JPS61181389A - Ｄ−乳酸の製造方法 - Google Patents
Ｄ−乳酸の製造方法Info
- Publication number
- JPS61181389A JPS61181389A JP2290785A JP2290785A JPS61181389A JP S61181389 A JPS61181389 A JP S61181389A JP 2290785 A JP2290785 A JP 2290785A JP 2290785 A JP2290785 A JP 2290785A JP S61181389 A JPS61181389 A JP S61181389A
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- JP
- Japan
- Prior art keywords
- lactic acid
- fermentation
- concentration
- medium
- acid fermentation
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- Granted
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は発酵法による純度の高いＤ−乳酸の製造方法に
関する。更にくわしくはＤ−乳酸発酵終了液を再び次の
Ｄ−乳酸発酵の種菌として用いる発酵方法によるＤ−乳
酸の製造方法に関するものである。
関する。更にくわしくはＤ−乳酸発酵終了液を再び次の
Ｄ−乳酸発酵の種菌として用いる発酵方法によるＤ−乳
酸の製造方法に関するものである。
各種乳酸生産菌によるＤ−乳酸の発酵生産が可能な事は
広く知られている（特開昭５８−１６８８８．同５８−
３６３９４号公報参照）。
広く知られている（特開昭５８−１６８８８．同５８−
３６３９４号公報参照）。
しかしながら従来の生産方式はすべて回分発酵法であり
回分発酵毎に保存されている乳酸生産菌を増殖させ順次
培養液量を増加させるといった繁雑な操作を伴なう前培
養のステップが必要とされていた。効率的な生産を目的
として発酵の連続化も考えられているが長期間にわたる
雑菌汚染防止技術が未確立なため、工業的に利用できず
もっばら回分発酵法にたよっているのが現状である。
回分発酵毎に保存されている乳酸生産菌を増殖させ順次
培養液量を増加させるといった繁雑な操作を伴なう前培
養のステップが必要とされていた。効率的な生産を目的
として発酵の連続化も考えられているが長期間にわたる
雑菌汚染防止技術が未確立なため、工業的に利用できず
もっばら回分発酵法にたよっているのが現状である。
Ｄ−乳酸の連続発酵による長期間の雑菌汚染防止技術が
未確立であるのでＤ−乳酸の回分発酵を反衝する半連続
発酵を試みた所１回分発酵を反復するだけでは生産物で
あるＤ−乳酸の純度が低下することが認められた。
未確立であるのでＤ−乳酸の回分発酵を反衝する半連続
発酵を試みた所１回分発酵を反復するだけでは生産物で
あるＤ−乳酸の純度が低下することが認められた。
この問題点を解決するため鋭意検討の結果１回分発酵を
反復しても高純度のＤ−乳酸を製造できる方法を見い出
し本発明を完成した。
反復しても高純度のＤ−乳酸を製造できる方法を見い出
し本発明を完成した。
本発明は糖類、無ｖ１塩類、増殖促進成分及び中和剤か
らなるＤ−乳酸発酵培地を用い、前培養で増殖したＤ−
乳酸生産菌を用いたＤ−乳酸発酵終了液の一部を次のＤ
−乳酸発酵培養の種菌としてＤ−乳酸発酵するに当り、
Ｄ−乳酸純度の低下を防止できる程度に増殖促進成分濃
度を高める事を特徴とするＤ−乳酸の製造方法である。
らなるＤ−乳酸発酵培地を用い、前培養で増殖したＤ−
乳酸生産菌を用いたＤ−乳酸発酵終了液の一部を次のＤ
−乳酸発酵培養の種菌としてＤ−乳酸発酵するに当り、
Ｄ−乳酸純度の低下を防止できる程度に増殖促進成分濃
度を高める事を特徴とするＤ−乳酸の製造方法である。
（使用微生物）
本発明で用いる事のできる微生物としてはＤ−乳酸を生
産する微生物であればいかなる微生物でもよく、例えば
スポロラクトバチルス・イヌリナスＡＴＣ０１５５３Ｂ
、 ラクトバチルス・デルブリッキーＩＦ０３５３
４ 、 ラクトバチルス・ライヒマニＪＣＭ１０１６
、 ラクトバチルスーライヒマニＪＣ旧５５７、ラ
クトバチルス・ラクティス０５Ｍ−２００７３などがあ
げられる。
産する微生物であればいかなる微生物でもよく、例えば
