JPS6098995A - 光学活性３−（３，４−ジヒドロキシフエニル）セリン，およびその誘導体の製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は医薬品として有用な光学活性な３−（３，ＩＩ
−、）ヒドロキシフェニル）セリン、するいはそのカテ
コール注水酸基？保穫した光学活性なる−（、？、４ｔ
−ジヒドロキンフェニル）セリン保護誘導体の製造法に
関する。

本発明者らは、公知の方法で製造されたスレオ形又はエ
リメロ形のＤＬ−、？−（、？、ｅ−ジヒドロキシフェ
ニル）セリン翫あるいはそのカテコー　□ル性水酸基を
保護したＤＬ−、？−（、？、ｌ−ジヒドロキシフェニ
ル）セリン保護誘導体のアミノ基ヲ常法によジアシル化
し、これによ５Ｎ−アシル−ＤＬ−３−（、、？　、　
ｌＩ−ジヒＰロキシフェニル）セリン又はその保護誘導
体を生成し、ついでストレプトミセス圀、あるいはスト
レゾトノモーティシリウム趙に屈する微生物の培養液、
又は該培養液の処理物、例えば該培養液よシ得た菌体も
しくは菌体処理物、わるいはその微生物の生産するアシ
ラーゼを用いる酵素反応に〃）けることによシ、そのＮ
−アシル化生成物からＮ−アシル基？立体特異的に力１
水分解して脱離し、これによ１）Ｌ−３−（、ｙ、＜ｚ
−，９ヒドロキシフエニル）セリン、するいはそのカテ
コール性水酸基保護篩導体を生成するが、他方、Ｎ−ア
シル−Ｄ−、？−（、？　、クージヒドロキシフェニル
）セリン、あるいはそのカテコール注水酸基保餓訪導体
は酵素反応を受けずにそのま＼残留すること、そして前
者は後者から溶解度の差、等を利用して分離できること
を知見したＯ 従って、本発明はストレプトミセスｈまたはストレゾド
パ−ティシリウム員に桐する微生物であって一般式（Ｉ
） ＦＬ′ （式中、Ｂｌ及びＲ２は夫々に水嵩原子、またはカテコ
ール性水酸基の保護基？示し、Ｒ３は置換されても良い
アルキル基またはアリール基を示す）でａｈされるＮ−
アシル−ＤＬ−アミノ酸銹導体を対厄する光学活性アミ
ノ酸に加水分解し得る微生物の培養液またはその処理物
あるいはこれら培養液または処理物から採取されたアシ
ラーゼ？、一般式（１）で表わされるＮ−アシル−ＤＬ
−アミノ醗酵導体に作用させてその５体のアミノ基から
アシル基（−００−Ｒ’　）を選択的に脱離し、これに
よシ一般式（ＩＩ） （式中、Ｒ１及びＲ２は夫々に水素原子、またはカテコ
ール性水酸基の保護基？示す）で表わされるＬ−、？−
（、？　、Ｇ−ジヒドロキシフェニル）七リン又はこれ
の保護誘導体を生成し、さらにこれを脱アシル化されず
に残留した一般式（財）□ＨＮＨ Ｃ＝Ｏ 几３ （式中　Ｂｌ及びＲ２は夫々に水素原子、またはカテコ
ール性水酸基の保護基？示し、Ｉジは置換されても良い
アルキル基またはアリール基を示す）で表わされるＮ−
アシル−Ｄ−、？−（、？　、ｌ−ジヒドロキシフェニ
ル）セリン誘導体から分離するとと′Ｉｔ特徴とする、
一般式叩及び一般式（ＩＩＩ）で賢ゎされる光学活性な
、？−（、？　、　ｌＩ−ジヒドロキシ７エエル）セリ
ンおよびその誘導体の製造法を要旨とするものである。

本発明の方法は、それに続いて、必要ならば、得うｔｌ
ｔ一般式（ＩＩ）（７）Ｌ−３−（ｙ、４ｔ−ジヒｌ。

キシフェニル）セリン保護誘導体から常法で脱保護する
工程を行うことができ、さらに得らｔｌ−た−１１２式
（ＪＩＤｃｖＮ−アシル−Ｄ−ａ−（Ｊ　、　１Ｉ−）
ヒドロキシフェニル）セリン誘導木刀）らＮ−アシル基
を脱離する工程を行うことができ、また所望ならば脱保
護する工程を行うこともできる。すなわち、本発明の方
法で得られたＮ−アシル−Ｄ−３−（３，クージヒド日
キシフェニル）セリンあるいはそのカテコール性水酸基
保護誘導体は、これのＮ−アシル基を化学的に加水分解
すると、Ｄ−３−Ｃ３，ＩＩ−ジヒドロキシフェニル）
セリンあるいはそのカテコール性水酸基保護誘導体を得
ることができる。

