JPS61293387A - Ｄ−乳酸の製造法 - Google Patents
Ｄ−乳酸の製造法Info
- Publication number
- JPS61293387A JPS61293387A JP13565785A JP13565785A JPS61293387A JP S61293387 A JPS61293387 A JP S61293387A JP 13565785 A JP13565785 A JP 13565785A JP 13565785 A JP13565785 A JP 13565785A JP S61293387 A JPS61293387 A JP S61293387A
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- JP
- Japan
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- lactic acid
- fermentation
- producing
- microorganism
- medium
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は発酵法による純度の高いＤ−乳酸の製造法に関
する。更に詳しくは、スポロラクトバチルス属に属する
Ｄ−乳酸生産菌を用いてＤ−乳酸を製造するにあたり、
培地に空気を供給することによるＤ−乳酸の製造法に関
するものである。
する。更に詳しくは、スポロラクトバチルス属に属する
Ｄ−乳酸生産菌を用いてＤ−乳酸を製造するにあたり、
培地に空気を供給することによるＤ−乳酸の製造法に関
するものである。
スポロラクトバチルス属に属する乳酸菌によるＤ−乳酸
の発酵生産が可能な事は広く知られている（「乳酸菌の
研究」北原覚雄編著、東大出版会（１９６６） ；米国
特許第３，２６２．８６２号参照）。
の発酵生産が可能な事は広く知られている（「乳酸菌の
研究」北原覚雄編著、東大出版会（１９６６） ；米国
特許第３，２６２．８６２号参照）。
これら従来の生産方式はすべて回分発酵法であり、回分
発酵毎に保存されている乳酸生産菌を増殖させ順次培養
液量を増加させるといった繁雑な操作を伴う前培養のス
テップが必要とされていた。効率的な生産を目的として
、回分発酵を反復する半連続培養法あるいは培地の供給
と培養液の抜き取りを連続して行う連続培養法も考えら
れている。前者においては培養の繰り返しによりＤ−乳
酸の純度低下が認められ、これを解決するめには本発明
者が見出した高濃度の増殖促進成分を添加する方法（特
願昭６０−２２９０７号）が有効である。後者において
は長期間にわたる雑菌汚染防止技術が未確立なため工業
的な利用は全くなされていないのが現状である。
発酵毎に保存されている乳酸生産菌を増殖させ順次培養
液量を増加させるといった繁雑な操作を伴う前培養のス
テップが必要とされていた。効率的な生産を目的として
、回分発酵を反復する半連続培養法あるいは培地の供給
と培養液の抜き取りを連続して行う連続培養法も考えら
れている。前者においては培養の繰り返しによりＤ−乳
酸の純度低下が認められ、これを解決するめには本発明
者が見出した高濃度の増殖促進成分を添加する方法（特
願昭６０−２２９０７号）が有効である。後者において
は長期間にわたる雑菌汚染防止技術が未確立なため工業
的な利用は全くなされていないのが現状である。
従って、工業的なり一乳酸の発酵生産においては、回分
培養を実施するか、高価な増殖促進成分の濃度を高める
回分培養を反復する半連続培養を用いる必要がある。し
かしながら、これらの方法は生産効率、経済性の面から
考え、更に改良すべき問題点を有しており、高価な増殖
促進成分の濃度を低く保ち、高純度のＤ−乳酸を効率的
に製造する方法の確立が望まれていた。
培養を実施するか、高価な増殖促進成分の濃度を高める
回分培養を反復する半連続培養を用いる必要がある。し
かしながら、これらの方法は生産効率、経済性の面から
考え、更に改良すべき問題点を有しており、高価な増殖
促進成分の濃度を低く保ち、高純度のＤ−乳酸を効率的
に製造する方法の確立が望まれていた。
この問題点を解決するため鋭意検討の結果、回分発酵を
反復しても高純度のＤ−乳酸を製造できる方法を見出し
本発明を完成した。
反復しても高純度のＤ−乳酸を製造できる方法を見出し
本発明を完成した。
本発明は、スポロラクトバチルス属に属するＤ−乳酸生
産菌をＩｉ類、無・機塩類、増殖促進成分及び中和剤か
らなるＤ−乳酸生産培地で培養しＤ−乳酸を製造するに
あたり、培地に空気を供給することを特徴とするＤ−乳
酸の製造法である。
産菌をＩｉ類、無・機塩類、増殖促進成分及び中和剤か
らなるＤ−乳酸生産培地で培養しＤ−乳酸を製造するに
あたり、培地に空気を供給することを特徴とするＤ−乳
酸の製造法である。
（使用微生物）
