JPS61146196A - Ｈ↓２ｏ↓２の測色的測定を改善するための方法び試薬 - Google Patents

Ｈ↓２ｏ↓２の測色的測定を改善するための方法び試薬

Info

Publication number
JPS61146196A
JPS61146196A JP60285929A JP28592985A JPS61146196A JP S61146196 A JPS61146196 A JP S61146196A JP 60285929 A JP60285929 A JP 60285929A JP 28592985 A JP28592985 A JP 28592985A JP S61146196 A JPS61146196 A JP S61146196A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
reagent
superoxide dismutase
oxidase
toluidine
ethyl
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
JP60285929A
Other languages
English (en)
Other versions
JPH0577399B2 (ja
Inventor
ヨアヒム・ジーデル
アルベルト・レーダー
ヨアヒム・ツイーゲンホルン
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Roche Diagnostics GmbH
Original Assignee
Boehringer Mannheim GmbH
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Boehringer Mannheim GmbH filed Critical Boehringer Mannheim GmbH
Publication of JPS61146196A publication Critical patent/JPS61146196A/ja
Publication of JPH0577399B2 publication Critical patent/JPH0577399B2/ja
Granted legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/26—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase
    • C12Q1/28—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase involving peroxidase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/26—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は、Ｈ２Ｏ２供給オキシダーゼによって生成され
るＨ２Ｏ２の測色的測定を、発色系を添加しかつ形成さ
れた色素を測定することによって改善する方法及び試薬
に関する。
従来の技術 Ｈ２Ｏ２供給オキシダーゼ反応の利用は、水性中性媒体
中でのＨ２Ｏ２の簡単で正確な検出法の開発によって、
従来から酵素的分析において著しくＸ要になった。特に
この重要性は、血清又は血漿又は尿のような体液中に含
有された、高い臨床診断的調節値を有する物質の日常的
卵定についていえる。
最終的に測定すべき物質から、前記のような特別のオキ
シダーゼ反応を用いて適当な、好ましくは酵素的な転換
反応を予め行うことによって直接又は間接的に形成され
るＨ２Ｏ２の定量的測定のためには、電気化学的測定法
の他に好ましくは測色的検出法が用いられる。さらに１
　トリンダータイプ（Ｔｒｉｎｄｅｒ−Ｔｙｐ　）　’
の検出法が特に有用であることが判明したが、同検出法
の場合は、ペルオキシダーゼｍ、ｃ、１．１１．１．７
の存在でフェノール又はフェノール誘導体又は置換アニ
リン及び４−アミノアンチピリンから、使用されたＢ２
０．量と比例関係にある量及び強さを有する赤乃至紫色
の色素が形成される。
さらにまた類似の原理に基く色素指示薬系も若干重要に
なったが、この場合には発色剤（Ｋｕｐｐｌｅｒ　）と
して４−アミノアンチピリンの代りに、６−メチル−２
−ペン・戸チアゾリノンーヒＰう・戸ン（’ＭＢＴＨ’
）又は２′位でスルホン化された同族化合物（’　ＭＢ
ｒｍ−ｓ　′）が使用され、しかも好ましくは置換アニ
リンと組合せて使用される（例えばＣｈｉｎ、　Ｏｈｅ
ｍ、　１７．１１５４〜１１５９頁（１９７１））。し
かし、これらの系は好ましくは、≦７の…値を有する試
薬中においてのみ使用されうろことが判明し、他の場合
にはＨ２Ｏ２の不在ですでに自動酸化による呈色が起り
、これによって発色が比較的急速になり、ひいては即用
試薬の貯蔵能力が明らかに限定されることになる。
例えば、デヒドロｒナーセ゛の反応を基礎とし、ＮＡＤ
（Ｐ）Ｈの形成又は使用量がＵＶ範囲で測定される試験
法と比べた前記種類の分析法の利点は、分析試薬の安定
性が大抵間らかに長くなりかつ可視波長範囲における試
料物質の固有の色又は固有の濁りによる試験への干渉が
著しく小さくなり、部分的には無視することさえできる
ことの他に、特に検出反応の感度に関する若干の融通性
（調節性、作用性）にあり、従ってこれらの利点は適用
される発色反応のために原理的に適当な発色化合物のた
めに用いられる。