本発明の方法で得られるＬ−スレオ−、？−（θ。

ケージヒドロキシフェニル）セリンは抗うっ薬（特開昭
５ｏ−Ｒ２，２８コ号、特開昭３８−２０７ケ７号公報
参照）、抗ｉＲ−キンソン莱（４？開昭Ｊ、２−／、２
Ａ；／；３０号公報参照）として有用であることが知ら
れている。またＬ−エリス０−３−（、ｙ、ｔｔ−、）
ヒドロキシフェニル）セリンは抗高血圧栗（特開昭５ｏ
−４ｔｙコｊ−号公報参照）として有用であることが知
られている。更に、フェニル環上のメタ位及びノぐ２位
にあるカテコール性水酸基を保６！ｉシたＬ−スレオ−
、？−（、？、ケタ−ヒドロキシフェニル）セリン誘導
体は抗うつ築および抗ノξ−キンソン薬として有用なＬ
−スレオ−３−（，３，’Ｉ−ジヒドロキシフェニル）
−Ｎ−メチルセリン（本出願人の出願に係る特願昭ｊ７
−．２コ／７７７号明細書参照）の合成原料として有用
である。さらにカテコール性水酸基を保護したＬ−エリ
スロー３−　（、？　、ｌ−ジヒドロキシフェニル）セ
リン誘導体は抗高血圧薬として有用なＬ−エリスＣ：１
−３−ＣＪ、ゲージヒｒロキン７工二ル）−Ｎ−メチル
セリン（特願昭ｊ　＃　−７，２０３３号明細書参照）
の原料として有用である。

光学活性なすなわちＬ−又はＤ−スレオ−３−（、？　
、ａ−、）ヒドロキシフェニル）セリンの取得法として
は、これまでにＤＬ−スレオ−Ｎ−ペンジルオキシカル
ゼニルー、３−（３，’Ｉ−ジベンジルオキシフェニル
）セリン？、光学分割剤としての光学活性エフェドリン
、光学活性スレオ−／−（ｐ−ニトロフェニル）−２−
アミノ−／、３−プロノぐンジオール（特開昭５Ｏ−４
ｔタコＳ２号公報参照）、キニン（特開昭Ｓ、２−ｇ、
１．２Ｚλ号公報参照）、光学活性スレオ−／−（ｐ−
メチルスルホニルフェニル）−、ｚ−アミノ−／、Ｊ−
プロノ々ンジオール（特開昭ＪＱ−３１，２３３号公桜
参照）、Ｓ−，２−アミノ−／、／−ジフェニルプロパ
ツール、５−２−アミノ−３−メチル−／、／−ジフェ
ニルブタノール、Ｓ−，２−アミノ−＜２−メチル−７
、／−ジフェニルペンタノール（特開昭ｊＪ−λ９！！
／号公報参照）を用いて光学分割し、ついで脱保饅する
方法が知られているが、上記の光学分割剤の入手が容易
でなく、また再結晶、再沈殿を繰シ返し行なわないと光
学純度の高い、？−（、？、ｌ−ジヒド四キジキシフェ
ニルリンを得ることができず、更に得られたジアステレ
オマー塩全分解する工程を必要とするなど経済的にも工
業的にも難点がある。そこで本発明者等は酵素法に依る
光学分割方法を検討したが、入手可能な公知のアシラー
ゼでは一般式（１）のＮ−アシル−ＤＬ−３−（、ｊ、
Ｑ−ジヒドロキシフェニル）セリンあるいはそのカテコ
ール性水酸基保護誘導体のＮ−アシル基倉不斉卯水分解
で除去できないことを認めた。このため、広く自然界を
探索し、ストレプトミセス１４　、ストレゾトノ々−テ
ィシリウムＭ　Ｉｃ　１ｍする微生物が一般式（１）の
化合物のうちＬ体のＮ−アシル基？選択的に加水分解す
ること？見出し、本発明を完成するに到った。本発明の
方法によれば光学分割剤を必要とせず、また酵素法によ
るために、前述の光学分割剤を用いた場合のような塩の
分解工程を必要とせずに極めて容易に光学的に純粋な光
学活性＆−（、？　、＆−ジヒＰロキシフェニル）セリ
ンあるいはそのカテコール性水酸基保護誘導体を得るこ
とができる。

