と反応させて、ハロゲン化メチルと相当する第四級・Ｘ塩を生成させる。第四級化とその後の所望により行うアニオン交換とにより、前記一般式（ＩＩＩ）で示される新規な化学的中間体が生成する〔式中、Ｒ゛は一般式（１）に対して説明した構造ｔａ＋、（ｂｌ、（Ｃ）もしくはｆｄｌである〕、やはり、好ましい一般式（ｍ）の化合物は、上に述べた最初の合成経路に関して説明したものと同じである。やはり同様に、この新規な中間体を次いで上に既に説明したようにしてヘパリンナトリウムと反応させて、相当する一般式（Ｉ）のヘパリン多重体を生成させることができる。

Ｒ゛が構造ｔｅｌである一般式（１）の多重体の現時点で好ましい製造方法は、次のｍ式もしくは（ＶＩ）式で示される出発物質を使用した方法である。

Ｚ−フルー１ｚン−ＣＯＯＨ（Ｖ）Ｚ−アルキｌ／７−ＣＯＹ　（Ｖｌ）式中、ＺはＣＩ、Ｂｒもしくは■を意味し；「アルキレン」基は炭素数１〜３であって、直鎖でも分岐鎖でもよく；ＹはＣＩもしくはＢｒである。一般式（Ｖ）もしくは（ｍの出発材料を、まず上記一般式（ＴＩ）のポリオールと反応させて、次式で示される中間ポリエステルを生成させる。

格であり、ｎはこのポリオール中のヒドロキシ基の総数を表す３〜約２４の数であり、ｐは≧３かつ≦ｎの数である）；そして「アルキレン」およびＺは上の一般式（Ｖ）および（ｍに関して上述したとおりの意味である。一般式（Ｖ）の出発材料を使用する場合、反応はジシクロへキシルカルボジイミドのような適当な結合剤の存在下に行われる０代わりに、混合酸無水物もしくは活性化エステルを使用してもよい、一般式（■工）の出発材料を使用する場合、反応はハロゲン化炭化水素溶媒（例、クロロホルム）中において、トリエチルアミンのような酸掃去剤の存在下で一般に行われる。得られた一般式（■）のポリエステルは、次いでこのポリエステルを、ニトロメタン、ジメチルホルムアミド、アセトニトリル、アセトン、テトラヒドロフランもしくはエチルエーテルのような極性溶媒中で、一般式（式中、Ｒ９はＨ，−ＣＯＮＨｚもしくは−Ｃｏｏ（Ｃ１〜Ｇ？アルキル）基であって、２．３もしくは４位に位置する）で示される過剰の反応物質と接触させた後、結晶化により単離することによって、Ｒ゛が構造Ｆａ＋である一般式（Ｉ［［）の目的とする第四級エステル中間体に転化させる。こうして得られたアニオンがＣＩ−、Ｂｒ−もしくはＩ−である新規な第四級中間体は、これを別のアニオンが存在する中間体にしたい場合には、次いでアニオン交換処理（アニオン交換樹脂または前述のＫａｗｉｎｓｋｉらの方法を利用）することもできる。かかる新規な第四級中間体はいずれも、次いで上述したようにしてヘパリンナトリウムと反応させて、一般式（Ｉ）で示される相当するヘバリン多重体とすることができる。

一般式（Ｉ）の多重体、特にＲｏが一般式（Ｉ）に関して上に説明した構造（ａｌである多重体の非常に望ましい別の製造方法は、出発材料として活性化エステル、第四級化活性化エステルもしくは第四級化酸無水物を使用した方法である。

出発材料として活性化エステルを使用してＲｏが構造（ａｌである一般式（Ｉ）の多重体を製造するには、使用する一ＩＩＩ（ＴＩ）のポリオールに対して、構造式で示される活性化スクシンイミジルエステルまたはフタルイミジルエステルあるいは類似の活性化エステル（たとえば、ニコチン酸などの適当な酸を、それぞれＮ−ヒドロキシスクシンイミドまたはＮ−ヒドロキシフタルイミドと反応させることにより調製）をまず作用させる。得られた一般式（ＴＶ）の中間体は、次いで上に詳述した方法（すなわち、Ｒ”−Ｈａｔによる第四級化と所望により行うその後のイオン交換）の後、かくして得られた新規な一般式（Ｉｌｌ）の塩にヘパリンナトリウムを作用させることにより一般式（ｒ）の誘導体に転化させる。

第四級化活性化エステルを出発材料としてＲｏが構造（ａｌである一般式（Ｉ）の多重体を製造するには、上に示したスクシンイミジルもしくはフタルイミジルエステルのような活性化エステルをまずＲ′ゞ−Ｈａｌにより第四級化し；次いで所望により得られた第四級化された活性化エステルをイオン交換した後、使用する一般式（ＩＩ）のポリオールを作用させて、目的とする一般式ＣＩ［［）の中間体とし、次いでこれをヘパリンナトリウムと反応させて、一般式（１）の多重体を得る。

第四級化酸無水物を出発材料としてＲｏが構造（ａｌである一般式（１）の多重体を製造するには、所望の無水物（例、ニコチン酸無水物）に適当な溶媒（例、アセトニトリル）中で２モル過剰のＲ”−Ｈａｌを作用させて、一般式（この構造式中、各構造記号の意味は上記と同じである）で示される第四級化された無水物をまず調製する。反応混合物を一般には４８時間還流攪拌する。得られた第四級化酸無水物に次いで、適当な溶媒（例、ピリジンもしくはピリジン／ジメチルホルムアミド）中で、使用する一般式（ＩＩ）のポリオールを作用させて、目的の一般式（ｍ）の中間体とし、次いでこれをヘパリンナトリウムと反応させて、一般式（Ｉ）の多重体を得る。

