JPS61215964A - 過酸化水素定量方法 - Google Patents
過酸化水素定量方法Info
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- JPS61215964A JPS61215964A JP2574586A JP2574586A JPS61215964A JP S61215964 A JPS61215964 A JP S61215964A JP 2574586 A JP2574586 A JP 2574586A JP 2574586 A JP2574586 A JP 2574586A JP S61215964 A JPS61215964 A JP S61215964A
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- Japan
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- hydrogen peroxide
- anisidine
- mbth
- salt
- ethyl
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- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は改良された色原体を用いた過酸化水素定量方法
に関するものである。
に関するものである。
プリン代謝経路は下記の図式に示される様な代謝経路で
ある。
ある。
アデノシン イノシン ヒポキ
サンチングアニン キサンチン尿
酸 グアナーゼはグアニンを脱アミノ化して牛サンチンとア
ンモニアに分解する酵素であり、更にキナンテンはキサ
ンチンオキシダーゼ（以下、 ＸＯＤと略す。〕により
尿酸と過酸化水素に分解される。
サンチングアニン キサンチン尿
酸 グアナーゼはグアニンを脱アミノ化して牛サンチンとア
ンモニアに分解する酵素であり、更にキナンテンはキサ
ンチンオキシダーゼ（以下、 ＸＯＤと略す。〕により
尿酸と過酸化水素に分解される。
・アデノシンデアミナーゼはアデノシンをイノシンとア
ンモニアに分解する酵素であり、イノシンはさらに代謝
されキサンチンとなる。
ンモニアに分解する酵素であり、イノシンはさらに代謝
されキサンチンとなる。
従来、これら経路の代謝物および酵素の臨床診断測定の
例として、キサンチン尿症での尿中キサンチンの測定（
仁科甫啓ら、臨床化学シンポジウム、＠２０集、１７８
ページ、 １９８０年）、あるいは肝疾患鑑別における
血清グアナーゼの測定（伊東進ら、肝臓、第１６巻１０
ページ、 １９７５年〕、さらに癌疾患での血清アデノ
シンデアミナーゼの測定（加藤憲二ら、臨床化学シンポ
ジウム、第１８集、１９７ページ、 １９７８年）が報
告されている。
例として、キサンチン尿症での尿中キサンチンの測定（
仁科甫啓ら、臨床化学シンポジウム、＠２０集、１７８
ページ、 １９８０年）、あるいは肝疾患鑑別における
血清グアナーゼの測定（伊東進ら、肝臓、第１６巻１０
ページ、 １９７５年〕、さらに癌疾患での血清アデノ
シンデアミナーゼの測定（加藤憲二ら、臨床化学シンポ
ジウム、第１８集、１９７ページ、 １９７８年）が報
告されている。
このように、プリン代謝経路の酵素活性および代謝物の
測定のもつ臨床的意義は１日増しに高まりつつあり、従
ってこれらの正確な測定法の確立が急がれるところであ
る。
測定のもつ臨床的意義は１日増しに高まりつつあり、従
ってこれらの正確な測定法の確立が急がれるところであ
る。
これらの測定に用いられる原理としては、グアナーゼの
測定については基質プリンの減少を紫外吸光度変化で測
定する方法（ＲｏｕｓｈおよびＮｏｒｒｊｓ。
測定については基質プリンの減少を紫外吸光度変化で測
定する方法（ＲｏｕｓｈおよびＮｏｒｒｊｓ。
Ａｒｃｈ、 Ｂｉｏｃｈｅｍ−＋第１６巻１０ページ、
１９５０年〕、生成物であるアンモニアを測定する方
法（Ｈｉｒｓｃｈｒｅｒｇら、 Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ
、ｓ第１２巻、５２４ページ、 １９５２年〕、さらに
は生成物であるキサンチンにＸＯＤ Ｙ作用させて生じ
