JPS61104798A - 脂質測定用酵素含有組成物 - Google Patents
脂質測定用酵素含有組成物Info
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- JPS61104798A JPS61104798A JP22517684A JP22517684A JPS61104798A JP S61104798 A JPS61104798 A JP S61104798A JP 22517684 A JP22517684 A JP 22517684A JP 22517684 A JP22517684 A JP 22517684A JP S61104798 A JPS61104798 A JP S61104798A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（産業上の利用分野）
本発明は、リボプロティンリパーゼ及び／又はコレステ
ロ−μエステラーゼを含む酵素類と界面活性剤を含む酵
素含有組成物に関する。更に詳しくは、生体成分中の遊
離コレステロール測定又は遊離グリセロ−／Ｉ／ｌ−消
去する中性脂肪測定に際し。
ロ−μエステラーゼを含む酵素類と界面活性剤を含む酵
素含有組成物に関する。更に詳しくは、生体成分中の遊
離コレステロール測定又は遊離グリセロ−／Ｉ／ｌ−消
去する中性脂肪測定に際し。
誤差のない正確な測定を可能とする酵素含有組成物に関
するものである。
するものである。
（従来の技術〕
Ｖングμマｐチ方式金採用している自動分析機の場合１
反応容器は１回目の反応及び測定を終了後、水で洗浄さ
れ、再び２回目の反応に使用されるものである。大半の
分析項目では、この水洗によって１回目の反応液はきれ
いに洗い落され、２回目の反応に影響を及ぼすことはな
い。しかし、例えば総コレステロール測定後に遊離コＶ
スデローＮｔ−測定する場合、大きな正誤差音生ずるこ
とが既に報告されている（特開昭５８−４１３５７号公
報、特開昭５８−６７１９７号公報）。この正誤差をな
くすための従来技術として、遊離コレステロール測定法
において脂質分解酵素の１つであるコレステロールエス
テラーゼの活性を阻害スるオレイン酸ナトリウム、バル
ミチン酸ナトリウム等の脂肪酸アルカリ金属塩を分析用
試薬に共存させる方法がある（特開昭５８−４１３５７
号公報）。
反応容器は１回目の反応及び測定を終了後、水で洗浄さ
れ、再び２回目の反応に使用されるものである。大半の
分析項目では、この水洗によって１回目の反応液はきれ
いに洗い落され、２回目の反応に影響を及ぼすことはな
い。しかし、例えば総コレステロール測定後に遊離コＶ
スデローＮｔ−測定する場合、大きな正誤差音生ずるこ
とが既に報告されている（特開昭５８−４１３５７号公
報、特開昭５８−６７１９７号公報）。この正誤差をな
くすための従来技術として、遊離コレステロール測定法
において脂質分解酵素の１つであるコレステロールエス
テラーゼの活性を阻害スるオレイン酸ナトリウム、バル
ミチン酸ナトリウム等の脂肪酸アルカリ金属塩を分析用
試薬に共存させる方法がある（特開昭５８−４１３５７
号公報）。
他の従来技術として遊離型コレステロール測定試薬にコ
レステロールエステラーゼ狙害剤である界面活性剤トリ
トンＸ−４０５或いはフッ化ナトリウム、ヨウド酢酸を
共存させる方法がある（特開昭５８−６７１９７号公報
）。
レステロールエステラーゼ狙害剤である界面活性剤トリ
トンＸ−４０５或いはフッ化ナトリウム、ヨウド酢酸を
共存させる方法がある（特開昭５８−６７１９７号公報
）。
（発明の解決しようとする問題点）
本発明者らは、更に遊離コレステロールの他の項目につ
いて検討した結果、遊離グリセロールを消去する中性脂
肪の測定においても同様の酵素のキャリーオーバー現象
がみられ、この場合質の誤差を与えることが判明し九。
いて検討した結果、遊離グリセロールを消去する中性脂