上述した製造方法の各種変更例のいずれにおいても、最終工程は、一般式（ｍ）の新規な第四級中間体にヘパリンナトリウムを作用させて、相当する一般式のヘパリン多重体を得る工程である。これらのどの方法でも、この最終工程は、まず一般式（Ｉ［［）の第四級中間体をイオン交換処理して、Ｘ−をヘパリン酸と反応させて一般式（Ｉ）の誘導体を得るという２工程法に変更することもできる。

この第１工程においては、強塩基性アニオン交換樹脂を使用して、ニーもしくはその他のＸ−基をＯＨ−基に交換する；一般式（Ｉ［［）の中間体を一般には水に溶解させ、イオン交換樹脂のカラムに通し、このカラムを水で洗浄して、次式で示される相当する化合物を溶（ＩＩ）に関して説明したのと同じ意味である。

得られた中間体を次いで一般には水もしくは水／アルコール中においてヘパリン酸と反応させると、ヘパリン単位の原子価ｒが７である一ｉ式（１）の相当する化合物が得られる。

上に詳述した合成法により製造される最終生成物および中間体の単離と精製は、通常の分離手段、たとえば溶媒抽出、希釈、再結晶、カラムクロマトグラフィーもしくは精製用薄層クロマトグラフィーにより容易に実施できる。

一般式（Ｉ）で示される多重体は、通常の経口、鼻腔もしくは肺（すなわち、口腔吸入）投与により温血動物に都合よく投与でき、その場合に一般式（Ｉ）の有効成分は、好ましくはそれぞれ経口用、鼻腔用もしくは膝用の薬剤に許容される適当な無毒で不活性な担体材料と混合される。かかる担体材料は製剤の分野の当業者には周知である。当業者でない場合には、レミントンズ・ファーマシューティカル・サイエンシズ（ＲＥＭＩＮＧＴＯＮ’Ｓ　ＰＨＡＲ？１ＡＣＥＵＴＩＣＡＬ　５ＣＩＥＮＣＥＳ）、第１４版、　１９７０年発行を参照されたい。

経口投与用の代表的な単位剤形（例、錠剤もしくはカプセル剤）にあっては、を効抗凝固量の一般式（りの任意の多重体が、乳糖、デンプン（製剤用）、リン酸二カルシウム、硫酸カルシウム、カオリン、マンニトールもしくは粉糖などの薬剤に許容される無毒で不活性な経口用担体と混合される。

必要もしくは所望により、適当な結合剤、滑剤、湿潤剤、界面活性剤、崩壊剤、着色剤、香味剤および防腐剤をさらに混入することもできる。代表的な結合剤としては、デンプン、ゼラチン、シ５糖、糖蜜および乳糖などのｔｆＭ類、アラビアゴムなどの天然もしくは合成ゴム、アルギン酸ナトリウム、カラゲーナンエキス、カルボキシメチルセルロース、メチルセルロース、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール、エチルセルロース、ならびにロウなどが挙げられる。

前記の剤形に使用される代表的な滑剤としては、ホウ酸、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム、ロイシン、およびポリエチレングリコールが挙、げられるが、これらに限定されるわけではない、Ｊ当な崩壊剤としては、他にもあるが、デンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、セルロース、木材製品、アルギン酸、グアーガム、シトラスバルブ、カルボキシメチルセルロース、およびラウリル硫酸ナトリウムが挙げられる。この薬剤組成物中に存在させる有効成分の量は、−ＩＣには全組成物の約１〜約７０重量％であろう。

鼻腔および口腔吸入治療用の代表的な剤形および担体は、所望の剤形の種類の詳しい性質、たとえば、一般式（１）のイオン対を鼻腔用溶液剤もしくは懸濁液剤（典型的には点鼻薬もしくは算用スプレー荊として使用）、鼻用軟膏剤、クリーム剤もしくはゲル剤、または口腔吸入用製剤のいずれの形態に製剤するかに応じて明らかに違ってくる。鼻腔投与用の好適な剤形は溶液剤であり、これは有効成分のほかに多量の水を含有する。微量のその他の成分、たとえばｐＨ調整剤（例、ＮａＯＨなどの塩基）、乳化剤もしくは分散剤、緩衝剤、防腐剤、ｆＡ潤剤、ならびにゼリー剤（例、メチルセルロース）もまた存在させうる。特に好ましくは、鼻腔用組成物は滅菌した等張の緩衝水溶液剤もしくはポリエチレングリコニル中の懸濁液剤である。鼻腔用組成物中のヘパリン多重体の量は、当然、使用する多重体の種類および選択した剤形の種類に応じて変動しよう、一般には、この組成物は、一般式（１）の多重体を０．０１〜５％、好ましくは０．２５〜２．５％の量で含有しよう。換言すると、溶液剤もしくは懸濁液剤１１につき０．１〜５０■、好ましくは２．５〜２５■の一般式（１）の多重体を含有する０口腔吸入治療用の場合には、かかる投与経路に対して一般に製剤化されている組成物を使用できるが、好ましい剤形は所望の一般式（１）の多重体と高圧ガスとしてフルオロクロロハイドロカーボンとを含有する口腔吸入用エアゾール剤である。

