JPS6148503B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は新規なチオカルボスチリル誘導体、さ
らに詳しくは、一般式〔１〕 〔式中、R¹は低級アルキル基、R²はシクロアルキ
ル基を示す。またチオカルボスチリルの３位と４
位の炭素間結合は一重結合または二重結合を示
す〕 で表わされるチオカルボスチリル誘導体に関す
る。 本発明の化合物は、血小板凝集抑制作用、消炎
作用およびホスホジエステラーゼ阻害作用を有
し、抗血栓剤、消炎剤、抗潰瘍剤および抗喘息剤
として有用である。 上記一般式〔１〕において、低級アルキル基と
しては、例えばメチル、エチル、プロピル、イソ
プロピル、ブチル、tert−ブチルなどが包含され
る。またシクロアルキル基としては、例えばシク
ロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シ
クロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル
などが包含される。 本発明の代表的な化合物を以下に列挙する。 ６−〔３−（Ｎ−メチル−Ｎ−シクロヘキシルア
ミノカルボニル）プロポキシ〕−３・４−ジヒド
ロチオカルボスチリル ６−〔３−（Ｎ−メチル−Ｎ−シクロヘキシルア
ミノカルボニル）プロポキシ〕チオカルボスチリ
ル ６−〔３−（Ｎ−ブチル−Ｎ−シクロヘキシルア
ミノカルボニル）プロポキシ〕チオカルボスチリ
ル ６−〔３−（Ｎ−メチル−Ｎ−シクロオクチルア
ミノカルボニル）プロポキシ〕−３・４−ジヒド
ロチオカルボスチリル ６−〔３−（Ｎ−メチル−Ｎ−シクロプロピルア
ミノカルボニル）プロポキシ〕チオカルボスチリ
ル ６−〔３−（Ｎ−イソプロピル−Ｎ−シクロヘキ
シルアミノカルボニル）プロポキシ〕チオカルボ
スチリル ６−〔３−（Ｎ−エチル−Ｎ−シクロヘキシルア
ミノカルボニル）プロポキシ〕チオカルボスチリ
ル 本発明の化合物は各種の方法で製造できるが、
その一例を示せば下記反応式−１に示す方法が挙
げられる。 ＜反応式−１＞ 〔式中、R¹、R²およびカルボスチリルの３位と４
位の炭素間結合は前記に同じ。Ｘは塩素原子、臭
素原子またはヨウ素原子を示す〕 上記反応式に示されるように本発明の化合物は
一般式〔２〕で表わされるヒドロキシチオカルボ
スチリル誘導体と一般式〔３〕で表わされるハロ
アミドとを脱ハロゲン化水素反応に付すことによ
り製造される。この反応は通常塩基性化合物を脱
ハロゲン化水素剤として用いて行われる。塩基性
化合物としては、例えば水酸化ナトリウム、水酸
化カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭
酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭酸銀な
どの無機塩基、ナトリウム、カリウムなどのアル
カリ金属、ナトリウムメチラート、ナトリウムエ
チラートなどのアルコラート、トリエチルアミ
ン、ピリジン、Ｎ・Ｎ−ジメチルアニリンなどの
有機塩基を使用できる。該反応は無溶媒または溶
媒中で行なわれ、溶媒としてはメタノール、エタ
ノール、プロパノール、ブタノール、エチレング
リコールなどのアルコール類、ジメチルエーテ
ル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、モノグラ
イム、ジグライムなどのエーテル類、アセトン、
メチルエチルケトンなどのケトン類、ベンゼン、
トルエン、キシレンなどの芳香族炭化水素類、酢
酸メチル、酢酸エチルなどのエステル類、Ｎ・Ｎ
−ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキサイ
ド、ヘキサメチルリン酸トリアミドなどの非プロ
トン性極性溶媒が挙げられる。また該反応はヨウ
化ナトリウム、ヨウ化カリウムなどの金属ヨウ化
物の存在下に行なうのが有利である。上記方法に
おけるヒドロキシチオカルボスチリル誘導体
〔２〕とハロアミド〔３〕との使用割合はとくに
限定されないが、通常、前者に対して後者を等モ
