JPS61271216A - 抗腫瘍剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野〕 本発明は抗腫瘍剤に関する。

（発明の構成） 本発明者等は種々の植物中に含まれる生理活性物質を探
索し、それらの薬効について検討中のところ、さきに、
ヒノキ科の植物であるシップヒバ中に存在するビシ７エ
リン酸およびそのアルキル誘導体が抗腫瘍作用を示すこ
とを知った。本発明者等は上記の知見に基づいて更に研
究の結果、上記物質以外の種々のビシフェリン醗誘導体
が類似の効果を奏することを知り本発明を達成し友もの
である。

すなわち、本発明の要旨は、〔１ン式 ％式％ （式中Ｘはヒドロキシメチル基、ホルミル基、アセトキ
シメチル基、メトキシメチル基、アルキル基又はカルボ
キシル基を示し、Ｙはヒドロキシル基又はアシロキシ基
を示す。ただし、Ｘがカルボキシル基のときＹはアシロ
キシ基を示す。） で表わされるジテルペンを有効成分とする抗腫瘍剤に存
する。

本発明の詳細な説明するに、本発明の有効成分であるジ
テルペンとしては、前示〔１〕式におけるＸが、ヒドロ
キシメチル基、アルデヒド基、アセトキシメチル基、メ
トキシメチル基、Ｃ数が７〜７０％にｌ〜乙のアルキル
基又はカルボキシル基でおり、また、Ｙがヒドロキシル
基又はアシロキシ基［−００ＯＲ’（ＲはＣ数が／〜１
０特に／−４のアルキル基〕〕である種々のが挙げられ
る。なお、Ｘがカルボキシル基のときＹはアシロキシ基
のみを示す。

これらの化合物は、例えば、次のようにして製造される
。

即ち、後記実施例に記載するように、前記［１］式にお
いて、Ｘがヒドロキシメチル基で、Ｙがヒドロキシル基
の化合物ｌは、Ｘがメトキシカルボニル基で、Ｙがヒド
ロキシル基であるメチルピシフェレートを、リチウムア
ルミニウムハイトライがヒドロキシル基の化合物２は、
化合物１をジョーンズ（Ｊｏｎｅｓ　）試薬で酸化して
製造される。

また、［１］式において、Ｘがメチル基で、Ｙがヒドロ
キシル基の化合物３は、化合物２に無水ヒドラジンを反
応させた後、苛性カリで還元することによって得られる
。

更に、［１コ式において、Ｘがアセトキシメチル基で、
Ｙがヒドロキシル基の化合物４は、メチルビシフエレー
トにジヒドロビランを反応させてヒドロキシル基をテト
ラヒドロピラニル基で保護した後、還元してメトキシカ
ルボニル基をヒドロキシメチル基に変え（中間体）、次
いで無水酢酸でアセチル化してヒドロキシメチル基をア
セトキシメチル基に変えた後、テトラヒドロピラニル基
を加水分解することによって製造される。

また、［１コ式においてＸがメトキシメチル基で、Ｙが
ヒドロキシル基の化合物５は、化合物４製造時の前記中
間体のヒドロキシメチル基をヨウ化メチルでメチル化し
た後、テトラヒドロピラニル基を加水分解することによ
って得られる。

更に、前記［１１式において、Ｘがアルキル基で、Ｙが
ヒドロキシル基の化合物６〜１０は、前記化合物２のヒ
ドロキシル基をテトラヒドロピラニル基で保護した後、
アルキルトリフェニルホスホニウムブロマイド又はイオ
ダイド（アルキルイオダイドとトリフェニルホスフィン
から得られる）と反応［ビテイッヒ（Ｗｉｔｔｉｇ）反
応コさせ、得られた縮合物のテトラヒドロピラニル基を
除去した後、接触還元（Ｐｄ−Ｃ触媒使用）することに
よって製造される。

なお、［１］式におけるＹがアシロキシ基である化合物
１１〜１９は、Ｘがヒドロキシメチル基である場合（化
合物１１）を除き、Ｙがヒドロキシル基である相当する
化合物を、夫々無水酢酸、無水プロピオン酸等の無水脂
肪族カルボン酸でアシル化することにより得られる。