特に好ましくは、このエアゾール剤は正確な用量での投与を可能にする計量機構を備えたものである。１回の吸入で、典型的には０．１〜５０■、好ましくは２．５〜２５ｇの一般式（１）の多重体を供給する。

本発明の多重体の治療用量範囲は、投与を受ける個体のサイズと必要度、および投与に使用する多重体の種類により変動しよう、一般に、本発明の「イオン対」の経口投与は、ヘパリンナトリウム自体を経口投与する場合に必要なものと比べて、重量ではるかに少量（例、半分以下）かつ少ない回数で投与できる。２４〜４８時間毎に１回程度の間隔のあいた投与も本発明の特定のイオン対の使用により可能となる。鼻腔もしくは吸入による投与を採用する場合にも、投与用量および頻度は上記の本発明のイオン対の経口投与の用！および頻度と同様でよいが、鼻腔および吸入治療用にはより少量の用量で回数を多くすることが好ましいこともある。いずれにしても、採用した投与経路での投与量は、本発明の多重体の製造で算出することができ、この新たな単位／■力価は、分子量の増大に基づいて算出される。与えられる単位数は、ヘパリンナトリウムの場合に現在非経口で使用されているものの約２〜１０倍となろう。

本発明およびその利点をさらに説明するために、以下に具体的な実施例を挙げるが、これらの実施例は単に例示として示したのであって、制限を目的としたものではないことは理解されよう、以下の実施例において、融点はすべて電熱式毛管融点測定装置を使用して得た未補正の値である０元素分析は、米国ジョーシア州アトランタのアトランティック・マイクロラボ社（Ａｔｌａｎｔｉｃ　Ｍｉｃｒｏｌａｂｓ＋　Ｉｎｃ、）で実施した。　Ｃ，ＩＩ。

Ｎの分析値を示したすべての場合において、分析材料の元素分析値は計算値の± ０．４の範囲内であることが認められた。

去舅皿よ蒸留した乾燥ピリジン１３５　ｍｌ中の乾燥ニコチンＭ５０　ｇ　（０゜４１モル）のＱｉ液に、オキシ塩化リン（ＰＯＣＩａ）　３４　ｇを加えた。この反応混合物を６０℃で１時間攪拌した後、叶０−イノシトール１２．３　ｇ　（０，０６８モル）を添加した。得られた混合物を攪拌しながら８０℃に３時間保持した後、氷冷水２００　ｍｌに投入した。析出した微細な黄白色固体を暗褐色の母液から濾別し、よく水洗した後、１５０℃の真空乾燥器で乾燥した。この固体をクロロホルム／エーテル溶媒ベアから結晶化させると、４５ｇ（収率８２％）のイノシトール・ヘキサニコチネート　（１）が得られた。この生成物は融点が２５８−２６０℃であり、次の構造式で示すことができる。

ジメチルホルムアミド２００　ｍｌにイノシトール・ヘキサニコチネート　（１）　２．０　ｇ（２，５ミリモル）をとかした溶液に、ヨウ化メチル１１．２　ｇ　（０，０８モル）を添加した。この混合物を攪拌下に５０℃で４８時間還流加熱した。析出した微細な黄色固体を濾別し、アセトンで洗浄し、１００℃で真空乾燥した。７８％の収率（３，２ｇ）で得られた生成物は、融点２５０−２５３℃（分解）のイノシトール・ヘキサ（１−メチル−３−ピリジニウムカルボキシレート）へキサヨーシト（２）であった。Ｎ　Ｍ　Ｒ（ＩｌｇＯ）６９．６− ７．９６　（ｍｓ、　２４Ｈ，ピリジニウムプロトン）、　６．７−６．６（ｍ。

６Ｌ　イノシトールプロトン）、　４．４　（ｓ、１８Ｈ，６Ｃ１（ｓ−Ｎ”）　。

分析値＜ｃａ、Ｈ４５ｘｂＮｂｏ＋ｔ＞　Ｃ，Ｈ９Ｎ−コノ生成物ハ下記ｆｌ造式で表すことができ、また、ヘキサ（Ｎ−メチルニコチノイルオキシ）−ｃｉｓ−１，２，３゜５−ｔｒａｎｓ−４＋６−シクロヘキサン・ヘキサヨーシトと命名することもできる。

ｍｌジメチルホルムアミド２００　ｍｌにイノシトール・ヘキサニコチネート　（１）　２．０　ｇ（２，５ミリモル）をとかした溶液に、ジメチルサルフェート６．６　ｇ　（０，０５３モル）を添加した。この混合物を攪拌下に６０℃で４８時間加熱した。エーテル添加により析出した粘着性の黄色残渣をアセトンで反復洗浄し、５０℃の真空乾燥器で２４時間乾燥した。かくして、２．５　ｇ（収率６４％）のイノシトール・ヘキサ（１−メチル−３−ピリジニウムカルボキシレート）へキサ（メチルサルフェート）（３）が非常に吸湿性の黄色固体として得られた。　Ｎ　Ｍ　Ｒ（ＤｚＯ）　６９．６０−８．０３（＋ｍｓ、　２４Ｂ、ピリジニウムプロトン）、　６．６−６．５　（＋ｅ、　６Ｂ、イノシトールプロトン）、　４．４６　（ｓ、　１８Ｌ　６　Ｃ■、−Ｎつ、　３．５６　（ｓ、　１８Ｈ。

