JPS61183280A - 抗生物質調整の中間体デイフイコール - Google Patents

抗生物質調整の中間体デイフイコール

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JPS61183280A
JPS61183280A JP61019215A JP1921586A JPS61183280A JP S61183280 A JPS61183280 A JP S61183280A JP 61019215 A JP61019215 A JP 61019215A JP 1921586 A JP1921586 A JP 1921586A JP S61183280 A JPS61183280 A JP S61183280A
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Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、ここでナイフイコール（ｄｉｆｆｉｃｏ＋　
）寸たけオキシディフィコール（ｏｘｙｄｉｆｆｉｃｏ
！　）として示さ力でいる新規な発酵産物および邑　、
該化合物の調製、す１離、積装に関する。用語ディフィ
コールは、ＲＩが水素である以下に示す構造式■の化合
物を示し、用語オキシディフィコール（ｏｘｙｄｉｆｆ
ｉｃｏｌ　）　　は、Ｒ１が水酸基である構造式■の化
合物を示す。当該発酵産物は、メリーランド州、ロック
ビルの米国標準菌株法（ｆｌＡｒ設（Ａｍｅｒｉｃａｎ
　Ｔｙｐｅ　Ｃｕ１ｔｕｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ　）
にＡＴＣＣ３９３７４および３９３２０の名称で寄託さ
れたバチルス・ズブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　５ｕｂ
ｔｉｌｉｓ　）　ＭＢ　３５７５およ６：ＭＢ４４８８
の微生物培養により調製される。
当該新規発酵ノ忙物（」、広域スペクトル抗生物質ディ
フィシジン（ｄｉｆｆｉｃｉｄｉｎ　）　、オキシティ
フィシシン（ｏｘｙｄｉｆｆｉｃｉｄｉｎ　）　　の６
周製における中間体として有用である。これら広域スペ
クトル抗生物質およびそれらの調製法は、１９８４年１
２月１４日に−ｆｌ１行されたＥＰＯ出願番号８４１０
６４０８．２、刊行番号０１２８５０５中に開示されて
いる。しかしながら、この刊行された出屑ｆば、ディフ
ィコール（ｄｉｆｆｉｃｏｌ　）が、バチルス・ズブチ
リス微生物培養物中に存在することもしくはそこから回
収し得ることを示唆する内容全含んでいないことが知ら
れている。
本発明に従って、ディフィシシンおよびオキシディフィ
シジン型の広域スペクトル抗生物質調製における中間体
とじ−Ｃ有用な以下に示す構造式■の化合物が供給され
る１、Ｒ１は水素才たは水酸基である。
ディフィコールはＲ１が水素の際の」二記構造式で示さ
れ、オキシディフィコールはＲ１が水酸基の際の上言己
構造式で示される。これら、マクロ（巨大）環状アルコ
ールは生物学的に不活性であるが、水酸基が燐酸化され
て対応するディフィシジンまたはオキシディフィシジン
