JPS61293388A - Ｄ−乳酸の製造方法 - Google Patents
Ｄ−乳酸の製造方法Info
- Publication number
- JPS61293388A JPS61293388A JP13565885A JP13565885A JPS61293388A JP S61293388 A JPS61293388 A JP S61293388A JP 13565885 A JP13565885 A JP 13565885A JP 13565885 A JP13565885 A JP 13565885A JP S61293388 A JPS61293388 A JP S61293388A
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- JP
- Japan
- Prior art keywords
- lactic acid
- fermentation
- producing
- neutralizing agent
- microorganism
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- Granted
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は発酵法による純度の高いＤ−乳酸の製造法に関
する。更に詳しくは、スポロラクトバチルス属に属する
Ｄ−乳酸生産菌を用いてＤ−乳酸を製造するにあたり、
特定の中和剤を用いることによるＤ−乳酸の製造方法に
関するものである。
する。更に詳しくは、スポロラクトバチルス属に属する
Ｄ−乳酸生産菌を用いてＤ−乳酸を製造するにあたり、
特定の中和剤を用いることによるＤ−乳酸の製造方法に
関するものである。
スポロラクトバチルス属に属する乳酸菌によるＤ−乳酸
の発酵生産が可能な事は広く知られており、中和剤とし
てもっばら炭酸カルシウムが用いられている（「乳酸菌
の研究」北原覚誰編著、東大出版会（１９６６） ；米
国特許第３，２６２，８６２号参照）。
の発酵生産が可能な事は広く知られており、中和剤とし
てもっばら炭酸カルシウムが用いられている（「乳酸菌
の研究」北原覚誰編著、東大出版会（１９６６） ；米
国特許第３，２６２，８６２号参照）。
さらにまた、従来の生産方式はすべて回分発酵法であり
、回分発酵毎に保存されている乳酸生産菌を増殖させ順
次培養液量を増加させるといった繁雑な操作を伴う前培
養のステップが必要とされていた。効率的な生産を目的
として、回分発酵を反復する半連続培養法あるいは培地
の供給と培養液の抜き取りを連続して行う連続培養法も
考えられている。前者においては培養の繰り返しにより
Ｄ−乳酸の純度低下が認められ、これを解決するめには
本発明者が見出した高濃度の増殖促進成分を添加する方
法（特願昭６０−２２９０７号）が有効である。後者に
おいては長期間にわたる雑菌汚染防止技術が未確立なた
め工業的な利用は全くなされていないのが現状である。
、回分発酵毎に保存されている乳酸生産菌を増殖させ順
次培養液量を増加させるといった繁雑な操作を伴う前培
養のステップが必要とされていた。効率的な生産を目的
として、回分発酵を反復する半連続培養法あるいは培地
の供給と培養液の抜き取りを連続して行う連続培養法も
考えられている。前者においては培養の繰り返しにより
Ｄ−乳酸の純度低下が認められ、これを解決するめには
本発明者が見出した高濃度の増殖促進成分を添加する方
法（特願昭６０−２２９０７号）が有効である。後者に
おいては長期間にわたる雑菌汚染防止技術が未確立なた
め工業的な利用は全くなされていないのが現状である。
従って、工業的なり一乳酸の発酵生産においては、回分
培養を実施するか、高価な増殖促進成分の濃度を高めた
状態で回分培養を反復する半連続培養を用いる必要があ
る。しかしながら、これらの方法は生産効率、経済性の
面から考え、更に改良すべき問題点を有している。
培養を実施するか、高価な増殖促進成分の濃度を高めた
状態で回分培養を反復する半連続培養を用いる必要があ
る。しかしながら、これらの方法は生産効率、経済性の
