JPS61289005A - 植物病原菌胞子発芽抑制剤 - Google Patents
植物病原菌胞子発芽抑制剤Info
- Publication number
- JPS61289005A JPS61289005A JP60130339A JP13033985A JPS61289005A JP S61289005 A JPS61289005 A JP S61289005A JP 60130339 A JP60130339 A JP 60130339A JP 13033985 A JP13033985 A JP 13033985A JP S61289005 A JPS61289005 A JP S61289005A
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- JP
- Japan
- Prior art keywords
- iturine
- plant pathogenic
- sporulation
- germ
- culture
- Prior art date
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- Pending
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は植物病原菌胞子発芽抑制剤に関し、詳しくはｉ
ｔｕｒｉｎｅ −Ａを有効成分とする植物病原菌胞子発
芽抑制剤に関するものである。更に、詳しくは、ｉｔｕ
ｒｉｎｅ −Ａ生産菌によって生産され、下式、で表さ
れる公知の物質ｉｔｕｒｉｎｅ −Ａを有効成分とする
植物病原菌胞子発芽抑制剤に関するものである。
ｔｕｒｉｎｅ −Ａを有効成分とする植物病原菌胞子発
芽抑制剤に関するものである。更に、詳しくは、ｉｔｕ
ｒｉｎｅ −Ａ生産菌によって生産され、下式、で表さ
れる公知の物質ｉｔｕｒｉｎｅ −Ａを有効成分とする
植物病原菌胞子発芽抑制剤に関するものである。
有用な農業、園芸等の植物病害菌からの防除はその生産
性や省力化に欠くことのできない手法であり、特に主要
農作物である稲は、その栽培期中に害虫による被害のみ
でなく、種々の植物病原菌による被害を受けるが、とく
に、イモチ病（Ｐｉｒｉｃｕｌａｒｉａｏｒｙｚａｅ）
による被害は最も大きなものであり、その防除は重要で
ある。更に、また、これら植物病害菌はその有効な防除
剤に対して数年を経ないでその耐性菌の現れることから
、種々の対抗防除剤を開発しておくことは極めて重要で
ある。
性や省力化に欠くことのできない手法であり、特に主要
農作物である稲は、その栽培期中に害虫による被害のみ
でなく、種々の植物病原菌による被害を受けるが、とく
に、イモチ病（Ｐｉｒｉｃｕｌａｒｉａｏｒｙｚａｅ）
による被害は最も大きなものであり、その防除は重要で
ある。更に、また、これら植物病害菌はその有効な防除
剤に対して数年を経ないでその耐性菌の現れることから
、種々の対抗防除剤を開発しておくことは極めて重要で
ある。
本発明者はイモチ病菌胞子の発芽をスクリーニングの指
標として、胞子発芽の抑制活性因子を広く探索した結果
、稲葉上より分離した、バチルス・ズブチリス種の培養
液に強い胞子発芽抑制効果のあることを発見した。そし
て、同菌の培養液中の活性因子について、鋭意研究をし
た結果、次の構造を有する、ｉｔｕｒｉｎｅ −Ａ （
式中、Ｒはアルキルである）を単離した。
標として、胞子発芽の抑制活性因子を広く探索した結果
、稲葉上より分離した、バチルス・ズブチリス種の培養
液に強い胞子発芽抑制効果のあることを発見した。そし
て、同菌の培養液中の活性因子について、鋭意研究をし
た結果、次の構造を有する、ｉｔｕｒｉｎｅ −Ａ （
式中、Ｒはアルキルである）を単離した。