る尿酸を測定するか（Ｋａｌｃｋａｒ、 Ｊ、Ｂｉｏｌ
、 Ｃｈｅｍ、 、第１６７巻、４６１ページ。
１９５０年〕、生成物であるアンモニアを測定する方
法（Ｈｉｒｓｃｈｒｅｒｇら、 Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ
、ｓ第１２巻、５２４ページ、 １９５２年〕、さらに
は生成物であるキサンチンにＸＯＤ Ｙ作用させて生じ
る尿酸を測定するか（Ｋａｌｃｋａｒ、 Ｊ、Ｂｉｏｌ
、 Ｃｈｅｍ、 、第１６７巻、４６１ページ。
１９４７年ン、あるいは過酸化水素を測定する方法（Ｓ
ｕｇｉｕｒｉら、 Ｃｈｅｍ、 Ｐｈａｒｍ、 Ｂｕｌ
ｌ、 、第２９巻、４２６ページ、 １９８１年）が知
られている。また、アデノシンデアミナーゼの測定原理
については、生成物であるアンモニアを測定する方法（
Ｋａｌｃｋａｒ＋ Ｊ−Ｂｉｏｌ、Ｃｈｅｍ。、第１６
７巻、４４５ページ、 １９４７年〕、プリンスフレオ
シドホスホリラーゼおよびＸＯＤ ７介在させることＫ
より生成物のイノシンを尿酸と過酸化水素に変換させ、
生じた過酸化水素を測定する方法（Ｓｕｇｉｕｒａら、
Ｃｈｅｗ、 Ｒｈａｒｍ、 Ｂｕｌｌ、、 ！ ２９
巻９４２６ページ、 １９８１年）などが知られている
。
ｕｇｉｕｒｉら、 Ｃｈｅｍ、 Ｐｈａｒｍ、 Ｂｕｌ
ｌ、 、第２９巻、４２６ページ、 １９８１年）が知
られている。また、アデノシンデアミナーゼの測定原理
については、生成物であるアンモニアを測定する方法（
Ｋａｌｃｋａｒ＋ Ｊ−Ｂｉｏｌ、Ｃｈｅｍ。、第１６
７巻、４４５ページ、 １９４７年〕、プリンスフレオ
シドホスホリラーゼおよびＸＯＤ ７介在させることＫ
より生成物のイノシンを尿酸と過酸化水素に変換させ、
生じた過酸化水素を測定する方法（Ｓｕｇｉｕｒａら、
Ｃｈｅｗ、 Ｒｈａｒｍ、 Ｂｕｌｌ、、 ！ ２９
巻９４２６ページ、 １９８１年）などが知られている
。
しかし、アンモニアを測定する方法、基質プリンの減少
を紫外吸光度変化で測定する方法あるいは生成物である
尿酸を測定する方法では被検検体中の内因性アンモニア
、紫外吸光物質あるいは尿酸の影ｌｌｌ１ｔ受けるため
、検体ブランク測定を実施しても、測定結果が不正確と
なる場合がある。
を紫外吸光度変化で測定する方法あるいは生成物である
尿酸を測定する方法では被検検体中の内因性アンモニア
、紫外吸光物質あるいは尿酸の影ｌｌｌ１ｔ受けるため
、検体ブランク測定を実施しても、測定結果が不正確と
なる場合がある。
−万、ＸＯＤの作用によって生成した過酸化水素を測定
する方法によれば、実測された過酸化水素生成量は紫外
吸光度測定により求めた基質減少量から算出した理論的
過酸化水素生成量よりも低い値乞示すこと、さらに反応
タイムコースが直線性を示さないこともあって、臨床診
断用の測定反応系としては満足できるものではなかった
。そこで。
する方法によれば、実測された過酸化水素生成量は紫外
吸光度測定により求めた基質減少量から算出した理論的
過酸化水素生成量よりも低い値乞示すこと、さらに反応
タイムコースが直線性を示さないこともあって、臨床診
断用の測定反応系としては満足できるものではなかった
。そこで。
本発明者らは、ＸＯＤを終末の酵素として生成する過酸
化水素を検出測定する系において、まず反応系において
ＸＯＤの反応時にスーパーオキシドデスムターゼ（以下
、ＳＯＤと略す。）を共存させて、過酸化水素を定量的
に産生させることに成功した（原特許出Ｍ：特開昭５９
−６６８９９号参照ン。しかしながら、過酸化水素の検
出系において感度、反応−、自動酸化及び退色性のすべ
ての点で満足できる色原体は皆無であった。
化水素を検出測定する系において、まず反応系において
ＸＯＤの反応時にスーパーオキシドデスムターゼ（以下
、ＳＯＤと略す。）を共存させて、過酸化水素を定量的
に産生させることに成功した（原特許出Ｍ：特開昭５９
−６６８９９号参照ン。しかしながら、過酸化水素の検
出系において感度、反応−、自動酸化及び退色性のすべ
ての点で満足できる色原体は皆無であった。
従来、臨床診断試薬での過酸化水素検出系としては、ペ
ルオキシダーゼ？共役酵素として用い、色原体として■
４−アミノア／チピリンと、ジメチルアニリンあるいは
Ｎ−エチル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピ
