JPS61148181A - Ｆｒ―９００５０６物質およびその製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 この発明は薬理活性を有するトリシクロ化合物またはそ
の塩、その製造法およびそれを含有する医薬組成物に関
する。

さらに詳細には、この発明は免疫抑制活性、抗菌活性等
のような薬理活性を有する新規なトリシクロ化合物また
はその塩、その製造法、それを含有する免疫抑制剤およ
び抗菌剤に関する。

すなわち、この発明の一つの目的は、移植による拒絶反
応、骨髄移植による移植片対宿主病、自己免疫疾患、感
染症等の治療および予防に有用な新規トリシクロ化合物
またはその医薬として許容される塩を提供することであ
る。

この発明のもう一つの目的は、醗酵法および合成法によ
るトリシクロ化合物またはその塩の製造法を提供するこ
とである。

この発明のさらにもう一つの目的は、有効成分としてト
リシクロ化合物またはその医薬として許容される塩を含
有する免疫抑制剤および抗菌剤を提供することである。

この発明は４種の新規化合物であるＦＲ−９００５０６
物質、ＦＲ−９００５２０物質、ＦＲ−９００５２３物
質およびＦＲ−９００５２５物質が初めて見い出きれた
ことに基づくものである。

さらに詳細には、ＦＲ−９００５０６物質、ＦＲ−９０
０５２０物質、ＦＲ−９００５２３物質およびＦＲ−９
００５２５物質は、ストレプトミセス（狂正匹四た朋）
Ｂに属する新菌種を醗酵することにより得られる培養ブ
ロスから純粋な形で初めて分離されたものである。

そして、ＦＲ−９００５０６物質、ＦＲ−９００５２０
物質、ＦＲ−９００５２３物質およびＦＲ−９００５２
５物質の化学構造を明らかにするため鋭意研究した結果
、この発明の発明者等はそれらの化学構造を決定し、そ
れらの化合物の誘導体の合成に成功した。

この発明の新規なトリシクロ化合物は下記一般式で示す
ことができる。

（式中、Ｒ１はヒドロキシ基または保護されたヒドロキ
シ基、Ｒ２は水素、ヒドロキシ基または保護されたヒド
ロキシ基、Ｒ３はメチル基、エチル基、プロピル基また
はアリル基、ｎは１または２の整数、実線と点線により
表わされる記号は単結合または二重結合を意味する） 目的化合物（１）のうち、下記４種の化合物が醗酵によ
り産生されることが見出された。

（１）ＲおよびＲ２がそれぞれヒドロキシ基、Ｒ３がア
リル基、ｎが整数２、実線と点線により表わされる記号
が単結合を意味する化合物（Ｉ）（ＦＲ−９００５０６
物質と命名） （２）ＲおよびＲがそれぞれヒドロキシ基、Ｒ３がエチ
ル基、ｎが整数２、実線と点線により表わされる記号が
単結合を意味する化合物（１）［（ＦＲ−９００５２０
物質と命名（別名：　ＷＳ７２３８Ａ物質）］１　　　
　　　２　。

（３）ＲおよびＲかそれぞれヒドロキシ基、Ｒ３がメチ
ル基、ｎが整数２、実線と点線により表わされる記号が
単結合を意味する化合物（Ｉ）［ＦＲ−９００５２３物
質と命名（別名：　Ｗ５７２３８Ｂ物質）］（４）Ｒ’
およびＲ２がそれぞれヒドロキシ基、Ｒ３がアリル基、
ｎが整数１、実線と点線により表わされる記号が単結合
を意味する化合物（Ｉ）（ＦＲ−９００５２５物質と命
名） この発明のトリシクロ化合物（１）において、フンホー
マーあるいは不斉炭素原子および二重結合に起因する光
学異性体および幾何異性体のような１対以上の立体異性
体対が存在することがあり、そのようなフンホーマーあ
るいは異性体もこの発明の範囲内に包含きれる。

この発明の目的化合物であるトリシクロ化合物（■）ま
たはその塩は、下記に示す製造法により製造することが
できる。

［Ｉ］蚊匠基 ＦＲ−９００５２５物質 （以下余白） ［１［］倉球羞 （１）製造法１（ヒドロキシ保護基の導入）町町 （２）製造法２（ヒドロキシ保護基の導入）Ｉ−Ｉｕ′
ｉ３町 （３）製ｊＥ陳」−（二重結合の形成）（４）　ｋ産羞
１（ヒドロキシエチレン基の酸化）（５）製造法５（ア
リル基の還元） １還元 （式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、ｎおよび実線と点線により
表わされる記号はそれぞれ前と同じ意味であり、Ｒおよ
びＲ２はそれぞれ保護されたヒトａ　　　　　　　　　
　　ａ ロキシ基、Ｒ２は脱離基を意味する） 上記定義の具体例およびその好ましい実施態様を以下詳
細に説明する。

この明細書において使用される「低級」なる語は、特に
指示がなければ、炭素原子１〜６個を意味する。

「保護されたヒドロキシ基」における好適なヒドロキシ
保護基としては、 例えばメチルチオメチル、エチルチオメチル、プロビル
チオメチル、イソプロピルチオメチル、ブチルチオメチ
ル、インブチルチオメチル、ヘキシルチオメチル等の低
級アルキルチオメチル基のような１−（低級アルキルチ
オ）（低級）アルキル基、さらに好ましいものとして０
１〜Ｃ４アルキルチオメチル基、最も好ましいものとし
てメチルチオメチル基； 例えばトリメチルシリル、トリエチルシリル、トリブチ
ルシリル、第三級ブチルチオメチルシリル、トリ第三級
ブチルシリル等のトリ（低級）アルキルシリル、例えば
メチル−ジフェニルシリル、エチル−ジフェニルシリル
、プロピル−ジフェニルシリル、第三級ブチル−ジフェ
ニルシリル等の低級アルキル−ジアリールシリル等のよ
うなトリ置換シリル基、さらに好ましいものとしてトリ
（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルシリル基およびＣ１〜Ｃ４アル
キル−ジフェニルシリル基、最も好ましいものとして第
三級ブチル−ジメチルシリル基および第三級ブチル−ジ
フェニルシリル基； カルボン酸およびスルホン酸から誘導される脂肪族アシ
ル基、芳香族アシル基および芳香族基で置換された脂肪
族アシル基のようなアシル基；等が挙げられる。

脂肪族アシル基としては、例えばホルミル、アセチル、
プロピオニル、ブチリル、インブチリル、バレリル、イ
ソバレリル、ピバロイル、ヘキサノイル、カルボキシア
セチル ピオニル、カルボキシブチリル サノイル等の、カルボキシのような適当な置換基を１個
以上有していてもよい低級アルカノイル基、例えばシク
ロプロピルオキシアセチル、シクロブチルオキシプロピ
オニル、シクロへブチルオキシブチリル、メンチルオキ
シアセチル、メンチルオキシプロピオニル、メンチルオ
キシブチリル、メンチルオキシペンタノイル、メンチル
オキシヘキサノイル等の、低級アルキルのような適当な
置換基を１個以上有していてもよいシクロ（低級）アル
コキシ（低級）アルカノイル基、カンファースルホニル
基等が挙げられる。

芳香族アシル基としては、例えばベンゾイル、トルオイ
ル、キシロイル、ナフトイル、ニトロベンゾイル、ジニ
トロベンゾイル、ニトロナフトイル等の、ニトロのよう
な適当な置換基を１個以上有していてもよいアロイル基
、例えばベンゼンスルホニル、トルエンスルホニル、キ
シレンスルホニル、ナフタレンスルホニル、フルオロベ
ンゼンスルホニル、クロロベンゼンスルホニル、ブロモ
ベンゼンスルホニル、ヨードベンゼンスルホニル等の、
ハロゲンのような適当な置換基を１個以上有していても
よいアレーンスルホニル基等が挙げもれる。

芳香族基で置換された脂肪族アシル基としては、１列え
ばフェニルアセチル、フェニルプロピオニル、フェニル
ブチリル、２−トリフルオロメチル−２−メトキシ−２
−フェニルアセチル、２−エチル−２−トリフルオロメ
チル−２−フェニルアセチル、２−トリフルオロメチル
−２−プロポキシ−２−フェニルアセチル等の、低級ア
ルコキシおよびトリハロ（低級）アルキルのような適当
な置換基を１個以上有していてもよいアル（低級）アル
カノイル基等が挙げられる。

上記アシル基中、さらに好ましいアシル基としては、カ
ルボキシを有していてもよい０１〜Ｃ４アルカノイル基
、シクロアルキル部分に（０１〜Ｃ）アルキルを２個有
するシクロ（０５〜Ｃ６）ア″キ″オキ′（０１〜Ｃ４
）ア″力′イ″基・　　　　　　　　、。

カンファースルホニル基、ニトロを１個または２個有し
ていてもよいベンゾイル基、ハロゲンを有するベンゼン
スルホニル基、０１〜Ｃ４アルフキシとトリハロ（０１
〜Ｃ４）アルキルを有するフェニル（Ｃ１〜Ｃ４）アル
カノイル基が挙げられ、それらのうち、最も好ましいも
のとしては、アセチル、カルボキシプロピオニル、メン
チルオキシアセチル、カンファースルホニル、ベンゾイ
ル、ニトロベンゾイル、ジニトロベンゾイル、ヨードベ
ンゼンスルホニルおよび２−トリフルオロメチル−２−
メトキシ−２−フェニルアセチルが挙げられる。

好適な「脱離基」としては、ヒドロキシ基、アシル部分
が上記で例示したようなものであるアシルオキシ基等が
挙げられる。

この発明のトリシクロ化合物（１）の製造法を以下詳細
に説明する。

［Ｉ］１匪迭 この発明のＦＲ−９００５０６物質、ＦＲ−９００５２
０物質、ＦＲ−９００５２３物質およびＦＲ−９００５
２５物質は、ストレプトミセス・ツクバエンシス（５ｔ
ｒｅ　ｔｏｍ　ｃｅｓｔｓｕｋｕｂａｅｎｓｉｓ　）　
Ｐ＆１９９９３およびストレプトミセス・ハイグロスフ
ビカス・サブスプ・ヤクシマエンシス（５ｔｒｅ　ｔｏ
ｍ　ｃｅｓ　ｈ　　ｒｏｓｃｏ　１ｃｕｓ　５ｕｂｓｐ
。

ａｋｕｓｈｉｍａｅｎｓｉｓ　）　Ｎａ　７２３８のよ
うなストレプトミセス属に属する、ＦＲ−９００５０６
、ＦＲ−９００５２０、ＦＲ−９００５２３および／ま
たはＦＲ−９００５２５物質−生産菌株を培地中で醗酵
させることにより生産することができる。

ＦＲ−９００５０６物質、ＦＲ−９００５２０物質、Ｆ
Ｒ−９００５２３物質およびＦＲ−９００５２５物質の
醗酵による生産について以下に説明する。

［Ａ］この発明のＦＲ−９００５０６物質、ＦＲ−９０
０５２０物質およびＦＲ−９００５２５物質は、ストレ
プトミセス・ツタバエンシスＮａ９９９３のようなスト
レプトミセス属に属する、ＦＲ−９００５０６、ＦＲ−
９００５２０および／またはＲ−９００５２５物質−生
産菌株を培地中で醗酵させることにより生産できる。

聚工碧 ＦＲ−９００５０６物質、ＦＲ−９００５２０物質およ
び／またはＦＲ−９００５２５物質の生産に使用される
菌は、ストレプトミセス属に属するＦＲ−９００５０６
、ＦＲ−９００５２０および／またはＦＲ−９００５２
５物質−生産菌株であり、それらのうちストレプトミセ
ス・ツクバエンシス歯９９９３が茨城県筑波郡豊里町で
採取された土壌試料から新たに分離された。

この新たに分離されたストレプトミセス・ツタバエンシ
ス＆９９９３の凍結乾燥標本は、工業技術院微生物工業
技術研究所（茨城県筑波郡矢田部町東１丁目１−３）に
１９８４年１０月５日付で寄託番号微工研菌寄第７８８
６号として寄託され、次いで１９８５年ｌθ月１９日付
で新しい寄託番号微工研条寄第９２７号として同寄託機
関のブダペスト条約ルートに切り換えられた。

新規なＦＲ−９００５０６物質、ＦＲ−９００５２０物
質および／またはＦＲ−９００５２５物質の生産におい
て、この明細書に記載した菌は単に説明のためにのみ掲
げたものであり、それに限定きれるものではない、この
発明にはまた、自然突然変異菌ならびにＸ線照射、紫外
線照射、Ｎ−メチル−Ｎ′−二トローＮ−二トロソグア
ニジン、２−アミノプリン等による慣用の処理によって
つくられる人工突然変異菌をも含む、　ＦＲ−９００５
０６物質、　ＦＲ−９００５２０物質および／またはＦ
Ｒ−９００５２５物質を産生できるいかなる突然変異菌
を使用する場合も含まれる。

ストレプトミセス・ツクバエンシス＆　９９９３は下記
のような形態学的性質、培養特性、生物学的および生理
学的特徴を有する。

［１］形態学的性質 主に、シャーリング（Ｓｈｉｒｌｉｎｇ）およびゴツト
リープ（Ｇｏｔｔｌｉｅｂ）に記載の方法［シル−リン
グ・イー・ビーおよびディー・ゴットリープ：メソッズ
・フォー・キ〜ラクテリゼーション・オブ・ストレプト
ミセス・スペシーズ（インターナショナル・ジャーナル
・才プ・システマチック拳バクテリオロジー）　（Ｍｅ
ｔｈｏｄｓ　ｆｏｒ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏ
ｎ　ｏｆＳｔｒａ　ｔｏｗ　ｃｅｓ　５ｐｅｃｉａｓ、
　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｊｏｕｒｎａｌｏｆ　
Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ）第
１６巻、第３１３〜３４０頁、１９６６年］を分類学的
検討に用いた。

形態学的観察は、オートミール寒天、イースト・マルト
エキストラクト寒天および無機塩・スターチ寒天上、３
０℃で１４日間生育させた培養物を用い、光学および電
子顕微鏡を用いて行った。

成熟胞子体は各胞子鎖に１０〜５０個または５０個を超
える数の胞子を有する直鎖状または波状（Ｒｅｃｅｉｆ
ｌｅｘｉｂｔｌｅｓ　）を形成した。電子顕微鏡での観
察によ・ればこの胞子は楕円形の円筒状で、大きさは０
．５〜０．７Ｘ０．７〜０．８−である、胞子表面は滑
らかであった。

［２コ培養特性 培養特性は上記シャーリングおよびゴツトリープ、なら
びにワクスマン（Ｗａｋｓｍａｎ）　［ワクスマン・ニ
ス・エー：ザ・アクチノマイセッツ、第２巻、タラシフ
ィケーション・アイデンティフィケーション・アンド・
デスクリプジョン・才ブ・ゼネラ・アンド・スペシーズ
、ザ瞼ウィリアムス・アンド・ウィルキンス・カンパニ
ー、バルチモア、１９６１年（Ｗａｋｓｍａｎ、Ｓ、Ａ
、　：Ｉｈｅ　ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ。

Ｖｏｌ、２　：　Ｃ１ａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ、　１
ｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ａｎｄｄｅｓｃｒｉｐｔ
ｉｏｎ　ｏｆ　ｇｅｎｅｒａ　ａｎｄ　５ｐｅｃｉｅｓ
、　ＴｈｅＷｉｌｌｉａｍｓ　ａｎｄ　Ｗｉｌｋｉｎｓ
　Ｃｏ、　、　Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ、　１９６１）　］
に記載の１０種類の培地で観察した。

３０℃で１４日間培養した。この研究で使用した色名は
新色冬枯（東京、日本色彩研究所の手引書）に基づいた
。オートミール寒天、イースト・マルトエキストラクト
寒天および無機塩・スターチ寒天上で成育啓せた場合、
コロニーは灰色系に属していた。可溶性色素はイースト
・マルトエキストラクト寒天で生成したが、他の培地で
は生成しなかった。結果を表１に示す。

表１．菌株＆、９９９３およびストレプトミセス・ミサ
キエンシスＩＦ０１２８９１　　（兆匹匹四匹朋ｍ１ｓ
ａｋｉｅｎｓｉｓ　ＩＦＯ１２８９１）の培養特性略号
二Ｇ−生育、Ａ−気菌糸の色 Ｒ−裏面の色、Ｓ−可溶性色素 細胞壁組成分析を、ベラカー等の方法［ベラカー・ビー
・、エム・ピー拳しシウ０アリエル、アール・イー・ゴ
ートンおよびエイチ・ニー・レシウ°アリエル：ラピッ
ド・ディフェレンシエーション・ビトウ０　イーン・ノ
カルジアおよびストレプトミセス・パイ・ベーパークロ
マトグラフィー・才ブ・ホール・セル・ヒドロリゼーツ
：アプライド・マイクロバイオロジー（Ｂｅａｋｅｒ。

Ｂ、、　Ｍ、Ｐ、Ｌｅｃｈｅｖａｌｉｅｒ、　Ｒ，Ｅ、
Ｇｏｒｄｏｎ　ａｎｄ　Ｈ，Ａ。

Ｌｅｃｈｅｖａｌｉｅｒ：Ｒａｐｉｄ　ｄｉｆｆｅｒｅ
ｎｔｉａｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎＮｏｃａｒｄｉａ　
ａｎｄ　５ｔｒｅ　ｔｏｗ　ｃｅｓ　ｂｙ　ｐａｐｅｒ
　　　　　　　　　１ｃｈｒｏａ＋ａｔｏｇｒａｐｈｙ
　ｏｆ　ｗｈｏｌｅ　ｃｅｌｌ　ｈｙｄｒｏｌｙｓａｔ
ｅｓ：Ａｐｐｌ、Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ、　）第１２巻、
第４２１〜４２３頁、１９６４年］および山口の方法［
山口、ティー・：フンバリジン・才ブ・ザ・セルΦウオ
ール曝コンポジション・才プ・モルホロジカリー・ディ
ステインクト・アクチノマイセッツ：ジャーナル・オブ
・バクテリオロジー（Ｙａｍａｇｕｃｈｉ、Ｔ、　：Ｃ
ｏ＋ｎｐａｒｉｓｏｎ　ｏｆｔｈｅ　ｃｅｌｌ　ｗａｌ
ｌ　ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍｏｒｐｈｏｌｏ
ｇｉｃａｌｌｙｄｉｓｔｉｎｃｔ　ａｃｔｉｎｏｍｙｃ
ａｔａｓ：Ｊ、Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ、　）第８９巻、第
４４４〜４５３頁、１９６５年］の方法によって行った
。