を生成すると、生成した化合物はＲ１がＨ寸た（ｄ：　
ＯＨである以下の構造式をもつ高活性広域スペクトル抗
菌物質であるのを見出すことは予期されないものである
。
ディフィコールお」：びオキシディフィコールは、メリ
ーランド州・ロックヒルの米国標準画′株保存施設（Ａ
ｍｅｒｉｃａｎ　Ｔｙｐｅ　Ｃｕ１ｔｕｒｅ（：ｏｌｌ
ｅｃｔｌｏｎ　）に寄託され、そこから、各、受入れ番
号Ａ’ｌ”ＣＣ３９３７４および３９３２０としてｔｔ
ｉｌｌ限なしに入手１〜得るバチルス・ズブチリスＭＢ
３５７５およびＭＢ４４８８の微生物培養により５周製
される。
当該バチルス丼たけその変イ１１ｉおよび変異株は、栄
養培地捷／辷は微生物を培養するのに一般的に用いられ
る栄養溶液を利用して、試験管寒天斜面上或いはエーレ
ンマイヤー・フラ　　゛スコまたは発酵槽中の深部培養
条件下に、よく知られた微生物学的工程に従って培養さ
れる。
本発明においては、ディフィコールおよびその水酸化誘
導体は、微生物、例えば、バチルス・ズブチリスＡＴＣ
Ｃ３９３２０を好気条件下で約２８℃の温度で培養する
間に生産される。
栄養培地の組・成は広域に変化させ得る。必須の同化可
能（ａｓｓｉｎｉｌａｂｌｅ　）　　な栄養成分ば；炭
素源、窒素源、燐、硫黄、マグネシウム、カリウム、カ
ルシウムおよび塩素を包囲する無機元素源である。培養
は中性ｐｉｆ条件、好ましくし、１、約６．０から７０
が最も生産的である。
ｊｌｌｉｌｌ外炭素源には、グルコース、テキストリン
、澱粉、クリセロールのようなものが含寸れる１、典型
的庁窒素諒には、植物粉末（大豆、綿実、トウモロコシ
、その他）、肉粉末または動物ペプトン、蒸溜残泄（ｄ
ｉｓｔｉｌｌｅｒｓｓｏｌｕｂｌｅ　）　　ｍｉＪ溶物
、カザミノ酸、酵ＰＩ細胞、各種加水分解産物（カゼイ
ン、酵母、大豆、その他）、酵母核酸およびアミノ酸が
含１れる。
ナトリウム、カリウム、アンモニウム、マグネシウムお
よびカルシウムの塩化物、硝酸塩、硫酸Ｊ篇、炭酸塩お
よび燐酸塩のような鉱物塩は必須無機元素源となる。栄
養培地は鉄、銅、マンカン、亜鉛およびコバルトのよう
な数々の微量元素をも含み得る。
も１７、培養の間に過剰な発泡が生じた場合は、植物油
、ラード油およびポリプロピレン、グリコールのような
消泡剤を発酵過程の前または間に発酵培地中に添加し得
る。ティフィコールの最高収量は約２０から１２０時間
内に達成され、培養依存性である３１発酵のだめの接神
閃Ｑ−１、懸濁液、スラント、凍結細胞捷たは凍結乾燥
試料から得られる。−に連の通常培養行程に加え、微生
物学の手法（Ｍｅｔｈｏｄｓ　ｉｎＭｉｃｒｏｂｉｏｌ
ｏｇｙ　）第２巻、２５９−３２８頁１９７０年、ロン
ドン−ニューヨーク、アカデミツク・プレス発行、中に
記載されているような連続７°ス程も用い得る。その」
：うな系では、バチルスは、長期間自然変異または他の
変性が明瞭になることなく定常状態に維持され得る。
ディフィコールおよびオキシディフィコールの産生のた
めに、本発明は、バチルス・スフチリスＡＴｃｃ３９３
７４捷たは３９３２０を利用することに限定されていな
いと理解されるべきである。それらが、ティフィコール
お・よひオキシディフィコールを生産し得る限りに１記
載された生物の自然またロー人工的な突然変異株または