ル〜５倍モル、好ましくは等モル〜２倍モル量用
いるのが望ましい。また、その反応温度もとくに
限定されないが、通常、室温〜200℃、好ましく
は50〜150℃で行なわれる。反応時間は通常１〜
30時間、好ましくは１〜15時間である。 出発原料である一般式〔２〕のヒドロキシチオ
カルボスチリル誘導体は一部公知化合物であるが
新規化合物を包含しており、例えば下記反応式−
２に示す方法で製造できる。 ＜反応式−２＞ すなわち、公知のヒドロキシカルボスチリル誘
導体〔４〕に五硫化リンを反応させて一般式
〔２〕の化合物が容易に製造できる。 上記反応において水酸基を、例えばベンジルま
たはアセチル基などで保護したのち、P₂S₅を反応
させ、ついで加水分解して保護基を除去してもよ
い。 一般式〔４〕の化合物と五硫化リンとの反応は
通常の不活性溶媒、例えばベンゼン、トルエン、
キシレン、クロルベンゼンなどの芳香族炭化水素
類、エチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオ
キサンなどのエーテル類、塩化メチレン、クロロ
ホルムなどのハロゲン化炭化水素類、メタノー
ル、エタノール、イソプロパノールなどのアルコ
ール類、ジメチルスルホキシド、ジメチルホルム
アミド、ヘキサメチルリン酸トリアミドなどの溶
媒中で行われる。五硫化リンの使用量は一般式
〔４〕の化合物に対して通常0.2倍モル〜大過剰
量、好ましくは0.4倍モル〜等モルである。反応
温度は通常室温〜200℃、好ましくは50〜100℃、
反応時間は0.5〜10時間である。 また前記反応式−１における他方の原料である
一般式〔３〕の化合物も一部公知化合物であるが
新規化合物を包含しており、例えば下記反応式−
３に示す方法で容易に製造できる。 ＜反応式−３＞ 〔式中、R¹、R²およびＸは前記に同じ〕 すなわち、公知の一般式〔５〕のカルボン酸と
公知の一般式〔６〕のアミンとを通常のアミド結
合生成反応に付す。該アミド結合生成反応として
は、例えば混合酸無水物法を採用でき、カルボン
酸〔５〕をアルキルハロカルボン酸と反応させて
混合酸無水物をえ、ついでアミン〔６〕と反応さ
せる。 混合酸無水物法において使用されるアルキルハ
ロカルボン酸としては、クロロ蟻酸メチル、ブロ
モ蟻酸メチル、クロロ蟻酸エチル、ブロモ蟻酸エ
チル、クロロ蟻酸イソブチルなどが挙げられる。
混合酸無水物は通常のシヨツテンーバウマン反応
により得られ、これを通常単離することなくアミ
ン〔６〕と反応させることにより目的とするハロ
アミド誘導体〔３〕が得られる。シヨツテンーバ
ウマン反応は、該反応に慣用の塩基性化合物、例
えば、トリエチルアミン、トリメチルアミン、ピ
リジン、ジメチルアニリン、Ｎ−メチルモルホリ
ンなどの有機塩基、炭酸カリウム、炭酸ナトリウ
ム、炭酸水素カリウム、炭酸水素ナトリウムなど
の無機塩基の存在下に行なわれる。該反応は−20
〜100℃、好ましくは０〜50℃の温度にて、５分
〜10時間、好ましくは５分〜２時間、処理するこ
とにより行われる。得られる混合酸無水物とアミ
ン〔６〕の反応は−20〜150℃、好ましくは10〜
50℃の温度にて、５分〜10時間、好ましくは５分
〜５時間の条件下に行われる。さらに、上記の混
合酸無水物法による反応は、通常、適当な溶媒中
で行われ、溶媒としては、塩化メチレン、クロロ
ホルム、ジクロロエタンなどのハロゲン化炭化水
素類、ベンゼン、トルエン、キシレンなどの芳香
族炭化水素類、ジエチルエーテル、テトラヒドロ
フラン、ジメトキシエタンなどのエーテル類、酢
酸メチル、酢酸エチルなどのエステル類、Ｎ・Ｎ
−ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシ
ド、ヘキサメチルリン酸トリアミドなどの非プロ
トン性極性溶媒が挙げられる。該法におけるカル
ボン酸〔５〕とアルキルハロカルボン酸とアミン
〔６〕の使用割合は通常等モルづつ使用される
が、カルボン酸〔５〕に対してアルキルハロカル
ボン酸およびアミン〔６〕を1.5倍モル程度まで
使用してもよい。 かくして製造される一般式〔１〕の化合物は通