本発明で用いる事のできる微生物としては、スポロラク
トバチルス属に属するＤ−乳酸生産菌であればいかなる
微生物でもよく、代表的な菌株としてはスポロラクトバ
チルス・イヌリナスＡＴＣＣ１５５３８が挙げられる。
トバチルス属に属するＤ−乳酸生産菌であればいかなる
微生物でもよく、代表的な菌株としてはスポロラクトバ
チルス・イヌリナスＡＴＣＣ１５５３８が挙げられる。
（培養方法）
スポロラクトバチルス属に属するＤ−乳酸生産菌はまず
通常の回分発酵法における操作と同様の操作で種菌を調
製する。つまり表−１に示したＧＹＰ培地などで培養し
、Ｄ−乳酸生産菌の生育が充分に達したら順次培養液量
を増加させＤ−乳酸発酵培地の種菌を調製する。この場
合、培養液量の増加は１０倍〜１０００倍程度で増加さ
せればよい。このようにして順次培養液量を増加させて
得た種菌を用い、Ｄ−乳酸発酵培地でＤ−乳酸を生産す
ればよい。Ｄ−乳酸発酵培地の組成は、用いる乳酸生産
菌に適した培地を用いればよいが、基本的にはグルコー
ス、フラクトース、シュークロース、イヌリン、マルト
ース、マンノース、ラフィノース、トレハロース等のＩ
Ｉ！類、或いは澱粉加水分解物、糖蜜のようにこれらの
糖類を含有するもののうち一種及び二種以上に対し、硫
酸マグネシウム、硫酸アンモニウム、リン酸第−カルシ
ウム、硫酸第一鉄等の無機塩類を必要に応じて加え、増
殖促進成分として酵母エキス、ペプトン、肉エキス、大
豆粉等の成分を添加する必要がある。乳酸生産菌は一般
に多くの栄養要求性を示すために、これらの増殖促進成
分の添加は必須である。更にはこれらの乳酸生産菌は酸
感受性を有するため、中和剤でｐＨを４．５以上７．０
以下に保つ必要がある。このために中和剤としてＣａＣ
０ｚ。
通常の回分発酵法における操作と同様の操作で種菌を調
製する。つまり表−１に示したＧＹＰ培地などで培養し
、Ｄ−乳酸生産菌の生育が充分に達したら順次培養液量
を増加させＤ−乳酸発酵培地の種菌を調製する。この場
合、培養液量の増加は１０倍〜１０００倍程度で増加さ
せればよい。このようにして順次培養液量を増加させて
得た種菌を用い、Ｄ−乳酸発酵培地でＤ−乳酸を生産す
ればよい。Ｄ−乳酸発酵培地の組成は、用いる乳酸生産
菌に適した培地を用いればよいが、基本的にはグルコー
ス、フラクトース、シュークロース、イヌリン、マルト
ース、マンノース、ラフィノース、トレハロース等のＩ
Ｉ！類、或いは澱粉加水分解物、糖蜜のようにこれらの
糖類を含有するもののうち一種及び二種以上に対し、硫
酸マグネシウム、硫酸アンモニウム、リン酸第−カルシ
ウム、硫酸第一鉄等の無機塩類を必要に応じて加え、増
殖促進成分として酵母エキス、ペプトン、肉エキス、大
豆粉等の成分を添加する必要がある。乳酸生産菌は一般
に多くの栄養要求性を示すために、これらの増殖促進成
分の添加は必須である。更にはこれらの乳酸生産菌は酸
感受性を有するため、中和剤でｐＨを４．５以上７．０
以下に保つ必要がある。このために中和剤としてＣａＣ
０ｚ。
Ｃａ（Ｏｌｌ）ｚ、 ＮａＯＨ，ＮａｔＣＯｚ＋ Ｎａ
ＨＣＯ＝、 ＫＯ１１＋アンモニア等を用いる必要があ
る。
ＨＣＯ＝、 ＫＯ１１＋アンモニア等を用いる必要があ
る。
発酵温度は各々の乳酸生産菌に適した温度を用いればよ
く、例えばスポロラクトバチルス・イヌリナスＡＴＣＣ
１５５３Ｂでは３７℃が好ましい。
く、例えばスポロラクトバチルス・イヌリナスＡＴＣＣ
１５５３Ｂでは３７℃が好ましい。
このような方法で１回目のＤ−乳酸発酵が終了した時点
でその発酵液の一部を次の発酵の種菌として用い、再び
同様の乳酸発酵を繰り返す。この場合、中和剤としてＣ
ａＣ０＋を用いる場合、２回目以降の発酵において、１
回目の発酵と同一組成の培地を用いるとＤ−乳酸の純度
が低下する。このためには２回目以降の発酵においては
、増殖促進成分の濃度を高めることによりＤ−乳酸の純
度低下を防止することも可能である（特願昭６０−２２
９０７号参照）、。
でその発酵液の一部を次の発酵の種菌として用い、再び
同様の乳酸発酵を繰り返す。この場合、中和剤としてＣ
ａＣ０＋を用いる場合、２回目以降の発酵において、１
回目の発酵と同一組成の培地を用いるとＤ−乳酸の純度
が低下する。このためには２回目以降の発酵においては
、増殖促進成分の濃度を高めることによりＤ−乳酸の純
度低下を防止することも可能である（特願昭６０−２２
９０７号参照）、。
しかしながら、中和剤としてＣａＣ０，を用い、しかも
増殖促進成分を高濃度にしない場合においても、発酵培
地中に空気を供給することによりＤ−乳酸の純度低下が
防止可能である。
増殖促進成分を高濃度にしない場合においても、発酵培
地中に空気を供給することによりＤ−乳酸の純度低下が
防止可能である。
空気の供給量としては培地液量に対し１分間当り１０容
量％（０，Ｉ Ｖ、Ｖ、Ｍ）未満にすることが好ましい
。０．Ｉ Ｖ、Ｖ、Ｍ以上になると乳酸生産菌の増殖が