菌株１＆　９９９３の全細胞加水分解物の分析結果は、
ＬＬ−ジアミノピメリン酸が存在することを示した。従
ってこの菌株の細胞壁はタイプ■に属すると考えられる
。

［３コ生物学的および生理学的性質 菌株＆　９９９３の生理学的性質は、前記シャーリング
およびゴツトリープに記載きれている方法によって測定
した。その結果を表２に示す、生育温度範囲および生育
至適温度は、イースト・マルトエキストラクト寒天上、
温度勾配培養器（東洋化学産業株式会社製）を使用して
測定した。生育温度範囲は１８〜３５°Ｃで、生育至適
温度は２８℃であった。ミルクのペプトン化およびゼラ
チン液化は陽性であった。メラニン色素の産出は陰性で
あった。

表２．菌株＆　９９９３およびストレプトミセス・ミサ
キエンシスＩＦ０１２８９１の生理学的性質炭素源の利
用性をプリドハムおよびゴツトリープの方法［プリドハ
ム・ティー・ジー・およびディー−ゴツトリープ：ザ・
ユーティライゼーション・オブ・カーボン・フンパウン
ズ・バイ・サム・アクチノマイセッテールズ・アズ・ア
ン・エイド・フォー・スペシーズ・デターミネーション
：ジ〜−ナル・オプ・バタテリオロジー（Ｐｒｉｄｈａ
ｍ、　Ｔ、　Ｇ、　ａｎｄ　Ｄ、　Ｇｏｔｔｌｉｅｂ：
Ｔｈｅ　ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｏｆ　　ｃａｒｂｏｎ
　　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　　ｂｙ　　ｓｏｍｅ　　Ａｃ
ｔｉｎｏｍｙｃｅｔａｌｅｓａｓ　ａｎ　ａｉｄ　ｆｏ
ｒ　５ｐｅｃｉｅｓ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ：Ｊ
。

Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ、　）第５６巻、第１０７〜１１４
頁、１９４８年］によって試験した。３０℃で１４日間
培養後に、生育状況を観察した。

この菌株の炭素源の利用性を表３にまとめて示す、グリ
セリン、マルトースおよびフハク酸ナトリウムは菌株Ｎ
Ｃ１９９９３により利用された。さらにまた、Ｄ−グル
コース、シュークロース、Ｄ−マンノースおよびサリシ
ンは多少利用する。

（以下余白） 表３．菌株Ｎ１９９９３およびストレプトミセス・ミサ
キエンシスＩＦ０１２８９１の炭素源利用性記号　十：
良く利用する ±：多少利用する ｍ：利用しない 菌株ＮｃＬ９９９３の顕微鏡学的観察および細胞壁組成
分析の結果から、この菌株が７クスマン（Ｗａｋｓｍａ
ｎ）およびヘンリシ（Ｈｅｎｒｉｃｉ）、１９４３年、
によるストレプトミセス属に属することが明らかとなっ
た。

すなわら、この菌株を公表されている性状〔インターナ
ショナル・ジャーナル・オプφシステマティック・バク
テリオロジ−（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ、Ｔｏｕｒ
ｎａｌ　ｏｆ　Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ　Ｂａｃｔｅｒｉ
ｏｌｏｇｙ）第１８巻、第６９〜１８９貞、第２７９〜
３９２頁、１９６８年および第１９巻、第３９１〜５１
２頁、１９６９年、ならびにパージエイズ・マニュアル
・才プ・デターミネイディプ・バクテリオロジ−（Ｂｅ
ｒｇｅｙ　’　ｓ　Ｍａｎｕａｌ　ｏｆＤｅｔｅｒｍｉ
ｎａｔｉｖｅ　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ　）第８版、
１９７４年］に照らして、ストレプトミセス属の種々の
種と比較した。

比較の結果、菌株＆　９９９３はストレプトミセス・ア
ブラウ゛イエンシス・ニジムラ等（Ｓｔｒａ　ｔｏｗ　
ｃａｓａｂｕｒａｖｉｅｎｓｉｓ　ＮｉｓｈＮ１５ｈｉ
　ｅｔ、ａｌ、　）、ストレプトミセス・アウ゛エラネ
ウス・バルダッシおよびグレイン（５ｔｒｅ　ｔｏｍ　
ｃａｓ　ａｖｅｌｌａｎｅｕｓ　Ｂａ１ｄａｃｃｉ　ａ
ｒｘｌＧｒａｉｎ　）およびストレプトミセス・ミサキ
エンシス・ナカムラに類似していると考えられる。

従って菌株Ｎｃ９９９３の培養特性を、対応するストレ
プトミセスΦアブラウ６イエンシスＩＦ０１２８３０、
ストレブトミセス・アウゝエラネウスＩＦＯ１３４５１
およびストレプトミセス・ミサキエンシスＩＦ０１２８
９１と比較した。その結果菌株１’ｈ９９９３はストレ
プトミセス・ミサキエンシスＩＦ０１２８９１に最も類
似していた。従って菌株ＮＱ９９９３をさらに上記表１
．２および３に示したストレプトミセス・ミサキエンシ
スＩＦＯ１２８９１と詳細に比較した。この結果から、
菌株Ｎｕ　９９９３はストレプトミセス・ミサキエンシ
スＩＦ０１２８９１と下記の点で区別することができ、
従って菌株Ｎｕ　９９９３はストレプトミセスの新種で
あると考えられ、この微生物が茨城県筑波郡で採取した
土壌にちなんでストレプトミセス・ツタバエンシス・ス
ブ・ノブ（５ｔｒｅ　ｔｏｗ　ａｓｓ　ｔｓｕｋｕｂａ
ｅｎｓｉｓ　ｓｐ。

ｎｏｖ、　）と命名された。

ストレプトミセス争ミサキエンシスＩＦ０１２８９１と
の菌株Ｎｃ　９９９３の培養特性は、ストレプトミセス
・ミサキエンシスＩＦ０１２８９１とは、オートミール
寒天、イーストΦマルトエキストラクト寒天、グルコー
ス・アスパラギン寒天、スザペツク寒天およびポテト・
デキストロース寒天を用いて培養したとき異なる。

菌株＆　９９９３のスターチ加水分解は陰性であるが、
ストレプトミセス・ミサキエンシスＩＦ０１２８９１の
場合は陽性である。

菌株Ｎａ　９９９３のゼラチン液化は陽性であるが、ス
トレプトミセス・ミサキエンシスＩＦ０１２８９１の場
合は陰性である。

炭素源の利用性においては、菌株＆　９９９３はグリセ
リン、マルトースおよびコハク酸ナトリウムを利用する
が、ストレプトミセス・ミサキエンシスＩＦ０１２８９
１はこれらを利用しない、さらに、菌株尚９９９３はＤ
−ガラクトースおよびイヌリンを利用しないが、ストレ
プトミセス・ミサキエンシスＩＦＯＩ２８９１はこれら
を利用できる。

この発明の新規なＦＲ−９００５０６物質、ＦＲ−９０
０５２０物　　　　　　　１質およびＦＲ−９００５２
５物質は、例えばストレプトミセス・ツクバエンシスＮ
Ｑ９９９３、（寄託１号：　微工研条寄第９２７号）の
ようなストレプトミセス属に属するＦＲ−９００５０６
、ＦＲ−９００５２０および／またはＦＲ−９００５２
５物質生Ｍ菌株を培地中で培養することにより産生でき
る。

一般的には、ＦＲ−９００５０６物質、ＦＲ−９００５
２０物質および／またはＦＲ−９００５２５物質は、Ｆ
Ｒ−９００５０６、ＦＲ−９００５２０および／または
ＦＲ−９００５２５物質生産菌株を、同化しうる炭素源
および窒素源を含有する水性培地中で、好ましくは例え
ば振とう培養、深部培養等の好気性条件下で培養するこ
とにより産生できる。

培地の好ましい炭素源としては、グルコース、キシロー
ス、ガラクトース、グリセリン、スターチ、デキストリ
ン等のような戻水化物が挙げられる。他の炭素源として
はマルトース、ラムノース、ラフィノース、アラビノー
ス、マンノース、サリンン、コハク酸ナトリウム等が挙
げられる。

好ましい窒素源としてはイースト嗜エキストラクト、ペ
プトン、グルテンミール、綿実粉、大豆粉、コーン・ス
テイープ・リカー、乾燥イースト、小麦胚芽、羽毛粉、
落花生粉等、ならびに例えば硝酸アンモニウム、硫酸ア
ンモニウム、燐酸アンモニウム等のアンモニウム塩、尿
素、アミノ酸等のような無機または有機窒素化合物が挙
げられる。

炭素源および窒素源は好ましくはそれらの組合わせで使
用されるが、微量の生育因子および相当ｌの無機栄養素
を含有していれば純度の低い物質も使用でき、必ずしも
純粋な形で使用する必要はない。所望により培地に炭酸
ナトリウムまたは炭酸カルシウム、燐酸ナトリウムまた
は燐酸カリウム、塩化ナトリウムまたは塩化カリウム、
沃化ナトリウムまたは沃化カリウム、マグネシウム塩、
銅塩、コバルト塩等の無機塩を冷加してもよい。

特に培養培地が著しく発泡する場合には、必要により液
状パラフィン、脂肪油、植物油、鉱油またはシリコンの
ような消泡剤を添加してもよい。

ＦＲ−９００５０６物質、ＦＲ−９００５２０物質およ
びＦＲ−９００５２５物質を大量生産する条件としては
、深部好気培養が好ましい、少量生産にはフラスコまた
はびん中で振とう培養または表面培養が行われる。

さらにまた、大型タンク内で生育を実施する場合には、
ＦＲ−９００５０６物質、ＦＲ−９００５２０物質およ
びＦＲ−９００５２５物質の生産工程における生育遅延
を回避するために、微生物の前培養を用いて生産タンク
中に菌を接種するのが好ましい、すなわち、比較的少量
の培養培地に微生物の胞子または菌糸を接種し、その接
種培地を培養して微生物の前培養接種物をまず生産し、
次いで培養した前培養接種物を無菌的に大型タンクに移
すのが望ましい、この前培養接種物を生産する培地は、
ＦＲ−９００５０６物質、ＦＲ−９０Ｏ５２０物質およ
びＦＲ−９００５２５物質の生産に使用される培地と実
質的に同じであってもよく、また異なってもよい。

培養混合物の攪拌および通気は種々の方法で行うことが
できる。攪拌はプロペラまたはこれに準する攪拌装置を
用いるか、醗酵器を回転させるかまたは振とうするか、
種々のポンプ装置を用いるか、または培地中に滅菌空気
を通すことによっても行うことができる０通気は滅菌空
気を醗酵混合物中を通過させることにより行ってもよい
。

醗酵は通常、約２０℃〜４０℃の温度範囲、好ましくは
２５〜３５℃で、約５０〜１５０時間行われるが、醗酵
条件および醗酵規模によって適宜変化させればよい。

このようにして生産きれたＦＲ−９００５０６物質、Ｆ
Ｒ−９００５２０物質およびＦＲ−９００５２５物質は
、他の既知の生物学的活性物質の回収に通常使用される
慣用の方法で培養培地から回収することができる。生産
されたＦＲ−９００５０６物質、ＦＲ−９００５２０物
質およびＦＲ−９００５２５物質は、培養菌糸中および
濾液中に見出され、従ってＦＲ−９００５０６物質、Ｆ
Ｒ−９００５２０物質およびＦＲ−９００５２５物質は
、培養ブロスの濾過または遠心分離によって得られる菌
糸および濾液から、減圧濃縮、凍結乾燥、常用の溶媒に
よる抽出、ｐＨ，調整、例えば陰イオン交換樹脂または
陽イオン交換樹脂、非イオン性吸着樹脂等の常用の樹脂
による処理、例えば活性次、ケイ酸、シリカゲル、セル
ロース、アルミナ等の常用の吸着剤による処理、結晶化
、再結晶化等の慣用の方法によって分離、精製すること
ができる。

上記醗酵法によって生産されたＦＲ−９００５０６物質
、ＦＲ−９００５２０物質およびＦＲ−９００５２５物
質は下記の物理化学的性質を有する。

■ヨ襄狙四生月 （１）形状および色調： 白色粉末 （２）元素分析値： Ｃ，６４，７２％、Ｈ：８．７８％、Ｎ：１．５９％６
４、５９％　　８．７４％　　１．６２％（３）呈色反
応： 陽性；硫酸セリウム反応、硫酸反応、エールリッヒ反応
、ドラーゲンドルフ反応、沃素蒸気反応陰性：塩化第二
鉄反応、ニンヒドリン反応、モーリッシュ反応 （４）溶解性： 可溶：メタノール、エタノール、アセトン、酢酸エチル
、クロロホルム、ジエチルエーテル、ベンゼン ｌ！Ｉ溶；ヘキサン、石油エーテル 不溶二本 （５〉融点： ８５〜９０℃ （６）比旋光度： ［α］乙３．−７３°Ｃ（Ｃ＝０．８．ＣＨＣｌ３）（
７）紫外線吸収スペクトル： 末端吸収 ＜８）赤外線吸収スペクトルニ ジＣＨＣｌ３：　３６８０．３５８０．３５２０．２９
３０．２８７０゜ａｘ ２８３０、１７４５．１７２０．１７００．１６４５゜
１４５０、１３８０．１３５０．１３３０．１３１０゜
１２８５、１１７０．１１３５．１０９Ｇ、　１０５０
゜１０３０、１０００．９９０．９６０　（ｓｈ）。

９１８　ｃｆｆｉｍ’ （９）　１３ｃ核磁気共鳴スペクトル：８４．４１　　
（ｄ）。

３９．４０　（ｔ）、　　　３１．５８　（ｔ）、　　
　３０．７９　（ｔ）。

上記スペクトルのチャートを図１に示す。

（１０）１Ｈ核磁気共鳴スペクトル： 上記スペクトルのチャートを図２に示す。

＜１１）薄層クロマトグラフィー： （１２）物質の性質： 中性物質 ＦＲ−９００５０６物質に関して、１３Ｃおよび１Ｈ核
磁気共鳴スペクトルの測定の際、この物質は種々の化学
シフトにおいてそれぞれ１対のシグナルを示す。

このような特徴を有するＦＲ−９００５０６物質は、さ
らに下記の性質を有する。

（１）１３Ｃ核磁気共鳴スペクトルを２５°Ｃおよび６
０℃において測定したところ、それぞれ１対のシグナル
の強度比が変化する。

（“）ｆｆＪｉ１７ｔｆｆ”″５７“−＃−−＊１７　
　　　　。

ロマトグラフイーを測定したところ、ＦＲ−９００５０
６物質はそれぞれ薄層クロマトグラフィーでは単一スポ
ットとして、高速液体クロマトグラフィーでは単一ピー
クとして現れる。

ＦＲ−９００５０６物質のこの白色粉末はアセトニトリ
ルから再結晶すると結晶の形状に変化し、この結晶は下
記の物理化学的性質を市する。

（１）形状および色調： 無色のプリズム状結晶 （２）元素分析値： Ｃ：６４．３０％、Ｈ：８．９２％、Ｎ：１．７７％６
４、２０％、　　　８．８６％、　　　１．７２％（３
）融点： １２７〜１２９℃ （４）比旋光度： ［α］Ｐニー８４．４＠（Ｃ＝１．０２．ＣＨＣｌ３）
（５）　１３Ｃ核磁気共鳴スペクトル：上記スペクトル
のチャートを図３に示す。

（６）　１Ｈ核磁気共鳴スペクトル： 上記スペクトルのチャートを図４に示す。

その他の物理化学的性質、すなわちＦＲ−９００５０６
物質の無色のプリズム状結晶の呈色反応、溶解性、紫外
線吸収スペクトル、赤外線吸収スペクトル、薄層クロマ
トグラフィーおよび物性の性質は、白色粉末のそれらと
同じであった。

上記物理化学的性質およびＸ線解析から、ＦＲ−９００
５０６物質は下記の化学構造を有することがわかった。

１７−アリル−１，１４−ジヒドロキシ−１２−Ｅ　２
−（４−ヒドロキシ−３−メトキシシクロヘキシル）−
１−メチルビニル］−２３，２５−ジメトキシ−１３，
１９，２１，２７−テトラメチル−１１，２８−ジオキ
サ−４−アザトリシクロ［２２，３、１、０’°９］オ
クタコスー１８−エンー２．３．１０．１６−チトラオ
ン 胆」匹契次１ この化合物の物理化学的性質は後に述べる。

■ｊ襲狙競焦ヌ （１）形状および色調： 白色粉末 （２）元素分析値： Ｃ：６５．１７％、Ｈ：８．５３％、Ｎ：１．７６％（
３）呈色反応： 陽性：硫酸セリウム反応、硫酸反応、エールリッヒ反応
、ドラーゲンドルフ反応、沃素蒸気反応 陰性：塩化第二鉄反応、ニンヒドリン反応、モーリッシ
ュ反応 （４）溶解性： 可溶：メタノール、エタノール、アセトン、酢酸エチル
、クロロホルム、ジエチルエーテル、ベンゼン Ｉｉｉ溶：ヘキサン、石油エーテル 不溶二本 （５）融点： ８５〜８９℃ （６）比旋光度： ［α］’ｅ、３　、−ｓ８°　（Ｃ＝１．０．ＣＨＣｌ
３）（７）紫外線吸収スペクトル： 末端吸収 （８）赤外線吸収スペクトルニ ジ”Ｃ１３：　３６８０．３５８０．３４７５．３３４
０．２９４０゜１１ａｘ ２８８０、２８３Ｇ、　１７５５．１７Ｇ５．１６３５
゜１４５５、１３８２．１３７０．１３３０．１３１Ｇ
。