この同活性物質は、菌糸の成長を阻害する効果が報告さ
れている公知の物質であるが、本発明者において別途に
胞子発芽抑制という観点から初めて単離されたことから
植物病原菌胞子発芽抑制剤として、単品及び、必要に応
じて、不活性の液体または固体状の担体および、または
希釈剤、溶剤、乳化剤その他の補助剤等を用いて、イモ
チ病菌胞子（〜由血ｒｉａ ｏｒｙｚ徊）、フハイ病菌
胞子（Ｆｕｓａｒｉｔ皿ｏｘｙｓｐｏｍｍ）、立枯病菌
胞子（Ｒｈｉｚａｃｔｏｎｉａ ５ｏｌａｎｉ ）、ゴ
マハガレ病胞子（Ｈｅｌｍｉｎｔｈｏｓｐｏｒｉｕｍ
ｏｒｙｚａｅ） 、ハイイロカビ病菌胞子（Ｂｏｔｒｙ
ｔｉｓ ｃｉｎｅｒｅａ ）等の植物病原菌胞子の発芽
を抑制し、更に、発芽管の伸長を低濃度で抑制すること
から、その病害予防に有効であることを見出し本発明を
完成した。
れている公知の物質であるが、本発明者において別途に
胞子発芽抑制という観点から初めて単離されたことから
植物病原菌胞子発芽抑制剤として、単品及び、必要に応
じて、不活性の液体または固体状の担体および、または
希釈剤、溶剤、乳化剤その他の補助剤等を用いて、イモ
チ病菌胞子（〜由血ｒｉａ ｏｒｙｚ徊）、フハイ病菌
胞子（Ｆｕｓａｒｉｔ皿ｏｘｙｓｐｏｍｍ）、立枯病菌
胞子（Ｒｈｉｚａｃｔｏｎｉａ ５ｏｌａｎｉ ）、ゴ
マハガレ病胞子（Ｈｅｌｍｉｎｔｈｏｓｐｏｒｉｕｍ
ｏｒｙｚａｅ） 、ハイイロカビ病菌胞子（Ｂｏｔｒｙ
ｔｉｓ ｃｉｎｅｒｅａ ）等の植物病原菌胞子の発芽
を抑制し、更に、発芽管の伸長を低濃度で抑制すること
から、その病害予防に有効であることを見出し本発明を
完成した。
本発明で使用する上記菌は宮城県仙台市内の稲葉上より
分離されたもので、次のごとき菌学的性質を有する。
分離されたもので、次のごとき菌学的性質を有する。
（ａ） 形態
（１）細菌の形：桿状
（２）細胞の大きさ二〇、８〜ｏ、ｓ／１ｍ（３）多形
性：なし く４）運動性：あり、側鞭毛を有する （５）胞子：あり （６）ダラム染色性：陽性 （ｂ） 生育伏態 ２８°Ｃで培養し、７日間にわたって観察した。
性：なし く４）運動性：あり、側鞭毛を有する （５）胞子：あり （６）ダラム染色性：陽性 （ｂ） 生育伏態 ２８°Ｃで培養し、７日間にわたって観察した。
（１）肉汁寒天平板培養：多量生育、２日後、１．０〜
２．Ｏｍｍ不規則円形、色彩はクリーム色、可溶性色素
は生成しない。
２．Ｏｍｍ不規則円形、色彩はクリーム色、可溶性色素
は生成しない。
（２）肉汁寒天斜面培養：表面に生育し、不透明、乳白
色後やや黄味。
色後やや黄味。
（３）肉汁液体培養：多量生育し、濁り後沈澱する、橙
色を呈す。
色を呈す。
（４） リドマス・ミルり：ペプトン化ＬｐＨはやや
アルカリ性を示す。
アルカリ性を示す。
（Ｃ） 生理学的性質
（１）硝酸塩の還元：陽性
（２）ＶＰテスト：陽性
（３）インドールの生成：陽性
（４）デンプンの加水分解：陽性
（５）クエン酸の利用：陽性
（６）プロピオン酸の利用：陰性
（７）７％ＮａＣ１培地：生育
（８）アジド培地：生育せず
（９）色素の生産（肉汁寒天培地に１％のブドウ糖及び
チロシンを加え色素の生産を調べた）：陰性 （１０）カゼイン分解二分解する （１１）カタラーゼ：陽性 （１２）嫌気培養：陰性 （１３）卵黄反応：陰性 （１４）チロシンの分解二分解せず （１５）ゼラチンの液化：溶解 （１６）リゾチーム抵抗試験：陽性 （１７）馬尿酸塩の分解：陰性 （１８）炭素源より酸の生成 グルコース；陽性 アラビノース：陽性 ギシロース：陽性 マニトール：陽性 （ｄ） サバロウド・デキストロース培地（ディフコ
製）：生育 以上の諸性質をバージエンスｅマニュアル・オン・デタ
ーミイネテイブ・バクテリオロジ−（Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ
Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｖｅ
Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ ） 第８版、１９７４年
の記載と比較すると本菌株は好気性のグラム陽性桿菌で
側鞭毛による運動性を有することからバチルス（Ｂａｃ
ｉｌｌｕｓ ）属に属するものと判断される。バチルス
属の中でも馬尿酸塩の分解、生育温度、炭素源の利用性
などの特徴からバチルス・ズブチリスの一菌株と同定し
、バチルス・ズブチリスＮ ｏ、Ｎ Ａ −ａ ｐ ｂ
−１（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ５ｕｂｔｉｌｉｓ Ｎｏ、
ＮＡ−ａｐｂ−１）と命名し、工業技術院微生物工業技
術研究所に微生物受託番号微工研菌寄７６６１号（昭和
５９年６月１１１１付）として寄託した。
チロシンを加え色素の生産を調べた）：陰性 （１０）カゼイン分解二分解する （１１）カタラーゼ：陽性 （１２）嫌気培養：陰性 （１３）卵黄反応：陰性 （１４）チロシンの分解二分解せず （１５）ゼラチンの液化：溶解 （１６）リゾチーム抵抗試験：陽性 （１７）馬尿酸塩の分解：陰性 （１８）炭素源より酸の生成 グルコース；陽性 アラビノース：陽性 ギシロース：陽性 マニトール：陽性 （ｄ） サバロウド・デキストロース培地（ディフコ
製）：生育 以上の諸性質をバージエンスｅマニュアル・オン・デタ
ーミイネテイブ・バクテリオロジ−（Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ
Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｖｅ
Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ ） 第８版、１９７４年
の記載と比較すると本菌株は好気性のグラム陽性桿菌で
側鞭毛による運動性を有することからバチルス（Ｂａｃ
ｉｌｌｕｓ ）属に属するものと判断される。バチルス
属の中でも馬尿酸塩の分解、生育温度、炭素源の利用性
などの特徴からバチルス・ズブチリスの一菌株と同定し
、バチルス・ズブチリスＮ ｏ、Ｎ Ａ −ａ ｐ ｂ
−１（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ５ｕｂｔｉｌｉｓ Ｎｏ、
ＮＡ−ａｐｂ−１）と命名し、工業技術院微生物工業技
術研究所に微生物受託番号微工研菌寄７６６１号（昭和
５９年６月１１１１付）として寄託した。
これまで、植物病原菌に用いられている、たとえば、抗
生物質防除剤としては、プラストサイジン・８１カスガ
マイシン等があるが、近年、その使用に伴い耐性菌の出
現していることから、このような耐性菌に対して、本発
明者によって提供される植物病原菌胞子発芽抑制剤は広
く利用されることが期待されるものである。
生物質防除剤としては、プラストサイジン・８１カスガ
マイシン等があるが、近年、その使用に伴い耐性菌の出
現していることから、このような耐性菌に対して、本発
明者によって提供される植物病原菌胞子発芽抑制剤は広
く利用されることが期待されるものである。
従って、本発明は、バチルス属に属するズブチリス種の
ｉｔｕｒｉｎｅ −Ａ生産性を有するバチルス舎ズブチ
リスＮ ｏ、 ＮＡ−ａ ｐ ｂ−１（Ｂａｃｉｕｕｓ
５ｕｂｔｉｌｉｓ Ｎｏ 、 ＮＡ−ａｐｂ−１）で
生産される１ｔｕｒｉｎｎ−Ａを有効成分とする植物病
菌胞子発芽抑制剤として出来る。
ｉｔｕｒｉｎｅ −Ａ生産性を有するバチルス舎ズブチ
リスＮ ｏ、 ＮＡ−ａ ｐ ｂ−１（Ｂａｃｉｕｕｓ
５ｕｂｔｉｌｉｓ Ｎｏ 、 ＮＡ−ａｐｂ−１）で