しかし前記の融通性には上の方に限界が設けられている
。例えば、ＮＡＤ（Ｐ）＋依存デヒーロデナーゼ反応の
検出感度にほぼ比較できる検出感度を有する色素指示薬
系ペルオキシダーゼ／フェノール／４−アミノアンチピ
リン〔ゝメソツヅ・イン・エンディマチック−アナリシ
ス（Ｍｅｔｈｏｄｓ　　ｉｎ　　Ｋｎｇｙｍａｔｉｃ　
　Ａｎａユｙｓｉｓ　　）　　　’、　第　６版（パイ
ンハイム（Ｗｅｉｎｈθ１ｍ）在フエルラークｅヒエミ
ー（Ｖｅｒｌａｇ　Ｃｈｅｍｉｅ　）、１９８３Ｅ第１
巻、第２．６．１．２章参照〕を用いて、比較的高濃度
の血清成分、例えば全コレステリン（脂肪酸エステル化
遊離コレステリンの総量、標単濃要約５．７　ｍ　ｍａ
ｌ　／　ｌ　；コレステリンエステラーゼＥ、０．３．
１゜１．１６及びコレステリンオキシダーゼＩＩ！、Ｃ
，１，１，５，６によって触媒される、最終的にＨ２Ｏ
２を形成する反応のカップリングを介して検出）は、分
析試薬２．０ゴに対して僅か２０μｍの試料を使用する
場合でさえ、高い精度（標準濃度範囲での測定信号：　
５４６Ｍｍ及びλｍａｘ　−５００ｎｍでの吸光度単位
約０．２６及び０．３８　）をもってかつ試料固有吸光
度を無視して難なく測定されうる。
これと反対に、例えば血清クレアチニンの測定（クレア
チニナーゼに、Ｃ，，５，５，２，１０、クレアチナー
ゼｚ、ａ、６．５．６．５及びサルコシンオキシダーゼ
ｌｌｉ、０．１．５，６．ｌによって触媒される反応を
順次に行うことによって検出）の場合（ｐＨ最適値約８
．０）には、現在最も鋭敏な公知のトリンダ−（Ｔｒｉ
ｎｄｅｒ　）色素指示薬系〔４−アミノアンチピリンに
対する発色剤としての２．４．６−ドリヨードー及び２
，４．６−）リゾロム−６−ヒＶロキシ安息香酸；発色
剤としての７エノールよりも約５倍高いＨ２Ｏ２検出感
度−０１ｉｎ。
Ｏｈｅｍ、　２６．１０６２頁（１９８０）及び鵬。
ａｌｉ、ｎ、　Ｂｉｏｃｈｅｍ、　’ｌ　１．４３０〜
４６６頁（１９８４））を使用しかつ分析試薬２．０Ｍ
に対して試料１００μｌのよ５に高い用量を用いる場合
ですら、５４６　ｎｍ及びλｍａｘ　−５１０での吸元
度単位約０．０７及び０．１を有するクレアチニン試料
濃度１■／ｅＬｌ（血清中の標進濃度の上限的８８　μ
ｍ＋）１／Ａ！　＝　１　Ｑ／ｅＬｌ　）ごとノｌｌｊ
定信号は、クレアチニンの測定をコレステリン試験に比
較できる十分な精度、つまり決定範囲における約２％の
変動係数をもって実施しうるＫはなお不十分である。
前記目的は原理的には試料／試薬の容量比を高めること
によって達成されうるが、しかしこのような手段の場合
には経験によれば、就中濁った（脂肪血症の、つまりト
リグリセリドの豊富な）試料の分析の場合の測定障害又
は試料物質中に潜在的に含有されていて、発色反応にマ
イナスの影響を与える他の還元性成分、すなわちアスコ
ルビン酸、ビリルビン及び特定の薬剤による測定障害が
、明らかに重要問題になることを考慮しなければならな
い。
また同様なことは、低濃度の他の血清中代謝産物、例え
ば尿酸（血清中の標進値１４０〜４００μｍａｎ／Ｉｌ
）についてもいえる。血清中の尿酸の測定（ウリカーゼ
ＬＣ，１，７゜６．６を用いる）の場合には、試料空値
の併用（これは血清クレアチニンの測定の場合には、同
時に著量で存在するクレアチンのために不可欠である）
を放棄することができ、ひいては分析の実施を容易にす
るために、通常分析試薬２８０Ｍ当り最大５０μｌの試
料しか使用されない。このような条件下ではトリヨード
及びトリブロムヒドロキシ安息香酸／４−アミノアンチ
ぎリン色素指示薬系を用いると決定範囲で同様に比較的
低い吸光度値（５４６ｎｍで約１０４５〜０゜１６及び
５１　Ｑ　ｎｍでＯ，［］　６　ｄ〜０．１８６　＞が
得られる。
最後にまた、例えば前記反応図式によるクレアチニンの
測定の場合、トリンダータイプの色素指示薬系（４−ア
ミノアンチピリンのフェノール系カップリングパートナ
−としてはトリブロム−又はトリヨードヒドロキシ安息
香酸又はアニリン系カップリングパートナ−としてはＮ
−エチル−Ｎ−β−スルホエチル−ｍ−トルイジ７、’
　ＥＳＴ　’）を用いると、種々の濃度の水性クレアチ
ニン標鵡を使用する場合、生じる検量線は座標系の原点
を通らず（Ｙ軸：試料中のクレアチニンの濃度；Ｙ軸：
吸光度単位での色素測定信号）、約０．０１５（）＋７
プロムヒドロキシ安息香酸／４−アミノアンチピリン系
、λ−５４６ｎｍ　）又は約０．０１５　（ｎｓＴ／４
−アミノアンチピリン系、λ＝　５７８　ｎｍ　）の大
きさのＹ軸の負の部分を有し、これはともかく標準値信
号の約２０〜５５９６を占め（例１及び例４参照）かつ
特に一点検量（Ｅｉｎｐｕｎｂｔ−Ｅｉｃｈｕｎｇ　）
の場合には、このような試験の検量を著しく狂わせるこ
とが判明した。
発明の解決しようとする問題点 従って本発明の課題は、Ｈ２Ｏ２供給オキシダーゼの反
応の検出そのものの感度を明瞭に高めることができかつ
対応する検量線を作る際の軸部分の出現を防止し、従っ
てＨ２Ｏ２供給オキシダーゼの反応の検出を著しく改善
する方法を創作することである。
問題点を解決するための手段 前記課題は本発明により、ｌ１２ｏ２供給オキシダーゼ
によって生成されるＨ２Ｏ２の測色的測定を、発色系を
添加しかつ形成された色素を測定することＫよって改善
する方法において試薬溶液にスーパーオキシドジスムタ
ーゼ （Ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｄｉｓｍｕｔａｓｅ　）　Ｅｉ、