１２７３、１１７０．１１３５．１０９３．１０５０゜
１０２０、９９５．９７０．９２０．８６７　ｃｍ−’
（９）　１３Ｃ核磁気共鳴スペクトル：上記スペクトル
のチャートを図５に示す。

（１０）ＩＨ核磁気共鳴スペクトル： 上記スペクトルのチャートを図６に示す。

（１１）薄層クロマトグラフィー： （１２）物質の性質： 中性物質 ＦＲ−９００５２５物質に関して、１３Ｃおよび１Ｈ核
磁気共鳴スペクトルの測定の際、この物質は種々の化学
シフトにおいてそれぞれ１対のシグナルを示したが、薄
層クロマトグラフィーおよび高速液体クロマトグラフィ
ーを測定したところ、ＦＲ−９００５２５物質はそれぞ
れ薄層クロマトグラフィーで単一スポット、高速液体ク
ロマトグラフィーでは単一ピークを示した。

上記物理化学的性質およびＦＲ−９００５０６物質の化
学構造が決定きれたことにより、ＦＲ−９００５２５物
質は下記の化学構造を有することが判明した。

１６−アリル−１，１３−ジヒドロキシ−１１−［２−
（４−ヒドロキシ−３−メトキシシクロヘキシル）−１
−メチルビニル］−２２，２４−ジメトキシ−１２，１
８，２０，２６−テトラメチル−１０，２フーシオキサ
ー４−アザトリシクロ［２１，３，１，０’°８］ペプ
タコス−１７−エン−２，３，９，１５−テトラオン ［Ｂコこの発明のＦＲ−９００５２０物質およびＦＲ−
９００５２３物質は、ストレプトミセス・バイグロスコ
ピカス・サブスプ・ヤクシマエンシスＮａ　７２３８の
ようなストレプトミセス属に属するＦＲ−９００５２０
および／またはＦＲ−９００５２３物質−生産菌株を、
培地中で醗酵させることにより生産できる。

象よ句 ＦＲ−９００５２０物質および／またはＦＲ−９００５
２３物質の生産に使用される菌は、ストレプトミセス属
に属するＦＲ−９００５２０および／またはＦＲ−９０
０５２３物質−生産菌株であり、それらのうちストレプ
トミセス・バイグロスコピカス・サプスプ・ヤクシマエ
ンシスＮｏ　７２３８が鹿児島県屋久島で採取された土
壌試料から新たに分離された。

この新たに分離されたストレプトミセス・バイグロスコ
ピカス・サプスプ・ヤクシマエンシス尚７２３８の凍結
乾燥標本は、工業技術院微生物工業技術研究所に寄託番
号微工研菌寄第８０４３号として、１９８５年１月１２
日付で寄託され、次いで１９８５年１０月１９日付で新
しい寄託番号微工研条寄第９２８号として同寄託機関の
ブダペスト条約ルートに切り換えられた。

新規なＦＲ−９００５２０物質およびＦＲ−９００５２
３物質の生産におい−Ｃ１この明細書に記載した菌は単
に説明のためにのみ掲げたものであって、それに限定さ
れるものではない、この発明にはまた、自然突然変異菌
ならびにＸ線照射、紫外線照射、Ｎ−メチル−Ｎ’−二
トローＮ−二トロソグアニジン、２−アミノプリン処理
等のような慣用の処理によってつくられる人工突然変異
菌をも含む、ＦＲ−９００５２０物質および／またはＦ
Ｒ−９００５２３物質を産生できるいかなる突然変異菌
を使用する場合も含まれる。

ストレプトミセス・バイグロスコピカス・サプスプ・ヤ
クシマエンシス＆　７２３８は下記のような形態学的性
質、培養特性、生物学的および生理学的特徴を有する。

［１１形態学的特徴 前述のシル−リングおよびゴツトリープによって記載き
れている方法を主としてこの分類学上の研究に用いた。

形態学的観察は、オートミール寒天、イースト・マルト
エキストラクト寒天および無機塩・スターチ寒天上、３
０℃で１４日間生育させた培養物を用い、光学および電
子顕微鏡により行った。成熟胞子体は幾分短かく、それ
ぞれの鎖に約２０個の胞子を有する錐状（旺見二臼旦■
虹且）およびら旋状（陀に畦閂）を形成していた。吸湿
性の胞子塊がオートミール寒天および無機塩・スターチ
寒天上の気菌糸に見られた。胞子表面の不揃いの凹凸は
非常に短くて太い鯨といぼとの間の中間の形状であった
。

［２コ培養特性 培養特性は、上記シャーリングおよびゴツトリープ、な
らびに前述のワクスマンに記載の１０種類の培地上で観
察した。

３０℃で１４日間培養した。この研究で使用した色名は
前記新色冬枯に基づいた。

オートミール寒天、イースト・マルトエキストラクト寒
天および無機塩・スターチ寒天上で生育させた場合、コ
ロニーは灰色系に属していた。可溶性色素は試験した培
地中では産生されなかった。結果を表４に示す。

表４．菌株Ｎｎ　７２３８、ストレプトミセス轡アンチ
マイコティクス（Ｓｔｒｅ　ｔｏｍ　ｃｅｓ　ａｎｔｉ
ｍｉｃｏｔｉｃｕｓ）ＩＦＯ１２８３９およびストレプ
トミセス・バイグロスコピカス・サブスプ・グレボスス
（Ｓｔｒｅ　ｔｏｍ　ｃｅｓｈ　　ｒｏｓｃｏ　１ｃｕ
ｓ　５ｕｂｓｐ、４）ＵＦＯ１３７８６の培養特性 略号：Ｇ−生育　　Ａ−気菌糸の色、 Ｒ＝表裏面色、　Ｓ−可溶性色素、 細胞壁分析を前述のベラカー等および山口の方法によっ
て行った。菌株Ｎｕ　７２３８の全細胞加水分解物の分
析結果は、ＬＬ−ジアミノピメリン酸の存在を示してい
た。従ってこの菌株の細胞壁はタイプＩに属すると考え
られる。

［３コ生物学的および生理学的性質 菌株Ｎｏ、７２３８の生理学的性質は、前記シャーリン
グおよびゴツトリーブ記載の方法に従って測定した。そ
の結果を表５に示す、生育温度範囲および生育至適温度
は、イースト・マルトエキストラクト寒天上、温度勾配
培養器（東洋化学産業株式会社製）を使用し又測定した
。生育温度範囲は１８〜３６°Ｃで、至適温度は２８℃
であった。スターチ加水分解およびゼラチン液化は陽性
であった。メラニン色素は産生されなかった。

表５．菌株Ｎａ７２３８、ストレプトミセス・アンチマ
イコティクスＩＦＯ１２８３９およびストレプトミセス
・ハイグロスコピ力スーサブスブ嗜グレボススＩＦ０１
３７８６の生理学的性質炭素源の利用性を前述のブリド
ハムおよびゴツトリープの方法によって試験した。生育
状態を３０°Ｃで１４日間培養した後観察した。

この菌株の炭素源利用性を表６にまとめて示す。

Ｄ−グルコース、シュークロース、ラクトース、マルト
ース、Ｄ−トレハロース、イノシトール、イヌリンおよ
びサリシンが菌株Ｎｎ　７２３８により利用された。

表６．ｍ株＆７２３８、ストレプトミセス・アンチマイ
コティクスＩＦＯ１２８３９およびストレプトミセス・
バイグロスコピカス・サプスプ・グレボススＩＦ０１３
７８６の炭素源利用性記号　　十：良く利用する ±：多少利用する −：利用しない 閑株隔７２３８の顕微鏡学的観察および細胞壁組成分析
結果から、この菌株がワクスマンおよびヘンリシ、１９
４３年によるストレプトミセス属に属することが明らか
となった。

従って、この菌株を公表きれた性状［インターナショナ
ル・ジャーナル・オブ・システマテイツク・バクテリオ
ロジ−（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｊｏｕｒｎａｌ
ｏｆ　Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇ
ｙ）　　第１８巻、６９〜１８９頁、２７９〜３９２頁
、１９６８年および第１９巻、３９１〜５１２頁、１９
６９年ならびにパージエイズ・マニュアル・才プ・デタ
ーミネーテイプ・バクテリオロジー第８版、１９７４年
（Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ　Ｍａｎｕａｌ　ｏｆＤｅｔｅｒｍ
ｉｎａｔｉｖｅ　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ　８ｔｈ　
Ｅｄｉｔｉｏｎ。

１９７４）　］に照らして種々のストレプトミセス属に
属する種と比較した。

比較の結果、菌株Ｐ＆１７２３８はストレプトミセス・
アンチマイコティクス・ワクスマン１９５７およびスト
レプトミセス・バイグロスコピカス・サブスブ・ダレボ
ススオオモリ等に類似していると考えられる。従って菌
株ＮＱ７２３８の培養特性を、さらに対応するストレプ
トミセス・アンチマイコティクスＩＦＯ１２８３９およ
びストレプトミセス・バイグロスコピカス・サプスプφ
グレボススＩＦ０１３７８６と、表４．５および６に示
したように比較した。この詳細比較の結果から、菌株Ｎ
ａ　７２３８はストレプトミセス拳アンチマイコティク
スＩＦＯ１２８３９およびストレプトミセス・バイグロ
スコピカス・サブスプ・グレポススＵＦＯ１３７８６と
は下記の点で区別することができた。

菌株ＮＱ　７２３８の培養特性は、ストレプトミセス・
アンチマイコティクスＩＦ０１２８３９とは、イースト
・マルトエキストラクト寒天、グルツース・アスパラギ
ン寒天、グリセリンアスパラギン寒天、ポテト・デキス
トロース寒天およびチロシン寒天を用いて培養したとき
異なる。

炭素源の利用性では、菌株＆　７２３８はマルトースを
利用するが、ストレプトミセス・アンチマイコディクス
ＩＦ０１２８３９は利用しない、さらに、菌株嵐７２３
８はグリセリン、Ｄ−フルクトース、ラムノース、ラフ
ィノース、Ｄ−ガラクトース、Ｄ−マンノース、マンニ
トールおよびコハク酸ナトリウムを利用しないが、スト
レプトミセス・アンチマイコティクスＩＦ０１２８３９
は利用する。

菌株ＮＱ　７２３８の培養特性は、ストレプトミセス・
バイグロスコピカス・サブスプ・ダレボススエ■１３７
８６とは、イースト・マルトエキストラクト寒天、ポテ
ト・デキストロース寒天およびチロシン寒天を用いて培
養したとき異なる。

菌株Ｎｃ　７２３ｇのミルクペプトン化は陰性であるが
、ストレプトミセス−バイグロスコピカス・サプスブ・
グレボススＵＦＯ１３７８６は陽性である。菌株Ｎｏ　
７２３ｇは７％ＮａＣ１の存在下に生育しうるが、スト
レプトミセス・バイグロスコピカス・サブスプ・グレボ
ススＩＦ０１３７８６は同条件下には生育しない。

炭素源の利用性では、菌株Ｎｕ　７２３８はラクトース
、イヌリンおよびサリシンを利用しうるが、ストレプト
ミセス・バイグロスコピカス・サブスプ・グレボススＵ
ＦＯ１３７８６はそれらを利用しない、また、菌株！１
＆１７２３８はグリセリン、Ｄ−キシロース、Ｄ−フル
クトース、ラフィノース、Ｄ−ガラクトース、Ｄ−マン
ノース、マンニトールオヨヒコハク酸ナトリウムを利用
しないが、ストレプトミセス・パイグロスコピカス書す
ブスブ・グレボススＩＦ０１３７８６はそれらを利用す
る。

しかしながら、菌株Ｎｏ、７２３８はオートミール寒天
および無機塩スターチ寒天で気菌糸に吸湿性胞子塊を形
成し、さらに菌株Ｎ１７２３８の形態学的特徴および培
養特性はストレプトミセス・バイグロスコピカス・サブ
スプ・グレボススＩＦＯ１３７８６に類似している。従
って菌株Ｎｏ、７２３８はストレプトミセス・バイグロ
スコピカスに属し、この公知の菌株がストレプトミセス
・バイグロスコピカスの亜種中では菌株Ｎｏ、７２３８
に最も類似しているけれども、菌株ＮＯ７２３８はスト
レプトミセス・バイグロスコピカス・サブスプ・グレポ
ススＵＦＯ１３７８ｆ３とは異なる。

以上の事実から菌株Ｎｏ　７２３８は、ストレプトミセ
ス・バイグロスコピカスの新亜種であると考えられ、微
生物が屋久島の土壌から分離きれたことにちなんで、ス
トレプトミセス・バイグロスコピカス・サブスジ拳ヤク
シマエンシス（兆昼匹恕圧！ｈ゛ｒｏｓｃｏ　１ｃｕｓ
　５ｕｂｓｐ、　ａｋｕｓｈｉｍａｅｎｓｉｓ）と命名
された。

ＦＲ−９００５２０物　およびＦＲ−９００５２３質の
産生この発明の新規なＦＲ−９００５２０物質および／
またはＦＲ−９００５２３物質は、例えばストレプトミ
セス・バイグロスコピカス・サプスプ・ヤクシマエンシ
スＮｏ　７２３８　（寄託番号：微工研条寄第９２８号
）のようなストレプトミセス属に属するＦＲ−９００５
２０および／またはＦＲ−９００５２３物質生産菌株を
培地で培養することにより産生できる。

一般的には、ＦＲ−９００５２０物質および／またはＦ
Ｒ−９００５２３物質は、ＦＲ−９００５２０および／
またはＦＲ−９００５２３物質生産菌株を同化しうるｊ
ｉ２素源および窒素源を含む水性栄養培地中、好ましく
は例えば振とう培養、深部培養等の好気性条件下に培養
することによって産生できる。

培地中の好ましい次素源としては、グルコース、シュー
クロース、ラクトース、グリセリン、スターチ、デキス
トリン等のような炭水化物が挙げられる。その他培地中
に含まれていてもよい次素源としては、マルトース、Ｄ
−トレハロース、イノシトール、イヌリン、サリシン等
が挙げられる。

好ましい窒素源としてはイースト・エキス１−ラクト、
ペプトン、グルテンミール、綿実粉、大豆粉、コーンΦ
ステイープ・リカー、乾燥イースト、小麦胚芽、羽毛粉
、落花生粉等、ならびに例えば硝酸アンモニウム、硫酸
アンモニウム、燐酸アンモニウム等のアンモニウム塩、
尿素、アミノ酸等のような無機または有機窒素化合物が
挙げられる。

戻素源および窒素源は好ましくはそれらの組合■ わせで使用されるが、微量の生育因子および相当量の無
機栄養素を含有していれば純度の低い物質も使用でき、
必ずしも純粋な形で使用する必要はない。所望により培
地に炭酸ナトリウムまたは炭酸カルシウム、燐酸ナトリ
ウムまたは燐酸カリウム、塩化ナトリウムまたは塩化カ
リウム、沃化ナトリウムまたは沃化カリウム、マグネシ
ウム塩、銅塩、コバルト塩等の無機塩を添加してもよい
。

特に培養培地が著しく発泡する場合には、必要により液
状パラフィン、詣肪油、植物油、鉱油またはシリコンの
ような消泡剤を添加してもよい。

ＦＲ−９００５２０物質およびＦＲ−９００５２３物質
を大量生産する条件としては、深部好気培養が好ましい
、少量生産にはフラスコまたはびん中で振とう培養また
は表面培養が行われる。さらにまた、大型タンク内で生
育を実施する場合には、ＦＲ−９００５２０物質および
ＦＲ−９００５２３物質の生産工程における生育遅延を
回避するために、微生物の前培養を用いて生産タンク中
に菌を接種するのが好ましい。すなわら、比較的少量の
培養培地に微生物の胞子または菌糸を接種し、その接種
培地を培養して微生物の前培養接種物をまず生産し、次
いで培養した前培養接種物を無菌的に大型タンクに移す
のが望ましい、この前培養接種物を生産する培地は、Ｆ
Ｒ−９００５２０物質およびＦＲ−９００５２３物質の
生産に使用される培地と実質的に同じであってもよく、
また異なってもよい。

培養混合物の攪拌および通気は種々の方法で行うことが
できる。攪拌はプロペラまたはこれに準ｒる撹拌装置を
用いるか、醗酵器を回転させるかまたは振とうするか、
種々のポンプ装置を用いるか、または培地中に滅菌空気
を通すことによっても行うことができる０通気は滅菌空
気を醗酵混合物中を通過させることにより行ってもよい
。

醗酵は通常、約２０℃〜４０℃の温度範囲、好ましくは
２５〜３５°Ｃで、約５０〜１５０時間行われるが、醗
酵条件および醗酵規模によって適宜変化させればよい。

このようにして生産されたＦＲ−９００５２０物質およ
びＦＲ−９００５２３物質は、他の既知の生物学的活性
物質の回収に通常使用される慣用の方法で培養培地から
回収することができる。生産されたＦＲ−９００５２０
物質およびＦＲ−９００５２５物質は、培養菌糸中およ
び濾液中に見出きれ、従ってＦＲ−９００５２０物質お
よびＦＲ−９００５２３物質は、培養ブロスの濾過また
は遠心分離によって得られる菌糸および濾液から、減圧
濃縮、凍結乾燥、常用の溶媒による抽出、ｐ）ｌＨ１４
整、例えば陰イオン交換樹脂または陽イオン交換！ＩＩ
４詣、非イオン性吸着樹脂等の常用の樹脂による処理、
例えば活性炭、ケイ酸、シリカゲル、セルロース、アル
ミナ等の常用の吸着剤による処理、結晶化、再結晶化等
の慣用の方法によって分離、精製することができる。