面から考え、更に改良すべき問題点を有している。
この問題点を解決するため鋭意検討の結果、回分発酵を
反復しても高純度のＤ−乳酸を製造できる方法を見出し
本発明を完成した。
反復しても高純度のＤ−乳酸を製造できる方法を見出し
本発明を完成した。
本発明は、スポロラクトバチルス属に属するＤ−乳酸生
産菌を＃Ｍ類、無機塩類、増殖促進成分からなるＤ−乳
酸生産培地で培養しＤ−乳酸を製造するにあたり、水酸
化ナトリウム、炭酸ナトリウム、重炭酸ナトリウムある
いはアンモニアで中和することを特徴とするＤ−乳酸の
製造方法である。
産菌を＃Ｍ類、無機塩類、増殖促進成分からなるＤ−乳
酸生産培地で培養しＤ−乳酸を製造するにあたり、水酸
化ナトリウム、炭酸ナトリウム、重炭酸ナトリウムある
いはアンモニアで中和することを特徴とするＤ−乳酸の
製造方法である。
（使用微生物）
本発明で用いる事のできる微生物としては、スポロラク
トバチルス属に属するＤ−乳酸生産菌であればいかなる
微性物でもよく、代表的な菌株としてはスポロラクトバ
チルス・イヌリナスＡＴＣＣ１５５３８が挙げられる。
トバチルス属に属するＤ−乳酸生産菌であればいかなる
微性物でもよく、代表的な菌株としてはスポロラクトバ
チルス・イヌリナスＡＴＣＣ１５５３８が挙げられる。
（培養方法）
スポロラクトバチルス属に属するＤ−乳酸生産菌はまず
通常の回分発酵法における操作と同様の操作で種菌を調
製する。つまり表−１に示したＧＹＰ培地などで培養し
、Ｄ−乳酸生産菌の生育が充分に達したら順次培養液量
を増加させＤ−乳酸発酵培地の種菌を調製する。この場
合、培養液量の増加は１０倍〜１０００倍程度で増加さ
せればよい。このようにして順次培養液量を増加させて
得た種菌を用い、Ｄ−乳酸発酵培地でＤ−乳酸を生産す
ればよい。Ｄ−乳酸発酵培地の組成は、用いる乳酸生産
菌に適した培地を用いればよいが、基本的にはグルコー
ス、フラクトース、シュークロース、イヌリン、マルト
ース、マンノース、ラフィノース、トレハロース等の糖
類、或いは澱粉加水分解物、糖蜜のようにこれらの糖類
を含有するもののうち一種及び二種以上に対し、硫酸マ
グネシウム、硫酸アンモニウム、リン酸第−カルシウム
、硫酸第一鉄等の無機塩類を必要に応じて加え、増殖促
進成分として酵母エキス、ペプトン、肉エキス、大豆粉
等の成分を添加する必要がある。乳酸生産菌は一般に多
くの栄養要求性を示すために、これらの増殖促進成分の
添加は必須である。発酵は嫌気条件で行うため、窒素等
の不活性ガスを通気してもよい。
通常の回分発酵法における操作と同様の操作で種菌を調
製する。つまり表−１に示したＧＹＰ培地などで培養し
、Ｄ−乳酸生産菌の生育が充分に達したら順次培養液量
を増加させＤ−乳酸発酵培地の種菌を調製する。この場
合、培養液量の増加は１０倍〜１０００倍程度で増加さ
せればよい。このようにして順次培養液量を増加させて
得た種菌を用い、Ｄ−乳酸発酵培地でＤ−乳酸を生産す
ればよい。Ｄ−乳酸発酵培地の組成は、用いる乳酸生産
菌に適した培地を用いればよいが、基本的にはグルコー
ス、フラクトース、シュークロース、イヌリン、マルト
ース、マンノース、ラフィノース、トレハロース等の糖
類、或いは澱粉加水分解物、糖蜜のようにこれらの糖類
を含有するもののうち一種及び二種以上に対し、硫酸マ
グネシウム、硫酸アンモニウム、リン酸第−カルシウム
、硫酸第一鉄等の無機塩類を必要に応じて加え、増殖促
進成分として酵母エキス、ペプトン、肉エキス、大豆粉
等の成分を添加する必要がある。乳酸生産菌は一般に多
くの栄養要求性を示すために、これらの増殖促進成分の
添加は必須である。発酵は嫌気条件で行うため、窒素等
の不活性ガスを通気してもよい。
発酵温度は各々の乳酸生産菌に適した温度を用いればよ
く、例えばスポロラクトバチルス・イヌリナスＡＴＣＣ
１５５３８では３７℃が好ましい。
く、例えばスポロラクトバチルス・イヌリナスＡＴＣＣ
１５５３８では３７℃が好ましい。
発酵液のｐｌ＋は乳酸の生成に伴い徐々に低下する。ス
ポロラクトバチルス属のＤ−乳酸生産菌は酸感受性を有
するため、中和剤でｐＨを４６５以上７．０以乍に保つ