Ｘがヒドロキシメチル基で、Ｙがアセトキシ基ヒドロキ
シメチル基に還元すればよい。

（発明の効果） これらのジテルペンは、後記実施例に示すように、ヒー
ラ（ＨｅＬａ）細胞（ヒト子宮頚癌組織から分離された
細胞株）に対し優れた細胞増殖阻止作用を示し、抗腫瘍
剤として有用である。

抗腫瘍剤として用いる場合、静脈内注射、皮下注射、経
口カプセル等の方法で投与され、投与量は、成人に対し
、水溶剤（注ＩＪ′Ｊ）では、５〜１００ｍｇ／ｋｇ体
重、経口剤では、２０〜５００　ｍｇ／ｋｇ体重の範囲
である。注射、点滴用製剤とするときは、単位投与量ア
ンプルあるいは添加防腐剤と共に多投４量容器中に提供
される。この製剤は、懸濁液・溶液・油性又は水性ビヒ
クル中の乳液のような形態であってよく、グルコース、
ゼラチンのような懸濁液、レシチン、リノール酸のよう
な安定化剤、アーモンド油、ココナツト油のような非水
性ビヒクル、ｐ−ヒドロキシ安息香酸メチルのような防
腐剤を含んでいてもよい。

本発明の抗腫瘍剤を経口投与製剤とするには、カプセル
のような腸管からの吸収に好適な形態で提供されること
が好ましい、カプセルでは、ゼラチンのような結合剤、
乳糖のような賦形剤、ステアリン酸マグネシウムのよう
な安定剤、馬鈴薯澱粉のような崩壊剤を含有させること
ができる。また、シクロデキストリンのような包接剤に
よる包接化合物とし、更に該包接化合物をアクリル酸メ
チル・メタアクリル酸共重合体のような腸溶性皮膜形成
物質を用いて皮膜を施すことができる。製剤化の方法は
、注射、点滴用製剤、経口投与用製剤のいずれの場合に
おいても常法でよい。

（＊施例） 以下本発明を実施例について更に詳細に説明する。

ヒーラ細胞増殖抑制試験 下記の表１に示す試料化合物をジメチルスルホキシドに
溶解し、これを５ｚ仔牛血清を加えたイーグルＭＥＭ培
地で所定濃度に希釈し、９６穴のマイクロプレートに１
００μｌ／穴で分注した。

えた。

これを炭酸ガス雰囲気下、３７℃で４日間培養した後ゲ
ンチアナバイオレット染色液でマイクロプレートの底に
付着増殖したヒーラ細胞を染色した。

水で過剰の染色液を洗浄後、染色されたヒーラ細胞の色
素をエタノール（１００μｍ７穴）で溶出し、その濃度
を分光光度計で測定した。

細胞数と染色された色素の量は比例するので、上記で測
定した試料の各濃度に対する色素濃度をプロットし、こ
のグラフから対照（試料化合物が無い場合）におけるヒ
ーラ細胞の数（１００！とする）の５０Ｘに相当する試
料化合物の濃度をＥ　Ｄ、ｏとして求めた。その結果を
表１に示した。

表１ 参考のため上記実施例に用いた化合物の製法を以下に例
示する。

［ｉｌ造例コ 化合物１の製造 アルゴン気流中で、無水エーテル１０　ｍｌにリチウム
アルミニウムハイドライド　１２７ＩＩＩｇを懸濁させ
、これにメチルビシフニレ−）２７６ｍｇの無水エーテ
ル溶液５１を０℃で滴加した。室温で２０時間攪拌した
後、少量の水を加えて過剰の試薬を分解した。反応液を
エーテル中に注入し、飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネ
シウムで乾燥し、減圧上濃縮した。得られた残渣を分取
浦和クロマトグラフィー（シリカゲル６０−使用、以下
同様、ｎ−へキサン：アセトン＝　７：３）に付して、
２５８　ｎｇの化合物ｌを得た。