肪の測定においても同様の酵素のキャリーオーバー現象
がみられ、この場合質の誤差を与えることが判明し九。
そこで、これらの分析誤差全解消を測るため従来技術の
検討を行った。
検討を行った。
すなわち、脂肪酸アルカリ金属塩を添加すると充分な吸
着阻害が見られなかった。一方、界面活性剤トリトンＸ
−４０５に添加すると脂肪酸アルカリ金属塩よ′りｒｇ
Ｌ着現象はすぐれるが、目的とするトリグリセリド、ド
を測定する場合質誤差を生ずる結果となった。
着阻害が見られなかった。一方、界面活性剤トリトンＸ
−４０５に添加すると脂肪酸アルカリ金属塩よ′りｒｇ
Ｌ着現象はすぐれるが、目的とするトリグリセリド、ド
を測定する場合質誤差を生ずる結果となった。
（問題点を解決するための手段）
本発明者らは、吸着現象による分析誤差の解をを計るた
めに、さらに鋭意検討を重ねた結果、測定系の活性値に
悪影響を及ぼさないで、しかも合成樹脂製反応容器への
吸Ｈを阻止する。即ち誤差のない正確な測定値が得られ
る点で、従来技術よシ極めて効果的な特殊構造を有する
界面活性剤？含む脂質測定用の酵素含有組成物を見い出
し、本発明に至った。
めに、さらに鋭意検討を重ねた結果、測定系の活性値に
悪影響を及ぼさないで、しかも合成樹脂製反応容器への
吸Ｈを阻止する。即ち誤差のない正確な測定値が得られ
る点で、従来技術よシ極めて効果的な特殊構造を有する
界面活性剤？含む脂質測定用の酵素含有組成物を見い出
し、本発明に至った。
すなわち本発明はリポプロティンリパーゼ及び／又ハコ
レステロ、−ルエステラーゼと下記一般式で表わされる
界面活性剤の少なくとも一種を含有する酵素含有組成物
である。
レステロ、−ルエステラーゼと下記一般式で表わされる
界面活性剤の少なくとも一種を含有する酵素含有組成物
である。
（Ｂ）ｍ
（式中ＳＡ＝水素原子又は炭素原子数１〜８の脂肪族基
、指環族基又は芳香族基、Ｂニアリール基又はアラルキ
ル基、−０（ＲＯ）ｎ−：ポリエチレングリコール残基
又はポリエチレンオキシド・ポリプ四ピレンオキＶド・
ブロック共重合体残基、ｎ ： ２〜６０、ｊ ： ０
〜４． ｍ ：１〜５且つ！十ｍ＝１゛〜５ｔ−示す。
、指環族基又は芳香族基、Ｂニアリール基又はアラルキ
ル基、−０（ＲＯ）ｎ−：ポリエチレングリコール残基
又はポリエチレンオキシド・ポリプ四ピレンオキＶド・
ブロック共重合体残基、ｎ ： ２〜６０、ｊ ： ０
〜４． ｍ ：１〜５且つ！十ｍ＝１゛〜５ｔ−示す。
）
本発明に使用されるリボプロティンリパーゼ及ヒ／又ハ
コレスチロールエステラーゼとバ一般に遊離コレステロ
ール又はトリグリセリド測定に用いる酵素である。
コレスチロールエステラーゼとバ一般に遊離コレステロ
ール又はトリグリセリド測定に用いる酵素である。
本発明の酵素含有組成物は他の酵素又は発色剤等を含ん
でいてもよい。例えば中性脂肪を酵素法で測定する際に
使用される種々の酵素及び試薬として、少なくともリポ
プロティンリパーゼを含み。
でいてもよい。例えば中性脂肪を酵素法で測定する際に
使用される種々の酵素及び試薬として、少なくともリポ
プロティンリパーゼを含み。
更にはグリセロキナーゼ、グリセロリン酸オキンダーゼ
、ベルオキＶダーゼ、グリセロール脱水素酵素、ジアホ
ラーゼ等の酵素類、マグネシウム。
、ベルオキＶダーゼ、グリセロール脱水素酵素、ジアホ
ラーゼ等の酵素類、マグネシウム。
鉄等の金属イオン、４−アミノアンチピリン（４ＡＡ）
、Ｎ−エチル−Ｎ（２−ヒドロキシ３−スルホプロピ／
Ｌ／ ） −ｍ−アニシジン（ＥＳＰＡＳ）等の発色基
質類、アデノクン５′−トリホスフエイト（ＡＴＰ）、
ニコチンアミドアデノシンヌクＶオチド（ＮＡＤ）等の
補酵素類、リン酸、グツドバッファー等緩衝液等が含ま
れるが、必ずしもこれらに限定されるものではない。
、Ｎ−エチル−Ｎ（２−ヒドロキシ３−スルホプロピ／
Ｌ／ ） −ｍ−アニシジン（ＥＳＰＡＳ）等の発色基