必要がある。このような方法で１回目のＤ−乳酸発酵が
終了した時点でその発酵液の一部を次の発酵の種菌とし
て用い、再び同様の乳酸発酵を繰り返すことができる。
ポロラクトバチルス属のＤ−乳酸生産菌は酸感受性を有
するため、中和剤でｐＨを４６５以上７．０以乍に保つ
必要がある。このような方法で１回目のＤ−乳酸発酵が
終了した時点でその発酵液の一部を次の発酵の種菌とし
て用い、再び同様の乳酸発酵を繰り返すことができる。
この場合、中和剤としてＣａＣＯ３を用いる場合には、
２回目以降の発酵においても１回目の発酵と同一組成の
培地を用いるとＤ−乳酸の純度が低下する。このために
は、２回目の発酵以後は、増殖促進成分の濃度を高めて
おくことにより、Ｄ−乳酸の純度低下を防止することも
可能である。
２回目以降の発酵においても１回目の発酵と同一組成の
培地を用いるとＤ−乳酸の純度が低下する。このために
は、２回目の発酵以後は、増殖促進成分の濃度を高めて
おくことにより、Ｄ−乳酸の純度低下を防止することも
可能である。
しかしながら、中和剤として水酸化ナトリウム、炭酸ナ
トリウム、重炭酸ナトリウムあるいはアンモニアを中和
剤として用いた場合には、１回目の発酵と同一組成の培
地を用いて発酵の反復を繰り返しても、Ｄ−乳酸の純度
は全く低下しない。
トリウム、重炭酸ナトリウムあるいはアンモニアを中和
剤として用いた場合には、１回目の発酵と同一組成の培
地を用いて発酵の反復を繰り返しても、Ｄ−乳酸の純度
は全く低下しない。
この方法を用いることにより、高価な増殖促進成分を多
量に使用しなくても高純度のＤ−乳酸を効果的に製造で
きる。
量に使用しなくても高純度のＤ−乳酸を効果的に製造で
きる。
ここで用いられる中和剤については、水溶液、粉末、ガ
スいかなる種類のものでもよく、操作性を考えて適宜決
めればよい。
スいかなる種類のものでもよく、操作性を考えて適宜決
めればよい。
表−Ｉ ＧＹＰ培地
〔実施例〕
以下実施例により本発明を更に詳細に説明−・る。なお
、実施例におけるＤ−乳酸の純度側ユは全乳酸量をイオ
ン交換樹脂（ＳＡＸ８０１）を用い１ＨＰＬＣ法で、Ｌ
−乳酸をＬ−乳酸脱水素酵素をＪいる酵素法で測定し、
次式により算出したち（である。
、実施例におけるＤ−乳酸の純度側ユは全乳酸量をイオ
ン交換樹脂（ＳＡＸ８０１）を用い１ＨＰＬＣ法で、Ｌ
−乳酸をＬ−乳酸脱水素酵素をＪいる酵素法で測定し、
次式により算出したち（である。
実施例１
スポロラクトバチルス・イヌリナスへＴＣＣ１５５３８
をＧＹＰ培地に接種し、３７℃、３日間静置培養した。
をＧＹＰ培地に接種し、３７℃、３日間静置培養した。
この培養液１ｍｌをＣａＣ０＊ １％含むＧＹＰ培地
２５ｍ ｌに接種し、３７℃、１日静置培養し種菌を調
製した。この種菌５０ｍ ｌを次に示す発酵培地９５０
ｍ ｌに接種し、３７℃、８．５％アンモニア水により
ｐＨ５，８〜６．２にコントロー、ルしながら発酵を行
った。
２５ｍ ｌに接種し、３７℃、１日静置培養し種菌を調
製した。この種菌５０ｍ ｌを次に示す発酵培地９５０
ｍ ｌに接種し、３７℃、８．５％アンモニア水により
ｐＨ５，８〜６．２にコントロー、ルしながら発酵を行
った。
発酵培地
グルコース １００ｇ／ １２酵母エキス
５ｇ／１ １ 阿ｇｓｏ ａ・７Ｈ２００，２ｇ／ Ｉｔ！
Ｆｅ５Ｏａ ・７Ｈ２０１０ｍｇ／ １こ
ＭｎＳＯ４＋ ４．５Ｈｚ０
１０ｍｇ／ １目
ＮａＣ１１０ｍｇ／ ｌ−リ
発酵４１時間においてグルコースは完全に消費され、乳
酸８２ｇ／ Ｉｌが蓄積した。このもののＤ−乳酸純度
は９９．５％であった。この１回目のＤ−乳酸発酵終了
液５０ｍ ｌを上記発酵培地９５０ｍ１に加え発酵を繰
り返し実施した。得られたＤ−乳酸純度は９９．２％で
あった。このものを種菌として同様に繰り返し３回目の
発酵を実施した結果、Ｄ−乳酸純度は９９．３％であっ
た。
５ｇ／１ １ 阿ｇｓｏ ａ・７Ｈ２００，２ｇ／ Ｉｔ！
Ｆｅ５Ｏａ ・７Ｈ２０１０ｍｇ／ １こ
ＭｎＳＯ４＋ ４．５Ｈｚ０
１０ｍｇ／ １目
ＮａＣ１１０ｍｇ／ ｌ−リ
発酵４１時間においてグルコースは完全に消費され、乳