化合物２の製造 ３５　ｍｇの上記化合物１をアセトン　１１に溶解し０
℃でジョーンズ試薬２滴を加えて数分間攪拌した。反応
液を飽和食塩水中に注入し、クロロホルムで抽出した。

クロロホルム層を飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシウ
ムで乾燥し、減圧上濃縮した。得られた残渣を分取４相
クロマトグラフィー（ｎ−へキサン：アセトン＝８５：
１５）に付して、２２　Ｂの化合物２を得た。

化合物３の製造 １４０　ｍｇの上記化合物２に、トリエチレングリコー
ル５１．無水ヒドラジン２．４　ｍｌ　、ヒドラジンニ
塩酸塩５００　ｍｇを加え、１４０℃で１４時間攪拌し
た０反応液を室温まで 冷却した後、苛性カリ顆粒２．６ｇを加えて１５０℃で
２時間、１５０〜２００℃で２時間、更に２１０℃で３
時間攪拌した。反応液を飽和食塩水中に注入し、ｎ−ヘ
キサンで抽出し、ｎ−ヘキサン層を硫酸マグネシウムで
乾燥し、減圧上濃縮した。得られた残渣を分取４相クロ
マトグラフィー（ｎ　−ヘキサン：アセトン＝９：ｌ　
　）に付して、１０３閤８の化合物３を得た。

化合物４の製造 メチルビシフエレート　１８０　ｍｇの無水塩化メチレ
ンｌ澄５ｍｌに、ジヒドロビラン２００　　ｒａｇ　　
及びピリジニウムｐ−）ルエンスルフォネート　１３．
６ｍｇを加え、室温で６時間攪拌した。反応液をエーテ
ル中に注入し、飽和食塩水で洗浄した後、硫酸マグネシ
ウムで乾燥し、減圧上濃縮した。

得られた残ｔｌ！、　２２５　ｍｇを無水エーテル３１
に溶解した溶液を、アルゴン気流中、０℃でリチウムア
ルミニウムハイドライド８３　Ｂの無水エーテル懸濁液
Ｓ　ｎ＋１中に滴加し、室温で１３時間攪拌した。少量
の水を加えて過剰の試薬を分解した後、反応液をエーテ
ル中に注入し、飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシウム
で乾燥し、減圧上濃縮した。

得られた残渣を分取４相クロマトグラフィー（ｎ−へキ
サン：アセトン＝７５：２５）に付して２１０　ｍｇの
化合物（［１コ式に於いて、Ｘがヒドロキシメチル基で
、Ｙがテトラヒドロピラニロオキシ基の化合物）を得た
。

上記吠得た化合物５４　Ｂに、ピリジン０．５　ｉｔ及
び無水酢酸０．５　ｍｌを加え、室温で１５時間放置し
た後、反応液を氷水中に　注入し、クロロホルムで抽出
した。クロロホルム層を５ｚ塩酸、５Ｘ炭酸水素ナトリ
ウム及び飽和食塩水で順欧洗浄後、硫酸マグネシウムで
乾燥し、減圧上濃縮した。

得られた残渣６０　ｍｇをエタノール２１に溶解し、ピ
リジニウムロートルエンスルフォネート４ＩＩＩｇを加
え、５５℃で３時閏攪拌した。反応液を減圧上濃縮して
得た残渣を分取浦和クロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン
：アセトン＝８５；１５）に付し４７ｍ８の化合物４を
得た。

化合物５の製造 水素化ナトリウム２０　Ｉｉｇを含む５　ｍｌの無水テ
トラヒドロフラン懸濁液に、アルゴン気流中４５℃でヨ
ウ化メチル　１９１　ｍｇを加え、次いでこれに、前記
化合物３製造の中間体である、［１コ式におけるＸがヒ
ドロキシメチル基でＹがテトラヒドロビラニロオキシ基
の化合物１０４　Ｂを含む無水テトラヒドロフラン３１
の溶液を滴加した。４５℃で１２時間攪拌後、水で過剰
の試薬を分解し、水中に注入し、クロロフォルムで抽出
した。