特に、ＦＲ−９００５２０物質およびＦＲ−９００５２
３物質は、醗酵によって産生きれた両生酸物を含む物質
を、酢酸エチル、ｎ−ヘキサン等のような適切な溶媒に
溶解し、次いでその溶液をクロマトグラフィー、例えば
、シリカゲルを使用するカラムクロマトグラフィーに付
し、酢酸エチルおよびｎ　−ヘキサン、またはそれらの
混合物のような適切な溶媒で溶出することにより分離す
ることができる。また、このようにして分離されたＦＲ
−９００５２０物質およびＦＲ−９００５２３物質はそ
れぞれ、例えば再結晶、再クロマトグラフィー、高速液
体クロマトグラフィー等の常法によってさらに精製する
ことができる。

（１）形状および色ｙ４＝ 無色の板状結晶 （２）元素分析値： Ｃ：　　６４．８１％、　）ｌ　：　８．８２％、　Ｎ
　：　１．５５％（３）呈色反応： 陽性：硫酸セリウム反応、硫酸反応、エールリッヒ反応
、ドラーゲンドルフ反応、沃素蒸気反応 陰性：塩化第二鉄反応、ニンヒドリン反応、モーリッシ
ュ反応 （４）溶解性： 可溶：メタノール、エタノール、アセトン、酢酸エチル
、りｒＪ　Ｏホルム、シュデルエーテル、ベンゼン 難溶：ｎ〜ヘキサン、石油エーテル 不溶：水 （５）融点： １６３〜１６５℃ （６）比旋光度： ２３゜ ［α］Ｄ　・　−８４，１＠（Ｃ＝　１．０．　ＣＨＣ
ｌ３）（７）紫外線吸収スペクトル： 末端吸収 （８）赤外線吸収スペクトルニ ジＣＨＣｌ３：　３６８０．３５７５．３５２０．２９
４０．２８７５゜ａｘ ２８２５、１７４５．１７２５．１７００．１６４７゜
１６１０（ｓｈ）、　１４５２．１３８０．１３５０゜
１３３０、１２８５．１１７０．１１３５．１０９０゜
１０３０、１００５．９９０．　９８０（ｓｈ）。

１６８．８５　（ｓ）　　　１６５．９７　（ｓ＞　　
　１３９．５３　（ｓ）上記スペクトルのチャートを図
７に示す。

（１０）ｌＨ核磁気共鳴スペクトル： 上記スペクトルのチャートを図８に示す。

（１１）薄層クロマトグラフィｍ： （１２）物質の性質： 中性物質 ＦＲ−９００５２０物質に関して、１３Ｃおよび１Ｈ核
磁気共鳴スペクトルの測定の際、この物質は種々の化学
ンブトにそれぞれ１対のシグナルを示すが、薄層クロマ
トグラフィーおよび高速液体クロマトグラフィーを測定
したところ、ＦＲ−９００５２０物質は薄層クロマトグ
ラフィーで単一スポットを、高速液体クロマトグラフィ
ーで単一ピークをそれぞれ示した。

Ｌ２物理化学的性質およびＦＲ−９００５０６物質の化
学構造が決定きれたことにより、ＦＲ−９００５２０物
質は下記の化学構造を有することが判明した。

１７−エテル−１，１４−ジヒドロキシ−１２−［２−
（４−ヒドロキシ−３−メトキシシクロへキシル）−１
−メチルビニル］−２３，２５−ジメトキシ−１３，１
９，２１，２７−チトラメテルー１１゜２Ｂ−ジオキサ
−４−アザトリシクロ［２２，３。

、０４．９コ才クタフス−１８−エン−２，３゜１０、
１６−チトラオン 門世躍ｌ　　　　　　　　　　　　　（（１）形状およ
び色ｕ４： 無色の針状結晶 （２）元素分析値： Ｃ：６４．５７％、）ｌ：８．８４％、Ｎ：１．８１％
（３）呈色反応： 陽性二硫酸セリウム反応、硫酸反応、エールリッヒ反応
、ドラーゲンドルブ反応、沃素蒸気反応 陰性：酸化第二鉄反応、ニンヒドリン反応（４）溶解性
： 可溶：メタノール、エタノール、アセトン、酢酸エチル
、クロロホルム、ジエチルエーテル、ベンゼン 難溶：ｎ−ヘキサン、石油エーテル 不ｍ：水 （５〉融点： １５２〜１５４℃ （６）比旋光度： ［αコ２３ニー７３．０’　　　（Ｃ＝０．６５．　　
ＣＨＣｌ３）（７）紫外線吸収スペクトル： 末端吸収 （８）赤外線吸収スペクトル： ＣＩ（Ｃ１ ｖｌ、１１１ｘ３：　３６７０．３５８０．３５１０．
２９３０．２８７５゜２ｇ２５．１７４５．１７２２．
１７００．１６４７゜１４５０、１３８０．１３５Ｇ、
　１３３０．１３０７゜１２８５、１１７０．１１３５
．１Ｇ９０．１０５０゜１０３０、１０００．９９０．
９７８．９６０゜９３０、９１５．８８８．８７０．８
５０　ｃｍ−’（９）１３Ｃ核磁気共鳴スペクトル： （９°６４　（Ｑ） １０．０４　（ｑ） 上記スペクトルのチャートを図９に示す。

（１０）ｌＨ核磁気共鳴スペクトル： 上記スペクトルのチャートを図１０に示す。

（以下余白） （１１）薄層クロマトグラフイｍ： （１２）物質の性質： 中性物質 ＦＲ−９００５２３物質に関して、１３Ｃおよび１Ｈ核
磁気共鳴スペクトルの測定の際に、この物質は種々の化
学シフトにそれぞれ１対のシグナルを示すが、薄層クロ
マトグラフィーおよび高速液体クロマトグラフィーの測
定の場合には、ＦＲ−９００５２３物質はそれぞれ薄層
クロマトグラフィーで単一スポットを、高速液体りａマ
ドグラフィーで単一ピークを示した。

上記物理化学的性質およびＦＲ−９００５０６物質の化
学構造が決定されたことにより、ＦＲ−９００５２３物
質は下記の化学構造を有することが判明した。

１．１４−ジヒドロキシ−１２−［２−（４−ヒドロキ
シ−３−メトキシシクロヘキシル）−１−メチルビニル
］−２３，２５−ジメトキシ−１３、１７，１９，２１
，２７−ベンタメデルー１１．２８−ジオキサ−４−ア
ザトリシクロ［２２，３、１。

０４．９］才クタコス−１８−エン−２、３，１０゜１
６−チトラオン ［Ｉ［］魚ス迭： （１）製造法１：（ヒドロキシ保護基の導入）化合物（
Ｉｂ）またはその塩は、化合物（Ｉａ）またはその塩に
ヒドロキシ保護基を導入することによって製造できる。

この反応において使われるヒドロキシ保護基の導入剤と
しては慣用のもの、例えばジメチルスルホキシド、エチ
ルメチルスルホキシド、プロピルメチルスルホキシド、
イソプロピルメチルスルホキシド、ブチルメチルスルホ
キシド、イソブチルメチルスルホキシド、ヘキシルメチ
ルスルホキシド等の低級アルキルメチルスルホキシドの
ようなジ（低級）アルキルスルホキシド；例えば塩化ト
リメチルシリル、臭化トリニブルシリル、塩化トリブチ
ルシリル、塩化ｔ−ブチルジメチルシリル等のトリ（低
級）アルキルシリルハロゲン化物、例えば塩化メチル−
ジフェニルシリル、臭化エチル−ジフェニルシリル、塩
化プロピル−ジトリルシリル、塩化ｔ−ブチル−ジフェ
ニルシリル等の低級アルキル−ジアリールシリルハロゲ
ン化物のような三置換シリル化合物；前記アシル基を導
入することのできるカルボン酸、スルホン酸および、例
えば酸ハロゲン化物、酸無水物、活性アミド、活性エス
テルなどのこれらの反応性誘導体のようなアシル化剤等
を挙げることができる。このような反応性誘導体の適切
な例としては、酸塩化物、酸臭化物、例えばジアルキル
燐酸、フェニル燐酸、ジフェニル燐酸、ジベンジル燐酸
、ハロゲン化燐酸等の置換燐酸、ジアルキル亜燐酸、亜
硫酸、チオ硫酸、硫酸、例えば炭酸メチル、炭酸エチル
、炭酸プロピル等のアルキル炭酸エステル、例えばピバ
リン酸、ペンタン酸、イソペ’ｙ−１）ン酸、２−エチ
ルブチル酸、トリクロロ酢酸、トリクロロ酢酸等の脂肪
族カルボン酸、例えば安息香酸等の芳香族カルボン酸の
ような酸との混合酸無水物、対称型酸無水物、イミダゾ
ール、４−置換イミダゾール、ジメチルピラゾール、ト
リアゾール、テトラゾールのようなイミノ基を含有する
複素環式化合物との活性酸アミド、例えばｐ−二トロフ
ェニルエステル、２．４−’；ニトロフェニールエステ
ル、トリクロロブエニルエステル、ペンタクロロフェニ
ルエステル、メシルフェニルエステル、フェニルアゾフ
ェニルエステル、フェニルチオエステル、ｐ−ニトロフ
ェニルチオエステル、ｐ−タレジルチオエステル、カル
ボキシメデルチオエステル、ピリジルエステル、ピペリ
ジルエステル、８−キノリルチオエステルまたはＮ。

Ｎ−ジメチルヒドロキシルアミン、１−ヒドロキシ−２
−（ＩＨ）−ピリドン、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド
、Ｎ−ヒドロキシフタルイミド、１−ヒドロキシベンゾ
トリアゾール、１−ヒドロキシ−６−クロロベンゾトリ
アゾールのようなＮ−ヒドロキシ化合物とのエステル等
の活性エステル等が挙げられる。

この反応において、ジ（低級）アルキルスルホキシドが
ヒドロキシ保護基の導入剤として使用される場合、反応
は、通常無水酢酸のような無水低級アルカン酸の存在下
に行われる。　　　　　　　　　　　１きらに、三置換
シリル化合物がヒドロキシ保護基の導入剤として使用さ
れる場合、反応は、イミダゾール等のような慣用の縮合
剤の存在下に行うことが好ましい。

さらには、アシル化剤がヒドロキシ保護基の導入剤とし
て使用される場合、反応は、例えばリチウム、ナ！・リ
ウム、カリウム等のアルカリ金属、例えばカルシウム等
のアルカリ土金属、例えば水素化ナトリウム等のアルカ
リ金属水素化物、例えば水素化カルシウム等のアルカリ
土金属水素化物、例えば水酸化ナトリウム、水酸化カリ
ウム等のアルカリ金属水酸化物、例えば炭酸ナトリウム
、炭酸カリウム等のアルカリ金属炭酸塩、例えば炭酸水
素ナトリウム、炭酸水素カリウム等のアルカリ金属炭酸
水素塩、例えばナトリウムメトキシド、ナトリウムエト
キシド、カリウムｔ−ブトキシド等のアルカリ金属アル
コキシド、例えば酢酸ナトリウム等のアルカリ金属アル
カン酸、例えばトリエチルアミン等のトリアルキルアミ
ン、例えばピリジン、ルチジン、ピコリン、４−Ｎ、Ｎ
−ジメチルアミノピリジン等のピリジン化合物、キノリ
ンのような有機または無機塩基の存在下に行うのが好ま
しい。

この反応において、アシル化剤が遊離の酸またはその塩
の形で使用する場合、反応は、例えばＮ、Ｎ’−ジシク
ロへキシルカルボジイミド、Ｎ−シクロへキシル−Ｎ’
　−（４−ジエチルアミノシクロヘキシル）カルボジイ
ミド、Ｎ、Ｎ’　−ジエチルカルボジイミド、Ｎ、Ｎ’
　−ジイソプロピルカルボジイミド、Ｎ−エチル−Ｎ’
−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド等の
カルボジイミド化合物、例えばＮ、Ｎ’　−カルボニル
ビス（２−メチルイミダゾール）、ペンタメチレンケテ
ン−Ｎ−シクロヘキシルイミン、ジフェニルケテン−Ｎ
−シクロヘキシルイミン等のケテンイミン化合物、例え
ばエトキシアセチレン、β−シクロビニルエチルエーテ
ル等のオレフィンまたはアセチレン系エーテル化合物、
例えハ１−　（４−’７０ロベンゼンスルホニル才キシ
）−６−１０ローＩＨ−ベンゾトリアゾール等のＮ−ヒ
ドロキシベンゾトリアゾール誘導体のスルホン酸エステ
ル等の慣用の縮合剤の存在下に行うことが好ましい。

反応は、通常、水、アセトン、ジクロロメタン、例えば
メタノール、エタノール等のアルコーノ呟テトラヒドロ
フラン、ピリジン、Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムアミド等ま
たはこれらの混合溶媒のようなこの反応に悪影響を与え
ない慣用の溶媒中で行われ、さらに、塩基またはヒドロ
キシ保護基の導入剤が液体の場合は、これらも溶媒とし
て使用することができる。

反応温度は特に限定されず、通常冷却下ないし加熱下で
行われる。

この反応において、化合物（Ｉａ）のＲ２で示されるヒ
ドロキシ基が保護されたヒドロキシ基に転換することも
あり、このような場合もこの製造法に包含される。

さらに、この反応において、無水低級アルカン酸の存在
下ジ（低級）アルキルスルホキシドをヒドロキシ保護基
導入剤として使用する際、ある）で示される部分構造を
有する化合物（Ｉａ）ドロキシである）で示される部分
構造を有する目的化合物（Ｉｂ）を得ることがあり、こ
のような場合も、この製造法の範囲に包含される。

（２）製造法２：（ヒドロキシ保護基の導入）化合物（
Ｉｄ）またはその塩は、化合物（ｒ　ｃ）またはその塩
にヒドロキシ保護基を導入することによって製造できる
。

この反応は、製造法１と実質的に同様の方法で行う２と
ができ、従って、例えば塩基、縮合剤、溶媒、反応温度
等の反応条件は、製造法１を援用できる。

この反応において、化合物（Ｉｃ）のＲ１におけるヒド
ロキシ基が目的化合物（Ｉｄ＞では対応する保護された
ヒドロキシ基へ転換することがあり、このような場合も
、この製造法の範囲に包含される。

（３）製造法３：（二重結合の形成） 化合物（Ｉｆ）またはその塩は、化合物（Ｉｅ）または
その塩に塩基を反応させることによって製造できる。

この反応で使用きれる塩基としては、製造法１で例示し
た塩基をそのまま挙げることができる。

この反応は、また、Ｒ２がヒドロキシである化合物（Ｉ
ｅ）またはその塩に、塩基の存在下アシル化剤と反応さ
せることによっても製造できる。

この反応は、水、アセトン、ジクロロメタン、例えばメ
タノール、エタノール、プロパツール等のアルコール、
テトラヒドロフラン、ピリジン、Ｎ、Ｎ　　’、；メチ
ルホルムアミド等またはその混合溶媒のようなこの反応
に悪影響を与えない慣用の溶媒中で行われ、さらに、塩
基が液体である場合には、これらも溶媒として使用する
ことができる。

反応温度は特に限定されず、通常冷却下ないし加熱下で
行われる。

（４〉製造法４：（ヒドロキシエチレン基の酸化）化合
物（Ｉｈ）またはその塩は、化合物（Ｉｇ）またはその
塩を酸化することによって製造できる。

この反応で使用される酸化剤としては、製造法１で示し
たようなジ（低級）アルキルスルホキシドを挙げること
ができる。

この反応は、通常無水酢酸のような無水低級アルカン酸
の存在下に、アセトン、ジクロロメタン、酢酸エチル、
テトラヒドロフラン、ピリジン、Ｎ、Ｎ−ジメチルホル
ムアミド等またはその混合溶媒のようなこの反応に悪影
響を与えない慣用の溶媒中で行われ、きらに、無水低級
アルカン酸が液体の場合には、これらも溶媒として使用
することができる。

反応温度は特に限定されず、通常冷却下ないし加熱下で
行われる。

この製造法は、反応の途中で、原料化合物（１ｇ）のＲ
１で示されるヒドロキシ基が目的化合物（Ｉ　ｈ）にお
いて１−（低級アルキルチオ）（低級）アルコキシ基へ
転換することがあり、このような場合もこの製造法の範
囲内に包含される。

（５）製造法５：（アリル基の還元） 化合物（Ｉｊ）またはその塩は、化合物（Ｉｉ）または
その塩を還元することによって製造できる。

この製造法における還元は、接触還元等のようなアリル
基をプロピル基に還元できる常法によって行うことがで
きる。

接触還元で使用される触媒としては、例えば白金板、白
金海綿、白金黒、コロイド白金、酸化白金、白金線等の
白金触媒、例えばパラジウム海綿、パラジウム黒、酸化
パラジウム、パラジウム・炭素、コロイドパラジウム、
パラジウム・硫酸バリウム、パラジウム・炭酸バリウム
等のパラジウム触媒、例えば還元ニッケル、酸化ニッケ
ル、ラネーニッケル等のニッケル触媒、例えば還元コバ
ルト、ラネーコバルト等のコバルト触媒、例えば還元鉄
、ラネー鉄等の鉄触媒、例えば還元銅、ラネー銅、ウル
マン鋼等の銅触媒等のような慣用のものが挙げられる。