酸８２ｇ／ Ｉｌが蓄積した。このもののＤ−乳酸純度
は９９．５％であった。この１回目のＤ−乳酸発酵終了
液５０ｍ ｌを上記発酵培地９５０ｍ１に加え発酵を繰
り返し実施した。得られたＤ−乳酸純度は９９．２％で
あった。このものを種菌として同様に繰り返し３回目の
発酵を実施した結果、Ｄ−乳酸純度は９９．３％であっ
た。
実施例２
実施例１と同様の方法で調製された種菌を用い下記の発
酵培地を用い、２０％水酸化ナトリウム水溶液でｐＨを
５．８〜６．２にコントロールしながら３７℃で発酵を
行った。
酵培地を用い、２０％水酸化ナトリウム水溶液でｐＨを
５．８〜６．２にコントロールしながら３７℃で発酵を
行った。
グルコース ２００ｇ／ １
酵母エキス Ｌｏｇ／ ｌ
ＭｇＳＯ４・７１１□０ ０．２８／ ｌＦｅ
５Ｏａ ・７Ｈｚ０ １０ｍｇ／ ｌｌＭｎＳ
Ｏ４・４．５Ｈｚ０ １０ｍｇ／ ｌＮａＣ１１
０ｍｇ／ １ 発酵５０時間においてグルコースは完全に消費され、乳
酸１２８ｇ／ ｌが蓄積した。このもののＤ−乳酸純度
は９９．２％であった。実施例１と同様の方法で発酵を
５回操り返した結果、３回目、５回目におけるＤ−乳酸
純度は９８．９％、９９．１％であった。
５Ｏａ ・７Ｈｚ０ １０ｍｇ／ ｌｌＭｎＳ
Ｏ４・４．５Ｈｚ０ １０ｍｇ／ ｌＮａＣ１１
０ｍｇ／ １ 発酵５０時間においてグルコースは完全に消費され、乳
酸１２８ｇ／ ｌが蓄積した。このもののＤ−乳酸純度
は９９．２％であった。実施例１と同様の方法で発酵を
５回操り返した結果、３回目、５回目におけるＤ−乳酸
純度は９８．９％、９９．１％であった。
の発酵においては９７．３％にＤ−乳酸純度は低下した
。
。
ることにより前回の発酵終了液を種菌として用いて発酵
を行ってもＤ−乳酸純度を高く保つことが出来た。
を行ってもＤ−乳酸純度を高く保つことが出来た。
Ｄ−乳酸は各種光学活性化合物を化学合成するための出
発物質として重要であり、近年Ｄ−乳酸に対する需要が
増大しつつあり、本発明により工業的規模での効率的な
り一乳酸の製造が可能となった。
発物質として重要であり、近年Ｄ−乳酸に対する需要が
増大しつつあり、本発明により工業的規模での効率的な
り一乳酸の製造が可能となった。
Claims (1)
- スポロラクトバチルス属に属するＤ−乳酸生産菌を糖類
、無機塩類、増殖促進成分からなるＤ−乳酸生産培地で
培養しＤ−乳酸を製造するにあたり、水酸化ナトリウム
、炭酸ナトリウム、重炭酸ナトリウムあるいはアンモニ
アで中和することを特徴とするＤ−乳酸の製造方法。
Priority Applications (6)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP13565885A JPS61293388A (ja) | 1985-06-21 | 1985-06-21 | Ｄ−乳酸の製造方法 |
| EP86101628A EP0190770B1 (en) | 1985-02-08 | 1986-02-07 | Fermentation to d-lactic acid |
| DE8686101628T DE3686893T2 (de) | 1985-02-08 | 1986-02-07 | Gaerung zur gewinnung von d-milchsaeure. |
| DE3650395T DE3650395T2 (de) | 1985-02-08 | 1986-02-07 | Gärung zur Gewinnung von d-Milchsäure. |
| EP91112523A EP0458370B1 (en) | 1985-02-08 | 1986-02-07 | Fermentation to d-lactic acid |
| US08/250,094 US5466588A (en) | 1985-02-08 | 1994-05-26 | Production of high optical purity D-lactic acid |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP13565885A JPS61293388A (ja) | 1985-06-21 | 1985-06-21 | Ｄ−乳酸の製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS61293388A true JPS61293388A (ja) | 1986-12-24 |