ルノアニリン（以下、ＥＨ３−アニリンと略丁。〕等の
アニリン誘導体、■４−アミノアンチピリンとフェノー
ル、あるいは■３−メチルー２−ベゾチアゾリノンーヒ
ドラゾン・塩酸塩（以下、ＭＢＴＨと略す。〕と、ジメ
チルアニリン、ジエチルアニリン、ＥＨ５−アニリンあ
るいはＮ−エチル−Ｎ−（３−スルホプロピル）アニリ
ン（以下、ＥＳ−アニリンと略す。）等のアニリン誘導
体を用いた系が汎用されている。
ルオキシダーゼ？共役酵素として用い、色原体として■
４−アミノア／チピリンと、ジメチルアニリンあるいは
Ｎ−エチル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピ
ルノアニリン（以下、ＥＨ３−アニリンと略丁。〕等の
アニリン誘導体、■４−アミノアンチピリンとフェノー
ル、あるいは■３−メチルー２−ベゾチアゾリノンーヒ
ドラゾン・塩酸塩（以下、ＭＢＴＨと略す。〕と、ジメ
チルアニリン、ジエチルアニリン、ＥＨ５−アニリンあ
るいはＮ−エチル−Ｎ−（３−スルホプロピル）アニリ
ン（以下、ＥＳ−アニリンと略す。）等のアニリン誘導
体を用いた系が汎用されている。
これらについて、■の系は感度が低く、酸性側よりも中
性側において特に退色性が大きくかつ感度が低いこと、
■の系は可視部短波長側に吸光度ピークを持ち、被検体
由来の色調の影＃を受けやすく、また感度が■〜■の系
の中で最も低いこと、゛そして■の系は発色−が３〜４
と低いため、過酸化水素を生成させる酵素反応とは別の
ステップｔ組む必要があること等、いずれの系も操作上
の難点及び短所があり、色原体として満足できるもので
はない。
性側において特に退色性が大きくかつ感度が低いこと、
■の系は可視部短波長側に吸光度ピークを持ち、被検体
由来の色調の影＃を受けやすく、また感度が■〜■の系
の中で最も低いこと、゛そして■の系は発色−が３〜４
と低いため、過酸化水素を生成させる酵素反応とは別の
ステップｔ組む必要があること等、いずれの系も操作上
の難点及び短所があり、色原体として満足できるもので
はない。
そこで本発明者らは、従来の過酸化水素検出系の欠点を
改良した田中性域で使用できかつ感度の良い色原体系を
見い出すため鋭意検討１ｋＪ！ねた結果、Ｎ−エチル−
Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）−ｍ−ア
ニシジｙ （以下、 ｇｎｓ−アニシジンと略す。）あ
るいはＮ−エチル−Ｎ−（３−スルホプロピル）−ｒｎ
−アニシジン（以下、ＥＳ−アニシジンと略す。）また
はそれらの塩とＭＢＴＨとのカップリング系が目的とす
る条件′ｆＪ！：１ｌｌＩ足することを見い出した。
改良した田中性域で使用できかつ感度の良い色原体系を
見い出すため鋭意検討１ｋＪ！ねた結果、Ｎ−エチル−
Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）−ｍ−ア
ニシジｙ （以下、 ｇｎｓ−アニシジンと略す。）あ
るいはＮ−エチル−Ｎ−（３−スルホプロピル）−ｒｎ
−アニシジン（以下、ＥＳ−アニシジンと略す。）また
はそれらの塩とＭＢＴＨとのカップリング系が目的とす
る条件′ｆＪ！：１ｌｌＩ足することを見い出した。
これらのアニリン誘導体とＭＢＴＨとのカップリング系
は、特開昭５６−１３３６６０号及び同５７−６４６６
０号明細書中ですでに明らかにされている力Ｓ％ （１ン 両明細書では、これらのアニリン誘導体と４
−アミノアンチピリンとの系については、種々の≠にお
ける検討がなされでいるが、ＭＢＴＨとの系についでは
、全く検討がなされでおらず、ＭＢＴＨとの系における
至適ｐＨをこの明細書から類推することは不可能である
。
は、特開昭５６−１３３６６０号及び同５７−６４６６
０号明細書中ですでに明らかにされている力Ｓ％ （１ン 両明細書では、これらのアニリン誘導体と４
−アミノアンチピリンとの系については、種々の≠にお
ける検討がなされでいるが、ＭＢＴＨとの系についでは
、全く検討がなされでおらず、ＭＢＴＨとの系における
至適ｐＨをこの明細書から類推することは不可能である
。
（１） 従来から知られている、ジメチルアニリン、
ジエチルアニリン等のアニリン誘導体とＭＢＴＨとのカ