バチルス・スフチリスＡ　Ｔ　ＣＣ３９３７４または３
９３２０　　の他の変種の利用を含むことが、特に望ま
れそして、意図されている。バチルス・スフチリス突然
変異株の人工的な生成は、Ｘ−線または紫外線（Ｕ　Ｖ
　）照射等のような常法、−または、ナイトロジエン・
マスタード（ｎｉｔｒｏｇｅｎ　ｍｕｓｔａｒｄｓ　）
　、ニトロソグアニジン、ショウノウのような化学変異
剤の利用、または組換えＤＮＡ］二学の手法によりなさ
れ得る。
本発明のもう一つの局面として、（１）Ｍ８３５７５株
を好捷しくは５日間培養し、（２）発酵に続いて、緩衝
溶液によりｐＨを８．３−８．５に調整し塩化マグネシ
ウム（０，２Ｍ　）を添加する、ことを含む２段階工程
によりオキシディフィコールの収量が大幅に増すことが
認められている。次いで、生成した混合物ｄ、室温捷た
は約２５℃で約２４時間の間攪拌され為。
オキシディフィコール産物の収量は処理発酵液あたり、
４０　６０　／ｌ？／ｍｌの範囲にあり、後続処理なし
に収穫した培養液からの抽出により得られた収量に比較
して有意に増大した値を示している。
バチルス・スフチリス、ＡＴＣＣ３９３２０のＪＡＭＡ
ＴＣＣ３９３２０の形態的および生理的性質はｊ′）、
下のようである： 形　態　　：クラム陽性、液胞のない桿状栄養細胞で先
端は丸い；半均の大 きさ０．９　Ｘ　２．３−３．６　／Ｚ　；連鎖せず。
桿菌は運動１イＬあり。好気 条件下で胞子形成。胞子Ｖ」０５ Ｘ　１．、　Ｏｆｉ　（平均の大きさ）、長円形ないし
円筒状、中央部に位 置することが多い、胞子のうに４、 膨大せず。
集落の外観：扁平、円形で周縁は不規則、表面げにぷい
光沢あり、経時に」： り集落の周縁は不透明になる、。
培養液表面ににぷい光σＣのある、 シワのよった全面菌膜を形成１、 トリブチカーゼ（ｔｒｙｐｔｉｃａｓｅ　）犬豆寒天上
で色素生成なし。
２８℃、３７℃で生育、６０℃ で生育ぜす。
陽性反応　二カタラーゼ、ホーゲス〜プロスカウエル（
Ｖｏｇｅｓ　−Ｐｒｏｓｋａｕｅｒ　）、セラチン、ニ
トレートの還元、 シトレートの利用、クルコース、 アラビノース、マンニトール、 キシロース、ソルビトールおよ びシュークロースからの酸生成、 澱粉の加水分１ｖｌ′。
陰性反応　：ウレアーゼ、インドール、プロピオネート
の利用、アルギニン ・ジヒドロラーゼ、ラムノース およびメリビオースからの酸生 成、嫌気的な寒天（穿刺または 嫌気的な容器内でインキユヘー トした平板）中で生育ぜす、嫌 気条件下でのグルコース培養液 寸たけニトレート培養液中に生 育ぜす。
バージニーの；１ｌ（Ｉｌ菌同定の手引？”　（Ｂｅｒ
ｇｅｙ’ｓＭａｎｕａｌ　ｏｆ　Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔ
ｉｖｅ　Ｂａｃｔ（４１−４ｏｌｏｇｙ　）第８版、ウ
ィリアムス及びウイルキンス（Ｗｉｌｌｉａｍｓ　＆Ｗ
ｉｌｋｉｎｓ　）、　１９７４年、お」二びコードン、
Ｒ，Ｅ、　（Ｇｏｒｄｏｎ、　Ｒ，Ｅ、　）　Ｎ　ハイ
ネス、Ｗ、Ｃ。
（Ｈａｙｎｅｓ、　Ｗ、　Ｃ，）　　およびパン、　　
Ｃ，Ｈ，（Ｐａｎｇ。
Ｃ，Ｈ，）　（１，９７３年）、バチルス属（ＴｈｅＧ