０．１．１５．１．１を加えることを特徴とする前記方
法によって解決される。
本発明の範囲内では特にＣｕ、Ｚｎ−スーパーオキシド
ジスムターゼが有利であると判明した。
この酵素は赤血球、例えば牛血液の赤血球がら得られる
。該酵素は銅及び亜鉛各２ｍ０１及び約３３．０００　
Ｄの分子量を有する。
しかしまたＯｕ、Ｚｎ−スーパーオキシドジスムターゼ
は他の物質、例えば酵母の中にも見出される。
スーパーオキシドジスムターゼは好ましくは１０〜１５
０μｉ／１ｌｌ（試薬溶液）、特に好ましくは２５〜７
５μｇ／ｍｌの量で加える。ここでスーパーオキシドジ
スムターゼ１μｙは市販のスーパーオキシドジスムター
ゼ製剤の約４Ｕに相当する。この関係は、Ｊ、　Ｂ１１
１．　ＯＭｍ、　２４４．６０４９頁（１９６９）に記
載された、スーパーオキシドジスムターゼの活性測定法
に基く。
発色系としては、本発明の範囲では原則として、色素形
成下にＨ２Ｏ２と反応するすべての発色系を、それらの
系がスーパーオキシドジスムターゼ又は場合によって存
在する他の酵素の活性を損う成分を含有しない限り、使
用することができる。多数のこのような発色系は当業者
には公知であって、ここで詳説する心太はない。
トリンダータイプの発色系が有利である。この系は主成
分としてペルオキシダーゼ、フェノール、フェノール誘
導体又はアニリン誘導体及び４−アミノアンチピリンを
含有する。極めて有利なフェノール誘導体は２，４．６
−ドリヨー１”−３−ヒドロキシ安息香酸又は相応のト
リブロム化合物である。有利なアニリン誘導体はＮ−エ
チル−Ｎ−β−スルホエチル−ｍ−トルイジン又はＮ−
エチル−Ｎ−β−ヒｒロキシエチルーｍ−トルイジンで
ある。もう一つの有利な発色系は、ペルオキシダーゼ、
アニリン誘導体及びＭＢＴＨ（５−メチル−２−ベンゾ
チア〜戸すノンーヒｒラデン）又はＭＢＴＨ−８から成
る。この系におけるアニリン誘導体としては、上に挙げ
た２穐の化合物の他に、好ましくはまたＮ。
Ｎ−ジメチルアニリン及びＮ、Ｎ−ジメチルアミン安息
香酸も使用される。
本発明は、サルコシンオキシダーゼ、ウリカーゼ及びオ
キサレートオキシダーゼ （０ｘａｌａｔｏｘｉｄａｓｅ　）のようなＨ２Ｏ２供
給オキシダーゼの場合に極めて優れた効果を示す。しか
しまた他のＨ２Ｏ２供給オキシダーゼも使用してよい。
この所見は予想できなかったことであり、現在でも十分
には説明することができない。それというのも同所見は
スーパーオキシドジスムターゼ、つまり次の反応： ２０２−　＋　２Ｈ”−〉ａ２ｏ□＋０２の触媒の公知
の酵素特性とは一致し得ないからである。
理由１：サルコシンオキシダーゼ又はウリカーゼのよう
なオキシダーゼに関しては、これら酵素がそれぞれの基
質、つまりサルコシン又は尿酸の反応の間にＨ２Ｏ２の
他になお著量の０２−イオン基を供給する（これによっ
て上記反応式により追加的なＨ２０□の生成、ひいては
スーパーオキシドジスムターゼによるＨ２０？検出度検
出改善が説明されうる）ことは知られていない：例えば
Ａｇｒｉｃ、　Ｂｉｏｌ、　Ｃｈｅｍ、　Ａ　４．１６
９１頁（１９８０）には、シリンドロカルプム・ジジム
ム（Ｏｙｌｉｎｄｒｏｃａｒｐｕｍ　ｄｉｄｙｍｕｍ　
）　Ｍ　−１から得られるサルコシンオキシダーゼがサ
ルコシン酸化の際に理論量でＨ２Ｏ２を生成することが
はっきり指摘されている。コリネバクテリウム（Ｏｏｒ
ｙｎｅｂａａｔｅｒｉｕｍ　）から得られるサルコシン
オキシダーゼの場合にも同様な確認がなされた（　Ｊ、
　Ｂｉｏｃｈｅｍ。８９．５９９頁（１９８１’）　）
。
またウリカーゼによる尿酸酸化の場合にもＨ２Ｏ２の生
成の他に超酸化物（Ｅｌｕｐｅｒｏｘｉｄ　）イオン基
の生成は検出されなかった（　Ａｒｃｈ。
Ｂｉｏｃｈｅｍ、　Ｂｉｏｐｈｙｓ、　１６３．５５９
頁（１９７４））。
理由２ニス−パーオキシドジスムターゼを使用する場合
、部分的にはスーパーオキシドシスムターゼをしのぎさ
えする、抜群の０２−″−不均化効果を有する銅錯体、
例えばＯｕ　（アセチルサリチレート）２、Ｏｕ　（リ
シン）２又はＯｕ２（インドメタシン）　４　ＣＢｕｌ
ｌ＋ｅｕｒｏｐ。
Ｐｈｙｓｉｏｐａｔｈ、　ｒｅｓｐ、　１７　（５ｕｐ
ｐ１．　）、７６（１９８１）３によって、オキシダー
ゼ試薬中の１００μｍｏｌ／Ａ’までの濃度（以下の例
中で使用されるスーパーオキシドジスムターゼの最高濃
度でも６．８μｍｏｌ／ＪにすぎないりでさえＨ２Ｏ２
の検出は改善されないという所見も、前記反応式による
スーパーオキシドシスムターゼの効果と矛盾する。
さらにスーパーオキシジスムターゼの効果は、軸部分の
除去に関しても、前記反応式により説明することはでき
ない、それというのもたとえ前記オキシダーゼによる若
干の０２−の生成が文献記載に反してあったとしても、
０２−の住或は基質反応がほぼ零になれば同様にほぼ零
になるにちがいないからである。
最後に、Ｈ２Ｏ２供給オキシダーゼの反応の検出を改善
する、スーパーオキシドゾスムーダの添加の効果は、燐
酸塩を含まない試薬（例えばＴＦｌｉＳ　Ｉ　Ｑ　Ｏｍ
ｍｏｌ／７によって緩衝）中でも、燐酸塩（試薬１００
〜１５０　ｍｍｏ１／ｌｏ中）濃度）で緩衝した溶液中
と同様に顕著である。しかし文献には牛赤血球起源の極
めて優れたスーパーオキシドジスムターゼの場合には、
その酵素活性は燐酸塩によって著しく阻害され、詳しく
はわずか１０　ｍｍｏｌ／ｌの燐酸塩濃度の場合にすで
に約５０％まで阻害されることが記載されている（　Ｂ
ｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　２５．２０７９頁（１９８４