ップリング系においては、至適−は３〜４であり、中性
附近ではｇ１度も低くまた退色及び自動酸化が起こるこ
とが知られている（ ＣＩｉｎｉｃＣｌｌｎｉｃａｌＣ
ｈｅ、 １７ 、１１５４（１９７１）参照のこと。〕
等の理由から、ＥＭＳ−アニシジンまたはＥｓ−アニシ
ジンとＭＢＴ）Ｉとの系ｆｔｌ１ｆ１５〜６．５で反応
させると感度が向上し、さらに退色性や自動酸化の面で
も改善が見られるということは全く予測不可能なことで
あったと考えられる。
ジエチルアニリン等のアニリン誘導体とＭＢＴＨとのカ
ップリング系においては、至適−は３〜４であり、中性
附近ではｇ１度も低くまた退色及び自動酸化が起こるこ
とが知られている（ ＣＩｉｎｉｃＣｌｌｎｉｃａｌＣ
ｈｅ、 １７ 、１１５４（１９７１）参照のこと。〕
等の理由から、ＥＭＳ−アニシジンまたはＥｓ−アニシ
ジンとＭＢＴ）Ｉとの系ｆｔｌ１ｆ１５〜６．５で反応
させると感度が向上し、さらに退色性や自動酸化の面で
も改善が見られるということは全く予測不可能なことで
あったと考えられる。
ＥＭＳ−アニシジンあるいはＥＳ−アニシジンまたはそ
れらの塩とＭＢＴＨとのカップリング系を用いて過酸化
水素を発色させると、５７０ ｎｍ附近に吸光度ビーク
を示し、ｐｆｉ５〜６．５における発色反応では自動酸
化及び退色は認められず、さらに−６での発色強度は％
４−アミノアンチピリンとＮ。
れらの塩とＭＢＴＨとのカップリング系を用いて過酸化
水素を発色させると、５７０ ｎｍ附近に吸光度ビーク
を示し、ｐｆｉ５〜６．５における発色反応では自動酸
化及び退色は認められず、さらに−６での発色強度は％
４−アミノアンチピリンとＮ。
Ｎ−ジメチルアニリンとの系を用いた場合に較べて約３
倍、またＥＳ−アニシジンとＭＢＴ）ｉとの系ヲｐＨ３
〜４で用いた場合に比べて約１．５倍の発色強度を示す
。すなわち−６附近で安定に過酸化水素を高感度に発色
させる方法としては、今までこの方法に及ぶものは皆無
である。ＥＭＳ−アニシジンまたはＥＳ−アニシジンは
、この方法によりｐＨ５〜６．５での発色に用いること
ができるのでカイネテイツクアツセイの自動分析器に適
用させることができる。
倍、またＥＳ−アニシジンとＭＢＴ）ｉとの系ヲｐＨ３
〜４で用いた場合に比べて約１．５倍の発色強度を示す
。すなわち−６附近で安定に過酸化水素を高感度に発色
させる方法としては、今までこの方法に及ぶものは皆無
である。ＥＭＳ−アニシジンまたはＥＳ−アニシジンは
、この方法によりｐＨ５〜６．５での発色に用いること
ができるのでカイネテイツクアツセイの自動分析器に適
用させることができる。
ＥＭＳ−アニシジンあるいはＥＳ−アニシジンまたはそ
れらの塩とＭＢＴＨとのカップリング系を用いた本発明
の過酸化水素定量方法は、ＸＯＤを介するプリン代謝経
路の代謝物及び酵素の測定だけでなく、グルコースオキ
シダーゼ乞介在させてのグルコースの測定、あるいはコ
レステロールオキシダーゼを介在させてのコレステロー
ルの測定等、過酸化水素の検出による臨床診断用測定で
あればすべての場合に適用できる。
れらの塩とＭＢＴＨとのカップリング系を用いた本発明
の過酸化水素定量方法は、ＸＯＤを介するプリン代謝経
路の代謝物及び酵素の測定だけでなく、グルコースオキ
シダーゼ乞介在させてのグルコースの測定、あるいはコ
レステロールオキシダーゼを介在させてのコレステロー
ルの測定等、過酸化水素の検出による臨床診断用測定で
あればすべての場合に適用できる。
本発明により、グアナーゼ等プリン代謝経路の酵素活性
あるいは代謝物の低値のものも精度よ（正確に測定する
ことが可能になり、さらにこれまで用手法にで検体ブラ
ンク測定の必要性、反応時間の長さ、操作ステップ数の
多さなど繁雑さのみとめられていた測定を短時間反応の
自動分析機へ適応させろことも可能クシた。なお、本発
明の方法を用いて過酸化水素を検出する際、高感度およ
ＳＯＤ び正確さｔ保持するためには、 ′やウリ
カー ゼを添加したり、内因性物質の除去のために、面処理法
を組んだり、カタラーゼ阻害剤としてアジ化す） ＩＪ
ウムを過酸化水素の産生系および発色検出系に存在させ
たりすることが望ましい。
あるいは代謝物の低値のものも精度よ（正確に測定する
ことが可能になり、さらにこれまで用手法にで検体ブラ