６　ＣＨｉ−Ｏ５（ｈ）−分析値（ＣｓａＨｈＪｈＯ，ｈＳ・６ＨｚＯ）　Ｃ，Ｈ，Ｎ　。

ヘキサ（Ｎ−メチルニコチノイルオキシ）−ｅｉｓ−１＋２＋３＋５−ｔｒａｎｓ−４，６−シクロヘキサン・ヘキサ（メチルサルフェート）と命名することもできるこの生成物は、下記構造式で示すことが第四級塩（２）または（３）１　ミリモルを水１０　ａ＋１にとかした溶液を、水１０　ｍｌ中ヘパリンナトリウム１．１４　ｇ　（１７Ｂ、６　ＵＳＰ単位／■ｇ、１２χＮａ）の溶液に、攪拌しながら加えた。沈殿は認められなかった。水１００　ｍｌで希釈後、黄色の油滴が分離してきた。水層をデカンテーションにより除去し、残留する油状物を水で数回充分に洗浄した。充分に水分を切った油状物をアセトン５０　ｍｌで研和した。油状物は固化して光沢ある黄色固体となり、これはを機溶剤に実質的に不溶であった。この生成物の量は１．６　ｇ（理論量の８４％）であり、２１０　’Ｃで分解した。ヘキサヨーシト型の第四級塩（２）を使用した方が、ヘキサ（メチルサルフェート）型の第四級塩（３）を使用した場合に比べ、より純度が高く、処理の容易な生成物を生じた。提示の化学式（ＣｔＪｚ４ＮａｚＮｚＯｚｓＳｓ）ａ’−Ｈ（ＣｉｓＨ４，ＮｈＯＩｚ６ＨｚＯ＞ｓ”に対するＣ、　ＩＩ、　ＮおよびＳについての微量分析の結果は次のとおりであった。計算値：　Ｃ，３９，３２；　Ｈ，４，１４；　Ｎ、　５．０１ｉ　Ｓ。

８．１９：　実測値：　Ｃ，３９，１４，Ｈ，４，７２Ｓ　Ｎ、　５．６０；　Ｓ、　７．６４　。

得られたヘパリン・ヘキサ（Ｎ−メチルニコチノイルオキシ）−ｃｉｓ−１，２，３，５−ｔｒａｎｓ−４，６−シクロヘキサン多重体（４）ハ次ノ構造式で示すことができる。

この生成物の抗凝固活性はヘパリンナトリウムのナトリウム含有量に基づいて１０７．６車位／ｌａｇであると算出された。

大施五ｌ水１０圀１中のヘパリンナトリウム１．１４　ｇ　（１７８，６ＵＳＰ　ｊｌ／ｌａｇ、　１２χＮａ）の溶液に、水１０　＋ｉｌにＮ、Ｎ−ジメチル−Ｎ−ドデシル−Ｎ−（β−ヒドロキシエチル）アンモニウム・ゾロミド６ミリした．混合物を遠心分離し、残渣を充分に水洗し、真空デシケータで乾燥した．この間に白色塊は、ヘパリン・Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−　ドデシル−Ｎ−（β− ヒドロキシエチル）アンモニウムイオン対（５）の無色透明なプラスチック様塊状物に変化した。

この生成物はメタノールとエタノールには可溶であったが、水、エーテル、クロロホルムもしくはジクロロメタンには不溶であった。

２施■立実施例１で使用したニコチン酸に代えて当量の次に列挙する出発材料をそれぞれ使用し、実施例１に詳述した方法を実質的蝉繰り返すことにより、適当な単離処理後に次式で示される生成物が得られる。

■　ト　■ 八ス亙烈工実施例１で使用したイノシトールに代えて当量の次に列挙する出発材料をそれぞれ使用し、実施例１に記載の方法を実質的に繰り返すと、適当な単離処理後に、次に表示する生成物が得られる。

０’）　ロ −へへ　〜去血炎主実施例１で使用したイノシトールに代えて当量の次のＡｉに列挙する出発材料をそれぞれ使用し、実施例１で使用したニコチン酸に代えて当量の次のＢｉに列挙する出発材料をそれぞれ使用すると、実施例１の方法により下記の生成物が得られる。

宮　へ一ノ　ζノ８　８　。

の　８叉施且ｌ実施例６．７および８の各生成物を実施例２に記載の一般的方法により第四級化すると、適当な単離処理後に、下記の生成物が得られる。

−＠ａ　＋４ＩＯ１０口の寸スｍ立実施例４で使用した第四級塩（２）もしくは（３）に代えて当量の害施例９で調製した各第四級塩を使用して、実施例４に記載の一般的方法を繰り返す。ただし、ヘパリン６−もしくはヘパリン１のイオン対が目的物である場合には反応条件を適宜変更する。適当な単離処理後に、下記の本発明のヘパリン多重体が得られる。

Ｉ／）（コｑコ　ｑ）ａり　Ｗ　Ｕつト　ト　トロ　−　へＣＯの　（１）臣　国梠スＩＬＬＬ１．０モルのエリスリトールと５．０モルのＢｒ−Ｃ）ＩｚＧＨｚＣＯＣｌとをクロロホルム（エリスリトール１３０ｇにつきクロロホルム２５　ｍｌ）中で混合し、５．０モルのトリエチルアミンを添加する。