質類、アデノクン５′−トリホスフエイト（ＡＴＰ）、
ニコチンアミドアデノシンヌクＶオチド（ＮＡＤ）等の
補酵素類、リン酸、グツドバッファー等緩衝液等が含ま
れるが、必ずしもこれらに限定されるものではない。
更に、場合によっては難溶性の脂ｘ’を可溶化するため
のツイーン２０（ポリエチレングリコールンｐビタンエ
ステル〕のような通常使用される界面活性剤も含ま・れ
る。
のツイーン２０（ポリエチレングリコールンｐビタンエ
ステル〕のような通常使用される界面活性剤も含ま・れ
る。
ここで使用されるリポプロティンリパーゼはその起源を
限定されるものではなく、例えばシュードモナス属、ム
コー／Ｉ／属、ストレプトマイセス属。
限定されるものではなく、例えばシュードモナス属、ム
コー／Ｉ／属、ストレプトマイセス属。
セラチア属、エアロモナス属、バチｐス属、クロモバク
テリウム属等に属する微生物で、生産され゛るものｔ−
含む＠ 次ニコレステロールエステラーゼを含む酵素類とは酵素
法で総コＶステロール或いは遊離コレステロ−１ｖｔ−
測定する酵素及び試薬類全含み、例えばコレステロール
エステヲーゼ、コレステロールォキンダーゼ、パーオキ
シダーゼ、４−アミノアンチピリン、リン酸バッファー
、Ｎ−エチル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロ
ピル）−ｍ−）ｙイジン等がちシ、これらに限定される
ものではない。更にコレステロールエステラーゼの起源
、製造法及び精製法には特に限定されるものではない。
テリウム属等に属する微生物で、生産され゛るものｔ−
含む＠ 次ニコレステロールエステラーゼを含む酵素類とは酵素
法で総コＶステロール或いは遊離コレステロ−１ｖｔ−
測定する酵素及び試薬類全含み、例えばコレステロール
エステヲーゼ、コレステロールォキンダーゼ、パーオキ
シダーゼ、４−アミノアンチピリン、リン酸バッファー
、Ｎ−エチル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロ
ピル）−ｍ−）ｙイジン等がちシ、これらに限定される
ものではない。更にコレステロールエステラーゼの起源
、製造法及び精製法には特に限定されるものではない。
本発明に用いる界面活性剤としては、下記一般式で表わ
される化合物である。
される化合物である。
（Ｂ）ｍ
（式中ｓ Ａｈ Ｂ＠ Ｒ＊ Ｊ＊ ｍ＠ ｎは前述の
通シ。）核置換基ＡおよびＢとしては次のものが挙げら
れる。
通シ。）核置換基ＡおよびＢとしては次のものが挙げら
れる。
Ａ：脂肪族基・・・炭素原子数１〜１８の７μキル基。
例えばメチル、エチル、プロピル、ブチル、ベンチ／Ｌ
／、ヘキシ／Ｌ／、ヘプチ／Ｌ／、オクチル。
／、ヘキシ／Ｌ／、ヘプチ／Ｌ／、オクチル。
イソオクチμ、ノニμ、デシ／Ｌ／、ドグシル。
ミリスチル、パルミチ／Ｌ／、ステアリル、オレイルな
ど。
ど。
脂ｅ 族Ｍ・・・シクロペンチル、シクロヘキＶ／し、
シクロヘプチ／Ｉ／、 Ｖクロオクチル、デカリルな
ど。
シクロヘプチ／Ｉ／、 Ｖクロオクチル、デカリルな
ど。
芳ｉ族基・・・フエニＡ／、ペンシル、ナフチル、アン
トラシル、フエナントリｐなど。
トラシル、フエナントリｐなど。
Ｂニアリール・・・フェニル、ナフチ、１１／、アント
ラシル、フエナントリルなど。
ラシル、フエナントリルなど。
アラルキル・・・ベンジル、β−フェニルエｆＡ／。
下記一般式（Ｉ［）で示される基など。
（式中、Ｒ：炭素原子数１〜１８のアルキル、ｍ＝ １
〜３ 、 ｎ ＝ １〜６０ ）本発明で用いる界面
活性剤としては、例えばポリオキンエチレン−〇−フェ
ニルフェノールエーテ／Ｌ／、ポリオキシエチレン−２
−フ二二／ｌ／−４−オクチルフェニールエーテル、ポ
リオキシエチレン４，５．６−ドリベンジＡ／２−フエ
二μフェノールエーテμ、ポリオキシエチレン２−スチ
リルフェノールエーテ／Ｌ／、ポリオキシエチレン２，
５−ジフエニｌレー４−ノ二〜フェニールエーテル、ポ