）〕。
本発明の他の対象は、Ｅ２０□供給オキシダーゼ、発色
系、緩衝剤及び場合によっては補酵素を含有するＨ２Ｏ
２の測色的測定を改善するための試薬において、このも
のがスーパーオキシｒジスムターゼを含有することを特
徴とする前記試薬である。
方法に関して上になされた記載は該試薬の組成について
も同様に適用される。血清成分の分析の場合には、本発
明による試薬に、さらに、脂肪血症試料をバックブラウ
ンｐの濁りによる訪客なしに測定できるように、例えば
非イオン界面活性剤、Ｎａ−コレート（０ｈＯ１ａｔ　
）のような胆汁酸の塩及びリパーゼに、Ｏ０６゜１．１
．３の混合物の形の明化剤を加えるのが有利である。最
後に該試薬は好ましくはＮａ−アジ−〇ような防鳥剤、
アスコルビン酸及びビリルビンを含有する試料によって
惹起されるＨ２Ｏ２の検出反応の妨害を除去するための
薬剤すなわちアスコルベートオキシダーゼ及びカリウム
７エロシアニド、ならびに少量のＥＤＴＡのような重金
属錯形成剤も含有することができる。これらの物質、発
色系の成分及び緩衝剤の量割合及び濃度は公知試薬の量
割合及び濃度に等しいので、ここではさらに詳述する必
要はない。
また本発明による試薬は、不活性の、場合により多層の
固体支持体物質上に存在してもよい。
有利にはテスト紙上に含浸されて存在しており、所謂１
乾式化学的“分析を許す。
本発明による添加物によって、Ｈ２Ｏ２の検出感度は、
特に有利な、トリンダータイプの発色系の場合には、約
２２〜３４％増大させることができ（使用されるオキシ
ダーゼ反応及び当該分析試薬の種類に応じる）、同時に
検量線をつくる際の軸部分の出現（トリンダータイプの
指示薬系及びカップリングパートナ−とじてＭＢＴＨ又
はＭＢＴＨ−８ならびにアリニン誘導体を含む指示薬系
の場合）は、回避することができるか又は少なくとも分
析的にもはや問題にならない程度Ｋまで減少させること
ができる。
次に本発明を、実施例により詳述する（図面参照）。
実施例 例　　１ クレアチニンの完全酵素的測定の際の１（２０２検出の
改善 ａ）発色試薬： ＴＥＳ’Ｋｏａ　（ｐＨ７，９）　　　　　　１００ｍ
ｍｏ１／ｌ！ＮＩＬＯＩ　　　　　　　　　　　　　１
５０　　　ｕ４−アミノアンチピリン　　　　　　　０
．７５　　　〃カリウム７エロシアニド　　　　　　　
　１０μｍｏｌ／ｊ’ＢＤＴＡ　　　　　　　　　　　
　　　　　　　５［１ｔｔりｖアｆ二ｆ−セｍ、ｃ、３
．５．２．１０　　　２０　　　Ｕ／１クレアチナーゼ
Ｆｉ、０．３．５．３．３　　　　　１０　　　Ｕ７ｖ
ｔｔペルオキシダーゼＥ、Ｏｏｌ、１１．１．７　　　
　　２　　Ｕ／ｄスーパーオキシｒジスムターゼ　　　
　０〜１５０μｉ／ｌ１ｌ（２０〜６００Ｕ／ｄ ｂ）試験二Ｔ（温度）−２５℃、λ−５４６ｎｍ。
ａ−１２ＯｃｒＩＬ リ　試料としては、プレシセット（Ｐｒｅｃｉｓｅｔ■
）・クレアチニン〔ベーリンガー・マンハイムＧｍｂＨ
裂、Ｋａｔ、　−４１２５５４７３を使用した。試料中
のクレアチニン濃度１１ｎ９／ｄ！！で得られる吸光度
差を可能な軸部分効果から独立的に測定するためにすべ
ての槓準（１〜６ｒｎ９／ｄＪ）を試料として使用し、
検量線〔クレアチニンｍ９／ｄｌｌ試料（Ｙ軸）に対す
るｎｍ（Ｙ軸）〕の勾配は△Ｅ／Ｗｄ１クレアチニンの
尺度として用いた。
第１図のグラフ（実線）は、発色試薬中に含有されたス
ーパーオキシドジスムターゼの活性（０，２，５，１０
，５０，１００，２００及び５００Ｕ／Ｉｔｌ）Ｋ対す
る検量線の勾配の依存関係を示す。グラフから判るよう
に、スーパーオキシげジスムターゼを含まない試薬に対
して試薬中のスーパーオキシドジスムターゼの濃度的５
Ｑｔｒ／＋ｊから、約６１俤のＨ２Ｏ２検出感度勾配を
有する平坦域が得られる。成程 １５０μＩＩ〜ヲ越よるスーパーオキシドジスムターゼ
濃度を増大させることは容易に′可能であるが、達成で
きる最大感度勾配に関する改善はなく、従って経済的観
点から見て好ましくない。
スーパーオキシドジスムターゼを添加しない試薬に関す
るＹ軸の負の部分（検量線）は０．０１５吸光度単位で
あったが、５０〜５００シゲのスーパーオキシドジスム
ターゼ活性を有する試薬の場合には０．００２吸光度単
位にすぎなかった。
発色剤として２，４．６−）リプロム−６−ヒｒロキシ
安息香酸の代りに相応のトリヨード化合物を使用する場
合にも、結果は変らない。
前記の発色試薬においてクレアチニナーゼのみ又はクレ
アチニナーゼ及びクレアチナーゼを省略する場合にも、
スーパーオキシドジスムターゼの添加による本発明によ
る効果が失われずに、クレアチン及びサルコシンの測定
が可能である。
例　　２ クレアチニンの酵素的測定の際のＨ２０□検出の改善 ａ）発色試薬： 例１から得られる試薬と同様。
さらに明化剤としてＯ−２５％　ｎ−デカノール−＆　
ＩＪグリコールエーテル［ルチンゾール（Ｌｕｔｅｎｓ
ｏｌ”　）　ＯＮ　　５０　］、Ｎａ　−ニアレート５
ｍｍｏｌ／ｌ及びリパーゼ〔カンジダ・シリントラシア
（０ａｎｄｉｄａ　ｃｙｌｉｎｄｒａｃｅａ　）起源〕
２Ｕ／ｄを加えた。
ｂ）試験： 例１、ｂ）と同様の試験及び測定の評価。測定結果は第
１図（断線−一、三角形としての測定点）に図示しであ
る。
例　　３ クレアチニンの酵素的測定の際のＨ２Ｏ２検出の改善 ａ）発色試薬： 例２から得られる試薬ａ）と同様。
ＴＢＳ緩衝剤の代りに燐酸カルシウム（ｐＨ７，８）１
５０　ｍｍｏｌ／Ａ’を使用しかつＭａｉｌの添加を省
略した。
ｂ）試験： 例１、ｂ）による試験及び測定評価。測定結果は第１図