この混合物をクロロホルムの沸騰点に加熱し、この温度に約４時間保持した後、水、炭酸水素ナトリウム水溶液および水で順次洗浄し、蒸発させる。残渣は構造式で示される完全にブロモアセチル化された中間体であり、これを次いでジメチルホルムアミド（上記中間体１．Ｏｇにつきジメチルホルムアミド２５１）に溶解し、過剰のニコチンアミド（上記中間体１．０モルに対して８．０モル）を添加する。この混合物を６０〜７０℃に加温し、この温度に約２４時間保持する。

アセトニトリルを加えて沈殿を完結させ、沈殿を濾別し、乾燥する。得られた構造式で示される新規中間体は、実施例４に記載の方法によりヘパリンナトリウムと反応させると、次式で示される本発明の多重体を形成することができる。

上の述べた一般的方法を、エリスリトールに代えて当量のα−Ｄ−リポフラノースを使用して実質的に繰り返すと、第１工程で次式で示されるブロモアセチル化中間体、第２工程で次式で示される新規な第四級中間体、そして、第３工程で次式で示される本発明のヘパリン多重体が得られる。

イノント−ルＣＯモル、ピリジニウム酢酸プロミド（ピリジンとブロモ酢酸とを反応させて調製）６．６モルおよびジシクロへキシルカルボジイミド６モルをとリジン（イノシトール１．０　ｇに′つき３０ｍ１：ｌ中で混合する。この混合物を室温で約４〜６時間攪拌する。適当なｊ１１離および精製処理後、下記の新規な中間体が得られる。

この新規な中間体を実施例４に記載の方法によりヘパリンナトリウムと反応させると、下記の本発明にかかる多重体が得られる。

実施例１２で使用したイノシトールとピリジニウム酢酸プロミドに代えて、それぞれ当量の次に列挙する出発材料を使用し、実施例１２の第１節に記載の一般的方法を繰り返すと、次に示す生成物が得られる。

スｍ支・実施例工３の各生成物を実施例４の方法によりヘパリンナトリウムと反応させると、下記の本発明の多重体が得られる。

去ｍ足ヌ１よし舶創註化合物（３）の０．０溶液をＮＭＲ試料管中において室温に保持し、ＮＭＲの測定を毎日行った。認められた唯一の差違は、イノシトール環のプロトンに対応する６６．６−６．５での多重線の幅広化であり、これは試験用溶液の調製から３日後に始まった。この幅広化は増大し、その吸収はこれがその固有の形状を失うまで（１２日以内）アブフィールド（ｕｐｆｉｅｌｄ）にシフトした。

スに違」■１逍逝１１己ｒｊ　（７）　ｉ肚定処置したもしくは対照用の動物（ラットもしくはウサギ）から心臓穿刺により血液を採取した。各血液検体を、３本の１、．５ｍｌポリプロピレン製微量遠心分離管に分けた。この管に栓をし、最初の採取血液を入れた管は、血液が凝固するまで３０秒に１回づつ上下逆に転置した。最初の検体が凝固した時点で、２番口の管も同様に転置を行い、その後に最後の採取血液を入れた３番目の管も同じようにした。測定した凝固時間は、この３番目の管の中の血液が凝固した時間とした。

ラットの経口１　でのｒ凝固活　試平均体重４５０ｇの誰性Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ系ラットを使用した。

このラットをエーテル麻酔し、１匹当たり９０００　ＵＳＰ単位の用量で試験薬剤もしくはヘパリンナトリウムのいずれかを、１ａ＋１のポリエチレングリコール４００中の懸濁液として胃管を通して経口投与した。別の１群のラットを、１ｍｌのポリエチレングリコール４００のみで同様に処置し、対照として使用した。所定の時間ごとに、血液試料を心臓穿刺により採取し、凝固時間を上に記載の方法で測定した。

う、トおよびウサギの　腸７　での　凝固活　試平均体重４５０　ｇの雄性Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ系ラットならびに平均体重３．０　ｋｇのニューシーラント白ウサギ（ｗｈｉｔｅ　ｒａｂｂｉｔ）をこの投与試験に使用した。各動物を試験前２４時間は絶食させた。麻酔した各動物を開腹し、空腸を確認した。

　２０，０００　ＵＳＰ単位／ｋｇの用量を含有するように調整した微粉末状のイオン対化合物もしくはヘパリンナトリウムをポリエチレングリコール４００に懸濁させ、空腸に直接注射した。投与後、所定の時間間隔で血液試料を心臓穿刺により採取し、凝固時間を先に述べた方法によりめた。ラットについては、内出血によるラットの死亡のため投与後４時間を過ぎてからは試料採取を行わなかった。

ヘパリン複合体（４）および（５）の試験管内抗凝固活性を試験した。その試験管内活性は、その相当するヘパリン含有量に匹敵することが認められた。その生体内抗凝固活性を、ラットへの経口、直腸および空腸投与ならびにウサギへの空腸投与を利用して、ヘパリンナトリウムと対比させて試験した。

試験化合物およびヘパリンナトリウムはいずれもポリエチレングリコール４００中の懸濁液として投与した。〔化合物（４）は、水と接触すると粘着性の半固体に変化した。〕心心臓側により血液試料を採取し、上述した方法により凝固時間を決定した。ラットへの直腸投与では、ヘパリン複合体およびヘパリンナトリウムのいずれについても活性は認められなかった。ラットへの経口投与では（第１図）、化合物（５）は活性を示さなかったが、本発明の代表的な多重体である化合物（４）は、２４時間後にヘパリンよりほぼ２倍も高い活性を示した。