リオキシエチレン２−ナフチ／Ｌ／４−イソオクチμフ
ェノールエーテル、ポリオキシエチレン４−オクチル２
−ナフチルフェノール等があるが、これらに限定される
ものではない。これらのノニオン界面活性剤のＨＬＢ
（親水性、疎水性のバランス値）は、特に限定するもの
ではないが、特に好ましい範囲はＨＬＢ９〜１７である
。しかし、それ以外の範囲でも他の界面活性剤との組合
せで十分なる効果が得られる。
〜３ 、 ｎ ＝ １〜６０ ）本発明で用いる界面
活性剤としては、例えばポリオキンエチレン−〇−フェ
ニルフェノールエーテ／Ｌ／、ポリオキシエチレン−２
−フ二二／ｌ／−４−オクチルフェニールエーテル、ポ
リオキシエチレン４，５．６−ドリベンジＡ／２−フエ
二μフェノールエーテμ、ポリオキシエチレン２−スチ
リルフェノールエーテ／Ｌ／、ポリオキシエチレン２，
５−ジフエニｌレー４−ノ二〜フェニールエーテル、ポ
リオキシエチレン２−ナフチ／Ｌ／４−イソオクチμフ
ェノールエーテル、ポリオキシエチレン４−オクチル２
−ナフチルフェノール等があるが、これらに限定される
ものではない。これらのノニオン界面活性剤のＨＬＢ
（親水性、疎水性のバランス値）は、特に限定するもの
ではないが、特に好ましい範囲はＨＬＢ９〜１７である
。しかし、それ以外の範囲でも他の界面活性剤との組合
せで十分なる効果が得られる。
該界面活性剤の添加濃度は水性組成物中０．０１Ｗ／Ｖ
％〜１０％で、好ましくは０．１Ｗ／Ｖ％〜３Ｗ／Ｖ％
である。又、リポプロティンリパーゼ又はコレステロ−
〜エステラーゼ等の酵素の最終仕上げ時に添加する場合
は乾性組成中の該酵累重址に対して０．１〜１０００倍
が好ましい範囲であるが、＆加力法によって大きく異な
るため、この範囲に限定するものではない。
％〜１０％で、好ましくは０．１Ｗ／Ｖ％〜３Ｗ／Ｖ％
である。又、リポプロティンリパーゼ又はコレステロ−
〜エステラーゼ等の酵素の最終仕上げ時に添加する場合
は乾性組成中の該酵累重址に対して０．１〜１０００倍
が好ましい範囲であるが、＆加力法によって大きく異な
るため、この範囲に限定するものではない。
界面活、性剤の配合方法としては脂質測定用の水性組成
物に添加する方法と或いはリポプロティンリパーゼ又は
コレステロールエステラーゼ等の製造の最終段階である
凍結乾燥前の酵素液に添加する方法がある。
物に添加する方法と或いはリポプロティンリパーゼ又は
コレステロールエステラーゼ等の製造の最終段階である
凍結乾燥前の酵素液に添加する方法がある。
（実施例°）
次に本発明を実施例により説明する。
実施例１
透明なメタクリル酸相１ｆ１ｔ−反応容器とする、多項
目選択機能をもつシングルマルチ方式の生化学自動分析
機を用いて、グリセロール消去系の中性脂肪を測定した
。この装置の測定条件は１反応容器が間歇的に”移送さ
れ、その停止時に第１の場所でサンプラーから血清試料
ｆ １０ ｍｌへ加し、第２の場所で３００＊ｌＯ第１
表に示した第１試薬ｔ−添加して、所定時間反応させて
遊離グリセロ−／Ｉ／を消去し、第３の場所で、第２試
薬を添加して、脂質の氷解反応及び発色系へ導く酵素反
応を行わせ。
目選択機能をもつシングルマルチ方式の生化学自動分析
機を用いて、グリセロール消去系の中性脂肪を測定した
。この装置の測定条件は１反応容器が間歇的に”移送さ
れ、その停止時に第１の場所でサンプラーから血清試料
ｆ １０ ｍｌへ加し、第２の場所で３００＊ｌＯ第１
表に示した第１試薬ｔ−添加して、所定時間反応させて
遊離グリセロ−／Ｉ／を消去し、第３の場所で、第２試
薬を添加して、脂質の氷解反応及び発色系へ導く酵素反
応を行わせ。
第４の場所で、該反応容器に光を照射して１反応液の吸
光度を測定して第１回目の測定を終了した。
光度を測定して第１回目の測定を終了した。
反応終了後１反応容器内の反応液は廃棄され、水洗され
第１の場所に戻って第２回目の測定に使用し九。ここで