スポロラクトバチルス・イヌリナスＡＴＣ０１５５３Ｂ
、 ラクトバチルス・デルブリッキーＩＦ０３５３
４ 、 ラクトバチルス・ライヒマニＪＣＭ１０１６
、 ラクトバチルスーライヒマニＪＣ旧５５７、ラ
クトバチルス・ラクティス０５Ｍ−２００７３などがあ
げられる。
（培養方法）
これらのＤ−乳酸生産菌は先ず通常の回分発酵法におけ
る操作と同様の操作で種菌を調製する。つまり表−１に
示したＧＹＰ培地などで培養しＤ−乳酸生産菌の生育が
十分に達したら順次培養液量を増加させＤ−乳酸発酵培
地の種菌を調製する。この場合、培養液量の増加は１０
倍〜１０００倍程度で増加させればよい、このようにし
て順次培養液量を増加させて得た種菌を用いＤ−乳酸発
酵培地でＤ−乳酸を生産すればよい、Ｄ−乳酸発酵培地
の組成は用いる乳酸生産菌に適した培地を用いればよい
が基本的にはグルコース、フラクトース。
る操作と同様の操作で種菌を調製する。つまり表−１に
示したＧＹＰ培地などで培養しＤ−乳酸生産菌の生育が
十分に達したら順次培養液量を増加させＤ−乳酸発酵培
地の種菌を調製する。この場合、培養液量の増加は１０
倍〜１０００倍程度で増加させればよい、このようにし
て順次培養液量を増加させて得た種菌を用いＤ−乳酸発
酵培地でＤ−乳酸を生産すればよい、Ｄ−乳酸発酵培地
の組成は用いる乳酸生産菌に適した培地を用いればよい
が基本的にはグルコース、フラクトース。
シュークロース、ラクトース等の糖類のうち一種および
二種以上に対し、硫酸マグネシウム、硫酸アンモニウム
、リン酸第−カリウム、硫酸第一鉄等の無４１に塩類を
必要に応じて加え、増殖促進成分として酵母エキス、ペ
プトン、肉エキス、大豆粉等の成分を添加する必要があ
る。乳酸生産菌は一般に多くの栄養要求性を示すために
これらの増殖促進成分の添加は必須である。更にはこれ
らの乳酸生産菌は酸感受性を有するため中和剤でｐＨを
４．５以上７．０以下に保つ必要がある。このために中
和剤としてＣａＣＯ３，Ｃａ（ＯＨ）２． ＮａＯＨ，
ＫＯＨ、アンモニア等を用いる必要がある６発酵は嫌気
条件でおこなうため窒素等の不活性ガスを通気してもよ
い。
二種以上に対し、硫酸マグネシウム、硫酸アンモニウム
、リン酸第−カリウム、硫酸第一鉄等の無４１に塩類を
必要に応じて加え、増殖促進成分として酵母エキス、ペ
プトン、肉エキス、大豆粉等の成分を添加する必要があ
る。乳酸生産菌は一般に多くの栄養要求性を示すために
これらの増殖促進成分の添加は必須である。更にはこれ
らの乳酸生産菌は酸感受性を有するため中和剤でｐＨを
４．５以上７．０以下に保つ必要がある。このために中
和剤としてＣａＣＯ３，Ｃａ（ＯＨ）２． ＮａＯＨ，
ＫＯＨ、アンモニア等を用いる必要がある６発酵は嫌気
条件でおこなうため窒素等の不活性ガスを通気してもよ
い。
発酵温度は各々の乳酸生産菌に適した温度を用いればよ
く例えばスポロラクトバチルス・イヌリナスＡＴＣＣ１
５５３８では３７℃、ラクトバチルス・デルブリッキー
ＩＦＯ３５３４では４５〜５０℃が好ましい、このよう
な方法で１回目のＤ−乳酸発酵が終了した時点でその発
酵終了液のうち一部を種菌として用い次のＤ−乳酸発酵
を実施するに当り、１回目と同じ培地組成では高純度の
Ｄ−乳酸が得られないが増殖促進成分濃度を高める事に
より反復発酵においても高純度のＤ−乳酸を得る事がで
きる。反復発酵における増殖促進成分の濃度は最初のＤ
−乳酸発酵における最小必要濃度の少くとも２０％以上
、好ましくは５０％以上高濃度にするか、あるいは更に
別の種類の増殖促進成分を添加する事によってもよい。
く例えばスポロラクトバチルス・イヌリナスＡＴＣＣ１
５５３８では３７℃、ラクトバチルス・デルブリッキー
ＩＦＯ３５３４では４５〜５０℃が好ましい、このよう
な方法で１回目のＤ−乳酸発酵が終了した時点でその発
酵終了液のうち一部を種菌として用い次のＤ−乳酸発酵
を実施するに当り、１回目と同じ培地組成では高純度の
Ｄ−乳酸が得られないが増殖促進成分濃度を高める事に
より反復発酵においても高純度のＤ−乳酸を得る事がで
きる。反復発酵における増殖促進成分の濃度は最初のＤ
−乳酸発酵における最小必要濃度の少くとも２０％以上
、好ましくは５０％以上高濃度にするか、あるいは更に
別の種類の増殖促進成分を添加する事によってもよい。
添加量としては使用する菌により添加量は変わるが一般
的には０．１％以上、好ましくは０．５％程度の添加が
必要である。
的には０．１％以上、好ましくは０．５％程度の添加が