ラットへの空腸投与では（第２図）、化合物（５）は活性を示さなかったが、本発明の代表的な多重体である化合物（４）は、４時間の実験時間の範囲内でより大きなＡＵＧ　（曲線上面積）を示した。ラットは試験操作による内出血により死亡するので、投与に対してこれより長時間についてはデータをとることができなかった。ウサギへの空腸投与では（第３図）、化合物（４）はヘパリンナトリウムに比べて作用開始はより遅いが、活性はより高く、また作用持続時間もはるかに長いことが示される。凝固時間は投与から約９０時間後以降を除けば正常値には戻らない。投与から４８時間後に１匹のウサギを層殺し、解剖した。空腸の内壁が黄色に着色していた点を除いて、内臓は正常であることが認められた。この着色は、薬剤が絨毛内になお残存していることを示していた。

本発明を各種の好適態様に関して以上に説明したが、本発明の技術思想を逸脱せずに各種の変更、置換、省略および付加をなしうろことは当業者には理解されよう。したがって、本発明の範囲は、以下の請求の範囲によってのみ制限さるべきである。

第１図第２図ラントへの空刺１投与技の凝固詩間うＩ　４１０　、ｓも歳蒔関（筋関）第３図ＰＬ斜髭、ド述時間（蒔朋）国際調査報告Ａｈ’ＮＥｊＣＴｏ　ＴｈＥ　工ＮＴＥＲＮＡＴＩＯＮＡＬ　５ＥＡＲＣＨＲＥＰＯＲＴ　ＯＮ