クロロフォルム層を飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシ
ウムで乾燥し、減圧上濃縮し、残渣を分取薄層クロマト
グラフィー（ｎ−へキサン：アセトン＝　９　：　１）
に付して４８　ＢＯＸがメトキシメチル基でＹがヒドロ
キシル基の化合物を得た。

化合物７の製造 ８４　ｒｅｇのエチルトリフェニルホスホニウムブロマ
イドを　！、５１の無水テトラヒドロフランに懸濁させ
、アルゴン気流下、−２５℃でｎ−ブチルリチウムのヘ
キサン溶液（１，６Ｍ　）を１５５μｍ加えた。

次いで、室温で３０分間攪拌した後、前記化合物２のヒ
ドロキシル基をテトラヒドロピラニル基で保護した化合
物５８　ｒａｇの無水テトラヒドロフラン溶液１．５１
を一２５℃で加え、室温で４時間攪拌した後、反応液を
飽和食塩水中に注ぎエーテルで抽出した。エーテル抽出
液を飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシウムで乾燥し、
減圧上濃縮した。

得られた残渣を、分取薄層クロマトグラフィー（ｎ−ヘ
キサン：アセトン＝　９８：２　）に付し、縮合物５０
　ｒａｇを得た。この　縮合物を　１１のエタノールに
溶かし、ピリジニウムｐ−１ルエンスルフオネー）３ｍ
ｇを加え、５５℃で３時間攪拌した。

反応液を濃縮後、残渣を分取薄層クロマトグラフィー（
ｎ−ヘキサン：アセトン＝９５：５）に付して得られた
化合物３６　ｔａｇを酢酸エチルエステル１．５１に溶
かし、２０　ｍｇの１０＄Ｐｄ−Ｃを加え、室温で水素
気流下１３時間攪拌した。触媒を吸引濾去した後、濾液
を減圧上濃縮して得られた残渣を分取薄層クロマトグラ
フィー（ｎ−へキサン：アセトン＝　９　：１　）に付
し、３７　ｍｇの化合物７を得た。

なお、化合物６及び化合物８〜１０も上記と同様の方法
で得られた。

化合物１９の製造 ３２　ｍｇのとシフニリン酸を０．１５　ｍｌの無水ピ
リリンに溶かし、２９μｍの無水吉草酸を加えて室温で
４時間放置した後、反応液を氷水中に注ぎ、クロロホル
ムで抽出した。クロロホルム層を５ｚ塩酸、５ｚ炭酸水
素ナトリウム及び飽和食塩水で順次洗浄した後、硫酸マ
グネシウムで乾燥し、減圧上濃縮した。得られた残渣を
分取薄層クロマトグラフィー（ｎ−へキサン：アセトン
＝　９：１）に付し２４　ｍｇの化合物１９を得た。

なお、化合物１２〜１８も上記と同様の方法で得られた
。

Ｙがアセトキシ基の化合物）２５ｍｇを　１１のエタノ
ールに溶かし、０℃で２．８　ｍｇの水素化ホウ素ナト
リウムを加え　１時間攪拌し、反応液をメタノール性希
釈酢酸で中和した後、飽和食塩水中に注ぎ、クロロホル
ムで抽出した。クロロホルム層を飽和食塩水で洗浄後、
硫酸マグネシウムで乾燥し減圧上濃縮し、残渣を分取薄
層クロマトグラフィー（ｎ−へキサン：アセトン＝８：
２）に付し、２３　ｍｇの化合物１１を得た。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. （１）〔１〕式 ▲数式、化学式、表等があります▼−−−−−〔１〕 （式中Ｘはヒドロキシメチル基、ホルミル基、アセトキ
   シメチル基、メトキシメチル基、アルキル基又はカルボ
   キシル基を示し、Ｙはヒドロキシル基又はアシロキシ基
   を示す。ただし、Ｘがカルボキシル基のときＹはアシロ
   キシ基を示す。） で表わされるジテルペンを有効成分とする抗腫瘍剤。