この還元は、通常、水、メタノール、エタノール、プロ
パツール、ピリジン、酢酸エチル、Ｎ。

Ｎ−ジメチルホルムアミド、ジクロロエタンまたはその
混合溶媒のようなこの反応に悪影響を与えない慣用の溶
媒中で行われる。

この還元の反応温度は特に限定されず、通常冷却下ない
し加温下の範囲で行われる。

上記に説明した製造法１〜５によって得られるトリシク
ロ化合物（Ｉ）は、例えば抽出、沈澱、分別結晶化、再
結晶化、クロマトグラフィ等の常法により単離、精製で
きる。

化合物（Ｉ）および（Ｉａ）〜（ｌにおける塩としては
、無毒の、医薬として許容される慣用の塩であり、例え
ばナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩、例え
ばカルシウム塩、マグネシウム塩等のアルカリ土金属塩
、アンモニウム塩、例えばトリエチルアミン塩、Ｎ−ベ
ンジル−Ｎ−メチルアミン塩等のアミン塩のような無機
または有機塩基との塩が挙げられる。

前記の製造法１〜５の反応またはその反応混合物の後処
理中において、出発化合物および目的化合物のフンホー
マーおよび不斉次素原子または二重結合による立体異性
体が、他のフンホーマーおよび立体異性体に転換される
ことがあり、このような場合もこの発明の範囲に包含き
れる。

この発明のトリシクロ化合物（Ｉ）は、免疫抑制作用、
抗菌作用等のような薬理作用を有し、従って、心臓、腎
臓、肝臓、骨髄、皮膚等の臓器あるいは組織の移植に対
する拒絶反応、骨髄移植によって起る移植片対宿主反応
、慢性関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、橋本甲
状腺炎、多発性硬化症、重症筋無力症、Ｉ型糖尿病、ブ
ドウ膜炎等の自己免疫疾患、病原菌によって起る感染症
等の治療および手助に有用である。

このような薬理作用を有することを示すため、トリシク
ロ化合物（１）の薬理試験データを以下に示す。

区勝ユ 試験管内混合リンパ球反応（ＭＬＲ）におけるトリシク
ロ化合物（１）の抑制効果 各ウェルにＣ５７ＢＬ／６応答細胞（Ｈ−２ｂ＞　５　
Ｘ　１０５個と、マイトマイシンＣ処理（マイトマイシ
ンＣ２５５ｇ／ｍｅで３７℃で３０分間処理しＲＰＭ１
１６４０培地で３回洗浄すル）　１．、　タＢＡ１．Ｂ
／Ｃ刺激細Ｊ］ｆｉ（Ｈ−２ｄ）　５　Ｘ　１０５ｍ　
ヲ０．２ｍｌの１０％牛脂仔血清加ＲＰＭ１１６４０培
地［炭酸水素ナトリウム２ｍＭ、ペニシリン（５０単位
／ｆｆ１ｌｌ）およびストレプトマイシン（５０［／ｆ
ｌ１Ｍ　）を添加コに加えたマイクロタイタープレート
中でＭＬＲ試験、を行う。

湿度１００％、二酸化炭素５％、空気９５％に保った培
養器内で、３７℃で、６８時間、細胞を培養し、４時間
３Ｈ−チミジ’、（０，５μＣｉ）でパルスして、細胞
を集める。この発明の目的化合物をエタノールに溶解し
、ＲＰＭ１１６４０培地に希釈し、培養物に添加し最終
濃度を０．１８！／ＩＩＩＱ以下になるようにする。

結果を表７〜１０に示す、この発明のトリシクロ化合物
は、マウスＭＬＲを抑制した。

（以内余白ン に艶１ トリシクロ化合物（１）の抗菌活性 各種真菌に対するトリシクロ化合物（りの抗菌活性を、
サブロー寒天中、寒天倍々希釈法によって測定した。３
０℃で２４時間培養した後、最小発育阻止濃度（ＭＩＣ
）を（／戚で表わす。

この発明のトリシクロ化合物は、真菌、例えばアスペル
ギルス・フミガーツスＩＦＯ５８４０およびフサリウム
・オキシスボルムＩＦＯ５９４２に対して、表１１およ
び１２に記載するような抗菌活性を示した。

表ｕニトリシクロ化合物（Ｉ＞のアスペルギルス・フミ
ガーツスＩＦＯ５８４０に対するＭＩＣ値（肩／−）表
１２ニトリシクロ化合物（Ｉ）のフサリウム・オキシス
ポルムに対するＭＩＣ値（に／誠）ラットにおける同種
皮膚移植片生存に対するトリシクロ化合物（Ｉ）の効果 ドナー（フィッシャー）ラットの腹部皮膚移植片を、レ
シピエンド（ＷＫＡ　’）ラットの外側胸部に移植する
。５８目に包帯を除去する。移植片上皮の９０％以上が
壊死する拒絶反応があるまで、移植片を毎日検査する。

ＦＲ−９００５０６物質をオリーブ油に溶解し、移植日
より毎日１４日間連続筋肉内投与する。

表１３に示すように、オリーブ油を１４日間連続筋肉内
投与したラットにおいて、皮膚同種移植片は８日以内に
すべて拒絶されるが、ＦＲ−９００５０６物質で毎日処
置したものは、皮膚同種移植片生存が明らかに延長した
。

表１３　、　ＦＲ−９００５０６物質の同種皮膚移植片
生存に対する効果 １０　　５　５６．６１．８２．８５．８９ラツトにお
ける■型コラーゲン誘発関節炎に対するトリシクロ化合
物（Ｉ）の効果 コラーゲンを２ｍｇ／ＩＱの濃度になるよう冷０．０１
Ｍ酢酸に溶解する。溶液を等容量の不完全フロインドア
ジュバント中で乳化する。総量ｏ、　５ｎｔｉのこの乳
化物を雌性ルイス系ラットの背中の数ケ所と尾の１．２
ケ所に皮内注射する。　ＦＲ−９００５０６物質をオリ
ーブ油に溶解し、経口投与する。同量の■型コラーゲン
で免疫した対照ラットには、オリーブ油のみを経口投与
する。関節炎の発現率を観察する。

試験結果を表１４に示す。■型コラーゲン免疫化と同し
日から１４日間オリーブ油で処理したラット全てに、関
節炎が誘発された。

ＦＲ−９００５０６物質を１４日間毎日投与すると、３
週間の観察期間中、関節炎の誘発を完全に抑制した。

表１４＝ラットにおけるフラーゲン誘発関節炎に対する
ＦＲ−９００５０６物質の効果 投与量（ｍｇ／ｋｇ／日）　関節炎の発現率ＳＪＬ／Ｊ
系マウスにおける実験的アレルギー性脳を髄炎（ＥＡＥ
）に対するトリシクロ化合物（１）の効果 ＳＪＬ／Ｊ系マウスよりを髄ホモジネートをｍ＊す　　
　　　　　　する、を髄を通気法で取り出し、約等容量
の水と混合し、４℃でホモジネートする０等容量のこの
冷水モジネート（１０ｍｇ／ｉｌｌ　）をマイフバクテ
リウム・ラベルクローシスＨ３７ＲＡ　Ｏ，６ｍｇ／−
を含有する完全フロインドアジュバント（ＣＦＡ　）で
乳化する。ＳＪＬ／Ｊ系マウスに、を髄−ＣＦＡエマル
ジョン０．２ｆｆｉＱを、０８目と１３日口の二回注入
し、ＥＡＥを誘発させる。この試験に使用した全マウス
について、ＥＡＥの臨床的徴候を毎日評価、判定する。

ＥＡＥの程度は、下記の判定基準によった。グレード１
：尾緊張低下、グレード２：ぎこちない歩行、グレード
３：１本以上の四肢の脱力、グレード４：対麻痺または
対麻痺。

ＦＲ−９００５０６物質をオリーブ油に溶解し、０日日
（初回免疫の日）より１９日間経口投与する０表１５に
示すように、ＦＲ−９００５０６物質は、ＥＡＨの徴候
の出現を明らかに阻止した。

表１５　：　ＳＪＬ／Ｊ系マウスにおける実験的アレル
ギー性脳を髄炎に対するＦＲ−９００５０６物質の効果
マウスにおける局所的移植片対宿主反応（ＧｖＨＲ）に
対するトリシクロ化合物（１）の効果Ｃ５７ＢＬ／６　
）？ナー、ｋ　’）得り生牌細胞（Ｉ　Ｘ１０７個）を
、ＢＤＦ工糸マウスの右後肢足蹟に皮下注射する。

７日後にマウスを層殺し、右（注射した足）および左（
注射していない足）両あの原素リンパ節（ＰＬＮ）の重
量を測る。ＧｖＨＲを左右ＰＬＮの重量差で表わす。

ＦＲ−９００５０６物質をオリーブ油に溶解し、感作臼
より５日間経口投与する。

ＦＲ−９００５０６物質の局所的移植片対宿主反応抑制
のＥＤ５−は、１９ｍｇ／ｋｇ−ｃある。

に験ｌ トリシクロ化合物（Ｉ）の急性毒性 ｄｄｙマウスにおける腹腔内投与によるＦＲ−９００５
０６、ＦＲ−９００５２０、ＦＲ−９００５２３、ＦＲ
−９００５２５物質の急性毒性に関する試験を行い、い
ずれの場合にも投与量１００ｍｇ／ｋｇで死亡は観察さ
れなかった。

この発明の医薬組成物は、外用、内服または非経口投与
に適した有機または無機の担体もしくは賦形剤と混合し
て、この発明のトリシクロ化合物（Ｉ）を有効成分とし
て含有する、例えば固体状、半固体状もしくは液状の医
薬製剤の形で使用することができる。有効成分は、錠剤
、ペレット剤、カプセル剤、半割、液剤、エマルジョン
、懸濁液およびその他の適切な形で使用でき、例えば、
通常の無毒で、医薬として許容される担体と混合しても
よい、使用し得る担体は、水、グルコース、ラクトース
、アカシアフ゛ム、ゼラチン、マンニトーノ呟でん粉ペ
ースト、三ケイ酸マグネシウム、タルク、コーンスター
チ、ケラチン、コロイドシリカ、バレイショでん粉、尿
素、および他の固体状、半固体状または液状の製剤を製
造するのに適した担体であり、さらに、賦形剤、安定化
剤、粘稠化剤、着色剤、香料を使用してもよい。

目的化合物は、疾患の経過または状態により、所望の効
果を発揮するのに十分な量が医薬製剤中に含有される。

この医薬組成物をヒトに用いる場合は、非経口投与ある
いは内服で使用することが好ましい。

トリシクロ化合物（１）の治療有効量は、治療する患者
側々の年齢および疾病の程度により変化するが、通常、
有効成分１日約０．０１〜１０００ｍｇ、好ましくは０
．１〜５００ｍｇ、さらに好ましくは０．５〜１００ｍ
ｇが疾患の治療に用いられ、一般に１回平均約０．５ｍ
ｇ。

１ｍｇ、　５ｍｇ、　１０ｍｇ、　５０ｍｇ、　１００
ｍｇ、　２５０ｍｇ、　５００ｎ＠が投与される。

以下、実施例に従って、この発明を説明する。

以下に示す平板希釈法を用いてストレプトミセス・ツタ
バエンシスＮｏ　９９９３を分離した。

茨城県筑波郡豊里町で採取した約１グラムの土壌を無菌
試験管に入れ、滅菌水を加え、容量５ｍ１ｌとする。混
合物をチューブブザーで１０秒間混合し、１０分間放置
する。上澄液を滅菌水で順次１００倍希釈する。希釈液
（ｏ、　ｔｍｎ　）を塩酸チアミン添加スザペツク寒天
（サッカロース３０ｇ、硝酸ナトリウム３ｇ１リン酸二
力リウム１ｇ１硫酸マグネシウム０．５ｇ、塩化カリウ
ム０．５＆、硫酸第１鉄０゜０１ｇ１塩酸チアミン０．
１ｇ、寒天２０ｇ１水道水１００１００Ｏ；　ｐＨ７，
２）を含有するペトリ皿上に広げる。３０℃で２１日間
インキュベートし、プレート上に生育させたコロニーを
斜面培地［酵母−麦芽エキス寒天（ＩＳＰ培地２）］に
移し、３０℃で１０日間培養する。分離したコロニーの
中にストレプトミセス・ツクバエンシスＮｃ　９９９３
を見い出した。

逸菫 グリセリン（１％）、可溶性でん粉（１％）、グルコー
ス（０，５％）、綿実粉（０，５％）、乾燥酵母（０，
５％）、コーンスターブリ力−（０，５％）、炭酸カル
シウム（０，２％）を含有する培地（１６０ｍＱ　）　
（ｐＨ６，５に調りを、各４５００ｍＱのエルレンマイ
ヤーフラスコ２０個に入れ、１２０℃で３０分間滅菌す
る。ストレプトミセス・ツタバエンシスＮ１１９９９３
（寄託番号：微工研条寄第９２７号）の斜面培養物の１
白金耳を各培地に接種し、回転振盪機上、３００Ｃで４
日間培養する。得られる培養物を、あらかじめ１２０℃
で２０分間滅菌した２００リツトルのジャーファーメン
タ−に入れた可溶性でん粉（４，５％）、コーンスター
プリ力−（１％）、乾燥酵母（１％）、炭酸カルシウム
（０，１％）、アデカノール（消泡剤、商品名、旭電化
製）（０，１％）を含有する培地（１５０リツトル）に
接種し、３０℃で、通気（１５０リットル／分）、攪拌
（２５０ｒｐｍ）下に４日間培養する。

！１ノｂ口り仇量 このようにして得られる培養プロスをケイソウ±（５ｋ
ｇ）を用いて濾過する。菌糸体の塊をメタノール（５０
リツトル）で抽出し、抽出液５０リツトルを得る。菌糸
体より得られるメタノール抽出液と濾液とを合わせ、非
イオン性吸着樹脂ｒダイアイオンＨＰ−２０，（商品名
、三菱化成社製）（１０リツトル）のカラムに通す、水
（３０リツトル）および水性メタノール（３０リツトル
）で洗浄した後、メタノールで溶出する。溶出液を減圧
下に蒸発させ、残量を２リツトルとする。これを酢酸エ
チル（２リツトル）で抽出する。酢酸エチル抽出液を減
圧濃縮し、油性残留物を得る。油性残留物を二倍重量の
酸性シリカゲル（特殊シリカゲル、グレード＝１２、富
士デビノン製）と混合し、この混合物を酢酸エチル中で
スラリー化する。溶媒を留去後、得られる乾燥粉末を、
ｎ−ヘキサンで上記と同じ酸性シリカゲル（８００ｍｍ
　）を充填したカラムを用いるクロマトグラフィに付す
、カラムをｎ　−ヘキサン（３リツトル）、ｎ−ヘキサ
ンと酢酸エチルの混合物（９：　ｌｖ／ｖ、　３リット
ル；４：１ｖ／ｖ、　３リツトル）および酢酸エチル（
３リツトル）で展開する。目的化合物を含む画分を集め
、減圧濃縮して、油性残留物を得る。油性残留物をｎ−
−＼キサンと酢酸エチルとの混合物（１：１ｖ／ｖ、３
ＱｍＱ　）に溶解し、同じ溶媒系でシリカゲル（２３０
〜４００メソシユ、メルク社製）　（ｓｏｏｍｉ　）を
充填したカラムを用いるクロマトグラフィに付す。

ｎ−ヘキサンと酢酸エチルとの混合物（１：１ｖ／ｖ、
２リットル；↓：２ｖ／ｖ、１．５リツトル）で溶出す
る。最初の目的化合物を含む画分を集め、減圧濃縮し、
黄色の油状物を得る。この油性残留物を二倍重量の酸性
シリカゲルと混合し、この混合物を酢酸エチル中でスラ
リー化する０Ｉ媒を留去後、得られる乾燥粉末をｎ−ヘ
キサンで酸性シリカゲルを充填したカラムにか（す、ｎ
−ヘキサンで展開する。目的化合物を含む両分を集め、
減圧濃縮し、粗ＦＲ−９００５０６物質（１０５４ｍｇ
　）を白色の粉末として得る。

この粗生成物１００ｍｇを高速液体クロマトグラフィに
付す、リクロソルブ（Ｌｉｃｈｒｏｓｏｒｂ　）　５Ｉ
　　６０（商品名、メルク社製）を担体とするカラム（
８φｘ　５００ｍｍ　）を用いて溶出する。このクロマ
トグラブイは、Ｕｖ検出器で波長２３０ｎｍにてモニタ
ーし、移動相は塩化メチレン−ジオキサン混液（８５：
１５ｖ／ｖ）を流速５絨／分で用い、活性画分を集め、
蒸発濃縮する。この高速液体クロマトグラフィを繰り返
して、精製ＦＲ−９００５０６物質１４ｍｇを白色の粉
末として得る。

さらに、酢酸エチル（１，５リツトル）で溶出を続けて
行い、第二の目的化合物を含む画分を集め、減圧濃縮し
て、粗ＦＲ−９００５２５物質（３０ｒｎｇ）を黄色の
油状物として得る。

犬菖輿１ 逸酸 グリセリン（１％）、コーンスターチ（１％）、グルコ
ース（０，５％）、綿実粉（１％）、コーンスターブリ
カー（０，５％）、乾燥酵母（０，５％）、炭酸カルシ
ウム（０，２％）を含有するｐＨ６，５の前培養培地（
１００ＩＩＱ　）を５００−のエルレンマイヤーフラス
コに入れ、１２０℃で３０分間滅菌する。

ストレプトミセス・ツタバエンシスＮｃｉ９９９３の斜
面培養物の１白金耳を培地に接種し、３０℃で４日間培
養する。得られる培養物を、あらかじめ１２０℃で３０
分間滅菌した３０リツトルのジャーファーメンタ−中の
前培養培地（２０リツトル）に移す、培養物を３０℃で
２日間インキュベートして、前培養物１６リツトルを、
あらかじめ１２０℃で３０分間滅菌した２トンタンクに
入れた可溶性でん粉（４，５％）、コーンスタープリカ
ー（１％）、乾燥酵母（１％）、炭酸カルシウム（０，
１％）、アデカノール（消泡剤、商品名、旭電化製）（
０，１％）を含有するｐＨ６，８の睨酵培地（１６００
リツトル）に接種し、３０℃で４日間培養する。