ｅｎｕｓ　Ｂａｃｉｌ　ｌｕｓ　）、農業モノグラフ（
ＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅＭｏｎｏｇｒａｐｈ　）第４２
７、米国農務省（Ｕ、　Ｓ。
Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ
　）、ワシントン特別区の培養に関する記載との比較か
ら、ＭＢ４４８８／ＡＴＣＣ３９３２０が既知のバチル
ス・ズブチリス種の株であることが示唆される。
バチルス・ズブチリスＡＴＣＣ３９３７４の形態的およ
び生理的特性 ＡＴＣＣ３９３７４の形態的および生理的性質（ｄｌ、
以下のような当該微生物の集落の外観に関する点を除け
ば、Ａ、ＴＣＣ３９３２０について上に示されたものと
同じである： 集落の外観：２４時間で、隆起、円形、粘稠。
経時とともに集落は、周縁が乾 燥ｊ〜、不透明、不規則になる。
中火の粘稠領域は継続的に乾燥、 不透明になりシワがよる。
培養液表面でにぷい光沢のある、 シワのよった全面菌膜を形成。
トリブチカーゼ（ｔｒｙｐｔｉｃａｓｅ　）大豆寒天」
二で色素産生なし。
２８℃、３７℃で生１Ｆ、６０℃ で生育ぜす。
ディフィコールおよびオキシディフィコール−■−ディ
フィコールおよびその誘導体を調製するための工程は、
バチルス・ズブチリスＡＴＣＣ３９３２０の株に属する
微生物を、炭素源、窒素源、栄養Ｊ塩および微量元素を
含む水性栄養培地を用いて、栄養培地がディフィコール
お」：びオキシディフィコールを含むようになる１で温
度範囲２０℃から４０℃で２４から１２０時間培養（７
、その後当該化合物が培養液から単離ざねる寸での過程
を含む。当該化合物の単離ば、全培養ｉ（上清および細
胞）をヘキサンのような溶媒で抽出し、続いてクロマト
グラフィーに」：る精製をすることによりなされる。
もう一つの方法において、ディフィコールまたはオキシ
ディフィコールは、ディフィシジンまたはオキシディフ
ィシシンを大部分の生細胞中にあり、経済的な理由から
、子牛腸粘膜から容易に単離されるアルカリ性フォスフ
ァターゼ酵素を用いて処理することにより生産される。
さらに、オキシディフィコールは、オキシディフィシジ
ンを含む発酵液から、発酵によりその中に（ｉｎ　５ｉ
ｔｕ　）　　生産されたアルカリ１牛フオスフアターゼ
酵素を用いて、直接得らノ１得る。
実施例１ 発酵培養基からのディフィコールおよびオキシディフィ
コールｄ以下のＪ：うに調製される：タネ培地： ］、　Ｈ３Ｍ−１ 自に〜エキス　　　　　　　　　　　　　　　１゜麦μ
″−エキス　　　　　　　　　　　　　　１．。
牛肉エキス　　　　　　　　　　　　　　１．０トリブ
チカーゼ・パフ０トン　　　　　　　２５トリブチカー
ゼ・大豆　　　　　　　　　ｏ１クルコース　　　　　
　　　　　　　　　５．０大豆油　　　　　　　　　　
　　　　　　０．１コーン・ステイーフ０・リカ＝　　
　　　　０５（Ｃｏｒｎ　５ｔｅｅｐ　Ｌｉｇｕｅｒ　
。
トウモロコシ溶出液） 炭酸カルシウム　　　　　　　　　　　１０．０シユー
クロース　　　　　　　　　　　１０．０大豆粉　　　
　　　　　　　　　　　　１ｏ、０ｉＴＪ＃月イ］二討