（断線−ｍ−、十字としての測定点）Ｋ図示しである。
例　　４ クレアチニンの酵素的測定の際のＨ２Ｏ２検出の改善 ａ）発色試薬： 例３から得られる試薬ａ）と同様。しかし４−アミノア
ンチビリンの発色剤としてトリブロムヒドロキシ安息香
酸の代りにＮ−エチル−Ｎ−β−スルホエチル−ｍ−ト
ルイジン（８，６ｍｍｏｌ／Ｊ　）　ｔ−使用した。試
薬中の、Ｚｎ−スーパーオキシドジスムターゼの活性は
０及び２００　Ｕ／ｄであった。
ｂ）試験： 例１、ｂ）により行った、但しλ−５４６ｎｍではなく
、５７８　ｎｍである。結果（検量線）は第２図に図示
しである。この色素指示薬系の感度は酸根、例１〜６の
系の感度よりも低いけれども、この場合には、スーパー
オキシドジスムターゼの添加はＨ２Ｏ２検出感度の明ら
かな増大をもたらしく約１７．６％）、かつスーパーオ
キシドジスムターゼを添加しない試薬で測定した、検′
ｊｋ線のＹ軸部分（−０２Ｏ１５吸光度単位）を事実上
完全に消滅させる。
例　　５ 尿酸の酵素的測定の際のＨ２０□検出の改善ａ）発色試
薬： 燐酸カリウム（ｐＨ８２Ｏ）　　　　　　　　　１００
ｍｍｏ１／ｌ！４−アミノアンチピリン　　　　　　　
　０．２〃力リウム７エロシアニト５０μｍｏｌ／Ａ！
ＥＤＴＡ、　　　　　　　　　　　　　　　　　　１　
ｍ　ｍｏ’ｌ　／　７３Ｈａ−コレート　　　　　　　
　　　　　　　　７ｍｍｏ’ｌ／ｌクリカーゼに、０．
１゜７．３．３　　　　　　　　　　　　１　Ｕ／ゴペ
ルオキシダーゼに、Ｏｏｌ。１１゜１゜７　　　　　６
　〃スーパーオキシドジスムターゼ　　　　　０〜５０
０　〃ｂ）試験 Ｔ−２５℃、λ−５４６ｎｍＸｄ＝　１．０ｃＩｒＬリ
　試料としては、プレシセット（Ｐｒｅｃｉｓｅｔ■）
尿酸（ヘ−ＩＪンカー書マンハイムＧｍｂＨ。
Ｋａｔ、−４１２５６２８）を使用する。尿酸ＩＷ／ｄ
Ａ’で得られる吸光度変化の測定のために例１〜３と同
様にして種々の尿酸標進（２〜１２１１ｖ／６１１　）
を用イテ検量線ヲ作す、その勾配をΔに／１■／ｄｌ尿
酸の尺度として使用した。
第６図は、発色試薬中で使用されたスーパーオキシドジ
スムターゼの量（０，２，５，１０゜５０．１００，２
００及び５００ＴＪ／７１１７）Ｋ対する前記勾配（Δ
Ｅ／１　ｍ９／６　／尿酸）の依存関係を示す。
例１〜４の場合と同様に１尿酸の発色試薬中では、４−
アミノアンチピリンの発色剤としてトリプロムヒＶロキ
シ安息香酸の代りに相応のトリヨーげ化合物又はＮ−エ
チル−Ｎ−β−スルホエチル−ｍ−トルイジンのような
アニリンを使用しても、スーパーオキシドジスムターゼ
の添加によるＨ２Ｏ２検出の改善が失われない。
例　　６ シュウ酸の酵素的御１定の際色素指示薬系としてオキサ
レートオキシダーゼ冗、０．１．２．６．４及びペルオ
キシダーゼ／　ＭＢＴＨ−８／　Ｎ　、　　Ｎ−ジメチ
ルアニリン混合物を用いてＨ２Ｏ２検出を改善すること
。
ａ）試薬： １、コハク酸緩衝液（０，５ｍｍｏｌ／Ａ’　＊Ｐ’　
−３，８）：コハク酸二ナトリウム塩（６水和物）６．
７５．９を蒸留水ＪＱＱｄ中に溶かし、２　ＮＨＯｌで
ｐＨ３，８（２５℃）に調節しかり補充して５００−に
する。
２、ＭＢＴＨ−８ ３、Ｎ、Ｎ−ジメチルアニリン（０，２１ｍｏｌ／ｌ）
：Ｑ、５　Ｎ　ＭＯ１５，９１１Ｃ１中にジメチルアニ
リン１００μＥを溶解する。
６、ペルオキシダーゼ： 蒸留水１Ｍ中に１１ｎ９（−約１０００）を溶かす。
４、オキサレートオキシダーゼ： 蒸留水１．ｗ／中Ｋ　Ｏ，３Ｕ　／！ｎ９を有する酵素
３．３６■を溶かす。
５、牛歩血球からのスーパーオキシドジスムターゼ（純
粋酵素）： 蒸留水１ゴ中に１２．５１１５１溶かし、これから蒸留
水１−当り酵素０．１２５．０．２５０．２．５０及び
５．００１Ｒ９に稀釈したもｏ’６製造する。
６、オキサレート溶液： シュウ酸を水に溶かして１．２．６．４．５及び６１ｎ
ｙ／ｄｌ（１００ｅｓ遊離に対して）の濃度にする。
ｂ）発色基礎試薬： ａ）１．のコハク酸緩衝剤１００Ｍ中ｉｃＭＢＴＨ−８
２，３１に９を溶かし、次Ｋ　ａ）３．０ジメチルアニ
リン溶液４μｌを加えて、十分に混合する。
コノ混合物の各１０　’　Ｉｃ　Ｈ２Ｏ０，１０ｍｌ又
はａ）５．のスーパーオキシドジスムターゼ溶液を加え
（最終濃度ニス−パーオキシダジスムターゼ１．２５．
２．５０．２５．０．５０．０及び１２５．０μｊｉ／
ｍｌ基礎試薬）、混合する。
Ｃ）試験： Ｔ−６７℃、λ−５７８ｎｍ、　　ｄ−１２ＯｃｒＩｔ
脣）一連の測定につき唯１個の試薬９値を一緒に使用す
ればよい。
種々の量のスーパーオキシドジスムターゼを加えた発色
基礎試薬を用いて得られた検量線の評価によって、Ｙ軸
部分（Ｙ軸：吸光度単位、Ｘ軸：シュウ酸試料譲度）の
除去に対するスーパーオキシドジスムターゼの明瞭な正
の影響が明らかになった。
表　　１ 基礎試薬中の種々のスーパーオキシドジスムターゼ濃度
に関して種々の濃度のシュウ酸試料を用いて確定された
検量線のＹ軸部分
【図面の簡単な説明】
第１図は例１〜５ＶＣ関するスーパーオキシドジスムタ
ーゼの活性とＨ２ｏ２検出感度との関係を示すグラフ、
第２図は例４による発色系の感度を示すグラフ、第６図
は例５に関する第１図と同様なグラフである。 ＦＩＧ、１ ０［Ｓ−界面活性剤を含：ｆｘａ−緩衝液□−（ｔｌｌ
＞ΔＴＥＳ　　　　ｔｔ　　　を含む　　　〃−′タリ
２）十に汗　　　　ｒｒ　　　　　　　　　　　　〃−
−−、　　−＜円ろＡＡ、−２Ｏ＋３０　　　　９＝　
、［１３％　　（スーパーオキンドゾスムターゼ含有せ
ず）ＦＩＧ、３