以下に本発明方法について具体的に述べる。本発明に使
用される微生物としては、ストレプトミセス属あるいは
ストレプトノ々−ティシリウム属に属し、一般式（Ｉ）
の化合物のうちのＮ−アシル−Ｌ−３−Ｃ３，４１−ジ
ヒドロキシフェニル）セリンあるいはそのカテコール注
水酸基保ｉＩ！綽導体のＮ−アシル基（几”００−　）
　’ｉｉ加水分解して除去する能力を有する微生物又は
そのような能力全方するアクラーゼを産生ずる微生物で
６７１ぽいずれも使用できる。このよりな微生物の例と
しては、たとえばアクチノミセス・アウレオノ々−テイ
シラーツス（Ａｃｔｌｎｏｍｙｃｅａ　ａｕｒｅｏｖｅ
ｒｔｉｃｔｌｌａｔｕｓ　）ＣＩＭＯＳ−０，２，３弘
（ＩＳＰｔＯざＯ）（ＦＥＢＭ　Ｐ−７Ｊ　／　Ｊ　）
　；アクチノミセス・ピカラー（Ａｃｔｌｎｏｍｙｃｅ
ｓ　ｂｉＣｏｌｏｒ　）　Ｉ　Ｍ　ＯＳ−０，２７１（
Ｉ８Ｐ　ｊ／Ｆ□）；ストレプトミセス・ブラストマイ
セテイクス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｂｌａｓｔｍ
ｙｃｅ　−１量ｃｕｓ）ＩＭＯ８−０／　ざ　タ　（Ｉ
ＳＰ　Ｊｏ、２９）（ＦＥＲＭ　Ｐ−７コ／７）；　ス
トレプトミセス・チャルトリウシス（８ｔｒｅｐｔｏｍ
ｙｃｅｓ　ｃｈａｒｔｒｅｕｓｉｓ　）ＩＭＣＩ　Ｓ−
０コλＡＣＩ８Ｐ　、３０１＆）：ストレフトミセス・
フラゼペルシクス（Ｓｔｒｅｐ−１ｏｍｙｅｅｓ　ｆｌ
ａｖｏｐｅｒｓｌｃｕＳ）　Ｉ　Ｍ　ＯＳ　−０コｏｅ
（ＩＳＰ　５ｏｙａ）；アクチノミセス−７ラヂトリシ
ニ（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ口ａｖｏｔｒｉｃｉｎｌ　
）　Ｉ　Ｍ　０８−０．２／り（ＩＳＰ　、！／！２）
：ストレゾトノマーティシリウム・グリゼオカルネラム
（５ｔｒｅｐｔｏｖｅｒ目Ｃ目目ｕｍ　ｇｒｌｓｅｏｃ
ａｒｎｅｕｍ　）　Ｉ　Ｍ　０ｓ−Ｏ，ｚ、、ｙ？Ｃｌ
５Ｐ　ｓｏｏケ）；ストレプトミセス・ハチジョーエン
シス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｅｅｓｈａｃｈｌｊｏｅｎｓ
ｉｓ　）　Ｉ　Ｍ　ＯＳ　−０コ４’４’（ＩＳＰｊ　
／　／　ｌＩ）　ＣＦ’）ＭｌもＭ　Ｐ−７２１ｒ）：
ストレプトミセスーハルステディ（８ｔｒｅｐｔｏｍｙ
ｃｅｓ　ｈａｌｓｔｅｄ目）ＩＭＯ５−０７タ　ダ　（
１８Ｐ　３０４　ｇ　）　；ストレプトノ々−ティシリ
ウム・ヒロシメンセ（Ｓｔｒｅｐｔｏｖｅｒｔｊｃｉｌ
ｌｌｕｍ　ｈｉｒｏｓｈｉｍｅｎｓｅ　）　Ｉ　Ｍ　０
８−０７７ＹＣＩＳＰ　！０３７）ＣＦＥ几Ｍｐ−７，
ｚｔｘ）ｉストレフトミセス・テンダニ（８ｔｒｅｐｔ
ｏｍｙｃｅｓ　ｔｅｎｄａｅ　）　ＩＭＯＳ　−０／　
Ａ　ｔ（ＩＳＦ　、！；１０／）ｇストレプトミセスー
トヨカエンシス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｔｏｙｏ
ｃａｅｎｓｉｓ　）　ＩＭＯ８−０／１ｊｃＩｓＰ　、
５０３０）（ＰＥＩ’ＬＭＰ−７２８，３）などが好適
に使用される。これらの菌株はすべて文献記載の公知の
保存菌である。