粉　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１０．
０当該培地は蒸留水で調製される。ｐＨ調整（、ｊＨ必
要ない。当該培地は、５４．　ｍｅ　７２５０ｍ１！　
　３枚邪魔板つきエーレンマイヤー・フラスコに分けら
れる。フラスコに１１、綿栓で密閉さ１１．１２１℃で
２０分滅菌される。
発酵培養： １、ＫＲＣ テキストリン　　　　　　　　　　　　　４００ツルラ
ツク（５ｏｌｕｌａｃ　）　　　　　　　　　７．０酵
母エキス　　　　　　　　　　　　　　５．０ＣｏＣ１
２・６Ｈ２００，１，０ 当該培地は蒸留水で１ｉｌＡｌ製される。滅菌前のｐＨ
は、ＮａＯＨの添加により７．３に調整される３、当該
培地は４４　ｍ１７２５０　ｍｌ標準エーレンマイヤー
・フラスコに分けられる。フラスコは、綿栓で′潜閉さ
れ、１２１℃２０分滅菌される１゜２　合成 成分　　　　　　　　　量（ｑ／ｚ） デキストリン　　　　　　　　　　　　５０．０クエン
酸ジアンモニウム　　　　　　　　３０Ａ４ｇＳＯ４・
７Ｈ２０１，５ 燐酸２カリウム　　　　　　　　　　　０１５ＣＯα２
・６Ｈ２００，１０ Ｍ０ＰＳＯバツフアー　　　　　　　　　１１．３微量
元素溶液　　　　　　　　　　　　　５．０吻ｑ当該培
地は蒸留水で調製される。細胞の生育を促進するために
、酵母エキス（１０９／ｌ）も添加され得る。滅菌前の
ｐＨはＮａＯＨの添加にＪ：す６７に調整される。当該
培地は、４４ｍ１７２５ｏｍｔ：　標４エーレンマイヤ
ー・フラスコに分けられる。フラスコは綿栓で密閉され
１２１℃で２０分滅菌される。
１１／９ＳＯ４・７Ｈ２０６１，，０ ＣａＣ０３２，Ｏ ｈα３　・６Ｈ２０５，４ ＺａＳＯ４Ｈ７Ｈ２Ｏ１，，４ ＭｎＳＯ４・Ｈ２Ｏ１，Ｉ ＣｌｌＳＯ４・５Ｈ２００，２５ Ｃｏ　Ｑ！２　・６　Ｈ２Ｏ０，２８ Ｈ３ＥＯ３０，０６２ Ｎａ　２Ｍｏ０４　　’　２　Ｈ２Ｏ０，４ｇ当該成分
は、９５０ｒｎｌの蒸留水に溶解される。
次いで濃塩酸（５０ｍｅ　）が添加される。当該溶液は
調製後０．４５／ｚｍ　　フィルターで濾過される。
３、ＰＤ培地 テキストリン　　　　　　　　　　　　ＳＯ，Ｏプロフ
ロー（Ｐｒｏｆｌｏ　）２０．０燐酸２カリウム　　　
　　　　　　　　　０．５乳酸（８５％）１８ ポリプロピレンクリコール−２０００１，０ｍ／！／７
（タウ）（Ｄｏｗ） 当該培地は蒸留水で調製される。滅菌前のｐＨけＮａＯ
Ｈの添加に」こり７３に調整される。
当該培地は、４４　ｍｅ７２５０　ｍｌ　　標準エーレ
ンマイヤー・フラスコに分けられる。フラスコは綿栓で
密閉され１２１℃２０分滅菌される。
発酵は以下に記載されるように実施される：１タネのｉ
開裂 Ｔ（Ｓ　Ｍ　−１種培地が、ＭＢ４４８８またはＭＢ３
５７５のどちらかの適当なもと、（胞子または栄＃細胞
）を接種される。Ｊ＠養は２７℃および２２Ｏｒｐｍで
１２時間生育させられる。
２、生産期 −１−述のように調製された種培養は、以下のような発
酵培地に接種するのに用いられる。
ＫＲＣ２，０ 合成　　　　　　　　　　　　　１゜ ＰＤ　　　　　　　　　　　　　　２．０生産フラスコ
は望みに応じて、２７℃お」：び２２０ｒｐｍで２２−
１２０　　時間インキュベートされる。
発酵培養液１２５ｍ１ｉ分（好丑しくはＫＲＣｉたは合