| JPH0523748B2 JPH0523748B2 (ja) | 1993-04-05 |
Family
ID=15156920
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP13565885A Granted JPS61293388A (ja) | 1985-02-08 | 1985-06-21 | Ｄ−乳酸の製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS61293388A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2007215427A (ja) * | 2006-02-14 | 2007-08-30 | Musashino Chemical Laboratory Ltd | 乳酸の製造方法 |
| WO2015128892A1 (ja) * | 2014-02-25 | 2015-09-03 | 乃 玉井 | 乳酸発酵竹液、乳酸発酵竹剤、及び乳酸発酵竹液の製造方法 |
| JP2017502677A (ja) * | 2014-01-17 | 2017-01-26 | 上海交通大学 | スポロラクトバチルス・テラエおよびその使用 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3262862A (en) * | 1962-05-10 | 1966-07-26 | Kyowa Hakko Kogyo Kk | Method for producing lactic acid with sporolactobacillus |
| JPS5856690A (ja) * | 1981-10-01 | 1983-04-04 | Musashino Kagaku Kenkyusho:Kk | 乳酸醗酵液の付着及び固結防止法 |
-
1985
- 1985-06-21 JP JP13565885A patent/JPS61293388A/ja active Granted
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3262862A (en) * | 1962-05-10 | 1966-07-26 | Kyowa Hakko Kogyo Kk | Method for producing lactic acid with sporolactobacillus |
| JPS5856690A (ja) * | 1981-10-01 | 1983-04-04 | Musashino Kagaku Kenkyusho:Kk | 乳酸醗酵液の付着及び固結防止法 |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2007215427A (ja) * | 2006-02-14 | 2007-08-30 | Musashino Chemical Laboratory Ltd | 乳酸の製造方法 |
| JP2017502677A (ja) * | 2014-01-17 | 2017-01-26 | 上海交通大学 | スポロラクトバチルス・テラエおよびその使用 |
| WO2015128892A1 (ja) * | 2014-02-25 | 2015-09-03 | 乃 玉井 | 乳酸発酵竹液、乳酸発酵竹剤、及び乳酸発酵竹液の製造方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0523748B2 (ja) | 1993-04-05 |
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