また、前記の菌株のうち、微工研寄託番号としてＦＢＲ
Ｍ　Ｐ−７コ／Ａ、ＦＥＢＭ　Ｐ−７コ／７、ＦＥＲＭ
　Ｐ−７コ／Ｉ”ｉｆ付した菌株は昭和８ｇ年２月Ｓ日
以来、ま７ｔ−ＦＥＢＭ　Ｐ　−７コｊコ、ｌ’Ｅ几Ｍ
Ｐ−７，２３，７を伺した菌株は昭和ｓｒ年９り、２０
日以来、工業技術院微生物工業武術研究所にを託されで
ある。

本発明の方法で用いる上記微生物の培養液を作るに当っ
て、この微生物？培養するには通常使用される培地が用
釣られる。この培地中の炭素源としてたとえばブドウ糖
、ショ糖、果糖、マンノース、でんぷん、糖蜜など金用
い、Ｎ紫源としてはたとえばヘソトン、肉エキス、酵母
エキス、コーンステイーシリカ−１尿素などの有機窒素
源、あるいはアンモニア、硫酸アンモニウム、硝酸ナト
リウムなどの無機窒素化合　？用いることができる。更
に硫酸マグネシウム　塩化ナトリウム、リン酸第−カリ
ウム、リン酸　ニカリウムなどの無機塩、菌株の生育に
必要な　金物、あるいは酵素を誘導するための添加物な
　の適当量を添η口した培地が好適に使用される。　生
物の培養は通気か培養の如き好気的榮件＋ＦＶｃて行な
うのが好ましい。また培養温度はコＯ′、〜ｅｏ℃程度
が好ましく、培養時間は辿常／日二１０日程度で良い場
合が多い。本発明の方法においては、その酵素反応に使
用される酵素（アシラーゼ）源としての上記の如くして
得られた微生ｉ培養液　に代えて、この培養液の処理物
として、培養Ｆ液、培養液から分離した菌体、該菌体処
品物、特に菌体破砕物、など全使用でき、また培養＝又
は菌体から採取、上 硫安分画した粗酵素（アシラーゼ）の溶液、ゲル１ 濾過法などで精製した酵素（アシラーゼ）又はそ。、、
、、、１カ、ツー□。６゜ま。い、ア、ワ。採１、精製
は公知の７シラーゼ製−法により行いうる。

本発明の方法の原料化合一である一般式（１）のＮ−ア
シル−ＤＬ−、？−（、、？　、４！−ジヒドロキシフ
ェニル）セリン、あるいはそのカテコール性水酸基を保
護した銹導体は既に公知の方法（Ｊ　Ｏｈｅｍ。

Ｂｏｃ、６　ｊ　Ｊ’　〜ｔ　１２頁、／２グア年、Ｊ
、Ａｍ。

Ｏｈｅｍ、　Ｓａｃ、、７に巻、／、：？ＪＪ　〜／Ｊ
ｅｔ頁、７１１年、Ｏｈｅｍ、　Ｂｅｒ、、２７巻、♂
２コ〜９０／貞、／”１３グ年）に依シ製造されたＤＬ
−、？−（、？　、ケージヒドロキシフェニル）セリン
あるいはそのカテコール性水酸基保護誇導体に一般式（
■） Ｒ１００ＯＨ（ＩＶ） （式中、Ｗは前記と同じ意味をもつ）のカルヂン酸又は
その反応往訪導体、例えば酸クロライド、酸無水物、あ
るいは縮合剤などを反応させてＰＡｆＡされる。用いら
れるアシル基（ａｉｏｏ−）として抹アセチル基、クロ
ロアセチル基、グリコリル基、ベンゾイル基などが好適
例として挙げられるが、水洗の酵素反応で選択的に除去
され得るアシル基であればすべて使用できる。

原料として用いられる一般式＋１）のＮ−アシル−ＤＬ
−、？−（、？　、ダージヒーロキシフェニル）セ□ リン、あるいはそのカテコー：ル住水酸基保護誘導１　
、オゎ１．。