成培地から）かへキサン（２Ｘ　１．００ｍ／　）で抽
出される。ヘキサン抽出物が併合され、乾燥されそして
濃縮される。残渣が逆層クロマトグラフィーにより精製
される。例えば、以下の条件で、オキシディフィコール
は、保持時間５１分そして、ディフィコールｄ゛保持時
間１１４分を有する。
カラム：ウォーターズ（ｗａｔｅｒｓ　）μｍボ゛ンダ
パツク　（Ｂｏｎｄａｐａｋ　）　、Ｃ−：ｉ、　８逆
層、４．５　Ｘ　２５αｎ 溶出液：メタノール（８４）　：　０．０１Ｍ　ｌ）Ｈ
７燐酸カリウム（１６） 温度　＝２６℃ 流速　：　ｌ　’３　ｍｌ　７分 検出　：　２７５　ｎｍの吸収 適当な溶出画分が併合され濃縮される１３ｍ縮溶液は酢
酸エチルで抽出される。その酢酸エチル抽出物（ｒ：Ｉ
ディフィコール訃よびオキシディフィコールをもたらす
ように濃縮される。
もう一つの方法では、培養液抽出物は濃縮され、尚該残
渣は、ヘキサン：酢酸エチル混合物を溶出液として用い
るシリカゲル上で精製される。
例示２゜ １、５　ｍｌの塩化メチレン中にある４−４ｍＷのデが
添加される。当該懸濁液は室温で攪拌され、その間に３
５ｔ１ｔのシイソプロピルエチルアミンが添加される。
透明な溶液が生ずる。室温１６時間後に反応は濃縮され
、残液はヘキサンで粉砕される。ヘキサン溶液は捨てら
れ、残渣はメタノール中に溶解さ、れる。メタノール可
溶性部分を、メタノール−燐酸カリウム緩衝液（０，０
］、Ｍ　、　ｐｌ＋　７　）を溶出液として用いる逆層
クロマトクラフィーで精製するとティフィシジンをもた
らす。当該合成産物はクロマトクラフィーおよびスペク
トル分析で発酵源より単離されたディフィシジンと一致
する。
例示３゜ オキシディフィコールからのオキシテイフィオキシディ
フイコールは、例示２で記載された条件を用いて、オキ
シディフィシジンをもたらす。
例示４゜ １４、／のメタノールおよび７７　ｍｌの０．１　Ｍグ
リシン酸ナトリウム（ｐＨ９，５）中にある５００ｍ！
のティフィシシン溶液が、約５０００　単位のアルカリ
性フォスファターゼ（子牛腸粘膜由来）で処理される。
反応は窒素下２５℃で２４時間攪拌される。次いで塩化
ナトリウムが添加され、ぞして当該反応混合物は酢酸エ
チル（２Ｘ　５０　ｍｅ　）で抽出される。当該抽出物
は乾燥され（Ｎａ　２　ＳＯ４）そ（〜で、油状に寸で
濃縮され、メタノール（９５）　：　０．Ｏ］、Ｍ燐酸
カリウム、ｐＨ７（５）を溶出液として用いるＣ−８逆
層クロマトグラフィーにかけられる。
ナイフイコール（ｄｉｆｆｉｃｏｌ　）を含む１面分は
濃縮され、当該残Ｉ−ｔは酢酸エチル中に取」−げられ
る。生成した溶液は乾燥され油状に丑で再濃縮され、ヘ
キサン（４）：酢酸エチル（１）を溶出液どして用いる
シリカゲル上のクロマトグラフィーにかけられる。精製
されたディフィコールは、透明な油状物どして得られる
。ＴＬＣ（シリカゲル、７ヘキサン：３酢酸エチル）：
Ｒｆ＝０．６゜ スペクトル・テーク： ＮＭＲ’（ＣＤＣ１３，２００ＭＴ（ｚ　）：　　δ　
１．０８　（ｄ、　Ｊ−６Ｈｚ、３Ｈ）：　　１．３７
−１．９５（ｍ、８Ｈ）：　　１．８２（ｓ、３Ｔ（）
；　　１．８６（ｓ、３Ｈ）：　　２１１４−２．７８
（ｍ、８Ｈ）；　　３．０５（ｄのｄ、　Ｊ−１，２Ｈ