！簾上主旦■１ このようにして得られる培萎ブロスを、ケイソウ±（２
５ｋｇ　）を用いて濾過する。菌糸体の塊をアセトン（
５００リツトル）で抽出し、抽出液５００リツトルを得
る。このアセトン抽出液と濾液（１３５０リツトル）と
を合わゼ、非イオン性吸着樹脂「ダイアイオンＨＰ−２
０Ｊ（商品名、三菱化成社製）（１００リツトル）のカ
ラムに通す、水（３００リツトル）および５０％水性ア
セトン（３００リツトル）で洗浄した後、７５％水性ア
セトンで溶出する。溶出液を減圧下に蒸発させ、残量を
３００リツトルとする。

これを酢酸エチル（２０リツトル）で３回抽出する。

酢酸エチル抽出液を減圧濃縮し、油性残留物を得る。こ
の油性残留物を二倍重量の酸性シリカゲル（特殊シリカ
ゲル、グレード１２、富士デビノン製）と混合し、この
混合物を酢酸エチル中でスラリー化する。溶媒を蒸発許
せ、得られる乾燥粉末を、ｎ−ヘキサンで上記と同じ雌
性シリカゲル（８リツトル）を充填したカラムクロマト
グラフィに付す、カラムをｎ−ヘキサン（３０リツトル
）、ｎ−へギサンー酢酸エチル混液（４：　ｌｖ／ｖ、
　３０リツトル）、酢酸エチル（３０リツトル）で展開
する。

目的化合物を含む画分を集め、減圧濃縮して油性残留物
を得る。この油性残留物を二倍重量の酸性シリカゲルと
混合し、混合物を酢酸エチル中でスラリー化する。溶媒
の留去後、得られる粉末を、ｎ−ヘキサンで充填した酸
性シリカゲル（３，５リツトル）のカラムを用いるクロ
マトグラフィに再度付す、カラムをｎ−ヘキサン（１０
リツトル）、ｎ−ヘキサン−酢酸エチル混液（４：１ｖ
／ｖ、１０リツトル）、酢酸エチル（１０リツトル）で
展開する。目的化合物を含む画分を集め、減圧濃縮して
、黄色の油状物を得る。この油性残留物をｎ−ヘキサン
−酢酸エチル混液（１：　１　ｖ／ｖ、　３００ＩＱ　
）に溶解し、同じ溶媒系で充填したシリカゲル（２３０
〜４００メツシユ、メルク社製）（２リツトル）のカラ
ムを用いるクロマトグラフィに付す、ｎ−ヘキサン−酢
酸エチル混液（１：　ｌｖ／ｖ、　１０リットル；　１
　：　２Ｖ／Ｖ％　６リツトル）および酢酸エチル（６
リツトル）で溶出する。

最初の目的化合物を含む画分を集め、減圧濃縮して、Ｆ
Ｒ−９００５０６物質を白色粉末（３４ｇ）として得る
。この白色粉末をアセトニトリルに溶解し、減圧濃縮す
る。濃縮液を５°Ｃで一夜放置してプリズム状結晶（２
２，７ｇ）を得る。同じ溶媒で再結晶して精製ＦＲ−９
００！ｉ０６物質（１３，６ｇ）を無色プリズム状結晶
として得る。

さらに、第二の目的化合物を含む画分を集め、減圧濃縮
して、祖ＦＲ−９００５２５物質（３１４ｍｇ）を黄色
の粉末として得る。

衷蓋透Ｉ グリセリン（１％）、コーンスターチ（１％）、グルコ
ース（０，５％）、綿実粉（１％）、乾燥酵母（０，５
％）、コーンステーブリカー（０，５％）、炭酸カルシ
ウム（０，２％）を含有する培地（１６０＋１１１１　
）（ｐＨ６，５に調！１）を各々５００Ｉｎｌノ工ルレ
ンマイヤーフラスコ１０個に入れ、１２０℃で３０分間
滅菌する。

ストレプトミセス・ツクバエンシスＮａ９９９３の斜面
培養物の１白金耳を各培地に接種し、回転振盪機上、３
０°Ｃで４日間培養する。得られる培養物を、あらかじ
め１２０℃で２０分間滅菌した２００リツトルのジャー
ファーメンタ−に入れた可溶性でん粉（５％）、ピーナ
ツ粉（０，５％）、乾燥酵母（０，５％）、グルテンミ
ール（０，５％）、炭酸カルシウム（０，１％）、アデ
カノール（消泡剤、商品名、旭電化製）（０，１％）を
含有する培地（１５０リツトル）に接種し、３０°Ｃで
、通気（１５０リットル／分）、攪拌（２５０ｒｐｍ＞
下に４日間培養する。

監夷旦去り韮ｌ このようにして得られる培養ブロスをケイソウ±（５ｋ
ｇ）を用いて濾過する。菌糸体の塊をアセトン（５０リ
ツトル）で抽出し、抽出液５０リツトルを得る。菌糸体
より得られるアセトン抽出液と濾液（１３５リツトル）
とを合わせ、非イオン性吸着樹脂「ダイアイオンＩＰ−
２０，（商品名、三菱化成社製）（１０リツトル）にカ
ラムを通す、水（３０リツトル）および５０％水性アセ
トン（３０リツトル）で洗浄し、７５％水性アセトンで
溶出する。溶出液（３０リツトル）を減圧下に蒸発濃縮
し、残量を２リツトルし、酢酸エチル（２リツトル）で
３回抽出する。酢酸エチル抽出液を減圧濃縮し、油性残
留物を得る。この油性残留物を二倍重量の酸性シリカゲ
ル（特殊シリカゲル、グレード１２、富士デビノン製）
と混合し、混合物を酢酸エチル中でスラリー化する。溶
媒を留去し、得られる乾燥粉末を、ｎ−ヘキサンで上記
と同じ酸性シリカゲル（８ＱＯｍｎ　）を充填したカラ
ムを用いるクロマトグラフィに付す、カラムをｎ−ヘキ
サン（３リツトル）、ｎ−ヘキサン−酢酸エチル混液（
４：１ｖ／ｖ、３リツトル）、酢酸エチル（３リツトル
）で展開する。目的化合物を含む画分を集め、減圧濃縮
して、油性残留物を得る。この油性残留物をｎ−ヘキサ
ン−酢酸エチル混液（１：１ｖ／ｖ、３０１ｎＱ　）に
溶解し、同じ溶媒系で充填したシリカゲル（２３０〜４
００メツシユ、メルク社製）　（５００ｍ１！　）のカ
ラムを用いるクロマトグラフィに付す、ｎ−ヘキサン−
酢酸エチル混液（１：１ｖ／ｖ、２リットル；１：　２
ｖ／ｖ、　１．５リツトル）および酢酸エチル（１，５
リツトル）で溶出する。

最初の目的化合物を含む画分を集め、減圧濃縮して、粗
ＦＲ−９００５０６物質（３ｇ）を黄色の粉末として得
る。

さらに、第二の目的化合物を含む画分を集め、減圧濃縮
して、油性残留物を得る。この油性残留物をシリカゲル
クロマトグラフィに再度付し、黄色の油状物を得る。こ
の油性残留物を二倍重量の酸性シリカゲルと混合し、混
合物を酢酸エチル中でスラリー化する。溶媒を留去して
、得られる乾燥粉末を、ｎ−ヘキサンで酸性シリカゲル
（１００ｍ１１）を充填したカラムを用いるクロマトグ
ラフィに付し、ｎ−ヘキサンで展開する。目的化合物を
含む画分を集め、減圧濃縮して、ＦＲ−９００５２５物
質を淡黄色の粉末（３８０＋ｎｇ）として得る。この粉
末をｎ−ヘキサン−酢酸エチル混液（１：　２ｖ／ｖ、
　５−）に溶解し、同じ溶媒系で充填し洗浄した酸性シ
リカゲル（特殊シリカゲル、グレード９２２、富士デビ
ノン製）　（１００ｎＱ　）のカラムを用いるクロマト
グラフィに付す、酢酸エチルで溶出する。活性画分を集
め、減圧下に蒸発させて、精製したＲ−９００５２５物
質（２３０ｍｇ　）を白色粉末として得る。

以下に示す平板希釈法によって、ストレプトミセス・バ
イグロスコピカス・サプスプ拳ヤクシマエンシス動７２
３８を分離する。

鹿児島県屋久島で採取した土壌約１グラムを無菌試験管
に入れ、滅菌水を加えて容量を５ｍＱとす↓ る、混合物をチューブブザーで１０秒間混合し、１０分
間放置する。上澄液を滅菌水で順次１００倍希釈する。

希釈液（０，１１１１１１）を塩酸デアミン添加スザペ
ツク寒天（サッカロース３０ｇ１硝酸ナトリウム３ｇ１
　リン酸二カリウム１ｇ、硫酸マグネシウム０．５ｇ、
塩化カリウム０．５ｇ、硫酸第一鉄ｏ、　ｏｔ　ｇ　。

塩酸チアミンｏ、ｔｇ、寒天２０ｇ、水道水１０１００
Ｏ。

ｐＨ７，２）を含有するペトリ皿上に広げる。３０℃で
２１日間インキュベートし、プレート上に生育させたコ
ロニーを斜面培地［酵母−麦芽エキス寒天（ＩｓＰ−培
地２）］に移し、３０°Ｃで１０日間培養する。

分離したコロニーの中に、ストレプトミセス・バイグロ
スコピカス・サブスプ・ヤクシマエンシス陽７２３８を
見い出した。

逸ｙ グリセリン（１％）、可溶性でん粉（１％）、グルコ−
ス（０，５％）、綿実粉（０，５％）、乾燥酵母（０，
５％）、フーンスチーブリ力−（０，５％）、炭酸カル
シウム（０，２％）を含有する培地（１６０１１１Ｑ）
（ｐＨ６，５にｍｖｉ）を、各々５００ｒｎＱノ工ルレ
ンマイヤーフラスコ２０個に入れ、１２０℃で３０分間
滅菌する。

ストレプトミセス・バイグロスコピカス・サプスプ・ヤ
クシマエンシスＮｏ、７２３８（寄託番号：微工研条寄
第９２８号）の斜面培養物の１白金耳を各培地に接種し
、回転振盪機上、３０℃で４日間培養する。

得られる培養物を、グルコース（４，５％）、コーンス
チープリ力−（１％）、乾燥酵母（１％）、グルテンミ
ール（１％）、麦芽（０，５％）、炭酸カルシウム（０
，１％）、アデカノール（消泡剤、商品名、旭電化製）
（０，１％）を含有する、あらかじめ１２０℃で２０分
間滅菌した２００リツトルのジャーファーメンタ−中の
培地（１５０リツトル）に接種し、３０℃、通気（１５
０リットル／分）、攪拌（２５０ｒｐｍ　）下に４日間
培養する。

監簾旦主旦韮ｌ このようにして得られる培養プロスを、ケイソウ土（５
ｋｇ）を用いて濾過する。菌糸体の塊をアセトン（５０
リツトル）で抽出し、抽出液５０リツトルを得る。菌糸
体より得られるアセトン抽出液と濾液（１３５リツトル
）とを合わせ、非イオン性吸着樹脂１ダイアイオンＨＰ
−２０Ｊ（商品名、三菱化成社製）（１０リツトル）の
カラムに通す、水（３０リツトル）および水性アセトン
（３０リツトル）で洗浄した後、アセトンで溶出する。

溶出液を減圧下に蒸発濃縮し残量を２リツトルとし、こ
れを酢酸エチル（４リツトル）で抽出する。酢酸エチル
抽出液を減圧濃縮し、油性残留物を得る。この油性残留
物を二倍重量の酸性シリカゲル（特殊シリカゲルグレー
ド１２、富士デビノン製）と混合し、この混合物を酢酸
エチル中でスラリー化する。溶媒を留去した後、得られ
る乾燥粉末をｎ−ヘキサンで充填した同じ酸性シリカゲ
ル（８００１１１１１）のカラムを用いるクロマトグラ
フィに付す、カラムをｎ−ヘキサン（３リツトル）、ｎ
−ヘキサン−酢酸エチル混液（４：　ｌｖ／ｖ、　３リ
ツトル）、酢酸エチル（３リツトル）で展開する。　Ｆ
Ｒ−９００５２０およびＦＲ−９００５２３物質を含む
画分を集め、減圧濃縮して油性残留物を得る。この油性
残留物をｎ−ヘキサン−酢酸エテル混液（１：　１　ｖ
／ｖ、　５０１１１１１　）に溶解し、同じ溶媒系で充
填したシリカゲル（７０〜２３０メツシユ、メルク社製
）　（１００１００Ｏ）のカラムを用いるクロマトグラ
フィに付す、ｎ−ヘキサン−酢酸エチル混液（１：　ｌ
ｖ／ｖ、　３リットル；１：２ｖ／ｖ、３リツトル）お
よび酢酸エチル（３リツトル）で溶出する。目的化合物
を含む画分を集め、減圧濃縮して、黄色の粉末（４，５
ｇ）を得る。

この粉末をメタノール（２０１ｄ　）に溶解し、水（１
０ｍｌりと混合する。混合物をメタノール−水混液（４
：　ｌｖ／ｖ）で充填し、これで展開する逆相シリカゲ
ル’　ＹＭＣＪ　（６０〜２００メツシユ）（５００１
ｎＱ）（商品名、山村化学研究新製）のカラムを用いる
クロマトグラフィに付す。

ＦＲ−９００５２０物質を含む画分を集め、減圧濃縮し
て、ＦＲ−９００５２０物質の粗生成物（１，８ｇ）を
淡黄色の粉末として得る。この粉末を少量のジエチルエ
ーテルに溶解する。−夜装置した後、沈澱する結晶を濾
取し、ジエチルエーテルで洗浄し、減圧乾燥する。ジエ
チルエーテルで再結晶して、精製Ｒ，９００５２０物質
６００ｍｇを無色の板状晶として得る。

同じ溶媒系を用いる逆相シリカゲルクロマトグラフィを
続けて行い、ＦＲ−９００５２３物質を含む次の画分を
集め、減ＥＥ濃縮して、ＦＲ−９００５２３物質の粗生
成物（０，５１ｇ）を淡黄色の粉末として得る。この粗
生成物をアセトニトリル（３誠）に溶解し、アセトニト
リル−テトラヒドロフラン−５０ｍＭリン酸緩衝液混液
（ｐＨ２，０＞（３：　２　：　５ｖ／ｖ）で充填し、
これで展開する逆相シリカゲル’　ＹＭＣＪ　（７Ｑｍ
ｌｌ　）を用いるクロマトグラフィに付す、目的化合物
を含む画分を酢酸エチルで抽出する。この抽出液を減圧
濃縮して、黄白色の粉末（１９０ｍｇ）を得る。

この黄白色の粉末を逆相シリカゲル’ＹＭＣＪ上で再び
クロマトグラフィに付し、白色粉末（”８０ｍｇ）を得
る。この白色粉末を少量のジエチルエーテルに溶解し、
室温で一夜放置して結晶５６ｍｇを得る。

ジエチルエーテルで再結晶して、ＦＲ−９００５２３物
質の無色の針状晶３４ｍｇを得る。

Ｋ及傅１ ＦＲ−９００５０６物質（１０，４ｍｇ）のジクロロメ
タンＣ０，２ｍ１ｔ）中溶液にとリジン（０，１１１１
１１）および無水酢酸（０，０５ｍＡ　）を室温で加え
、混合物を５時間攪拌する。溶媒を減圧下に除去する。

残留物をシリカゲル薄層クロマトグラフィ（展開溶媒：
ジエナルエーテルージクロロメタン、　　１　：　２ｖ
／ｖ）　ニ付して、１２−　［２−（４−アセトキシ−
３−メトキシシクロヘキシル）−１−メチルビニル］−
１７−アリル−１，１４−ジヒドロキシ−２３，２５−
ジメトキシ−１３，１９，２１，２７−テトラメチル−
１１，２８−ジオキサ−４−アザトリシクロ［２２，３
、１、０’°９］オクタコスー１８−エンー２．３．１
０．１６−チトラオン（６，０鵬ｇ）を得る。

ＩＲν（ＣＨＣＬ３）　’　３５２０．１７２８．１７
０５（ｓｈ）、　１６４０゜１０９５　ａｍ−１ 衷１１」− ＦＲ−９００５０６物質（５２，５ｍｇ　）のジクロロ
メタン（ＩＩＩＩＱ）中溶液に、ピリジン（０，５ｍ１
ｌ　）および無水酢酸（０，３１１１１１）を室温で加
え、混合物を室温で９時間攪拌する。溶媒を減圧下に除
去する。残渣をシリカゲル薄層クロマトグラフィ（Ｒ開
溶媒ニジエチルエーテル−ヘキサン、３　：　１　ｖ／
ｖ）　ｔ、：付して、１４−アセトキシ−１２−［２−
（４−アセトキシ−３−メトキシシクロヘキシル）−１
−メチルビニル］−１７−アリル−１−ヒドロキシ−２
３，２５−ジメトキシ−１３，１９，２１，２７−チト
ラメチルー１１゜２８−ジオキサ−４−アザトリシクロ
［２２，３、１。

０４，９］才クタコス−１８−エン−２，３，１０，１
６−チトラオン（４８，０ｍｇ　）および１２−　［２
−（４−アセトキシ−３−メトキシシクロヘキシル）−
１−メチルビニル］−１７−アリル−１−ヒドロキシ−
２３，２５−ジメトキシ−１３，１９，２１，２７−テ
トラメチル−１１，２８−ジオキサ−４−アザトリシク
ロ［２２゜３．１．０”９］オクタコサ−１４，１８−
ジエン−２゜３．１０．１６−チトラオン（５，４ｍｇ
　）を得る。