”′°°゛”′”“手、：：二、４８．。７スロ形のコ
種の異性体が 法Ｏいては、いずれも原←とじて使用できる・水洗での
酵素反応の基質とルてすなわち、原料□ でおる一般式（Ｉ）の化合物としてはカテコール注水□ 酸基が保護されてあっても無１保肢でも良く、目的によ
って使い分けることかで：きる。友とえば、光学活性な
３−（、ｙ、ｐ−ジヒドロキシフェニル）セリンを得る
べき場合はカテコール性水酸基は無保護で良い。また更
にＮ−メチル化を行って光学活性な、？−（、？、ｔＩ
−ジヒド：ロキシフェニル）−Ｎ−メチルセリンを得る
こと：ｔ−？−の目的とする場合は、次のメチル化の工
程瞳はカテコール性水酸基は保脱されてなくてはな□ら
ないので、水酸基を保護した形の一般式（Ｉ）のイし金
物音用いて本発明の方法の酵素反応を行なうの１が好ま
しい・もちろんカテ・−一性水酸基を保護１して行なっ
た場合でも、Ｆｌ￥素反応後に保＠基を惧１用の脱保護
法で除去すれば光学活性なθ−（３，ケージヒドロキシ
フェニル）セリン會容易に得ることができる。カテコー
ル性水酸基の保護基（几１．几２）としては４ンジル基
の如きアラルキル基、エトキシカルゼニル基の如きアル
コキシカルヂニル基、メチレン基、インプ四ビリデン基
の如きアルキリデン基、さらにシクロヘキシリデン基の
如きシクロアルキリデン基など、通常使用されるカテコ
ール性水酸基の保護基はすべて用い得るが、好ましくは
ベンジル基である。また、アルキリデン基又はシクロア
ルキリデン基を用いる場合には、ｌ′Ｌ１及び几８が相
互に連結してその基を形成する形Ｖこなる。

本発明の方法における酵素反応はｐＩｌ　、！〜り、特
ＫｐＨＪ〜ざ、’ｍｒＷ−Ｎｏ　〜ｇｏ℃、＋１７に、
？ｊ’〜１０℃で行なうのが好ましい。また必要に応じ
てコノセルトなどの金回のカチオンを触媒として添加す
ることも好ましい。また反応時間は酵素針、反応温度に
より異なるが、通常３０分〜コＯ時間で行なわれ、コ時
間〜／１時間反応を行なえば十分である場合が多い０ 反応終了談、生成した一般式（ＩＩ）のＬ−、？−（、
？。

クージヒドロキシフェニル）セリンを、アシル化を受け
ずに残留した一般式（２）のＮ−アシル−Ｄ−３−（’
＊　”−）ヒドロキシフェニル）セリン、あるいはこれ
のカテコール注水酸基保護誘導体から分離する工程を行
う。この分離は酸性ｐＨＷＪＡの水ｔ！＋、媒質中媒質
−アシル−Ｄ　−、？　−（３、弘−ジヒＰロキシフェ
ニル）セリン化合物がＬ−３−（、？　、ａ−）ヒドロ
キシフェニル）セリン化合物より一般に低い溶解度をも
っことを利用して沈澱法で行うことができる。若しくは
、後述の実施例−２（Ｃ示Ｔ　ヨウＶＣ、反応液力）ら
ブタノールｔ［ｔｌｌｌｃｊシ式叩及び武器）の化合物
の両者倉ブタノール溶液として敗出し、ブタノールを蒸
発層の残置を。ρＪＭリンｒｙｌ緩衝Ｙｉｋ　（ｐＨ７
、０）Ｉ’ｍ　溶Ｆ／ｌ’　シ、そノｐＨ’ｉ塩酸酸性
に調節層に両者を酢酸エチルで抽出し、この酢酸エチル
抽出液について水へ転溶し、再び酢酸エチルで抽出する
等の転浴法によっても、両者は相互に分離することが可
能である＠更１ｃ、本発明の方法の目的化合物（儂、シ
リカゲル・カラ轟り四マドグラフィー、イオン交換樹脂
カラムク四マドグラフィーなどの一般的なりロマトグヲ
フイー的精製法？用いることによって単離、精製ができ
るが、溶解度の差を利用することにょ力極めて容易に単
離、精製することができる。