完全に阻害されるため好ましくない。
量％（０，Ｉ Ｖ、Ｖ、Ｍ）未満にすることが好ましい
。０．Ｉ Ｖ、Ｖ、Ｍ以上になると乳酸生産菌の増殖が
完全に阻害されるため好ましくない。
ここで言う空気の組成は酸素２１％（容量）を含有する
ものをさし、当然のことながら酸素濃度の異なる場合に
は酸素濃度に応じて最大の通気量が制限されることとな
る。
ものをさし、当然のことながら酸素濃度の異なる場合に
は酸素濃度に応じて最大の通気量が制限されることとな
る。
この方法を用いることにより、いかなる中和剤を用いる
場合でも高価な増殖促進成分を多量に使用しないで高純
度のＤ−乳酸を効果的に製造できる。
場合でも高価な増殖促進成分を多量に使用しないで高純
度のＤ−乳酸を効果的に製造できる。
表−Ｉ ＧＹＰ培地
〔実施例〕
以下実施例により本発明を更に詳細に説明する。なお、
実施例におけるＤ−乳酸の純度測定は全乳酸量をイオン
交換樹脂（ＳＡＸ８０１）を用いた＋１ＰＬＣ法で、し
−乳酸をＬ−乳酸脱水素酵素を用いる酵素法で測定し、
次式により算出したものである。
実施例におけるＤ−乳酸の純度測定は全乳酸量をイオン
交換樹脂（ＳＡＸ８０１）を用いた＋１ＰＬＣ法で、し
−乳酸をＬ−乳酸脱水素酵素を用いる酵素法で測定し、
次式により算出したものである。
実施例１
スポロラクトバチルス・イヌリナスへＴＣＣ１５５３８
をＧＹＰ培地に接種し、３７℃、３日間静置培養した。
をＧＹＰ培地に接種し、３７℃、３日間静置培養した。
この培養液２ｍｌをＣａＣＯ３１％含むＧＹＰ培地５０
ｍ ｌに接種し、３７℃、１日静置培養し種菌を調製し
た。この種菌を次に示す発酵培地９５０ｍ１に接種し、
３７℃で発酵を行った。
ｍ ｌに接種し、３７℃、１日静置培養し種菌を調製し
た。この種菌を次に示す発酵培地９５０ｍ１に接種し、
３７℃で発酵を行った。
発酵培地
グルコース １００ｇ／ １酵母エキス
５ｇ／ ｊｌ！Ｍｇ５Ｏ，・７Ｈｚ８
０．２ｇ／βＦｅ５Ｏａ ・７１ｈＱ １
０ｍｇ／ ＩｔＭｎＳＯｎ ・４．５Ｈｚ０ １
０ｍｇ／ １２ＮａＣ１１０ｍｇ／ １２ ＣａＣＯｘ ６０ｇ／ ｊ！発酵３９
時間においてグルコースは完全に消費され、乳酸９５ｇ
／ ７！が蓄積した。このもののＤ−乳酸純度は９９．
１％であった。この１回目のＤ−乳酸発酵終了液５０ｍ
ｌを上記発酵培地９５０ｍ１に加え、空気供給速度０
．０３ Ｖ、Ｖ、Ｍの条件で発酵を繰り返し実施した。
５ｇ／ ｊｌ！Ｍｇ５Ｏ，・７Ｈｚ８
０．２ｇ／βＦｅ５Ｏａ ・７１ｈＱ １
０ｍｇ／ ＩｔＭｎＳＯｎ ・４．５Ｈｚ０ １
０ｍｇ／ １２ＮａＣ１１０ｍｇ／ １２ ＣａＣＯｘ ６０ｇ／ ｊ！発酵３９
時間においてグルコースは完全に消費され、乳酸９５ｇ
／ ７！が蓄積した。このもののＤ−乳酸純度は９９．
１％であった。この１回目のＤ−乳酸発酵終了液５０ｍ
ｌを上記発酵培地９５０ｍ１に加え、空気供給速度０
．０３ Ｖ、Ｖ、Ｍの条件で発酵を繰り返し実施した。
得られたＤ−乳酸純度は９９．０％であった。
実施例２
空気供給速度０．０７５ Ｖ、Ｖ、Ｈの条件以外は実施
例１と同様の実験を行った。結果を表−２に示した。
例１と同様の実験を行った。結果を表−２に示した。
比較例１．２
空気供給を行わないで実施例１．２と同様の実験を行っ
た。結果を表−２に示した。
た。結果を表−２に示した。
表−２
〔発明の効果〕
Ｄ〜乳酸発酵に於いて、培地に空気を供給することによ
り前回の発酵終了液を種菌として用いて発酵を行っても
Ｄ−乳酸純度を高く保つことが出来た。
り前回の発酵終了液を種菌として用いて発酵を行っても
Ｄ−乳酸純度を高く保つことが出来た。
Ｄ−乳酸は各種光学活性化合物を化学合成するための出
発物質として重要であり、近年り一乳酸に対する需要が
増大しつつあり、本発明により工業的規模での効率的な
り一乳酸の製造が可能となった。
発物質として重要であり、近年り一乳酸に対する需要が
増大しつつあり、本発明により工業的規模での効率的な
り一乳酸の製造が可能となった。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ スポロラクトバチルス属に属するＤ−乳酸生産菌を
糖類、無機塩類、増殖促進成分及び中和剤からなるＤ−
乳酸生産培地で培養しＤ−乳酸を製造するにあたり、培
地に空気を供給することを特徴とするＤ−乳酸の製造法
。 ２ 供給する空気量が培地液量に対し１分間当り１０容
量％未満であることを特徴とする特許請求の範囲第１項
記載のＤ−乳酸の製造法。
Priority Applications (6)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP13565785A JPS61293387A (ja) | 1985-06-21 | 1985-06-21 | Ｄ−乳酸の製造法 |