前記化合物 ＩＲν（ＣＨＣｌａ）　’　１７３０．１７２０（ｓｈ
）、１６４０　ｃｍ″″１後記化合物 ＩＲν（ＣＨＣＩ　）　：　１７３０．１６９０．１６
４０．１６２７　ｃｍ−１（以下余白） 実施例７ ＦＲ−９００５０６物質（９，７ｍｇ　）のジクｏｏメ
タン（０，２ｍ１１　）およびピリジン（０，ｆｕｌｌ
　）中溶液に、塩化ベンゾイル（５０４）を室温で加え
、混合物を室温で２時間攪拌する。溶媒を減圧下に除去
し、粗油状物を得る。この油状物をシリカゲル薄層クロ
マトグラフィ（展開溶媒：ンエチルエーテルーヘキサン
、２　二ｌｖ／ｖ）で精製して、１７−アリル−１２−
［２−（４−ベンゾイルオキシ−３−メトキシシクロヘ
キシル）−１−メチルピニルコー１．１４−ジヒドロキ
シ−２３，２５−ジメトキシ−１３゜１９．２１．２７
−テトラメチル−１１，２８−ジオキサ−４−アザトリ
シクロ［２２，３、１、０’°９コオクタコスー１８−
エンー２．３．１０．１６−チトラオン（８，０ｍｇ）
を得る。

ＩＲｌ／　（ＣＨＣｌａ）　’　３５００．１７３５（
ｓｈ）、　１７１Ｇ、１６４０゜１６００　ｃｍ−” 夾臭■Ｉ ＦＲ−９００５０６物質（３０，５ｍｇ　）のピリジン
（１ｍｍ）中溶液に、塩化ｐ−ニトロベンゾイル（約１
００ｍｇ）を加え、混合物を室温で２時間攪拌する。反
応混合物を酢酸エチルで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウ
ム水溶液、水、ＩＮ塩酸、水、飽和炭酸水素ナトリウム
水溶液、水、塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄し、乾燥
する。得られる溶液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカ
ラムクロマトグラフィで精製して、１７−アリル−１，
１４−ジヒドロキシ−２３，２５−ジメトキシ−１３，
１９，２１，２７−チトラメテルー１２−［２−［４−
（ｐ−ニトロベンゾイルオキシ）−３−メトキシシクロ
へキシルコー１−メチルビニル］−１１，２８−ジオキ
サ−４−アザトリシクロ［２２，３、１、０’°９］オ
クタコスー１８−エンー　２　、３．１０．１６−チト
ラオン（３７，７ｍｇ　）を得る。

ＩＲν（ＣＨＣＩ３）　：　１７２０．１６４０．１６
１０゜１５３０−１５２０　ｃｍ−１ 火轟■ユ 実施例８の方法に準じて、ＦＲ−９００５０６物質（３
０，６ｍｇ　）と塩化３．５−ジニトロベンゾイル（３
３ｍｇ）とをピリジン（０，５ｍ１）中で反応させるこ
とによって、１７−アリル−１，１４−ジヒドロキシ−
２３，２５−ジメトキシ−１３，１９，２１，２７−チ
トラメチルー１２−［２−［４−（３，５−ジニトロベ
ンゾイルオキシ）−３−メトキシシクロへキシル］−１
−メチルビニル］−１１，２８−ジオキサ−４−アザト
リシクロ［２２，３，１，０’°９］才クタコス−１８
−エン−２、３，１Ｇ、１６−チトラオン（３６，Ｏｍ
ｇ　）を得る。

ＩＲν（ＣＨＣＩ３）　？　１７３０．１６４０．１６
１Ｇ。

１５３０−１５２０　ｃｍ−’ 哀産五迎 実施例８の方法に準じて、ピリジン（０，５Ｉ１１１　
）中でＦＲ−９００５０６物質（４８ｍｇ）を塩化２−
１−メンチルオキシアセチル（０，０８ｆｆｌｌ　）と
反応させることによって、１７−アリル−１，１４−ジ
ヒドロキシ−２３，２５−ジメトキシ−１２−［２−［
４−（２−ｊ！−メンチルオキシアセトキシ）−３−メ
トキシシクロへキシル］−１−メチルビニルコー１３．
１９．２１゜２７−テトラメチル−１１，２８−ジオキ
サ−４−アザトリシクロ［２２，３、１、０’°９］オ
クタコスー１８−エンー２　、３．１Ｏ，１６−チトラ
オン（５０，９ｍｇ　）を得ＩＲν　（ニー））　　’
　　３５２０．　　１７６０．　　１７４０（ｓｈ）。

１７２０（ｓｈ）、　１６５２　ａｍ−１衷１！ｌ。

（−）−２−トリフルオロメチル−２−メトキシ−２−
フェニル酢酸（５１ｍｇ）の酢酸エテル（１０ｍ１１　
）中溶液に、室温で、Ｎ、Ｎ’　−ジシクロへキシルカ
ルボジイミド（４７ｍｇ）を加える。室温で１．５時間
攪拌した後、ＦＲ−９００５０６物質（２５，０ｍｇ　
）および４−（Ｎ、Ｎ−ジメチルアミノ）ピリジン（ｌ
１ｍｇ）を加え、室温で３．５時間攪拌する。得られる
溶液を濃縮して残渣を得、これをジエチルエーテルに取
り、次いで、塩酸、炭酸水素ナトリウム水溶液、塩化ナ
トリウム水溶液で順次洗浄する。有機層を硫酸ナトリウ
ムで乾燥し、濃縮して残渣を得、これをシリカゲルクロ
マトグラフィ（展開溶媒ニジクロロメタン−ジエチルエ
ーテル、１０：　ｌｖ／ｖ）に付して、１７−アリル−
１２−［２−［４−［（−）−２−トリフルオロメチル
−２−メトキシ−２−フェニルアセトキシ］−３−メト
キシシクロへキシル］−１−メチルビニル］−１，１４
−ジヒドロキシ−２３，２５−ジメトキシ−１３，１９
，２１，２７−テトラメチル−１１，２８−ジオキサ−
４−アザトリシクロ［２２，３、１、０’°９］オクタ
コスー１８−エンー２．３．１０．１６−テト２オン（
６，５ｍｇ）および１７−アリル−１４−［（−）−２
−トリフルオロメチル−２−メトキシ−２−フェニルア
セトキシ］−１２−［２−［４−［（−）−２−トリフ
ルオロメチル−２−メトキシ−２−フェニルアセトキシ
］−３−メトキシシクロへキシル］−１−メチルビニル
］−１−ヒドロキシ−２３，２５−ジメトキシ−１３，
１９，２１，２７−チトラメチルー１１゜２８−ジオキ
サ−４−アザトリシクロ［２２，３、１。

０４′９コオクタコス−１８−エン−２、３，１０，１
６−チトラオン（２０，２ｍｇ　）を得る。

腹星立遣勿 ＩＲν　（ニート）　　：　　３５１０．　１７５０．
　　１７３０（ｓｈ）、　　　１７１０゜１６５２、１
５００　ａｍ−１ 聚星上澄１ １Ｒν　（ニー））　　：　　１７５０．　１７２Ｇ、
　　　１６５２．　　１５００　　ａｍ−’Ｘ菖五旦 ＦＲ−９００５０６物質（２４８ｍｇ　）のピリジン（
７絨）中溶液を攪拌しながら、これに無水フハク酸（ｔ
ａｓｍｇ）および４−（Ｎ、Ｎ−ジメチルアミノ）ピリ
ジン（７ｍｇ）を加え、得られる混合物を室温で１８時
間攪拌する０反応混合物を減圧濃縮し、残渣を酢酸エチ
ルを用いるシリカゲル（２０ｇ）のクロマトグラフィに
付し、１７−アリル−１２−［：　２−　Ｃ４−（３−
カルボキシプロピオニルオキシ）−３−メトキシシクロ
へキシルツー１−メチルビニル］−１，１４−ジヒドロ
キシ−２３，２５−ジメトキシ−１３゜１９．２１．２
７−テトラメチル−１１，２８−ジオキサ−４−アザト
リシクロ［２２，３、１、０’°９］オクタフスー１８
−エンー２．３．１０．１６〜テトラオン（９０ｍｇ　
）を得る。

ＩＲν（ＣｕＣｌ２）　７３５００．３１００−２３０
０．１７２０゜１７０５（ｓｈ）、　１６３５　ｃｍ−
１に直輿封 ＦＲ−９００５０６物質（１００，７ｍｇ　）　０）ピ
リジン（３ｍＱ）中溶液に、塩化ｐ−ヨードベンゼンス
ルホニル（５００ｍｇ）を加え、混合物を室温で３６時
間攪拌する。溶液を酢酸エチルで希釈し、飽和炭酸水素
ナトリウム水溶液、水、塩化ナトリウム水溶液で洗浄す
る。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃
縮する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィ（展開溶媒
ニジエチルエーテル−ヘキサン、３　：　ｌｖ／ｖ）に
付し、１７−アリル−１，１４−ジヒドロキシ−ｔ２−
［２−［４−（ｐ−ヨードベンゼンスルホニルオキシ）
−３−メトキシシクロへキシル］−１−メチルビニル］
−２３，２５−ジメトキシ−１３，１９，２１，２７−
テトラメチル−１１，２８−ジオキサ−４−アザトリシ
クロ［２２，３，１，０’°９］才クタフス−１８−エ
ン−２，３，１０，１６−チトラオン（６１ｍｇ）およ
び１７−アリル−１−ヒドロキシ−１２−［２−Ｃ４−
（ｐ−ヨードベンゼンスルホニルオキシ）−３−メトキ
シシクロへキシルツー１−メチルビニルコー２３．２５
−ジメトキシ−１３，１９，２１゜２７−テトラメチル
−１１，２８−ジオキサ−４−アザトリシクロ［２２，
３、１、０’°９コ才クタコサ−１４゜１８−ジエン−
２，３，１０，１６−チトラオン（１２ｍｇ）を得る。

訓星±立碧 １Ｒν（ＣＨＣＬ３）　：　３４７０．１？３０．１７
１７．１６９２゜１６３５、１５６８　ａｍ’ ７．６０　（２Ｈ，ａ＋）、　７．９０　（２Ｈ，ｍ）
Ｘｌ最旦 実施例１３の方法に準じて、ピリジン（０，６１１１１
１）中でＦＲ−９００５０６物質（２７ｍｇ）を塩化ｄ
−カン７フースルホニル（９７ｍｇ＞と反応させること
によって、１７−アリル−１２−［２−（４−ａ−カン
ファースルホニルオキシ−３−メトキシシクロヘキシル
）−１−メチルビニルコー１．１４−ジヒドロキシ−２
３゜２５−ジメトキシ−１３，１９，２１，２７−チト
ラメチルー１１．２８−ジオキサ−４−アザトリシクロ
［２２，３，１゜０４°９］才クタコス−１８−エン−
２，３，１０，１６−チトラオン（３４ｍｇ）を得る。

ＩＲν　（ニート）　　：　　３５００．　１７４７．
　１７２０（ｓｈ）。

１７１０（ｓｈ）、　１６５５　ｃｍ−１衷五逍長 ＦＲ−９００５０６物質（８９，７ｍｇ　）のジクロロ
メタン（３１１１１）中溶液を攪拌しながら、これにイ
ミダゾール（１１８ｍｇ）および塩化ｔ−ブチル−ジフ
ェニルシリル（５２，２ａ＋ｇ　）を加える。混合物を
室温で２時間攪拌し、飽和塩化アンモニウム水溶液で希
釈し、ジエチルエーテルで３回抽出する。抽出液を水お
よび塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで
乾燥し、減圧乾燥する。残渣をシリカゲルカラムクロマ
トグラフィ（展開溶媒：酢酸エチル−ヘキサン、１　：
　３ｖ／ｖ）で精製し、１７−アリル−１２−［２−（
４−ｔ−ブチル−ジフェニルシリルオキシ−３−メトキ
シシクロヘキシル）−１−メチルビニル］−１，１４−
ジヒドロキシ−２３，２５−ジメトキシ−１３，１９，
２１，２７−テトラメチル　　　　　　　　１−１１．
２８−ジオキサ−４−アザトリシクロ［２２，３。

１．０４°９］才クタフス−１８−エン−２，３，１０
，１６−チトラオン（１０７ｍ＆）を得る。

ＩＲｌ／　　（ニー））　　：　　３５２０．　１７４
２．　１７０５．　１６５０　　ａｍ−’哀直血長 実施例１５の方法に準じて、イミダゾール（１５ｆｆ１
ｇ）の存在下に、Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムアミド（１ｍ
Ｉｌ）中で、ＦＲ−９００５０６物質（８０ｍｇ）を塩
化ｔ−ブチル−ジメチルシリル（１７ｍｇ）と反応きせ
ることによって、１７−アリル−１２−［２−（４−ｔ
−ブチル−ジメチルシリルオキシ−３−メトキシシクロ
ヘキシル）−１−メチルビニル］−１，１４−ジヒドロ
キジー２３．２５−ジメトキシ−１３，１９，２１，２
７−チトラメテルー１１．２８−ジオキサ−４−アザト
リシクロ［２２，３、１、０’°９］オクタフスー１８
−エンー　２　、３．１０．１６−チトラオン（８５ｍ
ｇ）を得る。

ＩＲｖ　（ＣＨＣＬ３）　：　１７３５．１７２０（ｓ
ｈ）、　１７００゜１６４０　ｃｒｔｒ−’ 罠産血■ ＦＲ−９００５０６物質（１００ｍｇ）のジメチルスル
ホキシド（１，５ｍＱ）中溶液に、無水酢酸（１，５ｍ
ｇを加゛　　え、混合物を室温で１４時間攪拌する。反
応混合物を酢酸エチルで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウ
ム、水溶液、水、塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄する
。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥、濾過し、減圧濃縮す
る。残渣をシリカゲルの薄層クロマトグラブイ（展開溶
媒ニジエチルエーテル）に付し、１７−アリル−１，１
４−ジヒドロキシ−２３，２５−ジメトキシ−１３，１
９，２１，２７−チトラメチルー１２−［２−（４−メ
チルチオメトキシ−３−メトキシシクロヘキシル）−１
−メチルビニル］−１１，２８−ジオキサ−４−アザト
リシクロ［２２，ａ　、　ｔ　、　ｏ　’°９］オクタ
コサー１４．１８−ジエン−２，３，１０，１６−チト
ラオン（５１ｍｇ）、１７−アリル−１−ヒトａキシ−
１２−［２−（４−ヒドロキシ−３−メトキシシクロヘ
キシル）−１−メチルビニル］−２３，２５−ジメトキ
シ−１３，１９，ｚｉ、ｇ７−チトラメチルー１１．２
８−ジオキサ−４−アザトリシクロ［２２，３、１。

０４°９］才ククコサ−１４，１８−ジエン−２，３，
１０，１６−チトラオン（１８ｍｇ）および１７−アリ
ル−１，１４−ジヒドロキシ−２３，２５−ジメトキシ
−１３，１９，２１゜２７−チトラメチルー１２−　［
２−（４−メチルデ才メトキシ−３−メトキシシクロヘ
キシル）−１−メチルビニル］−１１，２８−ジオキサ
−４−アザトリシクロ［２２，３，１，０’°９］オク
タコス−１８−エン−２、３，１０，１６−チトラオン
（１０ａ＋ｇ）を得る。

二豊亘五立皇璽 ＩＲＶ　（ＣＨＣｌａ）　’　３４７Ｇ、１７３０．１
６３５，１６３０（ｓｈ）。

１５８０（ｓｈ）　ａｍ−に 豊亘五豆澄碧 ＩＲν（ＣＨＣＩｓ）　＝１７２８．１６４０．１０９
０　ａｍ″″１旦豊亘五ユ介膣 ＩＲＶ　（ＣＨＣｌａ）　：　３４８０．１７３５．１
７１０．１６４０　ａｍ−１寒Ａ五長 １７−アリル−１２−［：２−（４−ｔ−ブチル−ジメ
チルシリルオキシ−３−メトキシシクロヘキシル）−１
−メチルビニル］−１，１４−ジヒドロキシ−２３，２
５−ジメトキシ−１３，１９，２１，２７−テトラメチ
ル−１１，２８−ジオキサ−４−アザトリシクロ［２２
゜３．１．０”９］オクタフス−１８−エン−２，３，
１０゜１６−チトラオン（３９，９ｍｇ）　（１）ピリ
ジン（１，５１１１Ｑ　）中溶液に無水酢酸（０，５１
１１ｆｆｉ）を加え、混合物を室温で６時間攪拌する。

溶媒を減圧下に除去して粗油状物を得、これをシリカゲ
ル薄層クロマトグラフィ（展開溶媒ニジエチルエーテル
−ヘキサン、１　：　ｌｖ／ｖ）に付し、１４−アセト
キシ−１７−アリル−１２−［２−（４−ｔ−ブチル−
ジメチルシリルオキシ−３−メトキシシクロへキシル）
−１−メチルビニル］−１−ヒドロキシ−２３，２５−
ジメトキシ−１３，１９，２１，２７−テトラメチル−
１１，２８−ジオキサ−４−アザトリシクロ［２２，３
，１，０”９］オクタコス−１８−エン−２，３，１０
，１６−チトラオン（２６，５岨）を得る。