、同一検体で同一反応容器を用いて。
第１の場所に戻って第２回目の測定に使用し九。ここで
、同一検体で同一反応容器を用いて。
吸光度を測定し、中性脂肪の標準溶液から、その含有量
を算出した。界面活性剤としてポリオキシエチレン４−
ノニ／Ｉ／−２−フエニ〃フェノールエーテＡ／ｌ−用
いた本発明の酵素含有組成物を第１表に示す。又、比較
のため、無添加系、ツイーン２０及び前述の特開昭５８
−６７１９７号公報に記載されるトリトンＸ−４０５添
加系も実施し、それらの結果を第２表に示した。
を算出した。界面活性剤としてポリオキシエチレン４−
ノニ／Ｉ／−２−フエニ〃フェノールエーテＡ／ｌ−用
いた本発明の酵素含有組成物を第１表に示す。又、比較
のため、無添加系、ツイーン２０及び前述の特開昭５８
−６７１９７号公報に記載されるトリトンＸ−４０５添
加系も実施し、それらの結果を第２表に示した。
第１表 本発明の酵素含有組成物
■無添加系：本発明第２試薬のポリオキシエチレン４−
ノニ／Ｌ／２−フェノールエーテ／Ｉ／を抜く。
ノニ／Ｌ／２−フェノールエーテ／Ｉ／を抜く。
■ツイーン２０系：本発明第２試薬のポリオキシエチレ
シ４−ノニ１ｖ２−フエ二〜フ ェノールエーテルの代わりにツイー ン２０（ポリオキノエチレンソルビ タンモノラウレートエーテルＨＬＢ １６．９ ） ｔ−０，２Ｗ／Ｖ％使用した。
シ４−ノニ１ｖ２−フエ二〜フ ェノールエーテルの代わりにツイー ン２０（ポリオキノエチレンソルビ タンモノラウレートエーテルＨＬＢ １６．９ ） ｔ−０，２Ｗ／Ｖ％使用した。
Ｏ）！７ トンＸ−４０５系：本発明第２試薬のポリオ
キシエチレン４−ノニ／Ｉ／２−フェニルフェノールエ
ーテルの代わシニ。
キシエチレン４−ノニ／Ｉ／２−フェニルフェノールエ
ーテルの代わシニ。
トリトンＸ−４０５（ポリエチソン
グリコールオクチルフェノールエ−
？／Ｌ’ＨＬＢ１７．９）を０．２Ｗ／Ｖｌ使用した・
第 ２ 表
第２表から明らかな如く、本発明の酵素含有組成物では
酵素活性（即ち、中性脂肪測定値）の低下は全く与られ
ず、しかも第２回の測定値も第１回測定値と全く変らず
、負誤差を与える対照の何れよシも著しく優れた酵素含
有組成物であることが認められた。
酵素活性（即ち、中性脂肪測定値）の低下は全く与られ
ず、しかも第２回の測定値も第１回測定値と全く変らず
、負誤差を与える対照の何れよシも著しく優れた酵素含
有組成物であることが認められた。
実施例２
アクリル酸系反応容器にリポプロティンリパーゼ（ＬＰ
Ｌ）３Ｕ／ｇｅｔ含む５０ｍＭグツド緩衝液（ｐ Ｈ７
，０ン’ｆｔＯ，５ｍｌ添加し、更に本発明で使用のポ
リオキシエチレンノニルフェニル０．２Ｗ／Ｖ％或いは
ポリオキＶエチレンベンジ〜フェノールエーテ／Ｌ’０
．２Ｗ／Ｖ％を該溶液に加えて、３７℃×１０分間水浴
中で加温後、排液しｓＬｍｌの蒸留水で３回洗浄した。
Ｌ）３Ｕ／ｇｅｔ含む５０ｍＭグツド緩衝液（ｐ Ｈ７
，０ン’ｆｔＯ，５ｍｌ添加し、更に本発明で使用のポ
リオキシエチレンノニルフェニル０．２Ｗ／Ｖ％或いは
ポリオキＶエチレンベンジ〜フェノールエーテ／Ｌ’０
．２Ｗ／Ｖ％を該溶液に加えて、３７℃×１０分間水浴
中で加温後、排液しｓＬｍｌの蒸留水で３回洗浄した。
次いで、リパーゼキットＳ（大日本製薬）ｔ−用いて１
反応容器に吸着されているＬＰＬ活性をＯＤ４１２ｎｍ
の吸光度変化（ΔＯＤ４１２ ）で測定した。その結果
を第３表に示すＯ 対照として、界面活性剤無添加系、実施例１で使用した
特開昭５８−６７１１７号公報に記載されるフッ化ナト
リウム、及び特開昭５８−４１３５７号公報に記載され
るオレイン酸ナトリウムの場合も実施し念。
反応容器に吸着されているＬＰＬ活性をＯＤ４１２ｎｍ
の吸光度変化（ΔＯＤ４１２ ）で測定した。その結果
を第３表に示すＯ 対照として、界面活性剤無添加系、実施例１で使用した
特開昭５８−６７１１７号公報に記載されるフッ化ナト
リウム、及び特開昭５８−４１３５７号公報に記載され