常の分離手段により容易に単離精製できる。該分
離手段としては、例えば溶媒抽出法、溶媒稀釈
法、再結晶法、液体クロマトグラフイーなどを例
示できる。 つぎに参考例および実施例を挙げて本発明をさ
らに具体的に説明する。 参考例 １ 酢酸エチル400mlにＮ−メチルシクロヘキシル
アミン26mlを加え、外部氷冷して内温を10〜20℃
に保ちながら、撹拌下に、４−クロルブチリルク
ロリド25mlとトリエチルアミン33.5mlを同時に適
下する。20分間を要して滴下し、その後、室温下
１時間撹拌する。反応後、反応液に水を加えて分
液し、有機層を水、飽和炭酸カリウム水溶液、10
％塩酸、水の順で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥
する。硫酸ナトリウムを去し、母液を濃縮後、
減圧蒸留し、無色液体のＮ−（４−クロロブチリ
ル）−Ｎ−メチルシクロヘキシルアミン41.5ｇを
得る。沸点133〜136℃（２mmHg） 実施例 １ ジメチルホルムアミド50mlに６−ヒドロキシ−
３・４−ジヒドロチオカルボスチリル1.8ｇ、
K₂CO₃1.8ｇおよびK10.5ｇを加え、これに60〜70
℃にて撹拌下Ｎ−メチル−Ｎ−（４−クロロブチ
リル）シクロヘキシルアミン2.8ｇを除々に滴下
する。滴下後、同温度にて４時間撹拌したのち溶
媒を減圧留去する。残渣をクロロホルム200mlに
溶解させ、希塩酸、１％NaOH水、水で洗浄し、
Na₂SO₄で乾燥する。乾燥剤を去後、母液を濃
縮し、残渣を石油エーテルで結晶化させる。得ら
れた結晶をエタノール−リグロインから再結晶し
て淡黄色粉末状晶の６−〔３−（Ｎ−メチル−Ｎ−
シクロヘキシルアミノカルボニル）プロポキシ〕
−3.4−ジヒドロチオカルボスチリル0.7ｇを得
る。融点149〜151℃ 実施例 ２ ジメチルホルムアミド50mlに６−ヒドロキシチ
オカルボスチリル1.8ｇ、K₂CO₃1.8ｇおよび
KI0.5ｇを加え、これに60〜70℃にて撹拌下Ｎ−
メチル−Ｎ−（４−クロロブチリル）シクロヘキ
シルアミン2.8ｇを徐々に滴下する。滴下後、同
温度にて４時間撹拌したのち溶媒を減圧留去す
る。残渣をクロロホルム200mlに溶解させ、希塩
酸、１％NaOH水、水で洗浄し、Na₂SO₄で乾燥
する。乾燥剤を去後母液を濃縮し、残渣を石油
エーテルで結晶化させる。得られた結晶をエタノ
ール−リグロインから再結晶して、淡黄色粉末状
晶の６−〔３−（Ｎ−メチル−Ｎ−シクロヘキシル
アミノカルボニル）プロポキシ〕チオカルボスチ
リル0.4ｇを得る。融点176〜177.5℃。 薬理試験 １ 下記供試化合物について血小板凝集抑制作用を
試験した。 供試化合物： １ ６−［３−（Ｎ−メチル−Ｎ−シクロヘキシル
アミノカルボニル）プロポキシ］−３・４−ジ
ヒドロチオカルボスチリル（本願実施例１の化
合物） ２ Ｎ−エチル−５−（３−ベンジルカルバモイ
ル）プロポキシ−３・４−ジヒドロカルボスチ
リル（特開昭51−136676号の実施例１の化合
物） ３ ８−（４−カルバモイル）ブトキシカルボス
チリル（特開昭51−136676号の実施例２の化合
物） ４ ６−（３−エトキシカルボニルプロポキシ）−
3.4−ジヒドロチオカルボスチリル（特開昭53
−21177号の実施例１の化合物） 方法： ネイチユア（NATURE）、第927〜929頁、1962
年の記載の方法に準じて薬理試験を行なつた。 血小板凝集阻止作用はAG−型凝集計
（aggregometer）［ブライストン・マニユフアク
チユアリング・カンパニー（Bryston
Manufacturing Co.）製］を用いて測定された。 ウサギより採取された血液に3.8％クエン酸ナ
トリウム水溶液［3.8％クエン酸ナトリウム水溶
液と血液との混合比率は、１：９（容量比）であ
る］を加えた血液試料を1000r.p.m.（200xg）で
10分間遠心分離して、上澄部分の血小板濃度の高
い血奨［platelet rich plasma］を分離する（こ
こで分離された血奨を以下PRP−１と略す）。
PRP−１の分離後の残りの血液試料を更に3000r.