ＩＲν（ＣＨＣＩｓ）　’　１７２８，１７１５（ｓｈ
）、　１６３５　ａｍ−１１五且卦 実施例１８の方法に準じて、ピリジン（０，２１１１）
中で１７−アリル−１２−［２−（４−ｔ−ブチル−ジ
フェニルシリルオキシ−３−メトキシシクロヘキシル）
−１−メチルビニル］−１，１４−ジヒドロキシ−２３
，２５−ジメトキシ−１３，１９，２１，２７−テトラ
メチル−１１，２８−ジオキサ−４−アザトリシクロ［
２２，３、１、０’°９］オクタフスー１８−エンー２
゜３．１０．１６−チトラオン（１０，６ｍｇ　）を無
水酢酸（０，１ｍｇ）と反応させることによって、１４
−アセ　、トキシー１７−アリル−１２−［２−（４−
ｔ−ブチル−ジフェニルシリルオキシ−３−メトキシシ
クロヘキシル）−１−メチルビニル］−１−ヒドロキシ
−２３，２５−ジメトキシ−１３，１９，２１，２７−
テトラメチル−１１，２８−ジオキサ−４−アザトリシ
クロ［２２，３，１，０’°９］才クタフス−１８−エ
ン−２゜３．１０．１６−チトラオン（１０ｍｇ）を得
る。

ＩＲｌ／　（ＣＨＣｌａ）　’　３５００，１７３０．
１７２０（ｓｈ）。

１６６０（ｓｈ）、　１６４０．１６２０（ｓｈ）。

１１００　ｃｍ−１ 夫直斑毅 １４−アセトキシ−１７−アリル−１２−［２−（４−
ｔ−プチルージプエニルシリルオキシー３−メトキシシ
クロヘキシル）−１−メチルビニルツー１−ヒドロキシ
−２３，２５−ジメトキシ−１３，１９，２１゜２７−
ナトラメデル−１１，２８−ジオキサ−４−アザトリシ
クロ［２２，３，１，０’°９］才クタコス−１８−エ
ン−２，３，１０，１６−チトラオン（４３，８ｍｇ　
）のテトラヒドロフラン（１，５ＩＱ）中溶液に、炭酸
カリウム（約１００ｍｇ）を室温で加え、混合物を同温
で３時間攪拌する０反応混合物をジエチルエーテルで希
釈し、得られる溶液を飽和塩化アンモニウム水溶液、水
、塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄し、硫酸ナトリウム
で乾燥する。得られる溶液を減圧濃縮し、残渣をシリカ
ゲル薄層クロマトグラフィ（展開溶媒ニジエチルエーテ
ル−ヘキサン、３：２ｖ／ｖ）で精製して、１７−アリ
ル−１２−［２−（４−ｔ−／チルージフェニルシリル
オキシー３−メトキシシクロヘキシル）−１−メチルビ
ニル］−１−ヒドロキシ−２３，２５−ジメトキシ−１
３，１９，２１，２７−テトラメチル−１１，２８−ジ
オキサ−４−アザトリシクロ［２２，３，１，０’°９
］オクタフサ−１４、１８−ジエン−２、３，１０，１
６−チトラオン（３０ｍｇ）を得る。

ＩＲｌ／　　（ＣＨＣｌａ）　　　’　　１７３３．　
１７２０（ｓｈ）、　　１６８５゜１６４０（ｓｈ）、
　１６２０　ｃｍ″″１東直孤里 ＦＲ−９００５０６物質（５０ｍｇ）の酢酸エチル（２
−）中溶液を、１０％パラジウム−炭素（１０ｍｇ）を
用いて、大気圧下、室温で、２０分間接接触覚する０反
応混合物を濾過し、濾液を蒸発乾固し、薄層クロマトグ
ラフィで精製する。クロロホルム−アセトン混液（ｓ　
：　ＩＶ／Ｖ）で展開して、１．１４−ジヒドロキシ−
１２−［２−（４−ヒドロキシ−３−メトキシシクロヘ
キシル）−１−メチルビニル］−２３，２５−ジメトキ
シ−１３，１９，２１，２７−テトラメチル−１フーブ
ロビルー１１．２８−ジオキサ−４−アザトリシクロ［
：　２２．３　、１　、０　’°９コオクタコスー１８
−工”／　−２、３，１０，１６−チトラオン（５０，
０ｍｇ　）を得る。

ＩＲＶ　（ＣＨＣｌａ）　’　３４８０．１７３５（ｓ
ｈ）、１７１７．１７００゜１６５０（ｓｈ）、　１６
２５　ｃｍ−１哀五偲召 実施例１と同様の醗酵法により得られたＦＲ−９００５
０６物質の粗白色粉末（１ｇ）をアセトニトリル（５ｒ
ｎＱ）に溶かし、高滓ＬＣ４Ａ（商標、高滓製作所社製
）の高速液体クロマトグラフィーに付す。

ＹＭＣ−５３４３（ＯＤＳ　）　（商標、島久薬品株式
会社製）を充填したスチールカラム（内径２５ｍ、長さ
２５０■）を用い、１２戚／分の流速で溶出する。移動
相は２８％アセトニトリル水溶液、１０％ｎ−ブタ／　
−ル、０．０７５％燐酸、３．７５ｍＭドデシル硫酸ナ
トリウム（ＳＤＳ）の混液を用い、Ｕｖで２１０１にて
検出する。１回につき１００ＰｆＬのサンプルを注入し
、この高速液体クロマトグラフィーを５０回繰り返し、
すべての量のサンプルをクロマトグラフィーに付す、８
５分〜９０分の保持時間で溶出される画分を集め、等容
量の酢酸エチル（３，６ｆｆｉ）で抽出する。

酢酸エチル層を分取し、１％炭酸水素ナトリウム（２ｉ
）で洗浄した後減圧で少量まで濃縮する。

析出するＳＤＳを濾去し、得られる粗粉末を１００ｍｇ
／−の濃度になるようにアセトニトリルに溶かし、さら
に高速液体クロマトグラフィーに付す、移動相として１
２．５％アセトニトリル水溶液、９．７５％ｎ−５％ｎ
−ブタノール０７５％燐酸、３．７５ｍＭ　ＳＤＳを用
い６、ヵ、、、、よ１゜ｍ１１／ｅ（７）ｆｉ＊’ｔ’
＊ヨオ６．１３１カ〜　　　　ｉ・１４３分の保持時間
で溶出きれる画分を集め、等容量の酢酸エチルで抽出す
る。抽出液を１％炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し、
減圧下で少量まで濃縮する。ａ！縮の際析出するＳＤＳ
を濾去する。

得られる粗粉末を少量の酢酸エチルに溶解し、シリカゲ
ル（Ｋｉａｓｅｌ　ｇｅｌ、２３０−４００メツシユ）
（メルク社製）を用いたカラムクロマトグラフィーに付
す、カラムをｎ−ヘキサンと酢酸エチルの混液（３０１
ｎＱ）　（１：　ｌｖ／ｖ）、次いでｎ−ヘキサンと酢
酸エチルの混液（ｓｏｍｕ）　（１：　２Ｖ／Ｖ　）で
洗浄する。さらにカラムを酢酸エチルで溶出し、各画分
を３−づつ集める。１ｇ−２４の画分を合し、減圧下で
濃縮すると、ＦＲ−９００５２０物質（２４ｍｇ）を得
る。

【図面の簡単な説明】

図１はＦＲ−９００５０６物質の白色粉末の１３０核磁
気共鳴スペクトルを表わす。 図２はＦＲ−９００５０６物質の白色粉末の１Ｈ核磁気
共鳴スペクトルを表わす。 図３はＦＲ−９００５０６物質の無色のプリズム状結晶
の１３０核磁気共鳴スペクトルを表わす。 図４はＦＲ−９００５０６物質の無色のプリズム状結晶
の１Ｈ核磁気共鳴スペクトルを表わす。 図５はＦＲ−９００５２５物質の１３０核磁気共鳴スペ
クトルを表わす。 図６はＦＲ−９００５２５物質の１Ｈ核磁気共鳴スペク
トルを表わす。 図７はＦＲ−９００５２０物質の１３０核磁気共鳴スペ
クトルを表わす。 図８はＦＲ−９００５２０物質の１Ｈ核磁気共鳴スペク
トルを表わす。 図９はＦＲ−９００５２３物質の１３ｃ核磁気共鳴スペ
クトルを表わす。 図１０はＦＲ−９００５２３物質の１Ｈ核磁気共鳴スペ
クトルを表わす。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）一般式： ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） （式中、Ｒ＾１はヒドロキシ基または保護されたヒドロ
   キシ基、Ｒ＾２は水素、ヒドロキシ基または保護された
   ヒドロキシ基、Ｒ＾３はメチル基、エチル基、プロピル
   基またはアリル基、ｎは１または２の整数、実線と点線
   により表わされる記号は単結合または二重結合を意味す
   る） で示される化合物またはその医薬として許容される塩。 ２）下記式： ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ＾１はヒドロキシ基または保護されたヒドロ
   キシ基、Ｒ＾２はヒドロキシ基または保護されたヒドロ
   キシ基、Ｒ＾３はメチル基、エチル基、プロピル基また
   はアリル基を意味する） で表わされる特許請求の範囲第１）項記載の化合物。 ３）Ｒ＾３がアリル基である特許請求の範囲第２）項記
   載の化合物。 ４）Ｒ＾１がヒドロキシ基、１−（低級アルキルチオ）
   （低級）アルコキシ基、トリ置換シリルオキシ基または
   アシルオキシ基である特許請求の範囲第３）項記載の化
   合物。 ５）Ｒ＾１がヒドロキシ基、低級アルキルチオメトキシ
   基、トリ（低級）アルキルシリルオキシ基、低級アルキ
   ル−ジアリールシリルオキシ基、カルボキシを有してい
   てもよい低級アルカノイルオキシ基、シクロアルキル部
   分に低級アルキルを２個有していてもよいシクロ（低級
   ）アルコキシ（低級）アルカノイルオキシ基、カンファ
   ースルホニルオキシ基、１個もしくは２個のニトロを有
   していてもよいアロイルオキシ基、ハロゲンを有してい
   てもよいアレーンスルホニルオキシ基、または低級アル
   コキシおよびトリハロ（低級）アルキルを有していても
   よいアル（低級）アルカノイルオキシ基、Ｒ＾２がヒド
   ロキシ基または低級アルカノイルオキシ基である特許請
   求の範囲第４）項記載の化合物。 ６）１７−アリル−１，１４−ジヒドロキシ−１２−［
   ２−（４−ヒドロキシ−３−メトキシシクロヘキシル）
   −１−メチルビニル］−２３，２５−ジメトキシ−１３
   ，１９，２１，２７−テトラメチル−１１，２８−ジオ
   キサ−４−アザトリシクロ［２２．３．１．０＾４＾．
   ＾９］オクタコス−１８−エン−２，３，１０，１６−
   テトラオンである特許請求の範囲第５）項記載の化合物
   。 ７）Ｒ＾１が低級アルカノイルオキシ基であり、Ｒ＾２
   がヒドロキシ基または低級アルカノイルオキシ基である
   特許請求の範囲第５）項記載の化合物。 ８）１２−［２−（４−アセトキシ−３−メトキシシク
   ロヘキシル）−１−メチルビニル］−１７−アリル−１
   ，１４−ジヒドロキシ−２３，２５−ジメトキシ−１３
   ，１９，２１，２７−テトラメチル−１１，２８−ジオ
   キサ−４−アザトリシクロ［２２．３．１．０＾４＾．
   ＾９］オクタコス−１８−エン−２，３，１０，１６−
   テトラオンである特許請求の範囲第７）項に記載の化合
   物。 ９）１４−アセトキシ−１２−［２−（４−アセトキシ
   −３−メトキシシクロヘキシル）−１−メチルビニル］
   −１７−アリル−１−ヒドロキシ−２３，２５−ジメト
   キシ−１３，１９，２１，２７−テトラメチル−１１，
   ２８−ジオキサ−４−アザトリシクロ［２２．３．１．
   ０＾４＾．＾９］オクタコス−１８−エン−２，３，１
   ０，１６−テトラオンである特許請求の範囲第７）項記
   載の化合物。 １０）１７−エチル−１，１４−ジヒドロキシ−１２−
   ［２−（４−ヒドロキシ−３−メトキシシクロヘキシル
   ）−１−メチルビニル）−２３，２５−ジメトキシ−１
   ３，１９，２１，２７−テトラメチル−１１，２８−ジ
   オキサ−４−アザトリシクロ［２２，３，１，０＾４＾
   ．＾９］オクタコス−１８−エン−２，３，１０，１６
   −テトラオンである特許請求の範囲第２）項記載の化合
   物。 １１）１，１４−ジヒドロキシ−１２−［２−（４−ヒ
   ドロキシ−３−メトキシシクロヘキシル）−１−メチル
   ビニル］−２３，２５−ジメトキシ−１３，１９，１７
   ，２１，２７−ペンタメチル−１１，２８−ジオキサ−
   ４−アザトリシクロ［２２，３，１，０＾４＾．＾９］
   オクタコス−１８−エン−２，３，１０，１６−テトラ
   オンである特許請求の範囲第２）項記載の化合物。 １２）Ｒ＾１がヒドロキシ基、低級アルキルチオメトキ
   シ基、低級アルカノイルオキシ基またはハロゲンを有し
   ていてもよいアレーンスルホニルオキシ基、Ｒ＾２が水
   素またはヒドロキシ基、ｎが整数２、実線と点線により
   表わされる記号が二重結合である特許請求の範囲第１）
   項記載の化合物。 １３）１６−アリル−１，１３−ジヒドロキシ−１１−
   ［２−（４−ヒドロキシ−３−メトキシシクロヘキシル
   ）−１−メチルビニル］−２２，２４−ジメトキシ−１
   ２，１８，２０，２６−テトラメチル−１０，２７−ジ
   オキサ−４−アザトリシクロ［２１，３，１，０＾４＾
   ．＾８］ヘプタコス−１７−エン−２，３，９，１５−
   テトラオンである特許請求の範囲第１）項記載の化合物
   。 １４）（ａ）ストレプトミセス属に属するＦＲ−９００
   ５０６物質、ＦＲ−９００５２０物質および／またはＦ
   Ｒ−９００５２５物質−生産菌株を培地に培養し、得ら
   れる培養物からＦＲ−９００５０６物質、ＦＲ−９００
   ５２０物質および／またはＦＲ−９００５２５物質を分
   離採取することを特徴とするＦＲ−９００５０６物質、
   ＦＲ−９００５２０物質および／またはＦＲ−９００５
   ２５物質を得る方法； （ｂ）ストレプトミセス属に属するＦＲ−９００５２０
   物質および／またはＦＲ−９００５２３物質−生産菌株
   を培地に培養し、得られる培養物からＦＲ−９００５２
   ０物質および／またはＦＲ−９００５２３物質を分離採
   取することを特徴とするＦＲ−９００５２０物質および
   ／またはＦＲ−９００５２３物質を得る方法； （ｃ）式： ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ａ） （式中、Ｒ＾２は水素、ヒドロキシ基または保護された
   ヒドロキシ基、Ｒ＾３はメチル基、エチル基、プロピル
   基またはアリル基、ｎは１または２の整数、実線と点線
   により表わされる記号は単結合または二重結合を意味す
   る） で示される化合物またはその塩にヒドロキシ保護基を導
   入して、式： ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ｂ） （式中、Ｒ＾２、Ｒ＾３、ｎおよび実線と点線により表
   わされる記号はそれぞれ前と同じ意味であり、Ｒ＾１＿
   ａは保護されたヒドロキシ基を意味する）で示される化
   合物またはその塩を得る方法；（ｄ）式： ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ｃ） （式中、Ｒ＾３、ｎおよび実線と点線により表わされる
   記号はそれぞれ前と同じ意味であり、Ｒ＾１はヒドロキ
   シ基または保護されたヒドロキシ基を意味する） で示される化合物またはその塩にヒドロキシ保護基を導
   入して、式： ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ｄ） （式中、Ｒ＾１、Ｒ＾３、ｎおよび実線と点線により表
   わされる記号はそれぞれ前と同じ意味であり、Ｒ＾２＿
   ａは保護されたヒドロキシ基を意味する）で示される化
   合物またはその塩を得る方法；（ｅ）式： ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ｅ） （式中、Ｒ＾１、Ｒ＾３およびｎはそれぞれ前と同じ意
   味であり、Ｒ＾２＿ｂは脱離基を意味する）で示される
   化合物またはその塩に塩基を作用させ、式： ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ｆ） （式中、Ｒ＾１、Ｒ＾３およびｎはそれぞれ前と同じ意
   味） で示される化合物またはその塩を得る方法；（ｆ）式： ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ｇ） （式中、Ｒ＾１、Ｒ＾３およびｎはそれぞれ前と同じ意
   味） で示される化合物またはその塩を酸化して、式： ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ｈ） （式中、Ｒ＾１、Ｒ＾３およびｎはそれぞれ前と同じ意
   味） で示される化合物またはその塩を得る方法；（ｇ）式： ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ｉ） （式中、Ｒ＾１、Ｒ＾２、ｎおよび実線と点線により表
   わされる記号はそれぞれ前と同じ意味） で示される化合物を還元して、式： ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ｊ） （式中、Ｒ＾１、Ｒ＾２、ｎおよび実線と点線により表
   わされる記号はそれぞれ前と同じ意味） で示される化合物またはその塩を得る方法からなる、一
   般式： ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） （式中、Ｒ＾１、Ｒ＾２、Ｒ＾３、ｎおよび実線と点線
   により表わされる記号はそれぞれ前と同じ意味）で示さ
   れる化合物の製造法。 １５）一般式： ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） （式中、Ｒ＾１はヒドロキシ基または保護されたヒドロ
   キシ基、Ｒ＾２は水素、ヒドロキシ基または保護された
   ヒドロキシ基、Ｒ＾３はメチル基、エチル基、プロピル
   基またはアリル基、ｎは１または２の整数、実線と点線
   により表わされる記号は単結合または二重結合を意味す
   る） で示される化合物またはその医薬として許容される塩を
   含有する免疫抑制剤または抗菌剤。 １６）微生物ストレプトミセス・ツクバエンシスＮｏ．
   ９９９３の生物学的純粋培養物。 １７）微生物ストレプトミセス・ハイグロスコピカス・
   サブスプ・ヤクシマエンシスＮｏ．７２３８の生物学的
   純粋培養物。