生産される１ｔｕｒｉｎｎ−Ａを有効成分とする植物病
菌胞子発芽抑制剤として出来る。
本発明の植物病菌胞子発芽抑制剤の製法としては、バチ
ルス・ズブチリスＮｏ、ＮＡ−ａ ｐ ｂ−１（＆ｃｉ
ｌｌｕｓ ５ｕｂｔｉｌｓ Ｎｏ、ＮＡ−ａ ｐ ｂ−
１）菌株を利用可能な栄養物を含有する培地で培養して
行なわれる。
ルス・ズブチリスＮｏ、ＮＡ−ａ ｐ ｂ−１（＆ｃｉ
ｌｌｕｓ ５ｕｂｔｉｌｓ Ｎｏ、ＮＡ−ａ ｐ ｂ−
１）菌株を利用可能な栄養物を含有する培地で培養して
行なわれる。
培地組成としては、たとえば、じゃがいも煎汁、澱粉、
グリセリン、デキストリン、しよ糖、麦芽糖、ブドウ糖
等の炭素源、ペプトン、肉エキス、カゼイン加水分解物
、コーン・スチープｅリカー、グルテンミール、無機窒
素源等が用いられる。また必要に応じて炭酸カルシウム
、燐酸２水素カリウム、燐酸水素２カリウム、塩化マグ
ネシウム、塩化ナトリウム等の無機塩が添加される。培
地温度は２０〜３０°Ｃが適当である。種培養は固体培
養でも液体培養でもよい。本培養の場合は攪拌培養、振
とう培養、通気培養等が用いられる。培養あるいは培養
滅菌中消泡を必要とするときはシリコーンオイル、界面
活性剤等の消泡剤が使用できる。
グリセリン、デキストリン、しよ糖、麦芽糖、ブドウ糖
等の炭素源、ペプトン、肉エキス、カゼイン加水分解物
、コーン・スチープｅリカー、グルテンミール、無機窒
素源等が用いられる。また必要に応じて炭酸カルシウム
、燐酸２水素カリウム、燐酸水素２カリウム、塩化マグ
ネシウム、塩化ナトリウム等の無機塩が添加される。培
地温度は２０〜３０°Ｃが適当である。種培養は固体培
養でも液体培養でもよい。本培養の場合は攪拌培養、振
とう培養、通気培養等が用いられる。培養あるいは培養
滅菌中消泡を必要とするときはシリコーンオイル、界面
活性剤等の消泡剤が使用できる。
培養はｉｔｕｒｉｎｅ −Ａが実質的に蓄積されるまで
続け、本物質の培養液からの抽出は、後記製造例に示す
ごとく、生成したｉｔｕｒｉｎｅ −Ａは主に培養濾液
中に存在するので、遠心分離、または濾過により菌体を
除去した後、その上清液から精製、採取される。同抑制
因子を精製、採取するには通常微生物の代謝産物を採取
するのに用いられる手段を適宜利用することができる。
続け、本物質の培養液からの抽出は、後記製造例に示す
ごとく、生成したｉｔｕｒｉｎｅ −Ａは主に培養濾液
中に存在するので、遠心分離、または濾過により菌体を
除去した後、その上清液から精製、採取される。同抑制
因子を精製、採取するには通常微生物の代謝産物を採取
するのに用いられる手段を適宜利用することができる。
例えば減圧濃縮、凍結乾燥、溶媒抽出、樹脂による処理
、吸着剤による処理、結晶化、再結晶等の手段を単独、
あるいは任意の順序に組合せ、または反復して濾液から
目的物質の分離、精製、採取を行う。
、吸着剤による処理、結晶化、再結晶等の手段を単独、
あるいは任意の順序に組合せ、または反復して濾液から
目的物質の分離、精製、採取を行う。
さらに具体的にその一例を述べるならば、培養終了後、
培養液を濾過補助剤を用いて濾過し、菌体を除去する。
培養液を濾過補助剤を用いて濾過し、菌体を除去する。
得られた濾液を減圧下で濃縮し、有機溶媒たとえば酢酸
エチル、ヘキサン、クロロホルム、アセトン等を添加し
て目的外物を抽出除去する。ここで得られた残物をアル
コールし、抽出物を減圧下で濃縮し、たとえば、シリカ
ゲルの如き吸気剤を用いたクロマトグラフィーにかける
。吸気剤としてシリカゲルを用いた場合には、溶出溶媒
に、ブタノール、エタノール、クロロホルム、アンモニ
ア水、水等の混合溶媒系を用いて展開溶出する。溶出液
を適宜分画し、目的物質を含む両分を集め減圧下低温で
濃縮乾固して粗物質を得る。得られた粗物質を更に精製