必要である。
表−Ｉ ＧＹＰ培地
グルコース ２０ｇ／文
酵母エキス Ｌｏｇ／ｌ
ペプトン ｌＯｇＺ見
酢酸ナトリウム １０ｇ／立
硫酸マグネシウム ０．２ｇ／ｌ
Ｆｅ５ｉＯａ ・７Ｈ２０１０ｍｇ／ １Ｍｎ５Ｏ・
４．５Ｈ０１０ｍｇ／ １ＮａＣ見
１０ｍｇ／文〔実施例〕 以下実施例により本発明を更に詳細に説明する。なお、
実施例におけるＤ−乳酸の純度測定は全乳酸量とイオン
交換樹脂（ＳＡＸ８０１）を用いたＨＰＬＣ法で、Ｌ−
乳酸をＬ−乳酸脱水素酵素を用いる酵素法で測定し次式
により算出したものである。
４．５Ｈ０１０ｍｇ／ １ＮａＣ見
１０ｍｇ／文〔実施例〕 以下実施例により本発明を更に詳細に説明する。なお、
実施例におけるＤ−乳酸の純度測定は全乳酸量とイオン
交換樹脂（ＳＡＸ８０１）を用いたＨＰＬＣ法で、Ｌ−
乳酸をＬ−乳酸脱水素酵素を用いる酵素法で測定し次式
により算出したものである。
実施例１〜２．比較例１
スポロラクトバチルス・イヌリナスＡＴＣＣ＋５５３８
をＧＹＰ培地に接種し３７℃、３日間静置培養し凱こ
の培養液１＋ｕをＣａＣＯ３１％含むＧＹＰ培地２５Ｉ
ｏｊに接種し３７℃、１日齢首培養し種菌を調製した。
をＧＹＰ培地に接種し３７℃、３日間静置培養し凱こ
の培養液１＋ｕをＣａＣＯ３１％含むＧＹＰ培地２５Ｉ
ｏｊに接種し３７℃、１日齢首培養し種菌を調製した。
この種菌１５０ＩＩＩＪを次に示す発酵培地３ｆＬに接
種し３７℃。
種し３７℃。
２００ ｒｐｍで攪拌発酵をおこなった。
発酵培地
グルコース １００ｇ／見
酵母エキス ５ｇ／見
Ｍｇ５Ｏ・７Ｈ２００，２ｇ ／交
Ｆｅ５０ ・７Ｈ２０１０ｍｇ／ １Ｍｎ５Ｏ・４．
５Ｈ２０１０ｍｇ／ ９−ＮａＣＱ
１０ ｒｒｒｇ／ ｌＣａＣＯ３６０ｇ ／ １ 発酵３７時間後においてグルコースは完全に消費され乳
酸９８ｇ／文が蓄積した。このもののＤ−乳酸純度は９
８．２％であった。この１回目のＤ−乳酸発酵終了液１
５０ｍｊを、■上記発酵培地（比較例１）、■上記発酵
培地の酵母エキス濃度を７．５ｇ／ｌに増加させた培地
（実施例１）、◎上記発酵培地にペプトン５ ｇ／ｌを
追加した培地（実施例２）、各々２８５０ ｔａｇに加
え発酵を実施した。得られたＤ−乳酸の純度は■（比較
例１）９７．３％、■（実施例１）９９．７％、■（実
施例２） ９１１．４％でめった。
５Ｈ２０１０ｍｇ／ ９−ＮａＣＱ
１０ ｒｒｒｇ／ ｌＣａＣＯ３６０ｇ ／ １ 発酵３７時間後においてグルコースは完全に消費され乳
酸９８ｇ／文が蓄積した。このもののＤ−乳酸純度は９
８．２％であった。この１回目のＤ−乳酸発酵終了液１
５０ｍｊを、■上記発酵培地（比較例１）、■上記発酵
培地の酵母エキス濃度を７．５ｇ／ｌに増加させた培地
（実施例１）、◎上記発酵培地にペプトン５ ｇ／ｌを
追加した培地（実施例２）、各々２８５０ ｔａｇに加
え発酵を実施した。得られたＤ−乳酸の純度は■（比較
例１）９７．３％、■（実施例１）９９．７％、■（実
施例２） ９１１．４％でめった。
実施例３〜４．比較例２
実施例１と同様の方法で１回目のＤ−乳酸発酵を実施し
た０発酵３９時間後においてグルコースは完全に消費さ
れ乳＃９７ ｇ／ｌが蓄積した。このもののＤ−乳酸純
度は９９．３％であった。このＤ−乳酸発酵終了液を用
い、酵母エキス濃度を表−２に示す濃度にして更に次の
発酵を行った。結果を表−２に示した。
た０発酵３９時間後においてグルコースは完全に消費さ
れ乳＃９７ ｇ／ｌが蓄積した。このもののＤ−乳酸純
度は９９．３％であった。このＤ−乳酸発酵終了液を用
い、酵母エキス濃度を表−２に示す濃度にして更に次の
発酵を行った。結果を表−２に示した。
表 −２
（本） ３回目発酵の種菌として用いた〔発明の効果〕
Ｄ−乳酸発酵に於て、増殖促進成分濃度を高めることに
より前回の発酵終了液を種菌として用いて発酵を行って
もＤ−乳酸純度を高く保つことが出来た。
より前回の発酵終了液を種菌として用いて発酵を行って
もＤ−乳酸純度を高く保つことが出来た。
Ｄ−乳酸は各種光学活性化合物を化学合成するための出
発物質として重要であり近年り一乳酸に対す°る需要が
増大しつつあり、本発明により工業的規模での効率的な
り一乳酸の製造が可能となった。
発物質として重要であり近年り一乳酸に対す°る需要が
増大しつつあり、本発明により工業的規模での効率的な
り一乳酸の製造が可能となった。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、糖類、無機塩類、増殖促進成分及び中和剤からなる