次に実施例によｐ本発明？説明するが、本発明はもとよ
シこれに限定されるものではない。

実施例／ （イ）　ポテトスターチ　／９６、グルコース　／Ｘ１
肉エキス　０．７！％、ポリペゾトン　□、７３％、食
塩　０．３９Ｆ、、Ｗｃ酸マグネシウム・７水塩　。、
／９ｆｌ　ｓ硫酸鋼−ｊ水塩　０．０００　？　ＣＸ、
硫酸第一鉄・７水塩　０．０００　／％、塩化マンガン
・グ水塩ｏ、ｏ　ｏ　ｏ　ｔ　％、硫ｅＭ鉛’　？　水
ｔ、＋’ｉＡ　Ｏ，Ｏｏ　Ｏ，２Ｘｋ含す培地ｋＪＯＯ
ｍｌのコブ付き三角フラスコにｌｏ　ｏ　ａｄ分注Ｌ、
ストレプトミセス・ハチショーエンシス（８ｔｒｅｐｔ
ｏｍｙｃｅｓ　ｈｑｃ旧Ｊｏｅｎｓｉｓ　）　Ｉ　Ｍ　
０８−０．２４ｔｌｌ（１８Ｐ　Ｊ−／／＋）（ＦＥＲ
Ｍ　１Ｆ−７，ｚ／、ｒ）Ｏｘ７ントより／白金耳ｔｉ
培地に接種し、Ｊ７℃、３日間振盪培養し、種培養液と
した。上記培地ｋＪＺのコブ付き三角フラスコに７１分
注し、種培養液ＩＯ−を移植して、２７℃、ｑ日間振盪
培養ケ行なった。ζうして得た培養液から菌体をｐ別し
た培養Ｆ液、？！に１０％飽和になるように硫酸アンモ
ニウムを少量ずつかく拌しながら添加し、／晩ｊ℃の低
温寥に放置後、５℃に冷却して毎分９０００回転で遠心
分離した・得られた沈殿物ｆｚ０．０！；Ｍリン酸緩衝
液（ｐＨ７，０）／ＪＯ−に溶解し、酵素液とした。

（ロ）　ＤＬ−スレオ−Ｎ−アセチル−、？−（、？　
。

ｌ−ジベンジルオキシフェニル）セリン／１に水ＡＯｍ
ｅを卯え、ａＯ％苛性ソーダ溶液を溶解するまで加え１
このち０．Ｊ　Ｍ　！Ｊン酸緩衝液（ｐＨ７，０）、２
０−と、更に水ｒ加えて９０−として原料化合物の溶液
葡作った。これに上記酵素液／　Ｏｍｅを７７０え、３
７℃、／ｇ時間反応した。反応後生じ九沈殿物’ｔＵ５
敗した。そのＦ液は塩酸？用いてｐＨ／に調波し、生じ
た沈殿Ｔｈｅ取してＤ−スレオ−Ｎ−アセチル−、？−
（、？、ダージペンジルオキシフェニル）セリン／、ｔ
Ｏη？与えた。先の沈殿物は０、／　Ｎ塩酸にＤ１温溶
解し、室温に放置することによシ生じた沈殿？Ｆ＠して
更に第コ収獲物としてＤ−スレオ−Ｎ−アセチル−３−
（３、クージベンジルオキシフェニル）セリン２　ｌ／
−ｏａｙｋＪｉえた。

〔α）Ｄ　−Ｊ　Ｏ，Ｙｏ　（ＣＩ、エタノール）。こ
の０体のコ’ｔｏｑｙｔｖ＝喉し７ｔあとの戸漱はゾタ
ノ〜ル抽出し・ブタノール金減圧留去後インプロノ９ノ
ールから結晶化し、Ｌ−スレオ−、ｐ−（，３，ａ−ジ
ベンジルオキシフェニル）セリン塩酸塩３にＯｍｖ？得
た。〔α）Ｄ−！、？　ｆｏ　（ＣＩ、エタノール）。

（ハ）得られ７．Ｌｌ−スレオ−Ｎ−アセチル−３−（
、、？、ｔａ−）ベンジルオキシフェニル）セリンは／
Ｎ塩酸−メタノール（／：／）混液に溶解し、Ｓ時間〃
Ｄ温還流することによシ脱アセチル１ヒし、これにより
Ｄ−スレオ−，７−（、、？、４ｔ−ジベンジルオキシ
フェニル）セダンを与えた。またＬ−スレオ−、？　−
（、？　、　、ｔｔ　−、）ベンジルオキシフェニル）
セリン塩酸塩はエタノールＶＣ溶解し、１０％ノぞラジ
ウム−炭素を添〃ｕして接触還元することによフ脱保薩
し、これによシム−スレオ−、？−（、？、＃−ジヒド
ロキシフェニル）セリンを与、ｔ＊。