ｚ、　２ｌ−Ｔ）　；　４．７８（広域ｄ、Ｊ、ｎ）；
　４．８８−５．２７　（ｍ）、　５．３−５．５　（
ｔのｄ　）　、　５．６３−５．９　（ｍ）、　５．９
−６．３５　（ｍ）、　６．３５−６．７０　（ｍ）、
　４．８８−６．７０　（合泪−１６Ｈ）。
マス・スペクトル：　Ｍ”　＝　４６４ＵＶスペクトル
（メタノール）　：　２８２ｎｍ。
２７２　ｎｍ、　　２６１　ｎｍ、　　２３４　ｎｍ　
。
例示５ オキシディフィシジンからのオキシディフィ１４　ｍｌ
！のメタノールおよび７７　ｍｌの０．１．　Ｍクリシ
ン酸ナトリウム（１ｕ１１８．５　）中にある５　００
　ｍｇのオキシディフィシシン溶液が、約５０００単位
のアルカリ性フォスファターゼ（子牛腸粘膜由来）で処
理される。反応は２５℃で攪拌され、ｐｉｔにｌ、２．
１４Ｍ水酸化カリウム番液の添加（（より８６５と８６
の間に維持される。２５時間後に、反応に塩化ナトリウ
ムが添加され、酢酸エチル（２×５０　ｍｌ　）で抽出
される。精製はティフィコールについて上述され−たＪ
二うになされた。
ＮＭＲ，（ＣＤαｓ、　　４００ＭＴ（ｚ）　　：　　
δ　１．１　（ｄ、　Ｊ＝８Ｈｚ）；　　１．１８−１
．．８０（ｍ）；　　１．６８（ｓ）；　　１．７４（
ｓ）：　　］、、］８６−２．５６（ｍ）　；　　２．
９８　（ｄ）　：　　３．１．５　（ｄ）　：４２０（
広域ｄ）；４．７０（広域ｄ）　：　４．８−５．３　
（→：　　５．４２（ｍ）：　　５．７４−５．８４（
ｍ）；　　５．９−６．１８（ｍ）；　　６．２５　（
ｔ）　：　　６．４−６．５８　（ｍ）　；　　６．７
５　（Ｎ　。
マス・スペクトル：Ｍ’＝４８０ ｔＪＶ　スペクトル（メタノール）：　２８２ｎｍ　　
；２７３　ｎｒｎ；　　２６］、　ｎｍ；　　２３４　
ｎｍ　。

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 １、Ｒ＿１が水素または水酸基である以下の構造式 ▲数式、化学式、表等があります▼ I の化合物。 ２、Ｒ＿１が水酸基である特許請求の範囲第１項に従う
    化合物。 ３、Ｒ＿１が水素である特許請求の範囲第１項に従う化
    合物。 ４、水性栄養培地中の制御された好気条件下でバチルス
    ・ズブチリス菌株を培養することからなる特許請求の範
    囲第１項に従う化合物を調製するための方法。 ５、生産物がディフィコールである特許請求の範囲第４
    項に従う方法。 ６、生産物がオキシディフィコールである特許請求の範
    囲第４項に従う方法。 ７、ディフィシジンまたはオキシディフィシジンより選
    択された化合物をアルカリ性フォスファターゼ酵素で処
    理することからなる特許請求の範囲第１項の化合物を調
    製するための方法。 ８、水性栄養培地中の制御された好気条件下でバチルス
    ・ズブチリスＡＴＣＣ３９３７４株を培養し、次でｐＨ
    ８．３から８．５において塩化マグネシウム処理するこ
    とからなるＲ＿１がＯＨである特許請求の範囲第１項の
    化合物を調製するための方法。
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