Claims

【特許請求の範囲】１．下記構造式で示される多重体。〔ヘパリン単位〕 ▲数式、化学式、表等があります▼（Ｉ）式中、■はポリオールの骨格でおり、この骨格は該ポリオールからすべてのヒドロキシ置換基を取り除いた後に残る該ポリオールの部分を意味し；ｎは該ポリオール中のヒドロキシ基の総数を表す３〜２４の数値であり；ｐは≧３かつ≦ｎの数値であり；ｒはヘパリン単位の有効原子価であって、≧３かつ≦７であり；ｓは、これにｒを乗じたときにｐｖに等しくなる数値であり；Ｖは、これにｐを乗じたときにｒｓに等しくなる数値であり；Ｒは ▲数式、化学式、表等があります▼（ａ）▲数式、化学式、表等があります▼（ｂ）▲数式、化学式、表等があります▼（ｃ）▲数式、化学式、表等があります ▼（ｄ）▲数式、化学式、表等があります▼（ｅ）であり、ここで−ＣＯＯ−， −ＣＨ２ＣＯＯ−，−ＣＨ２ＯＣＯＯ−およびＲ▼の各環置換基は、いずれもピリジニウム環の２−，３−もしくは４−位に結合でき；ＲｉＶはＣｌ〜Ｃ３アルキル基を意味し；Ｒ′およびＲ”は同一でも異別でもよく、それぞれがＣ１〜Ｃ７アキル基を意味するか、またはＲ′とＲ′′が隣接の窒素原子と一緒になり、 ▲数式，化学式，表等があります▼が飽和単環式第二アミンの残基を表していてもよく；Ｒ′′′は天然アミノ酸の対応部分と同一の基を意味し；「アルキレン」基は炭素数１〜３で、直鎖でも分岐鎖でもよく；そしてＲ▼は、Ｈ，−ＣＯＮＨ２もしくは−ＣＯＯ（Ｃ１〜Ｃ７アルキル）基を意味する。２．前記ポリオールが単糖であり、特にこの単糖がベントース、ヘキソースもしくはヘプトースである、請求の範囲第１項に記載の多重体。３．前記ポリオールがオリゴ糖であり、特にこのオリゴ糖が二糖、三糖もしくはシクロデキストリンである、請求の範囲第１項に記載の多重体。４．前記ポリオールが、リボース、アラビノース、キシロース、リキソース、リブロース、キシルロース、グルコース、ガラクトース、マンノース、フルクトース、ソルボース、タガトース、マンノヘプツロース、セドヘプツロース、スクロース、ラクトース、マルトース、ラフィノース、α―シクロデキストリン、β― シクロデキストリンもしくはｒ―シクロデキストリンである、請求の範囲第１項に記載の多重体。５．前記ポリオールがＣ３〜Ｃ１５脂肪族ポリヒドロキシ化合物もしくはＣ５〜Ｃ１８脂環式ポリヒドロキシ化合物である、請求の範囲第１項に記載の多重体。６．前記脂肪族ポリヒドロキシ化合物がＣ３〜Ｃ８アルキルポリオールであり、特にこのＣ３〜Ｃ８アルキルポリオールがグリセロール、エリスリトールもしくは１，２，６―トリヒドロキシヘキサンである、請求の範囲第５項に記載の多重体。７．前記脂環式ポリヒドロキシ化合物がＣ５〜Ｃ１０シクロアルキルポリオール、特にシクロヘキサン系ポリオールであるか、前記脂環式ポリヒドロキシ化合物が縮合環完全水素化芳香族ポリオール、特にデカヒドロナフタレン系ポリオールである、請求の範囲第５項に記載の多重体。８．前記シクロヘキサン系ポリオールがイノシトールである、請求の範囲第７項に記載の多重体。９．Ｒ′′′がＨ、−ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＨ３）２、▲数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式、表等があります▼、 ▲数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式、表等があります▼、もしくは−ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨである、請求の範囲第１項に記載の多重体。１０．Ｒ′とＲ′′が隣接の窒素原子と一緒になり、▲数式、化学式、表等があります▼が５〜７員環の飽和単環式第二アミンの残基を表しており、ただしこの残基は、場合により表示の窒素原子のほかに別のヘテロ現原子−Ｏ−、−Ｓ−もしくは−Ｎ−を含有し、あるいは場合により１〜３個のメチル置換基を含有していてもよく、特に、この▲数式，化学式，表等があります▼基が、モルホリノ、１−ピロリジニル、ベルヒドロ−１，２，４−オキサチアジン−４−イル、１− もしくは４−ピペラジニル、４−メチル−１−ピペラジニル、ピペリジノ、ヘキサメチレンイミノ、２−メチル−１−ピラゾリジニル、１−もしくは２−ピラゾリジニル、３−メチル−１−イミダゾリジニル、または１−もしくは３−イミダゾリジニル基である、請求の範囲第１項に記載の多重体。１１．前記Ｒ＋が構造（ａ）、（ｂ）もしくは（ｃ）であり；Ｒｉｖがメチル基であり；−ＣＯＯ−、−ＣＨ２ＣＯＯ−もしくは−ＣＨ２ＯＣＯＯ−基が３位に位置している、請求の範囲第１項に記載の多重体。１２．前記Ｒ＋が構造（ｄ）であり、Ｒ′がメチルもしくはエチル基であって、Ｒ＋がＲ′と同一の基であるか、またはＲ＋Ｒ＋Ｎ−基がモルホリノ、ピペリジノ、１−ピロリジニルもしくは１−ピペラジニル基を表し；Ｒｉｖがメチル基であり；そしてアルキレンが−ＣＨ−であり、特に、Ｒ′′′がＨ、−ＣＨ３、▲ 数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式、表等があります▼もしくは▲数式、化学式、表等があります▼である、請求の範囲第１項に記載の多重体。１３．前記Ｒ＋が構造（ｅ）であり、アルキレンが−ＣＨ２−もしくは−ＣＨ２ＣＨ２−であり、特にＲ▼がＨもしくは−ＣＯＮＨ２である、請求の範囲第１項に記載の多重体。１４．ｐがｎに等しく、特にｐが少なくとも４である、請求の範囲第１項に記載の多重体。１５．ｒが５、６もしくは７である、請求の範囲第１項に記載の多重体。１６．▲数式、化学式、表等があります▼がイノシトールの骨格であり、ｎが６、Ｐが６であり、特にｖが５、ｒが５およびｓが６である、請求の範囲第１項に記載の多重体。１７．下記構造式で示される請求の範囲第１６項に記載の多重体。〔ヘパリン単位〕▲数式，化学式，表等があります▼式中、Ｒ２＋は▲数式、化学式、表等があります▼である。１８．請求の範囲第１項に記載の構造式（Ｉ）で示される多量体と、それに対する無毒な薬剤に許容される担体とからなる、薬剤組成物。１９．温血動物における抗凝固応答誘起用の単位用量形態の薬剤組成物であって、１用量単位につき請求の範囲第１項に記載の構造式（Ｉ）で示される有効単位抗凝固量の多重体と、それに対する無毒な薬剤に許容される担体とを含有し、鼻腔投与、口腔吸入治療もしくはその他の経口投与に適した薬剤組成物。２０．下記構造式で示される塩。 ▲数式、化学式、表等があります▼（ＩＩＩ）式中、▲数式、化学式、表等があります▼はポリオールの骨格であり、この骨格は該ポリオールからすべてのヒドロキシ置換基を取り除いた後に残る該ポリオールの部分を意味し；ｎは該ポリオール中のヒドロキシ基の総数を表す３〜２４の数値であり；ｐは≧３かつ≦ｎの数値であり；Ｒ＋は ▲数式、化学式、表等がありま▼（ａ）、▲数式、化学式、表等があります▼（ｂ）、▲数式、化学式、表等があります▼（ｃ）、▲数式、化学式、表等があります▼（ｄ）または▲数式、化学式、表等があります▼（ｅ）であり、ここで− ＣＯＯ−，−ＣＨ２ＣＯＯ−，−ＣＨ２ＯＣＯＯ−およびＲ▼の各環置換基は、いずれもピリジニウム環の２−，３−もしくは４−位に結合でき；ＲｉｖはＣ１〜Ｃ３アルキル基を意味し；Ｒ′およびＲ＋は同一でも異別でもよく、それぞれがＣ１〜Ｃ７アルキル基を意味するか、またはＲ′とＲ′′が隣接の窒素原子と一緒になり、▲数式、化学式、表等があります▼が飽和単環式第二アミンの残基を表していてもよく；Ｒ′′′はは天然アミノ酸の対応部分と同一の基を意味し；「アルキレン」基は炭素数１〜３で、直鎖でも分岐鎖でもよく；Ｒ＋は、Ｈ■ −ＣＯＮＨ２もしくしは−ＣＯＯ（Ｃ１〜Ｃ７アルキル）基を意味し；Ｘ−は薬剤用に許容される有機もしくは無機酸のアニオンを意味し；■はこの酸アニオンの原子価を意味し；ｑはこれにｔを乗じたときにｐに等しくなる数である。２１．前記ポリオールが単糖であり、特にこの単糖がベントース、ヘキソースもしくはヘプトースである、請求の範囲第２０項に記載の塩。２２．前記ポリオールがオリゴ糖であり、特にこのオリゴ糖類が二糖、三糖もしくはシクロデキストリンである、請求の範囲第２０項に記載の塩。２３．前記ポリオールが、リボース、アラビノース、キシロース、リキソース、リブロース、キシルロース、グルコース、ガラクトース、マンノース、フルクトース、ソルボース、タガトース、マンノヘプツロース、セドヘプツロース、スクロース、ラクトース、マルトース、ラフィノース、α−シクロデキストリン、β −シクロデキストリンもしくはｒ−シクロデキストリンである、請求の範囲第２０項に記載の塩。２４．ポリオールがＣ３〜Ｃ１５脂肪族ポリヒドロキシ化合物もしくはＣ５〜Ｃ１８脂環式ポリヒドロキシ化合物である、請求の範囲第２０項に記載の塩。２５．前記脂肪族ポリヒドロキシ化合物がＣ３〜Ｃ８アルキルポリオールであり、特にこのＣ３〜Ｃ８アルキルポリオールがグリセロール、エリスリトールもしくは１，２，６−トリヒドロキシヘキサンである、請求の範囲第２４項に記載の塩。２６．前記脂環式ポリヒドロキシ化合物がＣ５〜Ｃ１０シクロアルキルポリオール、特にシクロヘキサン系ポリオールであるか、前記脂環式ポリヒドロキシ化合物が縮合環完全水素化芳香族ポリオール、特にデカヒドロナフタレン系ポリオールである、請求の範囲第２４項に記載の塩。２７．前記シクロヘキサン系ポリオールがイノシトールである、請求の範囲第２６項に記載の塩。２８．Ｒ′′′がＨ、−ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＨ３）２、▲数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式、表等があります▼ 、▲数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式、表等があります▼、▲ 数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式、表等があります▼、もしくは−ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨである、請求の範囲第２０項に記載の塩。２９．Ｒ′とＲ＋が隣接の窒素原子と一緒になり、▲数式、化学式、表等があります▼が５〜７員環の飽和単環式第二アミンの残基を表しており、ただしこの残基は、場合により表示の窒素原子のほかに別のヘテロ環原子−Ｏ−、−Ｓ−もしくは−Ｎ−を含有し、あるいは場合により１〜３個のメチル置換基を含有していてもよく、特に、この▲数式，化学式，表等があります▼基か、モルホリノ、１ −ピロリジニル、ペルヒドロ−１，２，４−オキサチアジン−４−イル、１−もしくは４−ピペラジニル、４−メチル−１−ピペラジニル、ピペリジノ、ヘキサメチレンイミノ、２−メチル−１−ピラゾリジニル、１−もしくは２−ピラゾリジニル、３−メチル−１−イミダゾリジニル、または１−もしくは３−イミダゾリジニル基である、請求の範囲第２０項に記載の壇。３０．前記Ｒ＋が構造（ａ）、（ｂ）もしくは（ｃ）であり；Ｒｉｖがメチル基であり；−ＣＯＯ−、−ＣＨ２ＣＯＯ−もしくは−ＣＨ２ＯＣＯＯ−基が３位に位置している、請求の範囲第２０項に記載の塩。３１．前記Ｒ＋が構造（ｄ）であり、Ｒ′がメチルもしくはエチル基であって、Ｒ＋がＲ′と同一の基であるか、またはＲ′Ｒ＋Ｎ−基がモルホリノ、ピペリジノ、１−ピロリジニルもしくは１−ピペラジニル基を表し；Ｒｉｖがメチル基であり；そしてアルキレンが−ＣＨ−であり、特に、Ｒ′′′ＨがＨ、−ＣＨ３、 ▲数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式、表等があります▼もしくは▲数式、化学式、表等があります▼である、請求の範囲第２０項に記載の塩。３２．前記Ｒ＋が構造（ｅ）であり、アルキレンが−ＣＨ２−もしくは−ＣＨ２ＣＨ２−であり、特にＲＶがＨもしくは−ＣＯＮＨ２である、請求の範囲第２０項に記載の塩。３３．ｐがｎに等しく、特にｐが少なくとも４である、請求の範囲第２０項に記載の塩。３４．ｔが１である請求の範囲第２０項に記載の塩。３５．Ｘ−がＩ−、Ｂｒ−もしくはＣｌ−である、請求の範囲第２０項に記載の塩。３６．▲数式、化学式、表等があります▼がイノシトールの骨格であり、ｎが６、Ｐが６である、請求の範囲第２０項に記載の塩。３７．下記構造式で示される請求の範囲第３６項に記載の塩。 ▲数式、化学式、表等があります▼ 式中、Ｘ１−はＩ−、Ｂｒ−もしくはＣｌ−であり、Ｒ２＋は▲数式，化学式，表等があります▼である．３８．Ｘ１−がＩ−である、請求の範囲第３７項に記載の塩。３９．請求の範囲第１項に記載の一般式（Ｉ）で示される多重体の製造方法であって、（ａ）請求の範囲第２０項に記載の構造式（ＩＩＩ）で示される対応する塩をヘパリンナトリウムと反応させるか；または（ｂ）請求の範囲第２０項に記載の構造式（ＩＩＩ）で示される対応する塩をアニオン交換処理して、この塩のＸ−アニオンをＯＨ−アニオンに置換し、次いで得られた中間体をヘパリン酸と反応させることからなる方法。