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 １、Ｈ＿２Ｏ＿２供給オキダーゼによつて生成されるＨ
    ＿２Ｏ＿２の測色的測定を、発色系を加えかつ形成され
    た色素を測定することによつて改善する方法において、
    試薬溶液にスーパーオキシドジスムターゼＥ．Ｃ．１．
    １５．１．１を加えることを特徴とする前記方法。 ２、スーパーオキシドジスムターゼ１０〜 １５０μｇ／ｍｌ試薬溶液を加える特許請求の範囲第１
    項記載の方法。 ３、スーパーオキシドジスムターゼ２５〜 ７５μｇ／ｍｌ試薬溶液を加える特許請求の範囲第２項
    記載の方法。 ４、Ｃｕ−、Ｚｎ−スーパーオキシドジスムターゼを使
    用する特許請求の範囲第１項から第３項までのいづれか
    １項記載の方法。 ５、発色系として、ペルオキシダーゼ、フェノール又は
    フェノール−又はアニリン誘導体及び４−アミノアンチ
    ピリンを含有するトリンダータイプの発色系を使用する
    特許請求の範囲第１項から第４項までのいづれか１項記
    載の方法。 ６、ペルオキシダーゼ、アニリン誘導体及びＭＢＴＨ又
    はＭＢＴＨ−Ｓから成る発色系を使用する特許請求の範
    囲第１項から第４項までのいづれか１項記載の方法。 ７、フェノール誘導体として、２，４，６−トリヨード
    −３−ヒドロキシ安息香酸又は相応のトリブロム化合物
    を使用する特許請求の範囲第５項記載の方法。 ８、アニリン誘導体としてＮ−エチル−Ｎ−β−スルホ
    エチル−ｍ−トルイジン又はＮ−エチル−Ｎ−β−β−
    ヒドロキシエチル−ｍ−トルイジンを使用する特許請求
    の範囲第５項記載の方法。 ９、アニリン誘導体として、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン
    、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ安息香酸、Ｎ−エチル−Ｎ−
    β−スルホエチル−ｍ−トルイジン又はＮ−エチル−Ｎ
    −β−ヒドロキシエチル−ｍ−トルイジンを使用する特
    許請求の範囲第６項記載の方法。 １０、Ｈ＿２Ｏ＿２供給オキシダーゼとして、サルコシ
    ンオキシダーゼ、ウリカーゼ又はオキサレートオキシダ
    ーゼを使用する特許請求の範囲第１項から第９項までの
    いづれか１項記載の方法。 １１、Ｈ＿２Ｏ＿２供給オキシダーゼ、発色系、緩衝剤
    及び場合により補酵素を含有する、Ｈ＿２Ｏ＿２の測色
    的測定を改善するための試薬において、該試薬がスーパ
    ーオキシドジスムターゼを含有することを特徴とする前
    記試薬。 １２、Ｃｕ−、Ｚｎ−スーパーオキシドジスムターゼを
    含有する特許請求の範囲第１１項記載の試薬。 １３、発色糸がトリンダータイプであつて、ペルオキシ
    ダーゼ、フェノール又はフェノール−又はアニリン誘導
    体及び４−アミノアンチピリンを含有する特許請求の範
    囲第１１項又は第１２項記載の試薬。 １４、発色系がペルオキシダーゼ、アニリン誘導体及び
    ＭＢＴＨ又はＭＢＴＨ−Ｓを含有する特許請求の範囲第
    １１項又は第１２項記載の試薬。 １５、フェノール誘導体として、２，４，６−トリヨー
    ド−３−ヒドロキシ安息香酸又は相応のトリブロム化合
    物を含有する特許請求の範囲第１３項記載の試薬。 １６、アニリン誘導体として、Ｎ−エチル−Ｎ−β−ス
    ルホエチル−ｍ−トルイジン又はＮ−エチル−Ｎ−β−
    ヒドロキシエチル−ｍ−トルイジンを含有する特許請求
    の範囲第１３項記載の試薬。 １７、アニリン誘導体として、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリ
    ン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ安息香酸、Ｎ−エチル−Ｎ
    −β−スルホエチル−ｍ−トルイジン又はＮ−エチル−
    Ｎ−β−ヒドロキシエチル−ｍ−トルイジンを含有する
    特許請求の範囲第１４項記載の試薬。 １８、Ｈ＿２Ｏ供給オキシダーゼとして、サルコシンオ
    キシダーゼ、ウリカーゼ又はオキサレートオキシダーゼ
    を含有する特許請求の範囲第 １１項から第１７項記載の試薬。 １９、スーパーオキシドジスムターゼ１０〜１５０μｇ
    ／ｍｌを含有する特許請求の範囲第１１項から第１７項
    までのいづれか１項記載の試薬。 ２０、さらに、明化剤、防腐剤、アスコルビン酸又はビ
    リルビンによる妨害を除去するための薬剤及び重金属錯
    形成体の群からの１種以上の物質を含有する特許請求の
    範囲第１１項から第１４項までのいづれか１項記載の試
    薬。 ２１、該試薬が不活性の、場合により多層の固体支持体
    物質上に存在する特許請求の範囲第 １１項から第２０項までのいづれか１項記載の試薬。
JP60285929A 1984-12-20 1985-12-20 Ｈ↓２ｏ↓２の測色的測定を改善するための方法び試薬 Granted JPS61146196A (ja)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE3446637.1 1984-12-20
DE19843446637 DE3446637A1 (de) 1984-12-20 1984-12-20 Mittel zur verbesserung des nachweises h(pfeil abwaerts)2(pfeil abwaerts)0(pfeil abwaerts)2(pfeil abwaerts)-liefernder oxidase-reaktionen und seine verwendung