るオレイン酸ナトリウムの場合も実施し念。
第 ３ 表
第３表よ）本発明に添加し九界面活性剤は、対照の何れ
の界面活性剤よシも該反応容器へのＬＰＬ吸着活性が認
められなかった。すなわち、本発明による酵素含有組成
物はＬ Ｐ Ｌｌｌｉｔ−阻止する極めて効果的な組成
物であることが確認された。
の界面活性剤よシも該反応容器へのＬＰＬ吸着活性が認
められなかった。すなわち、本発明による酵素含有組成
物はＬ Ｐ Ｌｌｌｉｔ−阻止する極めて効果的な組成
物であることが確認された。
実施例３
実施例１と同様の自動分析後月いて、コレステロ−ｐエ
ステラーゼ、コレステロールオキシターゼ、ジエチルア
ニリン、４−アミノアンチピリン及びペルオキシダーゼ
を含むリン酸緩衝液を用いて、総コＶスデロー／Ｉ／全
測定し、水洗後、同じアクリル系反応容器を用いて、第
４表に示す本発明の酵素含有組成物を用いてプール血清
中の遊離コレステロ−／ｖｔ−測定し九。
ステラーゼ、コレステロールオキシターゼ、ジエチルア
ニリン、４−アミノアンチピリン及びペルオキシダーゼ
を含むリン酸緩衝液を用いて、総コＶスデロー／Ｉ／全
測定し、水洗後、同じアクリル系反応容器を用いて、第
４表に示す本発明の酵素含有組成物を用いてプール血清
中の遊離コレステロ−／ｖｔ−測定し九。
第 ４ 表
又、対照として、ポリオキシエチレンスチリルフェノー
ルエーテルの代わシに無添加系及びポリオキシエチレン
ラウリｐエーテＡ／（ＨＬＢ１３．Ｏ）を同濃度含む組
成物も実施した。遊離コレステロールの測定結果は、新
しい反応容器を用いた遊離コレステロールの測定値５３
１１Ｆ／ｄＪであシ１本発明による酵素含有組成物では
、５４”Ｐ／ｄＪであり、殆んど同じ測定値が得られた
のに対し、対照テストの測定値は、夫々１６３Ｍｑ／ｄ
Ｊ、１５４Ｈ１／ｄｌ と大きな正誤差となった。即ち
、本発明の該酵素含有組成物の測定値は正確であること
が確認された。
ルエーテルの代わシに無添加系及びポリオキシエチレン
ラウリｐエーテＡ／（ＨＬＢ１３．Ｏ）を同濃度含む組
成物も実施した。遊離コレステロールの測定結果は、新
しい反応容器を用いた遊離コレステロールの測定値５３
１１Ｆ／ｄＪであシ１本発明による酵素含有組成物では
、５４”Ｐ／ｄＪであり、殆んど同じ測定値が得られた
のに対し、対照テストの測定値は、夫々１６３Ｍｑ／ｄ
Ｊ、１５４Ｈ１／ｄｌ と大きな正誤差となった。即ち
、本発明の該酵素含有組成物の測定値は正確であること
が確認された。
実施例４
シュウトモナス属に属する微生物よシ得られたリポプロ
ティンリパーゼを塩析及びカフムクロマトグラフイー等
の精製手段を用いて精製した。
ティンリパーゼを塩析及びカフムクロマトグラフイー等
の精製手段を用いて精製した。
該酵素液２５００Ｕ／ｇＪに対し、ポリオキシエチレン
−〇−フェニルフェノールエーテルｔ−５Ｗ／Ｖチ混合
し、更にデキストラン０．２Ｗ／Ｖ％、乳糖１０Ｗ／Ｖ
チ添加した後に凍結乾燥を行ない仕上シの良好な粉状該
酵素含有組成物を得た。
−〇−フェニルフェノールエーテルｔ−５Ｗ／Ｖチ混合
し、更にデキストラン０．２Ｗ／Ｖ％、乳糖１０Ｗ／Ｖ
チ添加した後に凍結乾燥を行ない仕上シの良好な粉状該
酵素含有組成物を得た。
次いで、実施例１の試薬２のポリオキシエチレン−４−
ノニ１ｖ−２−フェニルフェノーμエーテルとリポプロ
ティンリパーゼの代わシにリボプロト上行なった。その
結果、遊離グリセロ−〜消去系中性脂肪測定値への負誤
差のないことが確認され°た。
ノニ１ｖ−２−フェニルフェノーμエーテルとリポプロ
ティンリパーゼの代わシにリボプロト上行なった。その
結果、遊離グリセロ−〜消去系中性脂肪測定値への負誤
差のないことが確認され°た。
（発明の効果）
本発明のリポプロティンリパーゼ又はコレステロールエ
ステラーゼと特定の界面活性剤ｔ−含む酵素含有組成物
上用いることによって１合成樹脂性反応容器への酵素類