| DE8686101628T DE3686893T2 (de) | 1985-02-08 | 1986-02-07 | Gaerung zur gewinnung von d-milchsaeure. |
| DE3650395T DE3650395T2 (de) | 1985-02-08 | 1986-02-07 | Gärung zur Gewinnung von d-Milchsäure. |
| EP86101628A EP0190770B1 (en) | 1985-02-08 | 1986-02-07 | Fermentation to d-lactic acid |
| EP91112523A EP0458370B1 (en) | 1985-02-08 | 1986-02-07 | Fermentation to d-lactic acid |
| US08/250,094 US5466588A (en) | 1985-02-08 | 1994-05-26 | Production of high optical purity D-lactic acid |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP13565785A JPS61293387A (ja) | 1985-06-21 | 1985-06-21 | Ｄ−乳酸の製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS61293387A true JPS61293387A (ja) | 1986-12-24 |
| JPH0561912B2 JPH0561912B2 (ja) | 1993-09-07 |
Family
ID=15156900
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP13565785A Granted JPS61293387A (ja) | 1985-02-08 | 1985-06-21 | Ｄ−乳酸の製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS61293387A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2004104202A1 (ja) | 2003-05-22 | 2004-12-02 | Kabushiki Kaisha Toyota Chuo Kenkyusho | D-乳酸脱水素酵素活性を有するタンパク質をコードするdna及びその利用 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3262862A (en) * | 1962-05-10 | 1966-07-26 | Kyowa Hakko Kogyo Kk | Method for producing lactic acid with sporolactobacillus |
| JPS49109583A (ja) * | 1973-02-27 | 1974-10-18 |
-
1985
- 1985-06-21 JP JP13565785A patent/JPS61293387A/ja active Granted
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3262862A (en) * | 1962-05-10 | 1966-07-26 | Kyowa Hakko Kogyo Kk | Method for producing lactic acid with sporolactobacillus |
| JPS49109583A (ja) * | 1973-02-27 | 1974-10-18 |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2004104202A1 (ja) | 2003-05-22 | 2004-12-02 | Kabushiki Kaisha Toyota Chuo Kenkyusho | D-乳酸脱水素酵素活性を有するタンパク質をコードするdna及びその利用 |
| US7964382B2 (en) | 2003-05-22 | 2011-06-21 | Kabushiki Kaisha Toyota Chuo Kenkyusho | DNA encoding a protein having D-lactate dehydrogenase activity and uses thereof |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0561912B2 (ja) | 1993-09-07 |
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