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JPS61146196A true JPS61146196A (ja) 1986-07-03
JPH0577399B2 JPH0577399B2 (ja) 1993-10-26

Family

ID=6253392

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP60285929A Granted JPS61146196A (ja) 1984-12-20 1985-12-20 Ｈ↓２ｏ↓２の測色的測定を改善するための方法び試薬

Country Status (6)

Country Link
US (1) US5094943A (ja)
EP (1) EP0186134B1 (ja)
JP (1) JPS61146196A (ja)
AT (1) ATE40835T1 (ja)
DE (2) DE3446637A1 (ja)
ES (1) ES8703162A1 (ja)

Families Citing this family (72)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5432285A (en) * 1988-11-03 1995-07-11 Theodoropulos; Spyros Chromogenic substrate to peroxidase enzymes
CA2019711A1 (en) * 1989-06-28 1990-12-28 Takashi Ikegami Sensitization of assays
US5312759A (en) * 1989-12-20 1994-05-17 Iatron Laboratories, Inc. Method for measurement of fructosamines using 1,2-quinones
DE69212334T2 (de) * 1991-11-29 1997-01-09 Oxis Int Sa Verfahren zur bestimmung der sod-aktivität unter verwendung einer autoxydablen zusammensetzung, diesbezüglicher testsatz, autoxydable zusammensetzungen und deren herstellungsverfahren
US5710012A (en) * 1993-08-25 1998-01-20 Actimed Laboratories, Inc. Salt of 6-carboxy-3-methylbenzothiazolone hydrazone hydrate in colorimetric determination of hydrogen peroxide
EP0840798A1 (en) * 1995-05-25 1998-05-13 Actimed Laboratories, Inc. Use of a salt of 6-carboxy-3-methylbenzothiazolone hydrazone hydrate in colorimetric determination of hydrogen peroxide
US5783407A (en) * 1996-04-05 1998-07-21 Beckman Instruments, Inc. Method of measuring bilirubin
US6391005B1 (en) 1998-03-30 2002-05-21 Agilent Technologies, Inc. Apparatus and method for penetration with shaft having a sensor for sensing penetration depth
US6642055B1 (en) 2000-03-31 2003-11-04 Arbogast Pharmaceuticals, Inc. Method for the prediction of preeclampsia and other diseases
US6540675B2 (en) 2000-06-27 2003-04-01 Rosedale Medical, Inc. Analyte monitor
US8641644B2 (en) 2000-11-21 2014-02-04 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Blood testing apparatus having a rotatable cartridge with multiple lancing elements and testing means
US7316700B2 (en) 2001-06-12 2008-01-08 Pelikan Technologies, Inc. Self optimizing lancing device with adaptation means to temporal variations in cutaneous properties
WO2002100460A2 (en) 2001-06-12 2002-12-19 Pelikan Technologies, Inc. Electric lancet actuator
US9226699B2 (en) 2002-04-19 2016-01-05 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Body fluid sampling module with a continuous compression tissue interface surface
US8337419B2 (en) 2002-04-19 2012-12-25 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Tissue penetration device
US9427532B2 (en) 2001-06-12 2016-08-30 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Tissue penetration device
US7981056B2 (en) 2002-04-19 2011-07-19 Pelikan Technologies, Inc. Methods and apparatus for lancet actuation
US9795747B2 (en) 2010-06-02 2017-10-24 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Methods and apparatus for lancet actuation
AU2002348683A1 (en) 2001-06-12 2002-12-23 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for lancet launching device integrated onto a blood-sampling cartridge
US7041068B2 (en) 2001-06-12 2006-05-09 Pelikan Technologies, Inc. Sampling module device and method
US7004928B2 (en) * 2002-02-08 2006-02-28 Rosedale Medical, Inc. Autonomous, ambulatory analyte monitor or drug delivery device
US9314194B2 (en) 2002-04-19 2016-04-19 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Tissue penetration device
US8784335B2 (en) 2002-04-19 2014-07-22 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Body fluid sampling device with a capacitive sensor
US7901362B2 (en) 2002-04-19 2011-03-08 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US7232451B2 (en) 2002-04-19 2007-06-19 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US8267870B2 (en) 2002-04-19 2012-09-18 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for body fluid sampling with hybrid actuation
US7331931B2 (en) 2002-04-19 2008-02-19 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US7175642B2 (en) 2002-04-19 2007-02-13 Pelikan Technologies, Inc. Methods and apparatus for lancet actuation
US7491178B2 (en) 2002-04-19 2009-02-17 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US7976476B2 (en) 2002-04-19 2011-07-12 Pelikan Technologies, Inc. Device and method for variable speed lancet
US7909778B2 (en) 2002-04-19 2011-03-22 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US7547287B2 (en) 2002-04-19 2009-06-16 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US8372016B2 (en) 2002-04-19 2013-02-12 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for body fluid sampling and analyte sensing
US8221334B2 (en) 2002-04-19 2012-07-17 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for penetrating tissue
US9248267B2 (en) 2002-04-19 2016-02-02 Sanofi-Aventis Deustchland Gmbh Tissue penetration device
US7229458B2 (en) 2002-04-19 2007-06-12 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US7297122B2 (en) 2002-04-19 2007-11-20 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US8360992B2 (en) 2002-04-19 2013-01-29 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for penetrating tissue
US9795334B2 (en) 2002-04-19 2017-10-24 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for penetrating tissue
US8579831B2 (en) 2002-04-19 2013-11-12 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for penetrating tissue
US7892183B2 (en) 2002-04-19 2011-02-22 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for body fluid sampling and analyte sensing
US7708701B2 (en) 2002-04-19 2010-05-04 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for a multi-use body fluid sampling device
US7674232B2 (en) 2002-04-19 2010-03-09 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US8702624B2 (en) 2006-09-29 2014-04-22 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Analyte measurement device with a single shot actuator
US8574895B2 (en) 2002-12-30 2013-11-05 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus using optical techniques to measure analyte levels
US7052652B2 (en) 2003-03-24 2006-05-30 Rosedale Medical, Inc. Analyte concentration detection devices and methods
JP2004343275A (ja) * 2003-05-14 2004-12-02 Murata Mach Ltd 画像処理システム及びスキャナ装置
ES2347248T3 (es) 2003-05-30 2010-10-27 Pelikan Technologies Inc. Procedimiento y aparato para la inyeccion de fluido.
US7850621B2 (en) 2003-06-06 2010-12-14 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for body fluid sampling and analyte sensing
WO2006001797A1 (en) 2004-06-14 2006-01-05 Pelikan Technologies, Inc. Low pain penetrating
WO2005033659A2 (en) 2003-09-29 2005-04-14 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for an improved sample capture device
US9351680B2 (en) 2003-10-14 2016-05-31 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for a variable user interface
US7822454B1 (en) 2005-01-03 2010-10-26 Pelikan Technologies, Inc. Fluid sampling device with improved analyte detecting member configuration
US8668656B2 (en) 2003-12-31 2014-03-11 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for improving fluidic flow and sample capture
US8828203B2 (en) 2004-05-20 2014-09-09 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Printable hydrogels for biosensors
US9775553B2 (en) 2004-06-03 2017-10-03 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for a fluid sampling device
EP1765194A4 (en) 2004-06-03 2010-09-29 Pelikan Technologies Inc METHOD AND APPARATUS FOR MANUFACTURING A DEVICE FOR SAMPLING LIQUIDS
US8652831B2 (en) 2004-12-30 2014-02-18 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for analyte measurement test time
US20060281187A1 (en) 2005-06-13 2006-12-14 Rosedale Medical, Inc. Analyte detection devices and methods with hematocrit/volume correction and feedback control
JP5147702B2 (ja) * 2005-09-30 2013-02-20 インテュイティ メディカル インコーポレイテッド 完全に統合された、ウエアラブル又はハンドヘルドモニタ
US8801631B2 (en) 2005-09-30 2014-08-12 Intuity Medical, Inc. Devices and methods for facilitating fluid transport
US9386944B2 (en) 2008-04-11 2016-07-12 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for analyte detecting device
US9833183B2 (en) * 2008-05-30 2017-12-05 Intuity Medical, Inc. Body fluid sampling device—sampling site interface
WO2009148626A1 (en) 2008-06-06 2009-12-10 Intuity Medical, Inc. Medical diagnostic devices and methods
JP5642066B2 (ja) 2008-06-06 2014-12-17 インテュイティ メディカル インコーポレイテッド 体液の試料内に含まれている検体の存在または濃度を決定する検定を行う方法および装置
US9375169B2 (en) 2009-01-30 2016-06-28 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Cam drive for managing disposable penetrating member actions with a single motor and motor and control system
EP2506768B1 (en) 2009-11-30 2016-07-06 Intuity Medical, Inc. Calibration material delivery devices and methods
US8965476B2 (en) 2010-04-16 2015-02-24 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Tissue penetration device
CA2803797A1 (en) 2010-06-25 2011-12-29 Intuity Medical, Inc. Analyte monitoring methods and systems
WO2012109258A2 (en) * 2011-02-07 2012-08-16 University Of Florida Research Foundation, Inc. Compositions adn methods for monitoring oxalate
WO2013020103A1 (en) 2011-08-03 2013-02-07 Intuity Medical, Inc. Devices and methods for body fluid sampling and analysis
JP2016522070A (ja) 2013-06-21 2016-07-28 インテュイティ メディカル インコーポレイテッド 可聴フィードバックを用いた分析物モニタリングシステム