p.m.（1500xg）で15分間遠心分離して、上澄部
分を採取して血小板濃度の低い血奨（platelet
poor plasma）を得る（ここで分離された血奨を
以下PPPと略す）。 前記PRP−１中に含まれている血小板の数をブ
レツチヤー・クロンカイント法（Brecher
Clonkite Method）［ジヤーナル・オブ・アツプ
ライド・フイジオロジー（J.Appl.Physiol.）、
３、365〜375（1950）］で測定する。 アデノシン・ジホスフエート−誘発凝集抑制試
験（以下ADP−誘発凝集抑制試験と略す）に供
する為、PRP−１をPPPで希釈して、300000／mm
^３の血小板を含む試料を調製した（ここで調製さ
れた試料を以下PRP−２と略す）。又、コラーゲ
ン−誘発凝集抑制試験に供する為、PRP−１を
PPPで希釈して450000／mm^３の血小板を含む試料
を調製した（ここで調製された試料を以下PRP−
３と略す）。 ADP−誘発凝集抑制試験 回転子を入れた血小板凝集測定用セルに試験す
べき化合物を予め定めた濃度で含有する溶液0.01
mlと前記で調製されたPRP−２、0.6mlを加え、
このセルを37℃に保温された血小板凝集計のセル
室に入れ（回転子の回転速度は、1100r.p.m.に調
製されている）、１分後、7.5×10^-5MADP溶液
0.07mlを添加し、光の透過度の変化を記録した。 上記試験で使用される7.5×10^-5MADP溶液
は、ADP粉末（シグマー社製）をオーレン・ベ
ロナール緩衝液（PH＝7.35）に加え調製した。 血小板の凝集が最大となつた時点（光の透過度
が最大となつた時点）の凝集率を下記の式より算
出した。 凝集率（％）＝ｃ_１−ａ_１／ｂ_１−ａ_１×100 a₁：PRP−２の光の透過度 b₁：PPPの光の透過度 c₁：上記の方法で血小板凝集を起こさせ、血小板
凝集が最大となつた時の光の透過度 試験化合物の血小板凝集阻止作用は、下記のよ
うに求めた。 試験化合物溶液の代わりに試験化合物の溶解に
用いた溶媒を加えて、同様に血小板を凝集させ、
凝集率を求め、これをコントロールの凝集率とし
た。下記の式により、阻止率を算出した。 阻止率（％）＝Ａ_１−Ｂ_１／Ａ_１×100 A₁：コントロールの凝集率 B₁：試験化合物の凝集率 コラーゲン誘発凝集抑制試験 回転子を入れた血小板凝集測定用セルに試験す
べき化合物を予め定めた濃度で含有する溶液0.01
mlと前記で調製されたPRP−３、0.6mlを加え、
このセルを37℃に保温された血小板凝集計のセル
室に入れ（回転子の回転速度は、1100r.p.m.に調
製されている）、１分後、7.5×10^-5Mコラーゲン
溶液0.07mlを添加し、光の透過度の変化を記録し
た。 上記試験において、使用されたコラーゲン溶液
は、ホレン・ベロナール緩衝液（PH7.35）５mlに
コラーゲン100mgをすりつぶし加え、得られた上
澄液を分離して調製した。 血小板の凝集が最大となつた時点（光の透過度
が最大となつた時点）の凝集率を下記の式より算
出した。 凝集率（％）＝ｃ_２−ａ_２／ｂ_２−ａ_２×100 a₂：PRP−３の光の透過度 b₂：PPPの光の透過度 c₂：上記の方法で血小板凝集を起こさせ、血小板
凝集が最大となつた時の光の透過度 試験化合物の血小板凝集阻止作用は、下記のよ
うに求めた。 試験化合物溶液の代わりに試験化合物の溶解に
用いた溶媒を加えて、同様に血小板を凝集させ、
凝集率を求め、これをコントロールの凝集率とし
た。下記の式により、阻止率を算出した。 阻止率（％）＝Ａ_２−Ｂ_２／Ａ_２×100 A₂：コントロールの凝集率 B₂：試験化合物の凝集率 結果： その結果を次表に示す。