するためこれらの手段を適当に組合せて、使用すること
により、本物質は培養液から単離される。このようにし
て、得られたｉｔｕｒｉｎｅ − Ａは、そのもの自体
或は必要に応じて不活性の液体又は固体状の単体および
、または希釈剤、溶剤、乳化剤その他の補助剤等を用い
、目的植物病菌胞子に施行することにより、目的を達す
ることができる。
エチル、ヘキサン、クロロホルム、アセトン等を添加し
て目的外物を抽出除去する。ここで得られた残物をアル
コールし、抽出物を減圧下で濃縮し、たとえば、シリカ
ゲルの如き吸気剤を用いたクロマトグラフィーにかける
。吸気剤としてシリカゲルを用いた場合には、溶出溶媒
に、ブタノール、エタノール、クロロホルム、アンモニ
ア水、水等の混合溶媒系を用いて展開溶出する。溶出液
を適宜分画し、目的物質を含む両分を集め減圧下低温で
濃縮乾固して粗物質を得る。得られた粗物質を更に精製
するためこれらの手段を適当に組合せて、使用すること
により、本物質は培養液から単離される。このようにし
て、得られたｉｔｕｒｉｎｅ − Ａは、そのもの自体
或は必要に応じて不活性の液体又は固体状の単体および
、または希釈剤、溶剤、乳化剤その他の補助剤等を用い
、目的植物病菌胞子に施行することにより、目的を達す
ることができる。
次に本発明の胞子抑制における実施例を示すが、同有効
成分の植物病原菌胞子抑制剤は諸種の修飾施行が可能で
あり、本発明は実施例に限定されるものではなくすでに
明らかにされている全ての施行法を含むものである。
成分の植物病原菌胞子抑制剤は諸種の修飾施行が可能で
あり、本発明は実施例に限定されるものではなくすでに
明らかにされている全ての施行法を含むものである。
製造例
肉エキス１％、ペプトン１％、酵母エキス０．２５％、
ＮａＣ１ ０，５％を含む液体培地に、バチルス・ズー
／ｆリスＮｏ，Ｎａ−ａ ｐ ｂ−１株を接種して２８
°Ｃにて５０時間好気適に培養した。得られた培養濾液
（３Ｑｌｔｅｒ） を減圧下低温で濃縮し、酢酸エチ
ル、洗浄後、メタノールで抽出した。抽出液を減圧低温
で濃縮乾固し、同物質をシリカゲル（ＯＤＳ）カラムク
ロマトグラフィー、展開溶媒６０〜８０％メタノールで
溶出し抑制因子含有、初流液２．５１ｉｔｅｒを採取し
た。この溶出液を濃縮乾固し、同操作を適時繰返すこと
によって白色粉末のｉｔｕｒｉｎｅ − Ａを１００
ｍ ｇ得た。このものは、別途得た標品と完全に一致し
た。
ＮａＣ１ ０，５％を含む液体培地に、バチルス・ズー
／ｆリスＮｏ，Ｎａ−ａ ｐ ｂ−１株を接種して２８
°Ｃにて５０時間好気適に培養した。得られた培養濾液
（３Ｑｌｔｅｒ） を減圧下低温で濃縮し、酢酸エチ
ル、洗浄後、メタノールで抽出した。抽出液を減圧低温
で濃縮乾固し、同物質をシリカゲル（ＯＤＳ）カラムク
ロマトグラフィー、展開溶媒６０〜８０％メタノールで
溶出し抑制因子含有、初流液２．５１ｉｔｅｒを採取し
た。この溶出液を濃縮乾固し、同操作を適時繰返すこと
によって白色粉末のｉｔｕｒｉｎｅ − Ａを１００
ｍ ｇ得た。このものは、別途得た標品と完全に一致し
た。
実施例
イモチ病菌胞子発芽および発芽管抑制試験は同菌の胞子
濃度８Ｘ１０／ｍｌの懸濁液と表−１のように２０ｐｐ
ｍの，界面活性剤（Ｔｗｅｅｎ − ８３）で濃度を調
整した胞子発芽抑制剤施行液と良く混ぜ、その溶液をス
ライドグラス（１，５Ｘ １０ ｃ ｍ）に滴下し、２
５°Ｃ１１５時間インキュベートした。胞子発芽管抑制
判定はそのインキュベートした溶液にラクトフェノール
・コツトンブル−で染色（同定染色）し、顕微鏡下で胞
子の発芽および発芽管伸長を観察し計測する。その結果
を表−１に示した。
濃度８Ｘ１０／ｍｌの懸濁液と表−１のように２０ｐｐ
ｍの，界面活性剤（Ｔｗｅｅｎ − ８３）で濃度を調