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5966899A (ja) * 1982-10-07 1984-04-16 Ono Pharmaceut Co Ltd 過酸化水素定量方法
JPS59140899A (ja) * 1982-09-29 1984-08-13 Wako Pure Chem Ind Ltd オキシダ−ゼによる基質の新規定量法

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5783287A (en) * 1980-11-14 1982-05-25 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd Elimination of hydrogen peroxide
SE427389B (sv) * 1981-03-02 1983-03-28 Alfa Laval Ab Indikator innefattande en berare och ett reaktionssystem
DE3124590A1 (de) * 1981-06-23 1983-01-27 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Stabilisiertes reagenz zum nachweis von h(pfeil abwaerts)2(pfeil abwaerts)o(pfeil abwaerts)2(pfeil abwaerts)
EP0100217B1 (en) * 1982-07-23 1987-10-07 Wako Pure Chemical Industries, Ltd. Process for quantitative determination of substrate treated with oxidase

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS59140899A (ja) * 1982-09-29 1984-08-13 Wako Pure Chem Ind Ltd オキシダ−ゼによる基質の新規定量法
JPS5966899A (ja) * 1982-10-07 1984-04-16 Ono Pharmaceut Co Ltd 過酸化水素定量方法

Also Published As

Publication number Publication date
EP0186134B1 (de) 1989-02-15
DE3568288D1 (en) 1989-03-23
JPH0577399B2 (ja) 1993-10-26
ATE40835T1 (de) 1989-03-15
US5094943A (en) 1992-03-10
ES8703162A1 (es) 1987-02-16
EP0186134A1 (de) 1986-07-02
ES550288A0 (es) 1987-02-16
DE3446637A1 (de) 1986-07-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JPS61146196A (ja) Ｈ↓２ｏ↓２の測色的測定を改善するための方法び試薬
Fossati et al. Use of 3, 5-dichloro-2-hydroxybenzenesulfonic acid/4-aminophenazone chromogenic system in direct enzymic assay of uric acid in serum and urine.
US3964974A (en) Enzymatic determination of glucose
US4350762A (en) Aminopyrine improved Trinder's reagent and dosing process for hydrogen peroxide from enzymatic oxidation of metabolic substrata with the same
KR920001449B1 (ko) 효소적산화에 의한 검체의 비색적 측정방법 및 시약
CA1155737A (en) Process and diagnostic agents for the detection of redox reactions
US4321397A (en) 4-Aminoantipyrine dye for the analytic determination of hydrogen peroxide
US4247631A (en) Reagent and method for the analytic determination of hydrogen peroxide
CZ278613B6 (en) Process of determining nad(p)h or substrates or enzymes reacting under the formation or consumption of nad(p)h and a testing system for making the same
CS228127B2 (en) Reagencni cinidlo
JPS6134799B2 (ja)
US4547461A (en) Composition, analytical element and method for the quantification of creatine kinase
CA2291912A1 (en) Method and reagent for quantitative determination of 1,5-anhydroglucitol
CS199692B2 (en) Method of photometric determination of hydrogen peroxides
EP0121254B1 (en) Process for determining substrate or enzymatic activity
Majkić-Singh et al. Spectrophotometric assay of xanthine oxidase with 2, 2'-azino-di (3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate)(ABTS) as chromogen
EP0193204B1 (en) Process for determining superoxide dismutase activity
EP0206316B1 (en) Method and test composition for determination of hydrogen peroxide
Masayoshi et al. A new enzymatic method to determine creatine
KR100312056B1 (ko) 아스코르브산의정량방법및정량용시약
US4695539A (en) Process for quantitative determination of substrate treated with oxidase
US4409328A (en) Method and reagent for the determination of glycerol
WO2006030866A1 (ja) 尿酸の定量方法
US5436133A (en) Enzyme assay of biochemical substances
JPS60210998A (ja) 無機リン酸塩の酵素学的測定用試験組成物、試験具及び試験方法