ンク測定の必要性、反応時間の長さ、操作ステップ数の
多さなど繁雑さのみとめられていた測定を短時間反応の
自動分析機へ適応させろことも可能クシた。なお、本発
明の方法を用いて過酸化水素を検出する際、高感度およ
ＳＯＤ び正確さｔ保持するためには、 ′やウリ
カー ゼを添加したり、内因性物質の除去のために、面処理法
を組んだり、カタラーゼ阻害剤としてアジ化す） ＩＪ
ウムを過酸化水素の産生系および発色検出系に存在させ
たりすることが望ましい。
以下、実施例をあげて具体的に説明する。但し、グアナ
ーゼ標品のＩＵはグアニン基質より２５℃反応１分間に
１μモルのキサンチン乞生成する酵素活性をいい、 Ｓ
ＯＤのＩＵはキサンチン、ＸＯＤ 。
ーゼ標品のＩＵはグアニン基質より２５℃反応１分間に
１μモルのキサンチン乞生成する酵素活性をいい、 Ｓ
ＯＤのＩＵはキサンチン、ＸＯＤ 。
７エリサイトクロームＣから一成る反応系において２５
℃ｐＨ７，８での７エリサイトクロームＣの５５０ｎｍ
Ｋおける１分間あたりの吸光度低下０．０５Ｙ５０％抑
制する酵素量をいう。
℃ｐＨ７，８での７エリサイトクロームＣの５５０ｎｍ
Ｋおける１分間あたりの吸光度低下０．０５Ｙ５０％抑
制する酵素量をいう。
実施例１
の感度比較
過酸化水素濃度０〜６０μｍｏｌｅ／Ａの溶液０．１−
にＭＢＴＨ０，０５ｍＭ 、 Ｋ Ｓ−アニシジン０．
５ ｍＭおよびリン酸２ナトリウム−クエン酸緩衝液２
００ ｍＭ カらなる液（ｐＨ６，０）を調製し、その
２．８−およびペルオキシダーゼ３０Ｕ／−の水溶液０
．１ｍを同時に加え、３７℃で７分反応させた後の発色
度合を水を対照に最大吸収波長である５７０ｍｍにて測
定し、過酸化水素検量線（第１図の■参照）１１：作成
した。
にＭＢＴＨ０，０５ｍＭ 、 Ｋ Ｓ−アニシジン０．
５ ｍＭおよびリン酸２ナトリウム−クエン酸緩衝液２
００ ｍＭ カらなる液（ｐＨ６，０）を調製し、その
２．８−およびペルオキシダーゼ３０Ｕ／−の水溶液０
．１ｍを同時に加え、３７℃で７分反応させた後の発色
度合を水を対照に最大吸収波長である５７０ｍｍにて測
定し、過酸化水素検量線（第１図の■参照）１１：作成
した。
同様にして、比較対照として、ＭＢＴＨｏ、０５ｍＭ。
ＥＳ−アニシジン０．５ｍＭ及びリン＃！２ナトリウム
ークエン酸緩衝液２００ｍＭからなる液を…４゜０に調
製し、その２．８−と上記のペルオキシダーゼ液０．１
−を用い過酸化水素検量線（第１図の■参照）を作成し
た。
ークエン酸緩衝液２００ｍＭからなる液を…４゜０に調
製し、その２．８−と上記のペルオキシダーゼ液０．１
−を用い過酸化水素検量線（第１図の■参照）を作成し
た。
さらにＭＢＴＨとジメチルアニリンとの系及び４−アミ
ノアンチピリンとジメチルアニリンとの系を用いた従来
法による過酸化水素検出系についても比較した。これら
の試薬濃度は通常用いられる方法に準じ、使用する緩衝
液は上述の緩衝液の条件を用いておこない過酸化水素検
量線（第１図■及び■参照ンを同様にして作成した。な
おＭＢＴＨ−ＥＳアニシジン系以外で測定に用いたそれ
ぞれの最大吸収波長は、 ＭＢＴＨ−ジメチルアニリン
系は５９０ｎｍ、４アミノアンチピリン−ジメチルアニ
リン系は５５５ ｎｍであった。
ノアンチピリンとジメチルアニリンとの系を用いた従来
法による過酸化水素検出系についても比較した。これら
の試薬濃度は通常用いられる方法に準じ、使用する緩衝
液は上述の緩衝液の条件を用いておこない過酸化水素検
量線（第１図■及び■参照ンを同様にして作成した。な
おＭＢＴＨ−ＥＳアニシジン系以外で測定に用いたそれ
ぞれの最大吸収波長は、 ＭＢＴＨ−ジメチルアニリン
系は５９０ｎｍ、４アミノアンチピリン−ジメチルアニ
リン系は５５５ ｎｍであった。
第１図からので示される本発明方法の色原体が従来方法
の色原体（■及び■）及び本発明の色原体ｔ’ｍ４．０
で用いた場合（＠に較べて、いづれも感度の高いことは
明らかである。
の色原体（■及び■）及び本発明の色原体ｔ’ｍ４．０
で用いた場合（＠に較べて、いづれも感度の高いことは
明らかである。
第１図は過酸化水素検量線による本発明の過酸化水素検
出用色原体と従来のものとの感度の比較を示すグラフで
ある。 図中符号： ■・・・本発明の色原体（ＭＢＴＨ−［３アニシジン系