【表】 薬理試験 ２ 前記薬理試験１で用いたものと同じ供試化合物
１についてサイクリツクアデノシンモノホスフエ
ートホスホジエステラーゼ（Ｃ−AMP−PDE）
の阻害作用を試験した。 方法： Biochimica et Biophisica Acta第429巻第485
〜497頁（1976年）及びBiochemical Medicine第
10巻第301〜311頁（1974年）に記載の活性測定法
に準じて調べた。即ち、まず家兎PRPを3000rpm
で10分間遠心分離して得た沈査の血小板に、PH
7.4の50ミリモル−トリス塩酸緩衝液にMgCl₂の
１ミリモルを加えた溶液10mlを加えて上記血小板
を浮遊させ、テフロンポツター型ホモゲナイザー
にて、血小板を磨砕し、次いで２回凍結乾燥を繰
返し、更に200ワツトの超音波を300秒間かけて破
壊後100000Gで60分間超遠心分離して、上清を粗
酸素液とした。 予め50ミリモル−トリス酢酸緩衝液（PH6.0）
にて緩衝化した1.5×20cmのDEAE−セルロース
カラムに、上記で調製した粗酸素液10mlを通し、
30mlの50ミリモル−トリス酢酸緩衝液にて溶出
し、この緩衝液に０〜１モルの酢酸ナトリウム−
トリス酢酸緩衝液にてリニアグラデイエントをか
け溶出した（総溶出液量約300ml）。尚流速は0.5
ml／分とし、各フラクシヨンは５mlづつ分取し
た。 上記操作により、100μモルの高いＣ−AMP基
質濃度で2nモル／ml／分以下の弱い活性を有し
且つ0.4μモルの低いＣ−AMP基質濃度で100pモ
ル／ml／分以上の強い活性を有するフラクシヨン
を集めた。これをＣ−AMP−PDEとした。 各濃度の供試化合物水溶液0.1mlと予め定めた
0.4μモルのＣ−AMP（トリチウムＣ−AMP）を
含むPH8.0、40ミリモル−トリス塩酸緩衝液（牛
血清アルブミン50μｇ及び４ｍミルのMgCl₂を含
む）との混合液合計0.2mlを基質液とし、これに
上記で調製した一定濃度のＣ−AMP−PDE溶液
0.2mlを添加し30℃で20分間反応させ、トリチウ
ムＣ−AMPからトリチウム5′−AMPを生成させ
た。次に反応停止のため、２分間沸騰水中に浸漬
後、反応液を氷水中で冷却し、これに5′−ヌクレ
オチダーゼとして蛇毒（１mg/ml）の0.05mlを加
え30℃で10分間反応させトリチウム5′−AMPを
トリチウム・アデノシンに変換させた。得られた
反応液全量を陽イオン交換樹脂［AG.50W×４、
200〜400メツシユ（Bio−Rad社製品）、カラムサ
イズ0.5×1.5cm］に添加して生成したトリチウム
アデノシンのみを結合させ、６mlの蒸留水で洗浄
後、3N−アンモニア水1.5mlで溶出させた。この
溶出液全量にトリトン−トルエン型のシンチレー
ター10mlを加え、液体シンチレーシヨンカウンタ
ーにて生成されたトリチウムアデノシンを計測す
ることによつて、PDE活性を測定した。 上記方法に従い測定された供試化合物PDE活
性値（Vs）及びコントロール値（Vc）（供試化合
物を含まない水）から、PDE阻害率（％）を次
式により算出した。 PDE阻害率（％）＝Ｖｃ−Ｖｓ／Ｖｓ×100 結果： その結果を次表に示す。

【表】

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 一般式 〔式中、R¹は低級アルキル基、R²はシクロアルキ
   ル基を示す。またチオカルボスチリルの３位と４
   位の結合は一重結合または二重結合を示す〕 で表わされるチオカルボスチリル誘導体。