Ｄ−乳酸発酵培地を用い、前培養で増殖したＤ−乳酸生
産菌を用いたＤ−乳酸発酵終了液の一部を次のＤ−乳酸
発酵の種菌としＤ−乳酸発酵するに当り、Ｄ−乳酸純度
の低下を防止できる程度に増殖促進成分濃度を高める事
を特徴とするＤ−乳酸の製造方法。 ２、増殖促進成分が酵母エキスである特許請求の範囲第
１項記載のＤ−乳酸の製造方法。
Priority Applications (6)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2290785A JPS61181389A (ja) | 1985-02-08 | 1985-02-08 | Ｄ−乳酸の製造方法 |
| EP86101628A EP0190770B1 (en) | 1985-02-08 | 1986-02-07 | Fermentation to d-lactic acid |
| DE8686101628T DE3686893T2 (de) | 1985-02-08 | 1986-02-07 | Gaerung zur gewinnung von d-milchsaeure. |
| EP91112523A EP0458370B1 (en) | 1985-02-08 | 1986-02-07 | Fermentation to d-lactic acid |
| DE3650395T DE3650395T2 (de) | 1985-02-08 | 1986-02-07 | Gärung zur Gewinnung von d-Milchsäure. |
| US08/250,094 US5466588A (en) | 1985-02-08 | 1994-05-26 | Production of high optical purity D-lactic acid |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2290785A JPS61181389A (ja) | 1985-02-08 | 1985-02-08 | Ｄ−乳酸の製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS61181389A true JPS61181389A (ja) | 1986-08-14 |
| JPH0559706B2 JPH0559706B2 (ja) | 1993-08-31 |
Family
ID=12095706
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2290785A Granted JPS61181389A (ja) | 1985-02-08 | 1985-02-08 | Ｄ−乳酸の製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS61181389A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2008104451A (ja) * | 2006-09-26 | 2008-05-08 | Toray Ind Inc | 連続発酵によるｄ−乳酸の製造方法 |
| WO2010143323A1 (ja) * | 2009-06-08 | 2010-12-16 | 国立大学法人 九州大学 | 新規なｄ－乳酸生産菌及びｄ－乳酸を生産する方法 |
-
1985
- 1985-02-08 JP JP2290785A patent/JPS61181389A/ja active Granted
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2008104451A (ja) * | 2006-09-26 | 2008-05-08 | Toray Ind Inc | 連続発酵によるｄ−乳酸の製造方法 |
| WO2010143323A1 (ja) * | 2009-06-08 | 2010-12-16 | 国立大学法人 九州大学 | 新規なｄ－乳酸生産菌及びｄ－乳酸を生産する方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0559706B2 (ja) | 1993-08-31 |
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