整した胞子発芽抑制剤施行液と良く混ぜ、その溶液をス
ライドグラス（１，５Ｘ １０ ｃ ｍ）に滴下し、２
５°Ｃ１１５時間インキュベートした。胞子発芽管抑制
判定はそのインキュベートした溶液にラクトフェノール
・コツトンブル−で染色（同定染色）し、顕微鏡下で胞
子の発芽および発芽管伸長を観察し計測する。その結果
を表−１に示した。
表−１
ハイイロカビ病菌胞子 ＋＋十＋
＊＃特許出願人 工業技術院長 等々力
達しく、置丁；
＊＃特許出願人 工業技術院長 等々力
達しく、置丁；
Claims (1)
- １ 植物病原菌胞子発芽抑制因子ｉｔｕｒｉｎｅ−Ａを
有効成分とすることを特徴とする植物病原菌胞子発芽抑
制剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60130339A JPS61289005A (ja) | 1985-06-14 | 1985-06-14 | 植物病原菌胞子発芽抑制剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60130339A JPS61289005A (ja) | 1985-06-14 | 1985-06-14 | 植物病原菌胞子発芽抑制剤 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS61289005A true JPS61289005A (ja) | 1986-12-19 |
Family
ID=15032011
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP60130339A Pending JPS61289005A (ja) | 1985-06-14 | 1985-06-14 | 植物病原菌胞子発芽抑制剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS61289005A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1998021968A1 (en) * | 1996-11-18 | 1998-05-28 | Marrone, Pamela, Gail | Antibiotic-producing strain of bacillus and methods for controlling plant diseases |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS59212416A (ja) * | 1983-05-19 | 1984-12-01 | Ajinomoto Co Inc | 農業用殺菌剤 |
-
1985
- 1985-06-14 JP JP60130339A patent/JPS61289005A/ja active Pending
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS59212416A (ja) * | 1983-05-19 | 1984-12-01 | Ajinomoto Co Inc | 農業用殺菌剤 |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1998021968A1 (en) * | 1996-11-18 | 1998-05-28 | Marrone, Pamela, Gail | Antibiotic-producing strain of bacillus and methods for controlling plant diseases |
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