、ｐＨ６）：■・・・本発明の色原体を用い従来法の条
件で発色（ＭＢＴＨ−ＥＳアニシジン系、ｐＨ４）：■
・・・従来の色原体（ＭＢＴＨ−ジメチルアニリン系％
−４）；■・・・従来の色原体（４−アミノアンチピリ
ン−ジメチルアニリン系％ｐＨ６）。 第１図
出用色原体と従来のものとの感度の比較を示すグラフで
ある。 図中符号： ■・・・本発明の色原体（ＭＢＴＨ−［３アニシジン系
、ｐＨ６）：■・・・本発明の色原体を用い従来法の条
件で発色（ＭＢＴＨ−ＥＳアニシジン系、ｐＨ４）：■
・・・従来の色原体（ＭＢＴＨ−ジメチルアニリン系％
−４）；■・・・従来の色原体（４−アミノアンチピリ
ン−ジメチルアニリン系％ｐＨ６）。 第１図
Claims (1)
- 過酸化水素発色剤が、３−メチル−２−ベンゾチアゾリ
ノン−ヒドラゾン・塩酸塩、ペルオキシダーゼ及びＮ−
エチル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）
−ｍ−アニシジンまたはその塩から成るか、あるいは３
−メチル−２−ベンゾチアゾリノン−ヒドラゾン・塩酸
塩、ペルオキシダーゼ及びＮ−エチル−Ｎ−（３−スル
ホプロピル）−ｍ−アニシジンまたはその塩から成り、
ｐＨ５〜６．５で発色させることを特徴とする過酸化水
素定量方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2574586A JPS61215964A (ja) | 1986-02-10 | 1986-02-10 | 過酸化水素定量方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2574586A JPS61215964A (ja) | 1986-02-10 | 1986-02-10 | 過酸化水素定量方法 |
Related Parent Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP17530182A Division JPS5966899A (ja) | 1982-10-07 | 1982-10-07 | 過酸化水素定量方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS61215964A true JPS61215964A (ja) | 1986-09-25 |
| JPH0588119B2 JPH0588119B2 (ja) | 1993-12-21 |
Family
ID=12174360
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2574586A Granted JPS61215964A (ja) | 1986-02-10 | 1986-02-10 | 過酸化水素定量方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS61215964A (ja) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5764660A (en) * | 1980-10-06 | 1982-04-19 | Doujin Kagaku Kenkyusho:Kk | N-hydroxysulfoalkylaminine derivative and its application |
-
1986
- 1986-02-10 JP JP2574586A patent/JPS61215964A/ja active Granted
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5764660A (en) * | 1980-10-06 | 1982-04-19 | Doujin Kagaku Kenkyusho:Kk | N-hydroxysulfoalkylaminine derivative and its application |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0588119B2 (ja) | 1993-12-21 |
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