実施例λ げ）　アクチノミセスーアウレオパーティシ２−ラス（
Ａｃｔｌｎｏｍｙｃｅｓ　ａｕｒｅｏｖｅｒｔｌｃ目１
＋Ｉｔｕｓ　）　Ｉ　Ｍ　０Ｓ−Ｏコ１１３（ＩＭＰ　
３０ざＯ）（ＦＥＢＭＰ−ｔｘ／ｌ）のスラントより／
白金耳ｉｔ実施例／と同じ培地に接種し１．２７℃、ｊ
日間培養し次。

得られた培養液から菌体２Ｆ別しｔ培養ｐ液１００−に
ＤＬ−エリスローＮ−アセチル−、？−（、？。

クージベンジルオキシフェニル）セリン１０？η全添加
し、８７℃、／♂時間反応した〇（ロ）反応終了後、反
応液を塩酸？用いてｐＨ，２に調整し、ブタノール抽出
を行なった０ブタノールを減圧留去後、得られ之残渣に
０．０　、！；　Ｍ　リン酸緩衝液（ｐＨ７，０）ｌ＝
加えて溶解し、塩酸を用いて再びｐＨ，２に調節したの
ち酢酸エチルで抽出した０酢酸工チル層は水？加え苛性
ソーダを用いてｐＨ９に調節して水層に転済し、さらに
水層ｉ　ｐＨ／に調節したのち酢酸エチルで抽出し友。

酢酸エチルを減圧留去してＤ−エリスローＮ−アセチル
−３−（３，ｓ−Ｊベンジルオキシフェニル）セリン３
ダ岬を得た。〔α）ｎ　−／　１１．に’（ｃ／、エタ
ノ−′ル） ｐＨ，２で酢酸エチル抽出した水層はブタノール抽出を
行ない、ブタノール全減圧留去後、残渣にメタノールを
加え、不溶物ｔ−炉去した。メタノール金減圧留去後イ
ンプロノぞノールよ多結晶化してＬ−エリスロー＆−（
、？　、　ｌＩ−ジベンジルオキシフェニル）セリン塩
酸塩、２４１１９　ｋ　’４たａ（α〕Ｄ＋１５’、、
ｔ’（ｃ／、エタノール）。

実施例３ ＤＬ−スレオ−Ｎ−アセチル−、？−（、？、グーシヘ
ンジルオ′キシフェニル）セリン、ＤＬ−スレオ−Ｎ−
クロロアセチル−３−（Ｊｐ＜’ｌベンジルオキシフェ
ニル）セリン、ＤＬ−スレオ−Ｎ−クリコリルー、？−
（３，４１−ジベンジルオキシフェニル）セリン、ＤＬ
−スレオ−Ｎ−ペンソイル−’−ＣＪ、Ｑ−ジＡンジル
オキシフェニル）セリン、ＤＬ−スレオ−Ｎ−アセチル
−ｓ　−（’　ｔクーメチレンジオキシフェニル）セリ
ン、ＤＬ−スレオ−Ｎ−アセチル−３−（３，クージヒ
ドロキシフェニル）セリン、ＤＬ−エリスローＮ−アセ
チル−、？−（、？、＋−ジベンジルオキシ７エ二ル）
セリンを各λ岬／−になるように０．１Ｍリン酸緩衝液
（ｐＨ７，０）　に溶解または懸濁し、基質（原料化合
物）溶液とした。この基質溶液ＯＳ、Ｚに実施例／げ）
の方法で得た酵素ＦＩ液Ｏ，Ｓ−を〃■え、３７℃、７
７時間反応した。

反応後、Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ　ｊ　ＯＨＩ　（１１，１
Ｘ　／　、２３１１１１１％ナーゲル社製）のカラムを
用いた高速液体クロマトグラフィーによシ、原料化合物
からＮ−アシル基の脱離で生じた脱アシル化生成物を定
置した。