の吸着を阻止し、誤差のない中性脂肪測定（グリセロー
ル消去系）、遊離コレステローｐ測定が可能となった。
ステラーゼと特定の界面活性剤ｔ−含む酵素含有組成物
上用いることによって１合成樹脂性反応容器への酵素類
の吸着を阻止し、誤差のない中性脂肪測定（グリセロー
ル消去系）、遊離コレステローｐ測定が可能となった。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 リポプロテインリパーゼ及び／又はコレステロールエス
テラーゼと下記一般式で表わされる界面活性剤を含有す
る酵素含有組成物。 ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） （式中、Ａ：水素原子又は炭素原子数１〜１８の脂肪族
基、脂環族基又は芳香族基、Ｂ：アリール基又はアラル
キル基、−Ｏ（ＲＯ）ｎ−：ポリエチレングリコール残
基又はポリエチレンオキシド・ポリプロピレンオキシド
・ブロック共重合体残基、ｎ：２〜６０、ｌ：０〜４、
ｍ：１〜５且つｌ＋ｍ＝１〜５を示す。）
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP22517684A JPS61104798A (ja) | 1984-10-25 | 1984-10-25 | 脂質測定用酵素含有組成物 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP22517684A JPS61104798A (ja) | 1984-10-25 | 1984-10-25 | 脂質測定用酵素含有組成物 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS61104798A true JPS61104798A (ja) | 1986-05-23 |
| JPH0549279B2 JPH0549279B2 (ja) | 1993-07-23 |
Family
ID=16825143
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP22517684A Granted JPS61104798A (ja) | 1984-10-25 | 1984-10-25 | 脂質測定用酵素含有組成物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS61104798A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPWO2013157642A1 (ja) * | 2012-04-20 | 2015-12-21 | デンカ生研株式会社 | 低密度リポ蛋白以外のリポ蛋白中のトリグリセリドの消去方法 |
| JP2019117196A (ja) * | 2017-12-26 | 2019-07-18 | 東洋紡株式会社 | 測定誤差の低減方法 |
-
1984
- 1984-10-25 JP JP22517684A patent/JPS61104798A/ja active Granted
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPWO2013157642A1 (ja) * | 2012-04-20 | 2015-12-21 | デンカ生研株式会社 | 低密度リポ蛋白以外のリポ蛋白中のトリグリセリドの消去方法 |
| JP2019117196A (ja) * | 2017-12-26 | 2019-07-18 | 東洋紡株式会社 | 測定誤差の低減方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0549279B2 (ja) | 1993-07-23 |
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