表／Ｉｃその結果會示した。

実施例グ アクチノミセス・アラレオパーティシラーラス（Ａｃｔ
ｌｎｏｍｙｃｅｓ　ａｕｒｅｏｖｅｒｔｌｃｌｌｌａｔ
ｕｍ　）　Ｉ　Ｍ　０８−０．２．３ダ（ＩＳＰ　５ｏ
ｉｒｏ）ＣＦＢ几ＭＰ−７ａｉｔ　）；ストレゾトミセ
ス拳ブラストマイセテイクス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅ
ｓ　ｂｌａｓｔｒｎｙｅｅｔｌｃｕｓ　）ＩＭＯＳ　−
０／♂２　（ＩＳＰ　、ＳＯコ９　）　（Ｆｌ！を几Ｍ
Ｐ−７コ／７）：ストレプトミセスーハチジョーエンシ
ス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｈａｃｈｌｊｏｅｎｓ
ｉｓ　）　Ｉ　Ｍ　Ｏ８−〇、２グダ（ＩＳＰ　３１／
弘）（Ｆ’ＢＲＭＰ−７，２／♂）の各スラントよシ／
白金耳危を実施例／と同じ培地に接種し、２７℃、を日
間振盪培養を行なった。得られた培養液菌体ｔ−濾過し
た培養Ｆ液Ｏ，Ｓ−にＤＬ−スレオ−Ｎ−アセチル−３
−（、？、４＜−ジベンジルオキシフェニル）セリンｒ
Ｏ°／Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７，０）　ＦＣＪｐ４／ｄ
（７）鋺度になるように溶解し７を基質溶液Ｏ，Ｓ−を
加えて、８７℃、７７時間反応した。

反応終了後、反応混合物に／Ｎ塩酸ｏ、／ｄｋ加え、ブ
タノール／−で２回抽出を行なった・ブタノールを減圧
留去し、残渣に０．／Ｍ’）ン酸−メタノール（４ｔｏ
’、ｔｏ）ｉ−を加えて溶解し、実〃１ｙ６ｓと同じカ
ラムを用いた高速液体クロマトグラフィーで、生じた脱
アシル化生成物、すなわちＬ−スｖ　オー　ｊ　−（，
３ｍダージペンジルオキシフェニル）セリンの足置を行
なった。ｍ果ｔ＊−２ｖｃ示した◎ 表　２ 基質のモル数

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 ｌ　ストレプトミセス＃！またはストレゾトノ々−ティ
   シリウム絹に属する微生物であって一般式（１）（式中
   　Ｂｌ及び几２は夫々に水嵩原子、ｔたはカテコール性
   水酸基の保護基を示し　Ｂｌは置換されても良いアルキ
   ル基ま７ｃｔｉアリール基を示す）で表わされるＮ−ア
   シル−ＤＬ−アミノ酸防導体ケ対応する光学活性アミノ
   酸に加水分解し得る微生物の培養液またＬその処理物あ
   るい紘これら培養液または処理物から採敬されたアシラ
   ーゼ勿、一般式（Ｉ）で表わされるＮ−アシル−ＤＬ−
   アミノ酸誘導体に作用させてそのＬ体のアミノ基からア
   シル基（−００−ＥＬＭ　）ｔ−選択的に脱離し、これ
   により一般式（ＩＩ） ＯＨＮＨ冨 （式中、Ｂｌ及び几３は夫々に水嵩原子、またはカテコ
   ール性水酸基の保護基を示す）で表わされるＬ−３−（
   、？　、Ｑ−ジヒドロキシフェニル）セリン又はこれの
   保護紡導体を生成し、さらにこれを脱アシル化されずに
   残留した一般式側 ｒｔ’。 ＯＨＮＨ ■ ０＝Ｏ 几３ （式中、几１及び几２は夫々水素原子、またはカテコー
   ル性水酸基の保護基？示し、Ｒ３は置換されても良いア
   ルキル基またはアリール基？示す）で表わされるＮ−ア
   シル−１）　−、？　−（、？　、ゲージヒドロキシフ
   ェニル）セリン訪導体から分離することを特徴とする、
   一般式（ＩＩ）及び一般式側で我わされる光学活性な、
   ？　−（、？、ゲージヒドロキシフェニル）セリンおよ
   びその誘導体の製造法。 ２一般式（Ｉ）の化合物における保護基Ｂｌ、Ｂ２がと
   もにベンジル基であル、同時に几３がメチル基、または
   クロロメチル基、またはヒドロキシメチル基、またはフ
   ェニル基である特許請求の範囲第１項記載の方法。 ３一般式（Ｉ）の化合物における保護基Ｂｌ、Ｈｊがメ
   チレン基を形成し、同時に几３がメチル基、ま之はり四
   ロメチル基、またはヒドロキシメチル基、また杖フェニ
   ル基である特許請求の範囲第１項記載の方法。 弘　一般式（１）の化合物における几１．Ｒ２がともに
   水素であって、同時にＲ３がメチル基、またはり四ロメ
   チル基、またはヒドロキシメチル基、またはフェニル基
   である特許請求の範囲第１項記載の方法。